三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的凍幹製品及其製備方法

2023-06-07 07:59:56

專利名稱：：三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的凍幹製品及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種三磷酸胞苷二鈉的穩定形式，具體涉及以精氨酸作為穩定劑的三磷酸胞苷二鈉的凍幹製品。本發明還涉及一種三磷酸胞苷二鈉凍幹製品的製備方法。肖i駄三磷酸胞苷二鈉為核苷酸衍生物，是一種輔酶類藥，其具有參與並調節物質代謝、營養神經和抗血管硬化的藥理作用，因而應用廣泛。但是，三磷酸胞苷二鈉具有熱不穩定性，其原料要求在冷處保存，製劑規定在陰涼處保存。經考察，目前市售產品在規定的陰涼貯存條件下，並不能保證其化學穩定性。三磷酸胞苷二鈉不穩定的原因在於其分子的磷酸鍵斷裂，迅速降解為一磷酸胞苷鈉和二磷酸胞苷二鈉。有效成分的快速下降，影響到藥物的療效和安全性。中國專利公開號CN1833655A(名稱為"三磷酸胞苷二鈉輸液及其製備工藝")公開了用於三磷酸胞苷二鈉輸液的穩定劑有碳酸胍、精氨酸或吐溫-80，三磷酸胞苷二鈉與穩定劑的重量比為1:801:150，pH值為7.59.0。該發明使用了大量的穩定劑(相對三磷酸胞苷二鈉)，不利於成本控制，並可能產生與治療無關的藥理作用。中國專利公開號CN101390873A(名稱為"一種三磷酸胞苷二鈉與精氨酸組合物及其製備方法")公開了三磷酸胞苷二鈉凍乾粉針劑，其中三磷酸胞苷二鈉、甘露醇和精氨酸的重量比為1:1.5:0.150.375，pH值為4.70-5.91(偏酸性)，而用精氨酸作pH調節劑。該發明所得產品的pH呈酸性，穩定性有待進一步提高。因此，有必要提供一種三磷酸胞苷二鈉的更加穩定形式的製品，以方便醫學上的實際應用。
發明內容本發明要解決的問題之一在於提供一種更加穩定的三磷酸胞苷二鈉製品，以使三磷酸胞苷二鈉的降解最小化，從而保證藥物的有效性和安全性。本發明要解決的另一問題在於提供一種製備三磷酸胞苷二鈉凍幹製品的方法，該方法操作簡單，用料少，有利於成本控制。為解決上述問題，本發明提供一種三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的凍幹製品，其包含作為活性成分的三磷酸胞苷二鈉和作為穩定劑的精氨酸，兩者的重量比為1:0.43.2。在優選的實施方式中，三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1:1。在優選的實施方式中，所述凍幹製品的水溶液的pH為7.011.0。優選地，所述pH為9.0。在優選的實施方式中，所述凍幹製品還包含一種或多種藥學上可接受的支架劑。所述支架劑例如為葡萄糖、乳糖、甘露醇、右旋糖苷或蔗糖。本發明另一方面提供一種三磷酸胞苷二鈉與精氨酸凍幹製品的製備方法，該方法包括(a)提供三磷酸胞苷二鈉，加水溶解，過濾；(b)提供精氨酸母體，使得三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1:0.43.2，加水溶解，過濾；(c)提供支架劑，加水溶解，過濾；(d)將步驟(a)、(b)、(c)中的溶液混合，將pH調節至7.011.0後分裝並凍幹。在優選的實施方式中，步驟(b)中所述的精氨酸母體為精氨酸或鹽酸精氨酸。優選地，三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1:1。優選地，步驟(c)中的支架劑為甘露醇。優選地，步驟(d)中的pH為9.0。