硫酸依替米星膠束凍乾粉針及其製備方法
2023-09-19 18:40:15 1
專利名稱：硫酸依替米星膠束凍乾粉針及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種硫酸依替米星納米膠束凍乾粉針製劑及其製備方法。屬於藥物製劑領域。
背景技術：
硫酸依替米星(Etimicin sulfate)是我國科研人員自行研製的，擁有自主智慧財產權的高效、低毒、抗耐藥菌的新一代半合成氨基糖苷類抗生素，是唯一獲得國家一類新藥證書的抗感染藥物，屬氨基糖苷類。體外抗菌作用研究表明本品抗菌譜廣，對多種病原菌有較好抗菌作用，其中對大腸埃希桿菌、克雷伯氏肺炎桿菌、腸桿菌屬、沙雷菌屬、奇異變形桿菌、沙門菌屬、流感嗜血桿菌及葡萄菌屬等有較高的抗菌活性，對部分假單胞桿菌、不動桿菌屬等具有一定抗菌活性，對部分慶大黴素、小諾黴素和頭孢唑啉耐藥的金黃色葡萄球菌、 大腸埃希菌和克雷伯氏肺炎桿菌，其體外MIC值仍在本品治療劑量的血藥濃度範圍內。常見致病菌MIC50值都小於等於1 (Mg/L)，對產生青黴素酶的部分葡萄球菌和部分低水平甲氧西林耐藥的葡萄球菌(MRSA)亦有一定抗菌活性。硫酸依替米星不僅抗菌譜廣而且抗菌活性強。耳毒性為奈替米星的1/2 丁胺卡納的1/7 ；腎毒性為奈替米星的1/12 丁胺卡納的 1/17 ；發明內容
本發明的目的在於提供可靜脈注射的硫酸依替米星的納米膠束凍乾粉針製劑，它是一種動力學穩定體系，具有良好的穩定性。
本發明的另一個目的是提供可靜脈注射的硫酸依替米星納米膠束凍乾粉針的製備方法。
本發明的主要內容是利用聚乙二醇(PEG)衍生化磷脂為主要輔料，採用適當的製劑學手段製備硫酸依替米星納米膠束凍幹製劑。
上述目的是通過如下技術方案實現
本發明提供了一種可靜脈注射的硫酸依替米星的納米膠束，包含
硫酸依替米星、雙親性分子、
其中所述的雙親性分子為PEG衍生化磷脂和其它磷脂。其它磷脂材料包括磷脂酸、磷脂醯肌醇、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯甘油、心磷脂、大豆磷脂、膦脂醯膽鹼、磷脂醯乙醇胺、氫化卵磷脂等。
其中硫酸依替米星和雙親性分子的摩爾比是1 2 1 10。
本發明的PEG衍生化磷脂為聚乙二醇分子通過共價鍵與磷脂分子上的含氮鹼基結合而形成。
PEG衍生化磷脂，其中結構中磷脂部分的脂肪包含的碳原子數為10 對個，優選 12、14、16、18、20、22、M個碳原子，脂肪酸鏈可以是飽和的，也可以是部分飽和的，特別需要指出的脂肪酸為月桂酸(12碳)、肉豆蔻酸(14碳)、棕櫚酸(16碳)、硬脂酸或油酸或亞油酸(18 碳)、廿酸(20 碳)、山俞酸(22 碳)、Iignocerate (24 碳)。
PEG衍生化磷脂，其磷脂部分可以是磷脂醯乙醇胺(PE)、磷脂醯膽鹼(PC)、磷脂醯肌醇(PI)磷脂醯絲胺酸(PQ 二磷脂醯甘油、縮酸磷脂、溶血磷脂膽鹼(LPC)、溶血乙醇胺磷脂(LPE)等。
本發明中，聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂中的磷脂優選為磷脂醯乙醇胺，尤其是二硬脂醯磷脂醯乙醇胺、二棕櫚醯磷脂乙醇胺、二油醯磷脂醯乙醇胺。
聚乙二醇衍生化磷脂，其聚乙二醇分子量範圍為1000 10000，優選的聚乙二醇分子量為2000。
