用於控制釋放藥物活性成分的新型脂質體氣霧劑的製作方法

2023-06-12 00:01:06

專利名稱：：用於控制釋放藥物活性成分的新型脂質體氣霧劑的製作方法
技術領域：
：本發明涉及脂質囊泡，特別是涉及哮喘及其它病症的治療。
背景技術：
：哮喘是一種呼吸系統慢性疾病，其中氣道非連續地收縮，具有有關的炎症。這引起以下症狀諸如咳嗽，喘鳴，和呼吸淺促且胸悶。哮喘症狀，從輕微的乃至危及生命，通常可被支氣管擴張藥或其藥物組合控制。發達國家特別關注哮喘，原因在於它的流行性快速增加，影響高達四分之一的城市兒童。見LillyCM.Diversityofasthma:Evolvingconceptsofpathophysiologyandlessonsfromgenetics(哮喘的多樣性病理生理學的進化概念和來自遺傳學的教導)。/力/"gyC7/"/ww""o/(變態反應臨床免疫雜誌)。2005;115(4增刊):S526-31。動物模型已經證實A2B拮抗藥在呼吸炎症、纖維變性和氣道重建中的作用，參見D.Zeng&R.Polosa(2006)歐洲呼吸道疾病.2006;26-27。哮喘的原因在於特殊類型的天然殺手細胞。這意味著經常沒有用正確種類的藥物活性成分治療哮喘。例如，天然殺手T細胞似乎對於廣泛使用的吸入器中的皮質類固醇具有耐受性，見Cromie,WilliamJ.哈佛大學公報(HarvardUniversityGazette),哈佛新聞辦公室，2006-03-16，2006年9月23日檢索。糖皮質激素是最廣泛使用的具有預防哮喘的活性藥物成分，諸如環索奈德，倍氯米松，布地奈德，氟尼縮松，氟替卡松，莫米松，曲安西龍等。長期使用皮質類固醇具有許多副作用，特別是高劑量的類固醇可以引起骨質疏鬆症。當前長效的(3-腎上腺素受體激動劑，包括持續釋放的口服舒喘寧、sameterol、福莫特羅(formoterol)和班布特羅(bambuterol)是可用的。然而，美國食品和藥品管理局(FDA)在2005年11月發布健康報告；警告長效(3-2激動劑的使用可以導致症狀的惡化，甚至有時導致死亡。研究報告三種常見的含有藥物活性成分沙美特羅(salmeterol)或福莫特羅(formoterol)的哮喘吸入器在美國每年可以引起五分之四與哮喘相關的死亡，並且應該從市場取締，Ramanujan,Krishna(2006-06-09)。CornellChronicleOnline(康奈爾新聞在線)。CornellNewsService(康奈爾新聞服務)。2006年9月23日檢索。支氣管擴張藥被推薦用於短期緩解所有患者的哮喘症狀。對於持久性哮喘疾病，可用較高劑量的糖皮質激素可以用長效P-2激動劑，茶鹼，白細胞三烯調節劑，或肥大細胞穩定劑。喘鳴和氣短症狀的控制一般用快速作用的支氣管擴張藥來實現。藥物活性成分包括選擇性卩-2腎上腺素能受體激動劑，諸如沙丁胺醇(舒喘寧)，叔丁喘寧，左旋沙丁胺醇(levalbuterol)，和比託特羅。在較高的劑量下，某些藥物活性成分可能由於其(3-l激動活性可導致對心臟的副作用，諸如心率加快或血壓升高。隨著選擇性藥物的出現，這些副作用雖然已經變得不太常見，但患者還是必須謹慎避免頻繁地使用這些藥物，因為頻繁使用這些藥物可引起其功效下降，藥效靈敏性下降，使症狀惡化，最終可導致難治性哮喘和死亡。早期的、較低選擇性的腎上腺素能受體激動劑，諸如吸入的麻黃鹼和腎上腺素片劑也在使用中。這些藥物的心臟副作用發生的比率類似於舒喘寧，HenddesL，MarshikPL，等。Responsetononprescriptionepinephrineinhalerduringnocturnalasthma(在夜間哮喘期間對於非處方腎上腺素吸入器的響應)AnnAllergyasthmaImmunol(變態反應哮喘免疫學年報)；2005年12月；95(6):530-4，禾口RodrigoGJ，NanniniIJ.Comparisonbetweennebulizedadrenalineand卩-2agonistsforthetreatmentofacuteasthma.Ameta-analysisofrandomizedtrials(用於治療急性哮喘的霧化的腎上腺素和(3-2激動劑之間的比較.隨機試驗的元分析);AmJEmergMed.(美國急救醫學雜誌);2006年3月；24(2):217-22。它們經由注射的使用已經減少了，原因就在於相關的副作用。現在它們通常存貯於袖珍形的，可控劑量的吸入器或哮喘儲霧器(spacer)或噴霧器中。以適當的載體靶向傳遞藥物活性成分的嘗試經常是不成功的。製備用於吸入的藥物活性成分似乎是快速被吸收的，這使得需要頻繁給藥，同時也增加了全身的副作用。它還可以導致呼吸組織的黏膜損傷，所述損傷由經鼻或經口吸入給藥必需的氟烴推進劑、溶劑、或其它添加劑的反覆使用所引起。攜帶藥物活性成分的氣霧劑微滴在提供最大的治療益處時，應當避免多次給藥。它應當在呼吸系統中使藥物活性成分控制釋放，同時所述藥物活性成分應當長期連續釋放，用最小劑量的藥物活性成分使平滑肌上的卩-2激動劑維持在有效劑量上。開發用於這種治療的適當載體製劑，藥物活性成分治療哮喘時伴隨的副作用將會被減少。Bystrom，K.，Nilsson,R在美國RE38407(2001)中描述了通過肺部途徑遞送用脂質體包封鎮痛藥達到局部或全身鎮痛的疼痛處理效果。Waldrep,J.C.，Knight,V.，Black，M.B.在美國5958378(1999)中採用約130-375mg/ml的磷脂，用於脂質體氣霧劑遞送約12-30mg/ml的藥物活性成分，經由呼吸系統治療疾病。另外的脂質體治療實例還包括用於呼吸道流感(Edwards，D.A.，Stone,H.A.:美國20050220720Al(2005"，腫瘤(Jin,T.，Zarif,L.，Mannino,R.:美國2006153217(2000)}，局部呼吸道感染和囊性纖維變性(Hersch,E.M.，Petersen,E.A.，Proffitt,R.T.，Bracken,K.R.，Chiang,S-M.美國5958449(1999)}等。在Parmar，M.:美國20060051406A1(2006)中描述用Ca^或Zi^+等共螯合物(cochleate)處理含有脂質體的兩相聚合物溶液，以實現藥物的有效遞送。然而，脂質體囊泡既不易穩定儲存，也不便於大量生產，因為大部分脂質容易分解，並且所述脂質體囊泡是數百納米大小的，當分散在緩衝液中時其必須經歷布朗運動，這可以導致脂質體囊泡的聚集和藥物活性成分的滲漏。Bystrom，K.，Nilsson，P.，美國6045828(1996)描述了開發用於吸入的脂質和藥物活性成分的簡單混合的粉末，其能夠水化而形成脂質體。在該意義上，所述粉末是無水的。混有脂質粉末的製備方法採用具有低於37。C的相轉換溫度的磷脂。用於藥物活性成分的迅速吸收的磷脂粉末公開在Weers,J.G"Tarara,T.，Clark，A.:US20040105820Al(2004)和Mezei，M"Hung,O.:USRE38407(2004]中。Radhakrishnan，R.:US5049389(1991)公開了脂質顆粒劑型，其聲稱延長藥物活性成分的釋放，改善治療比率，降低毒性，減少全身副作用，和穩定達數月。所述劑型特別適於哮喘的治療。通過用脂肪酸酯修飾皮質類固醇而獲得的新類固醇衍生物被結合在脂質體的脂質部分中用於經由吸入的遞送，導致實驗動物呼吸道中延長的類固醇保留。