分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法
2023-10-06 02:59:59 2
專利名稱：分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法
技術領域：
本發明涉及分析化學領域，特別涉及到用HPLC法分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法。
背景技術：
在提取法生產亮氨酸的過程中，常採用鄰二甲苯-4-磺酸作為沉澱劑，從複雜的胺基酸混合溶液中選擇性地沉澱亮氨酸，所形成的亮氨酸-沉澱劑複合物還需要通過氨解脫除沉澱劑、脫色等一系列精製過程，最終得到亮氨酸成品。其工藝流程如圖1 ;而分析、監控生產過程各環節的沉澱劑含量是保證生產正常運行和產品質量的必要條件，主要包括
(I)沉澱液；(2)沉澱母液；(3)氨解母液；(4)脫色液。鄰二甲苯-4-磺酸是帶苯環的有機化合物，在266nm有較強的紫外吸收峰，可以採用紫外分光光度法進行測定。但在上述樣品中都存在同樣具有紫外吸收的幹擾物質。因此，需要採用HPLC等分離手段預先實現了鄰二甲苯-4-磺酸和幹擾物質的分離後，才能完成鄰二甲苯-4-磺酸的測定。
發明內容
本發明的目的是提供分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法，它採用HPLC法進行分析，從而保證亮氨酸生產的正常和穩定運行，實現對亮氨酸產品的質量控制。為了解決背景技術所存在的問題，本發明的分析方法為1)取樣、制樣取亮氨酸生產過程中的沉澱液、沉澱母液、氨解母液、脫色液，分別以適當的倍數稀釋，使稀釋液中鄰二甲苯-4-磺酸的濃度在O. l-10mmol/L範圍內，再將稀釋液通過微孔過濾器過濾，將濾液作為分析溶液；2)設置流動相流速為O. 8-1. OmL/min,檢測波長為266nm，柱溫為室溫；3)採用六通進樣閥將製成的分析溶液20uL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，進行色譜分析。本發明分析方法選用C18，4. 6mmX 150mm分離柱，以醋酸鈉緩衝液-有機相作為流動相，其中有機相為甲醇、乙腈，優選乙腈，醋酸鈉緩衝液為醋酸與醋酸鈉混合配製的緩衝溶液，在流動相中有機相與醋酸鈉緩衝液的體積比為10 90-40 60，優選為20 80，醋酸鈉緩衝液中醋酸濃度為O. 10-0. 20mol/L，優選為0. 15mol/L，醋酸鈉緩衝液的pH值為4. 5-6. 8，優選為6. O。本發明具有以下有益效果1、採用碳十八燒基反向鍵合相色譜柱(C18,4. 6_X 150mm),能夠有效地分離樣品中的鄰二甲苯-4-磺酸和各種幹擾物質，準確測定樣品中的鄰二甲苯-4-磺酸濃度。2、簡便、快速，能準確地分析亮氨酸生產過程中提取的各種樣品的鄰二甲苯-4-磺酸濃度，確保對生產過程的監控。
圖1是現有技術的工藝流程圖2是本發明實施例選用沉澱液後的示意圖；圖3是本發明實施例選用沉澱母液的示意圖；圖4是本發明實施例選用氨解母液的示意圖；圖5是本發明實施例選用脫色液的示意圖。
具體實施例方式本具體實施方式
