無結晶型態鹽酸萬古黴素及其製備方法和用途、以及它的藥物組合物的製作方法

2023-09-16 06:17:15

專利名稱：無結晶型態鹽酸萬古黴素及其製備方法和用途、以及它的藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種鹽酸萬古黴素，具體地說，涉及一種高密度無結 晶型態鹽酸萬古黴素及其製備方法、和該鹽酸萬古黴素用於口服或注 射給藥的用途、以及含有該鹽酸萬古黴素的藥物組合物。
背景技術：
鹽酸萬古黴素是東方諾卡氏菌在控制發酵條件下產生的一種兩性糖肽類抗生素，其化學式為C66H75C12N9CVHC1，分子量為1，486。 通過發酵微生物Amycolatopis orientalis (以前的Nocardia orientalis) 製備萬古黴素的方法已經在美國專利3,067,099 (1955年申請)和 WO91/08,300中更為詳細的描述。鹽酸萬古黴素的凍乾粉呈現米白 色，其水溶液為透明溶液，pH為2.5-4.5。臨床上，鹽酸萬古黴素從20世紀50年代末開始有商業銷售。已 知鹽酸萬古黴素與黏肽的前質末端D-Ala-D-Ala結合，抑制細菌細胞 壁的合成。此外，鹽酸萬古黴素還可以改變細胞膜的滲透性和RNA 的合成。鹽酸萬古黴素特別用於由抗P-乳胺抗生素的葡萄球菌引起的嚴 重或重症感染的初步治療，也用於治療對青黴素過敏或使用青黴素和 頭孢菌素沒有效果的患者。商業銷售的鹽酸萬古黴素有口服(溶液和 膠囊/子彈型膠囊)和注射(小瓶的消毒靜脈溶液)形式。鹽酸萬古黴素單獨使用或與其它氨基葡糖苷結合使用可以治療由葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌或白喉桿菌引起的心內膜炎。只有在注射鹽酸萬古黴素對葡萄球菌引起的小腸結腸炎沒有效果的情況下，才允許口服鹽酸萬古黴素。只有注射用鹽酸萬古黴素適用於其它所有的適應症。目前在臨床上用的鹽酸萬古黴素都是用凍乾粉為原料來製備口服和注射劑型，在口服劑型的膠囊劑型中，因凍乾粉的密度比較小，製備膠囊顆粒較大，不易服用。發明內容本發明所要解決的技術問題是提供一種高密度無結晶型態的鹽 酸萬古黴素及其製備方法和藥學上的應用，不但可以注射用，還可用 於口服，尤其可應用於膠囊。根據本發明的一方面，本發明提供了一種無結晶型態鹽酸萬古黴 素，其特徵在於，所述鹽酸萬古黴素為無結晶型態，其具有與附圖1所示的x射線粉末晶體衍射圖譜基本相同的特徵。所述鹽酸萬古黴素的x-射線衍射圖譜不含有任何峰形。所述鹽酸萬古黴素的松密度為0.45 0.65g/ml，緊密度為0.65~0.85 g/ml 。根據本發明的另一方面，本發明還提供了一種藥物組合物，所述 藥物組合物包括治療有效量的無結晶型態鹽酸萬古黴素、以及藥學上 可接受的載體、賦形劑、稀釋劑或輔料。其中，該鹽酸萬古黴素的治 療有效量為0.5 5g。其中，該種藥物組合物可製成注射劑給藥，也可製成口服製劑給 藥。注射劑主要製成注射用凍乾粉針劑，所用的藥用輔料包括葡萄糖、 蔗糖、乳糖、果糖、甘露醇、木糖醇等多元醇類作賦形劑，還包括5 %葡萄糖注射液及0.9%氯化鈉注射液作臨床給藥時的稀釋劑。注射劑主要用於治療對甲氧西林耐藥的葡萄球菌引起的感染，對青黴素過 敏的患者及不能使用其他抗生素包括青黴素、頭孢菌素類，或使用後 治療無效的葡萄球菌、腸球菌和棒狀桿菌、類白喉桿菌屬等感染患者， 如心內膜炎、骨髓炎、敗血症或軟組織感染等，也可用於防治血液透 析患者發生的葡萄球菌屬所致的動、靜脈血分流感染。口服製劑主要 製成片劑和膠囊劑，所用的藥用輔料包括賦形劑和填充劑如微晶纖維素、羥丙纖維素、澱粉、乳糖、糊精等，粘合劑如聚維酮K30、羥丙 甲纖維素等，崩解劑如羧甲澱粉鈉、交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維 酮等，助流劑或潤滑劑如微粉矽膠、硬脂酸鎂、硬脂酸、硬脂酸鈣等。 本品口服用於治療由於長期服用廣譜抗生素所致的甲硝唑治療無效 的難辨梭狀桿菌引起的偽膜性結腸炎或葡萄球菌性腸炎。根據本發明的再一方面，本發明還提供了所述鹽酸萬古黴素的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟(1) 具有萬古黴素色譜純度不低於80%的萬古黴素粗品在含有 NH4HC03流動相的層析柱中進行柱層析，得到色譜純度不低於93% 的有效層析液或效層析液；(2) 向有效層析液或效層析液加入碳酸鹽，產生沉澱；(3) 採用乙醇進行頂洗，乾燥得到鹽酸萬古黴素。最好，所述有效層析液經過超濾、納濾後可得到有效層析液的濃 縮液，以通過碳酸鹽產生沉澱。其中，所述超濾的回流溫度控制在 10~20°C，並用純化水洗滌濾渣，超濾膜選用10000Da 50000Da。最好，所述有效層析液或有效層析液的濃縮液通過0.45pm和 0.2pm的濾芯過濾後再進行沉澱。所述納濾溶液的溫度控制在10~20°C，並分步加入純化水和 0.04%~0.06°/。的乙二胺四乙酸(W/bons)，納濾膜選用200Da 600Da。其中，所述碳酸鹽包括(NH4)2CO;j， NH4HC03， Na2C03和 NaHC03。最好，向有效層析液或有效層析液的濃縮液中加入碳酸鹽 所得到碳酸鹽濃度為3%~7% (W/V)。其中，加入碳酸鹽後，調節pH-2.0 3.5,不斷攪拌30 90分鐘， 混合液溫度控制在5 25 °C,並靜置24 48小時。最好，採用卯％的乙醇水溶液進行多次頂洗，頂洗至電導率 ^1000ns/cm時停止加入90%的乙醇水溶液。最好，採用的層析介質為葡聚糖凝膠Sephadex CM-25、瓊脂糖 SP Sepharose或瓊脂糖CM Sepharose，流動相為4~6% (w/v) NH4HC03。其中，流動相以流量為0.5-1.5柱體積/小時進行洗脫。最好，還包括在柱層析前，將萬古黴素粗品溶於純水中，攪拌， 用2 6 mol/LNaOH溶液調整至pH= 9~10，待完全溶解後過濾，收集 濾液，用2~6 mo1/ L HC1溶液調整濾液至pH=4.5 6.0。最好，還包括在用含有NH4HC03流動相洗脫前，先用純水和低 濃度的NH4HC03溶液進行預洗。根據本發明的最後一方面，本發明提供了一種鹽酸萬古黴素用於 口服或注射給藥的用途。本發明所提供的工藝流程具體描述如下。萬古黴素發酵液在鹼性條件下過濾，得到的澄清濾液通過大孔吸附樹脂，萬古黴素被吸附在樹脂，樹脂水洗後用含有溶劑的酸性水溶 液洗脫，典型的洗脫液為含乙醇的鹽酸水溶液。