含有利用蛋白酶製得的河豚提取物的組合物及其製備方法

2023-06-05 18:15:01

專利名稱：：含有利用蛋白酶製得的河豚提取物的組合物及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種利用蛋白酶製得的河豚提取物(swellfishextract)及其製備方法，和一種用來治療宿醉的組合物，該組合物含有所述河豚提取物作為活性成分。
背景技術：
：通常認為乙醛(乙醇的初級代謝產物)與乙醇本身的毒性相比更可能誘導在飲酒後的人體中觀察到的宿醉。〖0〗CH3CH2。H-一CH3CH=0-CH3COOH(乙醇)J(乙醛)J(乙酸)乙醇脫氫酶乙醛脫氫酶>也就是說，乙醇被乙醇脫氫酶分解轉化為乙醛，乙醛又被分解為乙酸。乙醛這種高濃度的活性化合物可以引起出汗、脈搏加速(rapidpulse)、皮膚潮紅、噁心和嘔吐。因此，大多數研究人員認為乙醛(乙醇的代謝產物)可能是造成宿醉的原因。由於氧化系統平穩運作，合適量的乙醇不會導致人體內出現障礙或不良現象。然而，過量的乙醇破壞了代謝系統的平衡，結果無法保持細胞穩態。肝臟是最容易受到過量乙醇影響的器官。也就是說，長期酗酒會導致肝功能疾病，例如，脂肪肝、肝硬化等，而短期酗酒則會引起頭痛、嚴重頭暈(heavyheadness)、注意力不集中、胃灼熱(heartburn)和消化不良。為了治療宿醉，己經廣泛使用了由鱈魚乾(driedpollack)、豆芽和河豚作為主要成分而製得的食品。特別地，鑑於河豚在中國被認為是對宿醉特別有效的食物，因此河豚受到了習慣性飲酒者的喜愛。河豚含有大量的蛋白質和多種胺基酸、礦物質和維生素，並能激活人體內的乙醇脫氫酶從而增強肝臟的解毒作用，並且能有效地防止酒精中毒和治療宿醉。此外，河豚具有減少膽固醇並降低高血壓的效果，從而預防成人病(adultdisease)的發生。因此，河豚是針對手術前或手術後的患者或針對患有糖尿病或腎臟疾病的患者進行的飲食治療中受到人們青睞的食物。在"Dongeuebogam(東醫寶鑑)"中已經記載了河豚能使身體變暖、滋補、減少水腫、有效地治療腰部和腿部疼痛、對痔瘡具有療效，還具有殺蟲效果。作為治療宿醉的食物，洋薊(學名朝鮮薊(Cynarascolymus))已經在歐洲得到了利用。己經知道洋薊在消化不良和成人病(包括冠心病和高血糖)方面具有預防和治療效果之外還具有治療宿醉的效果。歐洲國家和曰本一直是洋薊研究(特別是關于洋薊及其組成的多種生物學功能)的中心。洋薊原產於地中海，是具有薊花形狀的多年生植物，僅比薊花大幾倍。洋薊生長到2米高，延伸為1平方米寬範圍。洋薊的花芽(flowerbud)柔軟，味淡且富有營養，特別是它含有多種蛋白質、維生素A、維生素C、鈣、鐵、磷酸鹽、糖和菊粉。特別地，由於它含有在糖尿病患者體內能起到類似胰島素功能的糖，而成為一種重要的藥物。葉或根中含有的洋薊酸(Cynarin)成分加速了膽汁的分泌，能有效地治療受損的肝臟功能和胃腸道疾病並能對血膽固醇進行有效的調節，因此，在歐洲己經將洋薊作為用於動脈硬化的治療劑。洋薊也用於治療肝臟疾病和腎臟疾病，鑑於其利尿和清潔血液的作用，因此在尿液中蛋白質水平高時特別有效。洋薊的多種功能是由於其提取物的強抗氧化活性而產生的。具體來說，這種強抗氧化活性增強了促進膽汁分泌和保護肝臟細胞的功能。