微波促進固相合成苦瓜mc-jj2162多肽類似物及其應用的製作方法

2023-09-22 02:30:35

專利名稱：：微波促進固相合成苦瓜mc-jj2162多肽類似物及其應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及MC-JJ2162多肽類似物及其微波促進固相合成方法。
背景技術：
：糖尿病是當今危害人類健康的重要疾病，目前全世界約有5%-7%的人受糖尿病困擾，被認為是繼心腦血管疾病、惡性腫瘤之後，導致人類傷殘、死亡的第三大殺手。糖尿病分為I型和II型，I型糖尿病是一種自身免疫疾病，患者的存活需要注射胰島素。11型糖尿病佔眾多糖尿病患者總數的95%左右。II型糖尿病的原因是胰島細胞代謝發生障礙，胰島素分泌不足，或者產生胰島素抵抗，是以胰島素抵抗為主伴胰島素分泌相對不足，或者以胰島素分泌相對不足為主伴胰島素抵抗導致的代謝性疾病。胰島素分泌不足，或者產生胰島素抵抗都可造成血液中葡萄糖過量，當血糖含量超過腎閾時，葡萄糖就轉移到尿中排出，從而產生葡萄糖尿。目前臨床應用的幾種藥物均不能夠治癒糖尿病，主要是通過不同的作用機制，降低患者的血糖水平。糖尿病患者必須終生服藥，藥物本身對人體的毒副作用同樣威脅著糖尿病人的健康。在中國，目前使用藥物能夠控制血糖達到正常標準的，還不到糖尿病患者總數的20%(鄒大進，2型糖尿病的禍首--胰島素抵抗，大眾醫學，2002，(6):17)，直接導致了許多糖尿病患者的併發症發生早，進展快。顯然，除了篩選更加安全有效的新型藥物之外，尋找其它的輔助治療手段有效控制血糖水平，對於提高糖尿病人的健康水平同樣是十分重要的。苦瓜(Momordicacharantia)是一種人類有長期安全食用歷史的蔬菜。近二十年來，人們在苦瓜的果實中發現了許多具有降血糖活性的成分，一些苦瓜果實的提取物，或者直接用苦瓜果實幹燥後製成的茶飲料，已經推薦給糖尿病人使用，某些苦瓜成分已經被申請作為治療糖尿病藥物的專利。但是，從科技文獻中介紹以及已有的專利或產品，主要是基於對苦瓜諸多降血糖活性成分中對某個已知成分的認識，並沒有意識到，苦瓜中具有降血糖活性的成分已知的就有多種，並且化學性質各不相同，此外，苦瓜中還有某些具有降血糖的活性成分是未知的。所以，已有的文獻、專利或產品，其局限性也是明顯的。美國專利(US6391854B1)和中國專利(CN98805001，苦瓜中的口服活性成分，其活性肽，及它們治療糖尿病的用途；美國卡裡克斯治療公司)提供了苦瓜的一種水溶性提取物稱為MC6，MC6的特徵中它含有三種肽，它的製備方法的特徵是離心澄清的苦瓜汁依次通過30kDal，10kDal及3kDal的超濾膜。MC6分子量小於10kDal，能夠通過10kDal超濾膜，而為3kDal濾膜截留。有活性的MC6的特徵是在SDS-PAGE凝膠電泳上以單一條帶形式遷移，分子量小於10kDal，包含三種肽。同時提供的還有MC6的肽成分，稱為MC6.1，以及MC6.1的衍生物和模擬物。活性MC6，MC6.1，MC6.2，MC6.3有降血糖作用，尤其是糖尿病，其中優選口服給予這些活性藥物。在這一專利中，所利用的苦瓜降血糖活口服給藥後也有這種活性。同時提供的還有利用這些活性藥7物治療高血糖疾病的方法性成分僅僅是夠透過超濾膜的水溶性蛋白(多肽)。專利申請者描述，MC6沒有提高模型動物血漿中胰島素水平的活性。—則國際專利申請(PCT/IN99/000521999.9.28)的發明，提供了一種高效降血糖多肽-k，它提取自苦瓜。專利申請者介紹的多肽-k製備方法是用非極性溶劑處理苦瓜種子(或果實)，去除不需要的油脂、黃酮類和皂苷配基，然後用含水80%的丙酮提取殘留物中的蛋白質，最後選擇性地結晶分離出多肽-k。申請者描述，多肽-k不溶於水，其降血糖的作用機理是激活血液中無活性的胰島素。很明顯，MC6與多肽-k都是苦瓜中具有降血糖活性的蛋白質，但是，MC6溶於水，而多肽-k不溶於水，按照MC6的製備方法，則損失了苦瓜中的多肽-k;而按照多肽-k的製備方法，同樣損失了苦瓜中的MC6。還有一些中國專利公開了從苦瓜中提取降糖物質或製成中藥的內容1、99115925一種苦瓜降糖膠囊及其製備工藝，該發明是以新鮮苦瓜為原料，經清洗冷凍，低溫製漿，壓濾，將濾渣經烘乾過IOO目篩，製成苦瓜渣粉；濾液澄清再過濾，經酸性(pH3.0)乙醇在15t:條件下攪拌3小時，靜置沉澱12小時，過濾後將沉澱物經低溫乾燥，過100目篩，製成苦瓜蛋白；過濾液經6(TC真空濃縮，加2倍水溶解，加2倍乙醚脫脂，5(TC真空濃縮回收乙醚，6(TC真空回收乙醇製成粗苦瓜總皂苷，再經無水丙酮在4t:條件下沉澱洗滌數次，3(TC以下真空濃縮製成苦瓜總皂苷，最後將總皂苷，苦瓜蛋白粉和苦瓜渣按IO:2:88重量比經混勻，裝入膠囊製成苦瓜降糖膠囊。具有原料來源廣泛，工藝簡單，服用方便，價格便宜，無毒副作用的優點，可做為治療糖尿病的輔助製劑。2、981108022001年08月15日天然苦瓜素降糖藥及其製備方法，發明公開了一種天然苦瓜素降糖藥的製作方法，包括下述步驟a.將成熟苦瓜切成片，並進行乾燥處理；b.把乾燥的苦瓜片浸泡於水中，並提取浸液；C.把苦瓜浸液濃縮成濃縮液；d.將濃縮液進行生物酶解，得高活性降解液；e.把降解液進行恆溫乾燥噴粉制粒；f.將顆粒裝入膠囊成藥；該方法工藝設備簡單，符合大規模生產要求，產品得率高，治療效果好，無毒副作用。3、95103732治療糖尿病的中藥及其生產方法，該發明是一種治療糖尿病的中藥，該中藥的主要成分是動物胰臟、苦瓜、南瓜、黃芪，山藥，生產方法是動物胰臟粉碎千燥，與用水提法或醇析法得到的苦瓜、南瓜、黃芪提取物混合再加入山藥粉得到，該藥物具有益氣生津，健脾潤燥，滋陰降火功率效，並有提高機體免疫功能，促進胰島素分泌，降低血糖作用。4、〈申請號〉93119351.6〈發明名稱〉植物降血糖活性蛋白新組份PA及其製備，該發明涉及生物製藥領域。從植物材料苦瓜中提取降血糖活性蛋白新組分PA，製備工藝中材料淨化處理-低溫冰凍-破碎-酸醇浸漬-高速勻漿-酸醇提取-抽濾-離心淨化-沉澱-重新溶解-Sephadex凝膠過柱-紫外檢測分部收集-濃縮-乾燥的苦瓜降血糖活性蛋白新組份PA的製備方法，其特點是採用了等電點沉澱和凝膠過柱、紫外檢測分部收集的方法。發明人認為該物質具有分離提取簡便、消耗有機溶劑少、得率高等優點，經動物試驗證明降血糖效果明顯。5、02102754一種快速高效提取植物類胰島素的方法，苦瓜種子含有較豐富的植物類胰島素，是目前治療糖尿病的一種有效成分。發明技術特徵是苦瓜種子脫殼，種仁粉碎過60或100目篩，然後採用酸性乙醇進行萃取，離心取上清液，加入NaCl佔體積3%5%，用15Mol/LNaOH調節溶液至pH值7.0±7.5溶液變渾濁、離心、去上液，用丙酮洗滌沉澱部分三次，真空乾燥，得到植物類胰島素粗品。用0.1MTris.cl溶液(pH7.5)溶解進行凝膠親和層析，收集洗脫峰溶液，用丙酮或乙醇濃縮真空乾燥得到植物類胰島素精品。該方法可以提取製備高純度的植物類胰島素成分，可用於糖尿病的治療。6、98102198.0一種苦瓜含片及其製備方法，該發明為一種苦瓜含片及其製備方法。本苦瓜含片主要含有苦瓜粉、糊精、檸檬酸和甘露醇等，製備時，先將鮮苦瓜經榨汁、過濾、冷凍乾燥製得苦瓜凍乾粉，再與其它成分進行混合，並壓製成片。採用本發明的製備方法科學合理，充分保留了苦瓜中的多種營養成分，所制含片常溫下不失苦瓜的活性，具有清熱解毒、寬胸利氣、生津止渴、降低血糖、提高免疫力、抑制癌細胞等功效，是日常生活，特別是在災區救援、軍事行動、以及旅遊、探險活動中，可迅速補充體力，提高免疫力的方便必需品。主權項(A61K35/78)要求是一種苦瓜含片，其特徵是含有苦瓜粉、糊精、甘露醇、香料、色素及硬脂酸鎂。已有的研究表明，苦瓜中除蛋白質之外，皂苷也是一種極為有效的降血糖活性的成分。—些科技文獻報導，苦瓜皂苷為四環三菇類化合物，有多個不同成分，均難溶於水，可用乙醇從乾燥的苦瓜果實中提取出(常鳳崗苦瓜化學成分研究，中草藥，1995，26(10)507-510)。苦瓜皂苷並不影響受試動物模型血漿中胰島素含量，主要是促進增加肌糖原和肝糖原的合成(王先遠，金宏，許志勤等苦瓜皂苷降血糖作用及機制初探，胺基酸和生物資源，2001，23(3):42-45)，因而具有顯著的降血糖作用(孫淑卿，苦瓜的藥理和臨床研究概況，中藥材，1997，(8):428-429)，動物試驗證明，其血糖降低幅度甚至優於"優降糖"(孫寶瑩等，苦瓜皂苷的藥效學實驗研究，河南中醫藥學刊，1994，9(6):19—21)。水溶多肽MC6、水不溶的多肽-k及苦瓜皂苷，由於它們化學性質的差異，因而屬於彼此不同的物質。並且，苦瓜降血糖活性成分並不僅僅是已知的皂苷和蛋白質。從新鮮苦瓜的水煮液中分離出了可溶於乙醚和不溶於乙醚的兩個未知的成分，已經鑑定不為皂苷、黃酮和生物鹼，這兩種成分都表現出明顯的降血糖活性(王勇慶苦瓜降血糖作用研究，湖南中醫藥雜誌，1998，(C6):51-52)。由此證明，苦瓜中降血糖成分除皂苷和植物蛋白之外，還有其它的降糖活性化合物。將苦瓜的幾種不同方法提取物對四氧嘧啶誘導的化學性糖尿病模型小鼠的降糖效果進行比較，結果表明，苦瓜的未被加熱的直接壓榨的果汁較其它方法提取的有效部位的降血糖效果更好，並推斷其降血糖活性物可能為水溶性的受熱易被破壞的成分(範玉玲；崔福德，苫瓜有效部位降糖活性的比較研究，瀋陽藥科大學學報2001，18(1):50-52)。動物實驗表明，鮮苦瓜汁能使能使四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠已經受損傷的胰島P細胞得到修復，並再生出新的13細胞，提高了血漿中的胰島素含量(Ahmed，I.，Adeghate，E，Sharma，A.K.，Pallot，D丄etal.EffectsofMomordicacharantiafruitjuiceonisletmorphologyinthepancreasofthestreptozotocin-diabeticrat.Diabetesresearchandclinicalpractice.1998，40，145-151)。體內和離體的進一步研究表明，鮮苦瓜汁的這種作用機理是減輕了糖尿病小鼠的胰腺，RIN細胞及胰島的脂質過氧化，並降低了RIN細胞中四氧嘧啶誘導的apoptosis，從而對RIN細胞，胰島及胰腺13細胞的起保護作用(Sitasawad，S丄.，Shewade.Ye，Bhonde，Ro，Roleofbittergourdfruitjuiceinstz-induceddiabeticstateinvivoandinvitro.JournalofEthno-pharmacology，2000，73(1):71-79)。而在苦瓜的已知降糖活性化合物中，尚未能確定具有這種修復或再生胰島細胞，提高胰島素水平的生物活性。由上述事實可知，苦瓜的降血糖功能活性物，有已知的，也還有屬於未知的，苦瓜的降血糖功能，實際是其中所含的多種具有降血糖活性的成分協同作用的結果。就已知的活性成分而言，因其化學性質不同，很難用一種溶劑將它們同時提取出來。此外，在苦瓜的降血糖活性物中，包含有不耐熱的成分，其提取的過程不應當受熱。