在脂質體藥物活性成分粉末中，包封在脂質體中的藥物活性成分是均勻的，分散在載體中並且通過噴霧乾燥和/或冷凍乾燥轉變為乾粉。在吸入時，與脂質混合的藥物活性成分在呼吸系統中部分再水化和提供藥物活性成分的釋放。所謂的前體脂質體僅是藥物活性成分和脂質的混合物，因此它難以包封藥物並保持包封率，因為所述脂質體囊泡不僅可破裂或變形，並且所述藥物活性成分可以在乾燥和再水化過程期間從所述前體脂質體分離洩漏，而無論藥物活性成分本身是水溶性的或水不溶性的。當然，一旦包封在再水化的脂質體囊泡中，藥物活性成分必須等到細胞破壞所述囊泡時才得以釋放。從上面可以看到，對於使用脂質體或前體脂質體的藥物活性成分的劑型，仍然有許多問題未解決。這些問題涉及對於釋放速率進行適當控制的需要。發明目的本發明的主要目的是提供脫水的脂質嚢泡組合物，其中所述藥物活性成分可以成功包封在脂質體囊泡之內而在乾燥和再水化過程期間不會破裂或變形，具有粒度可控制性和長期穩定性，所述脂質囊泡有效控制藥物活性成分的效能。該組合物的一個相關目的是採用低劑量的藥物活性成分降低藥物毒性和全身性副作用並且整體提供所需的治療效果。發明概述本發明涉及一種適用於哮喘治療的新型脫水脂質囊泡製劑。特別是，所述組合物經由小粒徑的氣霧劑顆粒，使沉積在呼吸系統中的藥物活性成分有效控制釋放，並且特別用於製備小氣霧劑顆粒的吸入的和霧化的吸入的藥物活性成分。本發明的第一方面是提供可通過噴霧器或吸入器將各種藥物活性成分遞送到呼吸系統組織中的脫水脂質囊泡的製劑處方。所述脫水脂質囊泡形成具有均勻和可控制的粒度，可以使藥物活性成分被截留或包封，並且適合於將藥物活性成分遞送至呼吸系統。本發明的第二方面是提供對適用於吸入的水溶性和水不溶性藥物活性成分具有較高包封率的脫水脂質囊泡處方，其具有更低的毒性和副作用，可靶向到呼吸系統組織並且在呼吸系統組織中釋放藥物活性成分，不需要多次給藥，並且以乾燥形式提供長期而充分穩定的儲存。本發明的第三方面是所述脫水脂質囊泡藥物活性成分組合物的藥物活性成分在呼吸系統中的控制釋放，提供製備吸入給藥且控制藥物活性成分釋放的脫水脂質囊泡組合物的方法；提供通過施用所述霧化的或/和吸入的脫水脂質體囊泡藥物活性成分組合物來治療哮喘的方法。附圖簡述圖1脫水舒喘寧脫水脂質囊泡的TEM(透射電子顯微鏡)照片。圖2舒喘寧從脫水脂質囊泡到緩衝液中的釋放圖。發明詳述根據本發明發現，當脂質體製備成含有穩定劑和/或增塑劑、諸如甘油時，舒喘寧及其它藥物活性成分可以成功保留在脫水脂質囊泡中，用於在呼吸系統組織中控制釋放。所述穩定劑和/或增塑劑作為囊泡保護劑其作用，在冷凍乾燥或噴霧乾燥的乾燥過程期間保持脂質體囊泡的形狀，並且成為防止藥物活性成分從脂質體囊泡滲漏的屏障。為了設計具有較高藥物活性成分載藥量以及能控制釋放的最佳製劑，開發研究了許多不同的劑型，並且將所述許多不同的劑型與包含本發明組分的組合物以多種量和比例進行比較，以及與由全部種類的脂質或它們的混合物諸如卵磷脂、大豆磷脂、和合成的磷脂衍生物製備的常規脂質體進行比較。在一個優選形式中，本發明提供通過吸入到呼吸系統中來治療哮喘的藥物脂質組合物，所述組合物包含藥用囊泡保護劑、藥用脂質組分和藥物活性成分的脫水脂質囊泡。所述囊泡保護劑選自穩定劑和增塑劑。增塑劑是用於描述藥物賦形劑功能的術語，但是各種不同的增塑劑沒有共同的物理化學特性和化學結構。如在化學工業中通常認為，增塑劑是加入後可以給予柔性、可加工性、或伸展性的化學品。最頻繁使用的是甘油，山梨糖醇，丙二醇，蔗糖和阿拉伯膠也經常使用。本發明人通過參考結合在下列文獻中的有關公開內容MichaelEAulton，(1988),Pharmaceutics:ThescienceofDosageDormDesign;internationalstudentedition(製藥學劑量形式設計；國際學生版)(1996),324頁，MedicalDivisionofPearsonProfessionalLtd(皮爾遜專業公司醫療部，ChurchillLivingstone,紐約，]。將乳糖，阿拉伯膠等用作藥物科學中的穩定劑或穩定試劑。對於其它的增塑劑和穩定劑，本發明人通過參考結合下列文獻中的有關公開內容RaymondCRowe，PaulJSheskey，和SianCOwen，(2006),HandbookofpharmaceuticalExcipients(藥物賦形劑手冊)，第5版，藥物出版社，PublicationsdivisionoftheRoyalpharmaceuticalSocietyofGreatBritain,theAmericanPharmacistsAssociation,USA(英國皇家藥物學會出版部；和美國藥師聯合會，美國).，以及日本醫藥品添加劑協會(2005)醫藥品添加物事典，藥事日報社，東京，日本。所述穩定劑和/或增塑劑可在製備所述脂質囊泡以前和/或以後添加。適合的候選載體保護劑是己二酸及其衍生物或鹽，抗壞血酸及其衍生物或鹽，天冬氨酸及其衍生物或鹽，乙醯色氨酸及其衍生物或鹽，iV-乙醯苯胺及其衍生物或鹽，氨基乙基磺酸及其衍生物或鹽，丙氨酸及其衍生物或鹽，阿拉伯膠，亞硫酸氫鈉，亞硫酸鈉，精氨酸及其衍生物或鹽，海藻酸及其衍生物或鹽，苯甲酸及其衍生物或鹽，異硬脂酸及其衍生物或鹽，肌醇及其衍生物或鹽，1，2-乙二胺及其衍生物或鹽，異抗壞血酸及其衍生物或鹽，賴氨酸及其衍生物或鹽，可可脂，蓖麻蠟，黃原膠，木糖醇，檸檬酸及其衍生物或鹽，甘氨酸及其衍生物或鹽，甘油及其衍生物，葡糖酸及其衍生物或鹽，穀氨酸及其衍生物或鹽，肌酸酐，二異丙醇胺及其衍生物，二乙醇胺及其衍生物，環糊精，胱氨酸，半胱氨酸，二丁基羥基甲苯，酒石酸及其衍生物或鹽，脂肪酸蔗糖酯，硬脂酸及其衍生物或鹽，明膠，羊毛脂，鯨蠟醇，明膠，水解明膠，蟲膠，D-山梨糖醇，失水山梨醇脂肪酸酯，山梨酸(sorbicaacid)及其衍生物或鹽，巰基乙酸及其衍生物或鹽，硫氰酸鉀，硫代蘋果酸鈉，麝香草酚，中鏈脂肪酸甘油三酯，葡聚糖，糊精，維生素E，D-葡萄糖二酸鈣，生育酚及其同分異構體，氨丁三醇，煙醯胺，乳酸及其衍生物或鹽，乳糖，脲，棉白糖，組氨酸及其衍生物或鹽，羥丙基纖維素，氫醌(hyroquinone)，苯丙氨酸，非那西丁，葡萄糖，延胡索酸及其衍生物或鹽，丙二醇，肝素鈉，聚維酮(povidone)，順丁烯二酸及其衍生物或鹽，丙二酸及其衍生物或鹽，甘露糖醇，甲硫氨酸，十二烷基硫酸鈉，蘋果酸及其衍生物或鹽，氫化油，芝麻油，山梨醇83(karion83)，二亞乙基三胺五乙酸及其衍生物或鹽，琥珀酸二辛酯磺酸鈉，聚二甲基矽氧烷-矽氧烷二氧化物混合物，失水山梨醇脂肪酸酯，甘油三乙酸酯，蓖麻油，鄰苯二甲酸二乙酯/二丁酯，丁基鄰苯二甲醯基甘醇酸丁酸酯，丙二醇(1，2-丙二醇)，脂肪酸丙二醇酯，聚山梨醇酯，聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇，聚乙二醇，十四烷酸異丙酯，棉籽油-豆油混合物，單硬脂酸甘油酯，亞油酸異丙酯，凡士林等。這些穩定劑和/或增塑劑可以作為混合物使用。類似於甘油的優選候選物包括2-吡咯烷酮，檸檬酸乙醯三丁酯，檸檬酸乙醯三乙酯，苯甲酸苄酯，丁基鄰苯二甲醯基甘醇酸丁酸酯醋酞纖維素的相似相容物，氯丁醇，棉籽油-大豆油混合物，糊精，鄰苯二甲酸二丁酯，癸二酸二丁酯，鄰苯二甲酸二乙酯，鄰苯二甲酸二甲酯，己二酸二辛酯，鄰苯二甲酸二辛酯，D-山梨糖醇，明膠，甘油，甘油的衍生物，單硬脂酸甘油酯，鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素的相似相容物頁亞油酸異丙酯，十四烷酸異丙酯，山梨醇83(karion83)聚乙二醇，甘露糖醇，礦物油和羊毛脂醇，棕櫚酸植物甾醇聚乙二醇，聚甲基丙烯酸酯的相似相容物，聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇，聚山梨醇酯，聚醋酸乙烯鄰苯二甲酸酯丙二醇，芝麻油，山梨醇硬脂酸及其衍生物或鹽，甘油三乙酸酯，檸檬酸三丁酯三乙醇胺檸檬酸三乙酯及其混合物。