按照本發明的一個優選實施方案，聚乙二醇衍生化磷脂是聚乙二醇2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺(PEG2000-DSPE)。
本發明的硫酸依替米星的納米膠束的製備方法，包括以下步聚
(1)將硫酸依替米星和聚乙二醇衍生化磷脂溶於有機溶劑中；
(2)除去有機溶劑，製得硫酸依替米星聚合物脂膜；
(3)向上述( 得到的聚合物脂膜中加入水或緩衝溶液，在25 70°C下水化；
(4)渦旋振搖或超聲，得到包載硫酸依替米星的聚乙二醇衍生化磷脂納米膠束。
本發明還涉及含有本發明硫酸依替米星納米膠束的製劑，如凍幹製劑。
本發明的硫酸依替米星的納米膠束製劑中，納米膠束的粒徑範圍為5 lOOnm，優選10 50nm。硫酸依替米星藥物的用量為50 300mg的製劑，聚乙二醇衍生化磷脂的用量為250mg 3g。
本發明所述的硫酸依替米星的納米膠束製劑包括硫酸依替米星納米膠束、以及根據需要加入抗氧劑、滲透壓調節劑、PH值調節劑或金屬離子絡合劑。
本發明所述的硫酸依替米星的納米膠束製劑，是採用PEG衍生化磷脂作為載體， 或與其它磷脂配合使用，通過一定的製劑學手段，將治療劑量的硫酸依替米星包裹於所形成的納米膠束中，根據需要添加一定的抗氧劑、滲透壓調節劑、PH值調節劑、金屬離子絡合劑。
其中所述抗氧劑，選自如水溶性抗氧劑(抗壞血酸、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸氫鈉， 用量範圍為0. 01 1 % )和脂溶性抗氧劑(生育酚、BHA、沒食子酸丙酯，用量範圍為0. 01 1. 0% )。
其中所述金屬絡合劑，如EDTA。
其中所述pH調節劑(各類緩衝系統如枸椽酸-枸椽酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉、醋酸-醋酸鈉、磷酸鹽等)，調節藥液PH值範圍為4. 5 7. O。
其中所述滲透壓調節劑(氯化鈉、葡萄糖、甘露醇)。所述的滲透壓調節劑指各類藥劑上可接愛的用於調節等滲的鹽和碳水化合物，調節滲透壓至人體等滲或偏高滲(人體液滲透壓範圍四0 310mmol/L)。
本發明還提供了硫酸依替米星藥物的納米膠束製劑的製備方法，包括將硫酸依替米星包裹於聚乙二醇衍生化磷脂形成的納米膠束中，用製劑學常規技術製備成可靜脈注射的硫酸依替米星的納米膠束凍幹製劑。
根據本發明的硫酸依替米星的納米膠束製劑的製備方法具體包括以下步聚
步驟1，將硫酸依替米星和聚乙二醇衍生化磷脂溶於有機溶劑中；
步驟2，除去有機溶劑，製得硫酸依替米星聚合物脂膜；
步驟3，向上述( 得到的聚合物脂膜中加入水或緩衝溶液，在25 70°C下水化；
步驟4，渦旋振搖或超聲，得到包載硫酸依替米星的聚乙二醇衍生化磷脂納米膠束ο
按照本發明的方法，進一步包括用pH調節劑將得到的納米膠束溶液的pH值調至 3. 0 8. 0，優選 4. 5 7. 0。
按照本發明的方法，進一步包括將得到的納米膠束溶液冷凍乾燥，製成凍幹形式的製劑。
在本發明的方法步驟(1)中的所述有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿或他們的混合物。
在本發明的步驟O)中通過減壓除去有機溶劑和/或在真空條件下除去有機溶劑。