用磨漿的辦法將新鮮的苦瓜果肉組織細胞充分破碎，細胞的所有內含物，包括溶於水與難溶於水的降血糖活性成分，都將被釋放到果漿中。將果漿中的粗纖維(來自於果肉細胞壁)濾去，然後冷凍乾燥，這種苦瓜汁的凍幹製品無疑包含了比較全面的降血糖活性成分。但是，苦瓜汁中降血糖活性物的含量其實很低，直接凍幹成本昂貴，另一方面，苦瓜汁中存在的糖類物質極易潮解，使這種凍幹製品根本無法在正常條件下分裝、貯藏和使用。加入大量的乾燥助劑或防潮劑雖然可以解決苦瓜汁的凍幹製品的潮解問題，但將無法製得高含量的苦瓜降血糖製品。綜上所述，文獻和專利公開的苦瓜有效成分的製備，基本上是採用物理法和化學法提取某個或若干個明確的化學成分為主，或者是苦瓜在加熱條件下的某種溶媒(如水，乙醇或其混合物)的總提取物，它們或者未提及如何利用苦瓜中那些化學性質未知的降血糖活性成分，或者未明確苦瓜中某些熱敏性降血糖活性物的受熱破壞問題。99115925號中國發明專利，一種苦瓜降糖膠囊及其製備工藝提出了苦瓜蛋白與苦瓜皂苷的利用，但在製備過程使用了乙醇，丙酮，乙醚等有機溶劑。98110802號專利，天然苦瓜素降糖藥及其製備方法中提到將苦瓜濃縮液進行生物酶解，得高活性降解液，但未提及生物酶解中採用的是什麼酶。98102198.0號專利，一種苦瓜含片及其製備方法中使用的是冷凍乾燥苦瓜汁工藝，但它沒有考慮去除苦瓜中已知的不具有降血糖活性的成分的問題。基於上述原因，開發一套能全面利用苦瓜中理化性質不同的各類降血糖活性物，並且活性成分含量高，理化性質穩定的苦瓜降血糖製品的製備方法，不僅是開發高活性的苦瓜降血糖製品的必由之路，而且對於充分而合理地利用苦瓜資源，也是十分必要的。多肽可以通過基因工程的方法或者化學合成的方法得到。基因工程的方法在獲取長肽(胺基酸殘基長度大於50)或蛋白質上比化學方法有優勢，但是多肽的化學合成方法尤其是在固相合成策略出現後，在製備胺基酸殘基長度小於40的多肽或小肽上有基因工程方法難以比擬的靈活性、多樣性和高效性等。1963年Merrifield創立並開發了固相合成多肽的方法。固相多肽合成一般有兩種策略即Boc/Bzl正交保護固相合成策略和10Fmoc/tBu正交保護固相合成策略，Merrifield創立的固相合成法即為Boc/Bzl正交保護固相合成策略。但是，Boc/Bzl正交保護固相合成策略中存在一些缺點，如副反應多、條件苛刻以及在延長肽鏈的過程中多肽鏈會從固相上丟失等。而隨後出現的Fmoc/tBu正交保護固相合成策略則反應條件溫和的多。當近年來微波技術運用於多肽的固相合成中後，使多肽的合成技術產生了一個飛躍。微波促進化學反應是由於其使極性分子在微波場中快速旋轉，使得一些反應速率較常規加熱方法快10到1000倍，而且產率大大提高。1986年Gedye等人首次報導了將微波應用於有機合成中，微波可以促進許多化學反應，如Diels-Alder反應，皂化反應等，可以顯著地加快反應速率並提高收率。在1992年，Hui-mingYu等首先報導了將微波應用於多肽固相合成領域中，他們完成了醯基載體蛋白片斷十肽(acylcarrierprotein,ACP6574)的合成。如何高效的合成長肽(大於30肽)在世界上仍然是一個挑戰，因為多肽隨著肽鏈的增加，其合成難度成倍增加。用傳統的固相方法合成長肽，其收率往往很低雜質較多純化困難，從而從實用的角度上說失去了合成的意義。其次合成周期長，在中間不出現困難肽序的情況下30肽一般需要近一個星期時間才能完成合成周期，如果出現困難肽序，往往就無法合成得到目標多肽。而使用微波促進固相合成多肽，可以克服困難肽序，合成傳統固相方法無法得到的多肽，而且合成時間大大縮短，且顯著提高多肽粗品純度及收率，使得產品的純化大大方便，只要經過一次製備型HPLC就能得到純度較高的產品；此外還可以非常方便的用D型胺基酸及非天然胺基酸等對多肽進行定點修飾，去尋找活性更高、生物半衰期更長的多肽，這更是基因工程技術無法做到的。因此，我們在苦瓜降血糖MC-JJ2162多肽類似物的合成中採用此種方法快速高效的合成得到MC-JJ2162系列類似物。
發明內容本發明有兩個目的第一個母的是從具降血糖活性的藥食同源植物苦瓜中得到多肽進行修飾得到降血糖活性更高的MC-JJ2162多肽類似物。本發明的第二個目的是提供了MC-JJ2162衍生物的固相製備方法，本發明採用微波促進Fmoc旭u正交保護固相合成策略高效快速地合成得到系列MC-JJ2162類似物。其特徵在於採用微波促進Fmoc/tBu正交保護固相合成策略，於固相載體上先合成得到載有第一個Fmoc保護胺基酸的樹脂，茚三酮法檢測為陰性後脫去Fmoc保護基得到載有第一個胺基酸殘基的樹脂；再進入下一個偶聯循環，按照相應的肽序用不同的保護胺基酸重複偶聯和脫保護的步驟，依次延長所需的胺基酸序列，合成得到載有相應多肽的樹脂，最後用裂解劑將多肽從樹脂上切割下來得到多肽粗品。粗品經製備級高效液相色譜純化，凍幹得多肽純品。載有第一個Fmoc保護胺基酸的樹脂的製備方法，其特徵是通過在微波照射條件下Fmoc保護胺基酸先經活化劑活化後再與固相載體偶合得到，反應中加入1-羥基-苯並三氮唑(HOBT)或其衍生物抑制消旋，並使用有機鹼中和反應的酸性。載有第一個Fmoc保護胺基酸的樹脂所使用的固相載體是Rink樹脂、Wang樹脂或2-氯三苯甲基氯樹脂。活化劑是二環己基碳二亞胺(DCQ、N，N'-二異丙基碳二亞胺(DIC)、N，N〃-羰基二咪唑(CDI)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HC1)、2-(7-偶氮苯並11三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、苯並三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或使用的1-羥基-苯並三氮唑(HOBT)衍生物為N-羥基琥珀醯亞胺(HOSU)、l-羥基-7-偶氮苯並三氮唑(HOAT)或3-羥基-l，2，3-苯並三嗪-4(3H)-酮(HOOBT)。有機鹼為三乙胺(TEA)、N-甲基嗎啉(NMM)或二異丙基乙胺(DIEA);微波促進條件是微波頻率2450MHz，反應溫度20100°C，反應時間為515min。Fmoc保護基的脫除是通過使用含有O.lmolL—1的1-羥基-苯並三氮唑(HOBT)的六氫吡啶溶液在微波促進下反應，選用二甲基甲醯胺(DMF)、二甲亞碸(DMSO)、或N-甲基吡咯烷酮(NMP)為反應溶劑。微波促進條件是微波頻率2450MHz，反應溫度20100°C，反應時間為1lOmin。本發明的優點在於1.提出的一種MC-JJ2162類似物可以在保留降糖活性的基礎上，提高MC-JJ2162的穩定性，延長作用時間。2.微波促進固相合成MC-JJ2162類似物大大的提高了偶合反應速率，常規固相合成方法充分偶合一個胺基酸到樹脂上去，往往需要2小時到20小時不等，甚至更長。而微波促進則平均只需要10分鐘左右；常規固相合成方法脫Fmoc保護基，往往需要30分鐘到l小時不等，而微波促進則平均只需要5分鐘左右，這極大的提高了多肽合成的效率，縮短了合成周期。3.微波促進固相合成MC-JJ2162類似物合成得到的粗品的純度大於80%，較常規固相合成方法大大提高，這方便了後續的純化工作，只需要經過一次製備液相純化，凍幹即可得到目標純品。4.微波促進固相方法合成MC-JJ2162類似物，其成本低，由於偶合效率較高，所需要保護胺基酸平均只需要2倍過量，較常規固相合成方法需要4到5倍過量大為降低。5.微波促進固相合成MC-JJ2162類似物方法易於實現自動化、大規模化，這使其更適合工業化生產。因此用本發明提供的微波促進固相合成技術製備的MC-JJ2162類似物，收率高、合成周期短、粗品純化容易，生產成本低、易於工業自動化生產。製備得到的MC-JJ2162類似物，比天然MC-JJ2162更加穩定，適合作為治療糖尿病藥物的活性成分。具體實施例方式在本說明書全文中採用以下縮寫Et3N:三乙胺；NMM:N-甲基嗎啉；DIEA:N，N'-二異丙基乙胺；DMF:二甲基甲醯胺；DMSO:二甲亞碸；DCM:二氯甲烷；Fm0C:N-9荷甲氧羰基；DIC:N，N，-二異丙基碳二亞胺；CDI:N，N，-羰基二咪唑；DMAP:4-二甲氨基吡啶；HOSU:N-羥基琥珀醯亞胺；EDC.HC1:1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽；HATU:2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯；HBTU:苯並三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯；HCTU:6-氯苯並三氮唑-l，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯；HOAT:l-羥基-7-偶氮苯並三氮唑；HOBT:1-羥基-苯並三氮唑；PyBOP:六氟磷酸苯並三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷；HPLC:高效液相色譜；ESI-MS:電噴霧質譜；Gly:甘氨酸；Ser:絲氨酸；Ala:丙氨酸；Thr:蘇氨酸；Val:纈氨酸；lie:異亮氨酸；Leu:亮氨酸；Tyr:酪氨酸；Phe:苯丙氨酸；His:組氨酸；Pro:脯氨酸；Asp:天門冬氨酸；Met:蛋氨酸；Glu:穀氨酸；Trp:色氨酸；Lys:賴氨酸；Arg:精氨酸。Asn:天冬醯胺；Gin:穀氨醯胺。本發明是通過下列實施列來進行說明的，但這些實施例不做任何限制本發明的解釋。實施例1Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:2)的微波促進固相合成(1)樹脂的溶脹稱取Fmoc-rinkamide-MBHAResin50mg(取代量0.4mmol/g)，經7mLDCM溶脹30min，抽濾去DCM，再用10mLNMP溶脹30min，最後分別用NMP，DCM，NMP7mL衝洗乾淨。(2)微波促進Fmoc保護基的脫除將溶脹好的樹脂放入反應器中，加入7mL含0.1MHOBT的25%哌啶/NMP(V/V)溶液，在微波反應器中反應lmin，微波功率為15W，反應溫度控制在5(TC以內，使用空氣壓縮機壓縮空氣冷卻，反應結束後濾去溶液；再加入7mL含0.1MHOBT的25%哌啶/NMP(V/V)溶液在微波反應器中再反應4min，微波功率為25W，反應溫度控制在5(TC，使用空氣壓縮機壓縮空氣冷卻。反應結束後濾去溶液，用NMP洗滌乾淨。得到脫去初始連接的Fmoc保護基的樹脂。(3)微波促進Fmoc-Ala-rinkamide-MBHAResin的合成將Fmoc-Ala-OH(0.04mmol)，HBTU(0.04mmo1)，HOBT(0.04mmo1)和DIPEA(0.08mmol)溶於10mLNMP中，再將此溶液加入上面的樹脂中，在微波反應器中反應7min，微波功率為25W，反應溫度控制在5(TC，使用空氣壓縮機壓縮空氣冷卻。反應結束後濾除反應液，用DCM和NMP各7mL洗滌樹脂3次。