類似於乳糖的優選候選物選自以下列表:阿拉伯膠，,乙醯苯胺及其衍生物或鹽，乙醯色氨酸及其衍生物或鹽，己二酸瓊脂丙氨酸及其衍生物或鹽，白蛋白海藻酸及其衍生物或鹽，精氨酸(alginine)鹽酸鹽氫氧化鋁凝膠硬脂酸鋁磺酸氨基乙酯及其衍生物或鹽，精氨酸及其衍生物或鹽，抗壞血酸及其衍生物或鹽，抗壞血酸棕櫚酸酯天冬氨酸及其衍生物或鹽，膨潤土苯扎氯銨氯化節乙氧銨苯甲酸及其衍生物或鹽，丁基化羥基甲苯可可脂，D-葡萄糖二酸鈣，脲，卡巴克絡鈉磺酸鹽羧甲基纖維素及其鹽羧基乙烯基聚合物羧甲纖維素鈣羧甲纖維素鈉角叉菜膠酪蛋白蛋白腖蓖麻油，蓖麻蠟，醋酞纖維素的相似相容物，長角豆屬(ceratonia)鯨臘醇，氯丁醇，檸檬酸及其衍生物或鹽，膠態二氧化矽棉籽油-大豆油混合物，肌酸酐，環糊精，半胱氨酸及其衍生物或鹽，胱氨酸，葡聚糖，糊精，鄰苯二甲酸二丁酯，癸二酸二丁酯，二丁基羥基甲苯，二乙醇胺及其衍生物，鄰苯二甲酸二乙酯，鄰苯二甲酸二乙酯/鄰苯二甲酸二丁酯，丁基鄰苯二甲醯基甘醇酸丁酸酯，二亞乙基三胺五乙酸及其衍生物或鹽，二異丙醇胺及其衍生物，鄰苯二甲酸二甲酯，己二酸二辛酯，琥珀酸二辛酯磺酸鈉，甘草酸二鈉D-山梨糖醇，乙二胺四乙酸鹽異抗壞血酸及其衍生物或鹽，乙基纖維素乙二醇棕櫚酸硬脂酸酯(ethyleneglycolpalmitostearate)1,2-乙二胺及其衍生物或鹽，延胡索酸及其衍生物或鹽，果糖明膠，葡糖酸的衍生物或鹽，穀氨酸的衍生物或鹽，甘油及其衍生物諸如甘油單硬脂酸酯，單硬脂酸甘油酯，甘氨酸及其衍生物或鹽，瓜爾膠肝素鈉，組氨酸及其衍生物或鹽，水化二氧化矽氫化油，水解明膠，羥丙基纖維素，羥丙甲纖維素(Hypromellose)氫醌，肌醇及其衍生物或鹽，轉化糖亞油酸異丙酯，十四烷酸異丙酯，異硬脂酸及其衍生物或鹽，山梨醇(karion)83，乳酸及其衍生物或鹽，乳糖，羊毛脂，卵磷脂賴氨酸及其衍生物或鹽，聚乙二醇，矽酸鋁鎂順丁烯二酸及其衍生物或鹽，蘋果酸及其衍生物或鹽，丙二酸及其衍生物或鹽，甘露糖醇，中鏈脂肪酸甘油三酯，甲硫氨酸，微晶纖維素及其衍生物礦物油和羊毛脂醇單乙醇胺煙醯胺，果膠凡士林，非那西丁，苯丙氨酸，聚克立林鉀聚二甲基矽氧垸-矽氧烷二氧化物混合物，聚氧乙烯聚氧丙烯二醇，聚山梨醇酯，聚乙烯醇氯化鉀硫氰酸鉀，聚維酮(povidone)，1,2-亞丙基掊酸酯丙二醇(l,2-丙二醇)，丙二醇海藻酸酯，脂肪酸丙二醇酯，丙二醇，棉子糖芝麻油，荊芥穗蟲膠，矽酸乙酸鈉，海藻酸鈉，亞硫酸氫鈉，硼酸鈉，碳酸鈉辛酸鈉氯化鈉，十二烷基硫酸鈉，硬脂醯延胡索酸鈉，亞硫酸鈉，硫代蘋果酸鈉，山梨酸及其衍生物或鹽，失水山梨醇脂肪酸酯，山梨糖醇硬脂酸及其衍生物或鹽，明膠，硬脂醇脂肪酸蔗糖酯，磺基丁基醚(3-環糊精硫酒石酸及其衍生物或鹽，巰基乙酸及其衍生物或鹽，百裡酚，生育酚及其同分異構體，海藻糖，甘油三乙酸酯，氨丁三醇，維生素E，棉白糖，白蠟，黃原膠，木糖醇，乙酸鋅氯化鋅及其混合物。穩定劑和/或增塑劑與所述脂質的的合適摩爾比例是0.1%至40%的穩定劑和/或增塑劑；99.9%至60%的所述脂質。增塑劑與所述脂質的優選比例是1:5至1:50，諸如約1:10。藥物活性成分通常包括麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，偽麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，舒喘寧，茶鹼，硫酸沙丁胺醇，沙甲胺醇，叔丁喘寧，奧西那林，非諾特羅，鹽酸氯丙那林，甘草酸氯丙那林，妥洛特羅，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑鹽酸鹽，克侖特羅鹽酸鹽，丙卡特羅，沙美特羅，海索那林，馬布特羅，福莫特羅，甲氧那明，曲託喹酚，利米特羅，比託特羅，普羅託醇，瑞普特羅，吡布特羅，芬司匹利，異丙阿託品，異丙東莨菪鹼，氨茶鹼，二羥丙茶鹼，膽茶鹼，色甘酸鈉，酮替芬，曲普利啶，曲尼司特，氯化銨，碘化鉀，乙醯半胱氨酸，溴己新鹽酸鹽，羧甲司坦，氨溴索鹽酸鹽，愈創甘油醚，可待因，可待因磷酸鹽，福爾可定，羥蒂巴酚，噴託維林檸檬酸鹽，氯呱斯汀，磷酸苯丙呱林，美沙芬氫溴酸鹽，奧昔拉定，依普拉酮，齊培丙醇，脫氧異丙嗪鹽酸鹽，福米諾苯，普羅嗎酯，替培啶，苯佐那酯，普諾地嗪，noscactive藥物成分，倍氯米松，倍他米松，布地奈德，氯潑尼醇，可的松，可的伐唑，脫氧皮質酮，地奈德，地塞米松，二氟可龍，氟可龍，氟可的松，氟米松，氟尼縮松，氟輕鬆，醋酸氟輕鬆，氟可託龍，醛甾酮，氟米龍，氟氫縮松，哈西奈德，氫化可的松，甲潑尼松，甲潑尼龍，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松，曲安西龍，硫酸奧西那林，異丙腎上腺素，腎上腺素，去甲腎上腺素，氟米松，甲羥松，氟替卡松，阿託品硝酸甲酯，異丙託溴銨，色甘酸鈉，奈多羅米以及它們各自的藥用鹽或酯的一種或其中的幾種。作為治療呼吸系統病症的藥物活性成分，例如，舒喘寧，特布他林(terbutalin)等是用於哮喘的藥物。本發明人通過參考結合下列文獻中的公開內容BertramG.Katzung，(2001),BasicClinicalPharmacology(基礎臨床藥理學)，第8版，醫療出版部，McGraw-Hill公司，美國。藥物活性成分與所述脂質組分的摩爾比通常是0.1%至200%。優選的組合物中，舒喘寧在脫水脂質囊泡組合物中的濃度是0.1至300mg/ml。所述優選的組合物是可以霧化成空氣動力學直徑--重量平均徑(massmedianaerodynamicdiameter)小於10jjm的顆粒。本發明提供一種治療哮喘的方法，所述方法通過吸入途徑將有效治療量的脂質組合物用於需要治療的患者，所述脂質組合物基本上由下列所組成藥物活性成分，選自增塑劑、穩定劑及其混合物的囊泡保護劑，和脂質組分，其被霧化成具有空氣動力學直徑-重量平均徑小於10iim的氣霧劑顆粒，並且在呼吸系統中使藥物活性成分的緩慢或控制釋放。在所述方法中，藥物穩定劑和/或增塑劑脂質組合物形成脫水脂質囊泡，所述脫水脂質囊泡優選包含摩爾百分比為0.1%至40%的穩定劑和/或增塑劑，99.9%至60%的脂質，並且藥物活性成分相對於所述脂質的摩爾百分比是0.01%至200%。