含有adp受體拮抗劑和硝酸酯類藥物的組合物的製作方法

2023-10-10 04:55:24 1

專利名稱：含有adp受體拮抗劑和硝酸酯類藥物的組合物的製作方法
技術領域：
本發明屬於新的西藥複方。

背景技術：
硝酸酯類藥物是用於治療心肌缺血性疾病療效最為確切的藥物，它包括硝酸甘油、單硝酸異山梨酯、硝酸異山梨酯、戊四硝酯等。此類藥物現在仍然是臨床上最為常用的治療心肌缺血性疾病的藥物。單硝酸異山梨酯是硝酸酯類藥物的典型代表，它是硝酸異山梨酯的代謝產物之一。其特點是無肝臟首過效應，經胃腸道吸收完全而迅速，生物利用度幾乎達100％。適用於冠心病的長期治療和預防心絞痛的發作，也適用於心肌梗死後的治療和肺循環高血壓的治療。
血小板激活後的聚集是凝血系統最為重要的啟動因子，血栓的形成參與了很多的心腦血管系統疾病的發生和發展。在冠狀動脈硬化發生之後，冠脈內血栓的形成極易誘發心肌缺血和心絞痛的發作。ADP受體在血小板聚集中佔有十分重要的地位。氯吡格雷和日本三共製藥公司、Ube公司共同開發的Prasugrel(CS-747，LY640315)均具有很強的抗血小板活性。這兩種藥物在作用機制上均是通過阻斷ADP受體而起作用的，用來防止由血小板表面的二磷酸腺苷受體被封閉而導致的血小板激活。對於需要接受經皮冠狀動脈介入(PCI)手術的急性冠心病患者，氯吡格雷和Prasugrel可以有效的預防圍術期和術後的缺血性事件發生。
阿司匹林通過抑制TXA2的合成而具有弱的抗血小板作用。小劑量的阿司匹林在臨床上用於預防老年冠心病和腦中風患者的血栓形成，療效確切。阿司匹林和單硝酸異山梨酯的複方製劑現已應用於臨床，對於預防冠心病患者急性心肌缺血的發生具有較好的作用。阿司匹林和氯吡格雷、Prasugrel等ADP受體拮抗劑抗血小板的作用機理完全不同，對於ADP受體拮抗劑和單硝酸異山梨酯聯合使用在預防冠心病患者心肌缺血的發生是否具有很好的效果，尚不能夠得知，二者合用對於患者的安全性也沒有考察過。


發明內容
氯吡格雷現在已經應用於臨床。Prasugrel，其化學名稱為2-乙醯氧基-5-(α-環丙基羰基-2-氟苄基)-4，5，6，7-四氫噻吩並[3，2-c]吡啶，已經進入III期臨床。我們根據CN1041730C所公開的化合物結構式，合成了Prasugrel以及其可藥用的鹽，並對氯吡格雷和Prasugrel等ADP受體拮抗劑與單硝酸異山梨酯聯合使用的協同性效果進行了大量系統的研究。我們的實驗結果表明，在大鼠體內血栓形成實驗中，單硝酸異山梨酯可以增強ADP受體拮抗劑的抗血栓形成作用，而且其抗血栓形成效果要顯著優於單硝酸異山梨酯和阿司匹林聯合用藥；在大鼠血瘀模型加小劑量垂體後葉素所致的急性心肌缺血實驗中，單硝酸異山梨酯和ADP受體拮抗劑取得了顯著的協同性作用，而且其效果也明顯優於阿司匹林和單硝酸異山梨酯聯用。

具體實施例方式 實施例1 氯吡格雷、Prasugrel與單硝酸異山梨酯聯用對大鼠體內血栓形成的影響 實驗目的觀察氯吡格雷、Prasugrel分別與單硝酸異山梨酯聯合使用對大鼠體內血栓形成的影響。
實驗材料 氯吡格雷購自北京恆天易德化工有限公司； Prasugrel魯南製藥集團科研部有機合成實驗室合成； 單硝酸異山梨酯魯南製藥集團貝特公司生產。
SD大鼠魯南製藥集團山東新時代藥業有限公司動物中心提供。
主要儀器BT87-3型實驗性體內血栓形成儀，包頭醫學院電器維修科技開發部製造。
實驗方法 取健康大鼠70隻，體重180-230g，雌雄各半，按體重隨機分為下列7組 模型對照組，給予生理鹽水灌胃； 氯吡格雷組，給予氯吡格雷8mg/kg灌胃； Prasugrel組，給予Prasugrel 1.5mg/kg灌胃； 單硝酸異山梨酯組，給予單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃； 氯吡格雷聯合用藥組，給予氯吡格雷8mg/kg和單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃； Prasugrel聯合用藥組，給予Prasugrel 1.5mg/kg和單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃； 阿司匹林聯合用藥組，給予阿司匹林1.5mg/kg和單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃。
上述動物在灌胃後40min，腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，分離一側頸總動脈，用BT87-3型實驗性體內血栓形成儀刺激頸動脈，刺激電流1.5mA，刺激時間為7分鐘，觀察頸動脈血流阻塞時間(即血栓形成時間OT)。
