一種利用固定化酶製備梔子紅色素的方法
2023-06-04 07:07:41
專利名稱：一種利用固定化酶製備梔子紅色素的方法
技術領域：
本發明涉及一種利用固定化酶製備桅子紅色素的方法，尤其是以京尼平苷為原 料，通過鹼解、固定化酶酶解、酸沉澱富集，製備桅子紅色素的方法。
背景技術：
隨著食品工業的發展和人們生活水平的日益提高，食品色素作為食品添加劑中重 要的組成部分已經越來越受到人們的重視。桅子(Meirdenieijeisminoidem 1 s)在我國南方 廣泛分布，是一種已可人工栽培的觀賞藥用植物，具有豐富的資源。桅子紅色素是桅子的深 加工產品，安全性高，穩定性好，具有良好的開發應用前景。中華人民共和國發明專利ZL200610038494. 8公開了一種生產高純度桅子苷及高 色價桅子黃色素的提純方法，運用大孔吸附樹脂法、矽膠柱層析法工業化生產高純度桅子 苷及高色價桅子黃色素。
美國專利US4247698公開了桅子紅色素及其生產方法，利用化學或微生物或酶的 手段製備桅子紅色素。該專利採用游離的酶液水解京尼平苷，由於游離酶溶解於反應體系 中，使酶無法從反應體系中分離回收，導致桅子紅色素的生產成本高，不利於連續的工業化 生產；又由於游離酶也參與呈色反應，可能使製得的色素中雜質較多，顯色範圍加寬，色澤 不純。固定化酶技術是近十餘年發展起來的酶工程技術，經固定化後，酶的穩定性顯著 提高，且易從反應系統中分離回收，便於重複利用，在工業生產、化學分析和醫藥等方面得 到應用。目前，國內外對桅子紅色素的純化濃縮過程，均通過大孔樹脂吸附和柱層析純化， 再經濃縮實現，該技術有利於連續化工業化生產，但需要對柱填料進行解吸、再生，工藝復 雜，生產周期長，並且濃縮過程能耗高，導致生產成本增加，限制了桅子紅色素的開發與應用。本發明將固定化酶技術和酸沉澱富集法用於製備桅子紅色素，可降低生產成本， 並減少酶液對色素產品造成的雜質汙染，有利於提高產品質量。
發明內容
本發明的目的是提供一種以桅子提取黃色素副產的京尼平苷為原料，通過鹼解、 固定化酶酶解、酸沉澱富集，製備桅子紅色素的方法，可解決傳統工藝中酶液不易分離回 收，純化富集過程複雜，成本高，產品色價低的問題，並可提高資源利用率。本發明以京尼平苷為原料，通過鹼解、酸化、加入固定化酶進行酶解，過濾得酶解 液，然後加入伯氨基化合物反應，過濾得桅子紅色素溶液；桅子紅色素溶液通過酸沉澱，沉 澱洗滌中和、脫水、乾燥，即得到桅子紅色素。首先，在過量的鹼作為催化劑的條件下，通過鹼解反應使京尼平苷的側基脫去甲 氧基，改變原有的共軛體系，使其吸收波長發生紫移。同時，鹼解產物京尼平苷酸會與過量的鹼反應，轉變成相應的鹽，最終使京尼平苷完全水解，避免未水解的京尼平苷與伯氨基化 合物反應，影響最終產物的純度。鹼解結束後，用酸調節溶液PH至適宜酶解的範圍，然後利用固定化酶進行酶解， 脫去京尼平苷酸側基上的糖分子，生成京尼平酸，酶解結束後，回收固定化酶，實現酶的循 環利用，降低物耗。將酶解液與伯氨基化合物反應，過濾得到桅子紅色素反應液，利用酸沉澱使桅子 紅色素從反應液中沉澱出來，實現富集的目的；再經鹼中和溶解的方法，使桅子紅色素酸沉 澱物生成易溶於水的羧酸鹽，提高色素的水溶性和均勻性 ，得到水溶性的桅子紅色素。其具 體轉化過程如下 formula see original document page 5
