一種高活性醫用光合菌的培養方法和固體活菌的加工方法

2023-08-14 02:02:11 2

專利名稱：一種高活性醫用光合菌的培養方法和固體活菌的加工方法
技術領域：
本發明涉及醫藥領域，尤其涉及一種高活性醫用光合菌的培養及藥用固體 光合菌活菌的加工方法。
背景技術：
自20世紀70年代以來，日本、美國、德國、英國等廣泛開展了光合細 菌的研究開發，因其含有豐富的營養成分和生物活性物質而被開發成多種保 健食品。光合細菌能夠增強動物的抗氧化能力，經動物實驗表明其具有延緩 衰老、免疫調節的作用。據美國商務部透露，僅1992年，美國保健品中約有 5.5% ~6.5%的品種加有不同比重的光合細菌菌液。美國太空署曾撥款3200 萬美元，開發研製在宇宙飛船內製造光合細菌食品的新技術，為太空人長期 滯留太空提供食品保障。其中最具代表性的當屬紐奧良■貝魯斯潘有限公 司投產的PGH濃縮液，富含維生素、人體所需的微量元素、胺基酸等營養成 分，可調節內分泌，提高機體自身的免疫力。還有一種叫"米格申"的含光合 細菌菌液的飲料在健全中樞神經系統，預防老年痴呆等方面效果顯著。在曰 本，光合細菌飲料也因具有延緩衰老的作用以及在防止心臟病、腦梗死、癌 症等方面的神奇功效而備受青睞。日本生物化學工業公司生產的一種"紫色光 合細菌保健食品"還申請了專利。我國已經有人將光合細菌和其他益生菌一起 製成EM(effective microorganisms，有益微生物群)菌劑，並進行了相關報導。 由中國科學院研究生院與山西安泰生物工程公司共同研製開發的"安泰369 口 服液"就是利用光合細菌作為母液發酵製成的微生態保健飲品，經試驗表明其 具有延緩衰老、抑制腫瘤、免疫調節等多種功效。王夢亮等於1995年開發了 一種經過微生物發酵而形成的含有光合細菌菌體蛋白及其代謝分泌物、有機 硒化合物和中草藥發酵物的混合物，並申請了中國專利。此光合細菌製劑能 夠減少X射線引起的白細胞減少及染色體變異，能夠增加小鼠的巨嗟細胞吞 噬量，具有非常明顯的保健治療作用。
由於光合細菌含有豐富的營養成分和生物活性物質，對人體具有保健作 用，因此，其在醫藥保健品方面的應用越來越受到國內外研究者的關注。有 研究表明，在光合細菌培養基中添加一定濃度的木瓜、栝樓、女貞子、鬱金 等中草藥的浸提液，不僅可以明顯促進光合細菌的生長，還可以提高其抑菌 作用。且光合細菌本身能夠完全或部分對抗免疫抑制劑的免疫抑制作用，對
3小鼠的免疫器官與免疫功能有一定的保護作用。近年來，利用光合細菌的代 謝作用對中藥進行生物技術處理，又開闢一新的研究領域。太原康強藥業有 限公司研究開發的一種以中草藥為原料，利用現代生物工程技術研製而成的 富硒光合細菌製劑，能夠明顯提高癌症患者的免疫功能，並且具有一定的抑 瘤作用。劉俊清等利用光合細菌，以還原態硒化物發酵合成了多種生物活性 的有機硒化合物，並且製成了以硒蛋白、硒酸多糖和富硒卟啉色素為主要成 分的"康強硒"製劑，此製劑能夠輔助治療惡性肺瘤，提高患者的免疫力等。史 國富等對康強膠嚢的應用進行了詳細的報導，並高度評價了其採用中藥複方 與光合細菌發酵技術相結合的獨特製備工藝技術，指出該技術是傳統中藥與 現代生物技術的結合應用，對以後的中藥研究、應用、開發作出了新的貢獻。 劉繼彪等用光合細菌菌液發酵中藥，製成了口服液、冷凍乾燥產品等中藥制 劑，該製劑能夠糾正機體內環境微量元素平衡紊亂，促使癌細胞向正常細胞 轉化並最終全部恢復成正常細胞，對惡性腫瘤治療有較顯著的療效，並申請 了國家專利。
光合細菌作為一種營養豐富的光能自養菌，在人類生活的多方面都具有 重要作用，並且已經在世界上許多國家得到廣泛應用。隨著現代工業的發展， 河流、湖泊、近海水域、池塘、養殖池等受汙染的機會增加，人們的生活水 平不斷提高，對魚、肉、蝦產品需求量逐年增大，水域汙染對水產養殖業造 成巨大的危害，為解決這些問題，減少有機廢物的排放併合理處理，有必要 擴大光合細菌的養殖數量增加它的活性來滿足環保、養殖、種植等需求，而 選擇合適的菌林以及適當的培養條件非常關鍵。所以高活性光合細菌的優化 培養技術非常需求。
