一種多肽分離分析用聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片試劑盒的製作方法
2023-10-04 10:31:39 2
專利名稱：一種多肽分離分析用聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片試劑盒的製作方法
技術領域：
本實用新型涉及微流控晶片技術，特別提供了一種用於多肽分離分析專用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微流控晶片試劑盒。
背景技術：
微流控晶片技術是在在九十年代初發展起來的一門新興技術(J.Chromatogr.593(1992)253；Science 261(1993)895)。最初微流控晶片一般以玻璃和石英為主要製作材料，採用溼法刻蝕技術加工完成(Anal.Chem.74(2002)，5076-5083)。由於玻璃和石英材料的製作成本比較高，因此人們逐漸將目光轉向各種塑料材質。塑料晶片的製作過程相對簡單，費用也比較低，可以一次性使用，因此得到了日益廣泛的應用。其中聚甲基丙烯酸甲酯因其優良的電滲性能及透光性，目前已成為微流控晶片中應用最廣泛的一種聚合物材料。
目前大量的聚合物材料通過各種不同的加工技術被製作成微流控晶片(Electrophoresis 21(2000)，165；Anal.Chem.76(2004)，1865；Anal.Chem.73(2001)，4196；J.Chromatogr.A.907(2001)，279)。但不幸的是，絕大多數塑料表面都是疏水的，樣品與塑料晶片通道內表面發生疏水相互作用，被吸附在通道內壁，使通道內表面性質發生了改變，從而導致定量結果不準確，電滲流不穩定，以及分析重現性很差。因此不同材質的、不同運行緩衝液的、以及通道內壁經過不同處理的塑料晶片，其所適用於的分析對象也不相同，因此有必要針對不同的塑料晶片和分析對象，建立相應的分離分析專用試劑盒，以滿足不同應用對象的需求。目前關於多肽分離分析專用PMMA微流控晶片試劑盒的研究尚未見報導。
發明內容
本實用新型的目的在於提供一種可用於多肽分離分析專用的PMMA微流控晶片試劑盒，該試劑盒成本低廉，操作簡單，靈敏快速，適用於多肽的微流控晶片分離分析。
本實用新型提供了一種多肽分離分析用FMMA微流控晶片試劑盒，內部在水平面上分成兩格，分別裝置有5～10片聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片(1)，1～2瓶硼砂基體緩衝液(2)。
本實用新型提供的多肽分離分析用PMMA微流控晶片試劑盒，所述PMMA微流控晶片由底板與空白的蓋板封接而成，底板的裡面刻有並列分布的三條相同的十字交叉通道，底板和蓋板中間形成封閉的通道，通過通道末端的緩衝液池與外界相連；通道內壁帶有光聚合方法的修飾親水性塗層。微流控晶片內壁經過光聚合反應處理，由疏水表面轉化為親水表面，減少了樣品在通道內壁的吸附。
本實用新型提供的具有親水性的PMMA微流控晶片試劑盒，所述微流控晶片的尺寸選為長70～80mm，寬40～50mm，底板厚度為1～1.5mm，蓋板厚度為0.1～0.5mm。
本實用新型提供的具有親水性的PMMA微流控晶片試劑盒，所述微流控晶片的通道橫截面為近似梯形結構，其尺寸選為外口寬70～150μm，底寬50～80μm，深10～30μm。
本實用新型提供的具有親水性的PMMA微流控晶片試劑盒，所述微流控晶片，其光聚合的方法可以是紫外光聚合反應，將親水性化合物聚合在PMMA微流控晶片內表面，對PMMA微流晶片內表面進行塗層修飾。
本實用新型提供的具有親水性的PMMA微流控晶片試劑盒，所述微流控晶片，其親水性化合物可以是丙烯醯胺、聚乙烯醇或丙烯酸。
本實用新型提供的具有親水性的PMMA微流控晶片試劑盒的優點在於由於採用光化學接枝法，以苯甲酮為光敏劑，通過紫外光聚合反應，將親水性化合物鍵合在PMMA晶片內表面，因此晶片內表面的親水性能有了明顯改善，抑制了多肽在PMMA晶片內表面的吸附。使用該試劑盒對多肽樣品進行電泳分析時，樣品峰與原始晶片中得到的樣品峰相比，峰型得到明顯改善，柱效得到提高。該試劑盒由於成本低廉，操作簡單，靈敏快速，因此十分適用於微流控晶片中多肽的電泳分離分析。
圖1為多肽分離分析專用PMMA微流控晶片試劑盒；圖2為試劑盒中PMMA微流控晶片結構示意圖；圖3為試劑盒中PMMA微流控晶片通道截面結構示意圖；圖4小肽樣品在同一條內壁塗層的PMMA微流控晶片微通道內連續多次運行的部分譜圖；圖5小肽樣品在未修飾的PMMA微流控晶片上進行分析時所得到的電泳譜圖；圖6小肽樣品在內壁塗層的PMMA微流控晶片上進行分析時所得到的電泳譜圖；圖7為伴白蛋白胰蛋白酶酶解產物-多肽混合物在未修飾的PMMA微流控晶片上進行分析時所得到的電泳譜圖；圖8為伴白蛋白胰蛋白酶酶解產物-多肽混合物在內壁塗層的PMMA微流控晶片上進行分析時所得到的電泳譜圖。
