增溶紫杉醇的組合物及其製備方法

2023-09-18 22:06:50

專利名稱：增溶紫杉醇的組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及用於增溶紫杉醇的紫杉醇組合物及其製備方法。
背景技術：
紫杉醇，一種抗癌劑，對於各種癌症例如卵巢癌、乳腺癌、食道癌、黑素瘤和白血病顯示極好的細胞毒性。目前被用於臨床治療的紫杉醇製劑已經以乳劑預濃縮物(自乳化系統)形式被商業化，因為甚至與勃列斯多·邁耶施貴寶公司(Bristol-Myers Squibb Company)的抗癌藥物相比，它的水溶性也非常低。紫杉醇(泰素)是市場上可買到的注射劑，為溶液形式，其中紫杉醇與增溶劑混合，即在無水乙醇中的聚氧乙烯蓖麻油(聚氧乙烯35蓖麻油、聚氧乙基化的蓖麻油和聚氧乙氧基化的蓖麻油)(美國專利5438072)。然而，已知該藥劑在用法和劑量中有限制，因為紫杉醇中的增溶劑引起毒性副作用。因此，已經進行了許多研究來開發具有高度穩定性和低毒性作用的新的紫杉醇製劑。有許多描述脂質乳劑、聚合微粒和脂質體的專利。在乳劑製劑中，不僅有利用常規油脂和乳化劑的乳劑而且有固體脂質納米顆粒、乳劑濃縮物等已經被授予了專利權。也已經發展了通過利用脂質體、聚合納米顆粒和聚合微粒的其它溶解技術。這些增溶紫杉醇的製劑利用了已經被開發用於其它不溶藥物的累積的科技進步。
雖然紫杉醇目前也被用於治療轉移的卵巢癌和乳腺癌，但是在不遠的將來期望其被處方用於各種癌症，尤其是轉移的實體瘤(例如肺癌和肝癌)。因此，市場預測對於紫杉醇充滿希望。
從製藥的觀點來看，由於低溶解度，最常被開出藥方的紫杉醇製劑Taxol@(泰素)當稀釋在輸液袋中時具有形成沉澱的問題。利用管線內濾器來阻止沉澱進入患者血流。紫杉醇的精確劑量因此是未知的並且時常是變化的。也已知增塑劑會從由PVC製成的輸液袋中洩露出來，這引起潛在的健康問題。從藥理學的觀點來看，賦形劑聚氧乙烯蓖麻油會引起嚴重的副作用例如超敏反應、血管舒張、呼吸困難、衰弱和高血壓，從製藥和藥理學的觀點來看，必須通過開發其它給藥途徑和製劑來提高藥物的穩定性和安全性。
最有希望和方便的給藥途徑被認為是口服途徑。然而有一個大的障礙要克服，因為由於存在於胃腸道上皮細胞中的p-糖蛋白抑制劑的流出機理，紫杉醇不被吸收入機體。直到最近已知許多p-糖蛋白抑制劑，包括金雞納寧，鈣通道阻滯劑例如維拉帕米和二氫吡啶類(例如硝苯地平、尼卡地平和尼群地平)，鈣調素拮抗劑例如三氟拉嗪，抗高血壓藥例如利血平，長春花生物鹼類例如長春新鹼和長春鹼，類固醇類例如黃體酮，抗心律不齊藥例如胺碘酮和奎尼丁，驅蟲藥例如阿的平和奎寧，以及免疫抑制劑例如環孢素A、十字孢鹼和他克莫司。
除了紫杉醇的增強的口服生物利用度外，該p-糖蛋白抑制劑可以通過抑制存在於癌細胞中的p-糖蛋白來幫助克服多藥耐藥。另一方面，已知紫杉醇能被肝微粒體酶代謝。紫杉醇通過CYP2C8和CYP3A4分別轉化成6-a-羥基紫杉醇和3』-p-羥基紫杉醇。
環孢菌素A抑制6-a-羥基紫杉醇的形成。多柔比星、依託泊苷(VP-16)和順鉑抑制3』-p-羥基紫杉醇的形成。並且維拉帕米和他莫昔芬抑制紫杉醇代謝成6-a-羥基紫杉醇和3』-p-羥基紫杉醇。因此，紫杉醇與上述代謝抑制劑的共同給藥也能夠增加紫杉醇的生物利用度。
已經開發了許多製劑來增溶紫杉醇。最廣泛使用且成功的製劑中的一個是泰素@。脂質乳劑(US6391832用於潤滑和傳遞藥物的醫用乳劑；US6348491用於包裹紫杉醇的水包油乳劑)或在水中形成透明膠體系統的預濃縮物(US6267985透明的包含油的藥物組合物；US6294192用於疏水性治療劑的改善的傳遞的無甘油三酯的組合物和方法)也是公知的。在預濃縮物的情況下，透明油組合物形成極小顆粒的分散體，其在400nm的吸收度小於0.3。
上述製劑明顯不同於本發明中的用於增溶紫杉醇的組合物。本發明中的組合物粗分散於水中，並且在所有情況下在400nm的吸光度高於0.38並且在大多數情況下在1至4之間。換句話說，在現有的發明中已經做了努力來製備納米大小的顆粒或其預濃縮物來增溶紫杉醇，然而本發明公開了分散得不好並且如果分散則形成一些微米大小的顆粒的組合物。本發明組合物的優點包括紫杉醇不會在分散體中沉澱出來，同時其在腸內是高度黏膜粘附的。
在商業化口服紫杉醇製劑中一個主要的障礙是在用體液稀釋時形成紫杉醇沉澱的問題。即使製劑在稀釋前是穩定的，沉澱也會在分散體中隨時間形成。在腸中紫杉醇沉澱根本不能被吸收入機體。然而，一旦沉澱形成的問題被解決，另一障礙-胃腸道系統中p-糖蛋白的流出系統就等待著來減少紫杉醇的生物利用度。
在本發明中，黏膜粘附脂質-單油酸甘油酯被用作口服傳遞紫杉醇的主要成分。即使將紫杉醇溶解在單油酸甘油酯中，它也在單油酸甘油酯/水系統的立方體相中形成沉澱。因此，我們製備了含油的組合物，其不隨時間形成紫杉醇沉澱，甚至是在與水混合後。單油酸甘油酯/水系統的立方體相由大約60％(v/v)的水構成。另一方面，當多於10％的油被加入到單油酸甘油酯中時，混合物不形成立方體相，但是形成包含大約5-10％水的無定形組合物。值得指出的是該組合物不形成紫杉醇沉澱。該組合物對於腸壁也是非常有黏膜粘附性的。
迄今為止，還沒有開發出不需要p-糖蛋白抑制劑的口服紫杉醇製劑。當與p-糖蛋白抑制劑共同口服給藥時，口服紫杉醇製劑的生物利用度也非常低。
為克服上述與水接觸形成紫杉醇沉澱以及低口服生物利用度的問題，本發明提供當單獨給藥或與p-糖蛋白抑制劑共同給藥時具有高生物利用度的用於增溶紫杉醇的黏膜粘附組合物及其製備方法。
發明詳述本發明提供長時間穩定、黏膜粘附和有高度生物利用度的增溶紫杉醇的組合物以及其製備方法。
更具體地，本發明提供包括至少一種單酸甘油酯、至少一種油和紫杉醇的用於增溶紫杉醇的組合物及其製備方法。
本發明也提供包括至少一種單酸甘油酯、至少一種油、至少一種乳化劑和紫杉醇的用於增溶紫杉醇的組合物及其製備方法。
本發明將在下面做詳細說明。
本發明提供增溶紫杉醇的組合物。
特別地，上述組合物由4-90％重量的至少一種單酸甘油酯、0.01-90％重量的至少一種油和0.01-20％重量的紫杉醇構成(就該組合物的總重量而論)。
上述組合物可以通過在室溫或升高的溫度混合至少一種單酸甘油酯、至少一種油和紫杉醇來製備。
上述單酸甘油酯選自由一種或多種在烴鏈中具有10-22個碳原子的飽和或不飽和單酸甘油酯組成的組。單酸甘油酯優選選自由單油酸甘油酯、單棕櫚酸甘油酯、單肉豆蔻酸甘油酯、單反油酸甘油酯和單芥酸甘油酯組成的組，和選自從植物或動物油的甘油三酯半合成的單酸甘油酯的混合物組成的組，優選單油酸甘油酯。
