一種牙痛清火藥物的質量控制方法

2023-09-18 12:34:00 1

專利名稱：一種牙痛清火藥物的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥組合物的質量控制方法，更具體地說是一種具有清熱瀉火， 消腫止痛功效的牙痛清火藥物的質量控制方法，屬醫藥技術領域。
背景技術：
牙痛是多種牙病和牙周病症常見的症狀之一。牙病發作時疼痛難耐，如果不能及 時治療既影響正常的飲食又可引發口腔、食道、胃腸病等30多種疾病。中國人的牙齒健康 堪稱世界難題，按人口比例計算，中國人牙病為世界第二大國。然而，市場上現有的用於治 療牙痛病症藥物療效不確定、易復發，且毒副作用較大。中醫認為齒為骨之餘，為腎所主，並為足陽明胃經所絡，故牙病與胃、腎關係十分 密切，尤其以胃火牙痛最為常。風邪鬱於陽明而化火，熱蘊胃腑而上衝而致虛火上浮，均可 導致牙的病變，根據「痛則不通」之原理，來自腎、胃的虛、實之火邪必然遏阻陽明經絡之流 通。因此，中醫認為牙痛是人體實、虛火上升引起的。實火引起的，痛程短，疼痛厲害；虛火 引起的，痛程長，疼痛綿綿，牙齒鬆動，可見牙痛之病因主要責之於風、火、虛、瘀四端，其中 瘀為後果，風、火為原因。本發明藥物系由不同性味、歸經、功效的內服中藥，針對胃火引起的牙痛、牙齦紅 腫等症，直接作用於病變部位，標本兼治。本發明藥物臨床應用多年，療效顯著。

發明內容
本發明的目的在於提供一種牙痛清火藥物的質量控制方法，可增強該藥的有效 性、質量可控性及穩定性。本發明的目的是通過以下技術方案實現的 本發明藥物的質量控制方法為
鑑別方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣 加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流20 40分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每 次10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對 照藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽 酸1ml，置水浴中回流20 40分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮 去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩 種溶液各3 8 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以比例 為10 20 :3 8 :0. 5 2的30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑， 展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置 上，顯相同的橙紅色斑點；置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬1 3小時，時時攪拌，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶 液；另取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、4mg的溶液，作為對照品溶 液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各3 8 1，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液制 備的矽膠G薄層板上，以比例5 12 :2 5 :0. 5 2 :0. 05 0. 2的三氯甲烷-甲醇-醋 酸乙酯-二乙胺為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點 顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮 至2ml，作為供試品溶液；另取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾液 20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶 解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取 上述兩種溶液各8 15 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為3 5 :1 3 :0. 5 2正丁醇-甲酸乙酯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以臨用時混合的比例為1 :1的1% 香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色 譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定方法
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以70 90 10 30甲醇一0. 1%磷酸為流動相；檢測波長200 300nm ；理論板數按大黃酚峰計算應不低於 2500 3500 ；
對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每Iml含 大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得；
供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽酸 1. 5ml，搖勻，置水浴中回流水解20 40分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲 烷提取二至四次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中， 加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；
測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素和大黃酚的總量計，不得少於0. 06mgo優選方案
本發明藥物的質量控制方法為 鑑別方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘 渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次 10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照 藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽酸 Iml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次IOml，合併提取液，揮去乙醚， 殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各 5 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以比例15 5 1的30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下 檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點；置氨蒸氣中 燻後，斑點變為紅色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬2小時，時時攪拌，濾過，濾 液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液； 另取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、4mg的溶液，作為對照品溶液；照 薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5 1，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液製備的矽膠G 薄層板上，以比例8 :4 :1 :0. 1三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺為展開劑，展開，取出， 晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮 至2ml，作為供試品溶液；另取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾液 20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶 解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取 上述兩種溶液各10 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例4 2 1的正丁醇-甲酸乙 酯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以臨用時混合配置比例為1 :1的1%香草醛乙醇溶 液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照 藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定方法
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以85 15甲醇一 0. 1%磷酸為流動相；檢測波長254nm ；理論板數按大黃酚峰計算應不低於3000 ；
對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每Iml含 大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得；