對於所述方法，所述藥物活性成分可以包括麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，偽麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，舒喘寧，茶鹼，硫酸沙丁胺醇，沙甲胺醇，叔丁喘寧，奧西那林，非諾特羅，鹽酸氯丙那林，甘草酸氯丙那林，妥洛特羅，5-(4-氨基-3，5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑，5-(4-氨基-3，5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑鹽酸鹽，克侖特羅鹽酸鹽，丙卡特羅，沙美特羅，海索那林，馬布特羅，福莫特羅，甲氧那明，曲託喹酚，利米特羅，比託特羅，普羅託醇，瑞普特羅，吡布特羅，芬司匹利，異丙阿託品，異丙東莨菪鹼，氨茶鹼，二羥丙茶鹼，膽茶鹼，色甘酸鈉，酮替芬，曲普利啶，曲尼司特，氯化銨，碘化鉀，乙醯半胱氨酸，溴己新鹽酸鹽，羧甲司坦，氨溴索鹽酸鹽，愈創甘油醚，可待因，可待因磷酸鹽，福爾可定，羥蒂巴酚，噴託維林檸檬酸鹽，氯呱斯汀，磷酸苯丙呱林，美沙芬氫溴酸鹽，奧昔拉定，依普拉酮，齊培丙醇，脫氧異丙嗪鹽酸鹽，福米諾苯，普羅嗎酯，替培啶，苯佐那酯，普諾地嗪，noscactive藥物成分，倍氯米松，倍他米松，布地奈德，氯潑尼醇，可的松，可的伐唑，脫氧皮質酮，地奈德，地塞米松，二氟可龍，氟可龍，氟可的松(fluorocortisone)，氟米松(flumethasone)，氟尼縮松，氟輕鬆，醋酸氟輕鬆，氟可託龍(fluorocortolone)，醛甾酮，氟米龍，氟氫縮松(flurandrenolone)，哈西奈德，氫化可的松，甲潑尼松，甲潑尼龍，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松，曲安西龍，硫酸奧西那林，異丙腎上腺素，腎上腺素，去甲腎上腺素，氟米松(fluoromethasone)，甲羥松，氟替卡松(fluticasone)，阿託品硝酸甲酯，異丙託溴銨，色甘酸鈉，奈多羅米和它們各自的藥用鹽或酯中的一種或其中的幾種。當選用舒喘寧時，其優選的濃度是0.1至300mg/ml脫水脂質囊泡組合物。在另一方面，本發明提供用於治療呼吸系統疾病的吸入方法，所述吸入方法通過用有效治療量的霧化脫水脂質囊泡組合物治療患者，所述脂質囊泡組合物基本上由藥物活性成分和脂質組分組成，其通過所述吸入給藥途徑霧化成多數空氣動力學直徑--重量平均徑小於10pm的顆粒。所述藥物活性成分包括麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，偽麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，舒喘寧，茶鹼，硫酸沙丁胺醇，沙甲胺醇，叔丁喘寧，奧西那林，非諾特羅，鹽酸氯丙那林，甘草酸氯丙那林，妥洛特羅，5-(4-氨基-3，5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑鹽酸鹽，克侖特羅鹽酸鹽，丙卡特羅，沙美特羅，海索那林，馬布特羅，福莫特羅，甲氧那明，曲託喹酚，利米特羅，比託特羅，普羅託醇，瑞普特羅，吡布特羅，芬司匹利，異丙阿託品，異丙東莨菪鹼，氨茶鹼，二羥丙茶鹼，膽茶鹼，色甘酸鈉，酮替芬，曲普利啶，曲尼司特，氯化銨，碘化鉀，乙醯半胱氨酸，溴己新鹽酸鹽，羧甲司坦，氨溴索鹽酸鹽，愈創甘油醚，可待因，可待因磷酸鹽，福爾可定，羥蒂巴酚，噴託維林檸檬酸鹽，氯呱斯汀，磷酸苯丙呱林，美沙芬氫溴酸鹽，奧昔拉定，依普拉酮，齊培丙醇，脫氧異丙嗪鹽酸鹽，福米諾苯，普羅嗎酯，替培啶，苯佐那酯，普諾地嗪，noscactive藥物成分，倍氯米松，倍他米松，布地奈德，氯潑尼醇，可的松，可的伐唑，脫氧皮質酮，地奈德，地塞米松，二氟可龍，氟可龍，氟可的松(fluorocortisone)，氟米松(flumethasone)，氟尼縮松，氟輕鬆，醋酸氟輕鬆，氟可託龍(fluorocortolone)，醛甾酮，氟米龍，氟氫縮松(flurandrenolone)，哈西奈德，氫化可的松，甲潑尼松，甲潑尼龍，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松，曲安西龍，硫酸奧西那林，異丙腎上腺素，腎上腺素，去甲腎上腺素，氟米松(fluoromethasone)，甲羥松，氟替卡松(fluticasone),阿託品硝酸甲酯，異丙託溴銨，色甘酸鈉，奈多羅米和它們各自的藥用鹽或酯，單獨的它們或組合。在選用舒喘寧的情況下，所述量通常是0.1-300mg/ml。在還有的另一方面中，本發明提供製備可吸入的或可霧化的氣霧劑顆粒的混懸液的方法，所述顆粒粒徑多數(predominantly)小於10pim，是指脫水脂質體囊泡顆粒單獨和/或其與所分散介質共同形成的顆粒，所述方法包括在水性混懸液中提供粒徑小於10pm的脫水脂質體囊泡；和在產生空氣動力學直徑—重量平均徑小於10)um的氣霧劑顆粒的條件下吸入或霧化所述混懸液。所述脂質顆粒包含不大於1.0pm的脫水脂質囊泡和/或膠束，所述用於治療哮喘的組合物基本上由脂質組分和藥物活性成分或它的鹽或酯組成，適於通過吸入而遞送到呼吸系統中。脫水的脂質囊泡形成方法在開始用脂質、穩定劑和/或增塑劑和藥物活性成分配製時，可以通過用於製備和篩分脂質體的任一種標準方法來製備本發明的脫水脂質囊泡。但是這僅是所述脂質體囊泡。在脂質體囊泡形成以前，可以將穩定劑或增塑劑添加在脂質溶液中或用脂質溶液添加以形成脂質混合脂質體囊泡。用於製備所述脂質體的方法包括脂質膜的水化，溶劑注射，反相蒸發和凝膠狀磷月旨質囊泡(vesicularphospholipidsgels)方法，見Brandl,M"Bachmann,D.,Reszka，R.，禾口Drechsler,M.丄^osoma/eZw6ere"wwg,z72re7i/erafe〃w"g，dAreDE4430592.3(18.08-95提交)。PCTWO96/05808並且見Brandl,M.,Tard，C.,Drechsler,M.,Bachmann，D.，Reszka,R.,Bauer,K.H.，等.(1997)。結合具體參考Adv.DrugDdiv.Rev.(藥物遞送進展綜述)，24,161。並結合參考下列文獻中的具體信息Ann.Rev.Biophys.Bioeng.(生物物理和生物工程年度回顧)9:467(1980)。通過反相蒸發方法製備的反相蒸發囊泡(REVs)結合參考美國專利4,235,871號中的描述。脂質膜的薄膜處理或通過注射技術的多層囊泡(MLVs)的製備結合參考美國專利4,737,923號中的描述。其後面兩個步驟，一般是將溶解在優選的適合的溶劑中的形成脂質體的脂質混合物在容器中蒸發以形成薄膜，所述薄膜是由水性緩衝液覆蓋的。所述脂質膜水化而形成MLVs，一般粒徑在約0.1至10pm之間。將REVs或MLVs進一步處理以產生較小的基本上均勻的脂質體混懸液，在0.02-2.0pm粒徑範圍內，優選在0.2-0.4pm範圍內。一種有效的篩分方法包括經過具有選擇的均一孔隙大小的聚碳酸酯膜或不對稱的陶瓷過濾器擠出脂質體的水性混懸液，結合參考Ann.Rev.Biophys.Bioeng(生物物理和生物工程年度回顧)，9:467(1980)，和美國專利4,737,323號。聚碳酸酯膜的孔隙大小接近所述囊泡的大小。因而，所述囊泡的粒徑一般控制為20至5000nm。選擇地通過超聲波或擠出處理REVs或MLVs以產生小的單層囊泡(SUVs)，其特徵在於粒徑為0.02-0.07pm。另一種用於產生SUVs的優選方法是通過均化MLVs，其中使用用於乳液均化的商業使用類型的常規高壓均質機。這裡MLVs是循環經過均質機，周期性地對顆粒大小採樣以確定MLVs在何時已經基本上轉化成SUVs。通過使用例如通過參考結合於此的美國專利號4，752，425中描述的程序將所述藥物活性成分包封在脂質體中。在脂質體囊泡形成以後，可以作為氣霧劑載體的一些藥物賦形劑，更具體而言是穩定劑和或增塑劑，可以添加在脂質體溶液中，並且通過立即冷卻至-50。C以固定脂質體囊泡的形狀和大小，然後凍幹固體分散的團塊。在所述團塊中的水分乾燥以後，形成脫水脂質囊泡，所述藥物活性成分包封在脫水脂質囊泡中，脫水脂質囊泡由穩定劑和/或增塑劑組成，但是在所述脂質囊泡中沒有內水相。