氯黴素膠體金法免疫層析試紙卡的製作方法

2023-06-07 08:43:56

本實用新型屬於生物技術領域，具體涉及一種氯黴素膠體金法免疫層析試紙卡。

背景技術：

氯黴素（Chloramphenicol，CAP）是一種高效廣譜抗生素，能夠抑制革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌，廣泛應用於各類家禽、家畜、水產品生產過程中的傳染性疾病控制。但氯黴素在食品中的殘留會對人體健康構成潛在危害，引起人的骨髓造血機能紊亂，造成再生障礙性貧血、粒狀白細胞缺乏症及新生兒、早產兒灰色綜合症等疾病，歐美等發達國家已相繼禁止或嚴格禁止使用。我國農業部公告第235號文件也規定，氯黴素及其鹽、酯（包括琥珀氯黴素）在所有食品動物的所有可食組織中不得檢出。

目前用來檢測氯黴素的最常用方法主要是氣相色譜、液相色譜及色譜-質譜法，這些方法雖然具有靈敏度高、結果準確、重複性好、假陽性少等優點，但仍存在一定缺點，如樣品前處理過程複雜，儀器化程度高且價格昂貴，分析速度慢，已逐漸不能滿足發達國家及食品加工企業對檢測方法檢測限的要求。與之相比，免疫學測定方法靈敏度較高、特異性強、試樣預處理簡單、分析時間短，適合現場監控和大量樣本的篩查。

技術實現要素：

針對現有技術中存在的不足，本實用新型的目的旨在提出氯黴素膠體金法免疫層析試紙卡。

為實現上述目的，本實用新型採用如下之技術方案：

一種氯黴素膠體金法免疫層析試紙卡，包括由底座和面蓋嵌合連在一起的塑料盒體，所述塑料盒體內封裝有用於檢測的試紙條；所述面蓋上開有加樣端和觀察窗；其特徵在於：所述試紙條包括底板以及依次設置在底板上緊密相連的樣品吸收墊、反應膜、吸水墊，所述反應膜具有包被有氯黴素半抗原-載體蛋白偶聯物溶液印製的檢測線和包被羊抗鼠IgG溶液印製的質控線，其中檢測線位於靠近樣品吸收墊的一側；所述面蓋下表面上內嵌有試劑腔，所述試劑腔外沿所在的面蓋下表面上設有卡槽並與卡板卡扣連接，所述卡板上設有微孔，所述試劑腔通過流通通道與加樣端連通，由試劑腔和卡板合圍而成的腔室內設有氯黴素單克隆抗體-膠體金標記物；所述試劑腔位於樣品吸收墊上方，所述觀察窗位於反應膜的上方並能觀察到檢測線和質控線。

進一步，所述底板上還設有保護膜，所述保護膜位於底板的兩端，分別與樣品吸收墊的外邊緣和吸水墊的外邊緣相連接。這樣能夠更好的保存試劑溶液，使得檢測線和質控線充分接觸。

進一步，所述觀察窗內嵌入設置有透明板，能防止異物與試紙條接觸，對試紙條起到一定的保護作用。

進一步，所述面蓋上還設有檢測線印跡「C」和質控線印跡「T」，便於人員直接觀察。

進一步，所述底板為硬質塑膠條或不吸水的硬紙條；所述樣品吸收墊為玻璃纖維棉；所述吸水墊是由植物長纖維為原材料製成的純白濾紙。

由於上述技術方案運用，本實用新型與現有技術相比具有下列優點：

本實用新型提供的氯黴素膠體金法免疫層析試紙卡，具有靈敏度高、特異性強、成本低、操作簡單、檢測時間短、適合各種單位使用、儲存簡單、保質期長的優點。其中，採用高特異性的氯黴素單克隆抗體，保證了檢測結果的可靠性；將金標抗體放置在試劑腔內，在檢測過程中，能夠使金標抗體與待檢樣品液充分接觸，充分反應，從而減少誤差，增加整個體系的反應靈敏度。