供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽酸 1.5ml，搖勻，置水浴中回流水解30分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲烷提 取三次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇稀 釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；
測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素和大黃酚的總量計，不得少於0. 06mg。本發明的質量控制方法對製劑產品的質量控制十分有效，方法精密度高、靈敏度、 穩定性都很高。以下實驗例用於進一步說明本發明質量控制方法的有益效果，但不僅限於本發 明。實驗例1鑑別
(一)大黃薄層鑑別1、供試品溶液的製備取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取 濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙 醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶 液。2、對照藥材溶液的製備取大黃對照藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取 濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙 醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為對照藥材 溶液。3、缺大黃陰性對照溶液的製備按處方比例及製法，製成缺大黃的陰性樣品，取 5ml，按供試品溶液的製備方法，製成陰性對照溶液。4、薄層層析照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5 1，分別點於同一以羧 甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(15 5 1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在 與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點；置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色。陰 性對照色譜在與對照藥材色譜相應的位置上無幹擾。(二)赤芍、桅子的薄層鑑別
1、供試品溶液的製備取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬2小時， 時時攪拌，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液， 水液用水飽和的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解， 作為供試品溶液。2、對照藥材溶液的製備取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、 4mg的溶液，作為對照品溶液。3、缺赤芍、桅子陰性對照溶液的製備按處方比例及製法，製成缺赤芍、桅子的陰 性樣品，取10ml，按供試品溶液的製備方法，製成陰性對照溶液。4、薄層層析照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5 1，分別點於同一用4% 醋酸鈉溶液製備的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺(8 410. 1) 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰。供試 品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性對照色譜在與對照品色 譜相應的位置上無幹擾。(三)玄參的薄層鑑別
1、供試品溶液的製備取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁 醇液，蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的 正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少 許，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；
2、對照藥材溶液的製備取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾液 20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶 解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，作為對照藥材溶液；
3、缺玄參對照溶液的製備按處方比例及製法，製成缺玄參的陰性樣品，取20ml，按供 試品溶液的製備方法，製成陰性對照溶液；4、薄層層析照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 1，分別點於同一矽膠G薄 層板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(4 2 :1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1%香草醛乙 醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液(1 :1，臨用時混合)，在105°C加熱至斑點顯色清晰。 供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性對照色譜在與對 照藥材色譜相應的位置上無幹擾。實驗例2含量測定
按照高效液相色譜法的測定方法，對三批樣品(080201、080202、080203)進行含量測定。計算方法如下
X (mg/ml) = X1 (大黃素含量)(mg/ml)+ X2 (大黃酚含量)(mg/ml)
X1(大黃素含量)(mg/ml)= (A樣品峰面積xC大黃素對照品濃度XV定容體積)/ (A大黃素對照品峰面積X 1000X 10) X2(大黃酚含量)(mg/ml)= (Α樣品峰面積XC大黃酚對照品濃度XV定容體積)/ (A大黃酚對照品峰面積X 1000X 10)
試驗結果如下
批號大黃酚含量 大黃素含量樣品含量
■_, (Pig/ml)_, (mg/ml)_ _
0802010. 5218 . 25 240. 7742。
080202^ 0.55 720. 2644^ 0.8216
0802030. 561 20. 25 810. 81 9具體實施例方式以下用實施例對本發明的牙痛清火藥物的質量控制方法作進一步的說明，這將有 助於對本發明及其效果進一步的了解，實施例不限定本發明的保護範圍，其保護範圍由權 利要求來決定。實施例1本發明藥物的質量控制方法 鑑別方法
Α.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘 渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流20分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次 10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照 藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽 酸1ml，置水浴中回流20分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙 醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶 液各3 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(10 3 0. 5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點； 置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬1小時，時時攪拌，濾過，濾 液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、4mg的溶液，作為對照品溶液。照 薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各3 1，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液製備的矽膠G 薄層板上，以三氯甲烷_甲醇_醋酸乙酯_ 二乙胺(5 :2 0. 5 0. 05)為展開劑，展開，取出， 晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮 至2ml，作為供試品溶液。另取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾液 20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶 解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上 述兩種溶液各8 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(3 1 :0. 5) 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液(1 :1， 臨用時混合)，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置 上，顯相同顏色的斑點； 含量測定方法 照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，甲醇一0. 1%磷酸 (70 30)為流動相；檢測波長200nm。理論板數按大黃酚峰計算應不低於2500。對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每 Iml含大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得。供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽 酸1.5ml，搖勻，置水浴中回流水解20分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲烷 提取二次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇 稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得。 這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素(C15HltlO5)和大黃酚(C15HltlO4)的總量計，不