上述油優選選自能增溶紫杉醇的由甘油三酯、碘化油和植物油或動物油組成的組。
上述甘油三酯選自由一種或多種在烴鏈中具有2-20個碳原子的飽和或不飽和的甘油三酯組成的組。例如可以使用三醋酸甘油酯、三丁酸甘油酯、三己酸甘油酯、、三辛酸甘油酯、三癸酸甘油酯或三油酸甘油酯。
上述碘化油包括碘化的罌粟籽油例如碘化罌粟油、乙碘油和碘化的大豆油。
上述植物油包括大豆油、棉籽油、橄欖油、罌粟籽油、亞麻子油或芝麻油。
上述動物油包括角鯊烷或角鯊烯。
此外，上述組合物也可以包括高至5％重量的其它添加劑。例如，該組合物可以進一步包含醇、多元醇或克列莫佛(Cremophor)以改善紫杉醇的溶解性，生育酚或生育酚醋酸酯以防止氧化，脂肪酸、脂肪酸酯或脂肪酸醇以增加藥物吸收以及其它不溶藥物以獲得協同作用。
上述不溶藥物包括其它抗癌藥、P-糖蛋白抑制劑或肝代謝阻滯劑。
上述其它抗癌藥包括多柔比星、順鉑、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、達卡巴嗪、依託泊苷、5-氟尿嘧啶或紫杉醇衍生物。上述紫杉醇衍生物包括多西紫杉醇、bromotaxel和泰索帝。
上述p-糖蛋白抑制劑包括金雞納寧、鈣通道阻滯劑、鈣調素拮抗劑、長春花生物鹼、抗節律不齊藥、類固醇、抗高血壓藥、驅蟲藥或免疫抑制劑。上述鈣通道阻滯劑包括二氫吡啶類例如維拉帕米、硝苯地平、尼卡地平或尼群地平。上述鈣調素拮抗劑包括三氟拉嗪。上述抗高血壓藥包括利血平。上述長春花生物鹼類包括長春新鹼或長春鹼。上述類固醇包括黃體酮。上述抗心律不齊藥包括胺碘酮和奎尼丁。上述驅蟲藥包括阿的平和奎寧。上述免疫抑制劑包括環孢黴素、十字孢鹼和他克莫司。
上述肝代謝阻滯劑包括抗癌藥例如環孢黴素A、多柔比星、依託泊苷(VP-16)、順鉑、維拉帕米和他莫昔芬。
按照本發明的用於增溶紫杉醇的組合物可以通過各種途徑給藥包括口服給藥、口腔給藥、黏膜給藥、鼻內給藥、腹膜內給藥、皮下注射、肌內注射、經皮給藥、瘤內給藥，並且更優選口服給藥。
製備上述用於增溶紫杉醇組合物的方法包括步驟1)通過加熱至低於50℃將4-90％重量的至少一種單酸甘油酯化合物溶解在0.01-90％重量的至少一種油中來製備粘稠液體(步驟1)；和2)通過將0.01-20％重量的紫杉醇徹底溶解在步驟(1)中的所述的混合物中來製備均質的混合物(步驟2)在步驟(2)中，該混合物可以被加熱至50℃並在水浴類型的超聲波儀中超聲來加速溶解過程。
製備上述用於增溶紫杉醇的組合物的方法也包括步驟1)混合4-90％重量的至少一種單酸甘油酯化合物、0.01-90％重量的至少一種油和0.01-20％重量的紫杉醇(步驟1)；和2)通過徹底溶解步驟(1)中的所述組合物來製備均質混合物(步驟2)。
在步驟(2)中，上述混合物可以被加熱至50℃並在水浴類型的超聲波儀中超聲或攪拌來加速溶解過程。
上述製備方法只是多種可能方法中的兩種，並且也可以使用其它製備方法來獲得增溶紫杉醇的上述組合物。
本發明也提供包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物。
更特別地，上述組合物由4-90％重量的至少一種單酸甘油酯、0.01-90％重量的至少一種油、0.01-90％重量的至少一種乳化劑和0.01-20％重量的紫杉醇構成(就該組合物的總重量而論)。
上述組合物可以通過在室溫或升高的溫度加入至少一種單酸甘油酯、至少一種油、至少一種乳化劑和紫杉醇來製備。
上述單酸甘油酯選自由一種或多種在烴鏈中具有10-22個碳原子的飽和或不飽和單酸甘油酯組成的組。單酸甘油酯優選選自由單油酸甘油酯、單棕櫚酸甘油酯、單肉豆蔻酸甘油酯、單反油酸甘油酯和單芥酸甘油酯組成的組，或選自從植物或動物油的甘油三酯半合成的單酸甘油酯或它們的混合物組成的組，更優選單油酸甘油酯。
上述油優選選自能增溶紫杉醇的由甘油三酯、碘化油和植物油或動物油組成的組。
上述甘油三酯選自由一種或多種在烴鏈中具有2-20個碳原子的飽和或不飽和的甘油三酯組成的組。例如可以使用三醋酸甘油酯、三丁酸甘油酯、三己酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三癸酸甘油酯或三油酸甘油酯。
上述碘化油包括碘化的罌粟籽油例如碘化罌粟油、乙碘油和碘化的大豆油。
上述植物油包括大豆油、棉籽油、橄欖油、罌粟籽油、亞麻子油或芝麻油。
上述動物油包括角鯊烷或角鯊烯。
上述乳化劑優選選自由磷脂、非離子型表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑和膽汁酸組成的組。
磷脂優選選自由卵磷脂(PC)及其衍生物、磷脂醯乙醇胺(PE)及其衍生物、磷脂醯絲氨酸(PS)及其衍生物和其中親水聚合物與脂質首基共軛的聚合脂質組成的組。
非離子型表面活性劑選自由泊洛沙姆(也稱作普盧蘭尼克聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物)、脫水山梨糖醇酯(司盤)、聚氧乙烯去水山梨糖醇(吐溫)和聚氧乙烯醚(布裡傑)組成的組。
陰離子表面活性劑選自由磷脂醯絲氨酸(PS)及其衍生物、磷脂酸(PA)及其衍生物和十二烷基硫酸酯(SDS)組成的組。
陽離子表面活性劑選自由1，2-二油酸基三甲基銨丙烷(DOTAP)、溴化二甲基雙十八烷基銨(DDAB)、氯化N-[1-(1，2-二油酸氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨(DOTMA)、1，2-二油酸基乙基磷酸膽鹼(DOEPC)和3-β-[N-[(N』，N』-二甲氨基)乙烷]氨基甲醯基]膽固醇(DC-Chol)組成的組。
膽汁酸選自由膽酸、其鹽和衍生物；去氧膽酸、其鹽和衍生物；鵝去氧膽酸、其鹽和衍生物；以及石膽酸、其鹽和衍生物組成的組。
可以被加入上述組合物中的其它添加劑在5％重量內。例如，該組合物可以進一步包含醇、多元醇或克列莫佛(Cremophor)以改善紫杉醇的溶解性，生育酚或生育酚醋酸酯以防止氧化，脂肪酸、脂肪酸酯或脂肪酸醇以增加藥物吸收。取決於症狀，其它不溶藥物也可以被加入按照本發明的包含乳化劑的該組合物。
上述不溶藥物包括其它抗癌藥、P-糖蛋白抑制劑或肝代謝阻滯劑。
上述其它抗癌藥包括多柔比星、順鉑、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、達卡巴嗪、依託泊苷、5-氟尿嘧啶或紫杉醇衍生物。上述紫杉醇衍生物包括多西紫杉醇、bromotaxel和泰索帝。