萬古黴素被洗脫下來， 含有萬古黴素的洗脫液加入活性炭脫色，過濾得到的濾液濃縮得到鹽 酸萬古黴素水溶液，水溶液的濃度大約在100mg/mL。濃縮結束後，接著進行沉澱操作。在含有鹽酸萬古黴素的水溶液中加入NH4HC03 (數量為濃縮液體積的6%~10% (W/V))，然後用氨水調節萬古黴素濃縮液pH至 7.5~8.5，攪拌45 60min使其混合均勻，大量的萬古黴素從溶液中沉 澱出來。沉澱過程的溫度必須控制在10~20°C，靜置16士2小時後，把 混合液固液分離，使萬古黴素沉澱從溶液中分離出來得到固體萬古黴 素鹼，然後用乙醇頂洗，頂去固體中殘留液，分離後得到萬古黴素粗 品。得到的萬古黴素鹼中萬古黴素色譜純度不低於80% (HPLC)， 一 般在85%以上。萬古黴素粗品在水溶液裡溶解後過濾，上層析柱層析純化得到萬 古黴素色譜純度93%以上的有效層析液。有效層析液經過超濾、納濾 後得到鹽酸萬古黴素濃縮液。鹽酸萬古黴素濃縮液通過0.45pm和 0.2pm的濾膜過濾後進行沉澱。向含有鹽酸萬古黴素的濃縮液中加入碳酸鹽，例如NaHC03、 (NH4)2C03、 NH4HC03、或Na2C03，使濃縮液中碳酸鹽[NaHC03或 (NH4)2C03或NH4HC03或Na2C03]的濃度為3% 7% (W/V)，此時濃 縮液中有氣泡產生，再向溶液中加入適量的HCl調節pH值到2.0-3.5， 並持續攪拌60±30分鐘，控制混合液溫度在5 25°C，靜置24 48 小時後固液分離。鹽酸萬古黴素濾餅先用90%的乙醇水溶液進行第一 次頂洗，頂洗至電導率^1000^is/cm時停止加入90%的乙醇水溶液。 再用經0.45pm膜過濾後的無水乙醇進行第二次頂洗，頂洗後即得鹽 酸萬古黴素沉澱溼品(乙醇水溶液是由0.45pm膜過濾後的無水乙醇 與純化水配製而成)。沉澱溼品通過乾燥去除殘留乙醇及水分，獲得 鹽酸萬古黴素成品。通過本發明得到的鹽酸萬古黴素有效組份大大得到提高，其它雜 質大大降低，純度很高，色譜純度可達到95%以上，該鹽酸萬古黴素 的松密度為0.45 0.65g/ml，緊密度為0.65~0.85 g/ml。該密度比常規凍幹工藝要高，不但可以用於注射劑，還可用於膠囊等固體製劑。同 時產品外觀顏色得到明顯改觀，適於口服或注射給藥。


圖l為本發明高密度無結晶型態的鹽酸萬古黴素的x射線粉末衍射譜圖。
具體實施方式
通過以下實施例來對本發明作進一步具體說明，但並不僅限於以 下實施例和實施例中的工藝參數範圍。實施例l:萬古黴素粗品的製備萬古黴素發酵液在鹼性條件下過濾，得到的澄清濾液通過大孔吸 附樹脂XAD-1600，萬古黴素被吸附在樹脂，樹脂水洗後用40%乙醇 的酸性水溶液洗脫，萬古黴素被洗脫下來，含有萬古黴素的洗脫液加 入活性炭脫色，過濾得到的濾液濃縮得到鹽酸萬古黴素水溶液，接著 加入NH4HC03進行沉澱，得到萬古黴素粗品。萬古黴素粗品中萬古 黴素B含量為86.8%，效價為599u/mg。取此粗品2500g，加純化水20.0L,加NaOH溶液調節pH到10.0， 用0.2M2的0.5pm孔徑的陶瓷膜過濾得到25.0L萬古黴素濾液，溶液 效價為51224IU/ml，萬古黴素B含量為86.5%,濾液pH為9.72，濾 液用HC1水溶液調節pH到4.82後上柱層析，層析柱填料為瓊脂糖凝 膠。上柱結束後層析柱用純化水洗柱6BV，然後用O.lmol/1的 NH4HC03水溶液洗柱10BV，然後用0.6mol/l的NH4HC03水溶液層 析，收集其中萬古黴素含量在93n/。以上以及效價在2000IU/ml的部分，得到有效層析液。有效層析液中加入HC1，調節pH到2.76，然後用 50000Da的超濾膜超濾得到濾液，然後用200Da孔徑的納濾膜濃縮脫 鹽，最後獲得濃度為200mg/mL的鹽酸萬古黴素水溶液體積4500mL, 含萬古黴素色譜純度為95.6%,溶液pH為2.85。
實施例2:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2jim的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25gNaHC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HCl水溶液調節pH到2.80，繼續攪拌60MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置38小時，過程溫度控制在14 15 'C。混合物通過過濾分 離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 385us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 99.7g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體72.5g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品63.2g，成品水分為3.4%，鹽酸萬古 黴素其松密度為0.62g/ml，緊密度為0.81g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖1。
實施例3:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入15gNaHC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HCl水溶液調節pH到3.50，繼續攪拌30MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在5~6°C。混合物通過過濾分離 並先用用200mL 90%乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 293us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品92.3g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體68.5g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品58.6g，成品水分為3.1%，鹽酸萬古 黴素其松密度為0.45g/ml，緊密度為0.69 g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖1。
