B肝兩對半晶片檢測板和檢測陣列的製作方法
2023-06-04 06:22:36
專利名稱：B肝兩對半晶片檢測板和檢測陣列的製作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種檢測裝置，尤其涉及一種晶片檢測板，能同時對B肝兩對半 進行檢測。2個以上的晶片檢測板互相連接而成晶片檢測陣列，能同時用於多個病患進行檢 測。
背景技術：
乙型(病毒性)肝炎是由B型肝炎病毒(h印atitis B virus，HBV)引起的一種世界 性疾病。發展中國家發病率高，據統計，全世界無症狀B肝病毒攜帶者超過2. 8億。我國約 佔9300萬，大多數人無症狀，但其中的1/3會出現肝損害的臨床表現。目前通過三種途徑對B型肝炎進行診斷，如檢測病毒的抗原、檢測體內抗體以及 檢測病毒的DNA。臨床上，通常使用五種標識物進行判斷，如B肝表面抗原(h印atitis B surface antigen，HBsAg)、乙月幹^面㈱體(antibodies to hepatitis B surface antigen, HBsAb)、乙月幹 e 抗原(hepatitis B E antigen, HBeAg)、乙月幹 e 抗體(antibodies to the 'e' antigen, anti-Hbe/HBeAb)禾口乙月幹核心抗體(antibodies to the core antigen, anti-Hbc/HBcAb),又稱「兩對半」。在B肝的臨床診斷和治療過程中 ，需要將HBsAg、HBsAb、 HBeAg.HBeAb和HBcAb等五種標識物中的幾種相結合的方式來判斷B肝病情。若病人血清 中HBsAg、HBeAg和HBcAb三種標識物檢測均為陽性時，就可以確定該患者正受到B肝病毒 感染，且病毒正在活躍複製，病毒數量較多，傳染性也較強。若病人血清中HBsAg、HBeAb和 HBcAb三種標識物檢測均陽性時，表明B肝病情好轉，病毒複製數量減少。抗原或抗體的檢測屬於免疫學檢測技術，根據檢測標記物的不同，可以將檢測方 法分為酶聯免疫檢測、同位素免疫檢測、膠體金免疫檢測、螢光免疫檢測和化學發光免疫 檢測等，根據檢測方式不同，又可以分為免疫酶標板、免疫側向層析試紙和免疫滲濾等 方法。其中，酶聯免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)是目前用於 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb五種標識物體外檢測的常用方法(中國發明專利申請 200610030783. 3)。這些技術雖然操作簡便，檢測時間顯著縮短，但也只能在單次檢測中完成一種抗 原或抗體的檢測，不能適應於同時檢測多種抗原和抗體的需要。為了解決這一問題，中國實 用新型專利ZL01207812.3公開了一種免疫檢測板，能一次對多種抗原(或抗體)等致病因 素同時進行檢測分析。檢測板包括板體、微孔和微槽。微孔設置於板體上，各個微孔之間設 有微槽，微孔呈高密度分布。當沒有微槽時，板體上配有蓋，蓋與板體之間形成微隙的密閉 空間。微孔的排列為分組式，每組微孔的上平面低於板體的上平面而形成反應池。該種檢 測板與目前使用的48孔或96孔酶標板類似，檢測過程需要依賴專用設備。中國實用新型專利ZL01207857. 3公開了一種人類免疫缺陷病毒(HIV) 1+2型抗 體三條線快速檢測板，由上蓋板、底板和試紙條組成，試紙條置於上蓋和底板之間；在上蓋 上留有樣本加入孔和反應觀察孔，在底板上留有用於固定試紙條的檔牆。