本發明提供的三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的凍幹製品，使用精氨酸作為穩定劑，三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1:0.43.2，凍幹製品的水溶液pH為7.011.0(呈鹼性)，與現有同類產品的pH範圍不同，但屬藥劑學所允許、臨床能接受的範圍。按本發明的配方及控制參數可製成質量穩定的凍幹品或注射劑，可供生產注射劑使用或直接供臨床使用。本發明證實了三磷酸胞苷二鈉在鹼性條件下相對穩定，而在本發明選用的鹼性物質中以精氨酸為最穩定。本發明實施例中所製得的注射劑經動物實驗，證實安全性好。產品經一年的留樣觀察，採用最新的國家食品藥品監督管理局標準(YBH17632005)對其含量及有關物質進行測定，均可滿足質量標準的要求。圖1是顯示本發明凍幹製品中有關物質的含量與精氨酸比例的變化關係的圖表；圖2是顯示本發明凍幹製品中有關物質的含量與pH的變化關係的圖表；圖3是通過液相色譜法測定實驗例中樣品所得的圖譜；圖4是通過液相色譜法測定實驗例中陽性對照品所得的圖譜；圖5是通過液相色譜法測定實驗例中陰性對照品所得的圖譜。具體實施例方式為了更好地理解本發明的方法，下面將通過實施例和實驗證據進一步闡述本發明及其優勢。本發明穩定劑的篩選取三磷酸胞苷二鈉2g(折純計)，加水溶解並稀釋至1000ml。分別精密量取100ml，加磷酸鹽緩衝液或10%鹽酸精氨酸，分別以氫氧化鈉調節pH值為酸、中、鹼性，加水至200ml，得6個樣品，分別測定pH值，將樣品同時於90士rC水浴加熱，分別於O、1、2、3、6小時取樣測定1次三磷酸胞苷二鈉的含量。實驗數據見表l。表1不同穩定劑在不同pH時的熱穩定性數據穩定劑溶液pH值含量(標示含量％)0123456磷酸緩衝液5.699.077.4459.8451.0440.1527.3924.27.998.7880.362.2652.2542.3534.9825.748.699.2289.4382.8971.6163.855.4451.48鹽酸精氨酸4.797.3580.4165.4544.8841.737.7333.227.399.1382.2868.7558.9644.3340.2634.548.699.2493.7287.3483.3877.8873.3758.85從表1可看出，在選定的穩定劑用量基本相同時，三磷酸胞苷二鈉對熱穩定性隨pH值升高而升高，而溶液呈鹼性，有游離精氨酸存在時，三磷酸胞苷二鈉對熱的穩定性最好。穩定劑的用量及DH值的篩選取三磷酸胞苷二鈉2g(折純計)，加適量水溶解，分別加入10%精氨酸lml、2ml、4ml、8ml、16ml、32ml、64ml(相當於三磷酸胞苷二鈉與精氨酸重量比為1:0.05、1:0.1、1:0.2、1:0.4、1:0.8、1:1.6、1:3.2)，加水至100ml，得7個樣品，分別測得其對應的pH值為4.03、4,36、4.88、6.13、8,65、9.66、11.2，將樣品同時於90士rC水浴加熱，分別於O、1、2、3、6小時測定三磷酸胞苷二鈉及有關物質的含量。將有關物質含量變化與pH變化和精氨酸比例分別作成曲線圖，結果參見圖1和圖2。從圖1和圖2可看出，隨著精氨酸的增加，三磷酸胞苷二鈉在受熱條件下分解的有關物質明顯遞減，曲線顯示，當三磷酸胞苷二鈉與精氨酸重量比達l:l，其對應的溶液pH值約為9.0時對熱的穩定性最好，但隨精氨酸重量比進一步增加，有關物質的變化明顯趨平緩，從中可篩選出其適宜的pH範圍為7.011.0之間，其對應的三磷酸胞苷二鈉與精氨酸重量比為1:0.41:3.2,最佳pH值約為9.0,其對應的三磷酸胞苷二鈉與精氨酸重量比約為1:1。凍幹製品的製備方法實施例l:取精氨酸10.0g，甘露醇5.0g，以注射用水溶解，加適量活性炭，吸附，過濾脫炭，加入三磷酸胞苷二鈉10.0g(折純計)，攪拌溶解，加注射用水至500ml，測定pH值為9.0，以0.22微孔濾膜過濾，按無菌操作法分裝於西林瓶中，於冷凍乾燥機凍幹，壓塞、軋蓋，得樣品462瓶，每瓶含三磷酸胞苷二鈉20mg。