上述p-糖蛋白抑制劑包括金雞納寧、鈣通道阻滯劑、鈣調素拮抗劑、長春花生物鹼、抗節律不齊藥、類固醇、抗高血壓藥、驅蟲藥或免疫抑制劑。上述鈣通道阻滯劑包括二氫吡啶類例如維拉帕米、硝苯地平、尼卡地平或尼群地平。上述鈣調素拮抗劑包括三氟拉嗪。上述抗高血壓藥包括利血平。上述長春花生物鹼類包括長春新鹼或長春鹼。上述類固醇包括黃體酮。上述抗心律不齊藥包括胺碘酮和奎尼丁。上述驅蟲藥包括阿的平和奎寧。上述免疫抑制劑包括環孢黴素、十字孢鹼和他克莫司。
上述肝代謝阻滯劑包括抗癌藥例如環孢黴素A、多柔比星、依託泊苷(VP-16)、順鉑、維拉帕米和他莫昔芬。
按照本發明的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物可以通過各種途徑給藥包括口服給藥、口腔給藥、黏膜給藥、鼻內給藥、腹膜內給藥、皮下注射、肌內注射、經皮給藥、瘤內給藥，並且更優選口服給藥。
製備上述包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物的方法包括步驟1)通過加熱至低於50℃混合4-90％重量的至少一種單酸甘油酯化合物、0.01-90％重量的至少一種油和0.01-90％重量的至少一種乳化劑來製備粘稠液體(步驟1)；和2)將0.01-20％重量的紫杉醇徹底溶解在步驟(1)中的所述的混合物中來製備均質的混合物(步驟2)。
製備包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物的一個實施例如下。在通過加熱至低於50℃混合單酸甘油酯、油和乳化劑獲得的均質粘稠液體中加入紫杉醇。在50℃或低於50℃攪拌或超聲該混合物3-5分鐘以獲得均質組合物。
製備上述包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物的方法也包括步驟1)通過在水浴類型的超聲波儀中超聲將0.01-20％重量的紫杉醇溶解在0.01-90％重量的至少一種油中來製備紫杉醇溶液(步驟1)；和2)通過將步驟(1)中的紫杉醇溶液和0.01-90％重量的至少一種乳化劑和4-90％重量的單酸甘油酯混合來製備均質混合物(步驟2)。
上述製備方法只是多種可能方法中的兩種，並且其它製備方法也可以被用於獲得包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的上述組合物。
本發明的呈粘稠液體、凝膠或半固體形式的製劑是長時間穩定的，因為該組合物的物理性質不改變並且包含紫杉醇的組分不隨時間降解。本發明的用於增溶紫杉醇的組合物也是有效的溶解系統，因為它們能被容易地分散在水中或含水溶液中來形成直徑大於400nm的顆粒，並且分散體不隨時間形成凝聚物。在400nm波長的分散範圍1和4的吸收度也指出該平均顆粒尺寸是相對大的。
換句話說，本發明的組合物不形成具有納米大小顆粒的細微分散體，但是形成具有尺寸為幾百納米至幾微米的顆粒的粗分散體。本發明組合物的分散體不隨時間形成紫杉醇凝聚物。當給藥入機體時，該組合物是高度黏膜粘附的並且粘附在腸壁的廣泛區域上。該組合物中的紫杉醇通過腸中的黏膜吸收，因為黏膜粘附的單油酸甘油酯可以被吸收而無需另外的代謝過程。
附圖簡述

圖1是一幅顯示在口服給藥本發明實施例1和2中的增溶紫杉醇的液體製劑後血液中紫杉醇及其代謝產物的總濃度的圖。用ELISA來進行紫杉醇及其代謝產物的總濃度的定量分析。勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@經由靜脈內途徑給藥，作為對照組。
-●-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶紫杉醇＝66∶33∶1，實施例1中的組合物)，和-○-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的液體製劑組(2mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶紫杉醇＝65∶33∶2，實施例2中的組合物)-▲-；靜脈內給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@組(10@Lg紫杉醇)圖2是一幅顯示在口服給藥包含乳化劑和不同比率的紫杉醇的液體製劑後血液中紫杉醇及其代謝產物的總濃度的圖。用ELISA來進行紫杉醇及其代謝產物的總濃度的定量分析。口服給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@，作為對照組。
-●-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶吐溫80∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1，實施例3中的組合物)，和-○-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶吐溫80∶紫杉醇＝54∶27∶16∶2，實施例9中的組合物)，-▲-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶吐溫80∶紫杉醇＝55∶27∶16∶37，實施例10中的組合物)，-□-；口服給藥勃列斯多邁耶施貴寶公司的泰素@組(1mg紫杉醇)。
圖3是一幅顯示在口服給藥本發明實施例11中的包含乳化劑的液體製劑後血液中紫杉醇及其代謝產物的總濃度的圖。用ELISA來進行紫杉醇及其代謝產物的總濃度的定量分析。勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@是靜脈內給藥，作為對照組。
-●-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶普盧蘭尼克F68∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1，實施例11中的組合物)，和-○-；靜脈內給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@組(10pg紫杉醇)。