[OOM](4)偶合效率的檢測用茚三酮法或者溴酚蘭法定性檢測樹脂的偶合效率，顯色反應為陰性即可進入下一個偶合循環。茚三酮法取少量樹脂顆粒用乙醇洗滌，放入透明小瓶中加入5%茚三酮乙醇、KCN吡啶溶液(2ml0.001MKCN稀釋於98ml吡啶中)、80%苯酚乙醇溶液各2滴，於10(TC加熱5分鐘，如果樹脂顯藍色即為陽性。溴酚蘭法取少量樹脂顆粒用二甲醯乙醯胺洗滌，放入透明小瓶中加入3滴1%的溴酚藍二甲基乙醯胺溶液，常溫下振搖3分鐘，如果樹脂顯藍色即為陽性。(5)肽鏈的延長按照Ala2-MC-JJ2162-(l21)-NH2的序列，重複上述脫保護和偶合的步驟依次連接上相應的胺基酸，偶合微波促進反應時間520min不等。得到連有Ala2-MC-JJ2162-(121)-NH2的樹脂。(6)樹脂上多肽的裂解13將上述得到的連有Ala2-MC-JJ2162-(l21)-NH2的樹脂放入反應瓶中，各加入裂解劑ReagentK(TFA/苯甲硫醚/水/苯酚/EDT，82.5:5:5:5:2.5，V/V)10mL，先在0t:下振搖30min，再在常溫下反應3h。反應結束後抽濾，加少量TFA和DCM洗滌三次，合併濾液。將濾液加入大量的冰乙醚中析出白色絮狀沉澱，冷凍離心得到目標多肽的粗品。最終得到Gly8-GLP-(736)-NH2粗品63.2mg，收率為94.3%。(7)Ala2-MC-JJ2162-(l21)-NH2粗品的純化將上面得到的Ala2-MC-JJ2162-(l21)-NH2粗品，溶於少量的水中，用島津製備型反相HPLC純化粗品。純化中採用C18反相製備柱(340mmX28mm，5ym);流動相A:0.1%TFA/水(V/V)，流動相B:0.1%TFA/乙腈(V/V);流動相梯度流動相B13%15%，30min;流速為6mL/min;檢測波長為214nm。收集的溶液凍幹得純品，最終得到純品29.7mg。理論相對分子質量2211.636ESI-MSm/z:found[M+3H]3+738.2，[M+4H]4+553.9，[M+5H]5+443.3;calu[M+3H]3+738.0，[M+4H]4+553.8，[M+5H]5+443.5實施例266根據實施例l所述的方法，根據相應的序列合成得到實施例265的多肽，通過電噴霧質譜(ESI-MS)確證各自的分子量。實施例2Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:3);理論相對分子質量2185.6.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+729.5，[M+4H]4+547.4，[M+5H]5+438.1;calu[M+3H]3+729.7，[M+4H]4+547.6，[M+5H]5+438.0;實施例3Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:4);理論相對分子質量2185.6.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+729.5，[M+4H]4+547.4，[M+5H]5+438.1;calu[M+3H]3+729.6，[M+4H]4+547.4，[M+5H]5+438.0;實施例4Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:5);理論相對分子質量2220.603.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+741.2，[M+4H]4+556.2，[M+5H]5+445.1;calu[M+3H]3+741.0，[M+4H]4+556.0，[M+5H]5+445.0;實施例5Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:6);理論相對分子質量2220.603.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+741.2，[M+4H]4+556.2，[M+5H]5+445.1;calu[M+3H]3+741.0，[M+4H]4+556.0，[M+5H]5+445.0;實施例6Gly-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:7);理論相對分子質量2197.609.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;calu[M+3H]3+733.4，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.6;實施例7Gly-His-Pro-Gly-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:8);理論相對分子質量2171.573.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.3;calu[M+3H]3+724.8，[M+4H]4+543.8，[M+5H]5+435.2;實施例8Gly-His-Pro-Tyr-Gly-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Aa-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:9);理論相對分子質量2171.573.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.3;calu[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.3;實施例9Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:10);理論相對分子質量2206.576.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;calu[M+3H]3+736.6，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;實施例10Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Gly-Ser-Lys-Thr-Ala-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:11);理論相對分子質量2206.576.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;calu[M+3H]3+736.6，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;實施例11Gly-Ala-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:12);理論相對分子質量2211.636.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+738.2，[M+4H]4+553.9，[M+5H]5+443.3;calu[M+3H]3+738.0，[M+4H]4+553.8，[M+5H]5+443.2;實施例12Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:13);理論相對分子質量2185.6.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+729.5，[M+4H]4+547.4，[M+5H]5+438.1;calu[M+3H]3+729.4，[M+4H]4+547.4，[M+5H]5+438.0;實施例13Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:14);理論相對分子質量2158.6.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+729.5，[M+4H]4+547.4，[M+5H]5+438.1;calu[M+3H]3+729.4，[M+4H]4+547.5，[M+5H]5+438.0;實施例14Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:15);理論相對分子質量2220.603.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+741.2，[M+4H]4+556.2，[M+5H]b+445.1;calu[M+3H]針741.0，[M+4H]4+556.0，[M+5H]5+445.0;實施例15Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:16);理論相對分子質量2220.6.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+741.2，[M+4H]4+556.2，[M+5H]5+445.1;calu[M+3H]3+741.0，[M+4H]4+556.0，[M+5H]5+445.0;實施例16Gly-Ala-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:17);理論相對分子質量2188.599.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+730.5，[M+4H]4+548.1，[M+5H]5+438.7;calu[M+3H]3+730.5，[M+4H]4+548.1，[M+5H]5+438.7;實施例17Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:18);理論相對分子質量2162.563.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+721.9，[M+4H]4+541.6，[M+5H]5+433.5;calu[M+3H]3+721.9，[M+4H]4+541.7，[M+5H]5+433.5;實施例18Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:19);理論相對分子質量2162.563.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+721.9，[M+4H]4+541.6，[M+5H]5+433.5;calu[M+3H]3+712.8，[M+4H]4+541.6，[M+5H]5+433.5;實施例19Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:20);理論相對分子質量2197.566.