一種抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法

2023-09-23 03:29:35 1

專利名稱：一種抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種多糖和寡糖的製備方法。
背景技術：
經國內外醫藥研究發現多糖和寡糖在提高機體免疫功能、抗病毒 方面具有極其優異的性能，其保健價值在市場上已受到廣泛關注，隨 著技術發展，多糖和寡糖的市場需求量也在逐步提高，現有技術製備 多糖和寡糖一般都是以植物的果、莖、葉、根、菇類子實體、動物內 髒和皮毛為原料，通過水浸提取和酒精醇折提取方法，經濃縮、酒精 醇析反應後產生沉澱物，並對其收集後進行烘千、粉碎加工而成。由 於在原料中，特別是菇類原料，其活性多糖和寡糖僅只有微量存在， 經加工後，真正最終能獲得多糖和寡糖的量並不高，純度也較低，使 得投入資金量大，生產成本極其高昂。如以菇類為原料在深化加工提
取時，每加工一噸多糖原料需求量約在300噸，產品收得率約為0.3 %，每加工一噸寡糖原料需求量約在3000噸，收得率約為0.03%, 不僅如此，作為醇析提取用的酒精也高達原料的6倍，從而限制了該 產品工業化生產和市場發展的需求。

發明內容
本發明目的是解決上述技術問題，提供一種純度高、生產成本低、 易於人體口服吸收、保健功效強、具有優異的抗病毒功效的天然聚合 多糖和天然聚合寡糖的製備方法。
本發明的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法，其步驟包括
(1 )以抗病毒的藥食植物原料採用水浸提取、酒精醇析提取方法， 經收集沉澱物、烘乾、粉碎獲得藥食植物多糖；
(2 )將上述藥食植物多糖直接添加到培養基質中拌勻，然後按照 食用菌4喿作方法，在培養基質內接入各食用菇類菌種後送入培養室內 進行培育，將培育出的的白色菌絲體取出後烘千；
(3 )分別以上述各食用菇類菌種培育出的白色菌絲體為原料，採
用水浸提取、酒精醇析提取方法，收集沉澱物、烘乾、粉碎獲得天然 聚合多糖；再將提取天然聚合多糖後的醇提液貯存靜置、沉澱後，抽 取上清液回收乙醇，以回收乙醇後的剩餘溶液為原料，進行濃縮、過 濾、再採用酒精醇析方法，收集沉澱物、烘乾、粉碎獲得天然聚合寡糖。
所述步驟(2 )中培養基質與藥食植物多糖按重量配比優選為1000: 40 - 70，更為優選為1000: 60,所述培養基質為穀類、薯類或豆類。
所述步驟(3)中提取天然聚合多糖後的醇提液^存靜置、沉澱 60~ 100天。
所述步驟(3)中將以各食用菇類菌種為原料提取的天然聚合多糖 與天然聚合寡糖混合後製成相應的可應用於口服的各種劑型，如粉劑、 片劑、口服溶劑或膠嚢。
本發明先以抗病毒的藥食植物為原料，製備成藥食植物多糖粉， 並將藥食植物多糖添加入粗雜糧培基質中，再以各食用菇類菌種為原 料，採用生物菌化新工藝技術，將藥用或食用的真菌以及植物中微量 存在的活性物質，經吸收、裂變增殖，聚合形成具有多種生物活性的 糖鏈。通過基質調配、生物合成，增加原藥食植物的整體效應，能均 衡地滿足人體需求和易於吸收、利用的需要。通過在培養基質內添加 藥食植物多糖，使得培養出的菌絲體內多糖和寡糖活性糖鏈的組份增 加，由原來的14. 7%升至33°/ 以上，以其作為提取天然聚合多糖和天然 聚合寡糖的原料時，產品的收得率得到大幅提高，而相對於原料和酒 精的消耗量則降低。
作為藥食植物多糖的原料，本技術領域人員可以依照常識及參考 藥物配伍禁忌選取具有抗病毒作用的藥食植物，如選擇具有抗病毒功 效的刺五加皮、綠茶、洋蔥、南竹(夢)、枸杞、絞股蘭、紅丹參、板 藍根、芽菜、南瓜、苦瓜、野菊花等中的一種或多種，其各組份配比 並不限制，以本領域技術人員常用配比即可，作為優選是由刺五加皮、 絞股蘭、綠茶、洋蔥、竹夢、枸杞組成的組方。
