大分子膠原蛋白提取工藝的製作方法
2023-09-19 05:49:50 2
專利名稱：大分子膠原蛋白提取工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種膠原蛋白提取工藝，特別是一種大分子膠原蛋白提取工藝。
背景技術：
膠原蛋白是一類在醫用外科、美容充填、護膚品、食品、化工等行業廣 泛應用的原材料。目前我國膠原蛋白生產主要以豬、牛等的皮、腱等為原料 經過提取、純化得到。現有技術中膠原蛋白的提取過程基本都是採用了低溫
長時間浸泡提取的工藝， 一般以0.5M醋酸在4"C左右浸泡72-96小時，提取 時間長而且得率底，能耗高。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種提取時間 短、得率高、可操作性強的大分子膠原蛋白提取工藝。
本發明所要解決的技術問題是通過以下的技術方案來實現的。本發明是
一種大分子膠原蛋白提取工藝，其特點是，其步驟如下
(1) 選取魚皮、豬皮、牛皮或切片筋腱為原料，並用清水對原料進行清洗除 雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為0. 05-5. Omol/L的NaOH溶液在(TC —30。C條 件下浸泡l-30小時，在浸泡過程中，每隔l-5小時，更換浸泡用NaOH溶液l次；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對 原料進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積(g/ml)百分比為0. 1 —10%，洗滌後再用清水進行清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為0. 05—10mol/L的酸性溶液在0°C — 3(TC的條件下進行溶脹處理2-72小時，原料和酸性溶液的重量體積比
(g/ml，下同)為1: 2— 50;然後將溶脹處理後的原料在OX: — -40 。C條件下凍結1-12小時；凍結完畢後，向原料中加入適量的0.05— 1Omol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於5mm的顆粒料漿,打漿 時環境和料漿溫度為0。C —30°C;
(4) 向顆粒料漿中加入0.05—10mol/L的酸性溶液進行提取，所加入的酸性 溶液與原料的體積重量比為5—50: 1，提取溫度(TC 一 3CTC，提取時 間為l-72小時；提取完畢後，以40—80目紗網過濾，得提取液；再向 濾渣中加酸性溶液，按上述操作重複提取1-2次，得提取液和濾渣，向 提取液中加入NaCl至濃度為1. 5 — 3. 5 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍幹 燥製得大分子膠原蛋白；
所述的酸性溶液為醋酸、檸檬酸或鹽酸溶液；所述的有機溶劑為丙酮、 四氯化碳或己烷。
在以上所述的步驟(4)中還可以取濾渣並向其中加入0.05—1Omol/L 的酸性溶液，按步驟(4)所述方法重複操作提取1-2次，得提取液；合併提 取液，向其中加入NaCl至濃度為1.5 — 3.5 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍幹 燥製得大分子膠原蛋白。
在以上所述的大分子膠原蛋白提取工藝中1、 步驟(2)中，有機溶劑對原料進行浸泡的時間優選為2—IO小時。
2、 步驟(2)中，浸泡所用的Na0H溶液的濃度優選為0.5-2.0mol/L，在 0°C —20。C條件下浸泡5-20小時；在浸泡過程中，優選每隔2-3小時更換浸 泡用NaOH溶液1次；洗滌時原料與所加入的有機溶劑的重量體積百分比優選 為0. 5—5%。
3、 步驟(3)中，溶脹處理時加入的酸性溶液的濃度優選為0. 5— 5 mol/L， 溶脹處理在0" —20。C的條件下進行，溶脹處理時間優選為10-24小時，原 料和酸性溶液的重量體積比優選為1: 5—40;打槳破碎時所加入的酸性溶液 的濃度優選為0. 5—5mol/L，打漿時環境和料漿溫度優選為0°C —2(TC。
4、 步驟(4)中，提取時向顆粒料漿中加入的酸性溶液的濃度優選為0.5 —5 mol/L;原料與酸性溶液的重量體積比優選為1: 10—40，提取溫度優選 0°C _ 20°C，提取時間優選為5-36小時。
5、 所述的魚皮可以為水產加工過程中產生的下腳料魚皮，如鯉魚皮、鰱 魚皮、鱈魚皮、魷魚皮等；步驟(1)中對原料進行清洗除雜是為了除去原料 表面的血汙、粘液、鱗片等雜質。
與現有技術相比，本發明工藝具有以下優點採用NaOH溶液浸泡可以有 效地去除雜蛋白；採用有機溶劑洗滌可以有效地去除脂肪；將原料溶脹，進 行溶脹處理可以使原料的厚度增加，降低了原材料組織的韌性，結合控溫、 凍結增加了組織的脆性，進一步降低原料的韌性；然後進行破碎，將破碎後 的原料進一步提取。本發明大分子膠原蛋白提取工藝將各處理、提取步驟有 機地結合起來，可以較大程度的提高蛋白的提取效率，減少提取的時間，降 低提取過程的能耗，提取得到的膠原蛋白分子量不小於10萬道爾頓。
圖1為本發明工藝提取的大分子膠原蛋白的SDS-PAGE電泳圖。 圖中
1:高分子量標準蛋白(Sigma Co, USA); 2:牛皮標準I型膠原蛋白(Sigma Co, USA); 3:本發明工藝提取的鯉魚皮膠原蛋白。
具體實施例方式
以下進一步描述本發明的具體技術方案，以便於本領域的技術人員進一 步地理解本發明，而不構成對其權利的限制。
實施例1。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下
