一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的方法
2023-09-12 14:19:10 1
專利名稱：一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的方法
技術領域：
本發明涉及一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的工藝，特別是一種高速逆流色譜分離莫諾苷和馬錢苷的工藝。
背景技術：
山茱萸(Fructus Corni)為山茱萸科植物山茱萸 Cornus Officinalis Sieb. et Zucc.的乾燥果肉，又名山萸肉、藥棗、肉棗等。是一種滋補類名貴藥材，具有補益肝腎、澀精固脫的功效。近年來研究顯示，山茱萸具有抗失血性休克、抑制血小板聚集、免疫調節、抗炎、降血糖、抗氧化、抗癌、抗菌等作用。山茱萸主要含環烯醚萜苷、多糖、有機酸、鞣質等成分，以莫諾苷和馬錢苷含量最高。我國自古就有山茱萸應用於糖尿病(中醫稱「消渴症」)治療的記載，國內外眾多現在藥理學研究表明，山茱萸環烯醚萜苷類物質是降糖的主要活性部位，許慧琴等研究了山茱萸環烯醚萜總苷對實驗型糖尿病腎病變的保護作用；皮文霞等「正交法優選山茱萸抗衰老有效部位的提取工藝」表明山茱萸環烯醚萜苷類除了具有降血糖及抗糖尿病併發症夕卜，還具有抗衰老作用。山茱萸中的環烯醚萜類，溶於水、低碳醇，不溶於石油醚，微溶於氯仿，乙酸乙酯。現有莫諾苷分離方法大都採用水提醇沉和大孔樹脂柱吸附。如專利「山茱萸提取物莫諾苷的製備方法和用途」(申請號為200410014771. 2)，該專利公開的方法是山茱萸藥材用乙醇提取，減壓濃縮，濃縮液加水沉澱，上清液用大孔吸附樹脂或活性炭進行柱層析， 水和稀醇洗去雜質，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮並乾燥後，經反相矽膠分離得到粉末狀山茱萸提取物莫諾苷，該方法用水和稀醇洗脫雜質，再用乙醇洗脫有效成分，所得產品純度高，但有效成分損失較多，從而降低了提取率。專利「莫諾苷的製備方法及其新用途」(申請號為2007101138 . X)，該專利公開的製備方法是將山茱萸藥材水提醇沉，醇沉液調PH至1-3，兩次上大孔樹脂，水和低濃度乙醇洗脫，洗脫液低溫減壓乾燥，結晶即得產品， 該方法雖然操作簡單，但醇沉液需加酸調PH，而莫諾苷屬於環烯醚萜苷類，對酸較敏感，結構易發生改變。而馬錢苷的提取分離方法則很少。
發明內容
本發明的目的是為了提供一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的工藝。本發明的目的是這樣來實現的一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的方法，其特徵在於包括以下幾個步驟1)提取將乾燥山茱萸粉碎，用6-8倍量的70%乙醇超聲提取2-3小時，提取2_3 次，合併提取液；2)萃取將上述提取液濃縮至無醇，加水分散，加等體積的正丁醇萃取2-4次，正丁醇萃取液濃縮回收正丁醇，至幹，得到粗苷；3)高速逆流色譜分離以正丁醇-乙醇-水為兩相溶劑系統，將上述粗苷用下相
3溶解，以上相為固定相，下相為流動相，流出物分別減壓蒸乾；4)結晶將上述乾燥物正丁醇加熱溶解，再加5-8倍量乙酸乙酯結晶2-3次，乾燥艮口得廣品。步驟3)中使用的兩相溶劑為正丁醇-乙醇-水G 5 1 3 5 7)，色譜儀轉速為800 1000r/min，流動相的流速為1 2. 5ml/min。綜上所述，本發明存在以下優點1)醇溶液常溫提取，能耗低。2)採用HSCCC，分離效果好，溶劑用量小，無需使用載體，減少了過程中的損失。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 取Ikg乾燥山茱萸粉碎，用6L70%乙醇超聲提取3小時，提取3次，合併提取液，濃縮無醇，加IL水分散，加等體積的正丁醇萃取4次，正丁醇層濃縮回收正丁醇至幹，得到粗苷，取800ml正丁醇、200ml乙醇和IOOOml水，超聲波振蕩混合，轉移至分液漏鬥，靜置分層， 分出上下相，以上相為固定相，下相為流動相。上述粗苷用350ml下相溶解，將上相用泵以 lOml/min的流量灌滿色譜柱，將柱的首端與進樣閥相接，開啟速度控制器，使螺旋管順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為950r/min時，以流速為2. 5ml/min泵入流動相，並通過進樣閥進樣，每次進樣量為150mg，分別收集莫諾苷成分和馬錢苷成分，分別減壓蒸乾，乾燥物分別用 200ml正丁醇加熱溶解，再加IL乙酸乙酯結晶3次，濾出乾結晶燥即得莫諾苷7. 3g，含量 95. 1%，馬錢苷 6. lg，含量 95. 3%。實施例2 取Ikg乾燥山茱萸粉碎，用8L 70%乙醇超聲提取3小時，提取2次，合併提取液， 濃縮無醇，加800ml水分散，加等體積的正丁醇萃取3次，正丁醇層濃縮回收正丁醇至幹，得到粗苷，取700ml正丁醇、400ml乙醇和IOOOml水，超聲波振蕩混合，轉移至分液漏鬥，靜置分層，分出上下相，以上相為固定相，下相為流動相。