圖4是一幅顯示在口服給藥有或沒有1mg維拉帕米的本發明實施例4中的包含乳化劑的液體製劑後血液中紫杉醇及其代謝產物的總濃度的圖。用ELISA來進行紫杉醇及其代謝產物的總濃度的定量分析。
-●-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶普盧蘭尼克F68∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1，實施例4中的組合物)，和-○-；口服給藥維拉帕米和本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶普盧蘭尼克F68∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1，實施例4中的組合物+1mg維拉帕米)。
圖5是一幅顯示在口服給藥包含乳化劑的含油組合物後血液中紫杉醇的濃度的圖(該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶吐溫80∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1)。用HPLC來進行紫杉醇的總濃度的定量分析。靜脈內給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@，作為對照組。
-●-；口服給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇)，和-○-；靜脈內給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@組(401_tg紫杉醇)。
圖6是一幅顯示在腹膜內或肌內給藥實施例3的組合物中包含乳化劑的液體製劑後血液中紫杉醇及其代謝產物的總濃度的圖。用ELISA來進行紫杉醇及其代謝產物的總濃度的定量分析。
-●-；腹膜內給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶吐溫80∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1，實施例3中的組合物)，和-○-；肌內給藥本發明的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的液體製劑組(1mg紫杉醇，該組合物的重量比率是單油酸甘油酯∶三辛酸甘油酯∶吐溫80∶紫杉醇＝55∶28∶16∶1，實施例3中的組合物)。
基於下述實施例詳細地解釋本發明，但是它們不應被解釋為限制本在本發明中使用的緩衝液如下板孔覆蓋緩衝液50mM磷酸鈉，0.15M NaCl和0.02％疊氮化鈉，pH7.0(PBS)，板孔封閉緩衝液包含1％(w/v)的牛血清白蛋白(BSA)的PBS，樣本稀釋緩衝液包含0.25％(w/v)BSA，0.05％(v/v)吐溫-20，20％(v/v)甲醇和0.02％疊氮化鈉的PBS(PBSTM)，抗體稀釋緩衝液包含0.25％(w/v)BSA，0.05％(v/v)吐溫-20和0.02％疊氮化鈉的PBS(PBST)，洗滌緩衝液50mM Tris HCI，pH7.01，0.15M NaCl，包含0.05％(v/v)吐溫20和0.02％疊氮化鈉(TBST)，酶底物緩衝液25mM Tris，pH9.51，0.15M NaCl，包含5mM MgCl2和0.02％(w/v)疊氮化鈉。
實施例1.按照組合物比率變化的用於增溶紫杉醇的組合物(1)(1)製備用於增溶紫杉醇的組合物通過混合1g單油酸甘油酯和0.5g三辛酸甘油酯來製備粘稠的含油溶液，並在40℃加溫。將15毫克紫杉醇加入含油溶液中並為了完全溶解在水浴類型的超聲波儀中超聲來獲得液體製劑。
(2)對這樣製備的用於增溶紫杉醇組合物的特性分析在通過向2I-tL這樣獲得的液體製劑中加入3mL蒸餾水來稀釋乳劑後，通過應用Malvern Zetasizer(Malvern Instruments Limited，英國)來測量乳劑顆粒的大小。通過測量給定的製劑三次來獲得平均顆粒大小和多分散性(Orr，Encyclopedia of emulsion technology，1，369-404，1985)。作為由在對數正態分布函數中對數尺度制定的方差獲得該多分散性。在下述實施例中使用此方法測量顆粒尺寸和多分散性。
上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，並且也沒有觀察到相分離。當上述組合物在水中渦旋10秒時，獲得具有平均顆粒尺寸為1230nm的不穩定的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱。
實施例2.按照組合物比率變化的用於增溶紫杉醇的組合物(2)通過混合1g單油酸甘油酯和0.5g三辛酸甘油酯來製備粘稠的含油溶液，並在40℃加溫。將30毫克紫杉醇加入含油溶液中並為了完全溶解在水浴類型的超聲波儀中超聲。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，並且也沒有觀察到相分離。當上述組合物在水中渦旋10秒時，獲得具有平均顆粒尺寸為2080nm的不穩定的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱。
實施例1和2的結果匯總在下面表1中。
表1.

實施例3.按照組合物比率變化的含乳化劑的增溶紫杉醇的組合物(1)通過徹底混合1g單油酸甘油酯、0.5g三辛酸甘油酯和0.3g吐溫80來製備粘稠的含油溶液，並在40℃加溫。將18毫克紫杉醇加入含油溶液中並為了完全溶解在水浴類型的超聲波儀中超聲。當上述組合物在水中渦旋10秒時，獲得具有平均顆粒尺寸為600nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例4.按照組合物比率變化的含乳化劑的增溶紫杉醇的組合物(2)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、1g三辛酸甘油酯、0.4g吐溫80和10mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為530nm的分散體。在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例3和4的結果匯總在下面表2中。
表2.