在試紙條的中間 位置，分別包被有HIV-1、HIV-2抗原和羊抗鼠IgG抗體。由此將感染HIV-I和HIV-2兩種類型的樣本區分開來。該檢測板與常規使用的膠體金免疫層析試紙類似，是在檢測區包被 有兩種抗原。限於層析紙長度和面積，若需要檢測更多種抗原，不論從抗原的分布間隔和包 被均存在難度。此外，層析法檢測中所需的樣本量也較大。中國實用新型專利ZL 200720005145. 6公開了一種內分泌激素四合一聯合檢測 板，包含基礎板和檢測試紙；基礎板包括板身和板蓋，板身內部設有4個與檢測試紙對應的 凹槽。4個檢測試紙組成均與膠體金免疫層析試紙條一致，從而實現對FSH、LH、孕酮、雌二 醇的同時檢測。該檢測板是對分別檢測FSH、LH、孕酮和雌二醇4種激素的膠體金免疫層析 試紙條的集合，當需要檢測更多種抗原，就需要增加試紙條數量，進而增加檢測板的體積和 加工難度，不便於實際使用。
實用新型內容本實用新型的目的在於提供一種B肝兩對半晶片檢測板，檢測板上集成多個固定 有抗原或抗體的檢測區，通過單次實驗即可完成B肝兩對半的體外檢測。抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質。抗原進入機體後，可刺激機體產 生抗體和引起細胞免疫。在免疫測定中，抗原是指能與抗體結合的物質。抗原的反應性取 決於抗原決定簇(antigenic determinant)，亦稱表位(印itope)。一個抗原分子可帶有不 同的決定簇。此外，還可以通過基因工程或化學連接的方式對表位進行拼接。抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。Ig分五類，即 IgG、IgA、IgM、IgD和IgE0與免疫測定有關的Ig主要為IgG和IgM0抗原或抗體的製備，可以通過多肽化學合成、原核微生物(如大腸桿菌)基因工程 菌表達後純化、真核微生物(如啤酒酵母、畢赤酵母和乳酸克魯韋酵母等)基因工程菌表達 後純化或由動物細胞(如中國倉鼠CH0、倉鼠BHK、鼠骨髓瘤細胞小鼠成纖維細胞、猴CVl細 胞和人淋巴細胞等)等進行表達並純化。本實用新型提供的一種B肝兩對半晶片檢測板，包括檢測板本體和1個以上檢測 單元，檢測板本體由親水性材質製成，設於檢測單元外周。檢測單元包括單元本體和5的整 數倍個檢測晶片，各個檢測晶片均固定有檢測膜和參考膜。疏水性材質是材質對水無親和力的特性。這類材質如但不僅限於，聚二甲基矽氧 烷(poly (dimethylsiloxane)，PDMS)，通常含有非極性分子，含有非極性分子的物質不溶於 水或溶解度極小，所構成的固體表面不易被水所潤溼。親水性材質是材質對水具有親和力的特性。這類材質如但不僅限於，聚苯乙烯， 通常含有極性分子或基團，含有極性分子的物質能溶於水，所構成的固體表面易被水所潤溼。本實用新型提供的檢測板，其上檢測單元的數量可以根據檢測的實際需要進行增 加。2個以上的檢測單元的排列方式，如但不僅限於，橫向排列、縱向排列或1個以上的檢 測單元為橫向排列，且同時有1個以上的檢測單元為縱向排列。一種多個檢測單元的排列方式，第一檢測單元的右側端與第二檢測單元的左側端 相連，第一檢測單元的左側端與第三檢測單元的右側端相連，第二檢測單元的右側端與第 四檢測單元的左側端相連，如此將多個檢測單元呈「一」字橫向排列。另一種多個檢測單元的排列方式，第一檢測單元的下側邊沿與第二檢測單元的上側邊沿相連，第二檢測單元的下側邊沿與第三檢測單元的上側邊沿相連，第三檢測單元的 下側邊沿與第四檢測單元的上側邊沿相連，如此將多個檢測單元呈「 1 」字縱向排列。 