光合細菌雖然是一個非常古老的微生物菌種，但在醫藥保健品方面的應用 國外早已大量使用，而在我國才剛剛起步。近年來，隨著細胞務子生物學的 應用與發展，生物技術為中藥研究提供了全新的思路，在中藥開發中具有很 大的優勢與廣闊的應用前景。其中，中草藥及其有效生物活性成分的發酵生 產在具有中國特色的生物技術醫藥工業中應用最廣泛。用光合細菌對中藥進 行生物技術處理是這一技術領域新的探索，為現代新藥的研究開發，提供了 一種全新的思路和方法，具有極大的研究價值，目前光合菌培募大部分應用 於農業、養殖業及環保產業，因此迫切需要培養高活性醫藥用光合菌，適用 於醫藥產業的需要。在中國申請號為20061000126.6的中國專利申請中公開一種光合菌培養方 法，其包括提供經濾菌處理的培養液；使該項培養液盛裝於透明塑料瓶內； 添加少量光合菌種原至前述透明塑料瓶內進行培養。上述發明的優勢主要是 採用市面上常見的透明寶特瓶為光合菌的培養容器，光源採用最自然的太陽 光，在生產設備的投資方面可節省昂貴的發酵槽投資成本。其培養條件為培 養溫度10至37°C ，優選為15至35, 。C光照度為800至12000Lux，優選為 1000至10000Lux,培養14至15天。 '
也就是說，隨著細胞分子生物學的應用與發展，生物技術為中藥研究提 供了全新的思路，用光合細菌對中藥進行生物技術處理是這一技術領域新的 探索，為現代新藥的研究開發，提供了一種全新的思路和方法，具有極大的 研究價值，因此迫切需要培養高活性醫藥用光合菌和藥用固體光合菌活菌適 應醫藥產業的需要。

發明內容
本發明的目的在於提供一種培養高活性醫用光合菌的培養方法 本發明的第二目的在於提供一種藥用固體光合菌活菌的加工方法。 一種高活性醫用光合菌的培養方法，包括
在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及培養基，所述培 養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬鉀l公斤、磷酸氬 二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氫鈉0.5^>斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加劑的標準)、符合食用標準的氯化鈉l公斤、 符合藥用標準的維生素B1 100克、維生素B2 100克、維生素B6 100克、 生物素D 2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克等；
於潔淨的日光溫室內，溫度為25°C—3°C2,加菌種200公斤，自然光照條 件下培養7--IO天，獲得培養成熟的光合菌(檢測每毫升大於60個億)。
一種藥用固體光合菌活菌的加工方法，包括
在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及培喬基，所述培 養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬鉀l公斤、磷酸氬 二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氫鈉0.5公斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加劑的標準)、符合食用標準的氯化鈉l公斤、符 合藥用標準的維生素B1 100克、維生素B2 100克、維生素B6 100克、 生物素D2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克等； .
