生脈軟膠囊的製備方法及其質量控制方法
2023-09-18 19:08:35
專利名稱：生脈軟膠囊的製備方法及其質量控制方法
技術領域：
本發明涉及生脈軟膠囊的製備方法及其質量控制方法。
背景技術：
生脈飲是中醫益氣養陰的著名古方，由紅參、麥冬、五味子三味藥物組成。功能益氣復脈，養陰生津，用於氣陰兩虧，心悸氣短，脈微自汗。「生脈飲」收載於《中華人民共和國藥典》2005年版一部，歷年藥典均有收載，為口服液。現代臨床多應用本方治療肺心病、心血管疾病等屬於氣陰不足者、具有上述症狀的慢性氣管炎、神經官能症、功能性低熱等疾患。
中醫理論認為，本方治證為溼熱、暑熱之邪，耗氣傷陰，或久咳肺虛，氣陰兩傷而致。因暑為陽邪，熱蒸汗多，最易耗氣傷津，導致氣陰兩傷，故汗多，神疲，體倦，氣短，咽幹，脈虛。咳嗽時久傷肺，氣陰不足者，亦可見上述徵象。治宜益氣養陰生津之法。方中紅參甘溫，益氣生津以補肺，肺氣旺則四髒之氣皆旺，為君藥。麥冬甘寒，養陰清熱，潤肺生津，為臣藥。紅參、麥冬合用，則益氣養陰之功益彰。五味子酸溫，斂肺止汗，生津止渴，為佐藥。三藥合用。一補一清一斂，共奏益氣養陰，生津止渴，斂陰止汗之效。使氣復津生，汗止陰存，脈得氣充，則可復生，諸證得除。
方中紅參治療體虛欲脫，脈微欲絕，四肢厥冷，汗出亡陽的急危重患者，有明顯的大補元氣，固脫復脈的功效。現代藥理研究表明紅參能加強大腦皮質的興奮過程，加快神經衝動的傳導，縮短神經反射的潛伏期，增強條件反射，提高分析能力，同時也能加強抑制過程，改善神經過程的靈活性，對人能改善睡眠和情緒，大劑量也可出現鎮靜。紅參有「適應原」樣作用，能增強機體對各種有害刺激的防禦能力(對神經2垂體2腎上腺皮質系統的影響有關)。人參皂甙有明顯抗應激作用，能顯著抑制小鼠腎上腺、胸腺、甲狀腺等器官在應激反應中重要的變化。紅參無性激素樣作用，但能興奮垂體分泌促性腺激素，能促進男、女性腺功能，能降低血糖，與胰島素有協同作用，能調節膽固醇代謝，抑制高膽固醇血症的發生。紅參能刺激造血器官，使造血功能旺盛。增強機體免疫力，促進免疫球蛋白生成，防治多種原因引起的白細胞下降，能使淋巴細胞增加，使淋巴母細胞轉化，增強網狀內皮系統功能。
方中麥冬為其植物鬚根上的塊根。其性微寒、味甘、微苦，歸肺、心、胃經，屬補陰類中藥，可調肺養陰、益胃生津、清心除煩。麥冬含多種甾體皂甙。
方中五味子為其植物的成熟果實。其味酸、甘，性溫。歸心、肺、腎經。本品酸能收斂、甘溫而潤，上能益氣斂肺，下能補腎養陰，益氣生津，退熱斂汗。現代研究五味子能增強中樞神經系統的興奮與抑制過程，促進兩種神經過程的相互平衡，能改善人的智力活動，調節心血管系統血液循環，對不正常血壓有調節作用，對循環衰竭者升高血壓作用頗為顯著。對呼吸有興奮作用，止咳，調節胃液分泌，促進膽汁分泌，調節糖代謝，降低谷2丙轉氨酶，對肝細胞有保護作用。
綜上所述中醫在臨床治療用藥中將紅參、麥冬、五味子相配伍組成複方，發揮中藥多層面，多靶點在人體內的治療作用。三藥合用，一補，一清，一收，共成益氣養陰，生津止渴，固表止汗之功。同時現代藥理研究表明生脈飲對心肌具有保護作用、生脈飲能明顯提高T細胞亞群具有免疫調節作用、生脈飲具有清除對羥自由基的作用、生脈飲具有對生長發育和學習記憶促進作用。
本方在現代臨床應用廣泛，療效確切，臨床上主要用於心功能衰竭、擴張型心肌病心力衰竭、老年腦梗死、低血容量性休克、無症狀心肌缺血、過早搏動、中、重度新生兒硬腫症、頑固性室性早搏等。
總之，經過多年臨床實踐及現代藥理學研究證明本方療效確切，使用安全。被列為第二批國家非處方藥藥品中成藥內科目，廣泛地用於治療心肌梗死，心絞痛，休克，低血壓，心律失常，肺心病等。有關文獻資料常有報導，並不斷探索本方的臨床應用範圍，衍生許多新的臨床應用方法。
生脈軟膠囊根據「生脈飲」研製而成，並保持了原方的功效。通過製成軟膠囊使藥物包於膠囊中與外界隔離，減少了水分、空氣、光線的影響，從而提高穩定性；而且軟膠囊不加賦形劑，減少藥物服用量；不受壓力影響，在胃腸中分散快、吸收好，較丸劑、片劑崩解迅速，生物利用度高；軟膠囊外觀精美、掩蓋不良氣味，容易吞服，易被患者接受。更好地滿足了臨床的需要。改變劑型後的生脈軟膠囊每次服用量4粒/次，2次/天，每粒內容物為0.6g。
發明目的和發明內容《中國藥典》2005版一部收載的「生脈飲」為口服液，本發明通過研究，將其製成軟膠囊。並制定了其質量控制方法。