上述粗苷用300ml下相溶解，將上相用泵以lOml/min的流量灌滿色譜柱，將柱的首端與進樣閥相接，開啟速度控制器，使螺旋管順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為900r/min時，以流速為2ml/min泵入流動相，並通過進樣閥進樣，每次進樣量為250mg，分別收集莫諾苷成分和馬錢苷成分，分別減壓蒸乾，乾燥物分別用300ml正丁醇加熱溶解，再加2. 4L乙酸乙酯結晶2次，濾出乾燥即得莫諾苷7. Sg,含量 92 %，馬錢苷7. Og,含量93.6%。實施例3 取2kg乾燥山茱萸粉碎，用15L 70%乙醇超聲提取2小時，提取3次，合併提取液， 濃縮無醇，加1. 5L水分散，加等體積的正丁醇萃取2次，正丁醇層濃縮回收正丁醇至幹，得到粗苷，取1600ml正丁醇、500ml乙醇和1800ml水，超聲波振蕩混合，轉移至分液漏鬥，靜置分層，分出上下相，以上相為固定相，下相為流動相。上述粗苷用700ml下相溶解，將上相用泵以12ml/min的流量灌滿色譜柱，將柱的首端與進樣閥相接，開啟速度控制器，使螺旋管順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為950r/min時，以流速為lml/min泵入流動相，並通過進樣閥進樣，每次進樣量為150mg，分別收集莫諾苷成分和馬錢苷成分，分別減壓蒸乾，乾燥物分別用250ml正丁醇加熱溶解，再加1. 5L乙酸乙酯結晶2次，濾出乾燥即得莫諾苷18. 5g含量95. 5%，馬錢苷18. 4g，含量93. 8%。實施例4 取2kg乾燥山茱萸粉碎，用14L 70%乙醇超聲提取3小時，提取3次，合併提取液， 濃縮無醇，加1. 8L水分散，加等體積的正丁醇萃取3次，正丁醇層濃縮回收正丁醇至幹，得到粗苷，取1600ml正丁醇、800ml乙醇和MOOml水，超聲波振蕩混合，轉移至分液漏鬥，靜置分層，分出上下相，以上相為固定相，下相為流動相。上述粗苷用600ml下相溶解，將上相用泵以12ml/min的流量灌滿色譜柱，將柱的首端與進樣閥相接，開啟速度控制器，使螺旋管順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為lOOOr/min時，以流速為2. 5ml/min泵入流動相，並通過進樣閥進樣，每次進樣量為150mg，分別收集莫諾苷成分和馬錢苷成分，分別減壓蒸乾，乾燥物分別用500ml正丁醇加熱溶解，再加3乙酸乙酯結晶2次，濾出乾燥即得莫諾苷17. 5g，含量96%，馬錢苷15. 7g，含量96. 2%0實施例5 取5kg乾燥山茱萸粉碎，用40L70%乙醇超聲提取3小時，提取3次，合併提取液， 濃縮無醇，加3L水分散，加等體積的正丁醇萃取3次，正丁醇層濃縮回收正丁醇至幹，得到粗苷，取3. 2L正丁醇、1. 6L乙醇和5. 6L水，超聲波振蕩混合，轉移至分液漏鬥，靜置分層， 分出上下相，以上相為固定相，下相為流動相。上述粗苷用1.5L下相溶解，將上相用泵以 20ml/min的流量灌滿色譜柱，將柱的首端與進樣閥相接，開啟速度控制器，使螺旋管順時針方向旋轉，當色譜儀轉速為800r/min時，以流速為1. 5ml/min泵入流動相，並通過進樣閥進樣，每次進樣量為200mg，分別收集莫諾苷成分和馬錢苷成分，分別減壓蒸乾，乾燥物分別用1. 5L正丁醇加熱溶解，再加IOL乙酸乙酯結晶3次，濾出乾燥即得莫諾苷39. Ig,含量 95. 2%,馬錢苷36. 7g含量為94. 1% ο
權利要求
1.一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的方法，其特徵在於包括以下幾個步驟1)提取將乾燥山茱萸粉碎，用6-8倍量的70%乙醇超聲提取2-3小時，提取2-3次， 合併提取液；2)萃取將上述提取液濃縮至無醇，加水分散，加等體積的正丁醇萃取2-4次，正丁醇萃取液濃縮回收正丁醇，至幹，得到粗苷；3)高速逆流色譜分離以正丁醇-乙醇-水為兩相溶劑系統，將上述粗苷用下相溶解， 以上相為固定相，下相為流動相，流出物分別減壓蒸乾；4)結晶將上述乾燥物正丁醇加熱溶解，再加5-8倍量乙酸乙酯結晶2-3次，乾燥即得女口廣 PFt ο
2.如權利要求1所述的從山茱萸中提取莫諾苷的方法，其特徵在於步驟3)中使用的兩相溶劑為正丁醇-乙醇-水G 5 1 3 5 7)，色譜儀轉速為800 1000r/min， 流動相的流速為1 2. 5ml/min。
全文摘要
本發明涉及一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的方法。工藝步驟包括70％乙醇超聲提取，正丁醇萃取，萃取液濃縮回收正丁醇至幹，得到粗苷，以正丁醇-乙醇-水為兩相溶劑系統，將上述粗苷用下相溶解，高速逆流色譜分離，流出物分別減壓蒸乾，分別將乾燥物用正丁醇和乙酸乙酯結晶2-3次，濾出結晶分別乾燥即得產品。採用本發明生產莫諾苷和馬錢苷，工藝簡單、成本低、產品含量高。
文檔編號C07H17/04GK102477053SQ20101055777
公開日2012年5月30日 申請日期2010年11月25日 優先權日2010年11月25日
發明者劉東鋒, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司