作為培育的食用菌種，可選取現有技術中製備多糖或寡糖的常用
食用菇類菌種，如靈芝、猴頭菇、香菇、冬蟲夏草、金針菇、竹蓀菌、 雲芝、巴西蘑菇、槐栓菌、茯苓、安絡小皮傘、姬松萆和灰樹花等中 的一種或多種。
向培養基質內加入抗病毒的藥食植物多糖，使其培育出的菌絲體 內多糖含量較未培育的原菌種高，多糖結構中活性糖鏈分支含量高， 並且通過生物菌化新工藝技術，達到多糖的菌植複合，即提取的天然 聚合活性多糖天然聚合了菌類多糖及植物多糖的多重功效，如以靈芝 作為食用菌種培育，在培養基質中添加了具有抗病毒成份的藥食植物 多糖，從而經本發明方法製得的靈芝天然聚合多糖組分中活性糖鏈比 現有技術提取的多糖組分提高了 19 % ，具有了很好的抗病毒活性。同 理，製備的天然聚合寡糖也具有上述特徵。
相較市面上出現的單純多糖類的藥物組合，發明人認為還可將制 得的多糖和寡糖進行調配組合，將分別經由本發明製備方法獲得的各 菌種的天然聚合多糖和天然聚合寡糖經適宜的組合，可針對各種不同 病毒引發的各種疾病進行有效防治，組分間具有協同相加作用，達到 治療和保健功效的最大化。
本發明方法中能先後提取多糖和寡糖，工藝簡便，投入設備少，
能源消耗低，並且，由於純度高，收得率高多糖純度>70%，收得率 為1.2% ~ 2. 5%,寡糖純度>75%，收得率為1%。~1.5%。。相對使得 原材料和作為提取溶劑的乙醇用量少，生產成本僅為現有技術的八分 之一。工藝操作中，無添加任何防黴、殺蟲劑等化學物質，屬天然成 分，符合國際"綠色食品，，的要求。它適合於人體長期食用，無毒副 作用，可根據通過向培養基質內添加由不同的抗病毒藥食植物組方制 得的藥食植物多糖，以及針對不同的病毒性疾病選取合適的食用菇類 菌種製備出各菇類菌種的天然聚合多糖和天然聚合寡糖；進一步的， 可再根據需要將天然聚合多糖和天然聚合寡糖的粉末進行調配，作為 替代抗生素的保健食療產品，易於口服、易於吸收、療效佳，'具有廣 闊的市場前景。
實施例1
一、原料的準備
1. 菌種靈芝、猴頭菇、香菇、冬蟲夏草復壯後的試管種。
2. 抗病毒的藥食植物原料組方刺五加皮1000克、絞股蘭800 克、綠茶400克、洋蔥1000克、竹夢800克、枸杞1000克，.總量為 5000克，要求富硒野生採挖的、無蟲蛀無黴變的原料。
3. 培養基質的前期處理
(1) 原料玉米1000克，要求富硒地區農家肥種植的無蟲蛀無 黴變的玉米為原料。
(2) 製備方法將備用的玉米倒入1°/。的石灰溶液(上清液)中 浸泡24 - 36小時後，以殺滅玉米中黴菌和害蟲，倒出浸泡液，將玉米 在清水中反覆衝洗，使酸鹼度PH達到6-7，然後泣幹多餘水分，吹乾 表面水分後，備用。
4. 提取溶劑的配製
(l)原料玉米或穀物釀製的95度食用酒精、玉米或穀物釀製 的65度糧食酒。
(2 )配製取玉米或穀物釀製食用酒精與玉米等釀製的糧食酒按 重量比4: 1進行混合，綜合後酒度為88 ~ 90度，加入酒用活性炭攪拌 均勻，過濾、靜置48小時後，抽取上清液，製成提取溶劑備用。 二、製備方法
1.藥食植物多糖提取的製作方法
將抗病毒的藥食植物原料按上述重量分別裝入不鏽鋼容器中，加 入三倍重量的過濾自來水，加溫，使水溫在85。C中，保持85 100分 鍾，倒出提取液，再加入同等量的過濾自來水，仍保持水溫在85。C, 維持60分鐘，倒出第二次提取液，棄渣；將兩次提取液合併，過濾後， 加溫濃縮，濃縮至約l/3時，離火，將容器放入冷水冷卻，4~6小時 後，抽取上清液，在上清液中加入60公斤的提取溶劑，攪拌均勻，約 1 2分鐘產生細末狀沉澱物，靜置4小時後，抽取上清液，再用提取