其中，R基團與參加反應的伯氨基化合物相對應；Me為Na、K和NH4中的一種或幾種的 混合物。本發明一種利用固定化酶製備桅子紅色素的方法，具體步驟如下 (1) 固定化酶的製備高分子化合物載體加水配製成20g/L 80g/L濃度的溶液，在溫度為30°C 55°C條件 下，攪拌，使其溶解；然後加入與高分子化合物載體質量比為1 :1 1 :20的酶，攪拌均勻， 置於30°C 55°C的恆溫搖床上，50 200轉/分鐘下振蕩0. 5h 2h ；將上述混合液逐滴 滴入0. 2mol/L 3. Omol/L的氯化鈣溶液中，在3°C 5°C條件下靜置30min 150min，使 其凝聚固化，收集凝膠小球，並用0. 08mol/L 0. 3mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離 水分，收集得到的凝膠小球即為固定化酶； (2)桅子紅色素的製備
①原料以京尼平苷為原料；
②鹼解加入2 10倍京尼平苷質量(W/V)的0.5mol/L 5. Omol/L的鹼溶液，反應 溫度控制在20°C 90°C，反應時間為Ih 12h ；
③酸化鹼解結束後，用lmol/L 6mol/L的可食用酸溶液調節溶液至pH4.0 pH6. 0， 得到酸化液，
④酶解向步驟③得到的酸化液中加入步驟(1)製備的固定化酶進行酶解，固定化酶 與酸化液的質量比為1 :1 1 :50，酶解條件為40°C 70°C，pH4. 0 pH6. 0，酶解時間為 4h 20h ；
⑤過濾分離將步驟④酶解處理後的反應液過濾，得到濾液即為酶解液，同時回收固定 化酶；
⑥與伯氨基化合物反應向步驟⑤得到的酶解液中加入伯氨基化合物，伯氨基化合物 與酶解液的質量比為1 :5 1 :25，反應溫度為40°C 90°C，反應時間為2h 96h ；攪拌速 度為 10r/min 200r/min ；
⑦過濾將步驟⑥反應液過濾，得到桅子紅色素溶液；
⑧酸沉澱向步驟⑦所得的桅子紅色素溶液中加入酸溶液，調節溶液至PHl pH3，使 其沉澱，靜置Ih 24h後，收集沉澱物；
⑨洗滌、中和將步驟⑧得到的沉澱物用水洗滌至PH5 pH6，用0.05mol/L 5. Omol/ L的鹼溶液溶解沉澱物，並調節至pH7 pH9，得到桅子紅色素水溶液；
⑩乾燥、粉碎將步驟⑨得到的桅子紅色素水溶液進行脫水、乾燥處理，得到的乾燥粉 末即為所製備的桅子紅色素。其中步驟(1)所述的高分子化合物載體為海藻酸鈉，以及海藻酸鈉與明膠、變性澱 粉、果膠和環糊精中的一種或幾種的混合物；
步驟(2)所述的鹼解中的鹼溶液為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液、碳酸鈉溶液和碳酸氫 鈉溶液中的一種或幾種的混合物；
步驟(2)所述的酸化中的可食用酸溶液為檸檬酸溶液、酒石酸溶液、蘋果酸溶液、醋酸 溶液、碳酸溶液、乳酸溶液、磷酸溶液和已二酸溶液中的一種或幾種的混合物；
步驟(2)所述的與伯氨基化合物反應中的氨基化合物為胺基酸、蛋白質和氨基糖中的 一種或幾種的混合物；所述胺基酸包括甘氨酸、穀氨酸、苯丙氨酸、穀氨酸鈉等；所述蛋白 質包括牛血清蛋白、大豆蛋白、蛋白腖等；所述氨基糖類包括葡糖胺、半乳糖胺等。步驟(2)所述的酸沉澱中的酸溶液為鹽酸、硫酸、醋酸、檸檬酸、磷酸和乳酸中的一 種或幾種的混合物；
