一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法

2023-09-20 12:58:25

一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法
【專利摘要】本發明提供了一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，在拉曼光譜儀中施行，其特徵在於，包括四個步驟：1、將溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間將待檢中藥潤溼；2、取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓使拭子與溶劑滴加處完全接觸，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域；3、採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到拉曼光譜圖；4、根據所得的拉曼光譜圖對待檢中藥是否染色進行判定。本發明的技術方案專屬性強，結果準確，操作簡單，能夠快速完成檢測，適用範圍廣，且無需典型摻偽染料進行隨行對照。
【專利說明】一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，屬於醫藥分析【技術領域】。

【背景技術】
[0002]近年來，中藥材或中藥飲片摻偽造假的現象時有發生，其中採用染料對中藥材或中藥飲片進行染色的摻假現象尤為突出。目前已發現有染色摻假的中藥材及中藥飲片多達幾十種。2013年國家食品藥品監督管理總局組織對安徽、甘肅、廣東和四川等4省的相關單位生產、經營或使用的部分中藥飲品進行了抽樣檢驗，發現22批次存在染色問題。由於大部分染料具有致敏性和致癌性，如果長期接觸或服用染色的中藥材或中藥飲片，會對人體造成極大的傷害。因此，對上市的中藥材或中藥飲片是否染色進行檢測判定，對廣大藥檢工作者來說具有必要性和緊迫性。
[0003]目前，國內外判定中藥材及中藥飲片是否染色的方法主要包括經驗鑑別、一般理化鑑別、色譜法及其連用技術、以及光/波譜法等。其中，經驗鑑別和一般理化鑑別的方法最簡便，但準確度較差；薄層色譜法(TLC)操作簡單、成本較低，但需要典型摻偽染料進行隨性對照；高效液相色譜法(HPLC)及其聯用技術雖然檢測靈敏，準確度高，但該類方法的儀器成本聞，樣品如處理複雜。


【發明內容】

[0004]本發明的目的是提供一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，以克服上述現有技術的不足。
[0005]為了實現上述目的，本發明所提供的技術方案為:
[0006]一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，在拉曼光譜儀中施行，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，其特徵在於，包括以下四個步驟:
[0007]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0008]將溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間，溶劑為濃度為5%?80%的有機溶劑的水溶液，溶劑的滴加量為5?30 μ L，一定時間為2?15秒，待檢中藥為乾燥的中藥材或中藥飲片，有機溶劑為Cl?C4的醇、Cl?C4的羧酸、丙酮、丁酮、DMF、或DMSO ;
[0009]步驟二:拭子的採樣
[0010]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，拭子為標準的鋪有納米金溶膠或者納米銀溶膠的濾紙，按壓使該拭子與溶劑滴加處完全接觸，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為2?15秒，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域，所述的接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間；
[0011]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0012]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到拉曼光譜圖；
[0013]步驟四:對是否染色進行判定
[0014]如果步驟三中得到的拉曼光譜圖為空白譜圖，則判定待檢中藥沒有染色，如果步驟三中得到的拉曼光譜圖為非空白譜圖，則將該拉曼光譜圖與常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，當該拉曼光譜圖中的至少四個特徵峰的出峰位置與某一染料的標準拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，則判定待檢中藥被該染料進行染色，反之，則沒有進行染色。
[0015]本發明的技術方案的進一步特徵在於:溶劑的滴加量為10?20μ L。
[0016]本發明的技術方案的進一步特徵在於:有機溶劑為Cl?C4的醇，即:甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、或叔丁醇。
[0017]本發明的技術方案的進一步特徵在於:有機溶劑為甲醇或乙醇。
[0018]本發明的技術方案的進一步特徵在於:有機溶劑為Cl?C4的羧酸，即:甲酸、乙酸、丙酸、或丁酸。
[0019]本發明的技術方案的進一步特徵在於:有機溶劑為甲酸或乙酸。
[0020]本發明的技術方案的進一步特徵在於:一定時間為2?5秒。
[0021]本發明的技術方案的進一步特徵在於:接觸時間為5?10秒。
[0022]本發明的技術方案的進一步特徵在於:一定時間為2?5秒，接觸時間為5?10秒。