得少於0. 06mg。實施例2本發明藥物的質量控制方法 鑑別方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘 渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流40分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次 10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶液，另取大黃對照 藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽 酸Iml，置水浴中回流40分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次IOml，合併提取液，揮去乙 醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶 液各8 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(20:8:2)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點；置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色。B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬3小時，時時攪拌，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和 的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶 液；另取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、4mg的溶液，作為對照品溶 液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各8 1，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液製備的 矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺(12 :5 :2 0. 2)為展開劑，展開，取 出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照 品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘 渣加水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三 次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液 濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾 液20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使 溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸 取上述兩種溶液各15 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(5 3 2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液 (1 :1，臨用時混合)，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應 的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定方法
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，甲醇一0. 1%磷酸 (90 10)為流動相；檢測波長300nm。理論板數按大黃酚峰計算應不低於3500。對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每 Iml含大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得。供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽 酸1. 5ml，搖勻，置水浴中回流水解40分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲烷 提取四次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇 稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得。 這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素(C15HltlO5)和大黃酚(C15HltlO4)的總量計，不
得少於0. 06mg。實施例3本發明藥物的質量控制方法 鑑別方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘 渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次 10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶液，另取大黃對照 藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽 酸1ml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶 液各5 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5 1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點； 置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬2小時，時時攪拌，濾過，濾 液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液； 另取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、4mg的溶液，作為對照品溶液。 照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5 1，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液製備的矽膠 G薄層板上，以三氯甲烷_甲醇_醋酸乙酯_ 二乙胺(8 4 1 0. 1)為展開劑，展開，取出，晾 幹，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色 譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮 至2ml，作為供試品溶液。另取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾液 20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶 解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上 述兩種溶液各10 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(4 2 1) 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液(1 :1， 臨用時混合)，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置 上，顯相同顏色的斑點。含量測定方法
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，甲醇一0. 1%磷酸 (85 15)為流動相；檢測波長254nm。理論板數按大黃酚峰計算應不低於3000。對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每 Iml含大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得。供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽 酸1.5ml，搖勻，置水浴中回流水解30分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲烷 提取三次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇 稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得。 這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素(C15HltlO5)和大黃酚(C15HltlO4)的總量計，不
