擾亂內分泌的物質的吸收劑及含有該吸收劑的食物和飲料的製作方法
2023-09-16 17:22:35 2
專利名稱：擾亂內分泌的物質的吸收劑及含有該吸收劑的食物和飲料的製作方法
技術領域：
本發明涉及擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，該吸收劑能吸收並清除經口攝入的擾亂內分泌的化學物質，本發明尤其涉及一種擾亂內分泌的化學物質的吸收劑及含有該吸收劑的食物，該吸收劑不僅能在人或動物的腸腔內吸收擾亂內分泌的化學物質，從而抑制此類物質的體內吸收，而且能加速這類被體內吸收的化學物質的排洩。
背景技術：
長期以來，人們把有機錫塗在船底來防止甲殼類動物的吸附。自從有報導稱有機錫能夠導致甲殼類動物的生殖器官異常以來(Gibbs等，J.Mar.Biol.Assoc.UK，66，767，1986)，擾亂內分泌的化學物質(或環境激素)就被認為是能夠導致嚴重社會問題的物質。生物體的內分泌系統是一個非常重要的系統，它通過各種激素的作用進行生物個體進化的調節、生殖器官的發育和保持器官的自身穩定。對於那些生活在被生活廢水汙染的湖泊和沼澤中的動物來說，擾亂內分泌的化學物質能夠破壞其內分泌系統的平衡，並導致生長和生殖的異常。
據說人和動物可通過消化道、肺和皮膚吸收擾亂內分泌的化學物質。但是，在正常的生活環境下，人類通過空氣、水或土壤所吸收的擾亂內分泌的化學物質是相當少的。有人認為人類主要通過日常攝入的食物(肉類和魚)而受到此類物質的侵害。具體而言，據報導當前使用的三嗪除草劑如「阿特拉津(Atrazine)」(如下式(I)所示)和「西瑪津(Simazine)」以及其他農用化學品如「馬拉松(Malathion)」都是危險的，因為它們能侵害生物的各類器官。這類經口攝入的擾亂內分泌的化學物質在腸道內被吸收，併集中在肝臟和脂肪組織中。 另一方面，作為各種食品包裝材料的聚碳酸酯樹脂等釋出的雙酚A(Krishnan等，內分泌學(Endocrinology)，132，2279(1993)，Olea等，環境安全展望(Environ.Health Perspect.)，104，298(1996))和4-壬基酚(Soto等，Environ.Health Perspect.，92，167(1991)，Nimrod等，Crit.Rev.Toxicol，26，335(1996))結合到雌激素受體和雌激素上，對人類表現出嚴重的影響。所以這些化學物質都是嚴重社會問題的根源。
雙酚A是具有下式(II)的化合物。 該化合物主要用作聚碳酸酯樹脂、環氧樹脂和其他樹脂如酚醛樹脂、塑性聚酯、聚碸、丙烯酸樹脂等的原料，並且用作聚氯乙烯的穩定劑，還可用作抗氧化劑。1996年日本雙酚A的產量達到了約250,000噸，其中的40,000噸用於食品領域。
由於用雙酚A製得的聚碳酸酯樹脂具有出色的耐熱性和抗衝擊性，所以該樹脂被用於高溫設備如咖啡滴器(coffee dripper)、嬰幼兒的餐具和哺乳瓶等。聚碳酸酯產品不但含有未反應的雙酚A，而且在高溫下容易從該聚合物中釋出雙酚A。
另外，許多鋼罐和鋁罐的內壁塗有環氧樹脂或氯乙烯樹脂。環氧樹脂含有原料雙酚A，氯乙烯樹脂也含有穩定劑雙酚A。有人指出，保留在鋼罐和鋁罐內壁塗層中的雙酚A可能會被溶解下來進入食物(Brotons等，Environ.Health Perspect.，103，608(1995))。
此外，作為牙封閉劑的聚碳酸酯塑料中含有雙酚A，該牙封閉劑被用來填補牙齒的齲洞或作為兒童的牙齒塗敷劑(Keith等，「環境中的擾亂內分泌的物質(Environmental Endocrine Disruptors)」Willey-Inteuscience，New York，p1232(1997))。有人指出，如果聚合效果不好或用高壓蒸汽殺菌時，就存在從這類護牙材料中釋放出雙酚A的危險(Krishnan等，Endocrinology，132，2279(1993))。
下式(III)的4-壬基酚以4-壬基酚的乙氧基化物的形式被用作非離子表面活性劑。其年產量達約20,000噸。4-壬基酚乙氧基化物由於具有低的起泡性，所以在日本它主要用作紡織業、造紙業、金屬工業和殺蟲劑工業的工業洗滌劑或分散劑。被排放的含有4-壬基酚的廢水流入河流和海洋，汙染了魚和其他動物。 這樣，人類在日常生活中就面臨著與擾亂內分泌的化學物質如雙酚A、4-壬基酚和阿特拉津接觸的危險。因此，人們迫切希望能夠開發出某種能夠防止人類被這類化學物質侵害的物質，並且開發出清除這類化學物質的方法。經口攝入並在腸道內被吸收的擾亂內分泌的化學物質通過血液流動可到達身體的任何器官，結果可能帶來各種不利的影響，例如內分泌系統的失衡。如果發現某種物質能夠吸收腸道內的擾亂內分泌的化學物質，則該物質可用於抑制擾亂內分泌的化學物質的體內吸收，並可促進擾亂內分泌的化學物質的排洩。於是，根據上述機理，該物質可保護生物器官不受擾亂內分泌的化學物質的侵擾。
在這方面，Morita等曾報導，米糠纖維、菠菜纖維、小球藻和旋殼烏賊可促進擾亂內分泌的化學物質二-8-羥基喹啉和某些多氯聯苯(PCB)的排洩(Morita等，Jpn.J.Toxicol.Environ.Health，43，42-47(1997))。
然而，還沒有關於微生物在人和動物的腸道內吸收擾亂內分泌的化學物質並抑制該化學物質的體內吸收的報導。
本發明在這方面取得了成功。本發明的一個目的是提供一種藥物，當人們攝入來自餐具或被雙酚A、4-壬基酚和阿特拉津等擾亂內分泌的化學物質汙染的食物時，可日常口服該藥物，該藥物能抑制擾亂內分泌的化學物質的體內吸收，而且此類化學物質一旦被吸收，該藥物能促進其排洩。
發明內容
為了發現能夠吸收擾亂內分泌的化學物質，尤其是例如雙酚、烷基酚和三嗪等化學物質的物質，本發明的發明者進行了深入的研究。結果，該發明者發現，腸細菌或其成分能夠有效地吸收此類化學物質。該發現導致了本發明的完成。
具體而言，本發明提供了擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，該吸收劑含有作為活性成分的活的或死的腸細菌或腸細菌的成分。
本發明還提供了含有上述擾亂內分泌的化學物質的吸收劑的食物。
本發明進而提供了抑制人體吸收擾亂內分泌的化學物質的方法，或促進人體排洩擾亂內分泌的化學物質的方法，所述方法包括給人類施用上述擾亂內分泌的化學物質的吸收劑的步驟。
圖1顯示了當反應混合物中只存在腸細菌時，腸細菌的濃度與被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖2顯示了腸細菌濃度、反應混合物的上清液中殘餘的雙酚A的量以及被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖3顯示了當食物中存在腸細菌時，腸細菌的濃度與被吸收的雙酚A的量的關係。