[0023]本發明的技術方案的進一步特徵在於:溶劑為濃度為25%?50%的有機溶劑的水溶液。
[0024]與現有技術相比，本發明的技術方案的有益效果是:
[0025]一、專屬性強，結果準確
[0026]本發明的技術方案的溶劑滴加量為5?30 μ L，滴加完畢後放置2?15秒，拭子的接觸時間為2?15秒，在保證將待檢中藥表面可能染有的染料溶解和轉移到拭子上的同時，能夠降低將待檢中藥中的中藥基質溶解和轉移到拭子上的量或完全避免將中藥基質溶解和轉移到拭子上，從而使檢測過程受到中藥基質的影響較小，檢測結果較為準確，
[0027]二、操作簡單，能夠快速完成檢測
[0028]本發明的技術方案所需時間較短，一定時間和接觸時間僅需幾秒,且無需對待檢中藥進行複雜的前處理即可進行檢測，因此操作簡單，檢測快速。
[0029]二、適用範圍廣
[0030]本發明的技術方案所需的拭子製備方法簡單、成本較低；拉曼光譜儀攜帶方便，因此不僅能夠滿足實驗室檢測需要，也能夠滿足現場快檢的需要。
[0031]四、無需典型摻偽染料
[0032]本發明的技術方案將所得的非空白譜圖與與譜圖庫中常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，即可快速確定染料種類，無需典型摻偽染料進行隨行對照。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0033]圖1為本發明的技術方案在實施例一中的流程圖；
[0034]圖2為實施例一中靈芝飲片經不同量的有機試劑潤溼後的檢測結果圖；
[0035]圖3為實施例二中靈芝飲片經不同擦拭和一定時間後的檢測結果圖；
[0036]圖4為實施例三中靈芝飲片經不同試劑潤溼後的檢測結果圖；
[0037]圖5為實施例四中鹼性品紅的標準SERS圖與染色紅花的檢測對比圖；
[0038]圖6為實施例五中赤蘚紅的標準SERS圖與染色枸杞子的檢測圖；
[0039]圖7為實施例六中孔雀石綠的標準SERS圖與染色金銀花的檢測圖；以及
[0040]圖8為實施例七中玫瑰紅的標準SERS圖與染色花椒的檢測圖。

【具體實施方式】
[0041]以下結合附圖，對本發明的技術方案的【具體實施方式】做詳細說明。
[0042]
[0043]本實施例所提供的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法在拉曼光譜儀中施行，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0044]本實施例採用的待檢中藥為用10_4g/mL玫瑰紅水溶液染色的靈芝，乾燥後備用。採用的拉曼光譜儀為BWS415-785H型可攜式拉曼光譜儀(美國必達泰克公司)，激發波長785nm。採用的溶劑為濃度為25%的乙醇水溶液。採用的拭子為標準的鋪有納米銀溶膠的濾紙，製備方法為精密稱取45mg的硝酸銀，溶解後移至250mL的容量瓶中，定容後加熱至沸騰，逐滴加入5mL濃度I %的檸檬酸鈉溶液並持續沸騰60min，冷卻至室溫後置於棕色瓶中避光保存；將濾紙裁剪成IcmX 2cm的長方形，將其浸泡在上述銀膠中48小時後取出，乾燥備用。
[0045]圖1為本發明的技術方案在實施例一中的流程圖。
[0046]圖2為實施例一中靈芝飲片經不同量的有機試劑潤溼後的檢測結果圖。
[0047]本實施例對待檢中藥是否染色進行判定的方法如圖1所示，具體包括以下四步:
[0048]步驟一(SI):待檢中藥的潤溼
[0049]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為5 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中。
[0050]步驟二(S2):拭子的採樣
[0051]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為10秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域。
[0052]步驟三(S3):拉曼光譜圖的採集
[0053]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖2中2-a所示的拉曼光譜圖。
[0054]參照上述步驟一至步驟三的方法，分別將溶劑的滴加量設置為15 μ L和30 μ L，對上述的待檢中藥進行潤溼、採用拭子進行採樣、採集拉曼光譜圖，得到如圖2中2-b、2-c所示的拉曼光譜圖。
[0055]步驟四(S4):對是否染色進行判定
[0056]如果步驟三中得到的拉曼光譜圖為空白譜圖，則判定待檢中藥沒有染色，
[0057]如果步驟三中得到的拉曼光譜圖為非空白譜圖，則將該拉曼光譜圖與常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，當該拉曼光譜圖中的至少四個特徵峰的出峰位置與某一染料的標準拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，則判定待檢中藥被該染料進行染色，反之，則沒有進行染色。
[0058]由於圖2中2-a所示的拉曼光譜圖為非空白譜圖，將該拉曼光譜圖與染料的標準拉曼光譜圖進行比對。如圖2-a所示，該拉曼光譜圖的特徵峰位於622(^^735(^'1197cm_1U280cm_1U357cm_1U508cm_1和1648CHT1處，在常用染料的標準拉曼光譜圖的譜圖庫中，找到玫瑰紅標準譜的特徵峰為622011^735011^11970^^1280011^1357011^15080^1和1648CHT1，所得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有七個特徵峰的出峰位置與玫瑰紅色特徵峰的出峰位置一致，因此判定本實施例所提供的待檢中藥採用玫瑰紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0059]依照上述方法，分別對2-b、2_c所示的拉曼光譜圖進行判定，所得結果顯示該待檢中藥採用玫瑰紅進行染色。判定結果與實際相符。
