一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法
2023-09-19 05:50:40 3
專利名稱：一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法
技術領域：
本發明是涉及一種膠原蛋白的製備方法，尤其涉及一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法。
背景技術：
傳統的膠原蛋白主要來源於豬、牛等陸生哺乳動物的皮、骨和肌腱中，但是由於狂牛症、口蹄疫等流行病的發生，對此種膠原蛋白的安全產生了質疑；與此同時，宗教問題與素食者對飲食的特殊需求，使得尋求一種新的高品質膠原蛋白來源成為急需解決的問題。因此，從水生動物中提取安全的、可以滿足更多人需求的高品質膠原蛋白成為當今社會的研究熱點。 隨著經濟的發展和繁榮，我國的淡水養殖業得到了迅猛發展，已成為世界淡水養殖大國，淡水水產品產量居世界第一。我國淡水水產業長期發展不均衡，產業結構不合理，重養殖輕加工問題嚴重。淡水魚的利用率僅為30 50%，50 70%成為廢棄物，浪費資源、汙染環境。而廢棄物如魚皮中含有大量大膠原蛋白，膠原蛋白具有美容、豐胸、延緩衰老等生物活性，因此利用淡水魚魚皮可製成的保健品、化妝品及醫藥材料，具有廣闊的發展前
旦
-5^ O目前，提取魚皮中膠原蛋白的方法主要有熱水浸提、酸法、酶法等。但是以上方法多存在提取率低、生物活性低，或者提取工藝複雜、成本高、安全性低等問題。一種高效的提取魚皮膠原蛋白的方法是我們迫切需要的。
發明內容
本發明的目的是提供一種提取率高、純度高、生物活性高的高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法。為達到上述目的，本發明的技術方案包括預處理、脫脂、除雜蛋白、冷凍乾燥、提取、純化等步驟，實現本發明的步驟是
(1)魚皮預處理將魚皮洗淨，備用；
(2)脫脂在魚皮中加入10倍體積的O.2 1%的氫氧化鈉，4 10 °C攪拌3h，清水洗滌至中性；
(3)除雜蛋白在脫脂魚皮加入10倍體積的O.5 lmol/L的氯化鈉，4°C攪拌3h，清水洗滌兩次，蒸餾水洗滌一次至純淨浙幹水分，-20°C備用；
(4)冷凍乾燥將經除雜魚皮原料進行冷凍乾燥後粉碎，41保存備用；
(5)膠原蛋白的提取將步驟(3)所得魚皮加入I:100 I :300的O. 5 I mol/L的醋酸溶液中，4 10°C攪拌浸提48 96 h，離心得上清液；
(6)膠原蛋白的純化將上清液加氯化鈉至質量分數7%的進行鹽析靜置2h，並將析出的膠原蛋白於O. 5 mol/L的醋酸溶液中復溶，再用O. I mol/L的醋酸溶液透析24 h，蒸餾水透析48 h，將透析液冷凍乾燥，得高品質淡水魚魚皮膠原蛋白。
原料可選取白鰱魚、花鰱魚、草魚、鱅魚淡水魚的魚皮。本發明利用冷凍乾燥法，將魚皮進行預處理，使原本韌性極強的魚皮形成內部疏鬆多孔的結構，以利於後續酸溶時，魚皮樣品與酸溶液具有更大、更全面的接觸，以縮短提取時間及提聞提取率。本發明的優點在於
I、本發明採用氫氧化鈉、氯化鈉除雜，成本低、汙染小、安全性高；2、在提取膠原蛋白前，進行冷凍乾燥處理，有效的提高的提取率及效率，節省了時間；3、本發明方法製得的膠原蛋白溶解性好、出度高、色澤好，為高品質膠原蛋白。
具體實施例方式實施例I :一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法，其步驟如下
(1)原料處理將白鰱魚魚皮洗淨，備用；
(2)脫脂在魚皮中加入10倍體積的O.2%的氫氧化鈉，4 °C攪拌2. 5 h，清水洗滌至中
性；
(3)除雜蛋白在脫脂魚皮加入10倍體積的O.7 mol/L的氯化鈉，4 °C攪拌3 h，清水洗滌兩次，蒸餾水洗滌一次至純淨，浙幹水分，-20 °C備用；
(4)冷凍乾燥將經除雜魚皮原料進行冷凍乾燥後粉碎，41保存備用；
(5)膠原蛋白的提取將步驟(3)所得魚皮加入I:200的O. 5 mol/L的醋酸溶液中，4°〇攪拌浸提72 h，離心得上清液。(6)膠原蛋白的純化將上清液加7%的氯化鈉進行鹽析靜置2 h，4 °C離心10min，將析出的膠原蛋白溶於最少量的O. 5 mol/L的醋酸溶液中，然後用大量的O. I mol/L的醋酸溶液透析24 h，再換成蒸餾水透析48 h，整個過程保持在4 °C。最後將透析液冷凍乾燥，得聞品質淡水魚魚皮I父原蛋白。實施例2 : —種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法，其步驟如下