此外，已經5證實洋薊具有顯著的脂質吸收抑制作用。己證實洋薊是一種安全物質，並由美國食品和藥品管理局(FDA，USA)劃分為GRAS類(公認為安全的)。因此，本發明的發明人繼續進行研究，進而開發一種用來治療宿醉的組合物的製備方法，該組合物具有改善的增強健康的作用並對宿醉具有優異的治療效果，同時還不具有副作用。結果，本發明的發明人發現這樣的事實利用蛋白酶製得的河豚提取物比通過熱水或乙醇提取所製得的河豚提取物具有的有效成分更多。而且，本發明的發明人通過證實含有洋薊作為添加成分的河豚提取物由於協同效應而比單獨的河豚提取物和洋薊提取物具有更優越的宿醉治療效果。
發明內容本發明的一個目的在於提供一種利用蛋白酶製得的河豚提取物及其製備方法，和一種用來治療宿醉的組合物，該組合物含有河豚提取物作為活性成分。為實現上述目的，本發明提供了利用蛋白酶來製備河豚提取物的方法。本發明還提供了由上述方法製得的河豚提取物。本發明還提供了用於治療宿醉的藥物組合物，該藥物組合物含有所述河豚提取物作為活性成分。本發明還提供了一種用於治療宿醉的方法，該方法包括向受試者施用藥學上有效量的所述河豚提取物的步驟。本發明還提供了所述河豚提取物在生產用來治療宿醉的藥物組合物中的用途。本發明還提供了一種用來治療宿醉的健康食品，該食品含有所述河豚提取物作為活性成分。此外，本發明提供了所述河豚提取物在生產治療宿的健康食品中的用途。本發明的通過蛋白酶製得的河豚提取物比通過熱水或乙醇製備的河豚提取物含有更多的有效成分。添加有洋薊的河豚提取物比單獨的河豚提取物或洋薊具有更好的治療宿醉的效果，並具有增強肝臟功能作用。此外，本發明的河豚提取物是一種沒有副作用的安全的天然食品，它具有優異的治療宿醉的效果和優異的增強健康的作用。通過參考附圖，能最好地理解本發明的優選實施方式，其中圖1是表示用含有洋薊的河豚蛋白酶提取物處理後的血液乙醇濃度隨時間變化的圖。圖2是表示用含有洋薊的河豚蛋白酶提取物處理後的血液乙醛濃度隨時間變化的圖。具體實施方式下面將具體描述本發明。本發明中，"宿醉"指的是飲酒後表現出的全身症狀，例如，頭痛、腹瀉、食欲不振、噁心、嘔吐等，通常伴隨有辨別力和行動力的降低、血液學和激素的改變。本發明中，"酶反應產物"指的是利用蛋白酶從河豚肉中提取的含有河豚的活性成分的河豚提取物。本發明提供了一種河豚提取物的製備方法，該方法包括以下步驟1)將河豚肉從河豚上分離；2)使步驟l)的所述河豚肉與酶反應；和3)通過將步驟2)的酶反應產物進行蒸餾獲得餾出物。在上述方法中，步驟1)中的河豚可以為虎河豚(torafugu)(紅鰭東方飩(Takifligurubripes))或白鯖河豚(shirosabafugu)(懷氏兔頭魚屯(LagocephaluswheeleriAbe))，它們可以從自然中捕獲或通過飼養獲得。河豚是有劇毒的魚，因此如果不進行適當的處理，河豚可能具有危險性。因此，僅獲得資格認證且專門從事於河豚烹飪的廚師才被許可對河豚進行烹飪。尤其必須將有毒的腸道與頭部和皮膚一起除去。只有河豚肉才是適宜於用作製備河豚提取物的材料。上述方法中，步驟2)中所述的酶為蛋白酶。本發明中，不對河豚進行煮沸或煎煮。作為替換地，使用蛋白酶來分解河豚肉以提取河豚的各個有效成分，所述蛋白酶是一種可以分解蛋白質的酶。也就是說，通過使用蛋白酶可以儘可能多地提取河豚肉中含有的有效成分。