具體實施方式
實施例1一種新型內壁塗層的PMMA微流控晶片試劑盒如圖1所示，試劑盒的兩格分別裝置有5～10片聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片(1)，1～2瓶硼砂基體緩衝液(2)。PMMA微流晶片結構示意圖如圖2所示，尺寸為70～80mm(長)×40～50mm(寬)；該晶片由一塊一面刻有十字交叉結構微通道的PMMA底板，與空白的PMMA蓋板封接而成，底板厚度為1～1.5mm，蓋板厚度為0.1～0.5mm；底板和蓋板中間形成封閉的微通道，微通道橫截面結構示意圖如圖3所示，通過通道末端的緩衝液池與外界相連；每片晶片上並列分布著三條相同的通道；PMMA微流控晶片通道內壁採用靜態改性方法加以塗層修飾。
以10mM pH9.2的硼砂為運行緩衝液，以小肽(丙氨酸-纈氨酸和纈氨酸-纈氨酸)為樣品，同一條內壁塗層的PMMA微流控晶片微通道(1)內進行電泳分析，連續多次運行，其中部分譜圖如圖4所示。
在同一條內壁塗層修飾的PMMA晶片上，測定電泳分析重現性。如表1所示。
在同一批塗層修飾的不同PMMA晶片通道上，測定電泳分析重現性。如表2所示。
比較例1
以10mM，pH9.2的硼砂為運行緩衝液，以小肽(丙氨酸-纈氨酸和纈氨酸-纈氨酸)為樣品，在未修飾的和內壁塗層的PMMA微流控晶片上分別進行電泳分析。其電泳圖如圖5和6所示。
比較例2以伴白蛋白胰蛋白酶酶解產物-多肽混合物為樣品，其它同比較例1。其電泳圖如圖7和8所示。
表1小肽在內壁塗層的PMMA晶片中重複性(同一條通道內)
表2小肽在內壁塗層的不同PMMA微通道上的重複性
權利要求1.一種多肽分離分析用聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片試劑盒，其特徵在於該試劑盒內在水平面上分成兩格，分別裝置有5～10片聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片(1)，1～2瓶硼砂基體緩衝液(2)。
2.按照權利要求1所述的多肽分離分析用聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片試劑盒，其特徵在於所述聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片由底板與空白的蓋板封接而成，底板的裡面刻有並列分布的三條相同的十字交叉通道，底板和蓋板中間形成封閉的通道，通過通道末端的緩衝液池與外界相連；通道內壁帶有光聚合方法的修飾親水性塗層。
3.按照權利要求2所述的具有親水性的聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片，其特徵在於所述微流控晶片的尺寸為長70～80mm，寬40～50mm，底板厚度為1～1.5mm，蓋板厚度為0.1～0.5mm。
4.按照權利要求2所述的具有親水性的聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片，其特徵在於所述微流控晶片的通道橫截面為近似梯形結構，外口寬70～150μm，底寬50～80μm，深10～30μm。
5.按照權利要求2所述的具有親水性的聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片，其特徵在於所述光聚合的方法是紫外光聚合反應，將親水性化合物聚合在微流控晶片內表面。
6.按照權利要求2所述的具有親水性的聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片，其特徵在於所述親水性化合物為丙烯醯胺、聚乙烯醇或丙烯酸。
專利摘要本實用新型提供了一種多肽分離分析用FMMA微流控晶片試劑盒，內部在平面上分成兩格，分別裝置有5～10片聚甲基丙烯酸甲酯微流控晶片，1～2瓶硼砂基體緩衝液。本實用新型提供的具有親水性的PMMA微流控晶片試劑盒的優點在於成本低廉，操作簡單，靈敏快速，十分適用於微流控晶片中多肽的電泳分離分析。
文檔編號G01N35/00GK2791642SQ200420120689
公開日2006年6月28日 申請日期2004年12月23日 優先權日2004年12月23日
發明者林炳承, 王輝, 戴忠鵬, 王利, 白吉玲 申請人:中國科學院大連化學物理研究所