(1) 選取鯉魚皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為0.05mol/L的NaOH溶液在0"C條件下浸泡1 小時；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料 進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為0.1%，洗滌後再 用清水進行清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為0.05mol/L的酸性溶液在(TC的條件 下進行溶脹處理2小時，原料和酸性溶液的重量體積比為1: 2;然後將 溶脹處理後的原料在-4CTC條件下凍結1小時；凍結完畢後，向原料中 加入適量的0. 05mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於5ram的顆 粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為0°C;
(4) 向顆粒料漿中加入0.05mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸 性溶液的重量體積比為l: 5，提取溫度(TC,提取時間為l小時；提取完畢後，以40目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按上述 操作重複提取l次，得提取液；
(5)合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為1.5 mol/L進行鹽析沉 澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。 所述的有機溶劑為丙酮；有機溶劑對原料進行浸泡的時間為2小時；所 述的酸性溶液為醋酸溶液。
實施例2。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下
(1) 選取豬皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為5. 0mol/L的NaOH溶液在30'C條件下浸泡30 小時，在浸泡過程中，每隔5小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡 完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、 洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為10%，洗滌後再用清水進行 清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為10mol/L的酸性溶液在30'C的條件 下進行溶脹處理72小時，原料和酸性溶液的重量體積比為1: 50;然後 將溶脹處理後的原料在0"C條件下凍結12小時；凍結完畢後，向原料中 加入適量的10mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於4,的顆粒 料漿，打漿時環境和料漿溫度為30°C;
(4) 向顆粒料漿中加入10mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性 溶液的重量體積比為l: 50，提取溫度3(TC，提取時間為72小時；提 取完畢後，以80目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按上
述操作重複提取2次，得提取液；(5)合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為3.5mol/L進行鹽析沉澱， 冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。 所述的有機溶劑為四氯化碳;有機溶劑對原料進行浸泡的時間為10小時； 所述的酸性溶液為檸檬酸溶液。
實施例3。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下
(1) 選取牛皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為0. 5mol/L的NaOH溶液在5"C條件下浸泡5小 時，在浸泡過程中，每隔2小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡完 畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗 滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為0.5%，洗滌後再用清水進行清 洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為0.5mol/L的酸性溶液在5"C的條件 下進行溶脹處理12小時，原料和酸性溶液的重量體積比為1: 10;然後 將溶脹處理後的原料在-18t:條件下凍結2小時；凍結完畢後，向原料 中加入適量的0. 5mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於3mm的 顆粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為io°c;
(4) 向顆粒料漿中加入0.5mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸 性溶液的重量體積比為1: 10，提取溫度5'C，提取時間為5小時；提 取完畢後，以50目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按上 述操作重複提取2次，得提取液；
