抗纖溶酶劑的製作方法

2023-06-04 05:20:16

專利名稱：抗纖溶酶劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗纖溶酶劑。更具體地說，本發明涉及一種具有改善或防止由(例如)乾燥、清潔劑、以及各種類型的皮膚疾病所導致的皮膚粗糙和皸裂的功效的抗纖溶酶劑，所述的皮膚疾病諸如接觸性皮炎、銀屑病、尋常性天皰瘡和先天性皰疹，其中在患病部位觀察到了纖溶酶或纖溶酶原激活物活性的改變。
到目前為止已經公知各種類型的具有改善或治療皮膚疾病或皮膚粗糙的作用的治療劑、皮膚外用劑、化妝品等。這些常規的藥物和化妝品等含有具有抗炎活性或高度增加水分作用的胺基酸或多糖、脂質、提取物等作為有效組分，這是由於這些組分具有預防皮膚炎症或角質層中水分缺失的優良性能。然而，無論如何，它們改善或防止皮膚粗糙的作用並不充足，所以需要開發具有更優良醫療功效的抗纖溶酶劑。
另一方面，人們已經認識到表皮細胞內的蛋白酶在皮膚角化的正常過程中起著重要作用(Ogawa H.,Yoshiike T.；Int.J.Dermatol；23,1984)，並且近年來人們已經很清楚地了解到蛋白酶、諸如纖溶酶和纖溶酶原激活物(PA)活性上的改變在各類皮膚疾病損害的形成中是非常複雜的。例如，據報導在患病皮膚的角化不全部位存在較強的PA活性(Haustein；Arch.Klin.Exp.Dermatol；234,1969)且已經使用高濃度的鹽溶液從銀屑病的鱗屑中提取出了PA(Fraki.Hopsu-Havu；Arch.Dermatol.Res；256,1976)。纖溶酶原激活物是一種特別在纖溶酶原、纖溶酶前體上起作用並將它們轉化成活性形式纖溶酶的蛋白酶。此外，在尋常性天皰瘡中，表皮細胞中大量產生的纖溶酶原激活物將存在於細胞外的纖溶酶原轉化成纖溶酶。正如體外實驗清楚地表明的，這種纖溶酶消化細胞內的連接物質，由此將組織液儲存在細胞之間並形成表皮內小泡(Morioka S.；J.Invest.Dermatol；76,1981)。
根據上述情況，本發明者認為纖溶酶抑制劑可有效地改善各種皮膚疾病、皮膚粗糙、皮膚皸裂等並研究了各種物質的抗纖溶酶活性。結果是我們發現來自鹿蹄草科植物的提取物具有優良的抑制纖溶酶的活性。
因此，本發明的目的是解決現有技術中的上述難題並提供一種具有改善或防止皮膚粗糙和皸裂的優良功效的抗纖溶酶劑。
根據本發明，所提供的抗纖溶酶劑包括一種鹿蹄草科的植物或提取物作為一種有效成分。
就本發明者了解的情況來說，鹿蹄草科植物具有抗炎作用和防止或改善皮膚粗糙的作用(日本未審專利公開號(Kokai)3-190809)、對導致牙齦疾病的細菌的抗菌活性(日本未審專利公開號(Kokai)4-5222)、改善雀斑的作用(日本未審專利公開號(Kokai)4-279511)、睪酮5α-還原酶抑制活性(日本未審專利公開號(Kokai)5-17365)等並且可以作為外用藥劑、化妝品和口服組合物使用，而到目前為止還沒有對其抗纖溶酶活性的任何報導。
下面具體地解釋本發明的構思。
本發明所用的來源於鹿蹄草科的植物包括、例如日本鹿蹄草(Pyrolajaponica Klenze)、紅花鹿蹄草(Pyrola incarnata Fischer)、腎葉鹿蹄草(Pyrolarenifolica Maxim.)、圓葉鹿蹄草(Pyrola rotundifolia L.subsp.chinensis Andr.)。圓葉鹿蹄草主要在中國發現並且是與日本鹿蹄草不同的種，而公知日本鹿蹄草和紅花鹿蹄草的中國名稱是鹿蹄草(Luticao。在本發明中，從纖溶酶抑制活性強度或本國易獲得的觀點來看，特別優選使用的是它們中的日本鹿蹄草。
