一種高純度櫻黃素的製備方法
2023-06-04 11:13:06 2
專利名稱：一種高純度櫻黃素的製備方法
技術領域：
本發明屬於天然藥物化學領域，特別是涉及一種高純度櫻黃素的製備方法。
背景技術：
櫻黃素(Prunetin)為5，4' - 二羥基_7_甲氧基異黃酮，CAS號552-59-0，熔點 236-2380C (甲醇)，分子式C16H12O5,分子量284. 26，分子結構式櫻黃素為李屬異黃酮物質，具有抗炎、降血脂作用，同時還具有植物雌激素樣作用。如專利「一種含櫻黃素的藥物組合物及其在醫藥上的應用」和專利「一種含紅車軸草素、 櫻黃素的藥物組合物及其在醫藥上的應用」都實驗證實其藥理作用。從植物中提取櫻黃素工藝，很少有披露，多屬研究型工藝或低含量提取物。如房士明以昌都錦雞兒為原料，採用 95%乙醇浸泡提取，得到浸膏經矽膠柱反覆分離得到包括櫻黃素在內的15個化合物。還有馬強等以紅車軸草為原料50%乙醇回流提取，提取液濃縮後乙酸乙酯萃取，再經矽膠柱和凝膠柱反覆分離，得到包括櫻黃素在內的8個化合物。現有製備櫻黃素工藝，生產過程有大量的矽膠廢棄物產生，操作繁瑣，重現性差。因此提供一種製備高純度的櫻黃素是必要的， 可以更好地研究櫻黃素的藥理作用。
發明內容
本發明的目的在於提供一種櫻黃素的製備方法，採用高速逆流色譜法，可以快速高效得到高純度櫻黃素。為了實現上述目的，本發明採用如下技術方案1)以昌都錦雞兒為原料，粉碎，5-8倍量低碳醇超聲提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加入適量水分散，加入聚醯胺樹脂吸附，水、乙醇梯度洗脫，收集目標成分，減壓濃縮後用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得濃縮液；2)將氯仿、甲醇、酸性水溶液在分液漏鬥中充分混合，靜置分層後，取上相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉主機，泵入下相做流動相，平衡後，由進樣閥注進濃縮液，根據檢測器圖譜，收集組分，回收試劑，乾燥即得高純度櫻黃素。步驟1)中所述的低碳醇為70-90%的甲醇或乙醇溶液。步驟1)中所述的超聲提取次數為2-3次，每次30-40min。步驟1)中所述的水、乙醇梯度洗脫為水洗無糖色一5-7BV30-50%乙醇溶液洗脫 —4-5BV70-80%乙醇溶液洗脫。
步驟幻所述的酸性水溶液為pH2-3的磷酸水溶液。步驟2)所述的氯仿、甲醇、酸性水溶液混合比例為7-8 5-6 3。步驟2)述的主機轉速700-1000rpm，流動相流速l_3ml/min。本發明的優點是工藝採用聚醯胺樹脂和高速逆流色譜聯合製備櫻黃素，生產周期短、操作簡單、製備量大，收率高，而且生產過程減少了廢物的產生。
具體實施例方式下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。實施例1:取昌都錦雞兒粉碎，取10kg，投入超聲提取罐，加入8倍量90%乙醇超聲提取 40min,濾出液體，再加入6倍量80%乙醇溶液超聲提取30min，合併2次提取液減壓濃縮無醇，加適量水分散後，加入聚醯胺樹脂柱飽和吸附，水洗樹脂柱無糖色後，取7BV30%乙醇溶液洗脫棄去洗脫液，再用4BV80%乙醇溶液洗脫目的成分，洗脫液減壓濃縮後用等體積乙酸乙酯萃取3次，萃取液減壓濃縮，得濃縮液50ml。取氯仿、甲醇、磷酸水(pH2)溶液，按7 5 3比例在分液漏鬥中充分混合，靜置分層後，取上相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉主機，轉速調整為700rpm，以9ml/min泵入下相做流動相，平衡後，流速調整為3ml/min，由進樣閥注進濃縮液，根據檢測器圖譜，收集組分，回收試劑，乾燥得櫻黃素1. 3g，經HPLC檢測，含量98. 2%。實施例2 取昌都錦雞兒粉碎，取10kg，投入超聲提取罐，加入6倍量80%甲醇超聲提取 30min，提取3次，提取液減壓濃縮無醇，加適量水分散後，加入聚醯胺樹脂柱飽和吸附，水洗樹脂柱無糖色後，取5BV50%乙醇溶液洗脫棄去洗脫液，再用5BV70%乙醇溶液洗脫目的成分，洗脫液減壓濃縮後用等體積乙酸乙酯萃取4次，萃取液減壓濃縮，得濃縮液60ml。取氯仿、甲醇、磷酸水(pro)溶液，按8 6 3比例在分液漏鬥中充分混合，靜置分層後，取上相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉主機，轉速調整為800rpm，以6ml/min泵入下相做流動相，平衡後，流速調整為2ml/min，由進樣閥注進濃縮液，根據檢測器圖譜，收集組分，回收試劑，乾燥得櫻黃素1. Ig,經HPLC檢測，含量98. 