(5) 合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為2mol/L進行鹽析沉澱，冷 凍乾燥製得大分子膠原蛋白。所述的有機溶劑為己烷；有機溶劑對原料進行浸泡的時間為5小時；所 述的酸性溶液為鹽酸溶液。
實施例4。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下-
(1) 選取厚度2-3mm為切片筋腱為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理;
(2) 取清洗後的原料用濃度為1. 0mol/L的NaOH溶液在15。C條件下浸泡20 小時，在浸泡過程中，每隔3小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡 完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、 洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為2%，洗滌後再用清水進行清 洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為lmol/L的酸性溶液在15。C的條件下 進行溶脹處理26小時，原料和酸性溶液的重量體積比為l: 20;然後將 溶脹處理後的原料在-28'C條件下凍結3小時；凍結完畢後，向原料中 加入適量的2mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於5mm的顆粒 料漿，打漿時環境和料漿溫度為15°C;
(4) 向顆粒料漿中加入2mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性 溶液的重量體積比為l: 30，提取溫度6"C，提取時間為18小時；提取 完畢後，以60目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按上述 操作重複提取l次，得提取液；
(5) 合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為2.5mol/L進行鹽析沉澱，
冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。 所述的有機溶劑為四氯化碳；有機溶劑對原料進行浸泡的時間為12小 時；所述的酸性溶液為醋酸溶液。實施例5。
一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下
(1) 選取鰱魚皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為2. 0mol/L的NaOH溶液在2(TC條件下浸泡20小時，在浸泡過程中，每隔3小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為5%，洗滌後再用清水進行清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為5mol/L的酸性溶液在2(TC的條件下進行溶脹處理10小時，原料和酸性溶液的重量體積比為h 5;然後將溶脹處理後的原料在-5t:條件下凍結8小時；凍結完畢後，向原料中加入適量的5mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於lmm的顆粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為20°C;
(4) 向顆粒料漿中加入5mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性溶液的重量體積比為l: 10,提取溫度2(TC，提取時間為5小時；提取完畢後，以70目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按上述
操作重複提取l次，得提取液；
(5) 合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為1.8mol/L進行鹽析沉澱，
冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。有機溶劑對原料進行浸泡的時間為8小時。實施例6。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下
(1) 選取鱈魚皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為3. 0mol/L的Na0H溶液在12"條件下浸泡10小時，在浸泡過程中，每隔2小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為2.5%，洗漆後再用清水進行清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為2. 5mol/L的酸性溶液在l(TC的條件下進行溶脹處理15小時，原料和酸性溶液的重量體積比為1: 25;然後將溶脹處理後的原料在-12'C條件下凍結3小時；凍結完畢後，向原料中加入適量的2. 5q1/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於2mm的顆粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為10°C;