步驟(2)所述的洗滌、中和所用的鹼溶液為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液、碳酸鈉溶液、碳酸鉀溶液、碳酸氫鈉溶液、碳酸氫鉀溶液和碳酸氫銨溶液中的一種或幾種的混合物。上述用於酶解的酶為固定化酶，被固定的酶包括纖維素酶、果膠酶和β-葡糖苷 酶中的一種或幾種的混合物。固定化酶酶解過程為在反應器中進行的攪拌酶解，或是將固 定化酶裝入填充柱中，再將酸化液泵入填充柱進行的循環酶解。本發明方法製備的桅子紅色素，易溶於水、30%以下乙醇溶液及50%以下丙酮溶 劑；具備良好的熱穩定性，0°C 120°C環境下對色素無影響；色素在pH>3範圍內具有良好 的穩定性，氧化劑和還原劑對色素沒有不良影響，葡萄 糖和蔗糖溶液對色素沒有影響，各種 常見食品添加劑的使用基本不影響色素的品質，對金屬離子穩定。本發明方法製備的桅子紅色素可以用於紡織工業、塑膠工業和印刷業的著色；可 以作為食品著色劑用於糧食、肉製品、水產品等行業加工的著色，可用於配製酒、碳酸飲料、 果汁(味)型飲料、果醬、糖果、糕點等；可以用於醫藥品和化妝品等行業的加工著色。本發明同傳統方法相比較，具有以下優點
1、反應原料易得，價格低廉。生產工藝簡單，反應條件溫和，產物易分離，使整個反應過 程綠色環保、耗能低。2、利用固定化酶進行酶解，使酶的穩定性增加，易從反應系統中分離回收，可節省 資源，降低成本。3、本發明桅子紅色素的製備方法，通過酸沉澱和鹼性溶液溶解來實現對桅子紅色 素的純化富集，可降低能耗。採用本發明方法製備的桅子紅色素，其最大吸收波長為530nm，色價E53tJ5tlem高於 160，色素得率(以京尼平苷重量計)為65%以上。關鍵技術說明 1、固定化酶酶解技術
將高分子化合物載體以20g/L 80g/L的濃度加到水介質中，在溫度為30°C 55°C 條件下，攪拌，使其溶解。然後加入與高分子化合物載體質量比為1 :1 1 :20的酶，攪拌 均勻，置於30°C 55°C的恆溫搖床上，50r/min 200r/min下振蕩0. 5h 2h。再將該混 合液逐滴滴入0. 2mol/L 3. Omol/L的氯化鈣溶液中，在3°C 5°C條件下靜置30min 150min，使其凝聚固化，收集凝膠小球，並用0. 08mol/L 0. 3mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽 濾除去游離水分，收集得到的凝膠小球即為固定化酶。所用的高分子化合物載體包括海藻 酸鈉，以及海藻酸鈉與明膠、變性澱粉、果膠和環糊精中的一種或幾種的混合物。所述的酶 為固定化酶，被固定的酶包括纖維素酶、果膠酶和β 「葡糖苷酶中的一種或幾種的混合物。固定化酶酶解條件為40°C 70°C，pH4. 0 pH6. 0，酶解時間為4h 20h ；固定化 酶與酸化液的質量體積比為1 :1 1 :50 ；酶解過程為在反應器中進行的攪拌酶解，或是將 固定化酶裝入填充柱中，再將酸化液泵入填充柱進行的循環酶解。固定化酶重複利用20次 仍保持90%以上的酶解得率。2、酸沉澱法純化富集桅子紅色素
通過加酸調節PH至一定範圍，使桅子紅色素沉澱出來，然後通過用鹼溶液來處理沉澱 物，使桅子紅色素酸沉澱物生成易溶於水的羧酸鹽，增強色素的親水性，提高了色素的水溶 性和均勻性，從而實現了對色素的純化和濃縮過程。該方法純化桅子紅色素的回收率高於 95%。
圖1為本發明的工藝流程圖。
具體實施例方式下面通過實施例對本發明的技術進行進一步說明。實施例1