結果表明，與模型對照組相比較，單硝酸異山梨酯組對大鼠血栓形成時間有延長的趨勢，其他各用藥組可使大鼠血栓形成時間明顯延長，其中，氯吡格雷聯合用藥組和Prasugrel聯合用藥組的血栓形成時間延長最為顯著，且明顯優於單獨用藥的氯吡格雷組或Prasugrel組。具體結果見表1。
表1，氯吡格雷、Prasugrel分別與單硝酸異山梨酯聯合使用對大鼠體內血栓形成的影響 **與模型對照組相比較，P＜0.01. §§與單硝酸異山梨酯組相比較，P＜0.01. ※※與氯吡格雷組相比較，P＜0.01. ★★與Prasugrel組相比較，P＜0.01. &&與阿司匹林聯合用藥組相比較，P＜0.01. 我們將實施例1中所使用的單硝酸異山梨酯用硝酸異山梨酯、硝酸甘油或戊四硝酯代替，同樣取得了很好效果，與ADP受體拮抗劑取得了顯著的協同性作用。
實施例2 氯吡格雷、Prasugrel與單硝酸異山梨酯聯用對血瘀模型大鼠小劑量垂體後葉素所致急性心肌缺血的保護作用 實驗目的觀察氯吡格雷、Prasugrel分別與單硝酸異山梨酯聯合使用對血瘀模型大鼠小劑量垂體後葉素所致急性心肌缺血的保護效應。
實驗材料 FX-211型單道自動心電圖機北京福田公司生產； 氯吡格雷購自北京恆天易德化工有限公司； Prasugrel魯南製藥集團科研部有機合成實驗室合成； 單硝酸異山梨酯魯南製藥集團貝特公司生產。
SD大鼠魯南製藥集團山東新時代藥業有限公司動物中心提供。
垂體後葉素上海生物化學製藥廠生產。
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒購自南京建成生物工程研究所；激酸激酶MB亞型(CK-MB)試劑盒由Rapid Diagnostics，Inc.，Division of MP Biomedicals Inc.公司生產。
實驗方法取健康大鼠80隻，體重180-230g，雌雄各半，按體重隨機分為下列8組 正常對照組、模型對照組、氯吡格雷組、Prasugrel組、單硝酸異山梨酯組、氯吡格雷聯合用藥組、Prasugrel聯合用藥組和阿司匹林聯合用藥組。
其中，正常對照組，每天灌胃同體積的生理鹽水，連續7d；模型對照組，每天灌胃同體積生理鹽水，連續7d，第7天皮下注射鹽酸腎上腺素(Adr)8μg(8ml)/kg共2次，兩次間隔4h，在2次注射腎上腺素之間(第一次注射後2h)將大鼠浸入冰水內5min。處置後停食，次日上午腹腔注射腦垂體後葉素10U/kg，正常對照組腹腔注射等體積的蒸餾水。其它各用藥組在給予垂體後葉素前12小時和1小時兩個時間點分別給予各組相對應的藥物。氯吡格雷組，給予氯吡格雷8mg/kg灌胃；Prasugrel組，給予Prasugrel 1.5mg/kg灌胃；單硝酸異山梨酯組，給予單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃；氯吡格雷聯合用藥組，給予氯吡格雷8mg/kg和單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃；Prasugrel聯合用藥組，給予Prasugrel1.5mg/kg和單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃；阿司匹林聯合用藥組，給予阿司匹林1.5mg/kg和單硝酸異山梨酯2.0mg/kg灌胃。
在造血瘀模型之前以及腹腔注射垂體後葉素誘發心肌缺血後2min、5min、8min、15min，用FX-211型單道自動心電圖機記錄心電圖，以T波上升≥50％、T波變低平、雙向、倒置作為心肌缺血指標，用ST-T的振幅變化率來表示心肌缺血的嚴重程度。5小時後，斷頭處死大鼠，取血4ml，3000r/min離心30分鐘。按照試劑盒說明書中的方法檢測血清中乳酸脫氫酶(LDH)和激酸激酶MB亞型(CK-MB)的活性。
所有實驗結果資料用均數±標準差(x±s)表示，多組間比較用方差分析。
