新型σ-丁內醯胺之藥物組分的製備方法及醫藥應用的製作方法

2023-10-04 12:59:14 3

專利名稱:新型σ-丁內醯胺之藥物組分的製備方法及醫藥應用的製作方法
本發明介紹一個新型藥理活性的苯基和苄基取代的δ-丁內醯胺(在下文稱為「黃皮醯胺」)的製備，包括這類化合物從芸香科黃皮屬類植物分離，黃皮醯胺的某些衍生物及它們作為缺氧保護劑和抗健忘劑的應用。本發明還介紹了含有黃皮醯胺或其衍生物的藥物組分的製備方法。
已有報導芸香科非州黃皮在非州的某一地區作為草藥。(I.Mester等人，Planta Medica32(1)81，1977)。也有報導;印度黃皮的粗提物對心血管有作用，並且從五葉黃皮中分離的兩個香豆素衍生物clausmarins A和B具有解痙作用(Dhan PraKash等人，Phytochem.17，1194，1978;Aboo Shoeb等人，J.C.S.Chem.Commun.281，1978)。已從不同種屬的黃皮根、莖等中分離出了約50種組份。這些組份的大多數是香豆素咔唑和萜烯的衍生物;據報導到目前為止僅有兩個直鏈羧酸醯胺存在於黃皮屬植物的葉中(S.R.Johns等人，Aust.J.Chem.20，2795，1967;Dhan PraRosh等人，Indian J.Chem.Sect.B19B(12)，1975)。
現已知榔色黃皮葉中含有一種δ-丁內醯胺，它含有一個苯基和一個苄基取代物，是以兩種立體異構體存在的(「黃皮醯胺」和「化合物(9)」)榔色黃皮葉中還含有一種在結構上十分相近的二環丁內醯胺。還發現黃皮醯胺及其衍生物具有多種有價值的藥理性質。化學衍生法和光譜數據已證實了這些化合物的結構。
本發明提出通式(Ⅰ)為
的化合物，式中;
R為1-10碳的烷基，芳基和芳烷基。
R1表示氫，具有1至10個碳原子的一個烷基，芳基或芳烷基，具有1至18個碳原子的一個醯基，或者與R3一起表示一個化學鍵;
R2表示氫或者與R3一起表示氧;
R3表示氫、羥基、1至10個碳原子的烷氧基，苯氧基或苯烷氧基團，具有1至18個碳原子的醯氧基，與R1或R4一起表示一個化學鍵，或者與R2一起表示氧;
R4是氫，與R3一起表示一個化學鍵或與R5同;
R5和R6是相同或不同;表示氫，1至10個碳原子的烷基，芳香基或芳香基團，具有1至10個碳原子的一個烷氧基、苯氧基或苯烷氧基，1至18碳醯基、CF3、OCF3、硝基、羥基、滷素、氨基，1-4碳烷基取代的二烷胺基、羧基、SO3H或1-18碳的醯胺基。
在上述定義中，「烷基」和「烷氧基」最好含1至6個碳原子，並且特別指著甲基或甲氧基，「芳基」，「芳烷基」，「苯氧基」和「芳烷氧基」最好分別為苯基、苄基、苯氧基和苄氧基，「醯基」最好含1至4個碳原子並且特別是乙醯基。
根據通式(Ⅰ)的首選化合物為R為甲基;
R1是氫，烷基，醯基或與R3一起表示一個化學鍵;
R2是氫;
R3表示羥基、烷氧基，醯氧基或分別與R1，或R4，一起表示化學鍵。
R5和R6是氫。
上述可以從榔色黃皮葉中分離出的化合物結構式如下
「黃皮醯胺」
「化合物(9)」 「化合物(0)」(X-射線衍射證實了該立體化學)本發明也提出了黃皮醯胺的分離方法，該方法包括下列步驟a)用沸水浸潤榔色黃皮的葉，b)將濃縮的提取液與吸附劑(如矽膠、氧化鋁，砂子，矽藻土，纖維素或多聚醯胺)混合，c)用有機溶劑，如氯仿、乙酸乙酯，醚、二氯甲烷和氯乙烯，最好為氯仿，提取上述吸附劑。
d)濃縮有機洗脫液。
e)用冷卻的C1-C6-醇或C2-C6-酮(例如甲醇)洗滌液濃縮物。