比較實施例1.不含油的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的組合物(1)如實施例1製備該組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.2g吐溫和12mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為700nm的分散體。在偏振光顯微鏡下觀察到了紫杉醇沉澱，並且在製備後1小時該分散體變得不穩定。
比較實施例2.不含油的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的組合物(2)如實施例1製備該組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.24g普蘭羅尼克F-68和12.4mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為640nm的分散體。在偏振光顯微鏡下觀察到了紫杉醇沉澱，並且在製備後1小時該分散體變得不穩定。
比較實施例3.不含單油酸甘油酯的用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的組合物(1)如實施例1製備該組合物和分散的液體，除了使用1g三辛酸甘油酯、0.2g吐溫和12mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為560nm的分散體。在偏振光顯微鏡下沒有觀察到了紫杉醇沉澱，並且也沒有觀察到相分離。
實施例5.按照油變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物(1)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.5g三丁酸甘油酯、0.3g吐溫80和18mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為950nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例6.按照油變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物(2)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.5g碘化油(碘化油，Laboratoire Guerbet，法國，碘含量38％重量)、0.3g吐溫80和18mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為680nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例7.按照油變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物(3)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.5g角鯊烷(Sigma Chemical Company)、0.3g吐溫80和18mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為598nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例8.按照油變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物(4)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.5g紅花籽油(Sigma Chemical Company)、0.3g吐溫80和18mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為1040nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例5-8的結果匯總在下面表3中。
表3

實施例9.按照紫杉醇含量變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物(1)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.5g三辛酸甘油酯、0.3g吐溫80和38mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為1450nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例10.按照紫杉醇含量變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物(2)如實施例1製備組合物和分散的液體，除了使用1g單油酸甘油酯、0.5g三辛酸甘油酯、0.3g吐溫80和54mg紫杉醇，並通過與實施例1相同的方法來測量它們的顆粒尺寸和多分散性。獲得了平均顆粒尺寸為1630nm的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。與其它在實施例1-7中的組合物不同，上述組合物在室溫和在冰箱中分別以液體或固體存在。
實施例9和10的結果匯總在下面表4中。
表4

實施例11.按照乳化劑變化的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物如實施例3製備組合物和分散的液體，除了使用普羅蘭尼克F68(BASF公司)替代吐溫80。獲得了平均顆粒尺寸為420nm(多分散性0.284)的分散體。在製備該分散體24小時後，在偏振光顯微鏡下沒有觀察到紫杉醇沉澱，也沒有觀察到相分離。上述組合物在室溫和在冰箱中分別以半固體或固體存在，但是在40℃或高於40℃時以液體存在。
實施例12.體內口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物(1)通過應用在上面實施例1中製備的用於增溶紫杉醇的組合物來進行動物實驗。
①口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物將100微升包含1mg紫杉醇的黏膜粘附製劑給予先前通過應用胃探子禁食4小時的Balb/C小鼠(6-7星期大，雌性)。做為對照組，被口服給藥分散在0.5ml水中的167@LI勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@(對應於1mg紫杉醇)。100毫升在比較實施例3中製備的不含單油酸甘油酯的三辛酸甘油酯/吐溫80組合物(包含1mg紫杉醇)被用作另一對照並口服給藥，在口服給藥該組合物1、2、3和4小時後，測定從眼睛收集的血液中紫杉醇的濃度。
作為口服給藥的對照，勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@被靜脈內給予Balb/C小鼠(6-7星期大，雌性)，並且在靜脈內注射4小時後測定血液中紫杉醇的濃度。在將0.1ml泰素@分散在5.9ml水中後，將0.1ml分散體(相應於10紫杉醇)通過快速濃注給藥入禁食4小時的Balb/C小鼠的尾靜脈。在給藥該組合物0.5、1、2和4小時後收集血液，並且測定從眼睛收集的血液中紫杉醇的濃度。
②測定血液中紫杉醇及其代謝產物的總濃度(ELISA方法)
通過應用Hawaii Biotech Company的抗-紫杉烷單克隆試劑盒(型號編號8A10)來測定紫杉醇及其代謝產物在血中的總濃度。已知紫杉醇通過CYP2C8和CYP3A4會分別轉化為6-α-羥基紫杉醇和3』-p-羥基紫杉醇。包括紫杉醇的初級代謝產物的各種代謝產物存在於血液中。抗-紫杉烷單克隆試劑盒使得我們能夠測定紫杉醇和所有包含紫杉烷環的代謝產物的濃度(Grothaus，G.P.，Bignami，G，S.，O′Malley，S.，Harada，K.E.，Byrnes，J.B.，Waller，D.F.，Raybould，T.J.G.，Mcguire，M.T.and Alvaro，B.，Taxane-specific monoclonalantibodiesmeasurement of Taxol，baccatin 111，and『totaltaxanes』In Taxus brevifolia extracts by enzyme Immunoassay.J.Nat.Prod.58，pp.1003-10147 1995)。
將血液樣本連續地稀釋4次。用磷酸鹽緩衝生理鹽水(PBS)稀釋紫杉醇-蛋白覆蓋抗原(藍色標記)100倍。將1000稀釋的抗原溶液放入96孔板的每個孔中，將該板溫育1小時。在將該板用TBST洗滌4小時後，通過加入包含1％牛血清蛋白的PBS將其封閉1小時。在將每個孔用TBST連續洗滌4次後，將50ptl連續稀釋的樣本放在每個孔中。在用PBST連續稀釋HBC紫杉醇標準品(紅色標記)後，將50稀釋的標準溶液放在每個孔中。將50微升通過混合4.5mlPBST和50抗-紫杉烷兔抗體(綠色標記)製備的抗體溶液加入每個孔中。在用TBST洗滌孔四次後，加入100@tl用PBST稀釋1000次的第二抗體溶液並溫育一小時。在用TBST洗滌孔四次後，在每個孔中加入200 1mg/ml的pNPP溶液。在室溫溫育該板1小時後，通過酶標儀在414nm測量吸光度並與在690nm的吸光度比較用於定量分析。