另一種多個檢測單元的排列方式，第一檢測單元的右側端與第二檢測單元的左側 端相連，第一檢測單元的下側邊沿與第三檢測單元的上側邊沿相連，第三檢測單元的右側 端與第四檢測單元的左側端相連，且第二檢測單元的下側邊沿與第四檢測單元的上側邊沿 相連，如此將1個以上的檢測單元為橫向排列，且同時有1個以上的檢測單元為縱向排列。檢測單元的單元本體由疏水性材質製成，設於由親水性材質製成的各個檢測晶片 外周。當待測樣品溶液加於親水性的檢測晶片後，待測分子能與檢測膜和參考膜上固定的 抗原或抗體相結合，在外周疏水性單元本體的作用下，樣品溶液不會任意擴散，在之後的清 洗和染色步驟中，也避免了洗液和染色液產生交叉影響。檢測單元內所含有的檢測晶片為5的整數倍，如但不僅限於，5、10、15、20、25、 30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85 和 90 等，整數為正整數，如但不僅限於，1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14和 15 等。本領域技術人員所熟知的，檢測膜通常稱為T線或T膜，其上結合有能與待測樣品 中特定抗原或抗體結合的分子。參考膜通常稱為C線或C膜，其上結合有能與標記抗體結 合的分子，以確認標記抗體能夠發揮顯色作用。2個以上本實用新型B肝兩對半晶片檢測板，通過互相連接而成晶片檢測陣列，芯 片檢測板的排列方式，如但不僅限於，橫向排列、縱向排列或1個以上的晶片檢測板為橫 向排列，且同時有1個以上的晶片檢測板為縱向排列。這樣就能同時對多個病患的血樣或 待測樣品進行檢測，簡化操作過程，提高檢測平行性和重複性。本實用新型晶片檢測陣列，2個以上的晶片檢測板之間通過連接件連接，使晶片檢 測板形成一個晶片檢測陣列。只要起到將兩個部件連接起來的連接部件(如連接杆、連接 棒、螺栓或榫卯結構等)或方式(如焊接、粘結或注塑成型等)均可適用於晶片檢測板之間 的連接。連接件還可以是一個平板，各個晶片檢測板固定或套設於平板上。連接件是將各 個晶片檢測板互相連接的作用，其特定方式或部件不得限定本實用新型。本實用新型優先 選擇活動連接件，如但不僅限於，榫卯結構、拉鏈、螺栓和內螺母、搭扣、雌雄扣、嚙合的齒 輪扣、楔扣和環楔扣(CN93237153. 1)等。活動連接能使晶片檢測陣列根據實際病人檢測的 需要進行增加或減少1個以上的晶片檢測板。本實用新型提及的「待測樣品」、「血樣」、「(上)樣」或「試樣」來自於「受試者」的 血液、分泌物、組織液、體外培養液或組織等。本實用新型提及的「病患」、「病人」和「受試者」指人、野生動物和家畜 (Livestock)。野生動物為自然狀態下未經人工馴化的動物。家畜是為了提供食物來源而 人工飼養的動物，如猴、狗、鼠、倉鼠、豬、兔、奶牛、水牛、公牛、綿羊、山羊、鵝和雞等。給予 診斷的「患者」優先選擇哺乳動物，尤其是人。本實用新型技術方案實現的有益效果本實用新型提供的B肝兩對半晶片檢測板，包括檢測板本體和1個以上檢測單 元，檢測板本體由親水性材質製成，並設於檢測單元外周。通過疏水性材質和親水性材質交 叉運用，使樣品溶液、洗液和染色液在操作過程中限於親水性的區域內，避免了液體擴散， 提高了檢測準確性。[0028]把2個以上的本實用新型提供的B肝兩對半晶片檢測板互相連接起來而形成芯 片檢測陣列，通過一次操作過程中就能完成多個試樣的同時檢測，提高了檢測的平行性和 重現性。各個晶片檢測板之間採用活動連接件後就能根據實際情況增加或減少1個以上的 晶片檢測板，實現對隨機出現的不同數量的病患檢測樣品及時檢測，大大方便臨床檢測操 作和對疾病的及時診斷，而有效提高了試劑的利用度。