常規和脫水的脂質囊泡常規脂質體是含有純脂質的脂質體，而本發明的脫水脂質囊泡是不含有內部水但是由脂質和穩定劑和/或增塑劑以及藥物活性成分或備選地由兩性脂質組分形成的脂質體。所述穩定劑和/或增塑劑用作囊泡保護劑，並且用來在沒有水的情況下在凍幹或噴霧乾燥期間穩定所述脂質囊泡並且保持脂質囊泡的形狀。常規的和脫水的脂質囊泡都可以通過多種形成脂質囊泡的標準方法製備。對於常規的脂質體，這些脂質包括二脂族脂質，諸如磷脂，二脂醯甘油酯，二脂族糖脂；所述穩定劑和/或增塑劑不專門用於保持其脂質體囊泡的形狀。所述多種脂質組分佔所述脂質體中的總非水組分的摩爾百分比約為99.9%-60%的量；穩定劑和/或增塑劑摩爾百分比佔0.1%-40%之間的量。包封在兩種脂質體中的藥物活性成分的量是相對於所述脂質的摩爾百分比為0.01%-200%。所述脫水脂質囊泡是通過冷凍乾燥或噴霧乾燥所述常規脂質體而製備的產物，所述常規脂質體是用脂質和用於保存脂質囊泡的穩定劑和/或增塑劑形成的。用於本發明的脂質包括三甲銨-丙烷(TAP),磷脂醯膽鹼(PC)，及其混合物等，諸如卵磷脂醯膽鹼(EPC)和溶血磷脂醯膽鹼(LPC)，磷酯醯乙醇胺(PE)，磷脂醯肌醇(PI)，磷脂醯絲氨酸(PS)，磷脂酸(PA)和磷脂醯甘油(PG)，和它們的衍生物或混合物。這些脂質可以是完全飽和的或部分飽和的。它們可以是天然存在的或合成的。DOPC和DOTAP是優選的脂質。脂質與磷脂、糖脂、膽固醇和蛋白質一起是生物膜的主要組分。脂質可以以許多不同的方式分類，並且可以細分成脂肪酸和它們的衍生物(例如DOPC和DOTAP),三醯甘油，蠟酯磷脂(磷酸甘油酯例如DOPC和鞘磷脂)，鞘脂(不同於鞘磷脂的分子，其含有氨基醇神經鞘氨醇)，類異戊二烯(由重複的異戊二烯單元構成的分子，異戊二烯單元是支鏈的五碳烴)。參考TrudyMcKee和JamesRMcKee:(2003)，生物化學生命的分子基礎，第三版；國際版，332頁，McGraw-Hill公司，(2003)類似於DOPC的脂質列表.-磷脂醯膽鹼(PC)1，2-二醯基-sn-甘油-3-乙基膽鹼磷酸(EPC)-(磷脂)磷酯醯乙醇胺(PE)磷脂醯絲氨酸(PS)磷脂醯肌醇(PI&PIP's)雙(單醯基甘油)磷酸酯磷脂酸(PA)磷脂醯甘油(PG)心磷脂(CA)二醯基甘油酯(DG)膽固醇(植物來源的)和類似於DOTAP的脂質列表-1,2-二醯基-3-三甲銨-丙垸(TAP)-(二醇)1,2-二醯基-3-二甲銨-丙垸(0八)-(二醇)DC-膽固醇(DC-Chol)-(甾醇)二甲基二(十八烷基)溴化銨(DDAB)-(烷基胺)脫水脂質囊泡組合物可以配製成包括微量的脂肪醇，脂肪酸，和/或穩定劑和/或增塑劑，條件是這些較少脂質組分不顯著降低脂質體對於黏膜或呼吸系統組織的結合親和性，基本上是不飽和的，沒有毒性或刺激性，並且當脫水脂質囊泡在體外或/和在原位或/和在體內再水化或與水或任何緩衝液接觸時共同控制或調節藥物活性成分從脫水脂質囊泡釋放的性質。脫水脂質囊泡組合物的製備根據本發明發現，當脂質體中含有高百分比的囊泡保護劑穩定劑和/或增塑劑時，所述囊泡保護劑穩定劑和/或增塑劑諸如甘油和脂肪酸蔗糖酯，其摩爾百分比一般地在0.1%~40%，在冷凍乾燥或噴霧乾燥和再水化過程期間或之後，舒喘寧或其它藥物活性成分可以成功保持脂質囊泡形狀並且保留在脂質體囊泡中延遲釋放。根據本發明另發現，本發明的藥物活性成分/脂質/穩定劑和/或增塑劑組合物具有許多改善的性質，例如藥物活性成分從脂質體囊泡的滲漏較少，降低藥物的毒性和副作用，可控制藥物的釋放，改善藥物的溶解度和包封率，藥物活性成分在靶器官連續釋放，不需要多次給藥，延長藥物的有效性和穩定性，它可以以乾燥形式長期儲存，在再水化時沒有藥物活性成分從脂質囊泡中顯著滲漏，並且可以霧化或吸入以提供具有空氣動力學直徑--重量平均徑小於10pm的氣霧劑顆粒的均勻混合物。為了實現上述全部優點，本發明組合脂質組分(包括穩定劑和/或增塑劑的，提供親水性基團)以及藥物活性成分以配製成新的高效藥物活性成分脂質體組合物。改造所述組合物可增加藥物活性成分載藥量和控制呼吸系統組織中藥物活性成分的釋放速率。本發明還提供用於增溶藥物活性成分並且將它們結合在這樣的脂質體組合物中的方法。另外，所述劑型容易滅菌，滿足對於藥物製劑的重要條件，並且很穩定，適於長期儲存。含有藥物活性成分的脫水脂質囊泡組合物還可以含有任何適合的藥用添加劑，稀釋劑和/或賦形劑。這樣的添加劑、稀釋劑或賦形劑的實例，諸如氯化鈉或氯化鉀，水化的或脫水形式的磷酸二氫鈉或磷酸氫二鈉，水，鹽水等，不限制本發明的範圍，並且對於吸入製劑可以以在藥學上可接受的任何需要或必要的量使用。藥用穩定劑和/或增塑劑和賦形劑可被用於所述劑型。雖然穩定劑和/或增塑劑是優選的，但是所述組合物不局限於特定的甘油，並且可以釆取在藥物製劑中普遍使用和藥用的其它任何適合的穩定劑和/或增塑劑。在脫水脂質囊泡的製備中使用的緩衝液可以是選自下組的任何緩衝液擰檬酸鹽，碳酸鹽，碳酸氫鹽，乙酸鹽，三羥甲基氨基甲垸，甘氨酸鹽，卡可酸鹽，馬來酸鹽，和如此其它的緩衝液，優選pH7.4的磷酸鹽緩衝液。任何有機溶劑諸如低級醇，二甲氧基乙烷，二噁烷，四氫呋喃，四氫吡喃，二乙醚，丙酮，二甲亞碸(DMSO)，二甲基甲醯胺(DMF)，和滷代烴，諸如氟利昂，乙腈，或其混合物，優選地氯仿/甲醇，可被用於製備脂質體的方法中。脫水脂質囊泡的優選製備方法包括(1)以相對於所述脂質0.1-40摩爾％的穩定劑和/或增塑劑和0.1-200摩爾％的藥物活性成分的量，混合穩定劑和/或增塑劑，以及乾燥形式的藥物活性成分；(2)將所述混合物溶解在適合體積的有機溶劑、優選乙醇；(3)將所述乙醇溶液注射到適合體積的pH5.6-7.6的緩衝液中，然後轉到(5);或，在氮氣和/或真空下反覆乾燥獲得的溶液，和/或，將所述乾燥膜在適合的溫度冷凍乾燥適合的時間；(4)將所述殘餘物再混懸在適合體積的pH5.6-7.6的緩衝液中，優選pH7.4的磷酸鹽緩衝液中；(5)通過振蕩、攪拌或超聲波處理、溶劑注射或其它任何適合的方法形成脂質體；(6)通過擠出或通過其它方法篩分(sizing)所述脂質體；和(7)使用適合的和可接受的方法將所述脂質體消毒，用於將脂質體囊泡劑型滅菌；(8)冷凍乾燥或噴霧乾燥所述脂質體囊泡以形成脫水脂質囊泡。圖1提供由這樣一種方法製備的舒喘寧脫水脂質囊泡的TEM照片的圖像。製備本發明的組合物的方法不局限於以上列舉的那些，而製備脫水脂質囊泡的其它方法諸如溶劑注射、薄膜水化、脫水-再水化和反蒸發同樣是適合的。優選的脫水囊泡的粒徑是20-5000nm。水分含量一般小於所述粉末的15重量％，優選小於10重量％，更優選小於9%。產物中組分的按重量計算的量通常如下tableseeoriginaldocumentpage28所述粉末將用於製備用於治療呼吸系統病症的粉末或液體氣霧劑。治療應用控釋對於藥物活性成分成功遞送至呼吸系統是非常重要的。己知影響吸入顆粒沉積到呼吸系統中因素的列表，包括氣霧劑或它的環境特徵，呼吸系統結構特徵，吸入劑特徵，和呼吸;模式特徵。圖2顯示兩種脫水脂質囊泡製劑的釋放曲線。以小顆粒霧化脫水脂質囊泡和膠束的治療應用和優點是眾多的。吸入的霧化小顆粒將使包封在脫水脂質囊泡中的藥物活性成分以足夠高的量沉澱在呼吸組織中，以通過控制釋放來容許最小的每日劑量給藥，具有在一段時期內延長釋放的最大效果。所述藥物活性成分從脫水脂質囊泡的控制釋放預計延長每次給藥以後的治療活性，減少給藥頻率，進一步改善局部至全身性效果的比例，並且在呼吸系統中提供增加的和延長的局部治療效果。