一種保肝製品的製作方法
2023-10-18 14:48:39 1
一種保肝製品的製作方法
【專利摘要】本發明提供一種保肝製品。所述保肝製品至少包括芝麻提取物和水飛薊提取物，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的重量百分比為1:0.01－0.01：1。本發明還提供了所述保肝製品的製備方法。本發明提供的保肝製品可以較全面地預防由酒精或四氯化碳等化學物質引起的肝臟組織損傷，提高肝臟抵禦化學損傷的能力。
【專利說明】—種保肝製品
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種生物製品，尤其涉及一種保肝製品。
【背景技術】
[0002]肝臟是人體重要的排毒器官，經人體腸道等消化系統所吸收的有毒物質，通過肝臟解毒後變為無毒物質，再經過膽汁或尿液排出體外。肝臟功能損傷會直接威脅者人體健康，在諸多引起肝臟損傷的因素中，化學物質造成的肝臟損傷越來越引起人們的關注。可引起肝損傷的化學物質包括酒精、環境中的化學毒物等。
[0003]研究發現，酒精對肝臟的損傷是由於過量酒精進入人體後，在代謝過程產生大量的NADH (菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸)和NADP+ (菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷磷酸鹽)，而NADH的增加促進脂質的合成，從而導致脂肪肝；同時，酒精代謝過程中還會產生大量代謝產物乙醛，為了消除乙醛的毒副作用，需要消耗大量的穀胱甘肽(GSH)，造成抗氧化物質穀胱甘肽(GSH)含量的下降，最終破壞細胞內氧化還原穩態並誘導氧化應激，產生大量不能有效去除的活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS),包括超氧陰離子(02_)、輕自由基(OH)和過氧化氫(H2O2)等，這些氧化應激可能會引起線粒體功能障礙、脂質過氧化以及蛋白質改性，從而進一步導致肝細胞的死亡、炎症反應的發生、以及星形細胞的活化等。
[0004]環境中的化學毒物，如四氯化碳，在人體內代謝會產生一種氧化能力很強的中間產物，導致生物膜上的脂質過氧化，破壞膜的磷脂，改變細胞的結構與功能，並幹擾脂蛋白的合成與轉運，形成脂肪肝。由四氯化碳引起的急性肝功能損害患者的血清ALT、AST活性會明顯升高，患者的肝臟嚴重受損時，其血清膽紅素、凝血酶原時間也會明顯升高，血清白蛋白含量則明顯降低。
[0005]多種天然提取物經研究證實對消除或減輕上述化學性肝損傷有益，例如:芝麻提取物和水飛薊提取物等。芝麻提`取物:包括芝麻素，表芝麻素、芝麻林素、芝麻酚和芝麻酚林等，可有效減輕酒精對肝臟的損傷和促進肝臟脂肪代謝，減少肝臟脂肪堆積，例如:抑制血清谷丙轉氨酶(ALT)、穀草轉移酶(AST)、穀胱甘肽轉移酶(GST)，以及提高乙醛脫氫酶(ADHL)的活性，減輕酒精對肝臟的損傷；還可促進乙醛脫氫酶(ADHL)的基因表達，增加乙醇與乙醛的代謝，減輕乙醛的毒性，緩解酒精中毒；另外還可以降低血清中的三酸甘油酯(這是造成脂肪肝的主要脂肪來源)水平，並能通過提高乙醯輔酶A氧化酶的活性，抑制多不飽和脂肪酸的增加，促進脂肪氧化，降低肝臟脂肪的蓄積。此外，還可增加肝臟穀胱甘肽(GSH)含量，降低肝臟丙二醛(MDA)含量。水飛薊提取物:包括水飛薊素(包括水飛薊賓(silybin)、異水飛薊賓(isosilybin)、水飛薊寧(siIidianin)和水飛薊丁(silihristin))可有效消除氧自由基，促進肝臟內蛋白質的生物合成減輕氧化應激引起的肝損傷，例如:通過消除氧自由基、抗脂質過氧化和刺激肝細胞內蛋白質的生物合成，促進受損肝細胞的復元；穩定肝細胞膜，保護肝細胞不受損害。此外，水飛薊賓通過增進蛋白質合成促進肝的再生、可抑制肝損傷時生成白細胞三烯(Ieukotriene)和引起炎症反應的前列腺素的生成，具有抗氧化作用、以及預防穀胱甘肽的缺乏等作用。[0006]但是，現有的研究表明單獨使用上述兩種提取物均不能較全面地預防由酒精或四氯化碳等化學物質造成的肝臟功能損傷，尤其是不能較全面防止肝臟的組織學特徵惡化，因此如何提供一種能較全面地預防肝臟功能損傷，尤其是能較全面防止肝臟的組織學特徵惡化的保肝製品成為有待解決的問題。
【發明內容】
[0007]本發明的目的是提供一種保肝製品，通過使用特定比例的芝麻提取物和水飛薊提取物作為活性成分，能較全面預防肝臟功能由於酒精或四氯化碳等化學物質的損傷，尤其是能較全面防止肝臟組織學特徵的惡化。
