用於變性關節炎的治療劑的製作方法

2023-10-17 05:04:19 2

專利名稱：：用於變性關節炎的治療劑的製作方法
技術領域：
：本發明涉及以透明質酸為有效成分的變性關節炎治療劑。
背景技術：
：已知透明質酸是由D-葡萄糖醛酸與N-乙醯基-D-氨基葡萄糖的二糖重複單元構成的長鏈多糖；另一方面，其也是寡糖。透明質酸來自於雞冠、臍帶、皮膚、關節液等生物體組織的提取液，或者其是通過採用鏈球菌屬OS&eptococci^)的細菌的發酵法等方法來製備的。由於透明質酸不存在毒性學和免疫學作用，因此其用於藥物或化妝品。例如，眾所周知通過透明質酸的關節腔內注射來治療關節炎。在以下的說明中，HA4表示四糖透明質酸。據報導，HA4具有保護臟器的作用以及具有治療和抑制肝損傷和胃潰瘍的作用(參照專利文獻1)。另外，已知HA4具有增強應激蛋白表達的作用和抑制細胞死亡的作用(參照非專利文獻1)。變性關節炎是伴隨慢性關節炎的關節疾病，其中關節的構成要素的退行變性導致軟骨的破壞以及骨和軟骨的增殖性變化。此外，關節炎(滑膜炎)由於上述變化而二次發生(繼發性)。早期時，過度使用關節後產生疼痛，休息時緩解。病情發展時，即使輕微的運動或休息時也會產生疼痛，並且會觀察到夜間疼痛。劇烈的關節曲伸或者運動會發出咯咬咯吱聲，以及由於關節炎的關節腫大還會發生關節液的貯留。另外，關節構成要素的退行變性(隨年齡而變化)，遺傳因素，衰老，肥胖，關節不穩定，重複的半脫位和脫位，由於勞動、運動等引起的關節的過度負荷等與該疾病的發展相關。早期治療包括服用抗炎藥或止痛藥，以及使用含有止痛藥的泥罨劑或膠布以緩解疼痛。股四頭肌力的強化訓練對於治療膝蓋是有效的。外轉肌力訓練(躺下將腳向上舉起)對於治療髖關節是有效的。手杖的使用減少了對關節的負荷，因而對膝蓋或髖關節的變性關節炎也是有效的。關節保護劑的關節腔內注射也是有效的。關節腔內類固醇注射療法應當小心謹慎地實施，如果濫用其可能會加速關節破壞。疼痛或變性嚴重時，諸如截骨術或人工關節替代等外科手術適用於膝蓋或髖關節的治療。專利文獻l:WO2002/004471非專利文獻l:XuH,ItoT，TawadaA，MaedaH，YamanokuchiH,IsaharaK,YoshidaK，UchiyamaY,AsariA.Effectofhyaluronanoligosaccharidesontheexpressionofheatshockprotein72(透明質酸寡糖對熱激蛋白72的表達的作用).JBiolChem.200210;277(19):17308-14。
發明內容發明所要解決的問題本發明的目的在於提供用於治療變性關節炎的治療劑。解決問題的方法實現上述目的的本發明的用於治療變性關節炎的治療劑包含作為有效成分的透明質酸。發明的效果由於本發明的藥物是以透明質酸作為有效成分，因此其具有成本相對低廉且能夠容易地大量生產的優點。另外，由於透明質酸幾乎沒有毒性或抗原性，並增強了生物體本來就具有的治療作用和疾病預防作用，因此其作為具有極少不良藥物反應的治療劑是值得期待的。這樣，根據本發明，能夠提供用於治療變性關節炎的有效的新穎藥物。本發明的最佳實施方案下面將詳細闡述本發明。在下面的說明中，將本發明的治療劑簡單地稱為藥物。本發明的藥物中含有的透明質酸是基本含有至少一個二糖單元的二糖或更多的糖，所述的二糖單元是由/3-D-葡萄糖醛酸的1位與/J-D-N-乙醯基氨基葡萄糖的3位彼此連接，並且該透明質酸基本上由/3-D-葡萄糖醛酸與/3-D-N-乙醯基氨基葡萄糖構成。透明質酸還可以是含有與一個或多個二糖單元連接的這些成分的糖或其衍生物。例如，還能夠使用含有水解性保護基團的透明質酸等，該保護基團例如醯基基團等。這種糖可以是不飽和糖，不飽和糖的實例包括具有非還原端的糖，通常在4位與5位碳原子之間為不飽和的葡萄糖醛酸等。