另外，本發明提出化合物(O)的分離方法，該方法包括下述步驟a)用沸水浸潤榔色黃皮的葉;
b)在濃縮的提取液中加入稀酸(例如HCl);
c)將上清液通過陽離子交換樹脂，最好為H+型;
d)用鹼，最好是氨水浸潤樹脂;
e)用有機溶劑，諸如乙醚、三氯甲烷，二氯甲烷、C1-C6醇的乙酸酯或C2-C6酮，最好是乙醚提取樹脂;
f)用三氯甲烷、一氯甲烷、乙醚或三氯甲烷/甲醇混合物作為洗脫劑，在二氧化矽或氧化鋁層析分離濃縮提取物;
g)收集濃縮Rf值與化合物(0)相應的洗脫液，(矽膠為吸附劑，氯仿為洗脫劑時，Rf＝0.8)。
本發明還提出分離化合物(g)的方法，該方法由下述步驟組成a)用沸水浸潤榔色黃皮葉;
b)將稀酸(如鹽酸)加到濃縮過的提取液中;
c)上清液通過陽離子交換樹脂，最好是H+-型;
d)用鹼，例如氨水浸潤樹脂;
e)用有機溶劑，諸如醚、三氯甲烷、二氯甲烷、C1-C6-醇的乙酸酯或C2-C6-酮提取樹脂;
f)在SiO2或Al2O3上進行濃縮提取物的層析分離，三氯甲烷、二氯甲烷、醚或三氯甲烷/甲醇混合物作洗脫劑;
g)收集並濃縮Rf值與化合物(9)(矽膠吸附，氯仿洗脫，Rf＝0.2)相應的洗脫液(如通過TLC監測)。
我們認為，用上述分離方法得到的粗產物最好在醇。(例如甲醇或乙醇)中重結晶。
根據通式(Ⅰ)的黃皮醯胺的衍生物，化合物(9)和化合物(0)可以由人們已知的還原法(例如，催化氫化)，氧化法(例如，用氧化鉻)，酯化法和醚化法來合成。
本發明還提出含有通式(Ⅰ)作為有效成分的藥物組份和藥劑以及其的製備方法。
本發明還提出通式(Ⅰ)的化合物用於治療缺氧症和健忘症。
在動物實驗中，通式(Ⅰ)的化合物具有顯著的保護大腦缺氧和抗健忘作用，該作用明顯強於2-吡咯烷酮乙醯胺(Piracetam)。在大腦的治療和nootrpics範圍內，2-吡咯烷酮乙醯胺(Piracetam)是最接近地有關的化合物結構。
2-吡咯烷酮乙醯胺(Piracetam)即使在高量時，動物在他們的行為方面也不顯示任何重要改變。這種缺氧保護作用顯然不是由於一種非特異的鎮靜作用而引起的，(後者因此而引起降低對氧的需求。)我們發現(Ⅰ)式化合物的急性毒性是很低的。
按照本發明藥制組方可以成膏狀、膠體、糊狀、乳狀、噴霧(包括懸乳微粒)，洗劑，乳濁液，溶液，以及水或非水稀釋劑中的乳膠，糖漿，顆粒或粉末。
該配方最好製成無菌等滲水溶液或製成片劑，膠囊，藥丸和栓劑，本發明的化合物可單獨用藥或與稀釋劑混合。
該稀釋劑應用到藥物組成(例如制粒)，適應形成片劑，糖衣丸，膠囊和藥丸包括下列在該配方中所用的適於製成片劑，糖衣片、膠囊，丸劑的稀釋劑(如制粒)(a)填料，例如，澱粉、糖、矽酸;
(b)粘合劑，例如，纖維素衍生物，藻酸鹽，明膠和聚乙烯吡咯烷酮;
(c)保溫劑，例如，甘油;
(d)崩解劑，例如，瓊脂，碳酸鈣和碳酸氫鈉;
(e)吸收促進劑，例如，四價銨化合物;
(f)表面活性劑，例如，鯨蠟醇;
(g)吸附載體，例如，高嶺土和膨潤土;
(h)潤滑劑，例如，滑石粉，硬脂酸鈣和硬脂酸鎂和固態的聚乙烯乙二醇。
由本發明的藥用成分製造平體藥片、糖衣藥丸，膠囊和藥丸的成形可以用通常的包衣，包裹物和保護基質，上述這些可以含有遮光劑。這樣製成的上述藥物有效成份可以只在或絕大部分在腸道釋放，而且有可能維持很長時間。包衣、包裹物和保護片基可以用聚合材料和石蠟製備。
這個組份也可以與一個或多個上述稀釋劑一起以微囊的形式製劑。