[0060]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的判定結果與實際相符。
[0061]〈實施例二〉
[0062]本實施例採用的拉曼光譜儀為實施例一所採用的拉曼光譜儀，採用的拭子為實施例一製備的鋪有納米銀溶膠的濾紙，採用的待檢中藥為實施例一所採用的待檢中藥，採用的溶劑為濃度為25%的乙醇水溶液。
[0063]圖3為實施例二中靈芝飲片經不同擦拭和一定時間後的檢測結果圖。
[0064]本實施例對該待檢中藥進行檢測的方法包括以下步驟:
[0065]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0066]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為20 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中；
[0067]步驟二:拭子的採樣
[0068]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為2秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域，；
[0069]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0070]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖3中3-a所示的拉曼光譜圖。
[0071]參照上述步驟一至步驟三的方法，設定一定時間為5s，接觸時間為5s，對本實施例所採用的待檢中藥進行潤溼、採用拭子進行採樣、以及採集拉曼光譜圖，得到如圖3中3_b所示的拉曼光譜圖；設定一定時間為10s，接觸時間為10s，對本實施例所採用的待檢中藥進行潤溼、採用拭子進行採樣、以及採集拉曼光譜圖，得到如圖3中3-c所示的拉曼光譜圖；設定一定時間為15s，接觸時間為15s，對本實施例所採用的待檢中藥進行潤溼、採用拭子進行採樣、以及採集拉曼光譜圖，得到圖3中未顯示的拉曼光譜圖。
[0072]步驟四:對是否染色進行判定
[0073]分別對圖3中3-a、3-b、3_c三張拉曼光譜圖進行判定，由於三張拉曼光譜圖為非空白譜圖，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0074]如圖3所示，三張拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置包括622011^735011' 1197CHT1、1280cm_1> 1357cm_1> 1508cm-1和164801^1等,譜圖庫中，玫瑰紅標準拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置包括 622cm \735cm \ 1197cm \ 1280cm \ 1357cm \ 1508cm 1 和 1648cm S 所得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有七個特徵峰的出峰位置與玫瑰紅標準拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，因此判斷本實施例所檢測的待檢中藥採用玫瑰紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0075]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的結果與實際相符。
[0076]
[0077]本實施例採用的拉曼光譜儀為實施例一所採用的拉曼光譜儀，採用的拭子為實施例一製備的鋪有納米銀溶膠的濾紙，採用的待檢中藥為實施例一所採用的待檢中藥，採用的溶劑分別為濃度為25%的甲醇水溶液、濃度為25%的乙醇水溶液、濃度為25%的乙酸水溶液。
[0078]圖4為實施例三中靈芝飲片經不同試劑潤溼後的檢測結果圖。
[0079]本實施例對該待檢中藥進行檢測的方法包括以下步驟:
[0080]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0081]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，溶劑為25%的甲醇水溶液，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為20 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中。
[0082]步驟二:拭子的採樣
[0083]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為10秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域。
[0084]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0085]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖4中4-a所示的拉曼光譜圖。
[0086]參照上述步驟一至步驟三的方法，採用的溶劑為濃度為25%的乙醇水溶液，對本實施例所採用的待檢中藥進行潤溼、採用拭子進行採樣、以及採集拉曼光譜圖，得到如圖4中4-b所示的拉曼光譜圖；採用的溶劑為25%乙酸水溶液，對本實施例所採用的待檢中藥進行潤溼、採用拭子進行採樣、以及採集拉曼光譜圖，得到圖4中未顯示的拉曼光譜圖。
[0087]步驟四:對是否染色進行判定