圖1為本實用新型晶片檢測板一實施例的結構示意圖；圖2為本實用新型晶片檢測陣列一實施例的結構示意圖；圖3為本實用新型晶片檢測陣列另一實施例的結構示意圖；圖4為本實用新型晶片檢測陣列另一實施例的結構示意圖；圖5為本實用新型晶片檢測陣列另一實施例的結構示意圖。
具體實施方式
以下結合附圖詳細描述本實用新型的技術方案。本實用新型實施例僅用以說明本 實用新型的技術方案而非限制，儘管參照較佳實施例對本實用新型進行了詳細說明，本領 域的普通技術人員應當理解，可以對實用新型的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫 離本實用新型技術方案的精神和範圍，其均應涵蓋在本實用新型的權利要求範圍中。圖1為本實用新型B肝兩對半晶片檢測板一實施例的結構示意圖，如圖1所示，該 晶片檢測板，包括檢測板本體1和檢測單元2，檢測板本體1由親水性材質製成，圍於檢測單 元2外周。檢測單元2包括單元本體21和5個檢測晶片22，單元本體21由疏水性材質製成， 圍於由親水性材質製成的各個檢測晶片22外周。各個檢測晶片22均固定有檢測膜221和 參考膜222。當待測樣品溶液加於親水性的檢測晶片22後，待測分子能與檢測膜221和參 考膜222上固定的抗原或抗體相結合，在外周疏水性單元本體21的作用下，樣品溶液不會 任意擴散，在之後的清洗和染色步驟中，也避免了洗液和染色液產生交叉影響。採用5個檢測晶片22就能同時檢測B肝患者兩對半指標進行同時檢測，提高檢測 的準確性和平行性。圖2為本實用新型晶片檢測陣列一實施例的結構示意圖，如圖2所示，晶片檢測陣 列包括第一晶片檢測板Pl、第二晶片檢測板P2和第三晶片檢測板P3。晶片檢測板Pl包括 檢測板本體1和檢測單元2，檢測板本體1由親水性材質製成，圍於檢測單元2外周。晶片檢測板Pl的檢測單元2包括單元本體21和5個檢測晶片22，單元本體21由 疏水性材質製成，圍於由親水性材質製成的各個檢測晶片22外周。晶片檢測板Pl，P2, P3結構相同。第一晶片檢測板Pl的下側邊沿102與第二晶片檢測板P2的上側邊沿201相連， 第二晶片檢測板P2的下側邊沿202與第三晶片檢測板P3的上側邊沿301相連，從而形成 一個呈「 1，，字縱向排列的晶片檢測陣列。圖3為本實用新型晶片檢測陣列另一實施例的結構示意圖，如圖3所示，晶片檢測 陣列包括第一晶片檢測板Pl、第二晶片檢測板P2和第三晶片檢測板P3。晶片檢測板Pl包
6括檢測板本體1和檢測單元2，檢測板本體1由親水性材質製成，圍於檢測單元2外周。晶片檢測板Pl的檢測單元2包括單元本體21和5個檢測晶片22，單元本體21由 疏水性材質製成，圍於由親水性材質製成的各個檢測晶片22外周。晶片檢測板Pl，P2, P3結構相同。第一晶片檢測板Pl的右側端104與第二晶片檢測板P2的左側端203相連，第一芯 片檢測板Pl的左側端103與第三晶片檢測板P3的右側端304相連，從而形成一個呈「一」 字橫向排列的晶片檢測陣列。圖4為本實用新型晶片檢測陣列另一實施例的結構示意圖，如圖4所示，晶片檢測 陣列包括第一晶片檢測板P1、第二晶片檢測板P2、第三晶片檢測板P3和第四晶片檢測板 P4。晶片檢測板P2包括檢測板本體1和檢測單元2，檢測板本體1由親水性材質製成，圍於 檢測單元2外周。晶片檢測板P2的檢測單元2包括單元本體21和5個檢測晶片22，單元本體21由 疏水性材質製成，圍於由親水性材質製成的各個檢測晶片22外周。晶片檢測板Pl，P2, P3, P4結構相同。