5%。實施例3 取昌都錦雞兒粉碎，取10kg，投入超聲提取罐，加入5倍量70 %甲醇超聲提取 30min，提取3次，提取液減壓濃縮無醇，加適量水分散後，加入聚醯胺樹脂柱飽和吸附，水洗樹脂柱無糖色後，取5BV50%乙醇溶液洗脫棄去洗脫液，再用5BV75%乙醇溶液洗脫目的成分，洗脫液減壓濃縮後用等體積乙酸乙酯萃取3次，萃取液減壓濃縮，得濃縮液65ml。取氯仿、甲醇、磷酸水(pro)溶液，按8 5 3比例在分液漏鬥中充分混合，靜置分層後，取上相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉主機，轉速調整為lOOOrpm，以6ml/min 泵入下相做流動相，平衡後，流速調整為lml/min，由進樣閥注進濃縮液，根據檢測器圖譜， 收集組分，回收試劑，乾燥得櫻黃素1. 4g，經HPLC檢測，含量97. 7%。
權利要求
1.一種高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於包括以下步驟1)以昌都錦雞兒為原料，粉碎，5-8倍量低碳醇超聲提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加入適量水分散，加入聚醯胺樹脂吸附，水、乙醇梯度洗脫，收集目標成分，減壓濃縮後，用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得濃縮液；2)將氯仿、甲醇、酸性水溶液在分液漏鬥中充分混合，靜置分層後，取上相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉主機，泵入下相做流動相，平衡後，由進樣閥注進濃縮液，根據檢測器圖譜，收集組分，回收試劑，乾燥即得高純度櫻黃素。
2.根據權利要求1所述的高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於步驟1)中所述的低碳醇為70-90%的甲醇或乙醇溶液。
3.根據權利要求1所述的高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於步驟1)中所述的超聲提取次數為2-3次，每次30-40min。
4.根據權利要求1所述的高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於步驟1)中所述的水、 乙醇梯度洗脫為水洗至無糖色一5-7BV30-50%乙醇溶液洗脫一4-5BV70-80%乙醇溶液洗脫。
5.根據權利要求1所述的高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於步驟2)所述的酸性水溶液為PH2-3的磷酸水溶液。
6.根據權利要求1所述的高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於步驟幻所述的氯仿、 甲醇、酸性水溶液混合比例為7-8 5-6 3。
7.根據權利要求1所述的高純度櫻黃素的製備方法，其特徵在於步驟幻所述的主機轉速 700-1000rpm，流動相流速 l_3ml/min。
全文摘要
本發明屬於天然藥物化學領域，特別是涉及一種高純度櫻黃素的製備方法。方法步驟是1)以昌都錦雞兒為原料，粉碎，5-8倍量低碳醇超聲提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加入適量水分散，加入聚醯胺樹脂吸附，水、乙醇梯度洗脫，收集目標成分，減壓濃縮後，用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得濃縮液；2)將氯仿、甲醇、酸性水溶液在分液漏鬥中充分混合，靜置分層後，取上相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉主機，泵入下相做流動相，平衡後，由進樣閥注進濃縮液，根據檢測器圖譜，收集組分，回收試劑，乾燥即得高純度櫻黃素。本發明工藝易操作、生產周期短、收率高，適合工業化製備。
文檔編號C07D311/40GK102250049SQ20111015167
公開日2011年11月23日 申請日期2011年6月7日 優先權日2011年6月7日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司