實施例4:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL,通過0.45jam和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入35gNaHC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調節pH到2.01，繼續攪拌30MIN,使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在24 25°C。混合物通過過濾分 離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 396us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 102.1g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體81.3g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品64.1g，成品水分為3.5%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.63g/ml，緊密度為0.82 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖l所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相
同的特徵。請參見圖1。
實施例5:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25gNaHC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調節pH到3.00,繼續攪拌卯MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置24小時，過程溫度控制在15 16°C。混合物通過過濾分 離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為351us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 98.1g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體72.2g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品63.3g，成品水分為3.2%，鹽酸萬古 黴素其松密度為0.59g/ml，緊密度為0.79 g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖1。
實施例6:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45nm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25gNa2C03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調節pH到2.82,繼續攪拌60MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置36小時，過程溫度控制在14 15 °C。混合物通過過濾分 離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 405us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 101.5g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體73.0g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品62.4g，成品水分為2.8%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.64g/ml，緊密度為0.85 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖l所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
實施例7:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入15gNa2C03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調節pH到3.50,繼續攪拌60MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在5~6 °C 。混合物通過過濾分離並先用用200mL90%乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 325us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 91.3g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體62.5g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品50.8g，成品水分為2.9%，鹽酸萬古 黴素其松密度為0.46g/ml，緊密度為0.65 g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖1。