[0008]本發明提供的一種保肝製品，至少包括芝麻提取物和水飛薊提取物，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的重量百分比為1:0.01 — 0.01:1。
[0009]在本發明的【具體實施方式】中，所述的芝麻提取物可以是專利200610089321.9中所述方法獲得的芝麻素。本發明的芝麻提取物也可以是以芝麻素為主要成分，進一步還可含有表芝麻素、芝麻林素、芝麻酹和芝麻酹林中的一種或多種。
[0010]所述水飛薊提取物可以是專利200910238368.0中所述方法獲得的水飛薊素。本發明的水飛薊提取物也可以是以水飛薊素(包括水飛薊賓和異水飛薊賓)主要成分，進一步還可含有水飛薊亭、水飛薊寧、水飛薊賓葡甲胺鹽和水飛薊賓二偏琥珀酸酯鈉中的一種或多種。
[0011]在本發明方案中，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總重佔所述保肝製品0.lwt%-25wt%o
[0012]進一步的，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總量佔所述保肝製品5wt%_25wt%。
[0013]進一步的，所述保肝制`品還包括:五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一種或多種。所述五味子提取物為五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲或五味子酯乙。所述五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物均可通過商購獲得，或者通過水浸提取獲得，水浸提取的條件一般可以是:溫度90°C，浸提時間為3小時，浸提過程的液固質量比為15:1。
[0014]在本發明的方案中，所述芝麻提取物、水飛薊提取物、五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一種或多種均可用作本發明保肝製品的活性成分(即有效成分)。
[0015]進一步的，本發明提供的保肝製品可以保肝藥品或保肝食品。
[0016]進一步的，所述保肝藥品還包括醫藥學上可接受的賦形劑。更進一步的，所述保肝藥品的製劑形式可以為硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、粉劑、懸浮液、糖漿、口服液或注射液。進一步的，所述片劑可以為普通片劑、分散片或泡騰片。
[0017]在本發明的一個【具體實施方式】中，本發明的保肝藥品的有效成分包括芝麻提取物和水飛薊提取物的組合，該保肝藥品的每日劑量取決於多種因素:例如根據個體攝入的酒精或接觸的四氯化碳等化學物質的量，可以每天向個體施用含有治療有效量(有效成分的總量)為10-5000mg的保肝藥物，本領域技術人員根據需要確定保肝藥物的劑量，只要能較全面地預防由酒精或四氯化碳引起的肝損傷，尤其是能較全面防止肝臟的組織學特徵惡化即可。[0018]所述保肝藥品的每日劑量當然也可以根據個體已經產生的肝臟損傷(由酒精或四氯化碳等化學物質引起)的程度(例如:脂肪肝的嚴重性)、個體的年齡、身體條件、併發症等進行適當調整。通常可以每天向肝臟損傷個體施用含有治療有效量為10-5000mg的保肝藥物。進一步的，對於輕度肝臟損傷個體施用含有治療有效量為10-400mg的保肝藥物。對於中度肝臟損傷的個體施用含有治療有效量為500-2000mg的保肝藥物。對於重度肝臟損傷個體施用含有治療有效量為2500-5000mg的保肝藥物。以實現緩解或預防酒精或四氯化碳引起的肝損傷，提高肝臟抵禦化學損傷的能力。
[0019]進一步的，所述保肝藥品可以是單位製劑。所述單位製劑為滿足一次給藥所需有效成分的製劑，常見的單位製劑如一單位(片)片劑、一單位(針)針劑或粉針劑等。所述單位製劑中含有10-5000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。進一步的，所述單位製劑中含有10-400mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。更進一步的，所述單位製劑中含有500-2000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。更進一步的，所述單位製劑中含有2500-5000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。
