一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法
2023-10-04 10:45:39 2
專利名稱：一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法
技術領域：
本發明屬於植物提取技術領域，涉及一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，尤其是涉 及一種採用萃取技術和大孔樹脂提取製備瑞香狼毒總黃酮的方法。
背景技術：
瑞香狼毒(Stellera Chamae jasme. L)，別名斷腸草，火柴頭花等。多年生草本植 物、根粗大、可入藥。有大毒，能散結、逐水、止痛、殺蟲。可治療水氣腫脹、淋巴結核、骨結 核。外用可治疥癬、瘙癢、頑固性皮炎、殺蟲蠅、滅蛆。瑞香狼毒中的黃酮多為雙黃酮類物質， 如狼毒素(chamae jasmin),新狼毒素(neochamae jasmin),異狼毒素(isochamae jasmin), 優狼毒素(euchanmaejasmin)，狼毒色酮(chamaechromone)等。現代研究證明瑞香狼毒中 的黃酮類物質有抑菌、抗氧化、抗腫瘤等作用。作為草原泛濫的毒草之一，可以變廢為寶，具 有廣大的開發潛力。由於所述黃酮很多都含以下結構，所以這些黃酮分子量接近，溶解性類 似。國內外提取黃酮的方法很多，有水煮法、有機溶劑提取法、酶解法、超臨界萃取法、 超聲波提取法、微波提取法。分離黃酮的方法有樹脂吸附法、高效液相色譜法等。瑞香狼毒 的研究，目前僅限於藥理和化學成分研究，提取工藝研究較少，中國專利CN1410424「新狼毒 素A的提取工藝」採用酸鹼法提取、萃取、醯化、酸鹼法還原製得新狼毒素Α，工藝中主要採 用的是化學手段，需要原料和反應能量的大量消耗。中國專利CN1544433 「瑞香狼毒中新 狼毒素B的提取分離方法及其應用」採用常壓連續提取、柱色譜層析得產品，層析處理速度 慢。中國專利「瑞香狼毒植物性雙黃酮類農用抑菌劑及其製備方法」採用化學提取，大孔樹 脂分離的方法分離雙黃酮，分配提取易導致原料浪費。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法。該方法能夠得 到較高含量的瑞香狼毒總黃酮，操作簡單，便於工業操作。本發明提取技術方案如下—種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，其特徵在於，該方法按照下列步驟(1)將瑞香狼毒淨制、乾燥、粉碎，得粗粉；將粗粉與水按質量比1 1-5混合置於提取釜中，加熱提取2-3次，每次1-3小時，過濾，濾渣再用20-50%乙醇超聲提取1-2次，每 次0. 5-2小時，合併濾液；(2)濾液加熱至50_80°C，攪拌條件下加入鹼液，調節pH至8-13，保持10_30分鐘， 趁熱過濾，濾液在50-80°C，攪拌條件下用酸調節pH至2-5，靜置冷卻至室溫，放置析出沉 澱，抽濾，收集沉澱物；(3)加去離子水分散沉澱物，以石油醚萃取至石油醚萃取層顏色變淺，棄石油醚萃 取液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的樹脂柱，飽和吸附後依次用水、30% 乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，乾燥即得瑞香狼毒總黃酮。所述步驟(1)中20-50%乙醇溶液用量為濾渣質量的4-10倍。所述步驟O)中鹼液為氨水或氫氧化鈉水溶液；所述酸為鹽酸或硫酸水溶液。所述步驟(3)中加入的石油醚與分散液的體積比為0.5-2 1。所述步驟(3)中大孔樹脂為HPD400、HPD500、AB-8中的一種。綜上所述，本發明具有的優點1、本發明採用水煎煮和醇超聲提取結合，提取充分。2、採用石油醚萃取脫除脂溶性雜質，使上柱液有效去除了雜質，減輕了對樹脂吸 附幹擾，使樹脂對黃酮的吸附能力大大增強，更能適應規模化提取需要。3、大孔樹脂分離溫度低，有效減少了黃酮成分的分解。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限 於下列實施方式
具體實施例方式實施例1 將採購的瑞香狼毒全草淨制、乾燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；稱取5kg瑞香狼毒 粉末用15L水加熱至70V，提取3次，每次2小時，過濾，保留濾液，濾渣再加入30L50 %乙 醇水溶液超聲提取半小時，合併所有濾液，加熱至60°C，在攪拌下用氨水溶液調pH至11， 在60°C條件下保持10分鐘，趁熱過濾得到濾液，濾液在60°C條件下，邊攪拌邊加入鹽酸水 溶液，調節PH至3，冷卻至室溫，靜置析出沉澱，抽濾，收集沉澱物，加去離子水分散沉澱物， 用石油醚(沸程60°C )萃取至石油醚萃取層顏色變淺，每次石油醚用量為分散液體積的1 倍，棄石油醚萃取液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的AB-8大孔樹脂柱，飽 和吸附後用水、30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓濃縮，低溫真空乾燥粉碎得乾粉， 純度93%。實施例2 將採購的瑞香狼毒全草淨制、乾燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；稱取5kg瑞香狼毒 粉末用23L水加熱至80°C，提取2次，每次3小時，過濾，保留濾液，濾渣再加入37L40 %乙 醇水溶液超聲提取1小時，合併所有濾液，加熱至50°C，在攪拌下用氫氧化鈉水溶液調pH至 13，在50°C條件下保持20分鐘，趁熱過濾得到濾液，濾液在50°C條件下，邊攪拌邊加入鹽酸 水溶液，調節PH至2，冷卻至室溫，靜置析出沉澱，抽濾，收集沉澱物，加去離子水分散沉澱 物，用石油醚(沸程60°C)萃取至石油醚萃取層顏色變淺，每次石油醚用量為分散液體積的 0. 