上述藥學成分和藥劑的生產，可以通過在工藝上人們所知道的任何方法進行，例如，把有活性的組分與稀釋劑混合形成一種藥學組方(例如，溼粒)再做成劑形(例如片劑)。
本發明提出的藥物組方最好含總組分重量的0.1至99.5%的有效成分，最佳為0.5至95%。
本發明的治療服用最佳劑量是每天0.001毫克至0.2毫克的有效成分。
下面的實例對這個發明作一說明例1.
黃皮醯胺的分離八十公斤乾燥的SReeLs榔色黃皮葉首先與水煮沸。將該提取液濃縮得到18公斤的糖漿狀粗品，該糖漿狀粗品液與矽膠混合，用氯仿提取。該氯仿提取液被濃縮得到一褐色糖漿狀物，用冷甲醇洗該褐色糖漿狀液，如此獲得的黃色粉末用甲醇重結晶，得到黃皮醯胺的白色針狀結晶。
黃皮醯胺白色針狀結晶，m.p.239-40℃〔α〕21D0.00(0.53在甲醇中)，經元素分析和高分辨質譜測定(M+297、1364);分子式為C18H19NO3可溶於熱甲醇中，DMSO和DMF，僅僅微溶於一般的有機溶劑，例如CHCL3，CH2CL2，醚，乙酸乙酯，等。
IRγKBrmaxcm-13400，3310(OH)，1680(醯胺)，1600，1580，1490，1450，740，690(芳環的單取代)。
UVλMeoHmaxnm(Lgε)257(2.70)。
高解析度MS m/z297.1364(M+，C18H18NO3)，298.1448(C18H20NO3)，191.0946(C11H13NO2)，190.0881(C11H12NO2)，174.0912(C11H12NO)，162.0924(C10H12NO)，144.0815(C10H10N)，134.0687(C9H10O)，133.0646(C9H9O)。
元素分析得出C＝72.39，H＝6.39，N＝4.51表1，H1-NMR;化學位移及黃皮醯胺的歸屬ppm 氫3.05(S;3H) N-CH33.50(dd，J＝10.8;1H) C4-H3.90(d，J＝10;1H) C3-H)4.30(dd，J＝8.2;1H) C5-H4.65(d，J＝2;1H) C7-H4.70-5.40(m;2H) OH
6.50-6.70(m;2H) 芳香H6.90-7.30(m;8H) 芳香H)13C-NMR數據在下面表9中給出，X-射線衍射數據同樣證實了黃皮醯胺的化學結構。
例2化合物(0)和化合物(9)的分離。
80公斤的乾燥的SKecLs榔色黃皮(Lcur)葉用水煮沸。濃縮該浸液，得到18公斤的糖漿狀粗品。16公斤的該糖漿狀粗品用0.06NHCL(80L)處理和上層清液通過溼的H+-型的陽離子交換樹脂柱(由48公斤的Na+-形式陽離子交換樹脂轉換而成。然後用去離子水洗該樹脂，用2%氨水(32.2L)處理和最後用(60L)乙醚萃取。濃縮該醚提取物的氯仿溶液被用氯仿作為洗脫劑在矽膠柱(不同的比率從100∶1至20∶1)上反覆處理。收集並濃縮Rf＝0.8(化合物(0))和Rf＝0.20(化合物(9))的洗脫液。得到的結晶體用甲醇重結晶，得到0.18克的白色梭狀結晶，溶點，164-6℃，(化合物(0))和3.31克的方形結晶，m.p.205～6℃(化合物(9))化合特(0)〔α〕24.5D＝-40°(0.225in MeOH)元素分析理論值(C18H17NO2) 實驗值C 77.42 77.06H 6.09 6.13N 5.02 4.76