在本發明的方法步驟(3)中的緩衝溶液為枸椽酸、檸檬酸或磷酸緩衝溶液。在本發明的方法步驟中渦旋振搖或超聲1 5分鐘。
具體地，本發明所述的納米膠束製劑是採用了以下製備方法製成的將硫酸依替米星、聚乙二醇衍生化磷脂、脂溶性添加劑溶於有機溶劑中，置於燒瓶中，利用旋轉蒸發儀， 揮幹有機溶劑，在圓底燒瓶表面形成薄而均勻的膜，漿水溶性添加劑(水溶性抗氧劑、滲透壓調節劑、PH值調節劑、金屬離子絡合劑)、及凍幹支持劑溶於水中，將該水溶液加到圓底燒瓶中，振蕩水化，過0. 22um的微孔濾膜過濾除菌，製備成的納米膠束的粒徑範圍為10 50nm。再凍幹製成凍幹製劑。
本發明的處方與工藝經過優化獲得，本發明發現聚乙二醇衍生化磷脂的用量至少 2倍於硫酸依替米星的用量才能生成穩定的納米膠束；揮幹有機溶劑用旋轉蒸發儀溫度需在70°C以下，最好是60°C以下，否則會導致成品變色或在加速穩定性試驗時變色。由於氨基糖苷類容易被氧化，故在處方中需加入抗氧劑，脂溶性抗氧劑可加在製備脂膜過程中，水溶性抗氧劑加在凍幹溶液中。由於金屬離子對氨基糖苷類具有催化作用，而原料藥生產過程中不可避免地帶進金屬離子，故加入金屬離子絡合劑亦是優選方案。
因此，本發明優選的配方組成如下
聚乙二醇2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺 400-600g
硫代硫酸鈉山梨醇枸椽酸鹽緩衝溶液4-6g400-600g調pH值4. 5 7. 0EDTA
本發明最優選的配方組成如下；
硫酸依替米星硫代硫酸鈉山梨醇枸椽酸鹽緩衝溶液0. 4-0. 6gIOOg聚乙二醇2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺 500g5g500g調pH值4. 5 7. 0EDTA0.5g
製備工藝如下
(1)稱取硫酸依替米星IOOg和聚乙二醇2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺500g溶於 IOOOml無水乙醇中，混合均勻，減壓除去乙醇，得到硫酸依替米星的聚合物膜；
(2)將500g山梨醇、5g硫代硫酸鈉和0. 5g EDTA溶於水，加入所得的聚合物脂膜中，再加入枸椽鹽緩衝溶液高PH值至6. 0，水浴加熱至60°C水化1小時，得到硫酸依替米星聚乙二醇2000硬脂醯磷脂醯乙醇胺包載納米膠束；
(3)將得到的納米膠束溶液冷凍乾燥，得到硫酸依替米星的凍幹製劑。
為了更好的理解本發時的內容，我們對一些述語解釋如下
「納米膠束」是指雙親性分子在水溶液中的濃度超過臨界膠團濃度時(CMC)，能夠自發地聚合形成納米膠束。納米膠束的結構與脂質體不同，不具有脂雙層的結構特徵。一般來講，納米膠束的結構為疏水部分向內，形成疏水核，親水部分向外形成水表面。納米膠束粒徑小，平均粒徑在10 20nm左右。因此，其不但是熱力學穩定體系，而且是動力學穩定性體系。另外，納米膠束顆粒不易聚集分層，包載容量高，即在低濃度時可包載較高的藥量。
「磷脂」，磷脂的分子結構和脂肪相似，不同的是在甘油分子上只連有兩個脂肪酸， 第三個羥基與磷酸結合成脂。磷脂的這一結構使它成為一種雙親性分子，它的磷酸或磷酸脂一端是極性的，易與水相吸，構成磷脂分子的親水性頭部，而它的脂肪酸一端是非極性的，不與水相吸，構成磷脂分子的疏水性尾部。本發明所涉及的磷脂主要為聚乙二醇衍生化磷脂。在本發明中，聚乙二醇衍生化磷脂也可以與其它磷脂配合使用。藥物包載於疏水核中，可以使藥物免受外界因素(水、氧、光)的破壞，大大提高藥物在儲存過程中的穩定性。
