以3-乙醯氧基-1,1-環丁烷二羧酸根為離去基團的新型水溶性Pt(II)抗癌配合物的製作方法

2023-06-06 19:48:16 1

專利名稱：：以3-乙醯氧基-1,1-環丁烷二羧酸根為離去基團的新型水溶性Pt(II)抗癌配合物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及到一類以3-乙醯氧基-1，1-環丁垸二羧酸根為離去基團的水溶性鉑(n)抗癌配合物，屬於化學製藥領域。
背景技術：
：癌症是一種嚴重威脅人類健康和生命的疾病，是繼心血管疾病後的全球第二大死亡原因。據世界衛生組織大會估計，2005年全世界5800萬死亡總數中，大約有760萬人死於癌症，預計在今後10年將有8400萬人死於癌症。近年來，由於環境惡化、不良生活習慣以及人口老齡化等因素的影響，我國的癌症發生率也不斷增加，每年癌症新發病例為220萬，因癌症死亡人數為160萬。因此，癌症己成為人類亟待攻克的醫學難題之一。目前治療癌症主要有三大手段:手術治療、放射治療和化學治療。然而，手術治療和放射治療主要針對的是局部或區域性腫瘤，對發生全身多處轉移的惡性腫瘤只能依賴化學治療。此外，目前手術治療和放射治療的技術已經相當完善，已不能期望繼續取得顯著進步。而化學療法的歷史雖然較短，但發展較決，已經取得了很多成就，因而在治療腫瘤方面可以期望從化學療法獲得更好的發展。化療的基礎是化療藥物，因此，世界各國每年都投入大量人力物力和財力進行抗癌藥物的研究。鉑類抗癌藥物是上世紀70年代末發展起來的一類無機抗癌化合物，由於其抗癌活性強、作用譜較廣，作用機制獨特，與非鉑類抗癌藥物不產生交叉耐藥性，是治療許多腫瘤的首選藥物，得到廣泛使用。目前批准上市的鉑類拋中瘤藥物有六個，它們分別是順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、奈達銷(nedaplatin)、舒銷(sunpla，eptaplatin)禾口樂銷(lob印latin)。據最新統計，現臨床使用的i^化療方案中，有85%的方案是鉬類抗腫瘤藥物為主藥，或有鉑類抗腫瘤藥物參與配伍。下面為目前臨床上使用的鉑類抗癌藥物。formulaseeoriginaldocumentpage4然而，鉑類抗癌藥物存在較大的毒副作用，接受治療的癌症患者通常出現骨髓抑制如血小板低下、噁心嘔吐、腎和神經損傷等嚴重毒副作用，因此研究毒性小的新型鉑類配合物仍是目前抗癌藥研究的主要方向之一。
發明內容最新研究表明鉑類藥物的作用靶點為細胞的DNA，但只有約1%的藥物與DNA形成加合物A2Pt/DNA，抑制DNA的複製。其餘的99%分布在其4也細胞器中。基於對鉑類抗癌藥物的認識和前期工作基礎，謝門認為鉑類抗癌藥物的毒性可能與作用於非耙標的99%的藥物所含的金屬鉑有關。鉑屬於非人體必須的微量金屬元素，在人體內很容易產生積累性中毒，而藥物的積累往往與其水溶性有關聯。因此，劍門預測可以通過採用極性大的離去基團來提高鉑類抗癌藥物的水溶性，加速藥物在發揮藥理作用後從體內清除，減少鉑在體內的積累，降低泰性。增加鉑類抗癌藥的水溶解度可以通過在其載體基團和/或離去基團上修飾極性基團來實現，為此，我們以臨床應用的銷類抗癌藥為先導化合物，經過大量的研究和試驗，合成和篩選出水溶性好、毒性低的新型鉑(II)抗癌配合物。本發明的水溶性鉑(II)配合物，其化學結構如下formulaseeoriginaldocumentpage5formulaseeoriginaldocumentpage5其中，離去基團為3-乙醯氧基-1，1-環丁烷二羧酸根(3"C0CK:BDCA)，載體為己上市的鉑類抗腫瘤藥物的氨/胺配體，包括氨(鵬)、1R，2R-二氨基環己烷(DACH)、1，2-雙慮甲基)-環丁烷、2-異丙基-(4R，5R)-4,5-雙(氨甲基)-1,3-二氧環戊烷。