用於炎性病症的cajanus提取物和葡糖胺的製作方法

2023-09-22 20:39:55

專利名稱：用於炎性病症的cajanus提取物和葡糖胺的製作方法
用於炎性病症的CAJANUS提取物和葡糖胺發明概述本發明涉及包含Cajanus提取物和葡糖胺的新穎組合物，以及這些組合物作為藥物的用途，尤其是作為用於治療、輔助治療或預防炎性病症的藥物的用途。炎性病症anflammatory disorder)是世界上最重要的健康問題之一，因為許多疾病，例如動脈粥樣硬化、關節炎和糖尿病，都涉及炎性過程。炎症(Inflammation) —般是身體組織對外界材料或傷害性刺激對宿主的入侵的局部保護性應答。因此，炎症的起因可以是感染性試劑，例如細菌、病毒和寄生蟲；或物理因素，例如燒灼或輻射；或化學品，例如毒素、藥物或工業試劑；或免疫反應，例如變態反應和自身免疫應答或與氧化應激相關的病況。炎症的特徵在於受影響區域的疼痛、發紅、腫脹、發熱和最終喪失功能。這些症狀是主要涉及先天免疫系統的細胞的一系列複雜的相互作用的結果。細胞的應答導致產生若干組炎症介質的相互作用網絡，所述炎症介質包括蛋白質(例如細胞因子、酶、蛋白酶、過氧化物酶、主要鹼性蛋白、黏附分子(ICAM，VCAM))，脂質介質(例如類花生酸、前列腺素、白細胞三烯、血小板活化因子[PAF])，和活性氧種類(例如過氧化氫、超氧化物陰離子02_、一氧化氮[NO]等)。然而，許多這類炎症介質也是正常細胞活性的調節子。因此，炎性反應的不足導致產生缺乏抵抗力的宿主(即感染)。重要地，不受控制的並且因此是慢性的炎症導致炎性疾病，所述炎性疾病部分地由若干種上述介質的過量生產或失衡生產介導。炎性介質過量生物合成導致的急性和慢性炎症涉及大量炎性病症，如關節炎(例如骨關節炎、風溼性關節炎)、哮喘、炎性腸病、炎性皮膚疾病(例如接觸性皮炎[尤其是尿布區皮炎]、特應性皮炎、乾燥症、溼疹、酒渣鼻、皮脂溢出、銀屑病、神經性皮炎、痤瘡、熱燒傷和輻射燒傷如曬傷)和慢性炎性病症，例如動脈粥樣硬化、心臟病、代謝症候群X、癌症、 Alzheimer』 s病及其前期階段(如輕度認知缺損)或與慢性皮膚炎癥結合的光老化。風溼性關節炎是關節的慢性炎性疾病，其是許多不同形式的關節炎之一。例如，關節炎包括風溼性關節炎、脊椎關節病、痛風性關節炎、骨關節炎、系統性紅斑狼瘡和幼年型關節炎。儘管在許多情況下所述疾病的病因學是未知的，但是一些關節炎性退化(例如SLE 和RA)是自身免疫疾病。與哮喘類似，風溼性關節炎的特徵在於細胞因子、趨化因子、白細胞介素及其受體、黏附分子及其各自受體以及炎性酶的長期失衡表達導致的分子水平。銀屑病是最常見的皮膚問題之一，其影響1-3%的人群。炎性腸病(IBD)是用於描述胃腸道病症如潰瘍性結腸炎和Crohn's病的一個通用術語。炎性反應是銀屑病和IBD 病因學中的重要組成；多種趨化因子和白細胞介素是不同組織中這些炎性過程的關鍵調節子。除了血管內脂質沉積的過程之外，內皮(即血管壁)的炎性反應被認為關鍵性地引起動脈粥樣硬化，即粥樣斑形成。最終引發炎症的血管損傷導致動脈粥樣硬化。在粥樣斑形成期間，活化的巨噬細胞、T-淋巴細胞和最終的平滑肌細胞在損傷處累積並增殖，所述損傷最終形成動脈粥樣硬化斑塊。單核細胞/巨噬細胞和淋巴細胞活化導致類花生酸、細胞因子和基質金屬蛋白酶(MMP)的釋放，所述類花生酸、細胞因子和基質金屬蛋白酶均涉及內皮損傷以及動脈粥樣硬化斑塊的形成和最後破裂。最後，在高冠狀動脈疾病(CAD)風險的組中，循環炎性標記物(circulating inflammatory markers)如C-反應性蛋白(CRP)、 血纖蛋白原(fibrinogen)和白細胞介素提高或改變。若干臨床試驗指出提高的CRP濃度與提高的冠狀和血管事件風險相關。總而言之，炎性過程在粥樣斑形成的開始和發展中起
重要作用。炎性介質的組織特異性或器官特異性產生中的改變也與Alzheimer』 s病的病理生理學相關。在患有Alzheimer』 s病的患者大腦中存在炎症的跡象，因為其特徵是提高的細胞因子和活化的小神經膠質細胞水平。因此，炎症不僅涉及經典的炎性病症(例如關節炎、哮喘、腸病)，而且與許多慢性炎性病症相關(例如動脈粥樣硬化、心臟病、代謝症候群 X、癌症、Alzheimer' s 病)。炎性事件還與不同類型癌症(例如胃癌和腸癌、黑色素瘤)的病理生理學相關。在人的乳腺、結腸、肺和胰腺癌中已經發現提高的炎性介質(如前列腺素)水平。目前兩種主要的藥物種類——皮質類固醇和非類固醇消炎藥(NSAID)，被用於治療炎性病症。NSAID和皮質類固醇事實上提供了症狀緩解。出於對長期使用的嚴重副作用的越來越多的考慮，皮質類固醇的使用已減少。NSAID是最廣泛使用的藥物之一，主要用於治療疼痛和炎性病症，尤其是用於治療關節炎(即減輕疼痛)。流行病學研究已提出攝取NSAID的患者具有比不攝取NSAID的患者更低的發生Alzheimer's病的風險。NSAID的保護性作用提示環氧合酶可能涉及神經退行性過程。另外，流行病學研究顯示與不攝取NSAID的人群相比，在攝取NSAID的人群中結腸直腸癌、胃癌、食管癌和乳腺癌的風險顯著降低。在動物模型中，NSAID顯著降低腫瘤發生。