對各實例所製備的硫酸依替米星納米膠束製劑和市銷售的粉針進行質量檢測。分別將製得的硫酸依替米星納米膠束製劑和上市銷售的粉針在高溫60°C，光照4500Lx條件下放置10天按2010版《藥典》進行影響因素試驗，在高溫40°C、相對溼度75% 士5%條件下進行6個月的加速穩定性試驗。檢測各項質量指標的變化，所得數據如下表所示
表1影響因素結果
權利要求
1.一種硫酸依替米星的納米膠束，包含硫酸依替米星、雙親性分子、其中所述的雙親性分子選自PEG衍生化磷脂和其它磷脂，其中，PEG衍生化磷脂結構中磷脂部分的脂肪包含的碳原子數為10 M個，磷脂部分選自磷脂醯乙醇胺(PE)、磷脂醯膽鹼(PC)、磷脂醯肌醇(PI)磷脂醯絲胺酸(PQ 二磷脂醯甘油、縮酸磷脂、溶血磷脂膽鹼 (LPC)、溶血乙醇胺磷脂(LPE)；其它磷脂選自磷脂酸、磷脂醯肌醇、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯甘油、心磷脂、大豆磷脂、膦脂醯膽鹼、磷脂醯乙醇胺、氫化卵磷脂；其中硫酸依替米星和雙親性分子的摩爾比是1 2 1 10，納米膠束的粒徑範圍為 5 IOOnm0
2.根據權利要求1的納米膠束，其特徵在於，其中PEG衍生化磷脂的脂肪酸選自月桂酸(12碳)、肉豆蔻酸(14碳)、棕櫚酸(16碳)、硬脂酸或油酸或亞油酸(18碳)、廿酸(20碳)、山俞酸(22碳)、lignocerate(M碳)，磷脂中的磷脂選自磷脂醯乙醇胺，尤其是二硬脂醯磷脂醯乙醇胺、二棕櫚醯磷脂乙醇胺、二油醯磷脂醯乙醇胺；其聚乙二醇分子量範圍為1000 10000。
3.根據權利要求1的納米膠束，其特徵在於，其中聚乙二醇衍生化磷脂是聚乙二醇 2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺。
4.根據權利要求1的納米膠束的製備方法，其特徵在於，包括以下步聚1)將硫酸依替米星和聚乙二醇衍生化磷脂溶於有機溶劑中；2)除去有機溶劑，製得硫酸依替米星聚合物脂膜；3)向上述( 得到的聚合物脂膜中加入水或緩衝溶液，在25 70°C下水化；4)渦旋振搖或超聲，得到包載硫酸依替米星的聚乙二醇衍生化磷脂納米膠束。
5.一種含有硫酸依替米星納米膠束的製劑，包括權利要求1的硫酸依替米星納米膠束，配方中根據需要加入抗氧劑、滲透壓調節劑、PH值調節劑或金屬離子絡合劑。其中所述抗氧劑，選自如水溶性抗氧劑(抗壞血酸、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸氫鈉，用量範圍為0. 01 )和脂溶性抗氧劑(生育酚、BHA、沒食子酸丙酯，用量範圍為0. 01 1. 0% )。其中所述金屬絡合劑，如EDTA。其中所述PH調節劑(各類緩衝系統如枸椽酸-枸椽酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉、醋酸-醋酸鈉、磷酸鹽等)，調節藥液PH值範圍為4. 5 7. 0。其中所述滲透壓調節劑(氯化鈉、葡萄糖、甘露醇)，所述的滲透壓調節劑指各類藥劑上可接愛的用於調節等滲的鹽和碳水化合物，調節滲透壓至人體等滲或偏高滲(人體液滲透壓範圍四0 310mmol/L)。