圖4顯示了食物濃度與被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖5顯示了反應體系的pH值與被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖6顯示了反應時間與被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖7顯示了腸細菌的種類與被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖8顯示了纖維素的種類與被腸細菌所吸收的雙酚A的量之間的關係。
圖9顯示了腸細菌的種類與被腸細菌所吸收的4-壬基酚的量之間的關係。
圖10顯示了腸細菌的種類與被腸細菌所吸收的阿特拉津的量之間的關係。
圖11顯示了腸細菌的種類、所施用的腸細菌的量以及作為排洩物所排洩的雙酚A的總量之間的關係。
圖12顯示了腸細菌的種類、所施用的腸細菌的量以及幹排洩物的量之間的關係。
圖13顯示了腸細菌的種類、所施用的腸細菌的量以及在沒有施用腸細菌時盲腸中活的細菌的數量之間的關係。
圖14顯示了所施用的腸細菌的量與幹排洩物中雙酚A的濃度之間的關係。
具體實施例方式
本發明用作擾亂內分泌的化學物質的吸收劑的腸細菌是一些微生物，它們是已知的用於食品(乳酸菌飲料、酸奶等)加工的菌株，而且對人類是極其安全的。本發明的腸細菌不僅包括存在於腸內的細菌，而且包括來自食物和飲料的並在腸內長時間停留的細菌。
腸細菌的例子有屬於下列菌屬的微生物乳桿菌屬(Lactobacillus)、雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、乳球菌屬(Lactococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、腸道球菌屬(Enterococcus)、Weissella、明串珠菌屬(Leuconostoc)、Tetragenococcus、丙酸桿菌屬(Propionibacterium)、類桿菌屬(Bacteroides)、梭菌屬(Clostridium)、真桿菌屬(Eubacterium)、(Prevotella)、小球菌屬(Pediococcus)和巨球形菌屬(Megasphaera)。
所有屬於上述菌屬的微生物都很容易得到。特別優選的微生物的具體例子如下·乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029FERM BP-1366(1981年5月1日)·嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidphilus)YIT 0168FERM BP-7536(1981年12月16日)·短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065FERM BP-6223(1996年2月29日)·兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)YIT 4007FERM BP-791(1981年5月1日)·乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YIT 2027FERM BP-6224(1997年2月10日)·嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT 2001FERM BP-7538(2001年1月31日)·嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT 2021FERM BP-7537(1996年11月1日)上述微生物保藏在國家產業技術綜合研究所國際專利生物保藏中心(International Patent Organism Depositary National Institute ofAdvanced Industrial Science and Technology*)，AIST Tsukuba Central6，1-1，Higashi 1-Chome Tsukuba-shi，Ibaraki-ken 305-8566日本(*現名)。
·屎腸球菌(Enterococcus faecium)YIT 2039·Weissella confusa YIT 0233·嗜檸檬酸明串珠菌(Leuconostoc lactis)YIT 3001·Pediococcus acidilactici YIT 3025·丙酸丙酸桿菌(Propionibacterium acidipropionici)YIT 3051·埃氏巨球形菌(Megasphaera elsdenii)YIT 6063本發明的活的腸細菌可通過在含有酵母提取物和聚腖的複合培養介質中培養而得到。下面給出了優選的複合培養介質的組成。上述微生物既可單獨使用，也可以兩種或兩種以上本發明的腸細菌結合使用。兩種或兩種以上的屬於不同種或屬的微生物可結合使用。(複合培養介質)改性GAM液體培養基(日水製藥株式會社制) 41.7gD-(+)-葡萄糖(和光純藥工業株式會社制)10.0g聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐單油酸酯 1.0g(和光純藥工業株式會社制)去離子水1.0L(pH7.3)可以得到上述腸細菌的熱處理細胞(死細菌)，例如，通過在80-120℃的溫度下加熱上述活的細菌約15到30分鐘。
另一方面，本發明的腸細菌的成分可由常規方法得到。腸細菌的成分可以是用下述適當方法處理腸細菌所得到的產物，這些方法不會對本發明的效果造成不利影響。腸細菌的成分可包括通過用細胞壁消化酶處理上述細胞而除去細胞壁所得到的原生質體成分；通過用細胞壁消化酶處理上述細胞所得到的可溶成分；通過用有機溶劑處理原生質體成分所得到的細胞質膜成分；上述細胞的研磨產物；以及通過用核酸酶和蛋白酶處理上述細胞的研磨產物所得到的細胞壁成分。
活細菌、熱處理的細菌(死細菌)和由上述方法所得到的腸細菌的成分(下稱「腸細菌細胞」)的自身，或所述成分與已知的藥用載體的結合體被用作本發明的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑。
