Mkc－442的製備方法
2023-09-19 09:40:50 1
專利名稱：Mkc－442的製備方法
本申請要求申請日為1999年4月13日的美國臨時申請60/128,925的優先權。
本申請是有關合成藥物化學領域，具體而言，包括製備6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶，即MKC-442的有效方法。
在1983年，確定了獲得性免疫缺陷症候群(AIDS)的病源是人類免疫缺陷病毒(HIV)。目前已知，感染了HIV的人是否發展成AIDS的關鍵因素是在指定時間體內的HIV量(即「病毒負載量」)。研究人員關注的是通過阻斷病毒複製所需的兩種關鍵酶中的一種或兩者而終止HIV複製和減少病毒負載量，所述的兩種酶即為逆轉錄酶和蛋白酶。
第一種酶，即逆轉錄酶，在HIV複製周期的早期具有活性，它允許由RNA構成的病毒進行連續複製所必需的DNA。兩大類藥物可抑制該酶，依據所述藥物的結構和作用機理對它們進行了定義。第一大類，即核苷類似物逆轉錄酶抑制劑，例如3』-疊氮基-3』-脫氧胸苷(AZT)、2』，3』-二脫氧肌苷(ddI)、2』，3』-二脫氧胞苷(ddC)和(-)-順-2-羥甲基-5-(胞嘧啶-1-基)-1，3-氧硫戊環(3TC)與DNA的天然結構單元(核苷)有很大的化學相似性，它們通過替代酶所使用的天然核苷來幹擾所述酶的功能。第二大類，即非核苷逆轉錄酶抑制劑，例如MKC-442和奈韋拉平，是由完全不同的一類化合物組成，它們通過與酶結合併對酶進行修飾而發揮作用，因此其作用較弱。
從1985年，已證明了一些核苷逆轉錄酶抑制劑對於抗HIV有效，包括AZT、ddI、ddC、3TC、2』，3』-二脫氧-2』，3』-二脫氫胸苷(D4T)和順-2-羥甲基-5-(5-氟胞嘧啶-1-基)-1，3-氧硫戊環(FTC)。在細胞激酶作用下通過細胞磷醯化而生成5』-三磷酸後，將這些合成核苷引入病毒DNA的生長鏈中，由於缺少3』-羥基而導致鏈終止。
MKC-442發揮非核苷逆轉錄酶抑制劑的作用。MKC-442被認為是變構抑制劑，因為它通過與酶的「變構位置」結合而發揮其活性，所述變構位置即是除結合位點以外的一個位置。臨床前試驗表明MKC-442可具有以下特徵其具有治療性對抗HIV的作用。當在細胞培養實驗體系中進行對抗HIV野生型(藥物敏感性)和對已知非核苷逆轉錄酶抑制劑具有抗藥性的一些HIV突變株的測試時，MKC-442維持其抑制HIV複製的能力。在這些研究中，與奈韋拉平相比，MKC-442顯示出更強的抑制HIV野生型和突變株的能力。臨床前研究證實，MKC-442與AZT或ddI的二藥聯合或者與AZT和SAQUINAVIR的三藥聯合對HIV複製具有協同抑制作用。
對MKC-442的動物研究顯示出有利的安全性和藥物動力學模式。動物藥物動力學分析顯示出良好的口服生物利用度和對中樞神經系統極好的穿透性，中樞神經系統是HIV複製的重要位置，當前商品化的抗HIV藥物中許多都不能很好地穿入其中。例如，在大鼠中，MKC-442在腦中的濃度是血漿中濃度的100％。
I期研究評價了在感染了HIV的志願者中單一遞增劑量的MKC-442的藥物動力學和耐受性。該化合物通常有很好的耐受性，只有少數參與者體驗了在較高劑量水平時產生的輕微的副作用。在接受較高劑量的組中，血漿藥物濃度大大高於將培養物中病毒抑制90％所需的水平。