[0088]分別對圖4中4-a、4_b及未顯示的拉曼光譜圖這三張拉曼光譜圖進行判定，由於三張拉曼光譜圖為非空白譜圖，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0089]將所得拉曼光譜圖分別與譜圖庫中的常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對。如圖4 所示，拉曼光譜圖的特徵峰位於 622011^735011^1197011^1280011^1357011^15080^1 和1648cm-1等處，玫瑰紅的標準拉曼光譜圖的特徵峰為622011'735011'1197011'1280011'1357cm_\l508cm_1和1648CHT1，所測得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有七個特徵峰的出峰位置與玫瑰紅的標準拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置完全一致，因此判斷本實施例所檢測的待檢中藥採用玫瑰紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0090]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的判定結果與實際相符。
[0091]〈實施例四〉
[0092]本實施例採用拭子為實施例一製備的鋪有納米銀溶膠的濾紙，採用的拉曼光譜儀為實施例一所採用的拉曼光譜儀，採用的溶劑為濃度為25 %乙醇水溶液，採用的待檢中藥為10_4g/mL鹼性品紅乙醇溶液染色的紅花，乾燥後備用。
[0093]圖5為實施例四中鹼性品紅的標準SERS圖與染色紅花的檢測對比圖。
[0094]本實施例對該待檢中藥進行檢測的方法包括以下步驟:
[0095]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0096]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為20 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中。
[0097]步驟二:拭子的採樣
[0098]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為10秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域。
[0099]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0100]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖5中5_a所示的拉曼光譜圖。
[0101]步驟四:對是否染色進行判定
[0102]對步驟三所得的拉曼光譜圖進行判定，由於為非空白譜圖，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0103]如圖5_a所示,所得的拉曼光譜圖的特徵峰位於42lcm'SZOcnr1、827011'967011'lUOcnT1和1588(^1等處。如圖5_b所示，鹼性品紅標準曼光譜圖的特徵峰為421CHT1、52001^82701^96701^1170(^1和1588CHT1。所得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有六個特徵峰的出峰位置與鹼性品紅標準曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，因此判斷本實施例所檢測的待檢中藥採用鹼性品紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0104]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的判定結果與實際相符。
[0105]〈實施例五〉
[0106]本實施例採用拭子為實施例一製備的鋪有納米銀溶膠的濾紙，採用的拉曼光譜儀為實施例一所採用的拉曼光譜儀，採用的溶劑為濃度為25%的乙醇水溶液，採用的待檢中藥為10_4g/mL赤蘚紅水溶液染色的枸杞子，乾燥後備用。
[0107]圖6為實施例五中赤蘚紅的標準SERS圖與染色枸杞子的檢測圖。
[0108]本實施例對該待檢中藥進行檢測的方法包括以下步驟:
[0109]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0110]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為20 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中。
[0111]步驟二:拭子的採樣
[0112]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為10秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域。
[0113]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0114]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖6中6-a所示的拉曼光譜圖。
[0115]步驟四:對是否染色進行判定
[0116]對步驟三所得的拉曼光譜圖進行判定，由於為非空白譜圖，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0117]如圖6_a所示,所得拉曼光譜圖的特徵峰位於470011'5670]1'6190]1'9520]1'1166cm_1> 1326cm-1和1492(^1等處。如圖6_b所示，赤蘚紅標準譜的特徵峰為470011'567cm \619cm \952cm \ 1166cm \ 1326cm 1和1492cm 1O所得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有七個特徵峰的出峰位置與鹼性品紅標準曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，因此判斷本實施例所檢測的待檢中藥採用赤蘚紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0118]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的判定結果與實際相符。