5倍，棄石油醚萃取液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的HPD400大孔樹脂柱，飽和吸附後用水、30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓濃縮，低溫真空乾燥粉碎得 乾粉，純度95%。實施例3 將採購的瑞香狼毒全草淨制、乾燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；稱取5kg瑞香狼毒 粉末用20L水加熱至70°C，提取3次，每次1小時，過濾，保留濾液，濾渣再加入43L30%乙 醇水溶液超聲提取1小時，合併所有濾液，加熱至80°C，在攪拌下用氨水溶液調pH至8，在 80°C條件下保持15分鐘，趁熱過濾得到濾液，濾液在80°C條件下，邊攪拌邊加入硫酸水溶 液，調節PH至5，冷卻至室溫，靜置析出沉澱，抽濾，收集沉澱物，加去離子水分散沉澱物，用 石油醚(沸程60°C )萃取至石油醚萃取層顏色變淺，每次石油醚用量為分散液體積的1. 5 倍，棄石油醚萃取液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的HPD500大孔樹脂柱， 飽和吸附後用水、30 %乙醇洗脫，收集30 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，低溫真空乾燥粉碎得幹 粉，純度92%。實施例4 將採購的瑞香狼毒全草淨制、乾燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；稱取15kg瑞香狼毒 粉末用30L水加熱至80°C，提取3次，每次3小時，過濾，保留濾液，濾渣再加入120L40%乙 醇水溶液超聲提取半小時，合併所有濾液，加熱至70°C，在攪拌下用氫氧化鈉水溶液調pH 至10，在70°C條件下保持30分鐘，趁熱過濾得到濾液，濾液在70°C條件下，邊攪拌邊加入鹽 酸水溶液，調節PH至4，冷卻至室溫，靜置析出沉澱，抽濾，收集沉澱物，加去離子水分散沉 澱物，用石油醚(沸程60°C)萃取至石油醚萃取層顏色變淺，每次石油醚用量為分散液體積 的2倍，棄石油醚萃取液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的HPD400大孔樹脂 柱，飽和吸附後用水、30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓濃縮，低溫真空乾燥粉碎得 乾粉，純度65%。實施例5 將採購的瑞香狼毒全草淨制、乾燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；稱取35kg瑞香狼毒 粉末用170L水加熱至70°C，提取2次，每次2. 5小時，過濾，保留濾液，濾渣再加入200L50% 乙醇水溶液超聲提取1小時，合併所有濾液，加熱至60°C，在攪拌下用氨水溶液條pH至12， 在60°C條件下保持15分鐘，趁熱過濾得到濾液，濾液在60°C條件下，邊攪拌邊加入鹽酸水 溶液，調節PH至2，冷卻至室溫，靜置析出沉澱，抽濾，收集沉澱物，加去離子水分散沉澱物， 用石油醚(沸程60°C )萃取至石油醚萃取層顏色變淺，每次石油醚用量為分散液體積的 1. 5倍，棄石油醚萃取液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的AB-8大孔樹脂 柱，飽和吸附後用水、30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓濃縮，低溫真空乾燥粉碎得 乾粉，純度93%。
權利要求
1.一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，其特徵在於，該方法按照下列步驟(1)將瑞香狼毒淨制、乾燥、粉碎，得粗粉；將粗粉與水按質量比1 1-5混合置於提取 釜中，加熱提取2-3次，每次1-3小時，過濾，濾渣再用20-50%乙醇超聲提取1-2次，每次 0. 5-2小時，合併濾液；(2)濾液加熱至50-80°C，攪拌條件下加入鹼液，調節pH至7.5_13，保持10-30分鐘，趁 熱過濾，濾液在50-80°C，攪拌條件下用酸調節pH至2-5，靜置冷卻至室溫，放置析出沉澱， 抽濾，收集沉澱物；(3)加去離子水分散沉澱物，以石油醚萃取至石油醚萃取層顏色變淺，棄石油醚萃取 液，水層藥液蒸去殘留石油醚，緩慢加入預處理好的樹脂柱，飽和吸附後依次用水、30 %乙 醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，乾燥即得瑞香狼毒總黃酮。
2.如權利要求1所述的一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，其特徵在於所述步驟(1)中 20-50%乙醇溶液用量為濾渣質量的4-10倍。
3.如權利要求1所述的一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，其特徵在於所述步驟O)中 鹼液為氨水或氫氧化鈉水溶液；所述酸為鹽酸或硫酸水溶液。
4.如權利要求1所述的一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，其特徵在於所述步驟(3)中 加入的石油醚與分散液的體積比為0.5-2 1。
5.如權利要求1所述的一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，其特徵在於所述步驟(3)中 大孔樹脂為HPD400、HPD500、AB-8中的一種。
全文摘要
本發明公開了一種瑞香狼毒總黃酮的製備方法，屬於植物提取技術領域。瑞香狼毒中總黃酮由水提、有機溶劑提取、濃縮，除雜，大孔樹脂吸附洗脫製備獲得。所製得的瑞香狼毒總黃酮中黃酮含量高達90-95％。本方法採用石油醚萃取脫除脂溶性雜質，上柱液有效去除了雜質，減輕了對樹脂吸附幹擾，使樹脂對黃酮吸附能力增強，並且本方法成本低廉，工藝合理，能適應規模化生產。
文檔編號A01N65/08GK102078444SQ20101061307
公開日2011年6月1日 申請日期2010年12月30日 優先權日2010年12月30日
發明者張翼, 李法慶, 錢珏 申請人:蘇州瑞藍博中藥技術開發有限公司