現在還評價了從I/II期雙盲、安慰劑控制實驗獲得的初步數據，所述實驗被設計用於評價感染了HIV的患者反覆多次口服MKC-442的安全性和效力。對總共49名患者用MKC-442治療長達2個月。在每個劑量水平下，向各組患者一天給藥兩次，每次100mg-1000mg，每組6-8名患者。在所測試的最高劑量下(750mg和1000mg，一天兩次)，在一周後，在所有患者中病毒負載量平均減低96％。在兩周內基本維持了這種降低趨勢，隨後病毒負載量向基線水平逐步增加。在從一些患者中獲得的病毒中發現了在逆轉錄酶第13位上的單點突變，其可能與抗藥性相關。在接觸藥物的308個患者周中，MKC-442得到很好的耐受。
在例如美國專利5,461,060中對MKC-442進行了描述，該文獻以全文引入本文作參考。
於1997年2月18日公布、授權給Ubasawa等人並轉讓給MitsubishiChemical Corporation的美國專利5,604,209公開了某些6-苄基-1-乙氧基甲基-5-取代尿嘧啶衍生物表現出抗HIV的協同作用，包括MKC-442和某些2』3』-二脫氧核糖核苷，包括2』，3』-二脫氧肌苷(ddI)、3』-疊氮基-3』-脫氧胸苷(AZT)、AZT三磷酸和2』，3』-二脫氧胞苷(ddC)。
由於MKC-442單獨以及和其他抗病毒劑聯合具有藥理活性，因此，其有效的製備方法受到越來越多的關注。
由於MKC-442是在1位上具有烷氧基烷基的5，6-取代尿嘧啶衍生物(參見
圖1)，因此，其合成方法必須包括加入這三個1，5，6-取代基的步驟。MKC-442的一般合成途徑包括使烷氧基烷基部分與5-取代硫尿嘧啶縮合，然後使硫尿嘧啶脫硫，將6位鋰化(lithiation)，與苯甲醛反應，隨後乙醯化，最後利用氫解還原羥基，得到MKC-442。參見Rosowsky等人，J.Med.Chem.，1981，24，1177；Tanaka等人，J.Med.Chem.，1992，35，4713。還可參見Baba等人，Nucleosides and Nucleotides，14(3-5)，575-583(1995)。Baba等人注意到，眾所周知的是因取代基的位阻作用，6-取代尿嘧啶的糖基化幾乎總是導致N-3-糖基化產物的形成，因此，應在脂肪族部分引入之後再引入6-取代基。
Danel等人報導了5，6-二取代醯基尿苷衍生物的合成，包括在合成的最後一步將分子的乙氧基甲基部分插入N-1位置(J.Med.Chem.，1996，39，2427-2431；Synthesis，1995年8月，934-936)。Danel等人首先使醯基乙腈與2-溴酯以雷佛馬茨基反應發生反應，形成2-烷基-4-芳基-3-氧代丁酸乙酯(參見路線1)，即一種β-酮酯。然後，使該β-酮酯與硫脲在乙氧基鈉的存在下縮合，形成2-硫尿嘧啶，2-硫尿嘧啶與氯乙酸在含水乙酸中回流過夜，得到6-苄基-5-乙基尿嘧啶。在與所選的烷基化試劑縮合之前，尿嘧啶的矽烷化是必須的。儘管Danel方法可用於小量反應，但在以產業規模製備MKC-442方面具有實質性缺陷，因為它需要Zn大大過量並使用金屬鈉以原位產生鹼，這存在著嚴重的安全問題。此外，在該文獻中特別指定乙氧基金屬過量20倍，這對於工業化生產是不適用的。另外，Danel方法需要使用15當量的硫脲，這妨礙了硫尿嘧啶衍生物形成純的晶體。此外，硫尿嘧啶中間體在所用的氯乙酸溶液中完全不溶，當該物質加熱回流時，形成粘塊並附在攪拌子和燒瓶壁上。最後，當使用醇或四氫呋喃使脫硫反應物均化時，硫尿嘧啶轉變為不可測的雜質。當大規模使用Danel方法時，MKC-442的產量急劇減少，只得到25-50％的產物，純度僅為90％。路線1