[0020]在本發明的一個實施方式中，以注射方式施用含有治療有效量的所述保肝藥品。更好地是對患者以單位製劑的劑量給藥，所述單位製劑為滿足一次給藥所需有效成分的製劑，常見的單位製劑如一單位(片)片劑、一單位(針)針劑或粉針劑等。患者一次施用所需的藥物的量可以方便地通過計算患者的體重和該患者一次用藥所需單位體重劑量的乘積得到。例如，在製備藥物的過程中，一般認為成人體重為50-90kg，可以最初可以通過實驗動物與人的單位體重劑量之間的等效劑量換算關係來確定用藥量。例如，可以根據FDA、SFDA等藥品管理機構提出的指導意見，也可參考(黃繼漢等，「藥理試驗中動物間和動物與人體間的等效劑量換算」，《中國臨床藥理學與治療學》，2004S印;9 (9):1069-1072)來確定。在本發明的實施方式中，可以使用按照人和大鼠的體表面積折算係數0.018來換算人和大鼠的劑量。根據本發明實施方式，所述保肝藥品中的芝麻提取物和水飛薊提取物每次以5-200mg/kg大鼠劑量施用至大鼠時治療效果較好，當以10-100mg/kg大鼠劑量，例如100mg/kg、50mg/kg,以及10mg/kg大鼠劑量施用至大鼠時治療效果更佳。製藥商可以根據上述換算方法得到用於人的單位製劑中的有效成分含量，用以應用於其製藥過程中。
[0021]在本發明的技術方案中，根據等效劑量換算關係以及人的常規體重，並且綜合用藥安全、成本和藥效，優選的，所述單位製劑中含有20-800mg的所述芝麻提取物和水飛薊提取物，更優選含有40-450mg的所述芝麻提取物和水飛薊提取物。
[0022]進一步的，所述保肝食品中還可以含有果糖和/或奶製品。
[0023]所述果糖可通過添加含有果糖成分的果葡糖漿、結晶果糖、蜂蜜等方式實現，添加量可以為根據保肝食品的口感以及風味的需要適當選擇。在所述保肝食品中加入果糖除了可以改善保肝食品的風味外，還可以加快乙醇的代謝，有防醉、解酒和保護肝臟的作用。
[0024]所述奶製品可以鮮奶、酸奶或奶酪。所述酸奶可以由長雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌中的一種或多種發酵獲得的酸奶。所使用到的各種益生菌均為可商購獲得的益生菌，發酵方法採用本領域常規的發酵方法。
[0025]進一步的，本發明提供的所述保肝食品包括:含有上述活性成分的糖果、口香糖、奶含片、奶球、奶條或奶提子等產品。這些產品採用本領域已知的工藝進行製備。所述保肝食品還可以是保肝飲料，包括固體飲料和液體飲料。
[0026]本發明提供的保肝食品中活性成分(包括芝麻提取物和水飛薊提取物)的量可以視目的(預防或健康促進)而定適當地確定。通常，可以將芝麻提取物和水飛薊提取物(芝麻提取物與水飛薊提取物的重量百分比為1:0.01 - 0.01:1)以0.lwt%-25wt%、優選5wt%-25wt%的總量添加到所述保肝食品中。
[0027]本發明還提供了上述保肝製品的製備方法，包括在製備過程添加重量百分比為1:0.01 - 0.01:1芝麻提取和水飛薊提取物。
[0028]本發明提供的保肝製品和其製備方法的具有以下優點:
[0029]1、本發明的保肝製品具有突出的抑制酒精或四氯化碳引起的膽管增生、肝臟炎症肝損傷的作用，以及抑制肝臟中丙二醛含量的升高的作用，可以較全面防止由於酒精或四氯化碳等化學物質引起的肝臟功能損傷，尤其是能預防肝臟的組織學特徵的惡化。
[0030]2、本發明的保肝製品可以含有酸奶，酸奶能在胃腸黏膜表層形成一層生物活性保護膜(酒精防護牆)，把酒精和胃腸黏膜隔離開來，有效減少人體對酒精的吸收，有效地保護腸胃不受乙醇的直接刺激，並激活腸胃的自我防禦修復系統，使有害物質對器官的傷害降至最低；另外，酸奶中益生菌所產生的乙醇脫氫酶(ADH)和乙醛脫氫酶(ADHL)，可促進酒精分解，減輕對肝臟的毒害；並且益生菌產生的VB1、VB2、VB6、VB12等對解酒有利；同時益生菌發酵後產生的乳酸可有效地提高鈣的利用率，也有利於解酒，並提高腎臟細胞的活力和功能，快速排除體內的酒精及其衍生物和其它有毒物質。
[0031]3、本發明的保肝製品可以含有果糖，除了可以改善製品的風味外，還可以加快乙醇的代謝，有防醉、解酒和保護肝臟的作用。
【具體實施方式】
[0032]下文，本發明將通過實例來更詳細地描述。然而，以下實例僅用於理解本發明且其並不限制本發明。以下實施例中如無特別說明，所述的芝麻提取物為專利200610089321.9中所述方法獲得的芝麻素，所述水飛薊提取物為專利200910238368.0中所述方法獲得的水飛薊素。
[0033]實施例1動物實驗
[0034]一.實驗材料
[0035]1、動物:購自內蒙古大學實驗動物研究中心的60隻雄性大鼠(SD種)(平均體重=120-130g)。