在本發明中，將含有藥物活性成分的脂質囊泡混懸或/和溶解在0.9%無菌鹽水中或用0.9%無菌鹽水稀釋，在混合以後將所述混懸液放置在噴霧器中，可充分利用呼吸氣霧劑直到在噴霧器或吸入器中不再有液體。在提供數據並評價新的吸入組合物的實施例中主要使用抗炎的藥物活性成分舒喘寧，用於將霧化的或吸入的氣霧劑顆粒吸入到呼吸系統深處。本發明的範圍不局限於舒喘寧作為藥物活性成分。在經過吸入途徑給藥的該組合物中使用的化合物類別的實例包括，但不限於，支氣管擴張藥，諸如硫酸奧西那林，氨茶鹼，叔丁喘寧，舒喘寧，茶鹼，麻黃鹼，異丙腎上腺素，比託特羅，吡布特羅，腎上腺素，去甲腎上腺素，丙卡特羅，和沙美特羅；抗炎的藥物活性成分，諸如舒喘寧，地塞米松，潑尼松龍，氫化可的松，氟米松，甲羥松，氟替卡松，曲安西龍，和氟尼縮松。對於吸入，通過下列載體或方法實51所述遞送(a)利用氣動的或超聲波噴霧器霧化稀釋的水性混懸液，(b)使用空氣從配製的霧化器噴霧；在粉末中具有懸浮的乾燥的脫水脂質囊泡的溶劑(c)用推進劑將乾燥的顆粒噴霧到呼吸系統中或(d)使用適合的裝置將乾燥的脂質體作為粉末氣霧劑遞送，條件是通過上述任一項方法的產生的氣霧劑顆粒在0.02-20pm的粒徑範圍內。本發明的組合物一般具有高的包封率，好的穩定性，和延長的半衰期。舉下列實施例說明製備藥物活性成分脫水脂質囊泡的方法，以及使用這些脫水脂質囊泡用於治療間歇性呼吸系統疾病的方法。本發明的實施例材料舒喘寧[2-叔-丁基氨基-l-(4-羥基-3-羥基-甲基苯基)乙醇]購自亞邦化工公司(YabangchemicalindustryCorporation(常州，江蘇，中國)。EPC'SPC，DOTAP(l,2-二油醯-3-三甲銨丙烷)，DOPC(二油醯磷脂醯膽鹼)，DSPC(二硬脂醯磷脂醯膽鹼)，鞘磷脂，神經醯胺-l-膽鹼磷酸，和DMPC((二肉豆蔻基磷脂醯膽鹼)購自Avanti極性脂質公司(AvantiPolarLipids,Inc)(美國)。甘油及其它穩定劑或增塑劑和溶劑諸如氯仿[RDH(Riedel-deHagn"購自KouFlingHongScientificSuppliesLtd.，三(羥甲基)氨基甲烷(Tris)(Sigma)購自TinHangTechnologyLtd.,和磷酸二氫鉀(AmershamBiosciences)貝勾自AmershamBiosciencesChinaLtd(AmershamBiosciences中國有限公司)。全部溶劑，溶液和化學品是分析試劑等級。實施例1通過薄膜水化製備脂質體通過常規脂質膜水化方法製備水性多層囊泡(MLV)，並且隨後通過擠出法產生小的單層囊泡(SUV)。將脂質和舒喘寧分別溶解在氯仿和甲醇中，然後將所述溶液以指定摩爾比的脂質和舒喘寧混合。將所述混合物在氮氣流下乾燥成均勻的脂質膜，然後在真空下過夜以除去殘留的有機溶劑。將該脂質膜在10mM的Tris-等滲鹽緩衝液(IOmM的Tris，137mM氯化鈉，和在25。C下，pH7.4)水化。將脂質的終濃度控制在5-20mg/ml。然後將所述混合物在80。C(超過所有脂質的轉變溫度)保持60分鐘以使得所述脂質體結構固化。在固化期間，分別在開始的、中間的和末端的時間點將它用渦流攪拌3次，並且每一次連續攪拌5分鐘。然後將得到的MLV使用10mL擠出機(LipexBiomembranesInc.,Vancouver,加拿大)經過直徑為25mm的Whatman100nm聚碳酸酯過濾器(Nudepore，Pleasanton，CA)用數個循環擠出，直到粒徑在50-200nm之內。包封率的確定將150)LiL新製備的脂質體樣品用AvantiJ-E離心機(JA-20，17400xg，6。C，和20min)通過可截留分子量為10KD慮份的MicroconY-10離心過濾裝置(Millipore)離心。在276nm下用分光光度法測定離心溶液中的舒喘寧濃度。該濃度表示所述脂質體的連續相中的舒喘寧濃度(非-包封的舒喘寧)。分光光度法還用作測定包括在脂質體的分散相和連續相中的舒喘寧的總濃度。將無水乙醇添加到脂質體混懸液中以完全破裂所述脂質體並且將包封的舒喘寧完全溶解在溶液中。通過裝備有恆溫石英室的UV-VISVarianCary50分光光譜儀在278nm的波長下測量吸光度。用下式計算包封率卿EE(%)=(C,a-C游離)/C總x100其中c,是脂質體分散體/溶液的連續相中的未包封的舒喘寧的濃度，c,&是脂質體分散體/溶液中的舒喘寧的總濃度。包封率是20-30%。實施例2通過溶劑注射技術製備脂質體將部分DOPC或DOTAP，和藥物活性成分(舒喘寧，0.04mmol)以摩爾比為l:2的的混合物溶解在4ml的乙醇中。通過將脂質/藥物活性成分/乙醇溶液注射到50ml的pH7.4磷酸鹽緩衝液中形成舒喘寧脂質體分散體。脂質體經過0.4或0.2pm的聚碳酸酯膜擠出形成大小均勻分布的脂質體囊泡。包封率的確定將150piL新製備的脂質體樣品用AvantiJ-E離心機(JA-20，17400xg，6°C，和20min)經過可截留分子量為10KD慮份的MicroconY-10離心過濾裝置(Millipore)離心。在276nm下用分光光度法確定離心溶液中的舒喘寧濃度。該濃度表示所述脂質體的連續相中的舒喘寧濃度(非-包封的舒喘寧)。分光光度法還用於測定包括在脂質體的分散相和連續相中的舒喘寧的總濃度。將無水乙醇添加到脂質體混懸液中以完全破裂所述脂質體並且將包封的舒喘寧完全溶解在所述溶液中。通過裝有恆溫石英室的UV-VISVarianCary50分光光譜儀在278nm的波長測量吸光度。用下式計算包封率(EE):EE(o/o)氣C總匿C游離)/C總x100其中C游離是脂質體分散體/溶液的連續相中的未包封的舒喘寧的濃度，c總是脂質體分散體/溶液中的舒喘寧的總濃度。包封率是20-30%。實施例3通過凝膠狀磷脂質囊泡製備脂質體將1ml舒喘寧飽和水溶液，O.lg的甘油和2g的SPC通過高速或高速或高壓勻質機在50°C下混合直到形成凝膠;然後將所述凝膠稀釋在100ml的pH7.4的磷酸鹽緩衝液中以形成脂質體囊泡。包封率的確定將150pL新製備的脂質體樣品用AvantiJ-E離心機(JA-20，17400xg,6°C，禾B20min)經過可截留分子量為10KD慮份的MicroconY-10離心過濾裝置(Mmipore)離心。在276nm下用分光光度法測定離心溶液中的舒喘寧濃度。該濃度表示在所述脂質體的連續相中的舒喘寧濃度(非-包封的舒喘寧)。分光光度法還用於測定包括在脂質體的分散相和連續相中的舒喘寧的總濃度。將無水乙醇添加到脂質體混懸液中以完全破裂所述脂質體並且將包封的舒喘寧完全溶解在所述溶液中。通過裝有恆溫石英室的UV-VISVarianCary50分光光譜儀在278nm的波長下測量吸光度。用下式計算包封率(EE):EE(o/o)氣C總畫C游離)/C總x100其中C遊s是脂質體分散體/溶液的連續相中的未包封的舒喘寧的濃度，C總是脂質體分散體/溶液中的舒喘寧的總濃度。包封率是50-70%。實施例4脫水脂質囊泡的製備本實施例舉例說明用於製備含有穩定劑和/或增塑劑的控制釋放藥物活性成分的脂質體組合物的方法。將摩爾比為1:10:20的甘油、DOPC或DOTAP、和藥物活性成分(舒喘寧，0.04mmol)溶解在4ml的乙醇中。通過將脂質/藥物活性成分/乙醇溶液注射到50ml的pH7.4的磷酸鹽緩衝液中而形成脂質體舒喘寧分散體。經過0.4或0.2或0.1pm的聚碳酸酯膜擠出由此形成均勻大小分布的脂質體囊泡。將相對於DOPC或DOTAP摩爾比為200%的乳糖添加並溶解到脂質體混懸液中，並且立即用液氮或其他方法降低溫度。