得少於0. 06mg。上述質量控制方法，可以應用於這種牙痛清火藥物的中藥製劑的處方按照現有技 術製成丸劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液中任何一種現有臨床適用劑型的質量控制方法。
權利要求
一種牙痛清火藥物的質量控制方法，其特徵在於該方法包括如下步驟A.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流20～40分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流20～40分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3～8 l，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以比例為10～203～80.5～2的30～60℃石油醚 甲酸乙酯 甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點；置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色； B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬1～3小時，時時攪拌，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10ml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷、梔子苷對照品，分別加乙醇製成每1ml含1mg、4mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各3～8 l，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液製備的矽膠G薄層板上，以比例5～122～50.5～20.05～0.2的三氯甲烷 甲醇 醋酸乙酯 二乙胺為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮10ml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取玄參對照藥材5g，加水約100ml煎煮30分鐘，濾過，取濾液20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮10ml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各8～15 l，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為3～51～30.5～2正丁醇 甲酸乙酯 甲醇為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以臨用時混合的比例為11的1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
2.如權利要求1所述的一種牙痛清火藥物的質量控制方法，其特徵在於該方法包括如 下步驟A.取本品5ml，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇20ml使溶解，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘 渣加水IOml使溶解，加鹽酸1ml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次 10ml，合併提取液，揮去乙醚，殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照 藥材0. 2g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml，蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加鹽酸 lml，置水浴中回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取二次，每次10ml，合併提取液，揮去乙醚， 殘渣加三氯甲烷Iml使溶解，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各 5 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以比例15 5 :1的30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點；置氨蒸氣中 燻後，斑點變為紅色；B.取本品10ml，置水浴上蒸乾，殘渣加無水乙醇20ml，浸漬2小時，時時攪拌，濾過，濾 液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，棄去醚液，水液用水飽和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液； 另取芍藥苷、桅子苷對照品，分別加乙醇製成每Iml含lmg、4mg的溶液，作為對照品溶液；照 薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5 1，分別點於同一用4%醋酸鈉溶液製備的矽膠G 薄層板上，以比例8 :4 :1 :0. 1三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺為展開劑，展開，取出， 晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C.取本品20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，棄去醚液，水液用水飽和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮 至2ml，作為供試品溶液；另取玄參對照藥材5g，加水約IOOml煎煮30分鐘，濾過，取濾液 20ml，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加丙酮IOml使溶 解，並加活性炭少許，濾過，濾液濃縮至2ml，製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取 上述兩種溶液各10 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例4 :2 1的正丁醇-甲酸乙 酯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以臨用時混合配置比例為1 :1的1%香草醛乙醇溶 液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照 藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
3.一種牙痛清火藥物的質量控制方法，其特徵在於該方法包括如下步驟照高效液相色譜法測定色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以70 90 10 30甲醇一0. 1%磷酸為流動相；檢測波長200 300nm ；理論板數按大黃酚峰計算應不低於 2500 3500 ；對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每Iml含 大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得；供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽酸 1. 5ml，搖勻，置水浴中回流水解20 40分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲 烷提取二至四次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中， 加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得；這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素和大黃酚的總量計，不得少於0. 06mg。
4.如權利要求3所述的一種牙痛清火藥物的質量控制方法，其特徵在於該方法包括如 下步驟照高效液相色譜法測定色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以85 15甲醇一 0. 1%磷酸為流動相；檢測波長254nm ；理論板數按大黃酚峰計算應不低於3000 ；對照品溶液的製備分別精密稱取大黃素、大黃酚對照品適量，各加甲醇製成每Iml含大黃素12. 5 g、大黃酚50 g的溶液，即得；供試品溶液的製備精密量取本品10ml，置150ml燒瓶中，加無水乙醇5ml，再加鹽酸 1. 5ml，搖勻，置水浴中回流水解30分鐘，立即冷至室溫，轉移至分液漏鬥中，加三氯甲烷提 取三次，每次25ml，合併提取液，蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇稀 釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；測定法分別精密吸取上述三種溶液各10 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 這種牙痛清火藥物每Iml含總蒽醌以大黃素和大黃酚的總量計，不得少於0. 06mgo
全文摘要
本發明屬於中藥技術領域，具體說涉及是一種具有清熱瀉火，消腫止痛功效的牙痛清火藥物的質量控制方法。本發明經過多次試驗後採用薄層色譜法對處方中大黃、赤芍、梔子、玄參進行鑑別，且採用高效液相法進行含量測定。本發明質量控制方法對產品的質量控制更為有效，方法精密度、靈敏度、穩定性更高，能有效地保證藥品的質量。
文檔編號G01N30/90GK101926884SQ201010277690
公開日2010年12月29日 申請日期2010年9月9日 優先權日2010年9月9日
發明者唐德江, 陳犁 申請人:重慶希爾安藥業有限公司