本發明化合物的製備方法是以K2PtCl4為起始原料，加入KI，轉化成KaPtl4，與載體基團A2(A「2肌、lR，2R-二氨基環己烷、1,2-雙(氨甲基)-環丁烷、2_異丙基-(4R,5R)-4,5-雙(氨甲基)-l，3-二氧環戊垸)反應，製備出相應的cis-[Pt(II)A2lJ中間體，再在水中與3-乙醯氧基-1，1-環丁烷二羧酸銀等摩爾定量反應，反應完全後過濾分離Agl，母液濃縮和冷凍乾燥得到粗品。粗品在水乙醇=1:1的體系中重結晶得到本發明的配合物純品。所涉及的化學反應為formulaseeoriginaldocumentpage5formulaseeoriginaldocumentpage5本發明的化合物其特徵在於它的溶解度大、抗癌活性高、毒副作用小，可以用於臨床治療癌症。本發明的化合物可以帝喊兩種常規的製劑一凍乾粉和注射液在臨床中使用。具體實式(1)3-乙醯氧基l，l-環丁烷二羧酸銀的製備先按文獻報導的方法[InorganicaChimicaAcA2004，357,4452-4466]製備3-羥基-l，l-環丁垸二羧酸(mp151-152°C)。取20g3-羥基l,l-環丁烷二羧酸，溶於200ml丙酮，加入33g新蒸乙醯氯，於50。C攪拌4h，蒸發除溶劑，得粗品，在異丙醚重結晶，得到白色晶體，6(TC烘乾，得3-乙醯氧基-l,l-環丁烷羧酸15.5g,mp:128-129°C,產率60%。取3-乙醯氧基-l,l-環丁烷二羧酸10g，溶於100ml的水中，用lmol/LNaOH調節PH二6-7，加入104mmo1、100mlAgNO3(過量5%)，得到3-乙醯氧基-l，l-環丁烷二羧酸銀沉澱，過濾收集，用水、乙醇洗滌後在60^7(TC下真空乾燥4小時，得到19g3-乙醯氧基-l，1-環丁烷二羧酸銀，產率92%。(2)cis-[Pt(II)A2l2]中間體的製備稱取5gK2PtCl4(12mmol)溶於50ml水中，過濾除去不溶物，在6(TC下，緩慢加入含KI12g(72mmol)的水溶液50ml，避光反應2—3小時後，滴加載體基團A2(NH331mmol,過量30%;DACH，12mmo1)，得到黃色沉澱，過濾收集，用水、乙醇洗滌後在60~70匸下真空千燥4小時，分別得到cis-[Pt(II)A2I2](A2=2NH3)5.5g，產率95%，(A2=DACH)6.3g，產率92%。(3)cis-[3-乙醯氧基-l,1—環丁垸二羧酸根.二氨合鉑(n)](LLC-1401)的合成取5g的cis-ptCNH^y,懸浮100ml水中，加入等摩爾量的3-乙醯氧基-1,1-環丁垸二羧酸銀4.28g，在45"C下攪拌反應8小時，檢査反應完全後過濾除去Agl沉澱，母液減壓WI到5ml，過濾收集白色晶體，得2.9g，產率65%。水溶性大於30mg/ml(室溫)特徵結構參數為元素分析:C22.1%，N6.54%,H3.29%,Pt45.2%與理論值C22.4%，N6.52%，H3.26%,Pt45.5%—致。FAB+-MS(m/e，RI):4300000%)。0〉IR(cm",KBr壓片)..3286(svNH3),2960(w,vCH2),1722(s,vC=0),1639(vsVas(CO(J))，1374(sVs(COO-》。NMR(dmso,ppm):1.97(s,3H,C瑪CO),2.54(仁2H，C//2),3.21(t,2H，C刷，4.14(s,6H,2Mf》,4.64(m,1H,3-C//)。這些參數符合所發明的配合物的化學結構。(4)cis-[1民2R-二氨基環己烷0-乙醯氧基-l，1—環丁烷二羧酸根合鉑(II)]的合成取5g的cis-[Pt(DACH)I2](DACH=1民2R-二氨S5f己烷)，懸浮100mJ水中，加入等摩爾量的3-乙醯氧基-l,l-環丁烷二羧酸銀3.67g，在45。