根據本發明，抗纖溶酶劑可以通過下列方法得到將日本鹿蹄草的整株植物、葉、花、或根的任意一部位進行乾燥、然後粉碎成粉末；或將它們與一種提取溶液一起浸泡或將它們進行加熱回流、然後過濾；而從可用性、配製方便等的觀點來看，優選使用一種提取物。
作為日本鹿蹄草植物的提取溶液，可以使用任意常規的溶劑用於提取。例如醇，諸如甲醇、乙醇；以及有機溶劑，諸如丙酮、乙酸乙酯；並且可以單獨使用水或任意它們的混合物。
此外，還能夠使用上述溶劑、隨後用(例如)分配法或色譜法將該提取物進行純化並使用所得的產物。
一般主要將本發明的抗纖溶酶劑與一種載體一起用作外用劑。作為組合物總重中的乾燥產物，在該組合物中所配製的日本鹿蹄草植物或其提取物的用量優選為0.005-20.0(重量)％，且更優選0.01-10.0(重量)％。如果該用量小於0.005(重量)％，那麼本發明的優良功效就不能充分顯示，而如果該用量大於20.0(重量)％，那麼將會很難配製。此外，即使配製的用量超過了10.0(重量)％，也看不到所預計的優良功效的進一步增加。本發明中可以使用任何常規的載體作載體。
除主要成分以外，本發明的抗纖溶酶劑可以任意含有通常用於皮膚外用劑、諸如化妝品、藥物的其它成分。這類可選擇的成分的實例是增白劑、溼潤劑、抗氧化劑、油類組分、紫外線吸收劑、表面活性劑、增稠劑、醇類、粉末組分、著色物質、含水組分、水、各種皮膚營養素等。
此外，能夠使用例如金屬螯合劑，諸如乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸三鈉、檸檬酸鈉、多磷酸鈉、偏磷酸鈉、葡糖酸、咖啡因、丹寧、維拉帕米、氨甲環酸、及其衍生物、光甘草定(glabridin)、各種草藥提取物；其它藥物，諸如乙酸生育酚酯、甘草酸、及其衍生物或鹽；增白劑，諸如維生素C、抗壞血酸磷酸鎂、抗壞血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸；糖類，諸如葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖。
當例如作為一種外用劑使用本發明的抗纖溶酶劑時，它可以是任意的常規劑型，諸如(例如)軟膏、霜劑、乳劑、洗劑、藥包、浴劑等和通常用於皮膚外用劑的其它劑型。對劑型本身沒有特別的限定。
實施例現在通過下面的實施例來進一步具體地解釋本發明，但絕不僅限於此。實施例中配方的用量以重量百分比為準。
首先將解釋本發明抗纖溶酶活性和日本鹿蹄草的皮膚改善作用的試驗方法和評價標準。1．纖溶酶抑制活性試驗(1)樣品的製備在室溫下，將50g(乾重)開花期的日本鹿蹄草整株植物浸入其體積5倍的50％乙醇中1周。然後將提取物濃縮至幹。將固體產物溶於二甲基亞碸(DMSO)而製備成一種3％的溶液。將該溶液用於下面的實驗。(2)纖溶酶抑制活性的測定通過血纖蛋白平板法測定抑制率％。即將6ml含有1.0％血纖蛋白原(去除了纖溶酶原)的佛羅那緩衝液(25mmol/L含有0.125mol/LNaOH的巴比妥鈉溶液，pH7.4)傾入9cmφ培養皿中。向其中加入0.2ml的1.0mol/LCaCl2和0.1ml的25U/ml凝血酶、緩緩攪拌並使之維持1小時。