高解析度MS(M++1)＝280，1371IRγKBrmaxcm-11690(醯胺-羧基)，3080，3060，3010，1600，1500，750，730，705，700UVλMeOHmaxnm(Lgε)209(4.35)，257(2.60)表21H-NMR(在氘代氯仿中)化合物(0)的化學位移和歸屬，ppm 氫2.95(S;3H) N-CH33.60(S;1H) C4-H4.09(S;1H) C5-H4.81(S;1H) C3-H5.00(S;1H) C7-H7.10-7.50(m;10H) 芳香H13C-NMR的數據在表9中給出化合物(9)〔α〕19D＝0.00(0.29在甲醇中)元素分析理論值(C18H19NO3) 實驗值C 72.76 73.00H 6.45 6.46N 4.72 4.50高解析度MS(M++1)＝298.1453(C18H20NO3)IRγKBrmaxcm-13440，3340(OH)，1600(醯胺-羰基)，3060，3030，1600，1490，750，770(單基取代苯)UVλMeOHmaxnm(Lgε)258(2.59)表31H-NMR(在DMSO中);化學位移和歸屬ppm 氫2.90(S;3H) N-CH33.07(t;J＝7;1H) C4-H3.89(m;2H) C3-H;
C5-H5.00(dd，J＝5.3;1H) C7-H5.53(d，J＝7;1H) C3-OH;在D2O的加入後消失5.73(d，J＝5;1H) C7-OH;在D2O的加入後消失6.75-6.93(m;2H) 芳香H6.95-7.33(m;8H) 芳香H13C-NMR的數據在下表9中給出例3黃皮醯胺的衍生物的合成具有的通式
(立體化學與前述給出的黃皮醯胺本身相同)a)化合物(Ⅰ)R1＝CH3CO-;R2＝CH3COO-;R3＝R4＝H600毫克的黃皮醯胺被溶解在10毫升的無水吡啶和醋酸酐的混合物(1∶1)中。在室溫下攪拌反應混合物24小時後，將該反應物傾注到30的冰水中，和用乙醚液萃取三次，隨後用2%HCl(15ml)和水(25ml，20ml，15ml)洗滌醚萃取液。用Na2SO4乾燥和除去溶劑得到750毫克的半透明糖漿狀液。該反應粗產物在甲醇中重結晶得到570毫克的白色方體結晶，m.p.165-7℃。
元素分析理論值(C22H23NO5) 實驗值C 69.29 69.12H 6.04 6.04N 3.67 3.68IRγKBrmaxcm-11735(醯胺-羰基)，1715(肩峰，酯羰基)，1700(醯胺-羰基)，1215(C-O)。
MS m/z(%)382(M++1;0.5)，261(0.3)，232(17)，172(100)，144(9)，91(8)，43(40)。
表41H-NMR(在氘代氯仿中);化學位移和歸屬ppm 氫1.88(S;3H) CH3COO1.98(S;3H) CH3COO2.59(S;3H) N-CH3表4(續)ppm 氫4.07(dd，J＝10.8;1H) C4-H4.43(dd，J＝8.2;1H) C5-H5.72(d，J＝10;1H) C3-H5.74(d，J＝21H) C7-H6.08-7.50(m;10H) 芳香Hb)化合物(Ⅳ)R1＝CH3CO-;R2＝R3＝R4＝H500mg的化合物(Ⅰ)在40ml甲醇中，用200mg pd/c作催化劑，20大氣壓下，40℃，催化氫化7.5小時，除去催化劑和溶劑，得到464mg半透明漿狀粗品，在SiO2上層析得非晶形化合物(Ⅳ)，薄層層析，Rf＝0.58(SiO2鋪板，展開劑苯/甲醇95∶5)。
IRγfilmmaxcm-11740(酯-羰基)，1710(醯胺-羰基)，1203(C-O)。