Orr和Musso在1996年報導了利用苯基丙酸乙酯和硫脲的反應合成5-取代尿嘧啶衍生物(非5，6-二取代尿嘧啶)。據他們報導，常規文獻方法在從硫脲製備2-硫尿嘧啶的過程中使用金屬鈉作為鹼，可引起合成中的問題並導致低產率。Synthetic Communications，26(1)，179-189(1996)。Orr等人比較了經苯基丙酸乙酯與(i)鈉、甲酸乙酯、乙醚反應，然後與硫脲和乙醇回流；(ii)二異丙基氨基化鋰、四氫呋喃、甲酸乙酯在低溫下反應，然後與硫脲和乙醇回流；(iii)叔丁醇鉀在環境溫度下在四氫呋喃、甲酸乙酯、乙醚中反應，然後與硫脲和乙醇回流，來製備2-硫尿嘧啶。Orr等人報導了在5-苄基-2-硫尿嘧啶的製備中用二異丙基氨基化鋰或叔丁醇鉀代替金屬鈉提高了反應的產率，用2-丙醇代替乙醇作為烯醇化物與硫脲縮合的溶劑導致了產率的提高。使用原甲酸乙酯時，Orr反應不能用於製備5，6-二取代尿嘧啶，充其量不過產生5-取代尿嘧啶或5，5-二氫尿嘧啶(參見路線2)。路線2 a試劑(i)EtOH，Et2O，HCl，回流；(ii)EtOH，H2，PtO2；(iii)Me2CO，R3Br，K2CO3；(iv)Na，HCO2Et，Et2O然後加入硫脲，EtOH，回流；(v)LDA，THF，HCO2Et，-60°--78°然後加入硫脲，EtOH，回流；(vi)在THF中的叔丁醇鉀，HCO2Et，Et2O，環境溫度；然後加入硫脲，2-PrOH，回流。
Baba等人報導了通過使矽烷化的5-異丙基-2-硫尿嘧啶與致癌的CH3CH2OCH2Cl(KI/CH2Cl2)反應產生N-1-乙氧基甲基產物(Nucleosidesand Nucleotides，14(3-5)，575-583(1995))來製備MKC-442的方法。與二異丙基氨基化鋰(LDA)的鋰化產生6-取代產物。6-取代產物氧化水解，然後常規氫解，得到MKC-442。
MKC-442可用於治療感染了HIV的患者，鑑於這一事實，需要開發成本低廉且可大規模地的製備大量、高純度、高產率的純MKC-442的方法。因此，本發明的一個目的是提供改進的用於製備高產率、更高純度的6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶(MKC-442)的合成方法。
因此，在一個實施方案中，提供了一種製備5，6-二取代尿嘧啶的方法，其包括同時使用兩種鹼來有效地從β-酮酯高產率地合成5，6-二取代尿嘧啶。優選的鹼包括在乙腈中作為共同使用的鹼(co-bases)的碳酸鉀和叔丁醇鉀。該實施方案如路線3所示。路線3
作為合成MKC-442的非限制性實例，異丙基β-酮酯如2-異丙基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯可使用任何已知的方法合成，包括從苯乙腈和2-溴-3，3-二甲基-丙酸乙酯與活化的鋅以雷佛馬茨基反應合成。然後，在溶劑如乙腈中，β-酮酯與雙鹼體系反應，雙鹼體系包括但不限於碳酸鉀和叔丁醇鉀。