C下攪拌反應12小時，檢査反應完全後過濾除去Agl沉澱，母液Mffi濃縮到5ml，過濾收集白色晶體，得3.4g，產率75%。水溶性大於5mg/ml(室溫)特徵結構參數為元素分析:C29.6%,N5.54%,H4.29%,Pt38.1%與理論值C33.0%,N5.50%,H4.32%,Pt383%—致。FAB+-MS(m/e，RI):510(1^,100%)。0〉IR(cm"，KBr壓片)3208，3108(s，vNH2)，2941，2836(w,vCH2),1738(s,vC=0)，1646(vsVas(COO-))，1363(svs(COC0)013C-NMR(dmso,ppm):21.1(C-4,DACH),24.4(C誦3，DACH),31.8(C-2,CBDCA)，49.6(C-l,CBDCA),62.3,62.5(C-l，C-2，DACH),64.2(C-3,CBDCA)，170.4(00),176.6,176.8(COO—)。這些參數符合所發明的配合物的化學結構。(5)發明的配合物的急性毒性昆明種小鼠，體重20-22克，眼雄各半，購自上海斯萊克試驗動物有限責任公司，許可證號SCXK(滬)2004—0005。LLC-1401用5%葡萄糖溶液配製。小鼠單次靜脈注射不同劑量的LLC-1401。給藥後觀察死亡率及毒性情況，共觀察14天，根據死亡率應用Bliss方法計算LDn)，LD50。tableseeoriginaldocumentpage7試驗測得所發明的配合物LLC-1401注射給藥的LD5。=490mmol/kg,相同的實7驗測得目前常用的鉑類抗癌藥卡鉑注射給藥的LD5Q=350mmd/kg,.因此LLC-1401急性毒性明顯比卡鉬低。(6)發明的配合物LLC-1401的抗癌作用昆明種小鼠，？，22±lg，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司。合格證號:SCXK(滬)2007—0005。飼養環境SPF級。LLC-1401和陽性對照藥卡鉬用5%GS酉己製成所需濃度。小鼠皮下接禾中S180肉瘤細胞，接種次日開始給藥。給藥劑量及方案見表l。第8天處死小鼠，取瘤稱重，計算抑瘤率。抑瘤率K對照組瘤重-治療組瘤重y對照組瘤重xioo表1.LLC-1401，卡鈾對小鼠Sl柳肉瘤的療效tableseeoriginaldocumentpage8由此可知，本發明的化合物LLO1401對小鼠S180肉瘤生長有明顯的抑制作用，且呈現良好的量效關係，抑制率與目前常用的鉑類抗癌藥卡鉑相當。權利要求1.一種鉑(II)配合物，其特徵在於具有下列化學結構式A2＝2NH3，2.根據權禾腰求1所述的鉑(II)配合物，其特徵在於製成凍乾粉或注射液。3.根據權利要求1所述的鉑(II)配合物，其特徵是在製備臨床治療癌症藥物中的應用。全文摘要本發明涉及一種新型的水溶性鉑(II)抗癌配合物，它的離去基團為3-乙醯氧基-1，1-環丁烷二羧酸根(3-COO-CBDCA)，載體為已上市的鉑類抗腫瘤藥物的氨/胺配體，包括氨(NH3)、1R，2R-二氨基環己烷(DACH)、1，2-雙(氨甲基)-環丁烷、2-異丙基-(4R，5R)-4，5-雙(氨甲基)-1，3-二氧環戊烷。他們可以採用常規的鉑類抗癌藥物製備的方法合成。本發明配合物的抗癌活性與目前臨床上常使用的鉑類藥物卡鉑相當、毒副作用明顯比卡鉑小，可以製成凍乾粉或注射液，用於臨床治療癌症。文檔編號A61P35/00GK101386629SQ20081005898公開日2009年3月18日申請日期2008年9月27日優先權日2008年9月27日發明者堯餘,侯樹謙,劉偉平,葉青松,樓麗廣,諶喜珠申請人:昆明貴金屬研究所;中國科學院上海藥物研究所