對照實施例2:取甘氨酸5.0g，甘露醇2.5g，以注射用水溶解，加適量活性炭，吸附，過濾脫炭，加入三磷酸胞苷二鈉5.0g(折純計)，攪拌溶解，加氫氧化鈉溶液調節測定pH值為7.0，加注射用水至250ml，以0.22pm微孔濾膜過濾，按無菌操作法分裝於西林瓶中，於冷凍乾燥機凍幹，壓塞、軋蓋，得合格枰品202瓶，每瓶含三磷酸胞苷二鈉20mg。對照實施例3:取鹽酸精氨酸10.0g，甘露醇5.0g，以注射用水溶解，加適量活性炭，吸附，過濾脫炭，加入三磷酸胞苷二鈉10.0g(折純計)，攪拌溶解，加注射用水至500ml，加氫氧化鈉溶液調節測定pH值為6.0，以0.22pm微孔濾膜過濾，按無菌操作法分裝於西林瓶中，於冷凍乾燥機凍幹，壓塞、軋蓋，得合格樣品454瓶，每瓶含三磷酸胞苷二鈉20mg。實施例4(大盤凍幹無菌原料的製備)取精氨酸20.0g，甘露醇10.0g，以注射用水溶解，加活性炭0.8g，攪勻，吸附30分鐘，過濾脫炭，放冷，加入三磷酸胞苷二鈉20.0g，攪拌溶解，加冷卻至室溫的注射用水至1000ml，測定pH值為9.0，以0.22拜微孔濾膜過濾，按無菌操作法將濾液分裝於盤內，於冷凍乾燥機凍幹，粉碎，分裝於無菌容器中，得凍乾粉49g。實施例5(注射劑的製備)取實施例4所得的凍乾粉適量，加入適量注射用水溶解，過濾，分裝於無菌容器中，滅菌，得注射劑。凍乾粉針劑的安全性試驗將依本發明製成的凍乾粉針(實施例l)按中國藥典2005年版二部附錄XIC進行異常毒性檢查，實驗結果如下表2所示表2凍乾粉針劑的異常毒性實驗tableseeoriginaldocumentpage9將依本發明製成的凍乾粉針(實施例1)加氯化鈉注射液製成每lml中含2mg的溶液，按中國藥典2005年版二部附錄XID進行熱原檢査，劑量按家兔體重每lkg緩慢注射lml，實驗結果如下表3所示表3凍乾粉針劑的熱原檢查tableseeoriginaldocumentpage10從表2和表3的數據可看出，依本發明製成的凍乾粉針的異常毒性及熱原均符合規定。凍乾粉針劑的穩定性試驗將依本發明製得的凍幹品模擬運輸較差條件3035'C貯存，並與對照實施例比較其穩定性，實驗結果如表4所示表4本發明凍幹製品的穩定性數據tableseeoriginaldocumentpage10將依本發明製得的凍幹品按規定貯存條件上限1520'Cie存，並與對照實施例比較其穩定性，實驗結果如表5所示表5本發明凍幹製品的穩定性數據tableseeoriginaldocumentpage11從表4-5可看出，本發明的凍幹製品在規定的貯存條件下，均能保持含量及有關物質符合規定，同時也能保證產品在運輸過程的短暫高溫天氣影響下，起到延緩降解的作用。與對照實施例比較，本發明有效期內含量及有關物質的穩定性均有相當明顯的優勢。注射用三磷酸胞苷二鈉中精氨酸的含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽垸鍵合矽膠為填充劑；流動相A(取CH3COONa，3H2019.0g，三乙胺0.5ml，1000ppmEDTA溶液加水使溶解並稀釋至1000ml,用冰乙酸調節pH值為6.4，濾過，取濾液940ml與乙腈60ml混合，脫氣20秒，即得)，流動相B(乙腈-水-1000ppmEDTA(650:350:0.2)，濾過，脫氣20秒，即得)，按下表6進行梯度洗脫；柱溫為38.0°C;檢測波長為254nm。