在37℃下，將以29∶1的比例混合的5U/ml纖溶酶和試驗物質的混合物維持10分鐘，然後將20μl的該混合物加到由血纖蛋白原轉化成血纖蛋白而形成的平板上。接著進一步使之在37℃下維持18小時。使用DMSO替代試驗樣品進行同樣的操作作為對照，然後測量血纖蛋白溶解所形成的溶解圈的面積。通過下面的數學公式(Ⅰ)來測定纖溶酶抑制比率抑制比率(％)={1-(試驗樣品溶解圈的面積)/(對照品溶解圈的面積)}×100 (Ⅰ)結果如表1中所示。
此外，黃柏是一種被認為是具有抗炎這種確定作用的植物並且已知它有抗粗糙皮膚的用途。如上所述對黃柏的乙醇提取物進行同樣的試驗來作為一個參照實施例。將結果一併列在表1中。表1(最終濃度)
正如從如表1中可以理解的，與黃柏提取物相比，日本鹿蹄草提取物具有更優良的纖溶酶抑制活性。2．實際應用試驗(剃刀刮傷(須瘡)的改善試驗和冬季預防皮膚粗糙的試驗)從改善須瘡和皮膚刺激和預防冬季中的皮膚粗糙的效果、通過下面的評價方法來評價在外部皮膚上應用本發明外用劑組合物的功效。
注意如表2中所示，作為樣品，將具有不同濃度的開花期中日本鹿蹄草整株植物的50％乙醇提取物的兩類洗劑用作本發明的產品，而已經公知含有黃柏的50％乙醇提取物的洗劑對粗糙皮膚具有作用，且將不含日本鹿蹄草提取物或黃柏提取物的洗劑用作對比產品。將結果一併列在表2中。(1)須瘡的改善將40位患須瘡的男性受試參與者分成4組、每組10人，在刮臉後立即施用表2中所列的本發明產品或對比產品，並且判斷對須瘡的功效。判斷標準和評價如下須瘡改善效果的判斷標準非常有效須瘡消失。有效須瘡減弱。有些療效須瘡有些減輕無效沒有觀察到須瘡有改變須瘡改善效果的評價極佳大於或等於80％比例的受試者表現出非常有效、有效、或有些療效(功效)。良好50％至小於80％比例的受試者表現出非常有效、有效、有些療效(功效)。一般30％至小於50％比例的受試者表現出非常有效、有效、有些療效(功效)。較差小於30％比例的受試者表現出非常有效、有效、有些療效(功效)。(2)皮膚刺激性當評價須瘡的改善比率時，判斷和評價本發明產品和對比產品的皮膚刺激性。評價標準如下皮膚刺激性的評價極佳在0％比例的受試者中覺察到皮膚上有燒灼感。良好在小於5％的受試者中覺察到皮膚刺激性。一般在小於10％的受試者中覺察到皮膚刺激性。較差大於或等於10％的受試者中覺察到皮膚刺激性。表2
正如從表2中清楚表明的，含有1.0(重量)％日本鹿蹄草提取物的本發明產品2的洗劑表現出與含有3.0(重量)％黃柏提取物的對比產品1的洗劑相同的功效，而含有3.0(重量)％日本鹿蹄草提取物的本發明產品1的洗劑表現出比對比產品1更優良的改善須瘡作用。此外，同時沒有觀察到皮膚刺激性。(3)對冬季皮膚粗糙的預防在秋季(十月)取特別是患有冬季皮膚粗糙的女性受試參與者的面部皮膚的複製品並在一種顯微鏡(17×)下觀察皮膚情況。將皮膚按照下面所列的判斷標準分級。選擇列為4或5等級的40位女性並將她們分成2組、每20人1組。在冬季(十二月)給20位女性每位的左右側面部一天兩次施用本發明產品1和對比產品1的洗劑或本發明產品2和對比產品2的洗劑4周，然後取皮膚的複製品並再次按照上述判斷標準對皮膚情況進行分級。觀察每一位參與者試驗前和試驗後皮膚等級的差異，並判斷冬季中預防皮膚粗糙的效果。結果如表3中所示。皮膚等級和判斷標準1觀察到在很廣泛的面積內皮溝和皮嵴以及脫屑現象消失。2不能清楚地觀察到皮溝和皮嵴以及脫屑現象。3觀察到皮溝和皮嵴，但較平坦。4皮溝和皮嵴較清楚。5整個範圍的皮溝和皮嵴均較清楚。表3