具體地，作為本發明使用的透明質酸，能夠使用從諸如動物等天然物提取的透明質酸，通過培養微生物獲得的透明質酸，通過化學或者酶合成的透明質酸等。例如可以從諸如雞冠、臍帶、皮膚、關節液等生物體組織中通過已知的提取法和純化法來獲得透明質酸。此外，還可以通過使用鏈球菌屬CS&印toCOCCMS)的細菌的發酵法來製備透明質酸。在本發明中，透明質酸寡糖也被包括在透明質酸的範圍內，能夠使用諸如包含一個二糖單元的上述二糖及其衍生物的低分子量透明質.酸至重量平均分子量為400萬的高分子量透明質酸。該透明質酸的優選實例包括在組織中的滲透性等方面優異的重量平均分子量為380至900,000的透明質酸，更優選包含2至20個糖單元的透明質酸。優選地，具體採用如下方法製備低分子量透明質酸通過如酶分解法、鹼分解法、加熱處理法和超聲處理法(Biochem.，33(1994)p6503-6507)等已知技術來降低透明質酸分子量的方法；化學或者酶合成法(GlycoconjugateJ.,(1993)p435-439，WO93/20827)等。酶分解才支術的實例包括將諸如透明質酸分解酶(玻璃酸酶(來自睪丸)、玻璃酸酶(來自鏈黴菌屬OS^ej^omyc^))、玻璃酸酶SD等)，軟骨素酶AC，軟骨素酶ACII，軟骨素酶ACHI以及軟骨素酶ABC等分解透明質酸的酶作用於透明質酸而生成透明質酸寡糖的方法(參照新生化學實驗講座"糖質n-7°口亍才夕'y力y^r^u〕寸s乂夕、、!J力y(糖質II-蛋白聚糖與糖胺聚糖)"p244-248，1991年發行，東京化學同人)等。另外，鹼分解法的實例包括獲得低分子量透明質酸的方法，其包括以下步驟向透明質酸溶液中加入鹼，如約1N的氫氧化鈉等；將混合物加熱數小時以降^f氐分子量；然後加入酸以中和混合物，如鹽酸。本發明所用的透明質酸包括鹽的形式，根據製劑的需要能夠使用其藥物可接受的鹽。例如，諸如鈉鹽和鉀鹽的鹼金屬鹽；諸如鈣鹽和鎂鹽的鹼土金屬鹽；三(正丁基)胺鹽、三乙胺鹽、吡啶鹽和胺基酸鹽的胺鹽等。對本發明的藥物沒有特別的限制，能夠單獨-使用具有一定分子量的透明質酸，或者可以聯合使用具有不同分子量的透明質酸。本發明的藥物以透明質酸作為有效成分，通過向包括人在內的哺乳動物給予有效量的藥物能夠改善變性關節炎而對機體不產生不良作用。能夠使用透明質酸或其鹽自身或使透明質酸或其鹽與載體、賦形劑以及其它添加劑一起來製備本發明的藥物，如果需要，所述藥物是任選劑型的用於口服給藥或腸胃外給藥(關節內給藥、諸如靜脈內、肌內或皮下給藥等組織內給藥(注射)，腸內給藥、經皮給藥)的藥物，其以任選的給藥方法對患者給藥。特別優選地是，將本發明的藥物製成口服製劑。口服製劑的實例包括諸如散劑、顆粒劑、膠嚢劑和片劑等固體製劑以及糖漿劑、酏劑和乳劑等液體製劑。散劑能夠通過例如與賦形劑混合製得，所述賦形劑例如乳糖、澱粉、微晶纖維素、乳酸鈣、磷酸氫鈣、偏矽酸鋁酸鎂(乂夕^"<酸7少$y酸^夕'氺V夕厶)或矽酸酐等。顆粒劑的製備如下除了上述賦形劑之外，根據需要，再加入例如，諸如蔗糖、羥丙基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮等粘合劑，諸如羧甲基纖維素或羧曱基纖維素4丐等粘合劑，以及諸如^^甲基纖維素(力々求年、乂少於/k口一7)或羧甲基纖維素鈣等崩解劑，並且通過溼法或幹法將所述混合物制粒。片劑可以通過將上述散劑或顆粒劑自身壓片，或者加入諸如硬脂酸鎂或滑石粉等潤滑劑並將該混合物壓片而製得。此外，能夠用諸如羥丙曱纖維素鄰苯二曱酸酯、異丁烯酸曱酯共聚物等腸溶性基質，或乙基纖維素、或巴西棕櫚蠟、氫化油等將上述片劑或顆粒劑進行包衣以製成腸溶性或長效製劑。硬膠嚢能夠通過將上述散劑或顆粒劑填充於硬膠嚢中而製得。