(4) 向顆粒料漿中加入2. 5mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性溶液的重量體積比為l: 35，提取溫度10(TC，提取時間為36小時；提取完畢後，以50目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按
上述操作重複提取2次，得提取液；
(5) 合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為2.8mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。
有機溶劑對原料進行浸泡的時間為18小時。
實施例7。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下-
(1) 選取魚皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為7. Omol/L的NaOH溶液在18。C條件下浸泡18小時，在浸泡過程中，每隔4小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為7%，洗滌後再用清水進行清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為7mol/L的酸性溶液在18。C的條件下
進行溶脹處理60小時，原料和酸性溶液的重量體積比為1: 45;然後將
溶脹處理後的原料在-35'C條件下凍結2小時；凍結完畢後，向原料中加入適量的7mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於3ran的顆粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為18°C;
(4) 向顆粒料漿中加入7mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性溶液的重量體積比為1: 45，提取溫度18°C，提取時間為50小時；提取完畢後，以40目紗網過濾，得提取液；再向濾渣中加酸性溶液，按上述操作重複提取2次，得提取液；
(5) 合併提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為2 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。
所述的有機溶劑為四氯化碳；有機溶劑對原料進行浸泡的時間為6小時；所述的酸性溶液為醋酸溶液。
實施例8。 一種大分子膠原蛋白提取工藝，其步驟如下
(1) 選取魷魚皮為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；
(2) 取清洗後的原料用濃度為0.05mol/L的NaOH溶液在0t:條件下浸泡1小時；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為0.1%，洗滌後再用清水進行清洗；
(3) 取步驟(2)所得原料，加入濃度為0. 05mol/L的酸性溶液在(TC的條件下進行溶脹處理2小時，原料和酸性溶液的重量體積比為l: 2;然後將溶脹處理後的原料在-4(TC條件下凍結1小時；凍結完畢後，向原料中
加入適量的0. 05mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於5mm的顆粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為0°C;(4)向顆粒料漿中加入0.05mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性溶液的重量體積比為l: 5，提取溫度0。C，提取時間為l小時；提取完畢後，以40目紗網過濾，得提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為1.5 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。
所述的有機溶劑為丙酮；有機溶劑對原料進行浸泡的時間為2小時；所述的酸性溶液為醋酸溶液。
實施例9。參照圖l。鯉魚魚皮膠原蛋白的提取工藝。
其步驟如下
(1) 原料處理取新鮮鯉魚魚皮或冷凍鯉魚魚皮，鯉魚魚皮的厚度為1-2mm，大小基本一致，原料無腐爛、黴變的現象；將凍結原料首先用自來水流水解凍，解凍後的原料用自來水清洗，除去原料表面的血汙、粘液、鱗片等雜質，洗滌水溫度為4°C;洗後稱重並計算得原料乾重為172.95克；
(2) 除雜蛋白雜蛋白的去除採用Na0H溶液浸泡，Na0H溶液的濃度為0. 5mol/L，浸泡時間20小時，浸泡溫度4"C，在浸泡過程中，不斷攪拌，每隔5小時，更換Na0H溶液l次；
(3) 除脂肪採用有機溶劑四氯化碳4'C浸泡10小時，脫除脂肪；
(4) 去除部分脂肪的原料皮按照l: 30的比例加入醋酸溶液進行溶脹，醋酸溶液的濃度為0. 5mol/L，溶脹溫度為4。C，溶脹時間為24小時，溶脹後的原料皮厚度增加，柔韌性明顯降低；(5) 溶脹後的原料初步凍結，凍結溫度為-2(TC，凍結時間為4小時，凍結的目的是增加原料的脆性，降低原料的韌性，不需要深度凍結，凍結程度可以依據原料的厚度和溶脹的程度決定；凍結後原料加入適量濃度為0. 5mol/L的醋酸溶液，4"C下進行打漿破碎0.5分鐘，打漿後顆粒大小在2mm以內，打漿及環境溫度為4°C;然後向其中加入0. 5mol/L的醋酸溶液進行一次提取48小時，原料與醋酸溶液的重量體積比為1: 20，提取完畢後，以40目紗網過濾，得提取液和濾渣；