第一晶片檢測板Pl的右側端104與第二晶片檢測板P2的左側端203相連，第一 晶片檢測板Pl的下側邊沿102與第三晶片檢測板P3的上側邊沿301相連，第三晶片檢測 板P3的右側端304與第四晶片檢測板P4的左側端403相連，且第二晶片檢測板P2的下側 邊沿202與第四晶片檢測板P4的上側邊沿401相連。第一晶片檢測板Pl與第二晶片檢測 板P2，以及第三晶片檢測板P3和第四晶片檢測板P4為橫向排列；第一晶片檢測板Pl與第 三晶片檢測板P3，以及第二晶片檢測板P2和第四晶片檢測板P4為縱向排列。四個晶片檢 測板Pl，P2, P3, P4在橫向和縱向同時進行排列而成一個晶片檢測陣列。圖5為本實用新型晶片檢測陣列另一實施例的結構示意圖，如圖5所示，晶片檢測 陣列包括第一晶片檢測板P1、第二晶片檢測板P2、第三晶片檢測板P3和第四晶片檢測板 P4。晶片檢測板Pl包括檢測板本體1和檢測單元2，檢測板本體1由親水性材質製成，圍於 檢測單元2外周。晶片檢測板Pl的檢測單元2包括單元本體21和5個檢測晶片22，單元本體21由 疏水性材質製成，圍於由親水性材質製成的各個檢測晶片22外周。晶片檢測板Pl，P2, P3, P4結構相同。第一晶片檢測板Pl的右側端104與第二晶片檢測板P2的左側端203相連，第一 晶片檢測板Pl的左側端103與第三晶片檢測板P3的右側端304相連，第三晶片檢測板P3 的上側邊沿301與第四晶片檢測板P4的下側邊沿402相連。第一晶片檢測板Pl第二晶片 檢測板P2與第三晶片檢測板P3呈「一」字橫向排列，第三晶片檢測板P3和第四晶片檢測 板P4為縱向排列。四個晶片檢測板Pl，P2, P3, P4在橫向和縱向同時進行排列而成一個芯 片檢測陣列。
權利要求一種B肝兩對半晶片檢測板，其特徵在於包括檢測板本體和1個以上檢測單元，所述檢測板本體由親水性材質製成，設於所述檢測單元外周；所述檢測單元包括單元本體和5的整數倍個檢測晶片，所述各個檢測晶片均固定有檢測膜和參考膜。
2.根據權利要求1所述的B肝兩對半晶片檢測板，其特徵在於所述單元本體由疏水性 材質製成，設於由親水性材質製成的各個所述檢測晶片外周。
3.—種B肝兩對半晶片檢測陣列，由2個以上權利要求1或2所述的B肝兩對半晶片 檢測板連接而成。
4.根據權利要求3所述的B肝兩對半晶片檢測陣列，其特徵在於所述的B肝兩對半芯 片檢測板為橫向排列。
5.根據權利要求3所述的B肝兩對半晶片檢測陣列，其特徵在於所述的B肝兩對半芯 片檢測板為縱向排列。
6.根據權利要求3所述的B肝兩對半晶片檢測陣列，其特徵在於1個以上的所述B肝 兩對半晶片檢測板為橫向排列，且同時有1個以上的所述B肝兩對半晶片檢測板為縱向排 列。
7.根據權利要求3所述的B肝兩對半晶片檢測陣列，其特徵在於所述的連接為活動連接。專利摘要一種B肝兩對半晶片檢測板，包括檢測板本體和1個以上檢測單元，檢測板本體由親水性材質製成，並設於檢測單元外周。由疏水性材質製成的檢測單元的單元本體，設於由親水性材質製成的各個所述檢測晶片外周。通過疏水性材質和親水性材質交叉運用，使樣品溶液、洗液和染色液在操作過程中限於親水性的區域內，避免了液體擴散，提高了檢測準確性。把2個以上的本實用新型提供的B肝兩對半晶片檢測板互相連接起來而形成晶片檢測陣列，通過一次操作過程中就能完成多個試樣的同時檢測，提高了檢測的平行性和重現性。
文檔編號G01N33/576GK201732093SQ20102029531
公開日2011年2月2日 申請日期2010年8月18日 優先權日2010年8月18日
發明者崔大祥, 王賢松 申請人:上海交通大學;蘇州康立達納米生物工程有限公司