儘管根據細胞種類的不同，用來有效抑制腸道內擾亂內分泌的化學物質發生作用的吸收劑的劑量也有所不同，但是，10mg-30g/天，優選1-5g/天的劑量一般是足夠了。因此，本發明的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑可被配製成能夠提供該劑量的適當的製劑。
此外，可將本發明的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑摻入到各種食物和飲料中。這類食物和飲料的例子有發酵乳、果汁、湯、米餅以及小甜餅。儘管對於加入到食物和飲料中的該擾亂內分泌的化學物質的吸收劑的量沒有限制，但其用量應當足以使一個人最終達到上述限定的劑量。
這樣所得到的本發明的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑以及含有該吸收劑的食物和飲料可吸收多種擾亂內分泌的化學物質，例如雙酚如雙酚A、烷基酚如4-壬基酚和三嗪如阿特拉津，從而阻止了這些化學物質在體內的吸收，並促進了這些化學物質的排洩。所以擾亂內分泌的化學物質的吸收劑可保護內分泌系統不受這些化學物質的侵害。實施例通過實施例將對本發明做更為詳細的描述，但不應當認為這些實施例是對本發明進行限制。在下列實施例中，按照下述方法用動物測定了細菌對擾亂內分泌的化學物質的吸收量和排洩量。(1)微生物對雙酚A的吸收作用(a)試樣的製備將白金環上的存儲在分散介質中的細胞接種到試管(15ml)中的10ml上述複合培養介質中，並且在37℃下孵育。24小時之後，將試管的內容物置於含有240ml相同介質的錐形瓶(500ml)中，將該混合物在37℃下靜置16小時。培養後，將液體培養基離心分離為細胞和上清液，同時在下述條件下冷卻。用磷酸鹽緩衝液(20mM的磷酸二氫鉀水溶液與20mM的磷酸氫二鉀的水溶液的混合物，調節至pH7.0)洗滌所述細胞。使經過洗滌的細胞或通過在80℃下處理該細胞30分鐘所得到的熱處理細菌懸浮在磷酸緩衝液中，留待吸收性測試時使用。(冷卻離心分離的條件)冷卻離心分離器RS-18III(Tomy精工株式會社制)轉子TA-18BH(Tomy精工株式會社制)轉速(重力加速)8,000rpm(12,000×g)離心時間20分鐘溫度4℃(b)雙酚A試樣的製備用10ml的容量瓶在電子天平上稱出100mg的雙酚A(東京化成工業株式會社制)，將其溶解於乙醇(和光純藥工業株式會社制，特級)，最終得到精確的體積10ml。用移液管將1ml該溶液轉移到另一個容量瓶(50ml)中，然後用乙醇精確地稀釋至50ml。
用如下化學式(IV)的雙酚B作為內標物。 (c)微生物對雙酚A的吸收及雙酚A殘餘量的測定將由(b)所得到的0.2ml雙酚A的乙醇溶液加入到玻璃試管中，該玻璃試管中裝有3.8ml由上述(a)所得到的活細菌或熱處理細菌的上清液。充分攪拌該混合物，並在37℃的水浴中靜置。60分鐘後，離心使細胞沉澱，用一個單獨的玻璃管收集0.95ml上清液。加入0.05ml乙醇溶液(雙酚B內標物)及1ml二氯甲烷，然後用振蕩器劇烈振蕩該玻璃管。20分鐘後，用離心方法將二氯甲烷層從水層中分離出來，用另一個玻璃管收集0.2ml二氯甲烷層。將二氯甲烷蒸乾，使殘餘物在乾燥器中過夜。在沒有微生物存在下，通過上述步驟得到的試樣作為陰性對照。
接下來，將0.16ml二氯甲烷加入該殘餘物。在重新溶解雙酚A之後，加入N，O-雙(三甲基甲矽烷基)-三氟乙醯胺(BSTFA)，從而將酚基進行三甲基矽烷基化。室溫下靜置該混合物1小時。反應之後，在下述條件下用氣相色譜(GC)對雙酚A進行定量分析。(氣相色譜測定條件)氣相色譜儀GC-14A(株式會社島津製作所制)毛細柱NEUTRABOND-1(GL Science Inc.制，25m×0.25mm；df＝0.4μm)柱溫100℃到300℃，10℃/分鐘載氣氦注射器分流式(Split)，T＝310℃檢測器FID(火焰電離檢測器)，T＝310℃注射體積1μl分析時間20分鐘(d)由雙酚A殘餘物的量計算被微生物所吸收的雙酚A的量根據下列方程，由上述(c)所確定的未被微生物吸收的雙酚A的量計算被微生物所吸收的雙酚A的量。
Y＝X-(SA×CB/SB×CA)×XY被微生物所吸收的雙酚A的量X加入到反應溶液中的雙酚A的量
CA沒有微生物存在的條件下反應溶液中所含的雙酚A的峰面積CB相應於CA的雙酚B的峰面積SA未被微生物吸收的雙酚A的峰面積SB相應於SA的雙酚B的峰面積(e)微生物對雙酚A的吸收及雙酚A吸收量的測定將由上述(b)所得到0.2ml的雙酚A的乙醇溶液加入玻璃試管中，該玻璃試管中裝有3.8ml由上述(a)所描述的活細菌或熱處理細菌的上清液。充分攪拌該混合物，然後在37℃的水浴中靜置。60分鐘後，離心使細菌沉澱，將上清液置於一個單獨的玻璃管中。用磷酸鹽緩衝液(20mM的磷酸二氫鉀水溶液與20mM的磷酸氫二鉀的水溶液的混合物，調節至pH7.0)洗滌該細菌兩次。向該細菌團及上清液加入20μg雙酚A-d16(代用藥)和2ml二氯甲烷，劇烈振蕩該混合物(200次/分鐘)。20分鐘後，將離心所得到的0.2ml的上清液收集到一個單獨的玻璃管中。將二氯甲烷蒸乾，使該殘餘物在乾燥器中放置過夜。
接下來，向該殘餘物中加入0.26ml二氯甲烷。待雙酚A重新溶解後，加入BSTFA將酚基進行三甲基矽烷基化。將該混合物在室溫下放置1小時。三甲基矽烷基化(TMS)反應之後，加入0.1ml菲-d10(內標物)的二氯甲烷(10μg/ml)溶液，在下述條件下用氣相色譜/質譜儀(GC/MS)定量分析雙酚A。(氣相色譜測定條件)氣相色譜儀GC-17A(株式會社島津製作所制)毛細柱HP-5(Aglient Inc.製造，30m×0.25mm；df＝0.25mm)液相5％的苯基甲基聚矽氧烷柱溫60℃(1分鐘)至280℃(5分鐘)，10℃/分鐘入口溫度280℃注射方式不分流法(Splitless)(1分鐘後清洗)
注射體積1μl載氣高純度氦氣，線速度＝44cm/秒界面溫度280℃取樣時間1分鐘分析時間28分鐘(質譜檢測條件)質譜儀QP5000(株式會社島津製作所制)離子化方法EI(電子撞擊)(70eV)檢測器電壓1.5kV檢測方式SIM取樣速度0.2秒(被檢離子)測試物與代用藥中標準物質的被檢離子如下表1所示。
表1
*TMS(三甲基矽烷基化)衍生物(f)被微生物所吸收的雙酚A的量的計算由GC/MS測定所得到的雙酚A的三甲基矽烷基化(TMS)產物的峰面積與代用藥的峰面積之比得到校準曲線，用該校準曲線確定被檢測的雙酚A的量。然後根據測得的量、注射到GC/MS裝置中的試樣的量、濃度放大(concentration magnification)等按下式計算雙酚A的量。