軟膠嚢能夠通過將透明質酸或其鹽與甘油、聚乙二醇、芝麻油、橄欖油等混合，並用明膠膜對該混合物進行包覆而製得。糖漿劑能夠通過將諸如蔗糖、山梨醇或甘油(夕V^iry乂)等甜味劑以及透明質酸或其鹽溶解於水中而製得。此外，除了甜味劑和水外，還能夠加入精油、乙醇等以製成酏劑，或者能夠加入阿拉伯膠、黃蓍膠、聚山梨酯80、羧甲基纖維素鈉等以製成乳劑或混懸劑。另外，根據需要，能夠將矯味劑、著色劑和防腐劑等加入這些液體製劑中。腸胃外製劑的實例包括注射劑、直腸給藥劑、陰道栓劑、皮膚外用劑、吸入劑、氣霧劑、滴眼劑等。能夠通過向透明質酸或其鹽中加入諸如鹽酸、氫氧化鈉、乳酸、乳酸鈉、磷酸一氫鈉或磷酸二氫鈉等pH調節劑，諸如氯化鈉(塩化於卜]J々厶々厶)或葡萄糖等等滲劑以及注射用蒸餾水，將滅菌過濾後的混合物填充於安瓿瓶中來製得注射劑。此外，通過進一步加入甘露醇、糊精、環糊精、明膠等並真空冷凍乾燥該混合物來製成用時溶解型的注射劑。此外，通過向透明質酸或其鹽中加入諸如卵磷脂、聚山梨酯80或聚氧乙烯氫化蓖麻油等乳化劑，並在水中乳化該混合物還能夠製成注射用乳劑。直腸給藥劑能夠通過向透明質酸或其鹽中加入諸如可可脂肪酸的甘油一酯、甘油二酯或甘油三酯或聚乙二醇等栓劑用基質，然後加熱溶解，將所述混合物傾倒入模具中冷卻而製得；或者直腸給藥劑能夠通過將透明質酸或其鹽與聚乙二醇、豆油等混合，然後用明膠膜對混合物進行包覆而製得。皮膚外用劑能夠通過向透明質酸或其鹽中加入白凡士林、蜂蠟、液狀石臘、聚乙二醇等，根據需要加熱該混合物並將其捏合而製得。膠布能夠通過將透明質酸或其鹽與諸如松香或丙烯酸烷基酯聚合物等增粘劑一起捏合，將其在無紡織物等上塗覆而製得。吸入劑能夠通過使透明質酸或其鹽溶解或分散於例如，諸如藥物可才妄受的惰性氣體等的推進劑中，並將該混合物填充於耐壓容器中而製得。(給藥方法)本發明的以透明質酸為有效成分的藥物的給藥方法無特別限定，其實例包括靜脈內給藥、口服給藥和關節內給藥。(劑量)劑量根據待治療的疾病、患者的年齡、健康狀態、體重等適宜地確定，通常的日劑量為0.05mg/kg至50mg/kg，其可一次性給藥或者分成1次以上給藥。(毒性)本發明所用的透明質酸在表現出作為藥物的生物活性的劑量下，幾乎觀察不到或完全觀察不到細胞毒性。實施例參照以下實施例來更詳細地闡述本發明的藥物。然而，本發明的技術範圍不限於下面的實施例。tableseeoriginaldocumentpage9本實施例的結果能夠證實在HA4給藥組中對變性關節炎的治療效果。該結果表明以透明質酸為有效成分的藥物抑制變性關節炎。權利要求1.用於治療變性關節炎的治療劑，所述治療劑以透明質酸為有效成分。2.根據權利要求1所述的用於治療變性關節炎的治療劑，其特徵在於所述透明質酸是含有2個單元的四糖，單個單元為-D-葡萄糖醛酸1,3-D-N-乙醯基氨基葡萄糖-j3-1，4-。3.根據權利要求1所述的用於治療變性關節炎的治療劑，其特徵在於所述治療劑為口服製劑。4.治療變性關節炎的方法，其包括將有效量的透明質酸對需要所述治療的個體給藥的步驟。5.根據權利要求4所迷的方法，其特徵在於所述透明質酸是含有2個單元的四糖，單個單元為-D-葡萄糖醛酸-z3-l,3-D-N-乙醯基氨基葡萄糖-/3-1,4-。6.根據權利要求4所述的方法，其中所述透明質酸被口服給藥。全文摘要本發明提供了用於治療變性關節炎的治療劑，該治療劑是以透明質酸為有效成分的藥物。透明質酸優選為包含2個單元的四糖(HA4)，單個單元為-D-葡萄糖醛酸-β-1，3-D-N-乙醯基氨基葡萄糖-β-1，4-。文檔編號A61P19/00GK101389342SQ20068005357公開日2009年3月18日申請日期2006年12月5日優先權日2006年12月5日發明者淺利晃申請人:株式會社糖質科學研究所