然而，治療慢性疾病如關節炎時，NSAID的長期使用受到嚴重副作用(如嚴重的胃腸併發症、腎毒性或哮喘反應)的限制。因此，需要具有弱副作用或無副作用的新的消炎劑。患有炎性疾病的患者對被認為是「天然的」療法具有特殊的興趣，所述療法具有溫和的消炎作用並且不具有大的副作用，所述療法可以被用於疾病預防和作為輔佐療法。另外，使用的療法需要在過量和不足的炎性反應之間維持平衡。存在顯示抗炎作用的這類「天然」藥劑的許多已知例子。然而，這些「天然」化合物的缺點是它們的生物學活性和因此導致的抑制活性通常是不足的。發明詳述驚訝地發現，Cajanus提取物和葡糖胺的組合協同增強了抗炎活性。另外，驚訝地發現所述組合可能還通過刺激軟骨細胞的增殖協同增強了軟骨構建和修復。因此，本發明的組合物可特別適用於治療、輔助治療和預防炎性病症，如心臟病、多發性硬化、骨關節炎和風溼性關節炎、動脈粥樣硬化和骨質疏鬆。因此，本發明涉及包含Cajanus提取物和葡糖胺的組合物。優選地，本發明涉及包含化合物A-H(見下文)和葡糖胺的組合物。附圖概述

圖1 展示了 Cajanus提取物與葡糖胺硫酸鹽的混合物的協同效應。Cajanus的濃度在X-軸中標出(以mg/L為單位)，葡糖胺硫酸鹽的濃度在y-軸中標出(以mg/L為單位)。直線的端點反映出葡糖胺(y-軸)和Cajanus (X-周)的IC5tl值。用方形符號繪製觀察到的葡糖胺與Cajarms的組合的IC5tl值。因為它們位於直線下方，它們反映出協同的相互作用。在本文中使用時，術語「Cajanus」是Cajanus cajan或Cajanus indicus或其提取物，並且包含至少一種以下化合物，優選地包含多於一種以下化合物，最優選地包含所有這些化合物 化合物A (喬松酮) 化合物B (木豆芪A) 化合物C (木豆芪A碳酸[2-羥基-4-甲氧基-3-(3-甲基_2_ 丁烯基)_6_ (2_苯乙基)苯甲酸]E-同分異構體)或其被醚化或酯化的羥基衍生物 化合物D (木豆芪A碳酸[2-羥基-4-甲氧基-3_(3_甲基_2_ 丁烯基)_6_ (2_苯乙基)苯甲酸]Z-同分異構體)或其被醚化或酯化的羥基衍生物 化合物 E (5-甲氧基-3-芪酚)(5-methoxy-3-stilbenol) 化合物 F (4-0-甲基赤松素酸)(G-O-methylpinosylvic acid)) 化合物 G(9-羥基-10，12-十八碳二 烯酸)((9-hydroxy-lO， 12-actadecadienoic acid)) 化合物 H(amorfrutin A)。植物材料或提取物中這些化合物的量不是關鍵性的。優選地，存在以植物材料或提取物的總重為基礎至少0.5wt. %的化合物A-H。更優選地，存在以植物材料或提取物的總重為基礎至少Iwt%、進一步更優選地至少IOwt. %的量。需要時，可以例如通過加工Cajanus的天然來源，從而化合物A-H中的至少一種被選擇性地去除、保留或富集，來製備包含化合物A-H的植物提取物。或者，可以使用經純化的化合物A到H來製造此類組合物。也可以如下製備此類組合物例如向包含少量化合物 A-H的天然來源或經加工形式的天然來源中添加一定量的化合物B和/或化合物C到H中的至少一種。可以通過任何合適的手段加工Cajanus，以獲得化合物A_H。可以通過用溶劑如乙醇或二氯甲烷在回流溫度下或在更低的溫度下常規提取Cajanus(任選地以經乾燥或研磨的形式)，來獲得包含化合物A到H中至少一種的植物提取物。或者，可以用超臨界流體如液體二氧化碳提取，或通過用水對樹皮進行蒸汽蒸餾之後對蒸餾出的有機部分取樣來提取。取樣可例如通過用有機溶劑如二氯甲烷來進行。隨後的溶劑去除得到想要的 Cajanus提取物。任選地，可對藉此獲得的Cajanus提取物進行進一步的加工步驟，以富集化合物A到H的含量。提取和/或純化方法是本領域已知的，並且包括描述於Journal of Separation Science(2006),29(3),351-357 或 Journal of Chromatography, A (2004), 1036(2),171-175 中的方法。需要時，可以通過本領域技術人員已知的方法，例如使用烷基化試劑或乙醯化試劑對提取物或純淨的經分離的化合物進行進一步衍生化，從而獲得想要的衍生物。更優選地，通過Cajanus的超臨界二氧化碳提取獲得包含化合物A到H的植物提取物。或者可以通過化學合成獲得物質A到H。在本發明的範圍中，「葡糖胺」表示葡糖胺及其所有衍生物，例如葡糖胺鹽，例如葡糖胺硫酸鹽或葡糖胺鹽酸鹽。葡糖胺-3-硫酸鹽和葡糖胺-6-硫酸鹽是優選的形式。葡糖胺是可商業獲得的，並且可以從殼的甲殼質(shell chitin)製備，所述甲殼質典型地源自蟹或蝦。根據本發明的組合物中Cajanus與葡糖胺的比例可選自1比50到5比1的範圍， 優選地選自1比20到3比1的範圍，例如選自1比10到1比1的範圍。本發明的組合物特別適用於治療、輔助治療和預防不同形式的關節炎，尤其是骨關節炎和風溼性關節炎。