Y＝D×(L×1000/I)Y被微生物所吸收的雙酚A的量(μg)D由GC/MS檢測得到的量(μg)
L試樣的最終液量(ml)I注射到GC/MS中的試樣的量(μl)(2)不同微生物對4-壬基酚的吸收作用(a)試樣的製備試樣的製備採用與上述(1)(a)相同的方法。(b)製備4-壬基酚的試樣用10ml的容量瓶在電子天平上稱出100mg的4-壬基酚(GL Science Inc.公司生產)，將其溶解於乙醇，得到的最終體積精確為10ml。用移液管將3ml該溶液轉移到另一個容量瓶(50ml)，然後用乙醇精確稀釋到50ml。
用上述的雙酚B作內標物。(c)微生物對4-壬基酚的吸收及4-壬基酚殘餘量的測定將由(b)所得的0.2ml的4-壬基酚的乙醇溶液加入玻璃試管中，該玻璃試管中裝有3.8ml由上述(a)所描述的活細菌或熱處理細菌的上清液。充分攪拌該混合物，然後在37℃的水浴中靜置。60分鐘後，離心使細胞沉澱，將0.95ml上清液收集在一個單獨的玻璃管中。加入0.05ml乙醇溶液(雙酚B內標物)和1ml二氯甲烷，用振蕩器劇烈振蕩該試管。20分鐘後，用離心方法將二氯甲烷層從水層中分離出來，用另一個玻璃管收集0.2ml二氯甲烷層。將二氯甲烷蒸乾，使殘餘物在乾燥器中過夜。在沒有微生物存在下，通過上述步驟得到的試樣作為陰性對照。
接下來，將0.16ml二氯甲烷加入該殘餘物。在重新溶解4-壬基酚之後，加入N，O-雙(三甲基矽烷基)-三氟乙醯胺(BSTFA)，從而將酚基進行三甲基矽烷基化。該混合物在室溫下靜置1小時。三甲基矽烷基化反應之後，在與測定雙酚A所用的相同條件下用氣相色譜(GC)對4-壬基酚進行定量分析。(d)計算被微生物所吸收的4-壬基酚的量根據下列方程，由上述(c)所確定的未被微生物吸收的4-壬基酚的量計算被微生物所吸收的4-壬基酚的量。
Y＝X-(SA×CB/SB×CA)×XY被微生物所吸收的4-壬基酚的量X加入到反應溶液中的4-壬基酚的量CA沒有微生物存在的條件下反應溶液中所含的4-壬基酚的峰面積CB相應於CA的4-壬基酚的峰面積SA未被微生物吸收的4-壬基酚的峰面積SB相應於SA的4-壬基酚的峰面積(3)不同微生物對阿特拉津的吸收作用(a)試樣的製備試樣的製備採用與上述(1)(a)相同的方法。(b)製備阿特拉津的試樣用10ml的容量瓶在電子天平上稱出100mg的阿特拉津(GL Science Inc.公司生產)，將其溶解於乙醇(和光純藥工業株式會社制，特級)得到的最終體積精確為10ml。用移液管將3ml該溶液轉移到另一個容量瓶(50ml)，然後用乙醇精確稀釋到50ml。(c)微生物對阿特拉津的吸收及阿特拉津殘餘量的測定將由上述(b)所得的0.2ml的阿特拉津的乙醇溶液加入玻璃試管中，該玻璃試管中裝有3.8ml由上述(a)所描述的活細菌或熱處理細菌的上清液。充分攪拌該混合物，然後在37℃的水浴中靜置。60分鐘後，離心使細菌沉澱，將1ml上清液收集在一個單獨的玻璃管中。加入1ml二氯甲烷，用振蕩器劇烈振蕩該試管。20分鐘後，用離心方法將二氯甲烷從水層中分離出來，用另一個玻璃管收集0.2ml二氯甲烷層。將二氯甲烷蒸乾，使殘餘物在乾燥器中過夜。在沒有微生物存在下，通過上述步驟得到的試樣作為陰性對照。
將乙腈與50mM NH4H2PO4水溶液之比為55∶45的0.2ml混合物加入該殘餘物，以便溶解阿特拉津。然後，在下述條件下用HPLC(高效液相色譜)對阿特拉津進行定量分析。(HPLC測定條件)HPLC儀Waters 2690(Waters Corp.制)柱對稱C185mm(Waters Corp.制，4.6×150mm)柱溫37℃流速1ml/分鐘流動相乙腈(和光純藥工業株式會社制，HPLC用)與50mM NH4H2PO4水溶液之比為55∶45的混合物檢測器Waters 996光電二極體陣列檢測器(Waters Corp.制)波長230nm分析時間10分鐘(d)計算被微生物所吸收的阿特拉津的量根據下列方程，由上述(c)所確定的未被微生物吸收的阿特拉津的量計算被微生物所吸收的阿特拉津的量。
Y＝X-(S/C)×XY被微生物所吸收的阿特拉津的量X加入到反應溶液中的阿特拉津的量S未被微生物所吸收的阿特拉津的峰面積C沒有微生物存在時反應溶液中所含的阿特拉津的峰面積(4)微生物對大鼠的雙酚A的排洩的影響(a)試樣食物的製備以及動物實驗組的準備根據AIN-76組合物(美國營養學會特別委員會關於營養研究標準的報告(Report of the American Institute of Nutrition Ad Hoc Committeeon Standards for Nutritional Studies)；J.Nutr.，107，1340 1977)製備表2所示的試樣食物組合物。採用了4個實驗組，每組由8隻動物組成。給其中3個組中的每隻動物餵含有2.5％、5％或10％凍幹的活細菌的食物，給其他組(對照組)餵不含細菌的食物。每份食物均含有15％的脫脂奶粉，在凍幹細菌時，該脫脂奶粉被用作保護劑。食物組合物如下表2所示。
表2
(b)動物及其餵食方法飼養Fisher 2344雌性大鼠(鼠齡10周，由Clea Japan，Inc.公司提供)直到其適應環境(用Oriental Yeast Co.，Ltd.公司生產的MF食物自由給食)。一周後，將該大鼠按體重分為7組。用試驗食物給食12天，在此期間，根據大鼠的需求儘量為其提供多的食物和水。飼養條件為室溫25℃，相對溼度55％，12小時光照和12小時黑暗交替進行。(c)雙酚A的施用方法及排洩物的收集方法用試驗食物飼養這些動物5天後，禁食一夜。次日，施用10g含有100μg雙酚A的試驗試樣食物。在開始施用雙酚A後，收集全部的排洩物並凍幹7天。(d)從排洩物中分離雙酚A按照《廢水中擾亂內分泌的化學物質的檢測手冊》(MANUAL FORINVESTIGATION OF ENDOCRINE DISRUPTING CHEMICALS IN SEWERAGE)(日本廢水工程技術學會(Japan Institute of Wastewater EngineeringTechnology))和《擾亂內分泌的化學物質(環境激素)的分析》(ANALYSISOF ENDOCRINE DISRUPTING CHEMICALS(ENIRONMENT HORMONES))(III)(GLSciences，Inc.)中所描述的方法從排洩物中分離雙酚A。