(1)固定化酶的製備
將30g的海藻酸鈉與20g明膠混合，加到IL水中，在40°C條件下，攪拌溶解，加入40g 的纖維素酶，攪拌混勻，在40°C恆溫搖床上，100r/min振蕩0. 5h，然後將該混合液逐滴注 入1. 5mol/L的氯化鈣溶液中，在4°C條件下 靜置60min，使其凝聚固化，收集凝膠小球，用 0. 2mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離水分，收集凝膠小球得到固定化酶。(2)桅子紅色素的製備
稱取0. 5Kg京尼平苷粉末溶於3L濃度為4mol/L的氫氧化鈉溶液中，在55°C的搖床上 反應8小時，反應結束後，用5mol/L的檸檬酸溶液調節反應液至pH4. 5，加入溼重為IOOg的 固定化纖維素酶，於50°C搖床酶解12小時後過濾，回收固定化酶，向酶解液中加入0. 3Kg的 穀氨酸，在50°C搖床反應48小時，過濾，得桅子紅色素反應液。用5mol/L的磷酸溶液調節 反應液至PH2. 7，放置2小時，過濾，收集沉澱，水洗沉澱至pH5，用0. lmol/L的碳酸鈉溶液 溶解沉澱物，並調節至PH8，經噴霧乾燥，即得桅子紅色素粉末。實施例2
(1)固定化酶的製備
將4g的海藻酸鈉溶液與2g的變性澱粉混合，加到IOOml水中，在40°C條件下，攪拌溶 解，加入2g的β -葡糖苷酶，攪拌混勻，在37°C恆溫搖床上，50r/min振蕩lh，然後將該混合 液逐滴注入2. Omol/L的氯化鈣溶液中，在4°C條件下靜置120min，使其凝聚固化，收集凝膠 小球，用0. 2mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離水分，收集凝膠小球得到固定化酶。(2)桅子紅色素的製備
稱取15g京尼平苷粉末溶於90ml濃度為3. 5mol/L的氫氧化鈉溶液中，在50°C的搖床 上反應12小時，反應結束後，用5mol/L的檸檬酸溶液調節反應液至pH4. 5，加入溼重為5g 的固定化β 「葡糖苷酶，於50°C搖床酶解8小時後過濾，回收固定化酶，向酶解液中加入8g 的穀氨酸鈉，在50°C搖床反應36小時，過濾，得桅子紅色素反應液。用5mol/L的檸檬酸溶 液調節反應液至PH2. 5，放置8小時，離心，收集沉澱，水洗沉澱至pH5，用0. lmol/L的氫氧 化鈉溶液溶解沉澱物，並調節至PH8，經噴霧乾燥，即得桅子紅色素粉末。實施例3
(1)固定化酶的製備
將IOOg海藻酸鈉加到8L水中，在38°C下攪拌溶解，加入50g的果膠酶，攪拌混勻，在 37°C恆溫搖床上，80r/min振蕩0. 6h，將該混合液逐滴注入2. 0mol/L的氯化鈣溶液中，在 3°C條件下靜置lOOmin，使其凝聚固化，收集凝膠小球，用0. 15mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽 濾除去游離水分，收集凝膠小球得到固定化酶。(2)桅子紅色素的製備
稱取IKg京尼平苷粉末溶於4L濃度為5mol/L的碳酸鈉溶液中，在60°C的搖床上反應12小時，反應結束後，用5mol/L的醋酸溶液調節反應液至pH4. 7，加入溼重為150g的固定化果膠酶，於50°C搖床酶解12小時後過濾，回收固定化酶，向酶解液中加入0. SKg的甘氨 酸，在50°C搖床反應48小時，過濾，得桅子紅色素反應液。用5mol/L的鹽酸溶液調節反應 液至pH2. 0，放置4小時，過濾，收集沉澱，水洗沉澱至pH5，用0. 3mol/L的碳酸鈉溶液溶解 沉澱物，並調節至PH8，經噴霧乾燥，即得桅子紅色素粉末。實施例4