[0119]〈實施例六〉
[0120]本實施例採用拭子為實施例一製備的鋪有納米銀溶膠的濾紙，採用的拉曼光譜儀為實施例一所採用的拉曼光譜儀，採用的溶劑為濃度為25%的乙醇水溶液，採用的待檢中藥為10_4g/mL孔雀石綠水溶液染色的金銀花，乾燥後備用。
[0121]圖7為實施例六中孔雀石綠的標準SERS圖與染色金銀花的檢測圖。
[0122]本實施例對該待檢中藥進行檢測的方法包括以下步驟:
[0123]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0124]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為20 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中。
[0125]步驟二:拭子的採樣
[0126]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為10秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域。
[0127]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0128]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖7中7_a所示的拉曼光譜圖。
[0129]步驟四:對是否染色進行判定
[0130]對步驟三所得的拉曼光譜圖進行判定，由於為非空白譜圖，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0131]如圖7_a所示,所得拉曼光譜圖的特徵峰位於437011'4690]1' 1165011' 1239011'1274cm_1> 1327cm-1和l^llcnT1等處。如圖7_b所示，赤蘚紅標準譜的特徵峰為437(^1'469cm \ 1165cm \ 1239cm \ 1274cm \ 1327cm 1和1611cm、所得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有七個特徵峰的出峰位置與鹼性品紅標準曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，因此判斷本實施例所檢測的待檢中藥採用赤蘚紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0132]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的判定結果與實際相符。
[0133]〈實施例七〉
[0134]本實施例採用拭子為實施例一製備的鋪有納米銀溶膠的濾紙，採用的拉曼光譜儀為實施例一所採用的拉曼光譜儀，採用的溶劑為濃度為25 %的乙醇水溶液，採用的待檢中藥為10_4g/mL玫瑰紅水溶液染色的花椒,乾燥後備用。
[0135]圖8為實施例七中的標準SERS圖與染色金銀花的檢測圖。
[0136]本實施例對該待檢中藥進行檢測的方法包括以下步驟:
[0137]步驟一:待檢中藥的潤溼
[0138]取溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間進行潤溼，一定時間為2秒，溶劑的滴加量為20 μ L，使待檢中藥上能夠溶於溶劑的成份溶於溶劑中。
[0139]步驟二:拭子的採樣
[0140]取乾燥的拭子放置在待檢中藥上，按壓拭子使拭子與溶劑滴加處完全接觸貼緊，使待檢中藥表面的溶液轉移到拭子上，接觸時間為10秒，該接觸時間為拭子與溶劑滴加處完全接觸後在待檢中藥表面的停留時間，取下拭子，將拭子上與滴加處接觸的地方標記為採樣區域。
[0141]步驟三:拉曼光譜圖的採集
[0142]採用拉曼光譜儀對採樣區域進行檢測，得到如圖8中8_a所示的拉曼光譜圖。
[0143]步驟四:對是否染色進行判定
[0144]對步驟三所得的拉曼光譜圖進行判定，由於為非空白譜圖，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中染料的標準拉曼光譜圖進行比對。
[0145]如圖8_a所示,所得拉曼光譜圖的特徵峰位於622011'735011' 1197011' 1280011'1357cm_1> 1508cm-1和1648cm-1等處，如圖8_b所示，赤蘚紅標準譜的特徵峰為622cm_1>735cm—1、1197cm—1、1280cm—1、1357cm—1、1508cm—1 和 1648cm_10 所得的拉曼光譜圖的特徵峰中，有七個特徵峰的出峰位置與鹼性品紅標準曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，因此判斷本實施例所檢測的待檢中藥採用玫瑰紅進行染色。檢測結果與實際相符。
[0146]將本實施例中採用的拭子更換為鋪有納米金溶膠的濾紙，所得的判定結果與實際相符。
[0147]與現有技術相比，上述實施例一至七所提供的技術方案的有益效果是:
[0148]一、專屬性強，結果準確
[0149]上述實施例一至七所提供的技術方案採用5?30 μ L的溶劑潤溼待檢中藥，一定時間為2?15秒，採用拭子進行接觸的接觸時間為2?15秒，在保證將待檢中藥表面可能染有的染料溶解和轉移到拭子上的同時，能夠降低將待檢中藥中的中藥基質溶解和轉移到拭子上的量或完全避免將中藥基質溶解和轉移到拭子上，從而使檢測過程受到中藥基質的影響較小，檢測結果較為準確，所得的譜圖專屬性強。