為此目的，將河豚肉放在配備有溫度調節器的反應器中，向該反應器中加入相同重量的水。優選向其中加入蛋白酶(酶含量0.1-0.2%)，但是水和酶的量不限於此。優選的酶反應溫度為約25-5(TC，特別地，更優選37。C，這是由於蛋白酶的反應速度在該溫度下最快，但並不總是局限於此。優選的酶反應時間為約12-36小時，但不總是局限於此。上述方法中，步驟3)中的所述蒸餾優選在65-100x:下進行。如果進行蒸餾的溫度高於IOO'C，可能引起酶反應產物的熱變性。因此，進行蒸餾的溫度優選是低於IOO'C的低溫。優選持續進行蒸餾直到酶反應產物的體積變成1/3-1/2，但不總是局限於此。本發明中，不對河豚進行煮沸或煎煮，而是對其進行蒸餾。而且，僅使用蒸餾後留下的不含固體物質的餾出物。因此，自動地除去有毒物質並僅將河豚的有效成分保留在河豚濃縮物中。此時，還能除去魚腥味。優選地，額外地將洋薊粉加入通過上述方法獲得的河豚提取物中，然後進行過濾和陳化。河豚提取物中的洋薊粉的含量優選為2-8g/1，但不總是局限於此。優選加入洋薊粉後，用1000-1400目的網將河豚提取物過濾1-3小時。優選在40-60。C下使河豚提取物陳化5-20小時，但不總是局限於此。本發明還提供了通過本發明的方法製得的河豚提取物。本發明還提供了用來治療宿醉的藥物組合物，該藥物組合物含有河豚提取物作為活性成分。本發明中，本發明的發明人通過動物實驗研究了與由熱水或乙醇製得的河豚提取物相比，由蛋白酶製得的河豚提取物能怎樣不同地降低血液中的乙醇和乙醛。分別用蒸餾水、河豚蛋白酶提取物、河豚熱水提取物和河豚乙醇提取物向大鼠進行口服給藥，然後給所述大鼠口服乙醇。每小時採集血液樣品，並使用試劑盒測量血液中的乙醇和乙醛濃度。結果，雖然與對照組相比，河豚提取物未表現出在統計學上顯著降低血液中乙醇的效果，但是仍然可以減少血液中的乙醇。同時，與對照組相比，河豚提取物表現出了在統計學上顯著降低血液中乙醛的效果。確認了與通過熱水或乙醇製得的河豚提取物相比，河豚蛋白酶提取物具有統計學上顯著的降低乙醇和乙醛的效果。因此，證實了本發明的由蛋白酶製得的河豚提取物比起其他河豚提取物具有更多的用於治療宿醉的有效成分。本發明中，本發明的發明人還研究了額外地含有洋薊的河豚蛋白酶提取物是否比單獨的河豚提取物或洋薊提取物具有更好的治療宿醉的效果。將不含洋薊的河豚蛋白酶提取物、洋薊提取物和含有洋薊的河豚蛋白酶提取物中的每一種的被稀釋到15%和未被稀釋的溶液向大鼠進行口服給藥，並且隨後給所述大鼠口服乙醇。每小時採集血液樣品，並使用試劑盒測量血液中的乙醇和乙醛濃度。結果，與不含有洋薊的河豚提取物的未被稀釋溶液或洋薊提取物的未被稀釋溶液相比，含有洋薊的河豚提取物的被稀釋到15%的溶液和100%未被稀釋的溶液具有統計學上顯著的降低血液中乙醇和血液中乙醇的效果。因此，確認了額外含有洋薊的河豚提取物比不含有洋薊的河豚提取物或洋薊提取物具有更有益的治療宿醉的效果。9本發明還提供了一種治療宿醉的方法，該方法包括向受試者施用藥學上有效量的所述河豚提取物的步驟。本發明還提供了所述河豚提取物在生產用來治療宿醉的藥物組合物中的用途。除了河豚提取物之外，所述藥物組合物可以包括，一種或多種具有與河豚提取物具有相同或相似功能的有效成分。本發明的藥物組合物可以口服或經腸胃外給藥，並可以以藥物製劑的通常形式使用。