採用以下分析方法為1)取樣、制樣取亮氨酸生產過程中的沉澱液、沉澱母液、氨解母液、脫色液，分別以適當的倍數稀釋，使稀釋液中鄰二甲苯-4-磺酸的濃度在0. 1-lOmmol/L範圍內，再將稀釋液通過微孔過濾器過濾，將濾液作為分析溶液；2)設置流動相流速為0. 8-1. OmL/min，檢測波長為266nm，柱溫為室溫；3)採用六通進樣閥將製成的分析溶液20uL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，進行色譜分析。本發明分析方法選用C18，4. 6mmX 150mm分離柱，以醋酸鈉緩衝液-有機相作為流動相，其中有機相乙腈，醋酸鈉緩衝液為醋酸與醋酸鈉混合配製的緩衝溶液，在流動相中有機相與醋酸鈉緩衝液的體積比為20 80，醋酸鈉緩衝液中醋酸濃度為0. 15mol/L，醋酸鈉緩衝液的PH值為6.0。實施例1 :(I)儀器與試劑高效液相色譜儀=LabTech高效液相色譜系統及色譜工作站；色譜柱C18,4.6mmX 150mm ;流動相取無水醋酸鈉8. 2g，加水900mL溶解，滴加36%的醋酸至pH為6. 5，再補加水至IOOOmL,此為醋酸鈉緩衝液，將乙腈與醋酸鈉緩衝液以20 80(體積比)的比例混合，經0. 45um微孔濾膜過濾，並超聲波脫氣；流速1.OmL/min ；檢測波長266nm；柱溫室溫；進樣體積20uL。(2)實驗步驟分別取亮氨酸生產過程中的沉澱液、沉澱母液、氨解母液、脫色液10. OOmL於IOOmL容量瓶中，以水稀釋並定容。再分別取上述稀釋液1. OOmL，加流動相定容至10mL，即得各種樣品的分析液。在進樣前，還需採用0. 45um微孔濾膜過濾，取濾液進樣進行HPLC分析，記錄色譜圖。結果見附圖1-圖5。從附圖1-圖5可以看出，樣品溶液中存在的一些幹擾組分在鄰二甲苯-4-磺酸之前出峰，採用上述方法，實現了幹擾物質和鄰二甲苯-4-磺酸的分離，可對樣品中的鄰二甲苯-4-磺酸含量進行準確測定。
權利要求
1.分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法，其特徵在於的它的分析方法為1)取樣、制樣取亮氨酸生產過程中的沉澱液、沉澱母液、氨解母液、脫色液，分別以適當的倍數稀釋，使稀釋液中鄰二甲苯-4-磺酸的濃度在O. 1-lOmmol/L範圍內，再將稀釋液通過微孔過濾器過濾，將濾液作為分析溶液；2)設置流動相流速為O. 8-1. OmL/min，檢測波長為266nm，柱溫為室溫；3)採用六通進樣閥將製成的分析溶液20uL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，進行色譜分析。
2.根據權利要求1所述的分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法，其特徵在於本分析分析方法選用C18，4. 6mmX 150mm分離柱，以醋酸鈉緩衝液-有機相作為流動相，其中有機相為甲醇、乙腈，醋酸鈉緩衝液為醋酸與醋酸鈉混合配製的緩衝溶液，在流動相中有機相與醋酸鈉緩衝液的體積比為10 90-40 60，醋酸鈉緩衝液中醋酸濃度為O. 10-0. 20mol/L,醋酸鈉緩衝液的pH值為4. 5-6. 8。
全文摘要
分析亮氨酸生產過程中的沉澱劑鄰二甲苯-4-磺酸的方法，它涉及分析化學領域。它的分析方法為1)取樣、制樣取亮氨酸生產過程中的沉澱液、沉澱母液、氨解母液、脫色液，分別以適當的倍數稀釋，使稀釋液中鄰二甲苯-4-磺酸的濃度在0.1-10mmol/L範圍內，再將稀釋液通過微孔過濾器過濾，將濾液作為分析溶液；2)設置流動相流速為0.8-1.0mL/min，檢測波長為266nm，柱溫為室溫；3)採用六通進樣閥將製成的分析溶液20uL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，進行色譜分析；本發明採用HPLC法進行分析，從而保證亮氨酸生產的正常和穩定運行，實現對亮氨酸產品的質量控制。
文檔編號G01N30/02GK103048399SQ20121052101
公開日2013年4月17日 申請日期2012年12月7日 優先權日2012年12月7日
發明者劉勳 申請人:重慶工貿職業技術學院