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;calu[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;實施例20Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:21);理論相對分子質量2197.566.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;calu[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;實施例21Gly-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:22);理論相對分子質量2174.572.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+725.9，[M+4H]4+544.6，[M+5H]5+435.9;calu[M+3H]3+725.9，[M+4H]4+544.6，[M+5H]5+435.9;實施例22Gly-His-Pro-Gly-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Al16a-Ala(SEQ.IDNO:23);理論相對分子質量2148.536.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+717.1，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;calu[M+3H]3+717.1，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;實施例23Gly-His-Pro-Tyr-Gly-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:24);理論相對分子質量2148.536.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+717.1，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;calu[M+3H]3+717.0，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;實施例24Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:25);理論相對分子質量2183.539.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例25Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Gly-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:26);理論相對分子質量2183.539.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例26Gly-Ala-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:27);理論相對分子質量2174.572.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+725.9，[M+4H]4+544.6，[M+5H]5+435.9;calu[M+3H]3+725.8，[M+4H]4+544.6，[M+5H]5+435.9;實施例27Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:28);理論相對分子質量2148.536.ESI-MSm/z:found[M+3H廣717.1，[M+4H廣538.1，[M+5H廣430.7;calu[M+3H]3+717.0，[M+4H]4+538.0，[M+5H]5+430.7;實施例28Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:29);理論相對分子質量2148.536.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+717.1，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;calu[M+3H]3+717.0，[M+4H]4+538.0，[M+5H]5+430.8;實施例29Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:30);理論相對分子質量2138.539.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.8，[M+5H]5+437.7;實施例3017Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:31);理論相對分子質量2183.539.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例31Gly-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:32);理論相對分子質量2160.545.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+721.2，[M+4H]4+541.1，[M+5H]5+433.1;calu[M+3H]3+721.0，[M+4H]4+541.0，[M+5H]5+433.0;實施例32Gly-His-Pro-Gly-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:33);理論相對分子質量2134.509.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;calu[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;實施例33Gly-His-Pro-Tyr-Gly-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:34);理論相對分子質量2134.509.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;calu[M+3H]3+721.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;實施例34Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:35);理論相對分子質量2169.512.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.2，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.9;calu[M+3H]3+724.0，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.8;實施例35Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Gly-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:36);理論相對分子質量2169.512.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.2，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.9;calu[M+3H]3+724.0，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.8;實施例36Gly-Ala-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:37);理論相對分子質量2197.609.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;calu[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;實施例37Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:38);理論相對分子質量2171.573.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;calu[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;實施例38Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:39);理論相對分子質量2171.573.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;calu[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;實施例39Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:40);理論相對分子質量2206.576.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;calu[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;實施例40Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:41);理論相對分子質量2206.576.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;calu[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;實施例41Gly-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:42);理論相對分子質量2183.582.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例42Gly-His-Pro-Gly-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:43);理論相對分子質量2157.546.