可以通過與通常使用的稀釋劑或賦形劑(例如填料、增補劑、粘合劑、潤溼劑、分解劑和表面活性劑)混合來製備本發明的組合物，用於口服或經腸胃外給藥。用於口服給藥的固體劑型為片劑、丸齊l」、粉末劑、粒劑和膠囊。這些固體製劑是通過將本發明的藥物組合物與一種或多種合適的賦形劑(例如澱粉、碳酸鈣、蔗糖或乳糖、明膠等)混合而製得。除了簡單的賦形劑，可以使用潤滑劑(如硬脂酸鎂和滑石粉)。用於口服給藥的液體劑型為混懸劑、溶液、乳劑和糖漿劑，並且除了通常使用的簡單稀釋劑(例如水和液體石蠟)夕卜，上述劑型可以含有多種賦形劑，例如潤溼劑、甜味劑、香料和防腐劑。用於腸胃外給藥的劑型為經過消毒的水溶液、水不溶性賦形劑、混懸劑、乳劑、凍幹製劑和栓劑。水不溶性賦形劑除了含有一種或多種活性化合物外，可以含有丙二醇、聚乙二醇(polyethyleneglycol)、植物油(例如橄欖油)、可注射酯(例如油酸乙酯(ethylolate))等。栓劑除了含有一種或多種活性化合物外，可以含有半合成脂肪酸酯(witepsol)、聚乙二醇(macrogol)、吐溫61(tween61)、可可脂、月桂酸甘油酯(laurinbutter)、甘油、明膠等。本發明的治療劑可以通過皮下注射、靜脈注射或肌肉注射來進行給藥。本發明還提供了一種用來治療宿醉的健康食品，該食品含有所述河豚提取物作為活性成分。此外，本發明提供了所述河豚提取物在生產用來治療宿醉的健康食品中的用途。本發明的河豚提取物可以用作食品添加劑。在該情況下，所述河豚提取物可以直接添加或按照常規方法與其他的食品成分混合添加。可以根據使用目的(預防、增強健康或治療)來調節活性成分的混合比。通常來說，為了生產健康食品或飲料，本發明的藥物組合物的加入量優選最高為15重量份，並且更優選為最多10重量份。然而，如果為了健康和保健或調整健康狀況而需要進行長期給藥，含量可以低於以上所述，但是由於己經證實河豚提取物是十分安全的，因此也可以接受更高的含量。本文中的食品沒有限制。例如，可以將所述河豚提取物加入到肉、香腸、麵包、巧克力、糖果、點心、曲奇、披薩、拉麵(ramyun)、麵粉製品、口香糖、乳製品(包括冰激凌)、湯、飲料、茶、酒、酒精飲料和複合維生素等中，並且從廣義上來說，可以包括幾乎每一種能生產健康食品的食品。本發明的用於健康飲料的組合物可以額外地含有與其他的飲料相同的多種香味劑或天然的碳水化合物等。上述天然的碳水化合物可以為單糖(例如葡萄糖和果糖)、二糖(例如麥芽糖和蔗糖)、多糖(例如糊精和環糊精)、和糖醇(例如木糖醇、山梨糖醇和赤藻糖醇)。此外，可以含有天然甜味劑(例如索馬甜(thaumatin)和甜菊(stevia)提取物)作為甜味劑。除了以上提及的成分之外，本發明的河豚提取物可以包含多種營養物、維生素、礦物質、香味劑、著色劑、果膠酸及其鹽、褐藻酸及其鹽、有機酸、保護性膠狀增稠劑、pH調節劑、穩定劑、殺菌劑、甘油、醇、碳酸化劑(用來添加到蘇打中)等。本發明的河豚提取物還可以含有天然果汁、水果飲料和/或可加入到蔬菜飲料中的果肉。可以單獨或同時添加上述所有的成分。通過以下所示的實施例闡述了本發明在實踐上和目前優選的實施方式。然而，應該理解的是，本領域技術人員在考慮了本公開的基礎上，可以在本發明的實質和範圍內作出修改和改進。實施例1:河豚提取物的製備<1-1〉通過蛋白酶製得河豚提取物從清洗過的虎河豚(紅鰭東方飩)或白鯖河豚(懷氏兔頭飩)上分離約5kg的河豚肉。