將冰凍成冰塊的脂質體混懸液放入-50。C冷凍乾燥機，真空乾燥直到形成由乾燥乳糖粉末分散的脫水脂質囊泡。脫水脂質囊泡的透射電子顯微鏡(TEM)觀察使用如上所述相同的方法製備MLV和SUV脂質體溶液。將全部脂質體的脂質濃度控制在10mg/ml。採用空白脂質體囊泡和包封舒喘寧的脂質體。在TEM觀察以前，將10%的葡萄糖和1%的甘油添加到所述囊泡溶液中，然後將每一囊泡混懸液用純水稀釋100倍。將稀釋的溶液滴在碳塗敷的400目電子顯微鏡銅格網(SPISupplies②批號1110207，Structureprobe,Inc(結構探針公司)，西切斯特PA，美國)上並且用液氮冷凍所述格網。將具有脂質體囊泡混懸液的冷凍格網在冷凍乾燥機(FreeZon⑧6升冷凍乾燥系統，Labconco公司，美國)的隔室中在-40。C冷凍乾燥72小時。最終，將所述格網密封到10mL玻璃注射管中，並且保留所述格網上的脂質體囊泡，通過TEM(FEI，TecnaiG220STEM,英國)觀察。也可直接將乾燥乳糖粉末分散的脫水脂質囊泡置於碳塗敷的400目電子顯微鏡銅格網(SPI8邵？^3@批號1110207，Structureprobe，Inc(結構探針公司)，西切斯特PA，美國)上通過TEM(FEI,TecnaiG220STEM，英國)直接觀察。包封率的確定將一定量的脫水脂質囊泡粉末混合物溶解並懸浮在純水中。然後，將150)iL新製備的脂質體樣品用AvantiJ-E離心機(JA-20，17400xg，6°C，和20min)經過可截留分子量為10KD慮份的MicroconY-10離心過濾裝置(Mmipore)離心。在276nm下用分光光度法測定離心溶液中的舒喘寧濃度。該濃度表示所述脂質體的連續相中的舒喘寧濃度(非-包封的舒喘寧)。分光光度法還用於確定包括在脂質體的分散相和連續相中的舒喘寧的總濃度。將無水乙醇添加到脂質體混懸液中以完全破裂所述脂質體並且將包封的舒喘寧完全溶解在所述溶液中。通過裝有恆溫石英室的UV-VISVarianCary50分光光譜儀在278nm的波長下測量吸光度。用下式計算包封率卿formulaseeoriginaldocumentpage34其中<:是脂質體分散體/溶液的連續相中的未包封的舒喘寧的濃度，Ca是脂質體分散體/溶液中的舒喘寧的總濃度。實施例5透析平衡期間脂質體中舒喘寧的保留和釋放將一定量的脫水脂質囊泡粉末混合物溶解並懸浮在純水中。為了評價脂質體中的舒喘寧在體外的保留，通過膜透析在25°C進行透析相、連續相(分散介質)和分散相(脂質體內部)混懸液之間的平衡。釋放介質是Tris-鹽水緩衝液(pH7.4)，其是用於在脂質體製備期間水化脂質-舒喘寧薄膜的相同緩衝液，以便保持透析管中的脂質體和釋放介質之間的滲透平衡。選擇DOPC和DOTAP脂質體用於所述研究，原因在於它們具有相對高的包封率。將6mL的每個脂質體樣品轉移到透析膜管(截留分子量為12-14KD;SpectrumMedicalIndustries(光譜醫療工業)，洛杉磯，加利福尼亞州)並放在含有150mL的TBS的溫度受控的燒杯中。將燒杯的內容物在整個實驗期間在37。C的溫度下在50rpm攪拌。在時間點15，30，45，60，90，120，150和180min，其後3h的每一小時和其後每3小時直到24h，分別取出5mL的透析介質。在每次取出之後加入新的透析介質。通過裝備有恆溫石英室的UV-VISVarianCary50分光光譜儀在278nm的波長下測定樣品的在釋放介質中的舒喘寧濃度(C釋放介質)。在相同的時間點，取出300pL的透析管中的脂質體。將150nL用AvantiJ-E離心機(JA-20，17400xg，6°C，20min)經過可截留分子量為10KD慮份的MicroconY-10離心過濾裝置(Millipore)離心。將離心溶液中的舒喘寧濃度確定為在瞬時時間點的脂質體的連續相中的舒喘寧濃度(C游離)。在用乙醇適當稀釋以後，將另一個150pL脂質體確定為脂質體溶液中的舒喘寧的總濃度(C.g)。C^和C躺的差為Crt，其被認為是在相應的採樣時間點的脂質體之內的舒喘寧濃度。計算脂質體的連續相和分散相之間的包封分配係數(K游離/^C/C內)和脂質體的連續相與釋放介質之間的透析分配係數(K釋放介質鄰離<:釋放介質/C游離)°在脂質體周圍形成漏槽條件下，KM/rt<l/10;停止透析，並且記錄時間，並且測試C,s和C絲隨時間的變化，以計算包封的舒喘寧從脂質囊泡到緩衝液中的釋放。圖2顯示包封的舒喘寧從兩種脫水脂質囊泡的釋放。權利要求1.一種通過吸入到呼吸系統而用於治療哮喘的藥物脂質組合物，所述組合物包含藥用囊泡保護劑(增塑劑和/或穩定劑)、藥用脂質組分和藥物活性成分的脫水脂質囊泡。2.權利要求1的組合物，其中所述囊泡保護劑選自製劑學所使用的穩定劑和增塑劑，所述穩定劑和增塑劑包括己二酸及其衍生物或鹽，抗壞血酸及其衍生物或鹽，天冬氨酸及其衍生物或鹽，乙醯色氨酸及其衍生物或鹽，#-乙醯苯胺及其衍生物或鹽，氨基乙基磺酸及其衍生物或鹽，丙氨酸及其衍生物或鹽，阿拉伯膠，亞硫酸氫鈉，亞硫酸鈉，精氨酸及其衍生物或鹽，海藻酸及其衍生物或鹽，苯甲酸及其衍生物或鹽，異硬脂酸及其衍生物或鹽，肌醇及其衍生物或鹽，1,2-乙二胺及其衍生物或鹽，異抗壞血酸及其衍生物或鹽，賴氨酸及其衍生物或鹽，可可脂，蓖麻蠟，黃原膠，木糖醇，檸檬酸及其衍生物或鹽，甘氨酸及其衍生物或鹽，甘油及其衍生物，葡糖酸及其衍生物或鹽，穀氨酸及其衍生物或鹽，肌酸酐，二異丙醇胺及其衍生物，二乙醇胺及其衍生物，環糊精，胱氨酸，半胱氯酸，二丁基羥基甲苯，酒石酸及其衍生物或鹽，脂肪酸蔗糖酯，硬脂酸及其衍生物或鹽，明膠，羊毛脂，鯨蠟醇，明膠，水解明膠，蟲膠，D-山梨糖醇，失水山梨醇脂肪酸酯，山梨酸及其衍生物或鹽，巰基乙酸及其衍生物或鹽，硫氰酸鉀，硫代蘋果酸鈉，麝香草酚，中鏈脂肪酸甘油三酯，葡聚糖，糊精，維生素E，D-葡萄糖二酸鈣，生育酚及其同分異構體，氨丁三醇，煙醯胺，乳酸及其衍生物或鹽，乳糖，脲，棉白糖，組氨酸及其衍生物或鹽，羥丙基纖維素，氫醌，苯丙氨酸，非那西丁，葡萄糖，延胡索酸及其衍生物或鹽，丙二醇，肝素鈉，聚維酮，順丁烯二酸及其衍生物或鹽，丙二酸及其衍生物或鹽，甘露糖醇，甲硫氨酸，十二烷基硫酸鈉，蘋果酸及其衍生物或鹽，氫化油，芝麻油，山梨醇83，二亞乙基三胺五乙酸及其衍生物或鹽，琥珀酸二辛酯磺酸鈉，聚二甲基矽氧烷-矽氧烷二氧化物混合物，失水山梨醇脂肪酸酯，甘油三乙酸酯，蓖麻油，鄰苯二甲酸二乙酯/二丁酯，丁基鄰苯二甲醯基甘醇酸丁酸酯，丙二醇(l,2-丙二醇)，脂肪酸丙二醇酯，聚山梨醇酯，聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇，聚乙二醇，十四烷酸異丙酯，棉籽油-豆油混合物，單硬脂酸甘油酯，亞油酸異丙酯，凡士林，及其混合物。3.權利要求2的組合物，其中所述囊泡保護劑與所述脂質組分的摩爾比例是所述囊泡保護劑佔0.1%至40%，所述脂質佔99.9%至60%的所述脂質。4.