6.權利要求5的製劑，配方組成如下硫酸依替米星80-120g 聚乙二醇2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺 400-600g硫代硫酸鈉4-6g山梨醇400-600g 枸椽酸鹽緩衝溶液調PH值 4. 5~7. 0EDTA0.4-0.6go
7.權利要求5的製劑的製備方法，包括以下步聚步驟1，將硫酸依替米星和聚乙二醇衍生化磷脂溶於有機溶劑中； 步驟2，除去有機溶劑，製得硫酸依替米星聚合物脂膜；步驟3，向上述( 得到的聚合物脂膜中加入水或緩衝溶液，在25 70°C下水化； 步驟4，渦旋振搖或超聲，得到包載硫酸依替米星的聚乙二醇衍生化磷脂納米膠束。 步驟5，用pH調節劑將得到的納米膠束溶液的pH值調至3. 0 8. 0， 步驟6，將得到的納米膠束溶液冷凍乾燥，製成凍幹形式的製劑。
8.根據權利要求7的製備方法，其中步驟(1)中的所述有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿或他們的混合物，在本發明的步驟O)中通過減壓除去有機溶劑和/或在真空條件下除去有機溶劑，在本發明的方法步驟C3)中的緩衝溶液為枸椽酸、檸檬酸或磷酸緩衝溶液。在本發明的方法步驟中渦旋振搖或超聲1 5分鐘。
9.根據權利要求7的製備方法，步驟如下將硫酸依替米星、聚乙二醇衍生化磷脂、脂溶性添加劑溶於有機溶劑中，置於燒瓶中，利用旋轉蒸發儀，揮幹有機溶劑，在圓底燒瓶表面形成薄而均勻的膜，漿水溶性添加劑(水溶性抗氧劑、滲透壓調節劑、PH值調節劑、金屬離子絡合劑)、及凍幹支持劑溶於水中，將該水溶液加到圓底燒瓶中，振蕩水化，過0. 22um 的微孔濾膜過濾除菌，製備成的納米膠束的粒徑範圍為10 50nm。再凍幹製成凍幹製劑。
10.根據權利要求7的製備方法，配方如下硫酸依替米星IOOg聚乙二醇2000 二硬脂醯磷脂醯乙醇胺 500g 硫代硫酸鈉5g山梨醇500g枸椽酸鹽緩衝溶液調PH值、4. 5~7. 0EDTA0.5g製備工藝如下1)稱取硫酸依替米星IOOg和聚乙二醇2000二硬脂醯磷脂醯乙醇胺500g溶於IOOOm 1無水乙醇中，混合均勻，減壓除去乙醇，得到硫酸依替米星的聚合物膜；2)將500g山梨醇、5g硫代硫酸鈉和0.5g EDTA溶於水，加入所得的聚合物脂膜中，再加入枸椽鹽緩衝溶液高PH值至6. 0，水浴加熱至60°C水化1小時，得到硫酸依替米星聚乙二醇2000硬脂醯磷脂醯乙醇胺包載納米膠束；3)將得到的納米膠束溶液冷凍乾燥，得到硫酸依替米星的凍幹製劑。
全文摘要
本發明公開了硫酸依替米星納米膠束凍乾粉針及其製備方法，其含有治療有效量的硫酸依替米星藥物、聚乙二醇衍生化磷脂、以及藥學上可接受的輔料，其製備是將藥物包裹於形成的納米膠束中，製備成可供注射的硫酸依替米星的納米膠束製劑。本發明的硫酸依替米星納米膠束凍幹製劑不僅達到了血液中長效循環的目的，極大地提高了生物利用度，而且還大大增加了製劑的穩定性。
文檔編號A61K31/7036GK102512365SQ201110431888
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月21日 優先權日2011年12月21日
發明者鄒濟高 申請人:無錫濟民可信山禾藥業股份有限公司, 江西濟民可信集團有限公司