然後，將所述河豚肉置於反應器內，向反應器內加入5升的純水和7g的蛋白酶(由枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)產生的枯草桿菌蛋白酶(滴度16,000u/g))。24小時內保持反應器的溫度為37'C，隨後攪拌進行酶反應以製備河豚溶液。酶反應完成時，調整反應器的溫度到97"C。將所述河豚溶液在攪拌下蒸餾約8小時，直到該河豚溶液的體積減少到1/2，該過程中敞開反應器蓋子以釋放蒸汽。蒸餾後，關掉反應器並等到溫度降低至室溫。從餾出物獲得河豚提取物(5升)。含有洋薊的河豚提取物向實施例中獲得的河豚提取物中加入2%的市場上銷售的洋薊粉。將該混合物置於反應器中並完全混合，然後用1000目的網進行過濾。將過濾後的河豚提取物的溫度調整為45-5(TC，然後陳化12小時。結果，得到5升的含有洋薊的河豚提取物。河豚熱水提取物將5kg分離的河豚肉置於反應器中進行均質。向反應器中加入5升的純水，然後在90-10(TC下進行兩次熱水提取，每次進行4小時。結果，得到5升的河豚熱水提取物。河豚乙醇水溶液提取物將5kg分離的河豚肉進行均質。將均質後的河豚和5升的95%的乙醇水溶液加入到浸提器中，然後回流冷凝(水浴水溫80°C)。結果，得到5升的河豚乙醇提取物。洋薊提取物12將5kg的乾燥洋薊搗碎，向其中加入5升的純水。在90-10(TC下將洋薊溶液加熱2小時，接著冷卻至室溫，隨後進行加壓過濾。將過濾的溶液在減壓下濃縮，然後進行熱空氣乾燥。結果，得到5升的洋薊提取物。實驗實施例l:河豚蛋白酶液提取物的宿醉治療效果將40隻布拉格-Sprague-Dawley大鼠每10隻分為一組，然後進行動物試驗檢查宿醉治療效果。對照組的大鼠以10ml/kg的蒸餾水處理。實驗組的大鼠以10ml/kg的100。/。的實施例〈l-l〉製得的河豚提取物、10ml/kg的100%的實施例<1-3〉製得的河豚提取物或10ml/kg的100%的實施例製得的河豚提取物處理。允許Sprague-Dawley大鼠(雄性)隨意地攝取固體飼料和自來水並適應4天。禁食18小時後用測試樣品處理大鼠。30分鐘之後，給大鼠口服乙醇(3g/kg)。1小時和3小時後從眼眶採集血液樣品，且5小時後從心臟採集血液樣品。將血液樣品在3000rpm下離心20分鐘以分離血清。然後，使用試劑盒(Roche)測量乙醇和乙醛濃度。從而以w/v。/。和mg。/。的形式表示所測得的血液中的乙醇和血液中的乙醛。濃度隨著時間變化，並且通過司徒頓t檢驗(studentt-test)(成對的，獨立的)進行統計分析。通過觀察到未用本發明的樣品處理的對照組在攝入乙醇(3g/kg)1小時後，血液乙醇水平如所預期的正常地隨著時間降低，證實了實驗是成功的。tableseeoriginaldocumentpage14表2tableseeoriginaldocumentpage15*平均數±標準偏差結果表明，與用不含洋薊的河豚提取物和洋薊提取物處理的組相比，雖然用含有洋薊的15%的河豚提取物的組沒有表現出統計學上顯著的宿醉治療效果，但是血液乙醇水平隨著時間發生了減少，例如，給藥1小時後的血液乙醇水平為0.203±0.026w/v%;給藥3小時後的血液乙醇水平為0.06±0.012w/v%;且給藥5小時後的血液乙醇水平為0.045士0.015w/vy。。