正如從表3中所理解的，與對比產品的洗劑相比，本發明產品的洗劑表現出預防冬季中認為是由乾燥等所導致的皮膚粗糙的優良功效。實施例1霜劑處方 摻合比例硬脂酸 5.0十八烷醇4.0肉豆蔻酸異丙酯 18.0單硬脂酸甘油酯 3.0丙二醇 10.0日本鹿蹄草的70％醇提取物0.05氫氧化鉀0.2氨甲環酸0.5亞硫酸氫鈉 0.01防腐劑 適量香料適量離子交換水 平衡製備方法將丙二醇、日本鹿蹄草乙醇提取物和氫氧化鉀加入到離子交換水中，然後將其加熱並保持在70℃(水相)。將其餘組分混合、加熱至熔化並保持在70℃(油相)。將油相逐漸加入水相。將全部用量加完後，使混合物維持在該溫度下一段時間以引發反應。此後，用均勻混合器將該混合物均勻乳化、然後在充分攪拌的同時冷卻至30℃。實施例2；霜劑處方摻合比例硬脂酸2.0十八烷醇 7.0氫化羊毛脂2.0角鯊烷5.02-辛基十二烷醇6.0聚氧乙烯(25mol)鯨蠟醇醚 3.0單硬脂酸甘油酯2.0丙二醇5.0日本鹿蹄草的甲醇提取物0.05氨甲環酸 0.2亞硫酸氫鈉0.03對羥基苯甲酸乙酯 0.3香料 適量離子交換水平衡製備方法將丙二醇加入到離子交換水中，然後將其加熱並保持在70℃(水相)。將其餘組分混合、加熱至熔化、並保持在70℃(油相)。將油相加入水相併將該混合物預乳化。然後用均勻混合器將該混合物均勻乳化，接著在充分攪拌的同時冷卻至30℃。實施例3霜劑處方摻合比例固體石蠟 5.0蜂蠟 10.0凡士林 15.0液體石蠟 41.0單硬脂酸甘油酯 2.0聚氧乙烯(20mol)脫水山梨醇單月桂酸酯 2.0粉狀皂 0.1N-甲基-反式-4-氨基甲基環己烷羧醯胺 1.0硼酸鈉 0.2日本鹿蹄草的70％甲醇提取物 0.1亞硫酸氫鈉 0.03對羥基苯甲酸乙酯 0.3香料 適量離子交換水 平衡製備方法將粉狀皂和硼酸鈉加入到離子交換水中，然後將其加熱並保持在70℃(水相)。將其餘組分混合、加熱至熔化並保持在70℃(油相)。將油相逐漸加入水相，同時攪拌進行反應。接下來用均勻混合器將該混合物均勻乳化、然後在充分攪拌的同時冷卻至30℃。實施例4乳劑處方 摻合比例硬脂酸 2.5鯨蠟醇 1.5凡士林 5.0液體石蠟 10.0聚氧乙烯(10mol)單油酸酯 2.0聚乙二醇1500 3.0三乙醇胺 1.0羧乙烯基聚合物(商品名卡波泊爾Carbopol941,B.F.Goodrich Chemical Co)0.05日本鹿蹄草的乙酸乙酯提取物 0.03亞硫酸氫鈉 0.01對羥基苯甲酸乙酯 0.3香料 適量離子交換水 平衡製備方法將羧乙烯基聚合物溶於少量的離子交換水中(A相)。將聚乙二醇1500和三乙醇胺加入到剩餘的離子交換水中，加熱至溶解並保持在70℃(水相)。將其它組分混合、加熱至熔化並保持在70℃(油相)。將油相加入水相併將該混合物預先乳化，然後加人A相併用均勻混合器將該混合物均勻乳化，乳化後將該乳劑在充分攪拌的同時冷卻至30℃。實施例5乳劑處方 摻合比例微晶蠟 1.0蜂蠟 2.0羊毛脂 20.0液體石蠟 10.0角鯊烷 5.0脫水山梨醇倍半油酸酯 4.0聚氧乙烯(20mol)脫水山梨醇單油酸酯1.0丙二醇 7.0日本鹿蹄草的30％丁醇提取物 2.0氨甲環酸 1.0亞硫酸氫鈉 0.01對羥基苯甲酸乙酯 0.3香料 適量離子交換水 平衡製備方法將丙二醇加入到離子交換水中且加熱並保持在70℃(水相)。