所述方法具有若干優於現有技術的優點。首先，反應是單步過程，其以高於80％的產率形成產物。其次，雙鹼體系使產物具有更高的純度。例如，使用在乙腈中的碳酸鉀和叔丁醇鉀，產生純度為90-95％的產物。
在合成被取代的硫尿嘧啶環的過程中，高pKb的鹼破壞原料β-酮酯並產生更多的雜質。結果，單獨使用高pKb的鹼，導致產物具有較低的收率。較低pKb的鹼傾向於具有較長的反應時間並含有殘留的原料。因此，使用雙鹼體系克服這些傾向是有益的。
可用於本發明雙鹼體系的鹼包括但不限於碳酸鉀、叔丁醇鉀、碳酸鈉、二異丙基胺、三乙基胺、2，6-二甲基吡啶、乙酸鈉、乙酸鉀、氨、乙醇鉀和氰化鉀。所述鹼與溶劑聯合使用。
可用於本發明雙鹼體系的溶劑包括但不限於乙腈、丁腈、異丁腈、氯乙腈和其他烷基腈溶劑、異丙醇、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇和其他醇溶劑。
在本發明的另一實施方案中，提供了一種製備5，6-二取代尿嘧啶的方法，其包括使β-酮酯與硫脲在叔丁醇鉀的存在下、優選在異丙醇中反應。該反應的實施方案如路線4所示。路線4
作為合成MKC-442的非限制性實例，異丙基β-酮酯如2-異丙基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯可使用任何已知的方法合成，包括從苯乙腈和2-溴-3，3-二甲基-丙酸乙酯與活化的鋅以雷佛馬茨基反應合成，然後，2-異丙基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯和硫脲在叔丁醇鉀的存在下在本發明的步驟(A)中形成苄基異丙基硫尿嘧啶，該苄基異丙基硫尿嘧啶在步驟(B)中脫硫，然後苄基異丙基尿嘧啶在步驟(C)中烷氧基烷基化形成MKC-442。本發明的改進方法提供了若干出乎意料的優於現有技術的優點，同時以較高的產率和純度產生MKC-442。
本發明方法具有若干優於現有技術的優點。在步驟(A)的環縮合反應中用t-BuOK代替NaOEt，產生非常純的產物。儘管在先前的文獻中用t-BuOK使產率提高，但是所得產物純度的增加在此以前仍是未知和未曾預料到的。此外，用t-BuOK代替NaOEt，產生了易處理的硫尿嘧啶粗產物，這使得可對反應時間和量(workup)進行抑制和調整。步驟(A)的這一反應在亞化學計量的t-BuOK存在下進行也是令人吃驚的。最後，與現有技術中使用毒性很大的TMS triflate或氯甲基醚不同，在步驟(C)中在酸催化劑如硫酸的存在下使用二乙氧基甲烷，具有成本低廉和安全的優點。
在步驟(B)的脫硫反應中緩慢且可控地釋放硫化氫也是出乎意料的。快速且不可控的氣體釋放將妨礙該方法的大規模使用和產業化。
步驟(C)的烷基化反應具有兩個與之有關的出乎意料的方面。首先，令人吃驚的是在亞化學計量的硫酸的存在下該反應如此有效地進行。其次，非常方便的是無需除去HMDS。烷基化以有效的方式在亞化學計量的硫酸的存在下進行，即使存在有HMDS。發明詳述提供了用於製備5，6-二取代尿嘧啶的改進方法。該改進方法具有若干優於現有技術的優點。最重要的是，本發明的方法產生高產率的MKC-442，而無需犧牲產物的純度。事實上，所述方法可產生具有95％或更高純度的產物。
本發明至少包括以下實施方案經β-酮酯與硫脲在雙鹼體系中的反應來製備5，6-二取代尿嘧啶、優選MKC-442的第一方法。所述方法包括同時使用兩種鹼以有效地合成5，6-二取代尿嘧啶。所述方法包括在雙鹼體系和溫度為80-85℃的溶劑的存在下β-酮酯與硫脲反應。