與用不含有洋薊的河豚提取物和洋薊提取物處理的組相比，雖然用含有洋薊的100°/。的河豚提取物的組也沒有表現出統計學上顯著的效果，但是血液乙醇水平發生了減少，例如，給藥l小時後的血液乙醇水平為0.220士0.023w/v。/。；給藥3小時後的血液乙醇水平為0.071±0.014w/v%;且給藥5小時後的血液乙醇水平為0.074±0.022w/v%，儘管該數值比用15%的河豚提取物處理的組所表現的降低的水平要低(參見表2和圖1)。還對各組的血液乙醛進行了研究。在用含有洋薊的15%的河豚提取物處理的組中，給藥1小時後的血液乙醛水平為0.534士0.084w/vQ/。；給藥3小時後的血液乙醛水平為0.249±0.050w/v%;且給藥5小時後的血液乙醛水平為0.154±0.026w/v%，這與用不含洋薊的河豚提取物和洋薊提取物處理的組相比發生了更顯著的下調。在用含有洋薊的100%的河豚提取物處理的組中，給藥1小時後的血液乙醛水平為0.275±0.014w/v%;給藥3小時後的血液乙醛水平為0.158±0.039w/v%;且給藥5小時後的血液乙醛水平為0.128±0.024w/v%，這與用不含洋薊的河豚提取物和洋薊提取物處理的組相比發生了更顯著的降低效果(參見表2和圖2)。因此，證實了在用100%的提取物處理的組中，服用乙醇1小時和3小時後，本發明的含有洋薊的河豚蛋白酶提取物具有約50%的宿醉治療效果。下面，描述含有本發明的河豚提取物作為活性成分的組合物的製備實施製備實施例1:藥物製劑的製備<1-1〉粉末的製備實施例的提取物乳糖2glg通過混合所有上述成分來製備粉末，根據製備粉末的常規方法將這些成分填裝到氣密性包裝中。片劑的製備實施例的提取物玉米澱粉乳糖硬脂酸鎂100mg100mg100mg2mg通過製備片劑的常規方法混合以上所有成分來製備片劑,膠囊的製備16實施例<1-2〉的提取物玉米澱粉乳糖100mg100mg100mg2mg通過混合所有上述成分來製備膠囊，根據製備膠囊的常規方法將這些成分填裝到明膠膠囊中。丸劑的製備實施例的提取物乳糖甘油木糖醇lg1.5glg0.5g根據製備丸劑的常規方法，將上述所有成分混合來製備丸劑。各個丸劑含有4g的混合物。將所有上述成分混合，向其中加入100mg的30。/。的乙醇。將混合物在6(TC下乾燥並將製得的粒劑填裝入包裝。17150mg50mg200mg600mg粒劑的製備實施例的提取物大豆提取物葡萄糖製備實施例2:食品的製備按以下製備含有本發明的河豚提取物的食品。佐料的製備通過將20-95重量份的實施例的河豚提取物與根據常規方法的佐料混合來製備增強健康的佐料。<2-2〉麵食的製備向麵粉中加入0.5-5.0重量份的實施例的河豚提取物。根據常規方法用該麵粉混合物製得增強健康的食品，例如麵包、蛋糕、曲奇、餅乾和麵條。乳製品的製備向牛奶中加入5-10重量份的實施例的河豚提取物。根據常規方法用該牛奶混合物製得增強健康的乳製品，例如黃油和冰激凌。健康食品(Sun-Sik)的製備將糙米、大麥、糯米和薏米(Yulmu)(薏苡Gob'stears))按照常規方法進行糊化，乾燥並搗碎得到60目的粉末。按照常規方法蒸黑豆、黑芝麻和野生芝麻並乾燥，且搗碎得到60目的粉末。在減壓下對實施例的河豚提取物進行濃縮，噴霧乾燥並搗碎得到60目的乾粉末。