一、軟膠囊的製備經工藝學研究，生脈飲的製備方法為藥效原料組成紅參250g，麥冬500g，五味子250g。
輔料為由植物油∶蜂蠟∶司盤-80按18∶1∶1比例組成的植物油混合基質適量，優選360g。
製備方法紅參、麥冬、五味子，粉碎成粗粉，用60％-70％乙醇滲漉，收集漉液，回收乙醇至無醇味，並減壓濃縮成清膏，將清膏減壓乾燥，幹膏粉碎成細粉，過100目篩，得乾粉，將乾粉加入植物油混合基質中，攪拌均勻，用膠體磨磨三次以上，壓制於膠丸中，即得。
優選製備方法為紅參、麥冬、五味子，粉碎成粗粉，用65％乙醇作溶劑，浸漬24小時後進行滲漉，滲漉速度為2ml/min，收集漉液約10L，回收乙醇至無醇味，並減壓濃縮為相對密度為1.35～1.40(60℃)的清膏，將清膏於50～60℃減壓乾燥，幹膏粉碎成細粉，過100目篩，得乾粉，將乾粉加入植物油混合基質(植物油∶蜂蠟∶司盤-80為18∶1∶1)中，攪拌均勻，用膠體磨磨三次以上，壓制於膠丸中。常規定型、乾燥、洗丸，製成1000粒，裝瓶即得。
製備方法工藝技術條件的研究1.65％乙醇浸漬時間的考察按照生產工藝，分別利用65％的乙醇浸漬12、24、36小時，處理得到清膏，分別計算出膏率和五味子醇甲的含量。結果見表1。
表1 65％乙醇浸漬時間的考察
結果表明浸漬時間過短不能有效的提取出有效成分，時間過長則容易提取出非主要作用成分。因此選擇24小時作為最佳浸漬時間。
2.滲漉速度的篩選三批相同量的實驗同時進行。按照生產工藝，滲漉時速度分別為1、2、3ml/min，收集漉液，處理測定方法同1。實驗結果見表2。
表2 滲漉速度的篩選
結果表明滲漉速度慢，出膏率高，但是五味子醇甲含量偏低。滲漉速度快，則不能充分提取，當滲漉速度為2ml/min時，既能提高生產效率，又能充分提取，因此選擇2ml/min作為滲漉速度。
3.漉液收集體積的選擇三批相同量的實驗同時進行。按照生產工藝，滲漉速度2ml/min，收集漉液體積分別為原料量的5、10、15倍(V/W)，下一步的處理測定方法同1。實驗結果見表3。
表3 漉液收集體積的選擇
結果表明漉液收集體積大出膏率高，但是五味子醇甲含量偏低。選擇收集體積為加料量的10倍體積，即能保證出膏率，又能保證五味子醇甲含量。
4.製劑成型工藝研究4.1處方設計處方生脈乾燥粉40％輔料植物油54％蜂蠟3％司盤-80 3％4.2輔量用量選擇根據製劑學要求，軟膠囊多選用植物油作為混懸液的分散介質，選擇適宜的潤溼劑和助懸劑使內容物保持長時間的穩定是軟膠囊製備的關鍵。下而為輔料用量選擇情況①蜂蠟用量比例確定用50ml具塞試管，按如下比例在藥粉中加入植物油、蜂蠟，放置6小時，觀察試驗結果如下植物油 蜂蠟結果(助懸情況)90％ 2％ 較好5％ 好7％ 不好由上述結果可確定蜂蠟用量為5％。
②司盤-80用量比例確定用50ml具塞試管，按如下比例在藥粉中加入植物油、司盤-80，放置6小時，觀察試驗結果如下植物油司盤-80結果(助溶情況)90％ 2％較好5％好7％好由結果可知司盤-80用量為7％及5％時試驗結果一致，我們選擇司盤-80用量為5％，這樣即可以起到表面活性劑作用，司盤-80其含量所佔比例不多。
由上述試驗結果可確定植物油、蜂蠟、司盤-80的最佳比例為18∶1∶1③藥粉與基質比例確定選用不同比例基質，觀察乾燥藥粉情況及崩解情況表4 輔料用量選擇結果
由表4結果可知藥粉與基質比例為1∶1.5情況最好。
5.轉移率試驗三批中試樣品所用五味子的主要有效成分五味子醇甲含量為0.409％，製劑中五味子醇甲含量分別為0.57mg/粒、0.56mg/粒、0.57mg/粒，五味子醇甲的轉移率分別為57.0％、56.0％、57.0％。
6.日服劑量計算根據原劑型日服劑量，改為膠囊服用劑量為每次4粒，一日2次，每粒0.6克。每粒含飲片藥量與原劑型相同。
7.中試研究