表51H-NMR(在氘代氯仿中);化學位移和歸屬。
ppm 氫2.10(S;3H) CH3COO2.49(dd，J＝2.8;2H) C7-H2.56(S;3H) N-CH33.78-4.18(m;2H) C4-H，C5-H6.03(d，J＝10;1H) C3-H6.78-7.00(m;2H) 芳香H7.11-7.51(m;8H) 芳香HMS m/z(%)324(M+1;37)，264(M-60;4)，232(M-91;39)，172(M-60-91;100)，91(39)。
c)化合物(Ⅴ)R1＝R2＝R3＝R4＝H50毫克的化合物(Ⅳ)在2毫升的2%KOH-MeOH中，水浴上加熱50分鐘。加入2毫升的水，5毫升的氯仿和2毫升的甲醇。分離氯仿層，用Na2SO4乾燥，濃縮，得到一半透明糖漿狀粗品，該粗品通過加醚析出結晶，得到白色粒狀結晶，m.p.123-5℃。
IRγKBrmaxcm-13290(OH)，1680(醯胺-羰基)MS m/z(%)282(M+1;5)，190(
;100)，162(190-CO;38)，134(47)，91(42)d)化合物(Ⅵ)R1＝R4＝H;R2+R3＝0，
1.5克的黃皮醯胺在20毫升的吡啶溶液中被用30毫升的Conforth′s試劑氧化，該Conforth′s試劑的製備，是將3克CrO3溶於3ml水中，然後將此溶液加到27ml冰冷卻的吡啶中。該混合物放置過夜，然後傾注到100毫升的水中，用乙醚提取。該醚溶液用水洗兩次，Na2SO4乾燥。除去溶劑，剩餘物用甲醇重結晶。得到白色梭形晶體的m.p.207-10℃。
〔α〕25D＝0.00(0.26在CHCL3中)IRγKBrmaxcm-13260(OH)，1690(芳香酮)，1670(醯胺-羰基)，3060，3040，1600，1500，UVλMeOHmaxnm(Lgε)205(4.31)，252(4.07)MS m/z(%)295(M+;1)，190(
;100)，162(190-CO;45)，134(70)，133(40)，105(35)，91(20)，77(50)。
表61H-NMR在氘代氯仿中;化學位移和歸屬ppm 氫2.01(br;1H) OH2.92(S;3H) N-CH33.86(t，J＝8;1H) C4-H4.95(d，J＝8;1H) C5-H5.40(d，J＝8;1H) C3-He)化合物(Ⅶ)R1＝R2＝H;R3+R4＝化學鍵150毫克的黃皮醯胺在30毫升的6NHCL中，在封閉管內，在105℃，水解24小時。最後，白色薄片在溶液中出現。過濾該混合物，用醚(60毫升，50毫升和40毫升)抽提濾液三次。該醚萃取液被合在一起用水洗一次。乾燥之後，醚揮發乾得到半透明糖漿狀粗品在醚中結晶，該粗品用醚重結晶。得到白色針狀晶體，m.p.188-90℃。
高解析度的MS279，1176〔理論值(C18H17NO2)279，1259〕MS m/z(%)279(M，100)IRγKBrmaxcm-13300(OH)，1680(醯胺-羰基)，1600，1490，768，750，710。
UVλMeOHmaxnm(Lgε)220(3.60)，263(2.(2.90)。
表71H-NMR在氘代氯仿中;化學位移和歸屬ppm 氫2.57(S;1H) OH(加入D2O消失)2.96(S;3H) N-CH33.99(m;1H)4.36(m;3H)6.90-7.55(m;9H) 芳香H下面表9中給出13C-NMR數據。