本發明這一第一方法的一步過程包括在雙鹼體系和溶劑中2，4-二取代-3-氧代-丁酸酯、優選2-異丙基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯和硫脲反應。優選的用於雙鹼體系的鹼包括但不限於叔丁醇鉀和碳酸鉀。優選的用於該反應的溶劑包括但不限於乙腈。反應在80℃-85℃下進行。優選的反應溫度是約85℃。
本文使用的術語「雙鹼體系」指在溶劑的存在下同時使用兩種鹼。雙鹼體系中鹼的非限制性實例是碳酸鉀、叔丁醇鉀、碳酸鈉、二異丙基胺、三乙基胺、2，6-二甲基吡啶、乙酸鈉、乙酸鉀、氨、乙醇鉀和氰化鉀。所述鹼與溶劑聯合使用。
可用於本發明雙鹼體系的溶劑包括但不限於乙腈、丁腈、異丁腈、氯乙腈和其他烷基腈溶劑、異丙醇、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇和其他醇溶劑。
製備5，6-二取代尿嘧啶、優選MKC-442的第一方法包括(i)步驟(A)，包括經2，4-二取代-3-氧代-丁酸酯與硫脲在有機溶劑中在叔丁醇鉀的存在下的反應來製備5，6-二取代的硫尿嘧啶；(ii)步驟(A)的過程，其中溶劑是醇，優選異丙醇；(iii)步驟(A)的過程，其中硫脲與2，4-二取代-3-酮-丁酸酯的摩爾比不大於約10％過量，更優選不大於5％過量；
(iv)步驟(A)的過程，其中所述反應用水和乙酸終止；(v)步驟(B)，包括步驟(A)的過程，進一步包括將5，6-二取代硫尿嘧啶脫硫為5，6-二取代尿嘧啶，優選使用10％氯乙酸(含水)的乙酸溶液；(vi)步驟(B)的過程，進一步包括在脫硫之前分離出硫尿嘧啶；(vii)步驟(B)的過程，其中所述乙酸佔所有全部溶劑體積的約25-40％，優選約35％；(viii)步驟(B)的過程，其中所述反應物被加熱至85℃-105℃以形成溶液；(ix)步驟(C)，包括根據已知方法用任何合適的試劑將步驟(v)的5，6-二取代尿嘧啶矽烷化；(x)步驟(C)的過程，其中所述試劑是甲矽烷基化劑，例如六甲基二矽氮烷(hexamethyldisilizane)；(xi)步驟(x)的過程，其中所述六甲基二矽氮烷在催化量的硫酸銨的存在下發生反應；(xii)步驟(C)的產物與烷基化劑或烷氧基烷基化劑如二乙氧基甲烷反應；(xiii)步驟(xii)的過程，其中所述反應是在硫酸或甲磺酸中完成的；(xiv)步驟(xiii)的過程，其中使用亞化學計量當量、優選0.25-0.5當量的硫酸；和(xv)步驟(xiv)的過程，其中所述反應在回流的乙腈(或其他烷基腈)中進行，優選進行2-5小時。
本發明的第二方法的兩階段過程包括階段I中的步驟(A)和(B)。步驟(A)包括在異丙醇中在回流下用硫脲和叔丁醇鉀環化異丙基-β-酮酯，產生苄基異丙基硫尿嘧啶。然後，在步驟(B)中，使用氯乙酸溶液即10％ClAcOH(含水)乙酸溶液，使苄基硫尿嘧啶脫硫產生苄基異丙基尿嘧啶(BIU)。反應的處理包括用水和乙酸終止反應，然後過濾出晶體，產率70-80％。