二、生脈軟膠囊質量控制方法的制定[鑑別](1)取本品內容物4g，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去醚液，水溶液加水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，加氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，通過HPD100大孔樹脂(內徑1cm，高8cm)，先用50ml水洗脫，棄去水液，繼用50ml 20％乙醇洗脫，棄去醇液，再用50ml 70％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rg1、Rb1加甲醇製成每1ml各含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品6μl、對照品溶液各2μl，分別點(成條狀)於同一矽膠G薄層板(默克預製板)上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，預飽和15分鐘後，展開9cm，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，於105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取本品內容物2g，加水20ml，超聲處理20分鐘，離心(2000轉/分)，傾出上清液，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水層低溫揮去乙醚，加鹽酸2ml，加熱回流1小時，放冷，加乙醚提取2次，每次20ml，合併乙醚液，低溫蒸乾，殘渣加氯仿2ml使溶解，作為供試品溶液。另取麥冬對照藥材粉末(80目)2g，加65％乙醇20ml，加熱回流1小時，放冷，離心，傾出上清液，蒸至無醇味，加水20ml使溶解，加鹽酸2ml，同法製成對照藥材氯仿溶液2ml。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品、對照品藥材溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-甲酸(7∶3∶0.2)為展開劑，預飽和15分鐘後，展開9cm，取出，晾乾，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點由黃稍變藍黑色為止。供試品色譜中，在與對照品藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(62∶38)為流動相；檢測波長為254nm。理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取五味子醇甲對照品2mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解，並稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含五味子醇甲40μg)。
供試品溶液的製備取軟膠囊10粒，擠出內容物，攪勻，精密稱取0.25g，加甲醇20ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取4次，每次20ml，合併乙醚液，減壓(60℃)回收至幹，殘渣加甲醇使溶解，轉移至10ml量瓶中，並稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.5μm)濾過，即得。
測定方法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含五味子以五味子醇甲(C24H32O7)計，不得少於0.6mg。
權利要求
1.生脈軟膠囊的製備方法，其特徵在於包括以下步驟按紅參250g、麥冬500g、五味子250g的比例取原料，粉碎成粗粉，用60％-70％乙醇滲漉，收集漉液，回收乙醇至無醇味，並減壓濃縮成清膏，將清膏減壓乾燥，幹膏粉碎成細粉，過100目篩，得乾粉，將乾粉加入由植物油∶蜂蠟∶司盤-80按18∶1∶1比例組成的植物油混合基質中，攪拌均勻，用膠體磨磨三次以上，壓制於膠丸中，即得。
2.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於將紅參、麥冬、五味子粉碎成粗粉，用65％乙醇作溶劑，浸漬24小時後進行滲漉，滲漉速度為2ml/min，收集漉液約10L，回收乙醇至無醇味，並減壓濃縮為60℃熱測相對密度為1.35～1.40的清膏，將清膏於50～60℃減壓乾燥，幹膏粉碎成細粉，過100目篩，得乾粉，將乾粉加入植物油混合基質中，攪拌均勻，用膠體磨磨三次以上，壓制於膠丸中，即得。