(1)固定化酶的製備
將30g海藻酸鈉與20g環糊精加到IL水中，在37°C下攪拌溶解，加入30g β -葡糖苷 酶和IOg果膠酶，攪拌混勻，在37°C恆溫搖床上，120r/min振蕩0. 5h，將該混合液逐滴注 入1. Omol/L的氯化鈣溶液中，在5°C條件下靜置30min，使其凝聚固化，收集凝膠小球，用 0. 2mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離水分，收集凝膠小球得到固定化酶，將固定化酶 裝入玻璃柱中，製成固定化酶柱； (2)桅子紅色素的製備 在不鏽鋼反應器中，將IKg京尼平苷粉末溶於8L濃度為3mol/L的氫氧化鉀溶液中， 60°C的間歇攪拌反應12小時，反應結束後，用5mol/L的磷酸溶液調節反應液至pH4. 7，將 反應液泵入固定化酶柱進行酶解，酶解流出液回到不鏽鋼反應器中，如此循環反應，反應溫 度55°C，酶解時間8小時，酶解結束後，收集酶解液，向酶解液中加入0. 5Kg的半乳糖胺，在 55°C下間歇攪拌，反應30小時，過濾，得桅子紅色素反應液。用6mol/L的鹽酸溶液調節反 應液至pH2. 0，放置6小時，離心，收集沉澱，水洗沉澱至pH5，用0. 3mol/L的碳酸氫鈉溶液 溶解沉澱物，並調節至PH8，經噴霧乾燥，即得桅子紅色素粉末。實施例5
(1)固定化酶的製備
將30g海藻酸鈉和20g果膠加到IL水中，在45°C下攪拌溶解，加入IOg的纖維素酶 和IOgP-葡糖苷酶，攪拌混勻，在45°C恆溫搖床上，150r/min振蕩lh，將該混合液逐滴注 入2mol/L的氯化鈣溶液中，在4°C條件下靜置120min，使其凝聚固化，收集凝膠小球，用 0. lmol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離水分，收集凝膠小球得到固定化酶； (2)桅子紅色素的製備 稱取0. 5Kg京尼平苷粉末溶於IL濃度為5mol/L的氫氧化鈉溶液中，在60°C的搖床上 反應12小時，反應結束後，用5mol/L的酒石酸溶液調節反應液至pH4. 5，加入溼重為80g 的前述製備的固定化酶，於50°C搖床酶解12小時後過濾，回收固定化酶，向酶解液中加入 0. 5Kg的苯丙氨酸，在50°C搖床反應50小時，過濾，得桅子紅色素反應液。用6mol/L的硫 酸溶液調節反應液至PH2. 5，放置6小時，過濾，收集沉澱，水洗沉澱至pH5，用0. lmol/L的 碳酸氫鈉溶液溶解沉澱物，並調節至PH8，經噴霧乾燥，即得桅子紅色素粉末。實施例6
(1)固定化酶的製備
將15g海藻酸鈉和25g由變性澱粉、環糊精和明膠按任意比例混合所組成的混合物加 到IL水中，在50°C下攪拌溶解，加入IOg的纖維素酶、5g β-葡糖苷酶和IOg果膠酶，攪拌 混勻，在45°C恆溫搖床上，200r/min振蕩0. 6h，將該混合液逐滴注入1. Omol/L的氯化鈣溶 液中，在4°C條件下靜置30min，使其凝聚固化，收集凝膠小球，用0. 2mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離水分，收集凝膠小球得到固定化酶； (2)桅子紅色素的製備 在不鏽鋼反應器中，稱取0. 