階段I的過程不同於Danel的方法(J.Med.Chem.，1996，39，2427-2431)，它沒有使用Danel所用的金屬鈉，以在原位產生鹼。鈉的取消解決了在大規模製備過程中存在的嚴重的安全問題。Danel還指定使用20倍過量的乙氧基金屬，而本發明的方法只需5％-20％過量。此外，Danel方法產生硫尿嘧啶中間體，當加熱回流時，該中間體形成粘塊並附在攪拌子和燒瓶壁上。相反，通過使用本發明步驟(A)的過程所形成的經分離的硫尿嘧啶，提高了轉化率和純度。將乙酸加入步驟(B)的反應中(總溶劑體積的約35％)實現了兩個目標它允許在加熱至95℃時形成溶液；它在進行大規模反應時用作重結晶助溶劑。本發明的方法消除了Danel方法所形成的粘塊，這使得可將改進方法調整成適合生產尺寸的設備。此外，回收了BIU，純度大於98％物質的產率為約90％。
在本發明方法的階段II中，BIU在催化量的硫酸銨的存在下用1，1，1，3，3，3-六甲基二矽氮烷(HMDS)矽烷化，然後用二乙氧基甲烷在含硫酸的乙腈中烷基化。該過程在本文稱作步驟(C)。另外，也可使用甲磺酸作為酸催化劑。條件優化為使用亞化學計量(0.25-0.5當量)的濃硫酸在乙腈中回流2-5小時，以產生烷基化。典型的反應顯示出MKC-442產率為90-95％，含＜3％的BIU雜質。
本發明兩階段方法具有優於現有技術方法的若干改進。首先，在步驟(A)的環縮合反應中用t-BuOK代替NaOEt，產生非常純的產物。儘管在先前的文獻中用t-BuOK使產率提高，但是在本發明中所得產物純度的增加是出乎意料的。此外，用t-BuOK代替NaOEt，不可預料地產生了易處理的硫尿嘧啶粗產物，這使得可對反應時間和量進行控制和調整。在NaOEt的情況下，得到不易處理的粘塊，從而很難大規模地進行反應。另外，步驟(A)的這一反應在亞化學計量的t-BuOK存在下進行也是令人吃驚的。
本發明的另一優點是在步驟(B)的脫硫反應中緩慢且可控地釋放硫化氫。快速且不可控的氣體釋放將嚴重限制該方法的大規模利用。
最後，步驟(C)的烷基化反應具有若干與之有關的出乎意料的方面。首先，令人吃驚的是在亞化學計量的硫酸的存在下該反應如此有效地進行。其次，不可預料且非常方便的是無需除去HMDS。烷基化以有效的方式在亞化學計量的硫酸的存在下進行，即使存在有HMDS。最後，與現有技術中使用毒性很大的TMS triflate或氯甲基醚相比，使用二乙氧基甲烷作為烷基化劑具有顯著的優點。二乙氧基甲烷不僅便宜，而且其是明顯毒性較小的試劑，這使其較現有技術中的試劑更為安全。
然後，用2-溴異戊酸乙酯(48g，2.30mol)處理反應物。加入約50g溴酯，使反應開始，5分鐘後將反應溫度提高至69℃。然後在35分鐘內加入其餘的酯，從而維持最小的回流。加料後，反應物在65℃攪拌1小時。
得到了中間(in-process)樣品，用1.8M硫酸淬滅。氣相色譜顯示，異丙基β-酮酯為90％，苯乙腈為1％。然後，將反應物冷卻至35℃，通過減壓蒸發來除去4L四氫呋喃。然後，反應物用3L EtOAc稀釋，並小心地用2.0L 1.8M H2SO4(aq)淬滅。1小時後，分層。然後，用1L飽和NaHCO3和500ml鹽水洗滌有機相。然後，每次用250ml EtOAc反提含水層。合併有機相，並濃縮為油狀。產物341g，產率90％，氣相色譜AUC(曲線下面積)為90％。一般該物質本身已可使用，也可在5mmHg、110-120℃下蒸餾，得產物240g，氣相色譜AUC為96％。