實驗結果 藥物對心肌缺血大鼠心電圖ST-T振幅變化率的影響比較見表2。與模型對照組相比較，氯吡格雷聯合用藥組和Prasugrel聯合用藥組在腹腔注射垂體後葉素2min後心電圖的ST-T振幅變化率小於模型對照組(P＜0.01)；氯吡格雷組、Prasugrel組和單硝酸異山梨酯組在腹腔注射垂體後葉素15min後心電圖的ST-T振幅變化率小於模型對照組(P＜0.05)；阿司匹林聯合用藥組在腹腔注射垂體後葉素8min後心電圖的ST-T振幅變化率小於模型對照組(P＜0.01)； 由表中的數據可以看出，氯吡格雷聯合用藥組和Prasugrel聯合用藥組在5min和8min兩個時間點上，氯吡格雷和單硝酸異山梨酯聯合使用，Prasugrel和單硝酸異山梨酯聯合使用對心肌缺血大鼠心電圖ST-T振幅變化率的抑制作用取得了顯著的協同性作用。這就充分表明，氯吡格雷和單硝酸異山梨酯聯合使用，Prasugrel和單硝酸異山梨酯聯合使用對急性心肌缺血取得了顯著的協同性作用，並且其效果要顯著優於阿司匹林聯合用藥組。具體實驗結果見表2。
表2.藥物對心肌缺血大鼠心電圖ST-T振幅變化率的影響比較(x±s) *與模型對照組相比較，P＜0.05. **與模型對照組相比較，P＜0.01. §與單硝酸異山梨酯組相比較，P＜0.05. §§與單硝酸異山梨酯組相比較，P＜0.01. ※與氯吡格雷組相比較，P＜0.05. ※※與氯吡格雷組相比較，P＜0.01. ★與Prasugrel組相比較，P＜0.05. ★★與Prasugrel組相比較，P＜0.01. &與阿司匹林聯合用藥組相比較，P＜0.05. &&與阿司匹林聯合用藥組相比較，P＜0.01. 藥物對心肌缺血大鼠血清中乳酸脫氫酶(LDH)和激酸激酶MB亞型(CK-MB)活性的影響見表3。由表中的數據可以看出，單硝酸異山梨酯、氯吡格雷或Prasugrel分別單獨使用，對血瘀模型大鼠小劑量垂體後葉素所致急性心肌缺血沒有表現出顯著的保護作用，僅單硝酸異山梨酯組的CK-MB活性與模型組相比較有顯著性差異。氯吡格雷聯合用藥組和Prasugrel聯合用藥組在降低血清中LDH活性和CK-MB活性方面取得了顯著的協同性作用，且其保護作用要顯著優於阿司匹林聯合用藥組。
表3.藥物對心肌缺血大鼠血清中LDH和CK-MB活性的影響 *與模型對照組相比較，P＜0.05. **與模型對照組相比較，P＜0.01. §§與單硝酸異山梨酯組相比較，P＜0.01. ※※與氯吡格雷組相比較，P＜0.01. ★★與Prasugrel組相比較，P＜0.01. &與阿司匹林聯合用藥組相比較，P＜0.05.&&與阿司匹林聯合用藥組相比較，P＜0.01. 我們將實施例2中所使用的單硝酸異山梨酯用硝酸異山梨酯、硝酸甘油或戊四硝酯代替，同樣取得了很好效果，與ADP受體拮抗劑取得了顯著的協同性作用。
實施例3 氯吡格雷單硝酸異山梨酯片 氯吡格雷20g 單硝酸異山梨酯 10g 甘露醇 10g 乳糖40g 微晶纖維素 20g 6％PVP的無水乙醇溶液適量 山榆酸甘油酯2g 製備工藝 氯吡格雷和單硝酸異山梨酯分別過100目篩，甘露醇、乳糖、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的氯吡格雷和單硝酸異山梨酯以及甘露醇、乳糖、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP的無水乙醇溶液適量制粒，50℃以下乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯作為潤滑劑，壓片即得。
實施例4 氯吡格雷單硝酸異山梨酯緩釋膠囊 a、 氯吡格雷 30g 空白丸芯 300g 7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g 製備工藝 將氯吡格雷過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度35℃，CYL3bar，CAP10.6bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉盤轉速145rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為95％乙醇)。造粒結束，50℃烘乾，出料。
b、 a中製得的含氯吡格雷小丸 乙基纖維素 50g 硬脂酸 60g 聚乙二醇-40008g 滑石粉 10g 95％乙醇 1000g 製備工藝 將a中製得的含氯吡格雷小丸倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風溫度35℃，入風壓力0.5bar，CYL3bar，CAP1 1.0bar，蠕泵6％，轉盤轉速160rpm，噴入乙基纖維素、硬脂酸和聚乙二醇-6000的95％乙醇溶液。包衣結束，50℃烘乾，出料。
