一種藍萼甲素的純化方法
2023-10-26 11:54:27 2
專利名稱：一種藍萼甲素的純化方法
技術領域：
本發明屬於天然藥物化學領域，特別涉及一種藍萼甲素的純化方法。
背景技術：
藍萼甲素(glaucocalyxin A)為貝殼杉烯型的ニ職類化合物，CAS號79498-31-0，分子式C2tlH28O4,分子量332. 43，分子結構
H3C CH3 藍萼香茶菜為唇形科香茶菜屬植物，又叫香茶菜、山蘇子、回菜花、倒根野蘇。以全草入藥，具有清熱、除溼、解毒之功效，用於感冒、咽喉腫痛、扁桃體炎、胃炎、肝炎、乳腺炎、癌症(食道癌、賁門癌、肝癌、乳腺癌)。現在研究發現藍萼香茶菜中含有大量ニ萜類成分，主要是藍萼甲素成分，具有顯著細胞毒活性。藍萼甲素的純化方法，一般採用有機試劑回流提取和矽膠柱分離相結合。如項昭保等人採用對藍萼香茶菜80%こ醇提取物的こ酸こ酯部分進行色譜分離，分別為藍萼甲素、藍萼こ素等ニ萜類物質。再如專利(申請號201010264658. 5) 「ー種藍萼甲素的提取方法」，該方法藍萼香茶菜地上部分並粉碎，在常壓下用75 80%こ醇水溶液回流提取2 3次，毎次回流提取2 3小吋，濃縮提取液中加入矽膠並攪拌均勻，進行矽膠柱層析，無水こ醇重結晶，得藍萼甲素晶體。如上所述，現有純化藍萼甲素的方法存在著純化周期長、收率低而且方法繁瑣。
發明內容
本發明的目的是解決現有技術的不足和缺陷，提供一種藍萼甲素的純化方法，該方法高效、快速。為了實現上述目的，本發明採用以下技術方案
一種藍萼甲素的純化方法，其特徵在於以藍萼香茶菜為原料，粉碎過2(Γ80目篩投入萃取釜，通入液態CO2和夾帶劑進行超臨界萃取，所得萃取物，採用高速逆流色譜法純化，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，回收試劑，乾燥即得。所述的超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為35 50°C、壓カ為25 30MPa、時間為2 4h，C02流量為2(T25L/h，以こ酸こ酯為夾帶劑，夾帶劑用量為原料量的f 3倍量，解析溫度50飛0で、壓カ5 lOMPa。所述的高速逆流色譜法純化為取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、7jC,按Γ3: 3^10: Γ5: 3^8混合，充分分層後，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速70(Tl000rpm,同時泵入下相做固定相,建立動態平衡後,流速調節為l 4ml/min,用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分。本發明的積極效果是方法採用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜純化結合，是ー種 高效、快速、清潔無汙染的純化方法，解決了矽膠柱分離收率低、操作複雜的的技術缺陷，又克服了製備液相處理量小的技術不足，適合高純度的藍萼甲素的製備。
具體實施例方式 實施例I:
萃取藍萼香茶菜全草粉碎，過60目篩，取500g投入萃取釜中，通入處於超臨界狀態的CO2進行萃取，設定萃取釜參數萃取溫度35°C，壓カ為25MPa，通入CO2流量為20L/h，待萃取罐內環境穩定後，通入こ酸こ酯作為夾帶劑，流量500ml/h，萃取3h，設置分離釜的溫度50°C、壓カ8MPa，解析得萃取物。純化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按1:3:2:3混合，充分分層後，取上相注入滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速700rpm，同時泵入下相做固定相，建立動態平衡後，流速調節為2ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，連續製備，流分回收試劑，得3. 5g，含量98. 5%。實施例2:
萃取藍萼香茶菜全草粉碎，過80目篩，取500g投入萃取釜中，通入處於超臨界狀態的CO2進行萃取，設定萃取釜參數萃取溫度45°C，壓カ為30MPa，通入CO2流量為25L/h，待萃取罐內環境穩定後，通入こ酸こ酯作為夾帶劑，流量500ml/h，萃取2h，設置分離釜的溫度60°C、壓カlOMPa，解析得萃取物。純化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按2:5:4:5混合，充分分層後，取上相注入滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速800rpm，同時泵入下相做固定相，建立動態平衡後，流速調節為3ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，連續製備，流分回收試劑，得4. lg，含量97. 1%。實施例3:
萃取藍萼香茶菜全草粉碎，過40目篩，取500g投入萃取釜中，通入處於超臨界狀態的CO2進行萃取，設定萃取釜參數萃取溫度40°C，壓カ為27MPa，通入CO2流量為22L/h，待萃取罐內環境穩定後，通入こ酸こ酯作為夾帶劑，流量400ml/h，萃取3h，設置分離釜的溫度55°C、壓カ7MPa，解析得萃取物。純化取正己烷、こ酸こ酷、甲醇、水，按3:10:5:7混合，充分分層後，取上相注入滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速lOOOrpm，同時泵入下相做固定相，建立動態平衡後，流速調節為lml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，連 續製備，流分回收試劑，得3. 8g，含量95. 9%。
權利要求
1.一種藍萼甲素的純化方法，其特徵在於以藍萼香茶菜為原料，粉碎過2(T80目篩投入萃取釜，通入液態CO2和夾帶劑進行超臨界萃取，所得萃取物，採用高速逆流色譜法純化，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，回收試劑，乾燥即得。
2.根據權利要求I所述的藍萼甲素的純化方法，其特徵在於所述的超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為35 50°C、壓力為25 30MPa、時間為2 4h，CO2流量為20 25L/h，以乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為原料量的廣3倍量，解析溫度5(T60°C、壓力5 10MPa。
3.根據權利要求I所述的藍萼甲素的純化方法，其特徵在於所述的高速逆流色譜法純化為取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按廣3:3 10:1飛:3 8混合，充分分層後，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速70(Tl000rpm,同時泵入下相做固定相,建立動態平衡後，流速調節為f4ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分。
全文摘要
本發明公開了一種藍萼甲素的純化方法。方法是以藍萼香茶菜為原料，粉碎過20～80目篩投入萃取釜，通入液態CO2和夾帶劑進行超臨界萃取，所得萃取物，採用高速逆流色譜法純化，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，回收試劑，乾燥即得。本方法具有高效、快速、環保的優點，可工業化推廣使用。
文檔編號C07C45/78GK102850201SQ20121035666
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月24日 優先權日2012年9月24日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司