5於潔淨的日光溫室內，溫度為25-°C—32°C,加菌種200公斤，自然光照條 件下培養7…10天,獲得培養成熟的光合菌(檢測每毫升大於60個億)；
光合菌100公斤、低聚異構麥芽糖6.5公斤、蔗糖IO公斤、生物素…D 3 公斤、維生素E 2公斤於零下-80。C在2小時內凍成冰，然後在50。C抽真空， 蒸發乾得光合菌凍乾粉,全精工包包裝在鋁箔袋備用。全部生產過程在100萬 級淨化，符合GMP生產要求的條件下完成。 本專利和以前專利比4交具有以下優點
1、 產量大、工藝簡單，臺灣蘇先生專利使用塑料瓶培養產量小，操作煩 瑣，使用PET1000公斤的塑料桶培養產量大。
2、 以前專利使用PE、 PVC塑料瓶培養不利於培養出高生物活性的光合 菌，因為PE和PVC的助劑經太陽光照射後有部分助劑揮發影響光合菌的活 性，因此這種方法培養的光合菌液生物活性低，同時殘留有害物質於菌液不 適合藥用。
3、 使用潔淨的日光溫室比較好控制溫度，使用空調和遮陽網，溫度控制的 好，不利於雜菌生長，保障了光合菌的菌抹的純度，而以前專利只是開放性培 養，難免溫度過高與過低影響培養質量和菌抹純度。
4、 本專利使用的培養基提供了全面的多種營養元素，保障了光合菌合成 分泌的需求，保障可以合成更多的生物活性物質而以前專利培養基營養比較 單一，不能合成更多的活性分泌物。
5、 本專利使用的培養基全部符合食品、藥品生產的要求，最終產品符合 藥用要求。
6、 使用大桶培養，不僅產量高，而且有利於緩衝太陽光的照射吸光溫度 過高，臺灣蘇先生專利無法做無法作到緩沖太陽光照射後的溫度升的快和降 的快的缺點
7、 生產的菌液活菌數量，菌液中活性成分的含量大大提高，'前任專利因 為上述種種條件無法生產高生物活性適合藥用的光合菌。
8、 本專利培養的時間短，不僅可以提高產量而且可以大大節約人工成本。
9、 本專利提供的培養基營養更全面，光合菌利用可以產生更多生物活性物質。
具體實施例方式
6以下具體說明本發明。一種高活性醫用光合菌的培養方法，包括在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及培養基，所述培 養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氫鉀l公斤、磷酸氬 二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氫鈉0.5公斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加劑的標準)、符合食用標準的氯化鈉l公斤、 符合藥用標準的維生素B1 100克、維生素B2 100克、維生素B6 100克、 生物素D2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克等； -於潔淨的日光溫室內，溫度為2°C5-32°C，加菌種200公斤，自然光照條 件下培養7…10天,獲得培養成熟的光合菌(檢測每毫升大於60個億)。一種藥用固體光合菌活菌的加工方法，包括在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及培養基，所述培 養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬鉀l/》斤、磷酸氮 二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鉀0.8公斤、碳酸氳鈉0.5公斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加劑的標準)、符合食用標準的氯化鈉l公斤、 符合藥用標準的維生素B1 100克、維生素B2 100克、維生素B6 100克、 生物素D 2 />斤、亞竭酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克等；於潔淨的日光溫室內，溫度為25-°C—32°C，加菌種200公斤，'自然光照條 件下培養7…10天,獲得培養成熟的光合菌(檢測每毫升大於60個億)；光合菌100公斤、低聚異構麥芽糖6.5公斤、蔗糖10公斤、生物素D 3 公斤、維生素E 2公斤於零下-80。C在2小時內凍成冰,然後在50。C抽真空， 蒸發乾得光合菌凍乾粉(水分小於5%),全精工包包裝在鋁箔袋誇，全部生產 過程在100萬級淨化，符合GMP生產要求的條件下完成。實例一1、培養基配方醋酸鈉3。 7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬鉀 1公斤、磷酸氫二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氬鈉0.5 公斤、酵母浸膏1公斤(以上均符合食品添加劑的標準)、氯化鈉1公斤(食 用標準)、(後邊的符合藥用標準)維生素B1 IOO克、維生素.B2 IOO克、 維生素B6 100克、生物素D2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克 等、純化水800公斤等。2、培養方法；在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及上 述培養基，於潔淨的日光溫室內，溫度為25-°C—3°C2，加菌種200公斤，自然光照條件下培養7…10天，檢測光合菌的數量可高達80億個/毫升， 一般控 制在70…80億個/毫升為培養成熟。
