一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法
2023-09-16 00:56:30
專利名稱：一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法
技術領域：
本發明涉及一種從銀杏葉浸膏中提取純化聚戊烯醇的方法。
背景技術：
聚戊烯醇polyprenol亦稱聚異戊烯醇(polyi soprenol)，是異戊二烯單體(異戊 烯基)連結成直鏈狀的多聚化合物的總稱，在自然界廣泛存在。弱極性，易溶於有機溶劑。 聚戊烯醇是長鏈脂肪醇，結構中含有多個非共軛雙鍵，具有非常強烈的吸收自由基的性能。 存在於哺乳動物體內的聚戊烯醇類化合物被稱為多萜醇，它是生物膜中糖蛋白合成時重要 的糖載體，但其含量極低，而銀杏葉中聚戊烯醇含量可佔幹葉重的1 2%，被認為是合成 動物多萜醇最合適的中間體。銀杏葉中聚戊烯醇類化合物對人體無毒，可作為免疫活性物 質，用於治療因免疫缺陷造成的疾病，並具有誘導腫瘤細胞凋亡的作用，具有廣闊的醫藥保 健應用前景。聚戊烯醇浸膏通常是用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇或超臨界二氧化碳等中弱極性 溶劑提取銀杏葉得到，聚戊烯醇在浸膏中的含量大約在5-20%範圍。聚戊烯醇與多種複雜 的化學成分存在於銀杏葉及其浸膏中，分離提存難度大，步驟多，而且精製效果有限。由於 聚戊烯醇是長鏈聚異戊烯基醇，極性弱，與浸膏中的蠟質物質物理化學性質極為相似，這就 給聚戊烯醇的分離提存帶來極大的挑戰。發明專利CN01113696. 0利用溶劑沉析、萃取和矽膠柱層析等方法對聚戊烯醇進 行精製，可得到純度為95%的聚戊烯醇產品；發明專利CN200410041670. 4利用二級分子蒸 餾的方法，可以得到75-95%的聚戊烯醇產品；發明專利CN200410074088. 8利用超臨界二 氧化碳分級分離的方法，得到含量為80%聚戊烯醇產品；溶劑沉析和矽膠柱層析法可以除 去產品中的大部分極性物質，而對於和聚戊烯醇物化性質(包括極性)接近的蠟質物質的 作用十分有限；分子蒸餾具有清潔、綠色等優點，但是其理論基礎是按物質的分子自由程的 差別進行分離，由於蠟質物質和聚戊烯醇的分子量都具有一個分布較廣的範圍，使得其分 子自由程的交集很大，所以，僅憑分子蒸餾很難將產品中的蠟質物質分離出去，另外，分子 蒸餾必需在高真空和較高溫度下進行，會增加破壞產品中的聚戊烯醇的結構可能性；超臨 界二氧化碳分級分離的是根據不同的溫度和壓力下，超臨界二氧化碳對不同物質的溶解度 變化不同而進行分離提純的，這往往要求被分離的物質在極性或分子量等參數具有一定的 差別，但是銀杏葉浸膏中的蠟質物質和聚戊烯醇都是極性極弱而且分子量具有較廣的分布 範圍的物質，所以，超臨界二氧化碳分級分離雖然可以得到80%含量的聚戊烯醇，但是以犧 牲工藝的收率為代價。可以看出，現有的工藝過程中，沒有針對產品中的蠟質物質的分離的 步驟，所以，其產品中還含有一定量的蠟質物質，要想得到純度較高的聚戊烯醇產品，必需 經過複雜的工藝過程，而且工藝收率往往很低。使得聚戊烯醇的產業化生產受到限制。
發明內容
本發明的目的是提供一種工藝簡單，收率在80%以上，純度在98%以上的聚戊烯醇的製備方法。本發明是以弱極性溶劑提取的銀杏葉浸膏為原料，通過皂化、尿素柱層析、結晶等 工藝，得到純度在98%以上的聚戊烯醇產品，並大大提高其聚戊烯醇的收率。尿素柱層析法主要是一種用來分離提純脂肪酸的方法。我們在實驗中發現，尿素 固定相對蠟質物質具有較強的吸附作用，而對於雙鍵個數較多的聚戊烯醇基本沒有吸附作 用，這樣可以利用蠟質物質和聚戊烯醇的吸附差別將它們分離開來，由於尿素是一種極性 較大的物質，它同樣對於浸膏中的極性物質具有強的吸附作用，所以，可以同時除去浸膏中 極性較強的雜質和極性弱的蠟質物質，得到含量高的聚戊烯醇產品，再經過結晶，含量可以 達到98%以上，而且尿素柱層析過程的收率高(大於90%)，工藝總體收率(尿素柱層析和 結晶)大於80%。本發明具體操作步驟如下(1)浸膏皂化聚戊烯醇浸膏在醇鹼溶液中，充分攪拌，在30_80°C下皂化0. 5_4h， 反應液用酸中和，濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將尿素溶於負載溶劑中，加入載體，使尿素負載在載體 上，除去溶劑，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後將皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用流動 相勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮 蒸乾；(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，飽和溶 液，冷凍結晶，過濾，乾燥得到聚戊烯醇。如步驟(1)所述的聚戊烯醇浸膏是指用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇、超臨界二氧 化碳提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量在5-20襯％的聚戊烯醇浸膏；如步驟(1)所述的醇鹼 溶液指的是醇鹼溶液是l_40wt%的氫氧化鈉或氫氧化鉀的甲醇，1_40襯％的氫氧化鈉或氫 氧化鉀的乙醇溶液，浸膏與醇鹼溶液的質量比為1-10 10。如步驟(1)所述的酸是指任何種類的液體酸，優選鹽酸或硫酸。如步驟(2)所述的負載溶劑是指40-95%的甲醇-水溶液、40_95%的乙醇-水溶 液、甲醇或乙醇。如步驟(2)所述的載體是指任何有一定機械強度、穩定的固體粉末，優選矽膠、氧 化鋁或活性炭；如步驟⑵所述的尿素載體的質量比為0. 1-10 1 ；如步驟(3)所述的流動相是指任何可以溶解聚戊烯醇而不溶解尿素的溶劑，優選 石油醚、正己烷、氯仿或乙酸乙酯；本發明具有如下特點1、採用尿素柱層析法，操作條件溫和，工藝收率高，工藝總收率80%以上。產品純 度高，聚戊烯醇的含量達到98%以上，工藝簡單，運行成本低。2、尿素層析柱可以重複利用。3、生產周期短，批量大，便於產業化。
具體實施例方式實施例1
