一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽、其提取分離方法及用途的製作方法

2023-09-12 16:27:20 1

專利名稱：一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽、其提取分離方法及用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽、其提取分離方法及其用途，屬於生藥學技術領域。
背景技術：
僵蠶是臨床常用的中藥，為蠶蛾科昆蟲家蠶Bombyx mori L. 4 5齡的幼蟲感染 (或人工接種)白僵菌Beauveria bassiana(Bals.) Vuill.而致死的乾燥體。研究表明，僵蠶醇水浸出液對小鼠、家兔均有催眠、抗驚厥作用；其提取液在體內、 外均有較強的抗凝作用；僵蠶粉有較好的降血糖作用；體外試驗，對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌有輕度的抑菌作用，其醇提取物體外可抑制人體肝癌細胞的呼吸，可用於直腸瘤型息肉的治療。化學成分研究表明，僵蠶含蛋白質，脂肪，多種胺基酸以及鐵、鋅、銅、錳、鉻等微量元素，白僵蠶體表的白粉中含草酸銨，對其所含的主要藥效成分及其藥理作用至今尚不完全了解，從僵蠶中提取的具有鎮痛作用的小分子量糖肽的研究目前尚未見報導。已有報導從古尼蟲草、古尼擬青黴提取糖肽，但古尼蟲草和古尼擬青黴原料來源稀少，價格昂貴， 僵蠶作為一種常用中藥材，具有原料來源廣泛、價格低的優點。