166g硫尿嘧啶重新懸浮在含水的溶液(450ml)、冰乙酸(200ml)和氯乙酸(250g)中。將非均相的反應物加熱至95℃。約1小時後，形成溶液，在又1小時後，沉澱出白色固體。反應物再加熱6小時，然後，冷卻至室溫，真空過濾收集產物。產物為白色晶體，用水(2×150ml)洗滌，在真空爐(60℃，5mm Hg)中乾燥過夜。分離產物，從酮酯計算總產率為70％，純度為99.5％AUC(HPLC)。階段2異丙基苄基尿嘧啶的烷基化，合成MKC-442 向1L三頸圓底燒瓶中加入6-苄基-5-異丙基尿嘧啶(BIU)(50g，0.20mol)、硫酸銨(0.5g，催化)和1，1，1，3，3，3-六甲基二矽氮烷(258g，1.6mol)。在氬氣下將漿狀物加熱回流(125-130℃)4小時。在減壓(85℃，30mm Hg)下，所得溶液濃縮成稠油狀(約125ml)。將油重新懸浮在350ml乙腈中。在80℃加入硫酸(4.9g，0.05mol)，隨後加入二乙氧基甲烷(36g，0.30mol)。加入硫酸之後，沉澱形成，但在約30分鐘後再次形成溶液。溶液攪拌5小時。再加入一批H2SO4(2.5g，0.025mol)，混合物再加熱2.5小時。
10小時後，HPLC顯示殘留的原料為＜3％，MKC-442＞90％。用175ml 0.5N KOH在50-60℃(pH＝10-11)淬滅反應，減壓(65-70℃，30m Hg)蒸發除去乙腈。殘留的漿狀物用175ml乙酸乙酯稀釋，分層。水層用乙酸乙酯(50ml)洗滌，合併有機相。有機相濃縮成約75ml體積，然後用75ml乙醇洗滌(chase)至約75ml體積。然後，在85℃下，MKC-442粗品溶於100ml EtOH，用60ml H2O稀釋，冷卻至環境溫度，結晶。2小時後，過濾粗品，用25ml 25％EtOH的水溶液洗滌。產物52g，94％HPLC AUC。
然後，在85℃下，物質溶於115ml EtOH，用50ml H2O稀釋，產物冷卻至環境溫度，結晶。過濾產物，用25ml 25％EtOH的水溶液洗滌兩次。產物45g，99.8％AUC，含0.10％(AUC)BIU。
參照優選實施方案對本發明進行描述。基於本發明前面的具體描述，本發明的變化和改變對本領域技術人員而言是顯而易見的。所有這些變化和改變屬於本發明的範圍內。
權利要求
1. 6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶(MKC-442)的製備方法，包括(i)經2，4-二取代-3-氧代-丁酸酯與硫脲在溶劑的存在下在雙鹼體系中的反應來製備5，6-二取代的硫尿嘧啶；(ii)在氯乙酸的含水乙酸溶液中將所述5，6-二取代-2-硫尿嘧啶脫硫以形成5，6-二取代-尿嘧啶；(iii)根據已知方法用合適的試劑將所述5，6-二取代尿嘧啶矽烷化；(iv)步驟(iii)的產物和烷基化劑或烷氧基烷基化劑反應形成6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶(MKC-442)。
2.權利要求1的方法，其中所述雙鹼體系包括叔丁醇鉀和碳酸鉀。
3.權利要求1的方法，其中所述溶劑是乙腈。
4.權利要求1的方法，其中所述反應在80-85℃下進行。
5.權利要求1的方法，其中所述雙鹼體系包括叔丁醇鉀和碳酸鉀，所述溶劑是乙腈且所述反應在80-85℃下進行。