本發明的組合物還適合用作治療、輔助治療和預防關節病症的藥劑，尤其是用作用於減輕關節炎症、維護和/或改善關節健康、預防關節僵直、促進關節可動性、提供柔軟和/或靈活的關節、潤滑關節、減輕與關節炎症相關的疼痛、減輕關節腫脹、 減少關節問題和提供關節護理的藥劑。因此，本發明還涉及本發明的組合物作為治療、輔助治療或預防炎性病症以及關節病症的藥劑的用途。還在另一實施方案中，本發明涉及葡糖胺用於增強Cajanus提取物的抗炎活性的用途。已發現根據本發明的組合物還適用於治療、輔助治療或預防另一關節病症，即關節中的軟骨退化或軟骨損傷，並同樣用於治療關節病症例如退行性關節病症(如骨關節炎)的軟骨退化組件；或運動損傷。軟骨退化在本發明的範圍內定義為關節軟骨的代謝改變，特徵是提高的軟骨退化酶(例如基質金屬蛋白酶，包括膠原酶、彈性蛋白酶或ADAMTS，例如聚蛋白多糖酶 (aggrecanase)等等)^tJ/^t。骨關節炎是非炎性來源的關節慢性退行性疾病，其由於衰老期間關節的磨損消耗 (wear and tear)而發生，並導致疼痛和減小的關節功能。骨關節炎的症狀包括一個或多個關節中疼痛、僵硬和喪失活動性(mobility)。過量的關節負荷提高骨關節炎的風險，因此骨關節炎主要影響負重關節如脊柱、膝蓋和髖，但是拇指和指關節也被影響。關節病症也可由傷害(即微損傷(microdamage)或鈍傷，骨折，對腱、半月板或韌帶的損傷)引起，或可以由過度機械應激引起，或由例如損傷或肥胖症造成的其它生物力學不穩定性引起。歸因於軟骨退化的關節病症是老年人中殘疾和功能障礙的主導原因；60歲以上的人中有幾乎80%顯示這些病症的一些跡象。年齡、遺傳因素、肌肉廢用(muscle disuse) 和虛弱、創傷、肥胖症和解剖學異常促使該病症的發生。關節病症難以治療。迄今為止，治療在很大程度上被限制為優選地用非類固醇抗炎藥物減弱症狀。藥物被用於控制疼痛和抑制腫脹，但是不能預防或治療對軟骨的損傷。經歷嚴重軟骨損傷的患者頻繁地需要手術，包括關節置換手術。因此，人們非常需要治療或預防軟骨損耗和損傷的藥劑，而本發明解決了該需要。在本申請通篇中使用時，術語「預防」還包括延遲或組織病況的發生，減輕發展中的病況的嚴重性，在病況中進行早期幹預等等。其不僅適用於個體從未接觸病況的情況。本發明的組合物可具有一種或多種以下特性 其維護和/或改善關節健康 其預防關節僵直 其促進關節可動性 其幫助提供柔軟和/或靈活的關節 其潤滑關節
其減輕或減小與關節炎症相關的關節炎疼痛 其減少關節問題 其提供關節護理 其治療或預防關節退化， 其提供關節完整性， 其延遲或預防關節損傷的發展， 其支持關節功能， 其促進關節健康和功能， 其天然地支持活動個體的關節健康和可動性， 其維護關節的活動靈活性， 其促進關節靈活性。本發明的其他一些實施方案是· Cajanus加葡糖胺的組合物作為軟骨再生劑和軟骨維護劑的用途。 根據本發明的Cajanus加葡糖胺的組合物用於製造用於關節軟骨維護和再生的組合物的用途。 哺乳動物中(關節)軟骨的再生和/或維護的方法，所述方法包括對需要此類再生和/或維護的哺乳動物施用有效量的Cajanus加葡糖胺的組合物。在另一個實施方案中，本發明涉及本發明的Cajanus加葡糖胺的組合物作為用於治療、輔助治療或預防皮膚炎症(最優選地曬傷)的藥劑的用途。在一個不同的方面中，本發明還涉及用作藥物的本發明的組合物。還在另一實施方案中，本發明涉及本發明的組合物用於製造營養藥物、藥物、化妝品或皮膚病學製劑的用途，所述製劑適用於治療、輔助治療或預防炎性病症，例如上文詳述的那些，更優選關節炎，尤其是骨關節炎。本發明還涉及用於在動物(包括人)中治療、輔助治療和預防炎性病症(尤其是關節炎，更尤其是骨關節炎或風溼性關節炎)的方法，所述方法包括對有需要的動物(包括人)施用抗炎有效量的根據本發明的組合物的步驟。優選地，該炎性病症為關節炎，最優選地為骨關節炎。術語「抗炎有效量」是指獲得生理學效用所需的量。生理學效用可通過一次單個劑量或通過重複劑量達成。當然，施用的劑量可根據已知的因素變化並由本領域技術人員調節，所述因素例如具體組合物的生理學特徵及其施用模式和途徑；接收者的年齡、健康和體重；症狀的性質和程度；共存的治療的種類；治療的頻率；和期望的效果。在本發明的範圍中，「動物」表示所有的動物，包括哺乳動物，並且包括人。除人以外優選的哺乳動物的例子是非反芻動物或反芻動物，包括貓、犬、單峰駱駝(dromedary)、駱駝、大象和馬。在另一實施方案中，本發明涉及營養藥物組合物，其包含根據本發明的組合物和營養藥物可接受的載劑。在本文中使用時，術語營養藥物組合物包括食物製品、食品、膳食補充劑、營養補充劑或用於食物製品或食品的補充劑組合物。因此，在另一實施方案中，本發明涉及營養藥物，其中所述營養藥物為食物製品、食品、膳食補充劑、營養補充劑或用於食物製品或食品的補充劑組合物。本文使用的術語「食物製品」是指適用於被人或動物消耗的任何食物或飼料。食物製品可以是經製備和包裝的食物(例如蛋黃醬、色拉醬、麵包或乳酪食物)或動物飼料(例如擠壓和成粒的動物飼料、粗混合飼料或寵物食物組合物)。本文使用的術語「食品，，是指適合人或動物消耗的任何物質。術語「食品補充劑」是指用於補充人或動物膳食的小量化合物，其被包裝在單個或多個劑量單位中。