③口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物的結果血液中紫杉醇濃度隨時間的變化顯示在圖1中。當快速濃注時紫杉醇的生物利用度被設置在100％時，通過下式計算口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物時的相對生物利用度。

其中，AUC口服和AUC靜脈內分別代表口服和靜脈內給藥後的曲線下面積，並且劑量靜脈內和劑量口服分別代表口服和靜脈內給藥的紫杉醇劑量。當與快速濃注比較時，口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物時的生物利用度是19.5％。
實施例13.體內口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物(2)如實施例12，將50微升包含1mg紫杉醇的在實施例2中製備的包含乳劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。最為口服給藥的對照，勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@被靜脈內給藥(相應於10@tg的紫杉醇/小鼠)。用ELISA測定血液中紫杉醇及其代謝產物隨時間的總濃度。圖1顯示與實施例12比較的結果。當與快速濃注比較時，當口服給藥用於增溶紫杉醇的組合物時的生物利用度是9.5±5％。
實施例14.體內口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物-紫杉醇含量的影響如實施例12，通過應用相同的方法，將包含1mg紫杉醇在實施例3、9和10中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。作為對照組，如實施例11口服(相應於1mg紫杉醇)和靜脈內(相應於10l_tg/小鼠)給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@。如圖2所示，用ELISA測定血液中紫杉醇及其代謝產物隨時間的總濃度。通過設定在實施例12中快速濃注時泰素@的生物利用度為100％計算的生物利用度列在表5中。當與快速濃注比較時，口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物的生物利用度大約為10-30％。另一方面，口服給藥泰素@的生物利用度是1.7±3％。
表5

實施例15.體內口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物-乳化劑的影響如實施例12，通過應用相同的方法，將包含1mg紫杉醇在實施例11中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。做為對照組，靜脈內給藥勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@(相應10@tg/小鼠)。如圖3所示，用ELISA測定血液中紫杉醇及其代謝產物隨時間的總濃度。當與快速濃注比較時，口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物的生物利用度大約為13.4±4％。
實施例16.體內口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物-維拉帕米的共同給藥如實施例12，通過應用相同的方法，將包含1mg紫杉醇在實施例4中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。給予另一組小鼠包含1mg紫杉醇在實施例4中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物和1mg維拉帕米。如圖4所示，用ELISA測定血液中紫杉醇及其代謝產物隨時間的總濃度。當與實施例12中泰素@的快速濃注比較時，口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物時的生物利用度大約為2.7％。然而，當共同給藥維拉帕米時，口服生物利用度增加至17.6％。
實施例17.體內口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物-用HPLC測定紫杉醇濃度如實施例12，通過應用相同的方法，將包含1mg紫杉醇在實施例3中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。用HPLC測定紫杉醇濃度。當使用上述ELISA方法時，測定紫杉醇及其代謝產物的總濃度。然而，HPLC分析僅檢測樣本中的完整的紫杉醇分子。
①測定血液中紫杉醇濃度(HPLC方法)通過在3000rpm離心收集的血液10分鐘獲得血漿，並儲存在-20℃直到被分析。向200血漿中加入以100@tg/ml溶解在乙腈中的10丁基-p-羥基苯甲酸溶液作為內標準，通過加入1ml叔-丁基甲基醚提取該樣本並渦旋30秒。為分離有機層，在3000rpm離心上述溶液5分鐘，取出0.8ml有機層並在氮氣流下乾燥。將殘留物溶解在80 60％的乙腈中。將三十微升上述樣本注射入HPLC以分析紫杉醇的濃度。HPLC系統包括Shisheido Nanospace半微量柱、SI-1/2001泵、SI-1/2002 UVNIS檢測器、SI-112004柱烘箱、SI-112003自動採樣器、SI-1/2009脫氣單元、SI-1/2011、2012旋轉高壓六通閥和Shisheido-MicroChrom軟體。CAPCELPAK MF Ph-2 cartridge(4.6×20mm)被用作預處理柱，並且應用CAPCELL PAK C18 UG120(2.0×250mm)濃縮柱完成分離化合物。流動相是50％磷酸鹽緩衝溶液(0.1％，pH＝6.86)(泵A)和50％乙腈(泵B)，並將柱溫維持在30℃。通過柱轉換方法分析血液中紫杉醇濃度。在預處理柱和分析柱的情況下，流動相-0.1％磷酸鹽緩衝溶液/乙腈溶液(以重量計84∶16)的流動速率分別為0.5ml/min和0.1ml/min。切換閥被設在A位置以除去預處理柱洗脫液，並且使分析柱的洗脫液通過UV檢測器。因為通過預處理柱後，分別在4.1-7.2分鐘和6.4-9.3分鐘檢測內標準和紫杉醇，將切換閥在4.0分鐘設置在B位置以使預處理柱的洗脫液通過濃縮柱。在10分鐘，將切換閥再次設在A位置，以使來自濃縮柱的流體轉至分析柱。在227nm收集色譜圖並通過應用Syscon軟體(Shisheido)來分析。
②口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物如實施例12，通過應用相同的方法，將包含1mg紫杉醇在實施例3中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。做為口服給藥的對照，靜脈內給藥小鼠(6-7星期大，雌性)勃列斯多·邁耶施貴寶公司的泰素@並且測定血液中的紫杉醇濃度4小時。在將0.4ml泰素@分散在5.6ml水中後，將0.1ml分散體(相應於40@tg紫杉醇)通過快速濃注給藥入禁食4小時的Balb/C小鼠的尾靜脈。在給藥該組合物直至4小時後從眼睛收集血液，測定收集的血液中紫杉醇的濃度。通過HPLC測定的紫杉醇濃度顯示在圖5中。當與快速濃注比較時，口服給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物時的生物利用度是大約30.3％。
實施例18.體內腹膜內給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物通過腹膜內給藥，將50微升包含1mg紫杉醇在實施例3中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。如圖6所示，用ELISA測定紫杉醇及其代謝產物隨時間的總濃度。
實施例19.體內肌內給藥包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物通過肌內給藥，將50微升包含1mg紫杉醇在實施例3中製備的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物給予Balb/C小鼠。如圖6所示，用ELISA測定紫杉醇及其代謝產物隨時間的總濃度。
如上所述，本發明的用於增溶紫杉醇的組合物可以穩定地增溶紫杉醇，並且當分散在水中時也不會形成紫杉醇沉澱物。在含水環境中，該組合物也形成顆粒為30nm-5@tm的不穩定的分散體。當按照本發明的該增溶紫杉醇的組合物經由口服、腹膜內和肌內給藥時，血液中的紫杉醇濃度可以維持超過4個小時。
權利要求
1.用於增溶紫杉醇的組合物，包含4-90重量％的至少一種單酸甘油酯化合物、0.01-90重量％的至少一種油和0.01-20重量％的紫杉醇。
2.根據權利要求1的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述單酸甘油酯選自由在烴鏈中具有10-22個碳原子的飽和或不飽和單酸甘油酯組成的組。