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;calu[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;實施例43Gly-His-Pro-Tyr-Gly-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:44);理論相對分子質量2157.546.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;calu[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;實施例44Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:45);理論相對分子質量2192.549.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+731.8，[M+4H]4+549.1，[M+5H]5+439.5;calu[M+3H]3+731.8，[M+4H]4+549.0，[M+5H]5+439.5;實施例45Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Gly-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:46);理論相對分子質量2192.549.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+731.8，[M+4H]4+549.1，[M+5H]5+439.5;calu[M+3H]J+731.8，[M+4H]4+549.0，[M+5H]b+439.5;實施例46Gly-Ala-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:47);理論相對分子質量2197.609.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;calu[M+3H]3+733.5，[M+4H]4+550.4，[M+5H]5+440.5;實施例47Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:48);理論相對分子質量2171.573.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;calu[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;實施例48Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:49);理論相對分子質量2171.573.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;calu[M+3H]3+724.9，[M+4H]4+543.9，[M+5H]5+435.2;實施例49Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:50);理論相對分子質量2206.576.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;calu[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;實施例50Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:51);理論相對分子質量2206.576.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.6，[M+5H]5+442.3;calu[M+3H]3+736.5，[M+4H]4+552.5，[M+5H]5+442.3;實施例51Gly-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:52);理論相對分子質量2183.582.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例52Gly-His-Pro-Gly-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:53);理論相對分子質量2157.546.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;calu[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;實施例53Gly-His-Pro-Tyr-Gly-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:54);理論相對分子質量2157.546.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+720.2，[M+4H廣540.4，[M+5H]5+432.5;calu[M+3H]3+720.2，[M+4H]4+540.4，[M+5H]5+432.5;實施例54Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:55);理論相對分子質量2192.549.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+731.8，[M+4H]4+549.1，[M+5H]5+439.5;calu[M+3H]3+731.8，[M+4H]4+439.5，[M+5H]5+549.0;實施例55Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Gly-Ser-Lys-Thr-Gly-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:56);理論相對分子質量2192.549.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+731.8，[M+4H]4+549.1，[M+5H]5+439.5;calu[M+3H]3+731.9，[M+4H]4+549.0，[M+5H]5+439.5;實施例56Gly-Ala-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:57);理論相對分子質量2174.572.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+725.9，[M+4H]4+544.6，[M+5H]5+435.9;calu[M+3H]3+725.9，[M+4H]4+544.6，[M+5H]5+435.9;實施例57Gly-His-Pro-Ala-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:58);理論相對分子質量2148.536.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+717.1，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;calu[M+3H]3+717.0，[M+4H]4+538.0，[M+5H]5+430.7;實施例58Gly-His-Pro-Tyr-Ala-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:59);理論相對分子質量2148.536.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+717.1，[M+4H]4+538.1，[M+5H]5+430.7;calu[M+3H]3+717.0，[M+4H]4+538.0，[M+5H]5+430.7;實施例59Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Ala-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:60);理論相對分子質量2183.539.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例60Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ala-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:61);理論相對分子質量2183.539.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;calu[M+3H]3+728.8，[M+4H]4+546.9，[M+5H]5+437.7;實施例61Gly-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:62);理論相對分子質量2160.545.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+721.2，[M+4H]4+541.1，[M+5H]5+433.1;calu[M+3H]3+721.2，[M+4H]4+541.0，[M+5H]5+433.0;實施例62Gly-His-Pro-Gly-Tyr-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:63);理論相對分子質量2134.509.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;calu[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;實施例63Gly-His-Pro-Tyr-Gly-Ser-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:64);理論相對分子質量2134.509.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;calu[M+3H]3+712.5，[M+4H]4+534.6，[M+5H]5+427.9;實施例64Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Gly-Lys-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:65);理論相對分子質量2169.512.