採用一種用於檢測殺蟲劑殘餘物的有機溶劑來提取雙酚A。將0.5g凍幹的排洩物放入玻璃試管，加入1μg雙酚A-d16(代用藥)和10ml甲醇。劇烈振蕩該混合物(200次/分鐘)。將離心(2,000rpm，20分鐘)得到的上清液收集在一個單獨的玻璃試管中。向殘餘物中加入10ml甲醇。劇烈振蕩該混合物，然後與此前得到的上清液混合。將該上清液(約20ml)濃縮至約5ml。加入0.125ml純淨水和2.5ml正己烷之後，將該混合物劇烈振蕩(200次/分鐘)。10分鐘後，正己烷層消失，然後將2.5ml新的正己烷加入甲醇層，將該混合物劇烈振蕩(200次/分鐘)。10分鐘後，將甲醇層濃縮至約1ml，通過加入0.125N HCl水溶液將所得的濃縮物調節pH值至3。
向該溶液中加入4ml 3.75％的鹽水和5ml二氯甲烷，將該混合物劇烈振蕩(200次/分鐘)。10分鐘後，將下部的二氯甲烷層轉移到一個單獨的玻璃試管中。向上層加入5ml新的二氯甲烷，將該混合物劇烈振蕩(200次/分鐘)。10分鐘後，將該二氯甲烷層與此前得到的二氯甲烷層混合，然後將該混合物濃縮至約5ml。向該濃縮物中加入1.5g無水硫酸鈉進行脫水。將該溶液加載到矽膠柱(40mm×12mm)上，加入10ml正己烷，同時排出洗出液。接下來，加入10ml丙酮，同時收集洗出液。將所得到的洗出液乾燥至固化，向其殘餘物加0.26ml的二氯甲烷，以便重新溶解雙酚A。
加入BSTFA將酚基進行三甲基矽烷化。使該混合物在室溫下放置1小時。在三甲基矽烷化反應之後，加入0.1ml菲-d10(內標物)的二氯甲烷溶液(10μg/ml)，在下述條件下用氣相色譜/質譜(GC/MS)對雙酚A進行定量分析。(e)GC/MS測定條件GC/MS的測定與上述(2)(d)的方法相同。(f)雙酚A的定量分析由GC/MS測定所得到的雙酚A的三甲基矽烷基化(TMS)產物的峰面積與雙酚A-D16的峰面積之比得到校準曲線，用該校準曲線確定被檢測的雙酚A的量。然後根據測得的量、注射到GC/MS裝置中的試樣的量、測試中所用的排洩物的量以及濃度放大等，按下式計算雙酚A的量。
Y＝D×(L×1000/I)/FY被微生物所吸收的雙酚A的量(μg/g)D由GC/MS檢測得到的量(μg)L試樣的最終液量(ml)I注射到GC/MS中的試樣的量(μl)F測試中所用的排洩物的量(g)(g)盲腸內容物中活細菌數量的測定按照上述(a)的方法給大鼠施用活細菌12天，用戊巴比妥麻醉大鼠後取出盲腸，然後在冰中保存。按照Yuki等(Norikatsu YUKI，YukikoSAKAITANI，Yoko TAGAMI，and Masami MORTOMI，發酵乳中的Lactobacilluscasei Strain Shirota在消化道中的殘餘物的性質(Digestive TractRemaining Properties Of Lactobacillus casei Strain Shirota InFermented Milk)，營養食品雜誌(Journal of Nutrition Food)2，1-6，1999)或Asahara等(Takashi ASAHARA，Kensuke SHIMIZU，Yuji OHASHI，Takahiro MATSUKI，Kazumasa MATSUMOTO，Toshiihiko TAKADA，NorikatsuYUKI，Hirooo TAKAYAMA，and Ryuichiro TANAKA，雙歧桿菌-發酵乳對人類泌尿系統誘變性的影響——攝入熟的攪細的牛肉後該影響增加了(TheEffects of Bifidobacteria-Fermented Milk on Human UrinaryMutagenicity，Which Increases Following Ingestion of Cooked GroundBeef)，腸內微生物學雜誌(Journal of Intestinal Microbiology)，12，89-96，1999)的方法測定盲腸內容物中活細菌的數量。(h)統計分析根據Dunnett的多因素對照方法對所得數據進行統計分析。實施例1乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029對雙酚A的吸收(1)根據上述(1)(a)所描述的試樣製備方法得到乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌或熱處理細菌。採用這些試樣測定了該微生物的濃度與雙酚A的量之間的關係。製備不同濃度(0、0.625、1.25、2.5、5和10g/l)的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029的活細菌或熱處理細菌的試樣。將40μg的雙酚A加入到這些試樣中並反應，隨後用氣相色譜分析殘留在上清液中的雙酚A的量，從而確定被吸收的雙酚A的量。結果如圖1所示。(結果)如圖1所示，乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029所吸附的雙酚A的量隨反應溶液總中該細胞濃度的增加而增加。活細菌或熱處理細菌均顯示出了吸收作用。已經確定雙酚A對熱處理細菌的吸收多於對活細菌的吸收。於是本發明的活細菌和熱處理細菌均顯示出了吸收性。
因此，可以確定，採用這些微生物製備的食物和飲料不一定需要含有活細菌，而是這些食物和飲料可以在很寬的條件範圍如溫度、pH等下製備。實施例2乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029對雙酚A的吸收(2)採用微生物乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌研究了細菌濃度、吸收的雙酚A的量以及殘餘的雙酚A的量之間的關係。製備不同濃度(0、0.625、1.25、2.5、5和10g/l)的乾酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)YIT 9029活細菌試樣。向這些試樣加入20μg雙酚A。反應後，分別按照上述(1)(c)和(1)(e)所描述GC/MS方法和氣相色譜方法，並按照上述(1)(d)和(f)所述的計算公式，對被細菌所吸收的的雙酚A和殘餘的雙酚A的量進行定量分析。結果如表2所示。(結果)如表2所示，被乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029所吸收的雙酚A的量隨反應溶液中微生物的濃度增加而增加。相比之下，離心或殘留在上清液中的雙酚A的量則隨微生物的濃度增加而降低。在此情形下，被吸收的雙酚A的量與殘留在上清液中的雙酚A的量之和與加入到反應溶液中的雙酚A的量(20μg)相等。