溶劑衝洗沉澱物2-3次，收取沉澱物，泣幹溶液，在85。C的鼓風乾 燥箱中烘乾、粉碎、過80目篩，製得藥食植物多糖(純度為40-50 % ，收得率為1 % - 1. 5 % )，備用。
2. 菌化培養
將上述備用的玉米加入10克的白糖、1克的食用純鹼和60克的 藥食植物多糖粉，攪拌均勻，堆放10分鐘後，讓其充分溶解、吸收後， 分別裝入400 - 650克的廣.口玻璃瓶中，洗淨瓶外雜物，用塑料布和紙 封口，在高壓鍋(1.25kg壓力/40分鐘)和常壓滅菌鍋中上氣後保持 8小時進行殺菌，冷卻後，放入無菌接種箱中，按食用菌操作方法， 分別接入靈芝、猴頭菇、香菇、冬蟲夏草的試管菌種(菌絲長滿全瓶 後，可繼續轉接擴大)，在20-28。C恆溫中培育30天左右，待白色的 菌絲體長滿全部培育基後，分別掏出、烘乾，備用。培養時，若瓶中 出現黃、黑、綠等雜色時應及時清除。
3. 深化提取製作
(1)天然聚合多糖的提取
將各種食用菌種培育出的備用的菌絲體原料分別倒入不鏽鋼容器 中，加入菌絲體原料3倍量的過濾自來水後，加溫，使水溫在85。C中 保持85 ~ 100分鐘，倒出第一次提取液，再加入3倍量的過濾自來水 後，使水溫在85度中，保持85 100分鐘，倒出第二次提取液，棄渣。 將兩次提取液合併後過濾，加溫濃縮至三分之一時，離火，將容器放 入冷水中冷卻靜置24小時後，抽取上清液，在上清液中倒入4倍量的 提取溶劑，攪拌，約1 2分鐘產生黃白色粉末狀多糖沉澱物，靜置4 小時後，倒出醇提液，收取沉澱物，再用提取溶劑衝洗2 3次，泣幹 溶劑後，分別在85。C的鼓風烘乾機中烘千、粉碎、過80目篩後分別 獲得靈芝、猴頭菇、香菇、冬蟲夏草的粉末狀天然聚合活性多糖，多 糖純度>70%,收得率為1.2% -2.5%。提取多糖後的醇提液按不同 菌種分別貯存陶資酒罐中，靜置60 - 100天，備用。
(2 )天然聚合寡糖的提取 將上述備用的各食用菇類菌種醇提液抽取上清液，分別在酒用回 收罐中進行回收乙醇，回收量達到五分之三時，停止回收，將回收乙 醇後的剩餘溶液加溫濃縮至粘瓢(即至剩餘溶液總量的約三分之一) 時，離火，在冷水中冷卻，靜置24小時後，抽取上清液，倒入6倍量 的提取溶劑，攪拌，約2 3分鐘時溶液中出現褐色細末反應沉澱物， 靜置12小時後，倒出醇提液，再用提取溶劑衝洗2 ~ 3次後，將深褐 色粘度強的沉澱物收集，裝入不鏽鋼盤中，分別在85。C的鼓風乾燥箱 中烘乾、粉碎、過80目篩，分別獲得靈芝、猴頭菇、香菇、冬蟲夏草 等的粉末狀天然聚合寡糖，寡糖純度>75%,收得率為1%。-1.5%。。 三、食療組方配比(以1000克產品為計算單位) 用於防治細菌性病毒引起的各種惡性腫瘤及其綜合症狀的食療產 品調配
(1) 配方靈芝天然聚合多糖300克，猴頭菇天然聚合多糖200 克，冬蟲夏草天然聚合多糖IOO克，香菇天然聚合多糖IOO克，靈芝 天然聚合寡糖100克，猴頭菇天然聚合寡糖50克，冬蟲夏草天然聚合 寡糖1GQ克，香菇天然聚合寡糖50克。
(2) 加工加工成膠嚢，每粒O. 6克。
(3) 食用方法口服，每日三次，每次三至五粒，三十天為一療程。
實施例2
一、 原料的準備
1. 菌種靈芝、猴頭菇、冬蟲夏草、巴西蘑菇復壯後的試管種。
2. 抗病毒的藥食植物原料組方絞股藍2000克、綠茶1500克、 洋蔥800克、板藍根700克，總量為5000克。
3. 培養基質同實施例1。
4. 提取溶劑玉米或穀物釀製的90度糧食酒。
二、 製備方法其中，向玉米培養基質中加入的藥食植物多糖粉
為70克，其餘方法同實施例l。
三、食療組方配比(以IOOO克產品為計算單位)
1、防治細菌性病毒引起的愛滋病、非典、禽流感等疾病的食療產
品調配