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.2，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.9;calu[M+3H]3+724.0，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.9;實施例65Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Gly-Ser-Lys-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:66);理論相對分子質量2169.512.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+724.2，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.9;calu[M+3H]3+724.3，[M+4H]4+543.4，[M+5H]5+434.8;實施例66MC-JJ2162及其類似物體內降糖活性實驗取IO周齡雄性昆明小鼠(體重lS22g)，隨機分組，每組6隻。尾靜脈注射四氧嘧啶給藥建模，給藥劑量為60mg/kg，72小時後，小鼠禁食56小時測血糖挑選血糖值範圍在1323的小鼠隨機分組，每組6隻。成模後的小鼠連續10d腹腔注射MC-JJ2多肽及其類似物。在0，30，60，90，120用血糖儀測定血糖值。如表1所示，MC-JJ2162多肽及其類似物的降血糖活性強於二甲雙胍。表1MC-JJ2162及其類似物降血糖的效應0min30min60min90min120min陰性空白4.60±2.384.68±2.364.62±1.944.46±2.024.12±1.64陽性空白25.32±1.7722.78±2.2621.68±2.8219.16±1.0017.58±2.08二甲雙胍23.15±11.4820.45±5.9718.03±6.2416.01±3.8414.23±5.7722tableseeoriginaldocumentpage23n=6，x±s.*P<0.05，"P<0.01，"*P<0.001vssaline序列表中國藥科大學微波促進固相合成苦瓜MC-JJ2162多肽類似物及其應用211111PRT人工序列合成構建體(2)..(2)〈223〉第2位的Xaa是Ala，His或Gly合成構建體(4)..(4)〈223〉第4位的Xaa是Ala，Tyr或Gly合成構建體(5)..(5)〈223〉第5位的Xaa是Ala，Tyr或Gly23合成構建體(8)..(8)〈223〉第8位的Xaa是Ala，Lys或Gly合成構建體(9)..(9)〈223〉第9位的Xaa是Ala，Lys或Gly合成構建體(13)..(13)第13位的Xaa是Ala，Asn或Gly合成構建體(16)..(16)第16位的Xaa是Ala，His或Gly1GlyXaaProXaaXaaSei.lieXaaXaaSerLysThrXaaMetLysXaaMetAlaGlyAlaAla151015202110PRT人工序列合成構建體(2)..(2)第2位的Xaa是Ala2GlyAlaProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520321PRT人工序列3GlyHisProAlaTyrSerlieLysLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520421PRT人工序列4GlyHisProTyrAlaSerlieLysLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520521PRT人工序列5GlyHisProTyrTyrSerlieAlaLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520621PRT人工序列6GlyHisProTyrTyrSerIle-LysAlaSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520721PRT人工序列7GlyGlyProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520821PRT人工序列8GlyHisProGlyTyrSerlieLysLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520921PRT人工序列9GlyHisProTyrGlySerlieLysLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015201021PRT人工序列10GlyHisProTyrTyrSerlieGlyLysSerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015201121PRT人工序列11GlyHisProTyrTyrSerlieLysGlySerLysThrAlaMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015201221PRT人工序列12GlyAlaProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201321PRT人工序列13GlyHisProAlaTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201421PRT人工序列14GlyHisProTyrAlaSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201521PRT人工序列15GlyHisProTyrTyrSerlieAlaLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201621PRT人工序列16GlyHisProTyrTyrSerlieLysAlaSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201721PRT人工序列17GlyGlyProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201821PRT人工序列18GlyHisProGlyTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015201921PRT人工序列19GlyHisProTyrGlySerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015202021PRT人工序列20GlyHisProTyrTyrSerlieGlyLysSerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015202121PRT人工序列21GlyHisProTyrTyrSerlieLysGlySerLysThrAsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla151015202221PRT人工序列22GlyAlaProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202321PRT人工序列23GlyHisProAlaTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202421PRT人工序列24GlyHisProTyrAlaSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202521PRT人工序列25GlyHisProTyrTyrSerlieAlaLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202621PRT人工序列2628GlyHisProTyrTyrSerlieLysAlaSei.LysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202721PRT人工序列27GlyGlyProTyrTyrSerlieLysLysSei.LysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202821PRT人工序列28GlyHisProGlyTyrSerlieLysLysSei.LysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015202921PRT人工序列29GlyHisProTyrGlySerlieLysLysSei.LysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015203021PRT人工序列30GlyHisProTyrTyrSerlieGlyLysSei.LysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015203121PRT人工序列31GlyHisProTyrTyrSerlieLysGlySei.LysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015203221PRT人工序列32GlyAlaProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203321PRT人工序列33GlyHisProAlaTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203421PRT人工序列34GlyHisProTyrAlaSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203521PRT人工序列35GlyHisProTyrTyrSerlieAlaLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203621PRT人工序列36GlyHisProTyrTyrSerlieLysAlaSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203721PRT人工序列37GlyGlyProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203821PRT人工序列38GlyHisProGlyTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015203921PRT人工序列39GlyHisProTyrGlySerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204021PRT人工序列40GlyHisProTyrTyrSerlieGlyLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204121PRT人工序列41GlyHisProTyrTyrSerlieLysGlySerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204221PRT人工序列42GlyAlaProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204321PRT人工序列43GlyHisProAlaTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204421PRT人工序列44GlyHisProTyrAlaSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204521PRT人工序列45GlyHisProTyrTyrSerlieAlaLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204621PRT人工序列46GlyHisProTyrTyrSerlieLysAlaSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204721PRT人工序列47GlyGlyProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla151015204821PRT人工序列48GlyHisProGlyTyrSerlieLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAla15101520492lPRT人工序列49GlyHisProTyrGlySerIleLysLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAlal5101520502lPRT人工序列50GlyHisProTyrTyrSerIleGlyLysSerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAlal51015205l2lPRT人工序列5lGlyHisProTyrTyrSerIleLysGlySerLysThrGlyMetLysHisMetAlaGlyAlaAlal5101520522lPRT人工序列52GlyAlaProTyrTyrSerIleLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAlal5101520532lPRT人工序列53GlyHisProAlaTyrSerIleLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAlal5101520542lPRT人工序列54GlyHisProTyrAlaSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015205521PRT人工序列55GlyHisProTyrTyrSerlieAlaLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015205621PRT人工序列56GlyHisProTyrTyrSerlieLysAlaSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015205721PRT人工序列57GlyGlyProTyrTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015205821PRT人工序列58GlyHisProGlyTyrSerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015205921PRT人工序列59GlyHisProTyrGlySerlieLysLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla15101520603421PRT人工序列60GlyHisProTyrTyrSerlieGlyLysSerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla151015206121PRT人工序列61GlyHisProTyrTyrSerlieLysGlySerLysThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla15101520權利要求一種具有降血糖活性含有式I(SEQ.IDNO1)結構的苦瓜MC-JJ2162多肽類似物，得到的苦瓜MC-JJ2162多肽類似物；其特徵在於其結構具有以下形式Gly-Xaa1-Pro-Xaa2-Xaa3-Ser-Ile-Xaa4-Xaa5-Ser-Lys-Thr-Xaa6-Met-Lys-Xaa7-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO1)Xaa1Ala，His或Gly；Xaa2Ala，Tyr或Gly；Xaa3Ala，Tyr或Gly；Xaa4Ala，Lys或Gly；Xaa5Ala，Lys或Gly；Xaa6Ala，Asn或Gly；Xaa7Ala，His或Gly。2.根據權利要求1所述的多肽，具有如下序列Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:2)Glv-His-Pro-Ala-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:3)Glv-His-Pro-Tvr-Ala-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:4)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Ala-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:5)Gly-His-Pro-Tyr-Tyr-Ser-Ile-Lys-Ak-Ser-Lys-Thr-Ak-Met-Lys-His-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:6)Glv-Glv-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:7)Glv-His-Pro-Glv-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:8)Glv-His-Pro-Tvr-Glv-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:9)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Glv-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:10)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Glv-Ser-Lvs-Thr-Ala-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:11)Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:12)Glv-His-Pro-Ala-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:13)Glv-His-Pro-Tvr-Ala-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:14)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Ala-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:15)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Ala-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:16)Glv-Glv-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:17)Glv-His-Pro-Glv-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:18)Glv-His-Pro-Tvr-Glv-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:19)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Glv-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:20)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Glv-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:21)Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:22)Glv-His-Pro-Ala-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:23)Glv-His-Pro-Tvr-Ala-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:24)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Ala-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:25)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Ala-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