這表明，所有未被細菌吸收的雙酚A都存在於離心後的上清液中。所以，根據離心後殘留在上清液中的雙酚A的量所計算出來的被細菌吸收的雙酚A的量就等於實際被細菌所吸收的雙酚A的量。實施例3乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029對雙酚A的吸收(3)採用微生物乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌和熱處理細菌以及進行動物試驗的食物(商品名「F-2」，船橋農場社制)研究了微生物濃度或食物與被吸收的雙酚A之間的關係。製備不同濃度(0、0.625、1.25、2.5、5和10g/l)的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029活細菌和熱處理細菌以及食物試樣。向這些試樣加入40μg雙酚A並進行反應。隨後按照氣相色譜方法分析殘留在上清液中的雙酚A的量，以確定被吸收的雙酚A的量。結果如圖3所示。(結果)如圖3所示，在一定的食物濃度範圍內，被乾酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)YIT 9029所吸收的雙酚A的量隨反應溶液中細胞濃度的增加而增加。另一方面，如圖4所示，一定濃度範圍內的乾酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)YIT 9029細胞所吸收的雙酚A的量不受反應溶液中食物濃度的影響。
這些結果表明，乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029細胞在人和動物的消化道內選擇性地吸收雙酚A的能力不受食物存在與否的影響。實施例4乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029對雙酚A的吸收(4)採用微生物乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌和熱處理細菌研究了pH值與被吸收的雙酚A的量之間的關係。20mg的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029細胞和40μg雙酚A溶於4ml的緩衝溶液中並加熱至37℃。60分鐘後，測定吸收量。製備pH2-9的試樣溶液。向20mM的KH2PO4水溶液中加入鹽酸，製得pH為2到4的緩衝溶液。將20mM的KH2PO4水溶液與20mM的K2HPO4水溶液混合製得pH為5到8的緩衝溶液，由20mM的K2HPO4水溶液製得pH為9的緩衝溶液。結果如圖5所示。(結果)如圖5所示，當採用乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的熱處理細菌時，不論反應溶液的pH值如何，被吸收的雙酚A的量幾乎是相同的。相比之下，在酸性範圍(pH2)內，活細菌吸收了較多量的雙酚A。在任何pH範圍內，熱處理細胞比活細菌吸收的雙酚A的量要多。
該結果肯定地表明，消化道從食道到肛門的各個部分的pH值不同，但其中的微生物均具有吸收雙酚A的能力。此外，採用活細菌或死細菌均顯示出了吸收作用。實施例5乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029對雙酚A的吸收(5)採用微生物乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌和熱處理細菌研究了反應時間與被吸收的雙酚A的量之間的關係。20mg的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029細胞和40μg雙酚A懸浮於4ml的緩衝溶液中並加熱至37℃。分別在1分鐘、2分鐘、5分鐘、10分鐘、30分鐘、60分鐘和1440分鐘(24小時)後測定吸收量。結果如圖6所示。(結果)如圖6所示，當採用活細菌或熱處理細菌時，在反應開始後均很快就達到了雙酚A的最大吸收量，而且在全部24小時(1440分鐘)的測試過程中一直保持了吸收作用。
該結果表明，吸收了雙酚A的微生物可被沿消化道輸送到肛門並作為排洩物排出，而在此過程中不釋放出雙酚A。實施例6不同微生物對雙酚A的吸收20mg的活細菌或熱處理細菌以及40μg的雙酚A懸浮於4ml的緩衝溶液中，並在37℃的溫度下靜置。60分鐘後，測定離心後上清液中殘留的雙酚A的量，以確定被細菌所吸收的雙酚A的量。用1mg細胞所吸收的雙酚A的量(μg)來表示被微生物所吸收的雙酚A的單位量。結果如圖7所示。
作為對照，研究了據說能夠吸收擾亂內分泌的化學物質的纖維素對雙酚A的吸收能力。動物試驗中採用了作為食物纖維的植物纖維素(東洋濾紙公司生產)和細菌纖維素(由Acetobactor pasteuria YIT 6109製得的纖維素)，該細菌纖維素比植物纖維素具有更細的纖維結構。結果圖8所示。(結果)如圖7所示，儘管不同種類的微生物所吸收的雙酚A的量不同，但本發明所有的微生物都能夠吸收雙酚A。所有的微生物的活細菌和死細菌均吸收了較大量的雙酚A。
另一方面，如圖8所示，植物纖維素幾乎沒有吸收雙酚A。具有比植物纖維素更細的纖維結構的細菌纖維素也吸收了雙酚A，但其對雙酚A的吸收作用明顯小於本發明的微生物。
該結果表明，並非在任何條件下任何食物纖維和微生物均對雙酚A有吸收作用，這僅是本發明的腸細菌的固有性質。實施例7不同微生物對4-壬基酚的吸收試驗2.5mg的活細菌和40μg的4-壬基酚懸浮於4ml的緩衝溶液中，並在37℃下靜置。60分鐘後測定被細胞所吸收的4-壬基酚的量。用1mg細胞所吸收的4-壬基酚的量(μg)來表示4-壬基酚的吸收量。結果如圖9所示。(結果)如圖9所示，儘管不同種類的微生物所吸收的4-壬基酚的量不同，但本發明的所有微生物都吸收了4-壬基酚。所有的微生物的活細菌和死細菌均吸收了較大量的4-壬基酚。實施例8不同微生物對阿特拉津的吸收試驗20mg的活細菌或熱處理細菌以及40μg的阿特拉津懸浮於4ml的緩衝溶液中，並在37℃下靜置。60分鐘後測定被細胞所吸收的阿特拉津的量。用1mg細胞所吸收的阿特拉津的量(μg)來表示微生物所吸收的阿特拉津的單位量。結果如圖10所示。(結果)如圖10所示，儘管不同種類的微生物所吸收的阿特拉津的量不同，但本發明的所有微生物都吸收了阿特拉津。所有的微生物的活細菌和死細菌均吸收了較大量的阿特拉津。