6. 6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶(MKC-442)的製備方法，包括(i)經2，4-二取代-3-氧代-丁酸酯與硫脲在有機溶劑中在叔丁醇鉀的存在下的反應來製備5，6-二取代的硫尿嘧啶，以形成5，6-二取代-2-硫代尿嘧啶中間體；(ii)在氯乙酸的含水乙酸溶液中將所述5，6-二取代-2-硫尿嘧啶脫硫以形成5，6-二取代-尿嘧啶；(ii)根據已知方法用合適的試劑將所述5，6-二取代尿嘧啶矽烷化；(iv)步驟(iii)的產物和烷基化劑或烷氧基烷基化劑反應形成6-苄基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶(MKC-442)。
7.權利要求6的方法，其中在步驟(i)中，所述溶劑是醇。
8.權利要求7的方法，其中所述醇是異丙醇。
9.權利要求6的方法，其中硫脲與2，4-二取代-3-酮-丁酸酯的摩爾比不大於約10％過量。
10.權利要求9的方法，其中硫脲與2，4-二取代-3-酮-丁酸酯的摩爾比不大於約5％過量。
11.權利要求6的方法，其中步驟(ii)的反應用水和乙酸淬滅。
12.權利要求11的方法，其中步驟(ii)的反應用水和10％氯乙酸的含水乙酸溶液淬滅。
13.權利要求6的方法，其中在脫硫之前分離出在步驟(i)中形成的硫尿嘧啶。
14.權利要求6的方法，其中在步驟(ii)中所述乙酸佔所用全部溶劑體積的約25-40％。
15.權利要求14的方法，其中在步驟(ii)中所述乙酸是約35％。
16.權利要求6的方法，其中在步驟(ii)中將所述反應加熱至85℃-105℃以形成溶液。
17.權利要求6的方法，其中在步驟(ii)中所述試劑是甲矽烷基化劑。
18.權利要求17的方法，其中所述甲矽烷基化劑是六甲基二矽氮烷。
19.權利要求18的方法，其中所述六甲基二矽氮烷在催化量的硫酸銨的存在下發生反應。
20.權利要求6的方法，其中在步驟(iv)中所述烷氧基烷基化劑是二乙氧基甲烷。
21.權利要求20的方法，其中所述反應是在硫酸或甲磺酸中完成的。
22.權利要求21的方法，其中使用亞化學計量當量的硫酸。
23.權利要求22的方法，其中所用硫酸的量是0.25-0.5當量。
24.權利要求23的方法，其中所述反應在回流的乙腈中進行2-5小時。
全文摘要
公開了6－苄基－1－(乙氧基甲基)－5－異丙基尿嘧啶,其也被稱為MKC－442的製備方法。該方法包括使用任何已知的方法合成異丙基β－酮酯如2－異丙基－3－氧代－4－苯基－丁酸乙酯,包括從苯乙腈和2－溴－3,3－二甲基－丙酸乙酯和活化的鋅以雷佛馬茨基反應合成。然後,以兩種方法中的一種使2－異丙基－3－氧代－4－苯基－丁酸乙酯和硫脲縮合。一種方法是,在溶劑的存在下,在雙鹼體系中,2－異丙基－3－氧代－4－苯基－丁酸乙酯和硫脲縮合。另一種使2－異丙基－3－氧代－4－苯基－丁酸乙酯和硫脲縮合的方法是,在叔丁醇鉀的存在下形成苄基異丙基硫尿嘧啶,使其在步驟(B)中脫硫。然後,將從任一方法獲得的苄基異丙基尿嘧啶在生產中烷氧基烷基化以形成MKC－442。
文檔編號C07D239/54GK1352637SQ00806152
公開日2002年6月5日 申請日期2000年4月13日 優先權日1999年4月13日
發明者達裡爾·G·克利裡, 弗蘭克·瓦利格拉, 梅裡克·R·阿爾蒙德, 羅斯·奧馬奧尼, 特倫斯·芒戈, 麥可·庫澤姆科 申請人:三角藥物公司, 卡特利蒂卡製藥公司