c、 單硝酸異山梨酯 5g 空白丸芯 30g 7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 30g 製備工藝 將單硝酸異山梨酯過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中，開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒。下料速度4rpm，蠕泵12％，轉盤轉速130rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結束，45℃烘乾，出料。
d、將b與c製得的小丸採用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含氯吡格雷與單硝酸異山梨酯的重量分別為30mg和5mg進行填充，即可。
實施例5 氯吡格雷硝酸異山梨酯分散片 氯吡格雷15g 硝酸異山梨酯25g 甘露醇 24g 羥丙基纖維素30g 交聯聚乙烯吡咯烷酮 30g 5％PVPK30水溶液 適量 硬脂酸鎂 0.6g 製備工藝 將處方量的氯吡格雷和硝酸異山梨酯過100目篩，甘露醇、羥丙基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮過80目篩，混勻後加入適量5％PVPK30水溶液制粒，加入硬脂酸鎂後壓片即可。
實施例6 硝酸甘油prasugrel緩釋膠囊 處方A 硝酸甘油溶液 20g 羥丙基澱粉 50g 水溶性澱粉 20g 20％澱粉漿 適量 處方B 鹽酸prasugrel 5g 乙基纖維素 25g 硬脂酸 10g 羧甲基澱粉鈉 30g PVP5g 8％PVPk30無水乙醇溶液 適量 製備工藝 將處方A中的羥丙基澱粉、水溶性澱粉分別過100目篩，混勻、加入處方量的硝酸甘油溶液，再加20％澱粉漿適量制粒，50℃以下烘乾，18目篩整粒，將處方B中的prasugrel、乙基纖維素、硬脂酸、羧甲基澱粉鈉、PVP分別過100目篩，混勻、加8％PVPk30無水乙醇溶液適量制粒，烘乾，整粒。將處方A和處方B按重量比1∶1進行膠囊填充即可。
實施例7 戊四硝酯prasugrel緩釋片 戊四硝酯60g prasugrel 8g 乳糖 30g 羥丙基甲基纖維素-15M 20g 8％PVP的95％乙醇溶液 適量 山榆酸甘油酯 2g 製備工藝 戊四硝酯和prasugrel分別過100目篩，乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M過80目篩，分別按照處方量稱取，混合均勻，加入8％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。壓片即得。
實施例8 單硝酸異山梨酯prasugrel膠囊 單硝酸異山梨酯 15g 馬來酸prasugrel3g 預膠化澱粉 20g 微晶纖維素 20g 羧甲基澱粉鈉 10g 10％澱粉漿 適量 製備工藝 將處方中的單硝酸異山梨酯、prasugrel、預膠化澱粉、微晶纖維素和羧甲基澱粉鈉分別過100目篩，按處方量稱取，混勻、加10％澱粉漿適量制粒，55℃以下烘乾，18目篩整粒，膠囊充填即可。
實施例9 單硝酸異山梨酯prasugrel注射液 單硝酸異山梨酯4.0g 硫酸prasugrel 4.0g 丙二醇200ml 加注射用水至總量 1000ml 製備工藝 將處方量的單硝酸異山梨酯和prasugrel溶解於適量的丙二醇和注射用水的混合液中，加注射用水至注射液總量為1000ml，調pH值4.0-6.0，過濾，分裝即可。
權利要求
1.一種用於治療心肌缺血性疾病的藥物組合物，其特徵在於它含有硝酸酯類藥物和二磷酸腺苷受體拮抗劑。
2.如權利要求1所述的二磷酸腺苷受體拮抗劑，其特徵在於它是氯吡格雷、Prasugrel或其鹽。
3.如權利要求1所述的硝酸酯類藥物，其特徵在於它是硝酸甘油、單硝酸異山梨酯、硝酸異山梨酯或戊四硝酯。
4.如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於它是口服的固體製劑。
5.如權利要求4所述的口服固體製劑，其特徵在於它是片劑、膠囊、分散片、緩釋片、緩釋膠囊或注射液。
全文摘要
本發明通過藥理試驗證實了硝酸酯類藥物可以增強ADP受體拮抗劑的抗血栓形成作用，而且其抗血栓形成效果要顯著優於硝酸酯類藥物和阿司匹林聯合用藥；硝酸酯類藥物和ADP受體拮抗劑取得了顯著的協同性作用，而且其效果也明顯優於阿司匹林和單硝酸異山梨酯聯用。
文檔編號A61K9/52GK101028517SQ200610044408
公開日2007年9月5日 申請日期2006年3月2日 優先權日2006年3月2日
發明者趙志全 申請人:魯南製藥集團股份有限公司