(O原料處理將鱅魚魚皮洗淨，剪碎備用；
(2)脫脂在魚皮中加入20倍體積的O.5%的氫氧化鈉，4 °C攪拌2. 5 h，清水洗滌至中
性；
(3)除雜蛋白在脫脂魚皮加入10倍體積的O.5 mol/L的氯化鈉，4 °C攪拌5 h，清水洗滌兩次，再用蒸餾水洗滌，浙幹水分，-20 °C備用；
(4)冷凍乾燥將經除雜魚皮原料進行冷凍乾燥後粉碎，41保存備用；
(5)膠原蛋白的提取將步驟(3)所得魚皮加入I:300的0. 5 mol/L的醋酸溶液中，4°〇攪拌浸提48 h，離心得上清液。(6)膠原蛋白的純化將上清液加7%的氯化鈉進行鹽析4 °C靜置，4 °C離心15min，將析出的膠原蛋白溶於最少量的0.5 mol/L的醋酸溶液中，然後用大量的0. I mol/L的醋酸溶液透析24 h，再換成蒸餾水透析24 h，整個過程保持在4 °C。最後將透析液冷凍乾燥，得聞品質淡水魚魚皮I父原蛋白。實施例3 : —種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法，其步驟如下
(O原料處理將草魚魚皮洗淨，剪碎備用；
(2)脫脂在魚皮中加入20倍體積的0. 5%的氫氧化鈉，4°C攪拌2. 5 h，清水洗滌至中性；
(3)除雜蛋白在脫脂魚皮加入10倍體積的O.7 mol/L的氯化鈉，4 °C攪拌5 h，清水洗滌兩次，再用蒸餾水洗滌，浙幹水分，-20 °C備用；
(4)冷凍乾燥將經除雜魚皮原料進行冷凍乾燥後粉碎，41保存備用；
(5)膠原蛋白的提取將步驟(3)所得魚皮加入I:100的O. 5 mol/L的醋酸溶液中，4°〇攪拌浸提96 h，離心得上清液；
(6)膠原蛋白的純化將上清液加7%的氯化鈉進行鹽析4°C靜置，4 °C離心15 min,將析出的膠原蛋白溶於最少量的O. 5 mol/L的醋酸溶液中，然後用大量的O. I mol/L的醋 酸溶液透析24 h，再換成蒸餾水透析24 h，整個過程保持在4 °C。最後將透析液冷凍乾燥，得高品質淡水魚魚皮膠原蛋白。
權利要求
1.一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法，其特徵是步驟如下 (1)魚皮預處理將魚皮洗淨，備用； (2)脫脂在魚皮中加入10 20倍體積的O.2 1%的氫氧化鈉，4 10 °C攪拌3 h，清水洗滌至中性； (3)除雜蛋白在脫脂魚皮加入10倍體積的O.5 lmol/L的氯化鈉，4 °C攪拌3 h，清水洗滌兩次，蒸餾水洗滌一次至純淨浙幹水分； (4)冷凍乾燥將經除雜魚皮原料進行冷凍乾燥後粉碎，41保存備用； (5)膠原蛋白的提取將步驟(3)所得魚皮加入I:100 I :300的O. 5 I mol/L的醋酸溶液中，4 10 1攪拌浸提48 96 h，離心得上清液； (6)膠原蛋白的純化將上清液加入氯化鈉至質量分數為7%，進行鹽析，靜置2h，並將析出的膠原蛋白於0.5 mol/L的醋酸溶液中復溶，再用O. I mol/L的醋酸溶液透析24 h，蒸餾水透析48 h，將透析液冷凍乾燥，得高品質淡水魚魚皮膠原蛋白。
2.根據權利要求I所述的一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法，其特徵是原料可選取白鰱魚、花鰱魚、草魚、鱅魚淡水魚的魚皮。
全文摘要
本發明一種高品質淡水魚魚皮膠原蛋白的製備方法，原料經預處理去脫脂、除雜蛋白後，經冷凍乾燥後粉碎等預處理，採用醋酸溶液為提取液及進行浸提，浸提後的溶液進行低溫離心得膠原蛋白粗提液，然後通過鹽析、醋酸溶液復溶，再透析，冷凍乾燥，即得高品質膠原蛋白。本發明方法更為簡單、高效、經濟、合理、安全性高，該方法大大提高了膠原蛋白的得率、純度，也保持了膠原蛋白的生物特性。
文檔編號C07K14/78GK102964444SQ20121044654
公開日2013年3月13日 申請日期2012年11月10日 優先權日2012年11月10日
發明者塗宗財, 張秋婷, 王輝, 黃小琴, 秦曉輝, 樊亮亮 申請人:南昌大學