5Kg京尼平苷粉末溶於2L濃度為5mol/L的氫氧化鈉溶液 中，在60°C下反應8小時，連續攪拌，反應結束後，用4mol/L的已二酸溶 液調節反應液至 PH4. 0，加入溼重為50g的前述製備的固定化酶，於50°C下酶解12小時，連續攪拌，過濾，回 收固定化酶，向酶解液中加入0. 4Kg的牛血清蛋白，在50°C反應60小時，攪拌，反應結束後 過濾，得桅子紅色素反應液。用5mol/L的醋酸溶液調節反應液至pH2. 0，放置3小時，離心， 收集沉澱，水洗沉澱至PH5，用0. 2mol/L的碳酸鉀溶液溶解沉澱物，並調節至pH8，經噴霧幹 燥，即得桅子紅色素粉末。上述實施例1 6中，高分子化合物載體包括海藻酸鈉，以及海藻酸鈉與明膠、 變性澱粉、果膠和環糊精中的一種或幾種的混合物；被固定的酶包括纖維素酶、果膠酶和 3「葡糖苷酶中的一種或幾種的混合物；用於鹼解的鹼包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉和 碳酸氫鈉中的一種或幾種的混合物；用於酸化的可食用酸包括檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、醋 酸、碳酸、乳酸、磷酸和已二酸中的一種或幾種的混合物；酶解過程為在反應器中進行的攪 拌酶解，或是將固定化酶裝入填充柱中，再將酸化液泵入填充柱進行的循環酶解；參與反應 的伯氨基化合物包括胺基酸、蛋白質和氨基糖中的一種或幾種的混合物；用於富集桅子紅 色素的酸包括鹽酸、硫酸、醋酸、檸檬酸、磷酸和乳酸中的一種或幾種的混合物；用於中和並 溶解酸沉澱物的鹼包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀和碳酸氫 銨中的一種或幾種的混合物；其用量及固定化酶的循環使用次數應視具體情況來做適當的 調整。
權利要求
一種利用固定化酶製備梔子紅色素的方法，其特徵在於以京尼平苷為原料，通過鹼解、酸化、加入固定化酶進行酶解，過濾得酶解液，然後加入伯氨基化合物反應，過濾得梔子紅色素溶液；梔子紅色素溶液通過酸沉澱，沉澱洗滌中和、脫水、乾燥，即得到梔子紅色素。
2.根據權利要求1所述的利用固定化酶製備桅子紅色素的方法，其特徵在於所述方 法的具體步驟如下(1) 固定化酶的製備高分子化合物載體加水配製成20g/L 80g/L濃度的溶液，在溫度為30°C 55°C條 件下，攪拌，使其溶解；然後加入與高分子化合物載體質量比為1 :1 1 :20的酶，攪拌均 勻，置於30°C 55°C的恆溫搖床上，振蕩0. 5h 2h ；將上述混合液逐滴滴入0. 2mol/L 3. Omol/L的氯化鈣溶液中，在3°C 5°C條件下靜置30min 150min，使其凝聚固化，收集 凝膠小球，並用0. 08mol/L 0. 3mol/L的氯化鈉溶液洗滌，抽濾除去游離水分，收集得到的 凝膠小球即為固定化酶；(2)桅子紅色素的製備①原料以京尼平苷為原料；②鹼解加入2 10倍京尼平苷質量(W/V)的0.5mol/L 5. Omol/L的鹼溶液，反應 溫度控制在20°C 90°C，反應時間為lh 12h ；③酸化鹼解結束後，用lmol/L 6mol/L的可食用酸溶液調節溶液至pH4.0 pH6. 