3.鑑定含有紅參、麥冬、五味子的組合物中某類成分的方法，包括以下至少一項(1)取本品內容物4g，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去醚液，水溶液加水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，加氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，通過HPD100大孔樹脂，先用50ml水洗脫，棄去水液，繼用50ml20％乙醇洗脫，棄去醇液，再用50ml70％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg1、Rb1加甲醇製成每1ml各含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品6μl對照品溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水按15∶40∶22∶10體積比組成的混合液在10℃以下放置分層形成的下層溶液為展開劑，預飽和15分鐘後，展開9cm，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，於105℃加熱至斑點顯色清晰；比較供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，是否顯相同顏色的斑點；(2)取本品內容物2g，加水20ml，超聲處理20分鐘，離心，傾出上清液，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水層低溫揮去乙醚，加鹽酸2ml，加熱回流1小時，放冷，加乙醚提取2次，每次20ml，合併乙醚液，低溫蒸乾，殘渣加氯仿2ml使溶解，作為供試品溶液；另取麥冬對照藥材粉末2g，加65％乙醇20ml，加熱回流1小時，放冷，離心，傾出上清液，蒸至無醇味，加水20ml使溶解，加鹽酸2ml，同法製成對照藥材氯仿溶液2ml；照薄層色譜法試驗，吸取供試品、對照品藥材溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以沸點為60～90℃的石油醚-醋酸乙酯-甲酸按7∶3∶0.2體積比組成的混合液為展開劑，預飽和15分鐘後，展開9cm，取出，晾乾，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點由黃稍變藍黑色為止；比較供試品色譜中，在與對照品藥材色譜相應的位置上是否顯相同顏色的斑點。
4.測定含有紅參、麥冬、五味子的組合物中五味子醇甲含量的方法，其特徵在於採用高效液相色譜法，測定方法為用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水按62∶38體積比組成的混合液為流動相；檢測波長為254nm，理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；用五味子醇甲對照品的甲醇溶液為對照品溶液，每1ml含五味子醇甲40μg；供試品溶液的製備取軟膠囊10粒，擠出內容物，攪勻，精密稱取0.25g，加甲醇20ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取4次，每次20ml，合併乙醚液，減壓回收至幹，殘渣加甲醇使溶解，轉移至10ml量瓶中，並稀釋至刻度，搖勻，用0.5μm微孔濾膜濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
全文摘要
本申請涉及生脈軟膠囊的製備方法按紅參250g、麥冬500g、五味子250g的比例取原料，粉碎成粗粉，用60％－70％乙醇滲漉，收集漉液，回收乙醇至無醇味，並減壓濃縮成清膏，將清膏減壓乾燥，幹膏粉碎成細粉，過100目篩，得乾粉，將乾粉加入由植物油∶蜂蠟∶司盤－80按18∶1∶1比例組成的植物油混合基質中，攪拌均勻，用膠體磨磨三次以上，壓制於膠丸中，即得。並且本申請提供了對其中的紅參、麥冬的新的薄層鑑別方法。本申請進一步提供了對五味子醇甲的含量測定方法，能更好地反映和控制製劑的內在質量。
文檔編號G01N30/02GK1994426SQ20061017156
公開日2007年7月11日 申請日期2006年12月30日 優先權日2006年12月30日
發明者林德良 申請人:北京漢典中西藥研究開發中心