實施例9大鼠消化道內乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029或短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065對雙酚A的吸收採用微生物乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029或短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065研究了所施用的細菌的量與雙酚A的排洩量之間的關係。加入凍幹的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029或短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065細菌至最終濃度為0％、2.5％、5％和10％，從而製備得到作為試樣的動物食物。作為對照，採用了加入食物纖維素(東洋濾紙制)至最終濃度為10％而得到的食物。按照(4)(c)所述的步驟，在給動物飼餵試樣食物5天後禁食一晚，施用10g含有100μg雙酚A的試樣食物。
從開始施用雙酚A之後，收集7天的全部排洩物，測量排洩物的重量、排洩物中雙酚A的量、食物的消耗量以及體重的增加。此外，測定開始施用試樣食物後第7天大鼠盲腸內容物中活細菌的數量。(結果)如圖11所示，7天中對照組的大鼠排洩物中的雙酚A的量為17μg，僅為所施用的雙酚A(100μg)的17％。另一方面，施用了乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029或短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065的大鼠，其排洩物中雙酚A的量隨所施用的細菌量的增加而增加。可以確定，給動物飼餵含有10％該細菌的食物時，所施用的45-48％的雙酚A被排洩掉了。在試驗期間，測試組大鼠的體重和食物消耗量均未發生變化。
另一方面，如圖12所示，在施用雙酚A的頭7天裡，排洩物的量隨細菌施用量的增加而增加。此外，如圖13所示，在施用雙酚A後的第7天，大鼠盲腸內容物中的活細菌的數量隨細菌施用量的增加而增加。該結果表明，施用細菌後腸內的活細菌增加了，而這促進了排洩。
進而，如圖14所示，不同的組中大鼠排洩物中排洩出的雙酚A的濃度不同，但與對照組及施用了植物纖維素的組相比，所有施用了細菌的組均顯示排洩物中雙酚A的濃度有明顯的增加。
所有這些結果均表明，乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029和短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065能夠抑制消化道內隨食物攝入的雙酚A的吸收，並能促進雙酚A通過排洩物的排洩。該結果還表明，通過施用細菌使排洩物中雙酚A的排洩增加，其原因不僅在於施用細菌之後排洩物增加了，而且在於細菌對雙酚A的吸收也增加了。實施例10不同食物組合物的製備採用本發明的微生物製備了各種食物組合物。配方如下所示，但不應當將其認為是對本發明的限制。(1)保健品(片狀)按下述方法製成片狀組合物。
(組分) 含量(wt％)幹的腸細菌細胞1)10植物提取物粉末 30蜂王漿粉5膠原蛋白粉 5乳糖25玉米澱粉20羥丙基纖維素4硬脂酸鎂11)通過將由實施例1得到的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌或熱處理細菌凍幹進行製備。(2)保健飲品按下述配方製成保健飲品。
(組分)含量(wt％)幹的腸細菌細胞1)5
蜂蜜 15枸櫞酸0.1dl-馬來酸 0.1植物提取物液體(肉桂) 20D-山梨糖醇溶液(70％) 10苯甲酸鈉 0.05香料 適量純淨水餘量1)通過將由實施例1得到的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌或熱處理細菌凍幹進行製備。(3)果汁按下述配方製成果汁。
(組分)含量(wt％)幹的腸細菌細胞1)5液態纖維素33葡萄汁60香料 適量酸味劑適量1)通過將由實施例1得到的乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029的活細菌或熱處理細菌凍幹進行製備。(4)發酵乳按下述配方製成發酵乳。(A)由一種微生物菌株製得的發酵乳對10％的脫脂奶粉和5％的葡萄糖的混合物殺菌，在其中植入腸細菌，從而製成發酵乳。採用下述任一種腸細菌製備8種發酵乳乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT 9029、嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidphilus)YIT 0168、短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT 4065、兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)YIT 4007、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YIT 2027、嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophilus)YIT 2001、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT2021和屎腸球菌(Enterococcus faecium)YIT 2039。所得到的發酵乳中細胞的量在0.1g/l至10g/l之間(活細菌的數量約4×108到4×1010個細胞/ml)。所有的發酵乳都具有香氣並且非常可口。(B)用多種微生物菌株的組合製得的發酵乳對10％的脫脂奶粉和5％的葡萄糖的混合物殺菌，在其中植入下列腸細菌的組合，從而製成10種發酵乳。
組合1嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidphilus)YIT0168和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合2短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT4065和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合3兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)YIT4007和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合4乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YIT2027和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合5嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT2001和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合6嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT2021和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合7屎腸球菌(Enterococcus faecium)YIT2039和乾酪乳桿菌(Lactobacillus casei)YIT9029組合8短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT4065和兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)YIT4007和嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidphilus)YIT0168組合9嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT2021和短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT4065和嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidphilus)YIT0168
組合10嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)YIT2001和短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)YIT4065和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YIT2027所得到的發酵乳中細胞的量在0.1g/l至10g/l之間(活細菌的數量約4×108到4×1010個細胞/ml)。所有的發酵乳都具有香氣並且非常可口。
工業實用性如上所述，腸細菌或其成分的活細菌或死細菌能夠吸收擾亂內分泌的化學物質，在人和動物的消化道內，所述細菌能吸收並清除經口攝入的擾亂內分泌的化學物質如雙酚A、4-壬基酚和阿特拉津，而且，所述細菌不僅能抑制這類化學物質的體內吸收，而且能夠促進被體內吸收的這類化學物質的排洩。因而，該細胞及其成分對於防止人類的器官被擾亂內分泌的化學物質的侵襲非常有用。
腸細菌已被用來製備食物如乳酸菌飲料、酸奶等，這類細菌是不會致病的非常安全的微生物。
因此，本發明的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑含有上述腸細菌細胞，該吸收劑不僅能作為藥物或口服製劑，而且能被加入到食物中供日常食用。於是，本發明的吸收劑對於保護人類不被擾亂內分泌的化學物質的侵襲並保持人體健康非常有用。
權利要求
1.擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，其中含有活的或死的腸細菌或該細菌的成分作為活性成分。
2.權利要求1的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，其中的擾亂內分泌的化學物質為雙酚、烷基酚或三嗪。
3.權利要求1的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，其中的腸細菌為下列微生物中的一種或多種，所述微生物選自由屬於下列菌屬的腸細菌組成的組乳桿菌屬(Lactobacillus)、雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、乳球菌屬(Lactococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、腸道球菌屬(Enterococcus)、Weissella、明串珠菌屬(Leuconostoc)、Tetragenococcus、丙酸桿菌屬(Propionibacterium)、類桿菌屬(Bacteroides)、梭菌屬(Clostridium)、Prevotella和真桿菌屬(Eubacterium)。
4.權利要求1或3的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，其中的腸細菌具有抑制人和動物的腸道對擾亂內分泌的化學物質的吸收的作用。
5.權利要求1或3的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，其中的腸細菌具有促進擾亂內分泌的化學物質排洩的作用。
6.權利要求1到5任一項的擾亂內分泌的化學物質的吸收劑，其中採用了腸細菌的熱處理細菌。
7.含有吸收劑的食物，所述吸收劑為權利要求1到6任一項擾亂內分泌的化學物質的吸收劑。
8.抑制人或動物對擾亂內分泌的化學物質的體內吸收的方法，所述方法包括給人或動物施用擾亂內分泌的化學物質的吸收劑的步驟。
9.促進從人或動物體內排洩擾亂內分泌的化學物質的方法，所述方法包括給人或動物施用擾亂內分泌的化學物質的吸收劑的步驟。
全文摘要
擾亂內分泌的物質的吸收劑，其中所含的活性成分為腸細菌微生物的活的或死的細胞或該微生物細胞的成分。當攝入了以雙酚、烷基酚和三嗪為代表的擾亂內分泌的物質或被這類物質所汙染的食物和飲料時，日常或在攝入上述物質的同時口服該吸收劑，可以抑制這類物質被身體吸收，而且這類擾亂內分泌的物質一旦被身體吸收，該吸收劑還可促進其從體內排洩。
文檔編號C12N1/21GK1429115SQ01809593
公開日2003年7月9日 申請日期2001年5月14日 優先權日2000年5月16日
發明者大石憲司, 澤田治司, 橫井稚惠, 吉田康人, 渡邊常一 申請人:株式會社養樂多本社