表6梯度洗脫參數tableseeoriginaldocumentpage1110.054461.010.501001.011.501001.011.901001.012.001001.512.510001.020.010001.520.510001.0測定法取樣品3瓶，加水溶解並轉移至20ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取l(Hil於微量試管中，真空低溫乾燥30分鐘，加衍生劑(異硫氰酸苯酯-三乙胺-水-無水乙醇(1:1:1:7))20^1，在旋渦振蕩器上振蕩30秒；靜置10分鐘，再真空低溫乾燥50分鐘後，加稀釋液(取磷酸氫二鈉0.71g，加水使溶解並稀釋至1000ml，用10%磷酸-乙腈(95:5)調節pH值至7.4)100^1，於進樣前旋渦振蕩30秒。取1(V1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取精氨酸對照品約15mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，按以上樣品處理方法同樣操作，按外標法以峰面積計算，即得。樣品(含三磷酸胞苷二鈉-精氨酸-甘露醇)、陽性對照(含精氨酸)和陰性對照(含三磷酸胞苷二鈉-甘露醇)的液相色譜圖參見圖3-5。該實驗建立了穩定劑精氨酸的檢測方法，便於產品的質量控制，並可用於配方的甄別。雖然本發明己經參考具體的實施方式進行描述，但是本領域技術人員通過閱讀上述描述後，將可以對本發明做出顯而易見的修改和修飾，而不違背本發明的意圖和本質。本發明有意將這些修改和修飾包括在權利要求的範圍內。權利要求1.一種三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的凍幹製品，其包含作為活性成分的三磷酸胞苷二鈉和作為穩定劑的精氨酸，其特徵在於，兩者的重量比為1∶0.4～3.2。2.如權利要求l所述的凍幹製品，其特徵在於，三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1:1。3.如權利要求l所述的凍幹製品，其特徵在於，所述凍幹製品的水溶液的pH為7.011.0。4.如權利要求3所述的凍幹製品，其特徵在於，所述pH為9.0。5.如權利要求l所述的凍幹製品，其特徵在於，所述凍幹製品還包含一種或多種藥學上可接受的支架劑。6.如權利要求5所述的凍幹製品，其特徵在於，所述支架劑為葡萄糖、乳糖、甘露醇、右旋糖苷或蔗糖。7.如權利要求5所述的凍幹製品，其特徵在於，所述支架劑為甘露醇。8.—種三磷酸胞苷二鈉與精氨酸凍幹製品的製備方法，該方法包括(a)提供三磷酸胞苷二鈉，加水溶解，過濾；(b)提供精氨酸母體，使得三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1力.43.2，加水溶解，過濾；(C)提供支架劑，加水溶解，過濾；(d)將步驟(a)、(b)、(c)中的溶液混合，將pH調節至7.011.0後分裝並凍幹。9.如權利要求8所述的製備方法，其特徵在於，步驟(b)中所述的精氨酸母體為精氨酸或鹽酸精氨酸。10.如權利要求8所述的製備方法，其特徵在於，三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的重量比為1:1。11.如權利要求8所述的製備方法，其特徵在於，步驟(c)中的支架劑為甘露醇。12.如權利要求8所述的製備方法，其特徵在於，步驟(d)中的pH為9.0。全文摘要本發明提供一種三磷酸胞苷二鈉與精氨酸的凍幹製品，其包含作為活性成分的三磷酸胞苷二鈉和作為穩定劑的精氨酸，兩者的重量比為1∶0.4～3.2。該凍幹製品的水溶液的pH為7.0～11.0。本發明提供的凍幹製品使三磷酸胞苷二鈉的降解最小化，從而保證藥物的有效性和安全性。按本發明的配方及控制參數可製成質量穩定的凍幹品或注射劑，可供生產注射劑使用或直接供臨床使用。另外，本發明還提供該凍幹製品的生產方法。文檔編號A61K9/19GK101658498SQ20091019240公開日2010年3月3日申請日期2009年9月17日優先權日2009年9月17日發明者楊松明,蔣林波,傑陳申請人:廣東彼迪藥業有限公司