:26)Glv-Glv-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:27)Glv-His-Pro-Glv-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:28)Glv-His-Pro-Tvr-Glv-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:29)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Glv-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:30)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Glv-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:31)Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:32)Glv-His-Pro-Ala-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:33)Glv-His-Pro-Tvr-Ala-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:34)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Ala-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:35)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Ala-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:36)Glv-Glv-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:37)Glv-His-Pro-Glv-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:38)Glv-His-Pro-Tvr-Glv-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:39)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Glv-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:40)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Glv-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:41)Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:42)Glv-His-Pro-Ala-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:43)Glv-His-Pro-Tvr-Ala-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:44)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Ala-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:45)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Ala-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:46)Glv-Glv-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:47)Glv-His-Pro-Glv-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:48)Glv-His-Pro-Tvr-Glv-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:49)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Glv-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:50)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Glv-Ser-Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-His-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:51)Glv-Ala-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:52)Glv-His-Pro-Ala-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:53)Glv-His-Pro-Tvr-Ala-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:54)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Ala-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:55)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Ala-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:56)Glv-Glv-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:57)Glv-His-Pro-Glv-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:58)Glv-His-Pro-Tvr-Glv-Ser-Ile-Lvs-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:59)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Glv-Lvs-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:60)Glv-His-Pro-Tvr-Tvr-Ser-Ile-Lvs-Glv-Ser-Lvs-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:61)。3.—種藥物組合物，包括治療有效量的權利要求1中所述的MC-JJ2162多肽類似物或者其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體或稀釋劑。4.權利要求1中所述的MC-JJ2162多肽類似物或者其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體或稀釋劑在製備用於治療糖尿病的藥物中的運用。5.權利要求1中所述的MC-JJ2162多肽類似物的製備方法，其特徵在於採用微波促進Fmoc旭u正交保護固相合成策略，於固相載體上先合成得到載有第一個Fmoc保護胺基酸的樹脂，茚三酮法檢測為陰性後脫去Fmoc保護基得到載有第一個胺基酸殘基的樹脂；再進入下一個偶聯循環，按照相應的肽序用不同的保護胺基酸重複偶聯和脫保護的步驟，依次延長所需的胺基酸序列，合成得到載有相應多肽的樹脂，最後用裂解劑將多肽從樹脂上切割下來得到多肽粗品。粗品經製備級高效液相色譜純化，凍幹得多肽純品.6.根據權利要求5中所述微波促進固相合成MC-JJ2162多肽類似物方法，其特徵是載有第一個Fmoc保護胺基酸的樹脂的製備方法，是通過在微波照射條件下Fmoc保護胺基酸先經活化劑活化後再與固相載體偶合得到，反應中加入l-羥基-苯並三氮唑(HOBT)或其衍生物抑制消旋，並使用有機鹼中和反應的酸性。7.根據權利要求6所述的載有第一個Fmoc保護胺基酸的樹脂的製備方法，其特徵在於使用的固相載體是Rink樹脂、Wang樹脂或2-氯三苯甲基氯樹脂；使用的活化劑是二環己基碳二亞胺(DCQ、N，N'-二異丙基碳二亞胺(DIC)、N，N〃-羰基二咪唑(CDI)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)、2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、苯並三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或6-氯苯並三氮唑-l，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU);使用的1-羥基-苯並三氮唑(HOBT)衍生物為N-羥基琥珀醯亞胺(HOSU)、l-羥基-7-偶氮苯並三氮唑(HOAT)或3-羥基-l，2，3-苯並三嗪-4(3H)-酮(HOOBT);使用的有機鹼為三乙胺(TEA)、N-甲基嗎啉(NMM)或二異丙基乙胺(DIEA);微波促進條件是微波頻率2450MHz，反應溫度20100°C，反應時間為515min。8.根據權利要求5中所述微波促進固相合成MC-JJ2162多肽類似物合成方法，其特徵是Fmoc保護基的脫除是通過使用含有O.lmol丄"的1-羥基-苯並三氮唑(HOBT)的六氫吡啶溶液在微波促進下反應，選用二甲基甲醯胺(DMF)、二甲亞碸(DMSO)、或N-甲基吡咯烷酮(NMP)為反應溶劑；微波促進條件是微波頻率2450MHz，反應溫度20IO(TC，反應時間為110min。全文摘要本發明涉及新型高效降血糖苦瓜MC-JJ2162多肽類似物及其微波促進固相合成方法。通過對天然苦瓜多肽的2，4，5，8或9位點進行改造得到具有更長藥理作用時間的MC-JJ2162多肽類似物；其化學合成是通過微波促進固相合成方法而得以高效快速實現，粗品經製備級高效液相純化，最後凍幹得到MC-JJ2162多肽類似物。文檔編號C07K1/04GK101691398SQ20091018331公開日2010年4月7日申請日期2009年9月17日優先權日2009年9月17日發明者華傑,張惠斌,王敬傑,紀劍峰,金晶,錢海,陳巍,陳鑫,黃文龍申請人:中國藥科大學