(6) 向提取液中加入NaCl至濃度為2.5 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白，稱重73.60g;
(7) 向濾渣中加入醋酸溶液進行二次提取，提取方同一次提取，得提取液，向提取液中加入NaCl至濃度為2.5 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白，稱重36.59g;
採用SDS-PAGE電泳檢測方法對製得大分子膠原蛋白進行檢測，具體過禾呈參考文獻Laemmli,U.K.(1970).Cleavage of structural proteins duringassembly head ofbacteriophageT4.M^/M， 277,680- 685，結果參見圖1，說明它是一種大分子膠原蛋白。
本實施例大分子膠原蛋白的提取率參見下表
原料乾重質量(g)一次提取質量(g)
得率(％)二次提取質量(g)
得率(％)總質量(g)乾重總得率(％)
注原料乾重質量=新鮮原料質量* [卜水分含量％(48.5%)]
權利要求
1、一種大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，其步驟如下(1)選取魚皮、豬皮、牛皮或切片筋腱為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；(2)取清洗後的原料用濃度為0.05-5.0mol/L的NaOH溶液在0℃-30℃條件下浸泡1-30小時，在浸泡過程中，每隔1-5小時，更換浸泡用NaOH溶液1次；浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗滌，原料與有機溶劑的重量體積百分比為0.1-10％，洗滌後再用清水進行清洗；(3)取步驟(2)所得原料，加入濃度為0.05-10mol/L的酸性溶液在0℃-30℃的條件下進行溶脹處理2-72小時，原料和酸性溶液的重量體積比為1∶2-50；然後將溶脹處理後的原料在0℃--40℃條件下凍結1-12小時；凍結完畢後，向原料中加入適量的0.05-10mol/L的酸性溶液進行打漿破碎至粒徑不大於5mm的顆粒料漿，打漿時環境和料漿溫度為0℃-30℃；(4)向顆粒料漿中加入0.05-10mol/L的酸性溶液進行提取，原料與所加入的酸性溶液的重量體積比為1∶5-50，提取溫度0℃-30℃，提取時間為1-2小時；提取完畢後，以40-80目紗網過濾，得提取液和濾渣，向提取液中加入NaCl至濃度為1.5-3.5mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白；所述的酸性溶液為醋酸、檸檬酸或鹽酸溶液；所述的有機溶劑為丙酮、四氯化碳或己烷。
2、 根據權利要求1所述的大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，步驟(4)中取濾渣並向其中加入0.05—10mol/L的酸性溶液，按步驟(4)所 述方法重複操作提取1-2次，得提取液；合併提取液，向其中加入NaCl 至濃度為1.5 — 3.5 mol/L進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原 蛋白。
3、 根據權利要求1或2所述的大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，步 驟(2)中，有機溶劑對原料進行浸泡的時間為2—IO小時。
4、 根據權利要求1或2所述的大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，步 驟(2)中，浸泡所用的NaOH溶液的濃度為0.5-2.0mol/L，在0°C — 20'C條件下浸泡5-20小時；在浸泡過程中，每隔2-3小時更換浸泡用 Na0H溶液1次；洗滌時原料與所加入的有機溶劑的重量體積百分比為 0, 5—5%。
5、 根據權利要求1或2所述的大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，步 驟(3)中，溶脹處理時加入的酸性溶液的濃度為0. 5— 5mol/L，溶脹 處理在0。C —2(TC的條件下進行，溶脹處理時間為10-24小時，原料和 酸性溶液的重量體積比為1: 5—40;打漿破碎時所加入的酸性溶液的濃 度為0. 5—5mol/L，打槳時環境和料漿溫度為(TC 一20。C。
6、 根據權利要求1或2所述的大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，步 驟(4)中，提取時向顆粒料漿中加入的酸性溶液的濃度為0. 5—5 mol/L; 原料與酸性溶液的重量體積比為1: 10—40，提取溫度0°C — 20°C， 提取時間為5-36小時。
全文摘要
一種大分子膠原蛋白提取工藝，其特徵在於，選取魚皮、豬皮、牛皮或切片筋腱為原料，並用清水對原料進行清洗除雜處理；取清洗後的原料用NaOH溶液浸泡，浸泡完畢後，濾過，清洗；清洗後向原料中加入有機溶劑對原料進行浸泡、洗滌，向原料中加入酸性溶液溶脹處理，然後將溶脹處理後的原料凍結；凍結完畢後，向原料中加入酸性溶液進行打漿破碎，最後向顆粒料漿中酸性溶液進行提取，向提取液中加入NaCl進行鹽析沉澱，冷凍乾燥製得大分子膠原蛋白。本發明大分子膠原蛋白提取工藝將各處理、提取步驟有機地結合起來，可以較大程度的提高蛋白的提取效率，減少提取的時間，降低提取過程的能耗，提取得到的膠原蛋白分子量不小於10萬道爾頓。
文檔編號C07K14/435GK101628938SQ20091018448
公開日2010年1月20日 申請日期2009年8月12日 優先權日2009年8月12日
發明者張偉傑, 張俊傑, 蕊 段, 松 秦, 衣悅濤 申請人:江蘇省海洋資源開發研究院;煙臺海岸帶可持續發展研究所