[0150]二、操作簡單，能夠快速完成檢測
[0151]上述實施例一至七所提供的技術方案所需時間較短，一定時間和接觸時間僅需幾秒，且無需對待檢中藥進行複雜的前處理即可進行檢測，因此操作簡單，檢測快速。
[0152]二、適用範圍廣
[0153]上述實施例一至七所提供的技術方案所需的拭子製備方法簡單、成本較低；拉曼光譜儀攜帶方便，因此不僅能夠滿足實驗室檢測需要，也能夠滿足現場快檢的需要。
[0154]四、無需典型摻偽染料
[0155]上述實施例一至七所提供的技術方案將所得的非空白譜圖與與譜圖庫中常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，即可快速確定染料種類，無需典型摻偽染料進行隨行對照。
[0156]當然，本發明所涉及的一種染色中藥材或中藥飲片的快速檢測方法並不僅僅限定於上述實施例一至七中的內容。以上內容僅為本發明構思下的基本說明，而依據本發明的技術方案所作的任何等效變換，均屬於本發明的保護範圍。
[0157]另外，上述實施例一至七中採用的溶劑為濃度為25%的有機溶劑的水溶液，本發明的技術方案所涉及的溶劑可以為濃度為5%?80%之間任意溶度的有機溶劑的水溶液，所得的判定結果均與實際相符。優選的濃度為25%?50%，當選用優選範圍溶度，尤其溶度為25%時，不僅能夠保證待檢中藥表面的染料的較好溶出，拉曼光譜儀的檢測信號較強，當濃度逐漸增加到50%以上時，隨濃度增加，拉曼光譜儀的檢測信號逐漸減弱。
[0158]另外，上述實施例一至七中採用的有機溶劑為甲醇、乙醇或乙酸，本發明的技術方案所涉及的有機溶劑可以為Cl?C4的醇、Cl?C4的羧酸、丙酮、丁酮、DMF、或DMS0，所得的判定結果均與實際相符，優選甲醇、乙醇、甲酸或乙酸。
[0159]另外，本發明的技術方案所涉及的溶劑的滴加量可以為5?30 μ L之間的任意數值，優選10?20 μ L ;所涉及的一定時間可以為2?15秒之間的任意數值，優選2?5秒；所涉及的接觸時間可以為2?15秒之間的任意數值，優選5?10秒，當選用優選的滴加量、優選一定時間及優選的接觸時間時，能夠在保證將待檢中藥表面可能染有的染料溶解和轉移到拭子上的同時，避免將待檢中藥中的中藥基質溶解和轉移到拭子上，同時，所獲得的拉曼光譜儀的檢測信號較強。
【權利要求】
1.一種判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，在拉曼光譜儀中施行，將所得的拉曼光譜圖與譜圖庫中常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，其特徵在於，包括以下四個步驟: 步驟一:待檢中藥的潤溼 將溶劑滴加在待檢中藥上並放置一定時間，所述溶劑為濃度為5%?80%的有機溶劑的水溶液，所述溶劑的滴加量為5?30 μ L，所述一定時間為2?15秒，所述待檢中藥為乾燥的中藥材或中藥飲片，所述有機溶劑為Cl?C4的醇、Cl?C4的羧酸、丙酮、丁酮、DMF、和DMSO中的任意一種或至少兩種的混合物； 步驟二:拭子的採樣 取乾燥的拭子放置在所述待檢中藥上，所述拭子為標準的鋪有納米金溶膠或者納米銀溶膠的濾紙，按壓使該拭子與溶劑滴加處完全接觸，使所述待檢中藥表面的溶液轉移到所述拭子上，接觸時間為2?15秒，取下所述拭子，將所述拭子上與所述滴加處接觸的地方標記為採樣區域； 步驟三:拉曼光譜圖的採集 採用拉曼光譜儀對所述採樣區域進行檢測，得到拉曼光譜圖； 步驟四:對是否染色進行判定 如果步驟三中得到的所述拉曼光譜圖為空白譜圖，則判定所述待檢中藥沒有染色， 如果步驟三中得到的所述拉曼光譜圖為非空白譜圖，則將該拉曼光譜圖與常用染料的標準拉曼光譜圖進行比對，當該拉曼光譜圖中的至少四個特徵峰的出峰位置與某一染料的標準拉曼光譜圖的特徵峰的出峰位置一致，則判定所述待檢中藥被該染料進行染色，反之，則沒有進行染色。
2.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述溶劑的滴加量為10?20 μ L。
3.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述有機溶劑為Cl?C4的醇，即:甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、或叔丁醇。
4.根據權利要求3所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述有機溶劑為甲醇或乙醇。
5.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述有機溶劑為Cl?C4的羧酸，即:甲酸、乙酸、丙酸、或丁酸。
6.根據權利要求5所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述有機溶劑為甲酸或乙酸。
7.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述一定時間為2?5秒。
8.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述接觸時間為5?10秒。
9.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述一定時間為2?5秒，所述接觸時間為5?10秒。
10.根據權利要求1所述的判定中藥材或中藥飲片是否染色的方法，其特徵在於:所述溶劑為濃度為25%?50%的有機溶劑的水溶液。
【文檔編號】G01N21/65GK104237198SQ201410373119
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年7月31日 優先權日:2014年7月31日
【發明者】陸峰, 李丹, 柴逸峰, 呂狄亞, 朱青霞, 李皓, 苗麗, 方芳, 陳輝, 李曉 申請人:中國人民解放軍第二軍醫大學