(1) 配方靈芝天然聚合多糖300克，猴頭菇天然聚合多糖150 克，冬蟲夏草天然聚合多糖150克，巴西蘑菇天然聚合多糖IOO克， 靈芝天然聚合寡糖100克，猴頭菇天然聚合寡糖50克，冬蟲夏草天然 聚合寡糖100克，巴西蘑菇低天然聚合寡糖50克。
(2) 加工將以上原料攪拌均勻後，加工成壓片，每片0. 6克。
(3) 食用方法口服，每日三次，每次三至五粒，三十天為一療程。
實施例3
一、 原料的準備
1. 菌種靈芝、冬蟲夏草、槐栓菌、姬松茸、猴頭菇復壯後的試 管種。
2. 抗病毒的藥食植物原料組方大蒜1000克、板藍根1500克、 綠茶1500克、竹,500克、野菊花500克，總量為5000克。
3. 培養基質同實施例1。
4. 提取溶劑同實施例1。
二、 製備方法其中，向玉米培養基質中加入的藥食植物多糖粉 為40克，其餘同實施例1。
三、 食療組方配比(以IOOO克產品為計算單位) 防治細菌病毒引起的各種肝炎、脂肪肝、肝硬化等疾病食療產品
調配
(1)配方靈芝天然聚合多糖250克，冬蟲夏草天然聚合多糖 200克，槐栓菌天然聚合多糖150克，姬松茸天然聚合多糖100克， 猴頭菇天然聚合多糖100克，靈芝低天然聚合寡糖80克，冬蟲夏草天 然聚合寡糖70克，猴頭菇天然聚合寡糖50克。
(2 )加工將以上原料攪拌均勻後，加工成粉劑，每袋0. 6克。 (3)食用方法口服，每日三次，每次四至六袋，三十天為一療程。
實施例4
一、 原料的準備
1. 菌種猴頭菇、香菇、雲芝、冬蟲夏草、竹蓀菌、灰樹花復壯 後的試管種。
2. 抗病毒的藥食植物原料組方綠茶1500克、大蒜1000克、洋 蔥1GGQ克、刺五加皮8GG克、紅丹參7QG克，總量為5GQ0克。
3. 培養基質同實施例1。
4. 提取溶劑同實施例1。
二、 製備方法同實施例1。
三、 食療組方配比(以IOOO克產品為計算單位) 防治各種細菌病毒性心肌炎、病毒性肺炎、病毒性腸炎疾病的食
療產品調配
(l)配方猴頭菇天然聚合多糖300克，香菇天然聚合多糖150 克，雲芝天然聚合多糖150克，冬蟲夏草天然聚合多糖IOO克，竹蓀 菌天然聚合多糖100克，灰樹花聚合多糖50克，猴頭菇天然聚合寡糖 50克，雲芝天然聚合寡糖3G克，香菇天然聚合寡糖30克，冬蟲夏草 天然聚合寡糖20克，竹蓀菌天然聚合寡糖20克。
(2 )加工將以上原料攪拌均勻後，加工成膠嚢或壓片，每粒(片) 0.6克。
(3)食用方法口服，每日二次，每次四至六粒，三十天為一療程。
實施例5
一、製作原料的準備
1.菌種靈芝、竹蓀菌、冬蟲夏草、茯苓、安絡小皮傘復壯後的 試管種。
2. 抗病毒的藥食植物原料組方綠茶1500克、絞股藍800克、 南瓜800克、刺五加皮500克、苦瓜500克、紅丹參500克、 枸杞400克，總量為5000克。
3. 培養基質小麥1000克，製備方法同實施例l。
4. 提取溶劑同實施例2。
二、 製備方法同實施例l。
三、 食療組方配比(以IOOO克產品為計算單位) 防治心血管疾病、糖尿病、肥胖症及其綜合症狀食療產品調配
(l)配方靈芝天然聚合多糖300克，竹蓀菌天然聚合多糖200 克，冬蟲夏草天然聚合多糖150克，茯茶天然聚合多糖IOO克，安絡 小皮傘天然聚合多糖100克，靈芝天然聚合寡糖80克，竹蓀菌天然聚 合寡糖30克，安絡小皮傘天然聚合寡糖20克，冬蟲夏草天然聚合寡 糖20克。
(2 )加工將以上原料攪拌均勻後，加工成膠嚢或壓片，每粒(片) 0. 6克。
(3)食用方法口服，每日二次，每次四至六粒，早晚八時服用， 三十天為一療程。
實施例6
一、 原料的準備
1. 菌種猴頭菇、靈芝、冬蟲夏草、金針菇、茯苓復壯後的試管 種。
2. 抗病毒的藥食植物原料組方綠茶2000克、竹筍1000克、枸 杞1000克、木香200克、山藥800克，總量為5000克。
3. 培養基質小麥1000克，製備方法同實施例l。
4. 提取溶劑同實施例1。