將其餘組分混合、加熱至熔化、並保持在70℃(油相)。在攪拌的同時將油相逐漸加入水相。用均勻混合器將該混合物均勻乳化、然後在充分攪拌的同時冷卻至30℃。實施例6凝膠處方摻合比例95％乙醇 10.0二丙二醇 15.0聚氧乙烯(50mol)油醇醚 2.0羧乙烯基聚合物(商品名Carbopol940,B.F.Goodrich Chemical Co.)0.05氫氧化鈉 0.15L-精氨酸 0.1日本鹿蹄草的30％乙醇提取物1.0亞硫酸氫鈉0.01對羥基苯甲酸乙酯 0.3香料 適量離子交換水平衡製備方法將Carbopol940均勻地溶於離子交換水中。另一方面，將日本鹿蹄草提取物、聚氧乙烯(50mol)油醇醚溶於95％乙醇並加入水相。接下來加入其餘的組分，然後用氫氧化鈉和L-精氨酸將所得混合物中和並增稠。實施例7藥包處方 摻合比例(A相)二丙二醇 5.0聚氧乙烯(60mol)氫化蓖麻油5.0(B相)橄欖油 5.0乙酸生育酚酯 0.2對羥基苯甲酸乙酯 0.2香料 0.2(C相)亞硫酸氫鈉 0.03聚乙烯醇(皂化程度90，聚合度2000)13.0乙醇7.0日本鹿蹄草的50％1,3-丁二醇提取物1.0純水平衡製備方法將A相和B相均勻地溶解，然後將B相加入A相使之增溶。接下來向其中加入分散有日本鹿蹄草提取物的C相，然後填入所得產物。實施例8基質處方 摻合比例滑石 43.1高嶺土 15.0絲雲母 10.0氧化鋅 7.0二氧化鈦 3.8黃色氧化鐵 2.9黑色氧化鐵 0.2日本鹿蹄草的乾粉 0.05角鯊烷 8.0異硬脂酸 4.0單油酸POE脫水山梨醇3.0辛酸異鯨蠟酯 2.0防腐劑 適量香料 適量製備方法用一種粉磨機將充分乾燥的日本鹿蹄草的整株植物精細地粉碎並通過#30(500μm)篩。用一種摻合機將所得粉末和從滑石到黑氧化鐵的粉末組分充分混合，然後加入其它組分且將所得混合物充分捏合併將它們填入一種用於模塑的容器中。
正如上述所解釋的，根據本發明，能夠提供一種具有改善和防止健康人中伴有皮膚粗糙的各種皮膚疾病和皮膚粗糙、皸裂等優良功效的抗纖溶酶劑。
權利要求
1．一種抗纖溶酶劑，它含有一種屬於鹿蹄草科的植物或其提取物作為一種有效成分。
2．一種如權利要求1所述的抗纖溶酶劑，其中屬於鹿蹄草科植物或其提取物的配製用量為該組合物總重量的0.005-20.0重量％。
3．一種如權利要求1所述的抗纖溶酶劑，其中屬於鹿蹄草科的植物是至少一種選自下列植物組成的組的植物日本鹿蹄草、紅花鹿蹄草、腎葉鹿蹄草和圓葉鹿蹄草。
4．一種如權利要求1所述的抗纖溶酶劑，其中有效成分來源於至少一種屬於鹿蹄草科的植物的整株植物、葉、花或根的組成部分。
5．一種如權利要求4所述的抗纖溶酶劑，其中有效成分是通過對所述植物的至少一種組成部分進行乾燥且然後進行粉碎而獲得的粉末形式。
6．一種如權利要求4所述的抗纖溶酶劑，其中有效成分是用一種溶劑提取所述的至少一種植物的組成部分而獲得的一種提取物。
7．一種外用劑形式的如權利要求1所述的抗纖溶酶劑。
8．一種化妝品組合物或藥物組合物形式的如權利要求1所述的抗纖溶酶劑。
全文摘要
一種抗纖溶酶劑,在其載體中含有屬於鹿蹄草科的一種植物或其提取物,它具有改善或防止皮膚粗糙和皸裂的極佳功效。
文檔編號A61K8/97GK1232692SQ9910289
公開日1999年10月27日 申請日期1999年2月24日 優先權日1998年2月24日
發明者吉田雄三, 大田正弘 申請人:株式會社資生堂