發明內容
本發明的目的在於克服已有技術的不足而提供一種從僵蠶中提取分離的小分子量糖肽、其提取分離方法及其用途，其提取分離方法簡單，分離的小分子量糖肽純度高，回收率高，適宜於工業化生產，得到小分子量糖肽的具有鎮痛作用。本發明的目的可以通過如下措施來達到一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽，其特徵在於其特徵在於小分子量糖肽以僵蠶為原料，通過提取、超濾、濃縮和乙醇沉澱製備得到。一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽的提取分離方法，其特徵在於其包括如下步驟(1)符合國家藥典質量標準的僵蠶藥材，晾乾後粉碎得僵蠶原料；(2)將僵蠶原料中加入與僵蠶原料體積重量比(L/kg)為5-10 1的水， 80°C -100°c提取1. 5-2. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣；濾渣再加入與僵蠶原料體積重量比 (L/kg)為3-5 1的水，80°C _100°C提取0. 5-1. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣；濾渣再加入與僵蠶原料體積重量比(L/kg)為3-5 1的水，80°〇-1001提取0.5-1.5小時，過濾，分離濾液和濾渣，合併三次提取的濾液；(3)將步驟(2)所得的濾液減壓濃縮至原體積的1/5-1/10 ；(4)將步驟C3)所得的濃縮液加入到3-5倍體積的乙醇中，攪拌後靜置、沉澱，除去上層清液部分；沉澱部分離心，收集沉澱物；(5)將步驟(4)所得的沉澱物加入到去離子水中，去離子水與沉澱物的體積重量比(L/kg)為50-100 1，攪拌溶解;(6)將步驟( 所得的溶液用截留分子量6000的膜進行超濾，收集透過液部分；(7)對超濾透過液進行減壓濃縮，至原來體積的1/5-1/10 ；(8)將步驟(7)所得的濃縮液加入到3-5倍體積的乙醇中，攪拌後靜置、沉澱，除去上層清液部分；沉澱部分離心，收集沉澱物，獲得分子量在6000道爾頓以下的小分子量糖肽產品；為了進一步實現本發明的目的，將步驟⑶所得沉澱物用丙酮脫水2-3次， 600C _105°C乾燥，獲得小分子量糖肽產品。為了進一步實現本發明的目的，將步驟(8)所得沉澱物60°C-105°C烘乾、粉碎，獲
得小分子量糖肽產品。一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽用於鎮痛。本發明同已有技術相比可產生如下積極效果本發明以僵蠶為原料分離提取小分子量糖肽，僵蠶原料來源廣泛易得，價格便宜；其提取分離方法簡單，只需要用提取、超濾、 濃縮和乙醇沉澱，就能完成分離和純化，適宜於工業化生產。本發明中分離得到的小分子量糖肽，是首次在僵蠶中發現的具有鎮痛作用的成分。本發明中提取分離小分子量糖肽，可為僵蠶在更多方面的開發利用提供理論支撐，可以開發新的鎮痛藥物。
具體實施例方式下面對本發明的具體實施方式
作詳細說明實施例1 (1)符合國家藥典質量標準的僵蠶藥材Ig，晾乾後粉碎至80目大小顆粒；(2)將粉碎後的僵蠶，加入20L的水，80°C _100°C提取0. 5-2. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣；濾渣再加入IOL水，80°C _100°C提取0. 5-1. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣；濾渣再加入IOL水，80°C _100°C提取0. 5-1. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣。合併三次提取的濾液。(3)取步驟(3)所得的濾液30L減壓濃縮至3L。(4) 3L濃縮液加入到15L乙醇中，攪拌後靜置、沉澱過夜，除去上層清液部分；下層沉澱部分離心，收集沉澱物。(5)取步驟(4)所得的沉澱物0. 05kg加入到5L的去離子水中，攪拌溶解。(6)將步驟( 所得的溶液用截留分子量6000的膜進行超濾，收集透過液部分，得到清液。(7)取4L清液進行減壓濃縮至400ml。(8)將步驟(7)所得的濃縮液400ml加入到2L乙醇中，攪拌後靜置、沉澱過夜，除去上層清液部分；沉澱部分離心，收集沉澱物，獲得分子量在6000道爾頓以下的小分子量糖肽產品60g ；小白鼠扭體實驗法測定小分子量糖肽的口服鎮痛效果如下
權利要求
1.一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽，其特徵在於其特徵在於小分子量糖肽以僵蠶為原料，通過提取、超濾、濃縮和乙醇沉澱製備得到。
2.權利要求1所述的一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽的提取分離方法，其特徵在於其包括如下步驟(1)符合國家藥典質量標準的僵蠶藥材，晾乾後粉碎得僵蠶原料；(2)將僵蠶原料中加入與僵蠶原料體積重量比(L/kg)為5-10 1的水，80°C -IOO0C 提取1. 5-2. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣；濾渣再加入與僵蠶原料體積重量比(L/kg)為 3-5 1的水，80°C _100°C提取0. 5-1. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣；濾渣再加入與僵蠶原料體積重量比(L/kg)為3-5 1的水，80°C -100°C提取0. 5-1. 5小時，過濾，分離濾液和濾渣，合併三次提取的濾液；(3)將步驟( 所得的濾液減壓濃縮至原體積的1/5-1/10；(4)將步驟C3)所得的濃縮液加入到3-5倍體積的乙醇中，攪拌後靜置、沉澱，除去上層清液部分；沉澱部分離心，收集沉澱物；(5)將步驟(4)所得的沉澱物加入到去離子水中，去離子水與沉澱物的體積重量比(L/ kg)為50-100 1，攪拌溶解；(6)將步驟( 所得的溶液用截留分子量6000的膜進行超濾，收集透過液部分；(7)對超濾透過液進行減壓濃縮，至原來體積的1/5-1/10；(8)將步驟(7)所得的濃縮液加入到3-5倍體積的乙醇中，攪拌後靜置、沉澱，除去上層清液部分；沉澱部分離心，收集沉澱物，獲得分子量在6000道爾頓以下的小分子量糖肽產
3.根據權利要求2所述的一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽的提取分離方法，其特徵在於將步驟(8)所得沉澱物用丙酮脫水2-3次，60°C _105°C乾燥，獲得小分子量糖肽產品。
4.根據權利要求2所述的一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽的提取分離方法，其特徵在於將步驟(8)所得沉澱物60°C _105°C烘乾、粉碎，即得小分子量糖肽產品。
5.權利要求1所述的一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽用於鎮痛。
全文摘要
本發明公開了一種從僵蠶中提取的小分子量糖肽、其提取分離方法及用途，中藥材僵蠶粉碎後，通過提取、超濾、濃縮和乙醇沉澱提取分離獲得有功能作用的有效部分糖肽，該小分子量糖肽分子量在6000道爾頓以下，固態呈淺棕色或淺黃色，其提取分離方法簡單，分離的小分子量糖肽純度高，回收率高，適宜於工業化生產，得到小分子量糖肽的具有鎮痛作用，可研製成具有鎮痛作用的藥品，具有價格便宜、藥效顯著、食用安全性好等特點，對於新藥開發具有重要意義。
文檔編號A61K38/02GK102153619SQ20101059696
公開日2011年8月17日 申請日期2010年12月10日 優先權日2010年12月10日
發明者劉靜, 圖力古爾, 程麗芳, 程顯好, 馬天雲, 高興喜 申請人:魯東大學