權利要求1的組合物，其中所述藥物活性成分包括麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，偽麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，舒喘寧，茶鹼，硫酸沙丁胺醇，沙甲胺醇，叔丁喘寧，奧西那林，非諾特羅，鹽酸氯丙那林，甘草酸氯丙那林，妥洛特羅，5-(4-氨基-3，5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑鹽酸鹽，克侖特羅鹽酸鹽，丙卡特羅，沙美特羅，海索那林，馬布特羅，福莫特羅，甲氧那明，曲託喹酚，利米特羅，比託特羅，普羅託醇，瑞普特羅，吡布特羅，芬司匹利，異丙阿託品，異丙東莨菪鹼，氨茶鹼，二羥丙茶鹼，膽茶鹼，色甘酸鈉，酮替芬，曲普利啶，曲尼司特，氯化銨，碘化鉀，乙醯半胱氨酸，溴己新鹽酸鹽，羧甲司坦，氨溴索鹽酸鹽，愈創甘油醚，可待因，可待因磷酸鹽，福爾可定，羥蒂巴酚，噴託維林檸檬酸鹽，氯呱斯汀，磷酸苯丙呱林，美沙芬氫溴酸鹽，奧昔拉定，依普拉酮，齊培丙醇，脫氧異丙嗪鹽酸鹽，福米諾苯，普羅嗎酯，替培啶，苯佐那酯，普諾地嗪，noscactive藥物成分，倍氯米松，倍他米松，布地奈德，氯潑尼醇，可的松，可的伐唑，脫氧皮質酮，地奈德，地塞米松，二氟可龍，氟可龍，氟可的松，氟米松，氟尼縮松，氟輕鬆，醋酸氟輕鬆，氟可託龍，醛甾酮，氟米龍，氟氫縮松，哈西奈德，氫化可的松，甲潑尼松，甲潑尼龍，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松，曲安西龍，硫酸奧西那林，異丙腎上腺素，腎上腺素，去甲腎上腺素，氟米松，甲羥松，氟替卡松，阿託品硝酸甲酯，異丙託溴銨，色甘酸鈉，奈多羅米和它們各自的藥用鹽或酯，及其混合物。5.權利要求4的組合物，其中藥物活性成分與所述脂質組分的摩爾比是0.1%至200%。6.權利要求4的組合物，其中舒喘寧在脫水脂質囊泡組合物的濃度是0.1至300mg/ml。7.權利要求1的組合物，所述組合物可以霧化成顆粒，該顆粒多數空氣動力學直徑--重量平均徑小於10pm，重量最大徑小於35pm。8.—種治療哮喘的方法，所述方法通過吸入途徑將有效治療量的成形脂質組合物給予需要該治療的患者，並且在呼吸系統中使藥物活性成分緩慢釋放或控制釋放，所述成形的脂質組合物基本由下列組成所述藥物活性成分，選自增塑劑、穩定劑及其混合物的囊泡保護劑，以及脂質組分，所述脂質組合物被霧化成空氣動力學直徑--重量平均徑小於10pm的氣霧劑顆粒。9.權利要求8的方法，其中所述組合物包含0.1%至40%(摩爾百分比)的所述穩定劑和/或增塑劑、99.9%至60%(摩爾百分比)的脂質，並且所述藥物活性成分相對於所述脂質的摩爾百分比是0.01%至200%。10.權利要求8的方法，其中所述藥物活性成分包括麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，偽麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，舒喘寧，茶鹼，硫酸沙丁胺醇，沙甲胺醇，叔丁喘寧，奧西那林，非諾特羅，鹽酸氯丙那林，甘草酸氯丙那林，妥洛特羅，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑鹽酸鹽，克侖特羅鹽酸鹽，丙卡特羅，沙美特羅，海索那林，馬布特羅，福莫特羅，甲氧那明，曲託喹酚，利米特羅，比託特羅，普羅託醇，瑞普特羅，吡布特羅，芬司匹利，異丙阿託品，異丙東莨菪鹼，氨茶鹼，二羥丙茶鹼，膽茶鹼，色甘酸鈉，酮替芬，曲普利啶，曲尼司特，氯化銨，碘化鉀，乙醯半胱氨酸，溴己新鹽酸鹽，羧甲司坦，氨溴索鹽酸鹽，愈創甘油醚，可待因，可待因磷酸鹽，福爾可定，羥蒂巴酚，噴託維林檸檬酸鹽，氯呱斯汀，磷酸苯丙呱林，美沙芬氫溴酸鹽，奧昔拉定，依普拉酮，齊培丙醇，脫氧異丙嗪鹽酸鹽，福米諾苯，普羅嗎酯，替培啶，苯佐那酯，普諾地嗪，noscactive藥物成分，倍氯米松，倍他米松，布地奈德，氯潑尼醇，可的松，可的伐唑，脫氧皮質酮，地奈德，地塞米松，二氟可龍，氟可龍，氟可的松，氟米松，氟尼縮松，氟輕鬆，醋酸氟輕鬆，氟可託龍，醛留酮，氟米龍，氟氫縮松，哈西奈德，氫化可的松，甲潑尼松，甲潑尼龍，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松，曲安西龍，硫酸奧西那林，異丙腎上腺素，腎上腺素，去甲腎上腺素，氟米松，甲羥松，氟替卡松，阿託品硝酸甲酯，異丙託溴銨，色甘酸鈉，奈多羅米和它們各自的藥用鹽或酯，及其混合物。11.權利要求8的方法，所述方法以舒喘寧在脫水脂質囊泡組合物中的濃度為0.1至300mg/ml。12.—種用於治療呼吸系統疾病的吸入方法，所述方法採用有效治療量的霧化脫水脂質囊泡組合物通過吸入給藥途徑來治療患者。所述脫水脂質囊泡組合物基本由藥物活性成分和脂質組分組成，其霧化成顆粒的空氣動力學直徑-重量平均徑小於10pm。13.權利要求12的方法，其中所述藥物活性成分包括麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，偽麻黃鹼及其鹽和酯類衍生物，舒喘寧，茶鹼，硫酸沙丁胺醇，沙甲胺醇，叔丁喘寧，奧西那林，非諾特羅，鹽酸氯丙那林，甘草酸氯丙那林，妥洛特羅，5-(4-氨基-3,5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑，5-(4-氨基-3，5-二氯苯基)-3-叔-丁基惡唑鹽酸鹽，克侖特羅鹽酸鹽，丙卡特羅，沙美特羅，海索那林，馬布特羅，福莫特羅，甲氧那明，曲託喹酚，利米特羅，比託特羅，普羅託醇，瑞普特羅，吡布特羅，芬司匹利，異丙阿託品，異丙東莨菪鹼，氨茶鹼，二羥丙茶鹼，膽茶鹼，色甘酸鈉，酮替芬，曲普利啶，曲尼司特，氯化銨，碘化鉀，乙醯半胱氨酸，溴己新鹽酸鹽，羧甲司坦，氨溴索鹽酸鹽，愈創甘油醚，可待因，可待因磷酸鹽，福爾可定，羥蒂巴酚，噴託維林檸檬酸鹽，氯呱斯汀，磷酸苯丙呱林，美沙芬氫溴酸鹽，奧昔拉定，依普拉酮，齊培丙醇，脫氧異丙嗪鹽酸鹽，福米諾苯，普羅嗎酯，替培啶，苯佐那酯，普諾地嗪，noscactive藥物成分，倍氯米松，倍他米松，布地奈德，氯潑尼醇，可的松，可的伐唑，脫氧皮質酮，地奈德，地塞米松，二氟可龍，氟可龍，氟可的松，氟米松，氟尼縮松，氟輕鬆，醋酸氟輕鬆，氟可託龍，醛甾酮，氟米龍，氟氫縮松，哈西奈德，氫化可的松，甲潑尼松，甲潑尼龍，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松，曲安西龍，硫酸奧西那林，異丙腎上腺素，腎上腺素，去甲腎上腺素，氟米松，甲羥松，氟替卡松，阿託品硝酸甲酯，異丙託溴銨，色甘酸鈉，奈多羅米和它們各自的藥用鹽或酯，及其混合物。14.權利要求12的方法，所述方法可採用舒喘寧或其它藥物活性成分製備濃度為0.1至300mg/ml脫水脂質囊泡組合物混懸液。15.—種製備粒徑多數小於10pm的可吸入的或可霧化的氣霧劑顆粒混懸液的方法，所述顆粒為脫水脂質囊泡的顆粒，所述方法包括在水性混懸液中形成粒徑小於10pm的脫水脂質囊泡；和在產生空氣動力學直徑-重量平均徑小於10jim的氣霧劑顆粒的條件下吸入或霧化所述混懸液。16.權利要求15的方法，其中所述脂質顆粒包含不大於5.0pn的脫水脂質囊泡和/或膠束，所述組合物基本上由脂質組分和藥物活性成分或它的鹽或酯組成，用於治療哮喘，並且適合通過吸入遞送到呼吸系統中。全文摘要本發明涉及一種採用囊泡保護劑的脫水脂質囊泡新製劑。該製劑可控制藥物活性物質的釋放，並將其遞送到呼吸系統中，特別適用於哮喘的治療。該製劑在吸入後使藥物活性物質可在0至72小時內控制釋放，將全身作用改變為局部作用，延長給藥的治療周期，增加藥物的有效作用時間和穩定性，並且減小藥物的劑量、減少藥物對全身的副作用，全面降低藥物的毒性。文檔編號A61K47/18GK101366699SQ20081021095公開日2009年2月18日申請日期2008年8月15日優先權日2007年8月17日發明者楊智鈞,趙中振,黃志新,黃文華申請人:香港浸會大學