按以下的比例將穀物、種子的乾粉末與實施例<1-1〉的河豚提取物混合得到健康食品(Sim-Sik)。穀物(糙米30重量份、薏米15重量份、大麥20重量份)、種子(野生芝麻7重量份，黑豆8重量份，黑芝麻7重量份)、實施例的河豚提取物的乾粉末(3重量份)、靈芝(G3wcfer畫/wc油w)(0.5重量份)、地黃(ie/z願朋/ag7Wwcwa)(0.5重量份)。製備實施例3:飲料的製備健康汽飲料的製備實施例<1-2〉的提取物檸檬酸純水1000mg1000mg腦g補充至卯0ml將上述組成按照常規的用於製備健康飲料的方法混合。將混合物在85"C下攪拌加熱1小時，然後過濾。將濾液盛入2升無菌容器中，密封並再次進行消毒，在用來製備用於健康飲料的組合物之前儲存在冰箱中。按照優選的混合比將適合於所需飲料的組成混合，但是該組成比可以根據地區和國家偏好等等進行調整。本領域技術人員將理解的是，可以利用前述說明書中公開的概念和特定實施方式作為實現與本發明相同目的而進行的修改或設計其他實施方式的基礎。本領域權利要求1、一種河豚提取物的製備方法，該方法包括以下步驟1)將河豚肉從河豚上分離；2)使步驟1)的所述河豚肉與酶反應；和3)通過將步驟2)的酶反應產物進行蒸餾而獲得餾出物。2、根據權利要求1所述的製備方法，其中，步驟2)中所述的酶為蛋白酶。3、根據權利要求2所述的製備方法，其中，所述蛋白酶的含量為0.1-0.2%，反應溫度為25-5(TC，且反應時間為12-36小時。4、根據權利要求1所述的製備方法，其中，步驟3)中所述的蒸餾的溫度最高為IO(TC，且持續進行所述蒸餾直到酶反應產物的體積變為1/3-1/2。5、根據權利要求1所述的製備方法，其中，該方法還包括向步驟3)所述的餾出物中加入洋薊粉並過濾該餾出物，然後對濾液進行陳化的步驟。6、根據權利要求5所述的製備方法，其中，使用1000-1400目的網進行所述過濾。7、根據權利要求5所述的製備方法，其中，所述洋薊粉的加入量為2-8g/1。8、根據權利要求5所述的製備方法，其中，所述陳化的溫度為40-60°C，且陳化的時間為5-20小時。9、一種根據權利要求1所述的方法製得的河豚提取物。10、一種治療宿醉的藥物組合物，該藥物組合物含有根據權利要求9所:述的河豚提取物作為活性成分。11、一種治療宿醉的方法，該方法包括用根據權利要求9所述的河豚提取物以藥學上的有效量向受試者進行給藥。12、權利要求9所述的河豚提取物在製備用來治療宿醉的藥物組合物中的用途。13、一種治療宿醉的健康食品，該健康食品含有根據權利要求9所述的河豚提取物作為活性成分。14、權利要求9所述的河豚提取物在製備用來治療宿醉的健康食品中的用途。全文摘要本發明涉及一種利用蛋白酶製得的河豚提取物及其製備方法，和一種用來治療宿醉的組合物，該組合物含有所述河豚提取物作為活性成分。具體來說，利用蛋白酶製得的本發明的河豚提取物比通過熱水和乙醇製得的其他河豚提取物具有更多的活性成分。含有洋薊(朝鮮薊)的河豚提取物與單獨的河豚提取或洋薊提取物相比，在治療宿醉方面具有顯著的協同效應，因此能夠有效地用作治療宿醉的組合物。文檔編號A23L1/327GK101657110SQ200880008939公開日2010年2月24日申請日期2008年1月17日優先權日2007年1月19日發明者李相佶申請人:李相佶