f)化合物(Ⅷ)R1＝CH3CO-;R2＝H;R3+R4＝化學鍵
15毫克的化合物(Ⅶ)溶解在1.5毫升的醋酸酐/吡啶中(1)。該混合物在室溫放置兩天。然後減壓蒸除揮發物，殘餘物溶解在3毫升的氯仿溶液中。用2毫升的10%NH4OH液洗該氯仿溶液，接著用2毫升的水洗該氯仿溶液三次，除去溶劑。得到白色無定形固體，m.p.148-51℃。
IRγfilmmaxcm-11745(酯-羧基)，1710(醯胺-羰基)，1230(C-O)，3060，3030，1600，1500，750，720，700。
MS m/z(%)321(M+;5)，279(30)，261(M-CH3COO;100)。
表8H-NMR在代氯仿中化學位移和歸屬ppm 氫2.22(S;3H) CH3COOH3.09(S;3H) N-CH34.00(dd，J＝7.2;1H) C5-H4.34(dd，J＝7.3;1H) C4-H4.51(d，J＝2;1H) C7-H5.30(d，J＝3;1H) C3-H7.00-7.80(m;9H) 芳香H例4化合物(9)的衍生物的合成a)將150mg的化合物(9)溶於8毫升的乙酸酐/吡啶(1)中，室溫下攪拌此溶液2天，將反應混合物倒入水中，用氯仿提取，除去氯仿，殘餘物用甲醇重結晶，得到135mg的醋酸酯(方體結晶)，m.p.125-6℃。
b)在2毫升吡啶中的150毫克的化合物(9)用3毫升的Confort'h試劑氧化，該試劑是由在0.3毫升的H2O中的0.3克CrO3加入到2.7毫升的冰冷吡啶而製備的。該混合物靜止過液然後傾注進10毫升水用乙醚提取，醚溶液用水洗三次，並用Na2SO4乾燥，除去溶劑後，剩餘物用甲醇再結晶，得到57毫克的結晶固體，m.p.202-205℃。
表913C-NMR(在CDCL3中);黃皮醯胺，(Ⅶ)，化合物(0)及化合物(9)的化學位移和歸屬碳 黃皮醯胺 (Ⅶ) (0) (9)(ppm) (ppm) (ppm) (ppm)2 173.6 174.6 172.2 172.73 68.9 75.6 80.3 69.34 49.9 55.9 50.7 46.75 65.3 72.2 70.7 68.46 30.4 29.0 27.3 28.27 71.9 51.5 82.5 77.31′ 136.0 134.9 133.3 140.52′ 143.41″ 140.5 141.6 139.1 141.8芳香的 126.3 128.9 125.4 125.9碳 128.9 124.9 128.5 128.5
例5本發明提出的化合物對肝功能的影響在整個實驗中採用體重為18～22克的雄性昆明種鼠。待試的化合物懸浮在5%吐溫80中，然後用管飼法口服給藥，5%吐溫80溶液的載體同相同的方法給與對照組的鼠。在體外實驗中，化合物溶解在二甲基甲醯胺中，然後直接加進培養混合物。
肝毒學(hepatotoxicity)所採用的參數包括血清氨基轉移酶(SGPT)，肝三酸甘油脂和肝切片的病理檢驗。肝損傷主要由發炎和壞死的程度來記錄，並將其分成0至4級。
a)保護肝的作用試驗鼠分成三組，對照組餵載體。其它兩組分別給予每個化合物的兩個劑量(250mg/kg)，間隔為8小時。第二次餵進化合物後24小時，按10ml/kg皮下注射溶解在植物油中的0.1%Ccl4，禁食16小時，然後斷頭殺死。測定SGPT和肝炎脂物。做肝切片供病理觀察。
如表9所示，黃皮醯胺和化合物(0)兩者都明顯地減輕了CCl4中毒鼠的SGPT程度。