(1)浸膏皂化將超臨界二氧化碳提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為20襯％的 IOg聚戊烯醇浸膏，在1襯％的IOOg KOH-甲醇溶液，充分攪拌，在30°C下皂化4h，反應液用 鹽酸中和，濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於甲醇中，在甲醇溶液中加入IOg活性炭， 旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用石油醚 勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 8wt%，工藝總收率82wt%。實施例2(1)浸膏皂化將石油醚提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為15襯％的20g聚戊烯 醇浸膏，在5襯％的IOOg KOH-乙醇溶液，充分攪拌，在40°C下皂化3. 5h，反應液用硫酸中 和，濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於甲醇中，在甲醇溶液中加入IOOg矽膠， 旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用正己烷 勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的乙醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 6wt%，工藝總收率82wt%。實施例3(1)浸膏皂化將丙酮提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為IOwt %的50g聚戊烯醇 浸膏，在30襯％的IOOg NaOH-甲醇溶液，充分攪拌，在50°C下皂化3h，反應液用鹽酸中和， 濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於80wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入200g氧化鋁，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用氯仿勻 速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的乙腈，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到99. 6wt%，工藝總收率86wt%。實施例4(1)浸膏皂化將乙醇提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為聚戊烯醇浸 膏在20襯％的IOOg KOH-甲醇溶液，充分攪拌，在70°C下皂化lh，反應液用鹽酸中和，濃縮 得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於70wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入600g矽膠，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用乙酸乙酯勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 5wt%，工藝總收率82wt%。實施例5(1)浸膏皂化將乙醇提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為聚戊烯醇浸 膏，在35wt %的IOOg KOH-甲醇溶液，充分攪拌，在60°C下皂化1. 5h，反應液用硫酸中和，濃 縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於60wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入800g矽膠，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用石油醚 勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的乙醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 6wt%，工藝總收率84wt%。實施例6(1)浸膏皂化將乙醇提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為5襯％的IOOg聚戊烯醇 浸膏，在40襯％的IOOg NaOH-甲醇溶液，充分攪拌，在80°C下皂化0. 5h，反應液用鹽酸中 和，濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOg尿素溶於50wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中加 入IOOg氧化鋁，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用正己烷 勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的乙腈，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到99. 5wt%，工藝總收率86wt%。實施例7(1)浸膏皂化將丙酮提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為IOwt %的60g聚戊烯醇 浸膏，在15wt %的IOOg KOH-乙醇溶液，充分攪拌，在30°C下皂化4h，反應液用鹽酸中和，濃 縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將50g尿素溶於40wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中加 入80g氧化鋁，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用石油醚 勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 8wt%，工藝總收率82wt%。實施例8(1)浸膏皂化將丙酮提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為15襯％的40g聚戊烯醇