附圖說明

圖1為本實用新型的結構示意圖。

圖中：1.面蓋；2.底座；3.加樣端；4.流通通道；5.試劑腔；6.卡板；7.觀察窗；8.透明板；9.底板；10.樣品吸收墊；11.檢測線；12.反應膜；13.質控線；14.吸水墊；15.保護膜。

具體實施方式

下面結合附圖及實施例對本實用新型作進一步描述：

實施例：

圖1所示：氯黴素膠體金法免疫層析試紙卡,包括由底座2和面蓋1嵌合連在一起的塑料盒體，所述塑料盒體內封裝有用於檢測的試紙條。

所述面蓋1上開有加樣端3和觀察窗7，所述面蓋1下表面上內嵌有試劑腔5，所述試劑腔5外沿所在的面蓋1下表面上設有卡槽並與卡板6卡扣連接，所述卡板6上設有微孔，所述試劑腔5通過流通通道4與加樣端3連通，由試劑腔5和卡板6合圍而成的腔室內設有氯黴素單克隆抗體-膠體金標記物。待檢樣品液從加樣端滴入後沿著流通通道進入試劑腔，先與氯黴素單克隆抗體-膠體金標記物進行反應形成金標反應液，該金標反應液在從卡板上的微孔滴落而成。由於檢樣品液會在試劑腔內逗留一段時間，其與氯黴素單克隆抗體-膠體金標記物有充分的接觸時間，反應充分。

所述試紙條包括底板9以及依次設置在底板9上緊密相連的樣品吸收墊10、反應膜12、吸水墊14，所述反應膜12具有包被有氯黴素半抗原-載體蛋白偶聯物溶液印製的檢測線11和包被羊抗鼠IgG溶液印製的質控線13，其中檢測線11位於靠近樣品吸收墊10的一側。所述試劑腔5位於樣品吸收墊10上方，所述觀察窗7位於反應膜12的上方並能觀察到檢測線和質控線。

進一步來說，所述底板9上還設有保護膜15，所述保護膜15位於底板9的兩端，分別與樣品吸收墊10的外邊緣和吸水墊14的外邊緣相連接。這樣能夠更好的保存試劑溶液，使得檢測線和質控線充分接觸。

進一步來說，所述觀察窗7內嵌入設置有透明板8，能防止異物與試紙條接觸，對試紙條起到一定的保護作用。

進一步來說，所述面蓋1上還設有檢測線印跡「C」和質控線印跡「T」，便於人員直接觀察。

本實施例中所用的底板9為硬質塑膠條或不吸水的硬紙條，所述樣品吸收墊10為玻璃纖維棉，所述吸水墊14是由植物長纖維為原材料製成的純白濾紙。

使用時，將處理後的待檢樣品液從加樣端滴入，待檢樣品液沿著流通通道流入試劑腔內與氯黴素單克隆抗體-膠體金標記物（金標抗體）結合後一起向反應膜擴散；若待檢樣品液中氯黴素的含量高，則擴散過程中待檢樣品液中的氯黴素可與金標抗體相結合，進而完全封閉金標抗體上氯黴素的抗原結合點，阻止金標抗體與反應膜上氯黴素半抗原-載體蛋白偶聯物結合，檢測區不顯色，而羊抗鼠IgG（質控線）則可與金標抗體結合，質控區顯色；若待檢樣品液中氯黴素的含量低或無，則金標抗體上的抗原結合位點不能被封閉，進而金標抗體會與反應膜上氯黴素半抗原-載體蛋白偶聯抗原結合，檢測區顯色，同時羊抗鼠IgG（質控線）也可與金標抗體結合，質控區顯色。如果質控線不顯色，則試紙條失效。

陽性：當質控區（C）顯示出紅色條帶，而檢測區（T）不顯色時，判為陽性。

陰性：當質控區（C）顯示出紅色條帶，檢測區（T）同時也顯示出紅色條帶，判為陰性。

無效：當質控區（C）不顯示出紅色條帶，則無論檢測區（T）顯示出紅色條帶與否，該試紙條判為無效。

以上僅就本實用新型的最佳實施例作了說明，但不能理解為是對權利要求的限制。本實用新型不僅限於以上實施例，凡在本實用新型獨立權利要求的保護範圍內所作的各種變化均在本實用新型的保護範圍內。