0， 得到酸化液，④酶解向步驟③得到的酸化液中加入步驟(1)製備的固定化酶進行酶解，固定化酶 與酸化液的質量比為1 :1 1 :50，酶解條件為40°C 70°C，pH4. 0 pH6. 0，酶解時間為 4h 20h ；⑤過濾分離將步驟④酶解處理後的反應液過濾，得到濾液即為酶解液，同時回收固定 化酶；⑥與伯氨基化合物反應向步驟⑤得到的酶解液中加入伯氨基化合物，伯氨基化合物 與酶解液的質量比為1 :5 1 :25，反應溫度為40°C 90°C，反應時間為2h 96h ；⑦過濾將步驟⑥反應液過濾，得到桅子紅色素溶液；⑧酸沉澱向步驟⑦所得的桅子紅色素溶液中加入酸溶液，調節溶液至PH1 pH3，使 其沉澱，靜置lh 24h後，收集沉澱物；⑨洗滌、中和將步驟⑧得到的沉澱物用水洗滌至PH5 pH6，用0.05mol/L 5. Omol/ L的鹼溶液溶解沉澱物，並調節至PH7 pH9，得到桅子紅色素水溶液；⑩乾燥、粉碎將步驟⑨得到的桅子紅色素水溶液進行脫水、乾燥處理，得到的乾燥粉 末即為所製備的桅子紅色素。
3.根據權利要求2所述的利用固定化酶製備桅子紅色素的方法，其特徵在於步驟(1) 所述的高分子化合物載體為海藻酸鈉，以及海藻酸鈉與明膠、變性澱粉、果膠和環糊精中的 一種或幾種的混合物；步驟(2)所述的鹼解中的鹼溶液為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液、碳酸鈉溶液和碳酸氫 鈉溶液中的一種或幾種的混合物；步驟(2)所述的酸化中的可食用酸溶液為檸檬酸溶液、酒石酸溶液、蘋果酸溶液、醋酸溶液、碳酸溶液、乳酸溶液、磷酸溶液和已二酸溶液中的一種或幾種的混合物；步驟(2)所述的與伯氨基化合物反應中的氨基化合物為胺基酸、蛋白質和氨基糖中的 一種或幾種的混合物；步驟(2)所述的酸沉澱中的酸溶液為鹽酸、硫酸、醋酸、檸檬酸、磷酸和乳酸中的一種或 幾種的混合物；步驟(2)所述的洗滌、中和所用的鹼溶液為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液、碳酸鈉溶液、 碳酸鉀溶液、碳酸氫鈉溶液、碳酸氫鉀溶液和碳酸氫銨溶液中的一種或幾種的混合物。
4.根據權利要求2所述的一種利用固定化酶製備桅子紅色素的方法，其特徵在於步 驟(1)所述的酶為纖維素酶、果膠酶和0 「葡糖苷酶中的一種或幾種的混合物。
5.根據權利要求2所述的一種利用固定化酶製備桅子紅色素的方法，其特徵在於步 驟(2)所述的酶解過程為在反應器中進行的攪拌酶解，或是將固定化酶裝入填充柱中，再將 酸化液泵入填充柱進行的循環酶解。
全文摘要
本發明提供了一種利用固定化酶製備梔子紅色素的方法，該方法以京尼平苷為原料，通過鹼解、酸化、加入固定化酶進行酶解，過濾得酶解液，然後加入伯氨基化合物反應，過濾得梔子紅色素溶液；梔子紅色素溶液通過酸沉澱，沉澱洗滌中和、脫水、乾燥，即得到梔子紅色素。本發明的優點在於酶製劑可循環利用，反應條件溫和，經酸沉澱法富集，工藝簡單、耗能低，產物易分離。經本方法製備的梔子紅色素，可明顯降低其生產成本。產品最大吸收為530nm，具有良好的水溶性，以及光、熱、酸、鹼和金屬離子穩定性，有利於拓寬梔子色素的應用範圍。
文檔編號C12N11/04GK101831469SQ20101018675
公開日2010年9月15日 申請日期2010年5月31日 優先權日2010年5月31日
發明者周慶新, 甘純璣, 謝苗 申請人:福建農林大學