實施例8:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入35gNa2C03,萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調節pH到2.02，繼續攪拌30MIN,使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在24~25 °C 。混合物通過過濾分 離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 413us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 103.8g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體73.9g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品63.6g，成品水分為3.0%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.63g/ml，緊密度為0.83 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
實施例9:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25gNa2C03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調節pH到3.10,繼續攪拌90MIN，使其混合均勻，停攪拌靜置24小時，過程溫度控制在14 15 °C。混合物通過過濾分 離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 394us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 99.7g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體72.8g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品62.8g，成品水分為3.0%,鹽酸萬古 黴素其松密度為0.61g/ml，緊密度為0.84 g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖1。
實施例10:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25gNH4HC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調節pH到2.78，繼續攪拌60MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置30小時，過程溫度控制在11 12 °C。混合物通過過 濾分離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 524us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 103.7g,溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體74.5g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品64.5g，成品水分為3.2%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.64g/ml，緊密度為0.82 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖l所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
實施例ll:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL,通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入35gNH4HC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀物，加入HC1水溶液調節pH到3.48,繼續攪拌60MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在5~6 °C。混合物通過過濾 分離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 531us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 104.3g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體75.8g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品66.9g，成品水分為3.1%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.65g/ml，緊密度為0.85 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
實施例12:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2fim的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入15g NH4HC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調節pH到2.04,繼續攪拌30MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置24小時，過程溫度控制在24~25 °C 。混合物通過過 濾分離並先用用200mL90M乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 524us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 88.2g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體61.7g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品49.8g，成品水分為2.8%，鹽酸萬古 黴素其松密度為0.45g/ml，緊密度為0.66 g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖1。