6浸膏，在20襯％的IOOg NaOH-乙醇溶液，充分攪拌，在40°C下皂化3h，反應液用硫酸中和， 濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將30g尿素溶於95%的甲醇水溶液中，在甲醇溶液中加入 60g矽膠，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用乙酸乙 酯勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的乙醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 5wt%，工藝總收率86wt%。實施例9(1)浸膏皂化將石油醚提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為20襯％的20g聚戊烯 醇浸膏，在8wt %的IOOg NaOH-乙醇溶液，充分攪拌，在30°C下皂化4h，反應液用鹽酸中和， 濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於90wt%的甲醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入50g活性炭，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用氯仿勻 速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的乙腈，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到99. 5wt%，工藝總收率88wt%。實施例10(1)浸膏皂化將正己烷提取銀杏葉得到的聚戊烯醇含量為10襯％的60g聚戊烯 醇浸膏，在15wt %的IOOg KOH-乙醇溶液，充分攪拌，在60°C下皂化3h，反應液用硫酸中和， 濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將IOOg尿素溶於80wt%的甲醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入80g活性炭，旋轉蒸乾，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用正己烷 勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾。(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇，飽和溶液，冷凍結晶，過 濾，乾燥，得到的聚戊烯醇的含量達到98. 2wt%，工藝總收率85wt%。
權利要求
一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於包括如下步驟(1)浸膏皂化聚戊烯醇浸膏在醇鹼溶液中，充分攪拌，在30 80℃下皂化0.5 4h，反應液用酸中和，濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的製備將尿素溶於負載溶劑中，加入載體，使尿素負載在載體上，除去溶劑，製得固定相；(3)尿素柱層析將製得的固定相裝柱，然後將皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用流動相勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾；(4)結晶尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，飽和溶液，冷凍結晶，過濾，乾燥得到聚戊烯醇。
2.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟 (1)所述的聚戊烯醇浸膏是用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇或超臨界二氧化碳提取銀杏葉得 到的聚戊烯醇含量在5-20wt%的聚戊烯醇浸膏。
3.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟 (1)所述的醇鹼溶液是l_40wt%的氫氧化鈉或氫氧化鉀的甲醇，1-40襯％的氫氧化鈉或氫 氧化鉀的乙醇溶液。
4.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟 (1)所述的聚戊烯醇浸膏與醇鹼溶液的質量比為1-10 10。
5.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟(1)所述的酸是液體酸。
6.如權利要求5所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於液體酸 為鹽酸或硫酸。
7.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟(2)所述的負載溶劑是40-95wt%的甲醇-水溶液、40-95wt%的乙醇-水溶液、甲醇或乙
8.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟 (2)所述的載體是矽膠、氧化鋁或活性炭。
9.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟(2)所述的尿素載體的質量比為0.1-10 1。
10.如權利要求1所述的一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特徵在於步驟(3)所述的流動相是石油醚、正己烷、氯仿或乙酸乙酯。
全文摘要
一種分離精製銀杏浸膏中聚戊烯醇的方法是聚戊烯醇浸膏在醇鹼溶液中，充分攪拌，在30-80℃下皂化0.5-4h，反應液用酸中和，濃縮得到皂化後聚戊烯醇浸膏；將尿素溶於負載溶劑中，加入載體，使尿素負載在載體上，除去溶劑，製得固定相；將製得的固定相裝柱，然後將皂化後聚戊烯醇浸膏上柱，用流動相勻速注入層析柱進行洗脫，收集不同時段的洗脫分，將富含聚戊烯醇的洗脫分合併，濃縮蒸乾；尿素柱層析後的聚戊烯醇溶於回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，飽和溶液，冷凍結晶，過濾，乾燥得到聚戊烯醇。本發明具有操作條件溫和，工藝收率高，產品純度高，工藝簡單，運行成本低的優點。
文檔編號C07C29/76GK101967083SQ20101029154
公開日2011年2月9日 申請日期2010年9月20日 優先權日2010年9月20日
發明者侯相林, 鄧天昇, 韓蕊蕊 申請人:中國科學院山西煤炭化學研究所