3.根據權利要求2的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述單酸甘油酯化合物選自由單油酸甘油酯、單棕櫚油酸甘油酯、單肉豆蔻油酸甘油酯、單反油酸甘油酯和單芥酸甘油酯組成的組，或選自由從植物或動物油的甘油三酯半合成的單酸甘油酯的混合物組成的組。
4.根據權利要求1的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述油選自由甘油三酯、碘化油、植物油和動物油組成的組。
5.根據權利要求4的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述甘油三酯選自由在每個烴鏈中具有2-20個碳原子的飽和或不飽和的甘油三酯組成的組。
6.根據權利要求5的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述甘油三酯選自由三醋酸甘油酯、三丁酸甘油酯、三己酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三癸酸甘油酯和三油酸甘油酯組成的組。
7.根據權利要求4的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述碘化油選自由碘化罌粟油、碘化的罌粟籽油、乙碘油和碘化的大豆油組成的組。
8.根據權利要求4的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述植物油選自由大豆油、棉籽油、橄欖油、罌粟籽油、亞麻子油和芝麻油組成的組。
9.根據權利要求4的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述動物油選自由角鯊烷和角鯊烯組成的組。
10.根據權利要求1的用於增溶紫杉醇的組合物，另外包含0.01-5重量％的其它添加劑。
11.根據權利要求10的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述其它添加劑選自由克列莫佛、生育酚、生育酚醋酸酯、脂肪酸、脂肪酸酯、脂肪酸醇、不溶藥物、醇類和多元醇類組成的組。
12.根據權利要求11的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述不溶藥物選自由抗癌藥、P-糖蛋白抑制劑和肝代謝阻滯劑組成的組。
13.根據權利要求12的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述抗癌藥選自由多柔比星、順鉑、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、達卡巴嗪、依託泊苷、5-氟尿嘧啶和紫杉醇衍生物組成的組。
14.根據權利要求12的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述紫杉醇衍生物選自由多西紫杉醇、bromotaxel和泰索帝組成的組。
15.根據權利要求12的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述p-糖蛋白抑制劑選自由金雞納寧、鈣通道阻滯劑、鈣調素拮抗劑、抗高血壓藥、長春花生物鹼類、類固醇類、抗心律不齊藥、驅蟲藥或免疫抑制劑組成的組。
16.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述鈣通道阻滯劑選自由維拉帕米和二氫吡啶類例如硝苯地平、尼卡地平和尼群地平組成的組。
17.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述鈣調素拮抗劑選自由三氟拉嗪組成的組。
18.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述抗高血壓藥選自由利血平組成的組。
19.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述長春花生物鹼類選自由長春新鹼和長春花鹼組成的組。
20.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述類固醇類選自由黃體酮組成的組。
21.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述抗心律不齊藥選自由胺碘酮和奎尼丁組成的組。
22.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述驅蟲藥選自由阿的平和奎寧組成的組。
23.根據權利要求15的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述免疫抑制劑選自由環孢黴素A、十字孢鹼和他克莫司組成的組。
24.根據權利要求12的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述肝代謝阻滯劑選自由環孢黴素A、抗癌藥例如多柔比星、依託泊苷(VP-16)和順鉑、維拉帕米和他莫昔芬組成的組。
25.根據權利要求11的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述醇類選自由甲醇、乙醇、丙醇和異丙醇組成的組。
26.根據權利要求11的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述多元醇類選自由乙二醇、丙二醇和聚乙二醇組成的組。
27.根據權利要求11-26中任一項的用於增溶紫杉醇的組合物，其中給藥途徑選自口服給藥、口腔給藥、黏膜給藥、鼻內給藥、腹膜內給藥、皮下注射、肌內注射。
28.製備根據權利要求1-26中任一項的用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中所述方法包括步驟1)將4-90重量％的至少一種單酸甘油酯化合物溶解在0.01-90重量％的至少一種油中；和2)通過攪拌將0.01-20重量％的紫杉醇徹底溶解在步驟(1)中的所述混合物中。
29.根據權利要求28的製備方法，其中在步驟(1)中將所述混合物加熱至50℃以加速溶解過程。
30.根據權利要求28的製備方法，其中在步驟(2)中將所述混合物加熱至50℃並在水浴類型的超聲波儀中超聲以加速溶解過程。
31.製備根據權利要求1-26中任一項的用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中所述方法包括步驟混合4-90重量％的至少一種單酸甘油酯化合物、0.01-90重量％的至少一種油和0.01-20重量％的紫杉醇並徹底溶解。
32.根據權利要求31的製備方法，其中將所述混合物加熱至50℃並在水浴類型的超聲波儀中超聲以加速溶解過程。
33.包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其包含4-90重量％的至少一種單酸甘油酯化合物、0.01-90重量％的至少一種油、0.01-90重量％的至少一種乳化劑和0.01-20重量％的紫杉醇。
34.根據權利要求33的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述單酸甘油酯選自由在烴鏈中具有10-22個碳原子的飽和或不飽和單酸甘油酯組成的組。
35.根據權利要求34的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述單酸甘油酯化合物選自由單油酸甘油酯、單棕櫚油酸甘油酯、單肉豆蔻油酸甘油酯、單反油酸甘油酯和單芥酸甘油酯組成的組，或選自由從植物或動物油的甘油三酯半合成的單酸甘油酯的混合物組成的組。
36.根據權利要求33的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述油選自由甘油三酯、碘化油、植物油和動物油組成的組。
37.根據權利要求36的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述甘油三酯選自由在每個烴鏈中具有2-20個碳原子的飽和或不飽和的甘油三酯組成的組。
38.根據權利要求37的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述甘油三酯選自由三醋酸甘油酯、三丁酸甘油酯、三己酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三癸酸甘油酯和三油酸甘油酯組成的組。
39.根據權利要求37的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述碘化油選自由碘化罌粟油、碘化的罌粟籽油、乙碘油和碘化的大豆油組成的組。
40.根據權利要求37的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述植物油選自由大豆油、棉籽油、橄欖油、罌粟籽油、亞麻子油和芝麻油組成的組。
41.根據權利要求37的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述動物油選自由角鯊烷和角鯊烯組成的組。