b)黃皮醯胺對CCL4，硫代乙醯胺和撲熱息痛的保護作用。
抗CCL4肝毒理學的實驗程序與上述過程相同。所採用的活性化合物的劑量是125mg/kg和250mg/kg。列於表10的數據表明，125mg/kg和250mg/kg劑量的黃皮醯胺顯著地降低了CCL4引起的SGPT的提高。肝損傷、諸如用250mg/kg的化合物治療的鼠的肝炎和肝壞死低於對照鼠，肝脂沒有降低。
在另一實驗中，首先每天給鼠注射三次10mg/kg在植物油中的0.15%CCL4。第一次注射CCL4後，從第二天到第五天開始用黃皮醯胺(250mg/kg，每天治療鼠。在試驗的第七天進行SGPT的測定和肝切片的病理檢驗。所得結果表明該化合物有明顯抑制SGPT的降低作用，但並不影響肝損傷(見表11)。
在硫代乙醯胺肝毒理學實驗中，根據第一次實驗的程序治療鼠，但使用硫代乙醯胺(50mg/kg)而不是使用CCL4。我們發現，黃皮醯胺明顯降低了SGPT水平(表12)。
用下述方法進行抗-撲熱息痛肝毒理學的實驗，第一天給鼠兩次黃皮醯胺(250mg/kg)接下去的第二天給與同樣劑量。最後一次給藥後6小時，按150mg/kg劑量給鼠皮下注射撲熱息痛。注射撲熱息痛後20小時，測定SGPT並檢驗肝組織，黃皮醯胺明顯降低了SGPT的水平並減輕了肝損傷(見表13)c)對正常鼠的血清和肝氨基轉移酶(GPT)的影響。
分別給兩組鼠餵載體或250mg/kg的黃皮醯胺，每天一次，連續七天。最後一次餵藥後二十四小時，測定血清和肝GPT。如表14所示，用黃皮醯胺治療過的鼠的SGPT水平稍高於對照鼠的SGPT，但差別不明顯。對肝GPT，也得到了類似結果。
d)對肝微體細胞色素p-450誘導作用在Xenobioties的解毒過程中，肝微體細胞色素p-450起到關鍵作用。給試驗鼠餵250mg/kg的黃皮醯胺，每天一次，連續3天。對照鼠接受載體。禁食過夜後殺死試驗鼠。製備肝微粒，然後測定微粒單氧酶。
數據示於表15。肝細胞色素p-450，細胞色素b5，NADPH-細胞色素C還原酶，氨基比林脫甲酶和苯並芘羥化酶活性都明顯提高。
在另外的實驗中，給試驗鼠250mg/kg的黃皮醯胺。服該化合物後，在服藥後1小時和24小時皮下注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)。由記錄正常反射的消逝和恢復間隔來估計睡眠時間。數據列於表16。在注射戊巴比妥前24小時服進黃皮醯胺，鼠的睡眠時間明顯縮短，反之戊巴比妥注射前一小時服用該化合物，鼠的睡眠時間明顯延長而不是縮短。然而，提前服該化合物並不影響由巴比妥誘導鼠的睡眠時間。因為巴比妥並不是通過肝臟代謝的。這說明黃皮醯胺所致的戊巴比妥睡眠時間的延長是由於抑制了肝的藥物代謝酶。所以，該化合物對肝微體細胞色素p-450具有兩相作用，即;先抑制後誘導。
e)急性中毒實驗10隻鼠按3克/kg黃皮醯胺劑量口服給藥，7天內無死亡。
表9對Ccl4中毒鼠的SGPT程度的影響(每組9隻鼠)。
SGPT單位% PX±SE對照組 1678±261 ＜0.01化合物(0) 391±94黃皮醯胺 617±323 ＜0.01
例6黃皮醯胺所致缺氧容限(動物)的提高一群雄性鼠(體重20克)放置在分成兩室的塑料箱內(箱的體積為15×28×40cm，相當於每bos16.8升)。每一室內放置20隻老鼠。箱內充入含3.5%氧氣和96.5%氮氣的混合氣體。充入體積為4升/分鐘。在進行實驗前30分鐘，口服試驗物質和載體。