實施例13:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45|xm和0.2pm的濾膜過濾後邊攪拌邊加入25gNH4HC03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調節pH到3.02,繼續攪拌90MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在12 13 °C。混合物通過過 濾分離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 385us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 101.8g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體72.9g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品62.8g，成品水分為2.9%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.59g/ml，緊密度為0.78 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖i所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
實施例14:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45|xm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25g (NH4)2C03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HCl水溶液調節pH到2.82，繼續攪拌60MIN,使其混合均 勻，停攪拌靜置40小時，過程溫度控制在8~9 °C。混合物通過過濾 分離並先用用200mL90。/Q乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 352us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 104.2g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體75.1g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品6S.3g，成品水分為3.3%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.65g/ml，緊密度為0.84 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
實施例15:鹽酸萬古黴素的沉澱取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45nm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入15g (NH4)2C03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調節pH到3.47應續攪拌30MIN,使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在5 6 °C 。混合物通過過濾 分離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 318us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 94.5g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體69.2g，再通過高真 空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品5S.0g，成品水分為3.2%，鹽酸萬古 黴素其松密度為0.51g/ml，緊密度為0.69 g/ml 。該無結晶型態鹽酸萬 古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特徵。請參見圖l。
實施例16:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入35g (NH4)2C03，萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調節pH到2.00，繼續攪拌30MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時，過程溫度控制在24 25 °C 。混合物通過過 濾分離並先用用200mL90Q/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 502us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 108.2g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體78.4g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品69.0g，成品水分為2.9%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.62g/ml，緊密度為0.80 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。實施例17:鹽酸萬古黴素的沉澱