膳食補充劑通常不提供大量的卡路裡，但是可含有其它微量營養物(例如維生素或礦物)。術語「營養補充劑」是指包含與卡路裡來源組合的膳食補充劑的組合物。在一些實施方案中，營養補充劑是肉替代物或補充劑(例如營養或能量棒或營養飲料或濃縮物)。食物製品或食品為例如飲料(如非酒精飲品和酒精飲品)以及要被添加進飲用水和液體食物中的液體製劑。非酒精飲品為例如軟飲、運動飲品、果汁(例如橙汁、蘋果汁和葡萄柚汁)；梓檬水、茶、接近水的飲品和乳和其它乳製品飲品(例如酸乳飲品)和減肥飲品。在另一實施方案中，食物製品或食品是指固體或半固體的食物，例如烘焙的商品如蛋糕和曲奇、布丁、乳製品、糖膏(confection)、點心食物或冷凍糖膏或花式新品(novelties) (例如冰激凌、奶昔)，製備的冷凍肉、糖果、點心製品(例如薯片)，液體食物如湯、塗抹物、 醬、沙拉醬、製備的肉製品、乳酪、酸乳和任何其它含脂肪或油脂的食物，和食物成分(例如小麥粉)。術語食物製品或食品還包括功能性食物和製備的食物製品，後者是指適合人消耗的任何預先包裝的食物。動物飼料(包括寵物食物組合物)包括旨在補充必需膳食需要的食物，以及調劑物(treats)(例如狗餅乾)或其它食物補充劑。包含本發明的組合物的動物飼料可以是乾燥組合物(例如粗粒)、半潮溼組合物、潮溼組合物，或其任何混合物的形式。或者或另外， 動物飼料是補充劑，例如肉湯、飲用水、酸乳、粉末、懸浮液、咀嚼物(chew)、調劑物(例如餅乾)或任何其它遞送形式。本發明的膳食補充劑可以以任何合適的方式被遞送。在優選的實施方案中，膳食補充劑被配製為用於口遞送。本發明的膳食補充劑的成分包含在可接受的用於口消耗的賦形劑和/或載體中。載體和由此產生的膳食補充劑自身的實際形式不是關鍵的。載體可以是液體、凝膠、軟膠囊、膠囊、粉末、固體片劑(包衣或非包衣的)、茶等等。膳食補充劑優選地以片劑或膠囊的形式，最優選以硬(殼)明膠膠囊的形式。合適的賦形劑和/或載體包括麥芽糖糊精、碳酸鈣、磷酸二鈣、磷酸三鈣、微晶纖維素、葡萄糖、米粉、硬脂酸鎂、硬脂酸、 交聯羧甲基纖維素鈉、澱粉羥乙酸鈉、交聚維酮、蔗糖、植物膠、乳糖、甲基纖維素、聚維酮、 羧甲基纖維素、玉米澱粉等等(包括其混合物)。優選的載體包括碳酸鈣、硬脂酸鎂、麥芽糖糊精及其混合物。使用傳統的技術將多種成分和賦形劑和/或載體混合併形成想要的形式。本發明的片劑或膠囊可以用腸包衣包裹，所述腸包衣在約6.0到7.0的pH下溶解。在小腸中溶解而不在胃中溶解的合適腸包衣是醋酸鄰苯二甲酸纖維素(cellulose acetate phthalate)。配製和施用技術的更多細節可見於最新版的Remington' s Pharmaceutical Sciences(Maack Publishing Co.，Easton, PA)。在其它一些實施方案中，膳食補充劑作為適合被消費者添加進食物或飲料中的粉末或液體提供。例如，在一些實施方案中，膳食補充劑可以以粉末的形式被施用給個體，所述粉末例如要通過混合進飲料中使用，或通過攪拌進半固體的食物(如布丁、點心(topping)、醬、濃湯(puree)、烹調的穀物或沙拉醬)中使用，或以其它方式通過添加進食物(例如封裝在食物或飲料容器的蓋中，用於在消耗前立即釋放)使用。膳食補充劑可含有一種或多種惰性成分，特別是如果期望限制由膳食補充劑添加進食譜中的卡路裡數時。 例如，本發明的膳食補充劑也可以含有任選的成分，包括例如草藥、維生素、礦物、強化劑、 著色劑、甜味劑、調味劑、惰性成分等等。在一些實施方案中，膳食補充劑還含有維生素和礦物，包括但不限於三鹼基的(trikisic)磷酸鈣或醋酸鈣；二鹼基的磷酸鉀；硫酸鎂或氧化鎂；鹽(氯化鈉)；氯化鉀或醋酸鉀；抗壞血酸；正磷酸鐵；煙醯胺；硫酸鋅或氧化鋅；泛酸鈣；葡萄糖酸銅；核黃素；β -胡蘿蔔素；鹽酸吡哆醇；硫胺單硝酸酯；葉酸；生物素；氯化鉻或chromium picolonate ；碘化鉀；硒酸鉀；鉬酸鈉；葉綠醌；維生素D3 ；氰鑽銨素；亞硒酸鈉；硫酸銅；維生素A ；維生素C ；肌醇；碘化鉀。維生素和礦物的合適劑量可以通過參考 U. S. RDA指南獲得。在其它一些實施方案中，本發明提供了包含本發明的組合物的營養補充劑(例如能量棒或肉代替品棒或飲料)。營養補充劑可以作為進餐或點心替換物使用，並通常提供養分卡路裡。優選地，營養補充劑以平衡的量提供碳水化合物、蛋白質和脂肪。營養補充劑還可包含碳水化合物，單糖、中鏈長度糖或多糖或其組合。單糖可以針對想要的感覺特性選擇。未烹飪的玉米澱粉是複雜碳水化合物的一個例子。如果期望其維持其高分子量結構，則食物配製物或其部分中僅應該包含未經烹飪或加熱加工的碳水化合物，因為加熱會將複雜的碳水化合物分解為簡單的碳水化合物，其中簡單的碳水化合物是單糖或二糖。在一個實施方案中，營養補充劑包含三種鏈長度水平的碳水化合物(簡單、適中和複雜；例如蔗糖、 麥芽糖糊精和未烹飪的玉米澱粉)來源的組合。要摻入本發明的營養補充劑中的蛋白質來源可以是用於營養配製物中的任何合適的蛋白質，其可包括乳清蛋白、乳清蛋白濃縮物、乳清粉末、卵、大豆粉、大豆乳、大豆蛋白、大豆蛋白分離物、酪蛋白酸鹽(例如酪蛋白酸鈉、酪蛋白酸鈣鈉、酪蛋白酸鈣、酪蛋白酸鉀)、動物和植物蛋白質及其水解產物或混合物。選擇蛋白質來源時，首先應當考慮蛋白質的生物學價值，最高的生物學價值在酪蛋白酸鹽、乳清、乳清蛋白、卵清蛋白和全卵蛋白中發現。在一個優選的實施方案中，蛋白質是乳清蛋白濃縮物和酪蛋白酸鈣的組合。這些蛋白質具有高生物學價值；即它們具有高比例的必需胺基酸。參閱Modern Nutrition in Health and Disease, Eighth Edition, Lea & Febiger, publishers,1986, especially Volume 1, pages 30—32。營養補充劑可以以多種形式和通過多種生產方法提供。在一個優選的實施方案中，為了製造食物棒，液體成分被烹飪；乾燥成分與液體成分被添加進混合機中並混合，直到獲得麵團相；將麵團放進擠壓機中並擠壓；將經擠壓的麵團切成合適的長度；使產物冷卻。除了本文明確列出的成分外，棒還可含有其它養分和填充劑以加強口味。本領域技術人員理解其它成分(例如填充劑、乳化劑、防腐劑等)可以被添加進本文所述的這些中，用於加工或製造營養補充劑。另外，調味劑、著色劑、香料、堅果等等可以被摻入營養藥物組合物中。調味劑可以是有味的提取物、揮髮油、巧克力調味劑、花生醬調味劑、曲奇碎屑、鬆脆米(crisp rice), 香草或任何可商業獲得的調味劑的形式。有用的調味劑的例子包括，但不限於純淨的茴香提取物、仿造的香蕉提取物、仿造的櫻桃提取物、巧克力提取物、純淨的檸檬提取物、純淨的橙提取物、純淨的薄荷提取物、仿造的菠蘿提取物、仿造的朗姆提取物、仿造的草莓提取物或純淨的香草提取物；或揮髮油，如香蜂葉油(balm oil)、月桂葉油、佛手柑油、柏木油 (cedarwood oi)、胡桃油、櫻桃油、桂皮油、丁香油、薄荷油；花生醬、巧克力調味劑、香草曲奇碎屑、奶油糖(butterscotch)或太妃糖(toffee)。在一個實施方案中，膳食補充劑含有可可或巧克力。乳化劑可以被添加用於營養藥物組合物的穩定性。合適的乳化劑的例子包括，但不限於卵磷脂(例如來自卵或大豆)，和/或甘油單酯和甘油二酯。其它乳化劑對技術人員是顯而易見的，對合適的乳化劑的選擇將部分取決於配製物和最終產物。也可以向營養補充劑中添加防腐劑以延長產物的貨架壽命。優選地，使用防腐劑如山梨酸鉀、山梨酸鈉、苯甲酸鉀、苯甲酸鈉、或EDTA鈣二鈉(calcium disodium EDTA)。除了上述碳水化合物外，營養藥物組合物可含有天然或人工的(優選低卡路裡的)甜味劑，例如糖類、環己烷氨基磺酸鹽(cyclamate)、天冬胺(aspartamine)、天冬甜素 (aspartame)、安賽蜜!((acesulfame K)和/或山梨糖醇。如果營養補充劑旨在被超重或肥胖的個體或患有II型糖尿病的個體(其易於患高血糖症)消耗，則這類人工甜味劑是期望的。通過營養藥物施用的Cajanus和葡糖胺的劑量和比例當然會取決於已知因素而變化，所述已知因素例如為具體組合物的生理學特徵及其施用模式和途徑；接收者的年齡、 健康和體重；症狀的性質和程度；共存的治療的種類；治療的頻率；和期望的效果；所述因素可由本領域的專業人士通過常見試驗或通過與營養藥物組合物配製相關的一般考慮來確定。在一個優選的實施方案中，營養藥物每份包含Img到lOOOrng、更優選地2mg到 500mg的Cajanus (優選地是包含化合物A-H的提取物的形式)，和Img到2000mg、優選地 Img到1500mg的葡糖胺。在另一方面中，本發明涉及包含根據本發明的組合物和藥物可接受的載體的藥物。本領域技術人員知道何種載體可以被用作藥物可接受的載體。合適的藥物載體例
如在本領域的標準參考文獻-上文Remington' s Pharmaceutical Sciences中有所描
述。這類藥物可接收的載體的例子為適用於口/腸胃外/可注射施用的無機和有機載體材料，包括水、明膠、阿拉伯膠、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、滑石、植物油等等。藥物組合物可還含有常規的藥物添加劑和佐劑、賦形劑或稀釋劑，其包括但不限於水、任何來源的明膠、植物膠、木質素磺酸鹽、滑石、糖、澱粉、阿拉伯膠、植物油、聚亞烷基二醇、調味劑、防腐劑、穩定劑、乳化劑、緩衝液、潤滑劑、著色劑、溼潤劑、填充劑等等。在一個優選的實施方案中，藥物是粉末、片劑、膠囊、凝膠、液體或固體實施方案的形式。藥物組合物中各個組分的劑量和比例可以由本領域技術人員使用常見的臨床前和臨床試驗確定，或使用關於營養藥物組合物配製的常見考慮決定。在一個優選的實施方案中，活性成分通過藥物組合物以單個劑量或多個劑量的方式被施用，其中Cajanus的用量為至少0. 01mg/kg體重/天，優選地為0. l_50mg/kg體重/天，最優選地為0. 3-15mg/kg體重/天，例如0. 8到8mg/kg體重/天，葡糖胺的用量為至少0. Olmg/ kg體重/天，優選地為0. l-50mg/kg體重/天，最優選地為0. 3-15mg/kg體重/天，例如 3-25mg/kg 體重 / 天。例如，藥物可包含每劑量單位(例如每粒膠囊或片劑)lmg到500mg用量的 CajanusJP Img到1500mg用量的葡糖胺。根據本發明的營養藥物和藥物可以是適用於施用給動物體(包括人體)的任何蓋倫形式(galenic form)，更尤其是口施用中常規的任何形式，例如固體形式，例如作為食物或飼料(用的添加劑/補充劑)、食物或飼料預混物、強化的食物或飼料、片劑、丸劑、顆粒劑、錠劑、膠囊和泡騰配製劑(如粉末和片劑)，或液體形式，例如溶液、乳劑或懸浮液的形式，例如作為飲料、糊劑和油懸浮液。糊劑可以被填充進硬或軟殼膠囊中。其它應用形式的例子是用於經皮、腸胃外、局部或可注射施用的形式。營養藥物和藥物可以是受控(延遲) 釋放的配製劑的形式。藥物的例子也包括適用於局部應用的組合物，如霜劑、凝膠、噴霧、乾燥膠棒、粉末等。另一方面，本發明涉及化妝品或皮膚病學製劑(後一製劑是藥物的特定種類)，其包含有效量的本發明組合物和化妝品或皮膚病學可接受的載體。化妝品或皮膚病學組合物還可包含常規的化妝品或者皮膚病學佐劑和/或添加劑和/或額外的活性成分。優選地，化妝品或皮膚病學製劑是下述皮膚護理製劑，其用於治療、輔助治療或預防皮膚炎症，尤其是由UV-輻射引起的曬傷、接觸性皮炎(尤其是尿布區皮炎)、特應性皮炎、乾燥病、溼疹、酒渣鼻、皮脂溢出、銀屑病、神經性皮炎、熱燒傷、光老化，或用於治療、輔助治療或預防不純(impure)皮膚。不純皮膚的例子包括膿皰、座瘡和具有炎性方面的其它皮膚不純。術語「有效量」優選地表示以化妝品或皮膚病學組合物的總重為基礎至少0. 1% 的來自Cajanus cajan的化合物A-H和葡糖胺。優選地，化妝品或皮膚病學製劑以約 0. Olwt. 到20wt. -%，更優選地約0. 05到IOwt. -%，仍然更優選地約0. 1到5wt. 的總量包含化合物A-H和葡糖胺。要應用於皮膚的化妝品或皮膚病學製劑的用量取決於製劑中活性成分的濃度和期望的化妝品或藥物作用。例如，應用可以是對皮膚應用霜劑。通常以1到2mg霜劑/cm2 皮膚的用量應用霜劑。然而，應用於皮膚的組合物用量不是關鍵性的，如果應用某用量的組合物不能達到期望的作用，則可以使用含有更多活性成分的更高濃度的活性製劑。本發明還涉及化妝品製劑的下述用途，所述用途用於美容治療、輔助治療或預防皮膚炎症，尤其是用於美容治療、輔助治療或預防曬傷、接觸性皮炎(尤其是尿布區皮炎)、 特應性皮炎、乾燥病、溼疹、酒渣鼻、皮脂溢出、銀屑病、神經性皮炎、熱燒傷或光老化。本發明還涉及下述方法，所述方法用於治療、輔助治療或預防皮膚炎症，尤其是人曬傷、不純皮膚(例如痤瘡)或與慢性皮膚炎症相關的光老化，所述方法包括下述步驟對有需要的人施用有效量的根據本發明的皮膚病學組合物。本發明還涉及下述方法，其通過本發明的化妝品製劑對皮膚炎症(尤其是曬傷或不純皮膚)進行美容治療、輔助治療或預防。優選地通過局部應用達成曬傷預防，所述局部應用包含本發明的組合物，優選地與合適的遮光劑組合。根據本發明的化妝品或皮膚病學製劑可以是溶劑或脂肪物質中懸浮液或分散液的形式，或者是乳劑或微乳劑(尤其是0/W或W/0型，0/W/0或w/o/w-型，其中0表示油相， W表示水相)的形式，如霜劑、糊劑、乳液、增稠的乳液或乳、軟膏劑形式的小泡分散液、凝膠、固體管膠棒或氣溶膠摩絲，並可以以摩絲、泡沫或噴霧泡沫、噴霧、管棒或氣溶膠或擦拭物(wipe)的形式被提供。化妝品或皮膚病學製劑的例子是皮膚護理製劑，尤其是身體油、 身體乳液、身體凝膠、治療霜劑、皮膚保護軟膏、保溼凝膠、保溼噴霧、醒膚身體噴霧、曬後製劑或防曬配製物。用於治療、輔助治療或預防皮膚炎症(例如曬傷、光老化或不純皮膚)的化妝品或皮膚病學組合物可以是用於口施用的常規形式，其例子在上文中描述，其還包括美容食物和補充劑。本發明的化妝品或皮膚病學製劑(例如作為遮光配製物或曬後製劑)可進一步分別包含常用的化妝品或皮膚病學佐劑和/或添加劑，例如防腐劑/抗氧化劑，脂肪物質/ 油，水，有機溶劑，矽酮，增稠劑，軟化劑，乳化劑，其它遮光劑，抗泡劑，溼潤劑，香料，表面活性劑，填充劑，掩蔽劑，陰離子、陽離子、非離子或兩性多聚物，或其混合物，推進劑，酸化或鹼化劑，染料，著色劑，色素或納米色素，光穩定劑，抗蟲劑，皮膚美黑劑，皮膚增白劑，抗菌劑，防腐活性成分或通常被配製進化妝品中的任何其它成分。可被摻入本發明的化妝品或皮膚病學製劑(例如防曬配製劑)中的遮光劑有利地選自IR、UV-A, UV-B、UV-C和/或光譜遮光劑。UV-B或廣譜遮光劑(即具有約290 和340nm之間吸收最大值的物質)的例子可以是有機或無機化合物。有機UV-B或光譜遮光劑為例如丙烯酸酯，例如2-氰基-3，3- 二苯基丙烯酸2-乙基己基酯(奧克立林 (octocrylene)，PARSOL 340)，2-氰基-3，3- 二苯基丙烯酸乙酯等等；樟腦衍生物，例如4-甲基亞苄基樟腦(PARSOL 5000)、3_亞苄基樟腦、甲基硫酸樟腦苯甲烷銨(camphor benzalkonium methosulfate)、聚丙烯醯胺基甲基亞苄基樟腦、磺基亞苄基樟腦、磺基甲基亞苄基樟腦、對苯二亞甲基二樟腦醯胺磺酸等等；肉桂酸酯衍生物，例如甲氧基肉桂酸乙基己基酯(PARS0L MCX)、甲氧基肉桂酸乙氧基乙基酯、甲氧基肉桂酸二乙醇胺酯(PARSOL Hydro)、甲氧基肉桂酸異戊酯等等，以及鍵合到矽氧烷上的肉桂酸衍生物；對氨基苯甲酸衍生物，例如對氨基苯甲酸、對二甲基氨基苯甲酸2-乙基己基酯、N-氧丙烯化的對氨基苯甲酸乙酯、對氨基苯甲酸甘油酯；二苯甲酮，例如二苯甲酮-3、二苯甲酮_4、2，2' ,4,4'-四羥基-二苯甲酮、2，2' - 二羥基_4，4' - 二甲氧基二苯甲酮等等；亞苄基丙二酸酯，例如 4-甲氧基亞苄基丙二酸二-(2-乙基己基)酯；2-(4-乙氧基-苯胺亞甲基)丙二酸酯，例如歐洲專利公開EP 0895 776中所述的2- -乙氧基-苯胺亞甲基)丙二酸二乙酯；如歐洲專利公開EP 0358584 Bi、EP 0538431 Bl和EP 0709080 Al中所述的含有苯丙二酸基的有機矽氧烷化合物如聚矽氧烷-15 (PARSOL SLX)；甲酚曲唑三矽氧烷(Drometrizole trisiloxane(Mexoryl XL))；咪唑衍生物，例如2-苯基苯並咪唑磺酸及其鹽(PARSOL, : HS)。2-苯基苯並咪唑磺酸的鹽為例如鹼金屬鹽(如鈉鹽或鉀鹽)、銨鹽，嗎啉鹽，伯、仲和叔胺鹽(例如單乙醇胺鹽、二乙醇胺鹽)等等；水楊酸酯衍生物，例如水楊酸異丙基苄酯、水楊酸苄酯、水楊酸丁酯、水楊酸乙基己基酯(PARSOL EHS，NEO Heliopan 0S)、水楊酸異辛酯或水楊酸高薄荷酯(homosalate，PARSOL, HMS，NEO Heliopan OS)等等；三嗪衍生物，例如辛基三嗪酮(UVINUL T-150)、二辛基丁醯胺基三嗪酮(UVAS0RB HEB)。如例如EP 1471995 中所述的被封裝的UV-遮光劑如被封裝的甲氧基肉桂酸乙基己基酯(Eusolex UV-pearls)或裝有UV-遮光劑的微膠囊等等。無機化合物為色素，如微粒化的ai0、Ti02等等。術語「微粒化的」是指從約5nm到約200歷，尤其是從約15nm到約IOOnm的顆粒尺寸。TW2顆粒也可用金屬氧化物(例如氧化鋁或氧化鋯)或有機塗層(例如多元醇、甲基矽酮、硬脂酸鋁、 烷基甲矽烷)包覆。這類塗層為本領域熟知。廣譜的或UV A遮光劑(即在約320nm到400nm之間有最大吸收的物質)可以是有機或無機化合物，例如二苯甲醯甲烷衍生物，例如4-叔丁基-4'-甲氧基二苯甲醯甲烷(PARS0L 1789)、二甲氧基二苯甲醯甲烷、異丙基二苯甲醯甲烷等等；苯並三唑衍生物，例如2，2'-亞甲基-二-(6-QH-苯並三唑-2-基)-4-(1，1，3，3，_四甲基丁基)-苯酚)(TIN0S0RB M)等等；二-乙基己基氧代苯酚甲氧基苯基三嗪(Tinosorb S)等等；亞苯基-1，4- 二-苯並咪唑磺酸或鹽，例如2，2- (1，4-亞苯基)二 - (1H-苯並咪唑-4，6- 二磺酸)(Neoheliopan AP)；經氨基取代的羥基二苯甲酮，例如如歐洲專利公開EP 1046391中所述的2-(4-二乙氨基-2-羥基-苯甲醯基)-苯甲酸己酯(Uvinul A plus)；如國際專利公開W02005080341 Al中所述的離子UV-A遮光劑。色素，例如微粒化的ZnO或TiO2等等。 術語「微粒化的」是指從約5nm到約200nm，尤其是從約15nm到約IOOnm的顆粒尺寸。顆粒也可用金屬氧化物(例如氧化鋁或氧化鋯)或有機塗層(例如多元醇、甲基矽酮、硬脂酸鋁、烷基甲矽烷)包覆。這類塗層為本領域熟知。因為二苯甲醯甲烷衍生物具有有限的光穩定性，所以其可以適當地光穩定這些 UV-A遮光劑。因此，術語「常規的UV-A遮光劑」也指被以下物質穩定的二苯甲醯甲烷衍生物(例如PARSOL 1789)如歐洲專利公開EP O 514 491 Bl和EP O 780 119 Al中描述的3，3- 二苯基丙烯酸酯衍生物；如US專利No. 5，605，680中描述的亞苄基樟腦；如歐洲專利公開EP 0358584 BUEP 0538431 Bl和EP 0709080 Al中描述的含苯丙二酸酯基的有機矽氧烷。可以包含在本發明的化妝品或皮膚病學製劑中的活性成分為例如維生素及其衍生物，例如生育酚，醋酸生育酚，抗壞血酸，抗壞血酸磷酸鹽，維生素Q、D和K，視黃醇，視黃醛，視黃酸，視黃醇醋酸酯，視黃醇棕櫚酸酯，生物素，類胡蘿蔔素衍生物如β-胡蘿蔔素、 番茄紅素、蝦青素，植物提取物，抗菌成分，包含二肽、寡肽和多肽的不穩定的胺基酸如甲硫氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸，酚類、多酚或類黃酮，沒藥醇，尿囊素， 植烷三醇，泛醇，AHA酸，泛醌如輔酶Q10，神經醯胺酶，假神經醯胺，精油，植物提取物過氧核糖核酸、植烷酸。化妝品和皮膚病學佐劑、添加劑和/或其它活性成分的必需量可以以期望的產物為基礎，由本領域技術人員容易地選擇，並將在實施例中闡述，但不僅限於此。本發明將通過以下的非限制性實施例闡述。實施例1C. cajan和葡糖胺硫酸鹽的組合的抗炎活性通過測量對一氧化氮和/或促炎症前列腺素(PGE2)合成的抑制，在細胞測定法中測定Cajanus與葡糖胺硫酸鹽組合的混合物的抗炎效應。PGE2在炎症過程中起關鍵作用，而一氧化氮(NO)是多種慢性炎性疾病中的炎症標誌，所述慢性炎性疾病包括多種形式的關節炎、胃腸疾病和代謝症候群X (Creamer P et al 1997 Lancet 350 =503-508 ； Vuolteenaho et al. 2007 Scand. J Rheumatology 36 :247-258)。
使用鼠巨噬細胞系7，在細胞測定法中測試對炎性應答的影響。細胞購自 ATCC(Manassas，VA，USA)，並在含鏈黴素/青黴素、非必需胺基酸和10%胎牛血清(FCS)的 DMEM(D-IO)中培養。將細胞( 50，000/孔)接種在平底微量滴定板中，並培養一天。然後在含有0.25% FCS的完全培養基(D-025)中使細胞飢餓。過夜培養後，去除培養基並用以兩倍終濃度含有測試化合物的IOOuL D-025代替。Cajanus cajan提取物由Analyticon製備。葡糖胺3_硫酸鹽和葡糖胺_6_硫酸鹽購自Sigma。隨後添加IOOuL含2ug/ml LPS的D-025 (即lug/ml的終LPS濃度)，並將細胞培養M小時。通常以兩倍稀釋的步驟，在從0. 1到100mg/L的濃度範圍內來測試物質。 所有處理一式兩份重複進行，並且對每個處理進行若干實驗系列。一氧化氮從細胞中釋放， 並被轉化成亞硝酸鹽。使用亞硝酸鈉作為標準，通過Griess反應測定亞硝酸鹽的濃度。簡言之，將50ul 上清液與Griess試劑1 (25uL)和Griess試劑2 (25uL)混合，離心並測定540nm處的光密度。通過根據製造商的說明書使用得自Cayman Chemicals (Ann Harbor, WI, USA)的EIA， 測定分泌進細胞培養基中的PGE2。所有測定在不同稀釋度的培養上清液中一式兩份進行。 使用兩參數最小方差擬合等式[7 =々+( -幻/(1+(((1)~0))]，針對最佳擬合曲線(Excel 擬合軟體程序)計算被LPS-刺激的細胞的IC5tl值。表1顯示，葡糖胺硫酸鹽不抗炎或僅僅具有邊緣抗炎，而Cajanuscajan提取物的混合物以劑量依賴型的方式，既降低NO產生又降低PGE2產生。表1 單一物質的IC5tl值
權利要求
1.包含Cajanus或其生物活性組分化合物A-H和葡糖胺的組合物。
2.如權利要求1中所述的組合物，其中所述Cajanus生物活性組分已通過從C.cajan 或C. indicus提取而富集。
3.如權利要求1或2中所述的組合物，其中Cajanus與葡糖胺的比例在10 1到 100 1的範圍內。
4.如權利要求1到3中任一項所述的組合物作為用於治療、輔助治療或預防炎性病症的藥劑的用途。
5.如權利要求1到3中任一項所述的組合物作為用於治療、輔助治療和預防關節病症的藥劑的用途。
6.營養藥物，其包含權利要求1到3中任一項定義的組合物和營養藥物可接受的載體。
7.如權利要求6中所述的營養藥物，其為食物製品、食品、膳食補充劑、營養補充劑或用於食物製品或食品的補充劑組合物。
8.如權利要求6和7中任一項所述的營養藥物組合物，其中Cajanus和葡糖胺的量為每份0. 01到Ig,更優選地為0. 2mg到500mg。
9.用作藥物的如權利要求1到3中任一項所述的組合物。
10.如權利要求1到3中任一項所定義的組合物用於製造下述藥物的用途，所述藥物用於治療、輔助治療或預防炎性病症。
11.如權利要求10中所述的用途，其中所述炎性病症是任何形式的關節炎。
12.如權利要求10中所述的用途，其中所述炎性病症是糖尿病或代謝症候群X。
13.如權利要求10中所述的用途，其中所述炎性病症是皮膚炎症。
14.如權利要求10中所述的用途，其中所述炎性病症與神經退行性疾病相關。
15.藥物，其包含如權利要求1到3中任一項所定義的組合物和藥物可接受的載體。
16.如權利要求15中所述的藥物，其為粉末、片劑、膠囊、凝膠、液體或固體形式。
17.如權利要求15中所述的藥物，其用於皮膚病學的目的。
18.化妝品組合物，其包含如權利要求1到3中任一項定義的組合物和化妝品可接受的載體。
19.如權利要求18中所述的化妝品組合物，其為皮膚護理製劑。
20.用於治療、輔助治療或預防動物中炎性病症的方法，所述方法包括對需要此類治療的動物施用有效量的如權利要求1到3中任一項中定義的所述組合物的步驟。
21.如權利要求18中所述的方法，其中所述炎性病症是關節炎。
22.如權利要求18中所述的方法，其中所述炎性病症是皮膚炎症。
23.Cajanus用於增強葡糖胺的抗炎活性的用途。
24.增強Cajanus效力的方法，所述方法包括對含有Cajanus的組合物添加有效量的葡糖胺。
全文摘要
本發明涉及包含Cajanus和葡糖胺的新穎組合物，以及這些組合物作為藥物的用途，尤其是作為用於治療、輔助治療或預防炎性病症的藥物的用途。
文檔編號A61K31/7008GK102325535SQ201080008947
公開日2012年1月18日 申請日期2010年2月19日 優先權日2009年2月23日
發明者丹尼爾·雷德爾斯多夫, 克利斯託弗·維瑞裡, 斯文·沃爾夫拉姆, 約瑟夫·斯楚瓦格爾, 納薩列·理察 申請人:帝斯曼智慧財產權資產管理有限公司