充入缺氧混合氣開始後約7分鐘，動物缺氧死亡。當左邊室(對照動物組)的三隻動物僅出現呼吸症狀時，停止實驗。打開箱子然後計算經處理後的一組動物仍然活著的個數。
根據Fishe和yates(1963)(Thomann等人，1975)提出的X2試驗評價在兩組中存活動物之間的差別。
表9劑量 存活數/總的動物數 作用(mg/kgp.o.) 對照組 黃皮醯胺 (%)10 9/60 19/60 19.630 9/60 31/60 41.1100 9/60 40/60 58.8P＝0.05表9表明，黃皮醯胺顯著提高缺氧容限，僅用極少的物質(巴比妥類)口服100mg/kg存活率就可以提高59%例7黃皮醯胺對在缺氧條件下記憶力減退(老鼠)的影響裝置(39cm長，21cm高，21cm寬)由兩室組成。一間由半透明塑料製成(長29cm)而另一間除黑(長10cm)。該裝置有一金屬柵網底，柵網與能提供20鈔1.6mA電流的刺激裝置連接。
兩間由門連接，門可以關閉。
將雄性老鼠(體重100-120克)放置在大間，然後允許老鼠查看該裝置的兩室三分鐘。
以後，將動物放置進小間(塗黑)，關閉連接門，進行底振蕩，然後把動物放進氣密室，該氣密室內充入含3.8%氧和96.2%氮的混合氣體。把動物置於此種缺氧環境中，直到表現出表明即將出現呼吸衰竭的喘息為止(最長為15分鐘)。
24小時後，老鼠再放回裝置的亮間。觀察時間為3分鐘。
在三組15隻老鼠中進行一次實驗A組對照組，不經受缺氧環境。
B組對照組，在第一次訓練後接受缺氧環境。
C組服藥組，在第一次訓練後接受缺氧環境。
評述動物進入暗間所需的時間用秒計算。
將兩個對照組之間的時間差看作100%(A-B＝100%)。
用百分數(C-B＝X%)計算對照組B與服藥組C之間的時間差，X為待檢驗物質抗遺忘效果的度量。
黃皮醯胺 X(mg/kgp.o.) (%)3 4710 6530 100
權利要求
1.分離分
黃皮醯胺的方法，該方法包括如下步驟a)用沸水浸潤榔色黃皮的葉子，b)混合濃縮的提取液與吸附劑，最好與矽膠混合，c)用有機溶劑，最好是三氯甲烷萃取吸附劑，d)濃縮有機洗脫液，e)用冷的C1-C6醇或C2-C6酮洗滌濃縮物。
2.分離化合物(0)和/或化合物(9)的方法，該方法包括
a)用沸水處理榔色黃皮的葉子，b)將稀酸加到濃縮的萃取液中，c)合格的上層清液通過陽離子交換樹脂，d)用鹼、最好是氨水處理樹脂，e)用有機溶劑萃取樹脂，f)用三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚或三氯甲烷/甲醇混合物作為洗脫劑，在二氧化矽或氧化鋁上色層分離濃縮的提取物，g)收集並濃縮分別相應於化合物(0)或化合物(9)的Rf值的洗脫物。
3.根據權利要求
1或2所述的藥物組分的製備過程，其特徵在於得到二黃皮醯胺用作活性組分。
4.根據權利要求
1或2所述的藥物組份的製備過程，其特點在於權利要求
1或2中任一項所述的化合物與稀釋劑和/或其它添加劑或輔助劑混合。
專利摘要
通過萃取榔色黃皮葉，然後進行提純，得到純的黃皮醯胺，其分子式為
文檔編號C07D207/26GK85106973SQ85106973
公開日1987年4月1日 申請日期1985年9月17日
發明者陳延鏞, 楊明河, 黃量, 劉耕陶, 烏爾裡克·本茲 申請人:中國醫學科學院藥物研究所, 拜爾公司導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan