桃樹休眠解除的檢測方法
2023-09-16 17:01:35 1
專利名稱：桃樹休眠解除的檢測方法
技術領域：
屬於設施果樹栽培領域。
背景技術：
在桃樹的促成栽培、提早促成栽培中，準確掌握桃樹的休眠期， 是爭取提前上市和栽培成功的關鍵，休眠時間過長推遲成熟期，休眠時間不足 不能夠發芽。因此，對桃樹休眠期的預測顯得很重要。多年來科技工作者建立 了四種模型用於計算休眠期，即猶它模型、0 7'C模型、低於7'C模型、動態模 型。近年來鄭州果樹所等單位對桃樹的休眠需冷量多個品種進行了估算，然而 這種估算值只是一個大致的需冷量數值，各計算模型的計算結果是不同的而且 相差很大。同一品種在不同地區之間、同一地區的不同年份之間採用相同模型 計算，也存在較大差異。桃樹休眠時間的長短因脫葉時期、環境溫度、水分狀 況等差異而變。目前休眠期估算的方法是，在田間設置溫度自動記錄裝置，記 錄每一時刻的溫度。每天採取枝條放入24"C培養箱中水培，每隔2天剪去枝條 基部0.5釐米露出新茬以利吸水，連續觀察15天，發芽率能夠超過50%的才算 解除休眠，那麼這一天與休眠開始期間所經歷的有效低溫時間作為這個品種的 休眠小時數，也可叫做需冷量。採用這種方法雖然知道了桃樹的休眠期，但時 間已經過去了半個月，作為生產上應用為時已晚；採用需冷量估算的方法不僅 需要進行為期近2個月的溫度記錄和溫溼度管理，而且帶有很大的盲目性。
用於種子生活力測定的方法——四唑測定於1942年由德國Soealed Hoheneim學校的H. LakOn(萊康)教授發明，目前已經成為全世界最先進和實用 的種子四唑測定技術，在650多個屬和種的農業、蔬菜、林木、牧草、藥材和 花卉種子中得到應用。四唑測定具有原理可靠、結果準確、不受休眠限制、方法簡便、省時快速、成本低廉等特點。所以四唑測定是世界公認並得到廣泛應 用的種子生活力測定方法之一。
發明目的本發明的主要目的是探索一種簡單、方便、快速準確、成本低廉， 能夠指示桃樹花芽休眠解除的方法。
發明內容
桃樹生長發育到一定階段即進入休眠狀態，休眠期是一個生長相 對緩慢的發育時期，是花芽生長到一定階段後積極的生理反映。這個花芽的發 育時期需要7'C左右的低溫支持，在這個過程中花芽的形態和內含物發生著極其 細微的變化，當休眠到一定程度將發生質的變化，即解除了休眠期。休眠解除 時期的及時準確掌握，是設施果樹開始升溫的指導依據。將測定種子生活力的 四唑染色方法運用到桃樹花芽休眠的檢測上，是一種新的嘗試，本來種子生活 力的測定不受休眠限制，而在這裡卻用於檢測花芽休眠。這項技術是建立在試 驗基礎之上的，試驗要求花芽在規定時間內能夠染色才是解除休眠，種子染色 則需要預處理和較長時間，這是桃樹休眠生理與種子生潔力測定原理相結合的 產物。
休眠檢測原理桃樹真休眠後期，能量代謝從磷酸戊糖途徑(PPP)轉換為 三羧酸循環途徑(TCA);四唑溶液做為一種無色的指示劑被芽吸收，接受細胞 內三羧酸代謝途徑中釋放出來的氫離子，被還原成一種紅色、穩定、不會擴散 和不溶於水的三苯基甲替。其特點是檢測方法簡單，速度快，可以實現即時檢
試劑的配製
四唑染色液四唑全稱為2， 3， 5-氯化(或溴化)三苯基四氮唑，簡稱為四唑
或紅四唑。英文名為2， 3， 5-Triphenyl TetrazoliumChloride(Or Bromide),縮寫TTC(TTB)或TZ。分子式為C19H15N4C1，分子量334.8，為白色或淡黃色的粉劑， 溶點243°C，易溶於水，具有微毒。四唑染色通常使用濃度為0. 1% 1.0%的四 唑溶液。稱取1. 0克紅四唑溶於100克蒸餾水中即為1. 0%的四唑溶液。四唑遇 到直射光線會被還原成粉紅色，因此，該試劑需用棕色瓶盛裝，並用黑紙外面 包裝。同樣，己配好的四唑溶液也應裝入棕色玻璃瓶裡，存放在暗處。在進行 休眠解除的檢測時，也需將其放在暗處。
磷酸緩衝液的配製為保證四唑的染色效果，要求四唑溶液的pH值必須在 6.5 7.5範圍之內。當四唑溶液的pH值不在這一範圍之內時，建議採用磷酸緩 衝液來配製。首先配兩種母液I和II，母液I為稱取9. 087克磷酸二氫鉀溶於 1000毫升蒸餾水中，母液II為稱取9. 472克磷酸氫二鈉溶於1000毫升蒸餾水 中，然後取母液I 2份和母液I1 3份混合而成。
用磷酸緩衝液配製四唑溶液的方法取母液I 40毫升和母液I1 60毫升混 合，稱取1. 0克四唑粉末，用上述混合液定容至100毫升，即為pH值7. 5的1. 0% 的四唑溶液。
具體實施例方式將花芽縱切，用O. 1% 1.0%的四唑水溶液浸泡，要求四唑溶 液的pH值必須在6. 5 7. 5範圍之內，四唑溶液可以採用磷酸緩衝液來配製。 顯色反應的溫度範圍為20 °C 45 "C，在設定的溫度下於黑暗處進行顯色反應。 要求的顯色時間為20分鐘到2小時，在要求時間內花芽切面顯示紅色為解除休 眠。鑑定時藉助放大鏡或解剖顯微鏡觀察。用過的四唑溶液不可以重複使用。
實施例1: 取正在休眠階段或休眠剛剛解除或休眠已經解除的桃樹花芽，用刀 片將花芽縱切，放入染色皿中，加入1.0%濃度的四唑水溶液，以淹沒芽片為度，移置在35 'C恆溫箱內進行染色反應，恆溫箱內要保持黑暗。若沒有恆溫箱也可 以用人的體溫捂熱染色皿進行顯色反應。顯色反應1小時，藉助放大鏡或解剖 顯微鏡觀察，花芽切片染成紅色的為花芽已經解除休眠期。
實施例2: 取正在休眠階段或休眠剛剛解除或休眠己經解除的桃樹花芽，用刀
片將花芽縱切，放入染色皿中，加入用磷酸緩衝液配製的pH值7. 5的1. 0%的四 唑溶液。以淹沒芽片為度，移置在35 'C恆溫箱內進行染色反應，恆溫箱內要保 持黑暗。若沒有恆溫箱也可以用人的體溫捂熱染色皿進行顯色反應。顯色反應l 小時，藉助放大鏡或解剖顯微鏡觀察，花芽切片染成紅色的為花芽已經解除休 眠期。
權利要求
1、一種桃樹休眠解除的檢測方法，其特徵是將花芽縱切，用四唑溶液浸泡，在設定的溫度下於黑暗處進行顯色反應，於規定的時間內花芽切面顯示紅色為解除休眠。
2、 根據權利要求1所述的桃樹休眠解除的檢測方法，其特徵是 所述的四唑溶液為2， 3， 5-氯化(或溴化)三苯基四氮唑，簡稱 為四唑或紅四唑0. 1% 1. 0%的水溶液。要求四唑溶液的pH值必須在6. 5 7. 5範圍之內，四唑溶液可以採用磷酸緩衝液來配 制。
3、 根據權利要求1所述的桃樹休眠解除的檢測方法，其特徵是所述的設定溫度為顯色反應的溫度範圍為2(TC 45i:。
4、 根據權利要求1所述的桃樹休眠解除的檢測方法，其特徵是所述的顯色反應時間為20分鐘到2小時。
全文摘要
該項技術屬於設施果樹栽培領域。桃樹生長發育到一定階段即進入休眠狀態，休眠期是一個生長相對緩慢的發育時期，這個發育時期需要7℃左右的低溫支持，在這個過程中花芽的形態和內含物發生著極其細微的變化。當休眠到一定程度將發生質的變化，即解除了休眠期。如果休眠時間過長將推遲成熟期，休眠時間不足則不能夠發芽，因此，休眠解除時期的及時、準確掌握，是設施果樹開始升溫的指導依據。在桃樹的促成栽培、提早促成栽培中，準確掌握桃樹的休眠期，是爭取提前上市和栽培成功的關鍵。而採用需冷量估算的方法不能滿足生產需要。這裡提供了一種簡單、方便、快速準確、成本低廉，能夠指示桃樹花芽休眠解除的方法。
文檔編號G01N21/78GK101514965SQ200810074139
公開日2009年8月26日 申請日期2008年2月22日 優先權日2008年2月22日
發明者友 傅, 張新生, 王召遠, 王學軍, 湖 陳 申請人:河北省農林科學院昌黎果樹研究所