取實施例1中的濃縮液500mL，通過0.45jxm和0.2pm的濾膜過 濾後邊攪拌邊加入25g (NH4)2C03,萬古黴素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調節pH到3.05,繼續攪拌90MIN,使其混合均 勻，停攪拌靜置24小時，過程溫度控制在20-21 °C。混合物通過過 濾分離並先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結束是頂洗液電導率為 401us/cm，然後用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古黴素溼品 101.9g，溼品通過乾燥去除殘留乙醇後得到中間體73.2g，再通過高 真空乾燥後得到鹽酸萬古黴素成品66.5g，成品水分為2.7%，鹽酸萬 古黴素其松密度為0.61g/ml，緊密度為0.79 g/ml 。該無結晶型態鹽酸 萬古黴素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特徵。請參見圖1。
本發明通過上面的實施例進行舉例說明，但是，應當理解，本發 明並不限於這裡所描述的特殊實例和實施方案。在這裡包含這些特殊 實例和實施方案的目的在於幫助本領域中的技術人員實踐本發明。任 何本領域中的技術人員很容易在不脫離本發明精神和範圍的情況下 進行進一步的改進和完善，因此本發明只受到本發明權利要求的內容 和範圍的限制，其意圖涵蓋所有包括在由附錄權利要求所限定的本發 明精神和範圍內的備選方案和等同方案。
權利要求
1、一種無結晶型態鹽酸萬古黴素，其特徵在於，所述鹽酸萬古黴素為無結晶型態，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同的特徵。
2、 如權利要求1所述的鹽酸萬古黴素，其特徵在於，所述鹽酸 萬古黴素的X-射線衍射圖譜不含有任何峰形。
3、 如權利要求1或2所述的鹽酸萬古黴素，其特徵在於，所述 鹽酸萬古黴素的松密度為0.45 0.65g/ml，緊密度為0.65~0.85 g/ml 。
4、 一種藥物組合物，其特徵在於，所述藥物組合物包括權利要 求1~3中任一的權利要求所述的治療有效量的無結晶型態鹽酸萬古 黴素、以及藥學上可接受的載體、賦形劑、稀釋劑或輔料。
5、 如權利要求4所述的藥物組合物，其特徵在於，該鹽酸萬古 黴素的治療有效量為0.5 5g。
6、 一種如權利要求1~3所述的鹽酸萬古黴素的製備方法，其特 徵在於，包括以下步驟(1) 具有萬古黴素色譜純度不低於80%的萬古黴素粗品在含有 NH4HCCb流動相的層析柱中進行柱層析，得到色譜純度不低於93%的有效層析液或有效層析液的濃縮液；(2) 向有效層析液或有效層析液的濃縮液加入碳酸鹽，產生沉澱；(3) 採用乙醇進行頂洗，乾燥得到鹽酸萬古黴素。
7、 如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於，所述有效層析 液經過超濾、納濾後可得到有效層析液的濃縮液，以通過碳酸鹽產生 沉澱。
8、 如權利要求7所述的製備方法，其特徵在於，所述有效層析 液或有效層析液的濃縮液通過0.45pm和0.2pm的濾芯過濾後再進行 沉澱。
9、 如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於，所述碳酸鹽包 括(NH4)2C03， NH4HCO;j， Na2C03和NaHC03。
10、 如權利要求9所述的製備方法，其特徵在於，向有效層析液 或有效層析液的濃縮液中加入碳酸鹽所得到碳酸鹽的濃度為3%~7%(W/V)。
11、 如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於，加入碳酸鹽後， 調節pH=2.0 3.5，不斷攪拌30~90分鐘，混合液溫度控制在5 25°C ， 並靜置24~48小時。
12、 如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於，還包括採用 90%的乙醇水溶液進行多次頂洗，頂洗至電導率2000ias/cm時停止加 入90%的乙醇水溶液。
13、 如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於，採用的柱層析 介質為葡聚糖凝膠Sephadex CM-25、瓊脂糖SP Sepharose或瓊脂糖 CMSepharose，流動相為4 6% (w/v) NH4HC03。
14、 如權利要求13所述的製備方法，其特徵在於，流動相以流 量為0.5-1.5柱體積/小時進行洗脫。
15、 如權利要求7所述的製備方法，其特徵在於，所述超濾的回 流溫度控制在10~20°C，並用純化水洗滌濾渣，超濾膜選用 10000Da~50000 Da。
16、 如權利要求7所述的製備方法，其特徵在於，所述納濾溶液 的溫度控制在10 20°C，並分步加入純化水和0.04% 0.06°/。的乙二胺 四乙酸(W/bons)，納濾膜選用200Da 600Da。
17、 如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於，還包括在柱層析前，將萬古黴素粗品溶於純水中，攪拌，用2 6 mol/L NaOH溶液 調整至pH-9 10，待完全溶解後過濾，收集濾液，用2 6mol/LHCl 溶液調整濾液至pH=4.5 6.0。
18、 如權利要求6所述的製備方法，還包括在用含有NH4HC03 流動相洗脫前，先用純水和低濃度的NH4HC03溶液進行預洗。
19、 一種如權利要求1 3任一所述的鹽酸萬古黴素用於口服或注 射給藥的用途。
全文摘要
本發明提供了一種高密度無結晶型態鹽酸萬古黴素及其製備方法、和該鹽酸萬古黴素用於口服或注射給藥的用途、以及含有該鹽酸萬古黴素的藥物組合物。所述鹽酸萬古黴素為無結晶型態，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同的特徵。通過本發明得到的鹽酸萬古黴素有效組份大大得到提高，其它雜質大大降低，純度很高，色譜純度可達到95％以上，不但可以用於注射劑，還可用於膠囊等固體製劑，同時產品外觀顏色得到明顯改觀，適於口服或注射給藥。
文檔編號C07K9/00GK101613396SQ20081012643
公開日2009年12月30日 申請日期2008年6月26日 優先權日2008年6月26日
發明者勞學軍, 孫新強, 張國鈞, 王小勇 申請人:浙江醫藥股份有限公司新昌製藥廠