42.根據權利要求33的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述乳化劑選自由磷脂、非離子型表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑和膽汁酸組成的組。
43.根據權利要求42的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述磷脂選自由卵磷脂(PC)及其衍生物、磷脂醯乙醇胺(PE)及其衍生物、磷脂醯絲氨酸(PS)及其衍生物和其中親水聚合物與脂質首基共軛的聚合脂質組成的組。
44.根據權利要求42的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述非離子型表面活性劑選自由泊洛沙姆(普盧蘭尼克聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物)、脫水山梨糖醇酯(脫水山梨糖醇酯司盤)、聚氧乙烯去水山梨糖醇(吐溫)和聚氧乙烯醚(布裡傑)組成的組。
45.根據權利要求42的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述陰離子表面活性劑選自由磷脂醯絲氨酸(PS)及其衍生物、磷脂酸(PA)及其衍生物和十二烷基硫酸酯(SDS)組成的組。
46.根據權利要求42的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述陽離子表面活性劑選自由1，2-二油酸基三甲基銨丙烷(DOTAP)、溴化二甲基雙十八烷基銨(DIDAB)、氯化N-[1-(1，2-二油酸氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨(DOTMA)、1，2-二油酸基乙基磷酸膽鹼(DOEPC)和3P-[N-[(N』，N』-二甲氨基)乙烷]氨基甲醯基]膽固醇(DC-hol)組成的組。
47.根據權利要求42的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述膽汁酸選自由膽酸、其鹽和衍生物；去氧膽酸、其鹽和衍生物；鵝去氧膽酸、其鹽和衍生物；以及石膽酸、其鹽和衍生物組成的組。
48.根據權利要求33的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，另外包含0.01-5重量％的其它添加劑。
49.根據權利要求48的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述其它添加劑選自由克列莫佛、生育酚、生育酚醋酸酯、脂肪酸、脂肪酸酯、脂肪酸醇、不溶藥物、醇類和多元醇類組成的組。
50.根據權利要求49的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述不溶藥物選自由抗癌藥、P-糖蛋白抑制劑和肝代謝阻滯劑組成的組。
51.根據權利要求50的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述抗癌藥選自由多柔比星、順鉑、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、達卡巴嗪、依託泊苷、5-氟尿嘧啶和紫杉醇衍生物組成的組。
52.根據權利要求50的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述紫杉醇衍生物選自由多西紫杉醇、bromotaxel和泰索帝組成的組。
53.根據權利要求50的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述p-糖蛋白抑制劑選自由金雞納寧、鈣通道阻滯劑、鈣調素拮抗劑、長春花生物鹼類、抗心律不齊藥、類固醇類、抗高血壓藥、驅蟲藥和免疫抑制劑組成的組。
54.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述鈣通道阻滯劑是選自由維拉帕米、硝苯地平、尼卡地平和尼群地平組成的組的二氫吡啶類。
55.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述鈣調素拮抗劑是三氟拉嗪。
56.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述抗高血壓藥是利血平。
57.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述長春花生物鹼類選自由長春新鹼和長春花鹼組成的組。
58.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述類固醇類是黃體酮。
59.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述抗心律不齊藥選自由胺碘酮和奎尼丁組成的組。
60. 根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述驅蟲藥選自由阿的平和奎寧組成的組。
61.根據權利要求53的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述免疫抑制劑選自由環孢黴素類、十字孢鹼和他克莫司組成的組。
62.根據權利要求50的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述肝代謝阻滯劑選自由抗癌藥例如環孢黴素A、多柔比星、依託泊苷(VP-16)和順鉑、維拉帕米和他莫昔芬組成的組。
63.根據權利要求49的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述醇類選自由甲醇、乙醇、丙醇和異丙醇組成的組。
64.根據權利要求49的包含乳化劑的用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述多元醇類選自由乙二醇、丙二醇和聚乙二醇組成的組。
65.根據權利要求33-64中任一項的包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物，其中給藥途徑選自口服給藥、口腔給藥、黏膜給藥、鼻內給藥、腹膜內給藥、皮下注射、肌內注射、透皮給藥和瘤內注射。
66.製備根據權利要求33-64中任一項的包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中所述方法包括步驟1)通過加熱至低於50℃混合4-90重量％的至少一種單酸甘油酯化合物、0.01-90重量％的至少一種油和0.01-90重量％的至少一種乳化劑來製備粘稠液體(步驟1)；和2)通過將0.01-20重量％的紫杉醇徹底溶解在步驟(1)中的所述的混合物中來製備均質的混合物(步驟2)。
67.根據權利要求66的製備包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中在步驟(1)中將所述混合物加熱至50℃以加速溶解過程。
68.根據權利要求66的製備包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中在步驟(2)中將所述混合物加熱至50℃以加速溶解過程。
69.根據權利要求66的製備包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中在步驟(2)中將所述混合物在水浴類型的超聲波儀中超聲以加速溶解過程。
70.製備根據權利要求33-64中任一項的包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中所述方法包括步驟1)通過在水浴類型的超聲波儀中超聲將0.01-20重量％的紫杉醇溶解在0.01-90重量％的至少一種油中來製備紫杉醇溶液(步驟1)；和2)通過將步驟(1)中的紫杉醇溶液和0.01-90重量％的至少一種乳化劑和4-90重量％的單酸甘油酯混合來製備均質混合物(步驟2)。
71.根據權利要求70的製備包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物的方法，其中在步驟(2)中將所述混合物加熱至50℃並在水浴類型的超聲波儀中超聲以加速溶解過程。
72.根據權利要求1-26和權利要求33-64中任一項包含乳化劑用於增溶紫杉醇的組合物，其中所述組合物在室溫在液體或半固體狀態。
全文摘要
本發明涉及用於增溶紫杉醇的紫杉醇組合物及其製備方法，其中所述組合物包含4－90重量％的至少一種單酸甘油酯、0.01－90重量％的至少一種油和0.01－20重量％的紫杉醇。本發明也涉及用於增溶紫杉醇的包含乳化劑的紫杉醇組合物及其製備方法，其中所述組合物包含4－90重量％的至少一種單酸甘油酯、0.01－90重量％的至少一種油、0.01－90重量％的至少一種乳化劑和0.01－20重量％的紫杉醇。本發明的組合物是有效的紫杉醇傳遞系統，因為該組合物增溶紫杉醇，在被分散於水中後不形成聚集體，良好吸附在腸壁上，並且因此具有高生物利用度。
文檔編號A61K47/22GK1671370SQ03817346
公開日2005年9月21日 申請日期2003年7月18日 優先權日2002年7月20日
發明者鄭蕙嬋, 鄭曙榮, 權翊贊, 樸榮澤, 李仁鉉, 陸淳鴻, 催永鬱, 樸在亨, 鄭鎮旭 申請人:韓國科學技術研究院