二、 製備方法同實施例1。
三、 食療組方配比(以IOOO克產品為計算單位)
防治螺旋桿菌病毒引起的消化道腫瘤、陳舊性胃潰瘍、胃炎及其
綜合症狀的食療產品調配
(l)配方猴頭菇天然聚合多糖400克，靈芝天然聚合多糖150 克，冬蟲夏草天然聚合多糖IOO克，金針菇天然聚合多糖100克，茯 蒼天然聚合多糖100克，猴頭菇天然聚合寡糖100克，靈芝天然聚合 寡糖50克。
(2 )加工將以上原料攪拌均勻後，加工成膠嚢或壓片，每粒(片) 0.6克。
(3)食用方法口力l，每日三次，每次三至四粒，三十天為一療程。
權利要求
1、一種抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法，其特徵在於，其步驟包括(1)以抗病毒的藥食植物為原料採用水浸提取、酒精醇析提取方法，經收集沉澱物、烘乾、粉碎獲得藥食植物多糖；(2)將上述藥食植物多糖直接添加到培養基質中拌勻，然後按照食用菌操作方法，在培養基質內接入各食用菇類菌種後送入培養室內進行培育，將培育出的的白色菌絲體取出後烘乾；(3)分別以上述各食用菇類菌種培育出的白色菌絲體為原料，採用水浸提取、酒精醇析提取方法，收集沉澱物、烘乾、粉碎獲得天然聚合多糖；再將提取天然聚合多糖後的醇提液貯存靜置、沉澱後，抽取上清液回收乙醇，以回收乙醇後的剩餘溶液為原料，進行濃縮、過濾、再採用酒精醇析方法，收集沉澱物、烘乾、粉碎獲得天然聚合寡糖。
2、 如權利要求1所述的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法， 其特徵在於，所述抗病毒的藥食植物由刺五加皮、絞股蘭、綠茶、洋 蔥、竹夢、枸杞組成。
3、 如權利要求1所述的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法， 其特徵在於，所述步驟(2)中培養基質與藥食植物多糖按重量配比為 1000: 40 ~70。
4、 如權利要求1所述的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法， 其特徵在於，所述步驟(2)中培養基質與藥食植物多糖按重量配比為 1000: 60。
5、 如權利要求1所述的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法， 所述培養基質為穀類、薯類或豆類。
6、 如權利要求1所述的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法， 其特徵在於，所述步驟(3 )中提取天然聚合多糖後的醇提液貯存靜置、 沉澱60-100天。
7、 如權利要求1 - 6任一項權利要求所述的抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法，其特徵在於，所述步驟(3)中將以各食用菇類菌種 為原料先後提取的天然聚合多糖與天然聚合寡糖混合後製成可應用於 口服的各種劑型。
全文摘要
本發明公開了一種抗病毒天然聚合多糖、寡糖的製備方法，解決了現有多糖和寡糖製備方法中純度低、產品收得率低、投入資金量大，生產成本極其高昂的問題。本發明以食用菇類菌種為原料，通過生物菌化新工藝技術配合水浸提取、酒精醇析等方法製得純度高、抗病毒功效優異的天然聚合多糖和天然聚合寡糖，進一步的還可製成各種口服膠囊(片)劑或各種口服液/粉末衝劑等不同型號的產品，本方法成本低，產品收得率高，具有廣闊的市場前景。
文檔編號A61K36/06GK101167758SQ20071005377
公開日2008年4月30日 申請日期2007年11月1日 優先權日2007年11月1日
發明者瑾 嚴, 嚴正華 申請人:嚴正華