[0036]2、藥物、試劑及儀器:
[0037]陽性藥物1:芝麻提取物；陽性藥物2:水飛薊提取物。
[0038]橄欖油和CCL4均商購獲得。
[0039]3、分組及藥物劑量
[0040]將上述60隻大鼠隨機分為6組，大鼠每組10隻，分別為:
[0041]I)空白對照組(施用橄欖油)；2)模型組(施用橄欖油和CCL4)；
[0042]3)陽性藥物組I (施用橄欖油和CCL4,以及表1-3中相應劑量的芝麻提取物)；陽性藥物組2 (施用橄欖油和CCL4,以及表1-3中相應劑量的水飛薊提取物組)；
[0043]4)高劑量組、5)中劑量組、6)低劑量組(施用橄欖油和CCL4,以及表1_3中相應治療有效量的保肝藥品)。
[0044]二、實驗過程
[0045]實驗第I天，空白對照組腹腔注射0.75ml/kg大鼠體重的橄欖油，每周一次，共8周。其餘各組大鼠:模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，陽性藥物組，分別腹腔注射CCL4與橄欖油的混合物，施用量為0.75ml/kg大鼠體重，該混合物中CCL4佔40% (體積)，每周一次，共8周。在上述對除空白對照組以外的各組大鼠進行腹腔注射CCL4與橄欖油的混合物的同一天，對高、中、低劑量組分別施用相應劑量的保肝製品一次，對陽性藥物組1，2分別施用相應的陽性藥物一次。
[0046]最後一次給藥結束後，對空白對照組，模型組，高、中、低劑量組，以及陽性藥物組的大鼠停止供食12小時，然後分別腹腔注射10%水合氯醛進行麻醉，取血收集血清，根據試劑盒的操作要求檢測血清中AST和ALT值。
[0047]收集完血清後，將大鼠肝使用冰生理鹽水清洗組織表面，濾紙吸乾，製備肝組織勻漿:取左葉肝組織10%勻漿，以3000rpm離心10分鐘，取上清液，根據試劑盒的操作要求檢測肝組織中SOD、GPX、GSH、MDA水平。
[0048]將剩餘的肝組織置於10%中性福馬林溶液中固定24小時，常規石蠟包埋，4μ m切片，HE染色，光學顯微鏡下進行肝臟的組織學特徵檢查，包括:檢查肝臟膽管增生、肝臟炎症、肝臟脂肪細胞變性、肝臟細胞壞死以及肝臟纖維化的情況等。由輕到重的程度分別標記為I分，2分，3分，4分，無明顯病變為O分，極輕度病變為0.5分，累加所有分數，並計算出每組每隻動物的均分(土SD)，分值越高提示病變程度越重。對病變評分結果進行兩個樣本比較的秩和檢驗，與模型組進行比較。
[0049]三、數據處理:對所有數據進行數據處理，對病理學評分採用秩和檢驗，其他數據採用t檢驗，並統計分析結果。`
[0050]四、結果如表1-3所示
【權利要求】
1.一種保肝製品，其特徵在於，至少包括活性成分芝麻提取物和水飛薊提取物，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的重量為1:0.0l — 0.0l:1。
2.根據權利要求1所述的保肝製品，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總重佔所述保肝製品 0.lwt%-25wt%o
3.根據權利要求1所述的保肝製品，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總量佔所述保肝製品 5wt%-25wt%。
4.根據權利要求1所述的保肝製品，還包括:五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一種或多種。
5.根據權利要求1-4任一項所述的保肝製品，所述保肝製品為保肝藥品或保肝食品。
6.根據權利要求5所述的保肝製品，所述保肝藥品還包括醫藥學上可接受的賦形劑。
7.根據權利要求5所述的保肝製品，所述保肝藥品的製劑形式為硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、粉劑、口服液或注射液。
8.根據權利要求7所述的保肝製品，所述保肝藥品為單位製劑，所述單位製劑中含有10-5000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。
9.根據權利要求5所述的保肝製品，所述保肝食品中還含有果糖和/或奶製品。
10.根據權利要求9所述的保肝`製品，所述奶製品為鮮奶、酸奶或奶酪。
【文檔編號】A61K31/357GK103446212SQ201310411115
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年9月11日 優先權日:2013年9月11日
【發明者】王鼎, 趙永強, 孫立, 廖小雪 申請人:白心亮