3、最終產品凍幹，凍幹的方法如下光合菌IOO公斤、低聚異構麥芽糖6。 5公斤、蔗糖10公斤、生物素…D 3公斤、維生素E 2公斤於零下-80度 在2小時內凍成冰,然後在50度抽真空,蒸發乾得光合菌凍乾粉.精工包包裝在 鋁箔袋備用,全部過程在100萬及淨化條件下完成，最後4全驗無雜菌.凍幹的光 合菌粉240個億/克活菌，全部生產過程在IOO萬級淨化，符合GMP生產要 求的條件下完成。
實例二、培養基配方醋酸鈉5公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氫鉀O。 5 公斤、磷酸氫二鉀O。 5公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氫鈉1 公斤、酵母浸膏1公斤(以上均符合食品添加劑的標準)、氯化鈉1公斤(食
用標準)、(後邊的符合藥用標準)維生素B1 IOO克、維生素B2 IOO克、 維生素B6 100克、生物素D 2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500 克等、純化水800公斤等。
2、培養方法；在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及上 述培養基，於潔淨的日光溫室內，溫度為25—°C-32°C,加菌種2'00公斤，自 然光照條件下培養7…10天，檢測光合菌的數量可高達70億個/毫升， 一般控 制在70…80億個/毫升為培養成熟。
最終產品凍幹，凍幹的方法如下光合菌100公斤、低聚異構麥芽糖6。 5 公斤、蔗糖10公斤、生物素…D 3公斤、維生素E 2公斤於零下-80度在 2小時內凍成冰，然後在50度抽真空,蒸發乾得光合菌凍乾粉.全#工包備用,全 部過程在100萬及淨化條件下完成,最後檢驗無雜菌.凍幹的光合菌粉200個億 /克活菌活菌。全精工包包裝在鋁箔袋備用,凍幹的光合菌粉200個億/克活菌個 活菌，全部生產過程在IOO萬級淨化，符合GMP生產要求的條件下完成。
以上公開的僅為本發明的幾個具體實施例，但本發明並非局限於此，任 何本領域的技術人員能思之的變化，都應落在本發明的保護範圍內。
權利要求
1、一種高活性醫用光合菌的培養方法，其特徵在於，包括在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及培養基，所述培養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氫鉀1公斤、磷酸氫二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氫鈉0.5公斤、酵母浸膏1公斤，上述原料符合食品添加劑的標準，符合食用標準的氯化鈉1公斤、符合藥用標準的維生素B1 100克、維生素B2 100克、維生素B6 100克、生物素D2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克；於潔淨的日光溫室內，溫度為25℃---32℃，加菌種200公斤，自然光照條件下培養7---10天，獲得培養成熟的光合菌。
2、 一種固體光合菌活菌的加工方法，其特徵在於，包括在1000公斤的透明的pet樹脂桶內加800公斤純化水及培養基，所述培 養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氫鉀l公斤、磷酸氫 二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化4丐0.8公斤、碳酸氫鈉0.5公斤、酵母浸膏 l公斤，上述原料符合食品添加劑的標準符合食用標準的氯化鈉l公斤，以上 原料均符合食品添加劑標準、符合藥用標準的維生素b1 100克、維生素b2 100克、維生素b6 100克、生物素d2公斤、亞硒酸鈉300克、.葡萄糖酸鋅 500克；於潔淨的日光溫室內，溫度為25-°c—3°c2，加菌種200公斤，自然光照條 件下培養7…io天,獲得培養成熟的光合菌，檢測每毫升60個億以上；光合菌100公斤、低聚異構麥芽糖6.5公斤、蔗糖10公斤、生物素d 3 公斤、維生素e 2公斤於零下-8(rC在2小時內凍成水,然後在50。c抽真空， 蒸發乾得水分不超過5%的光合菌凍乾粉，精工包包裝在鋁箔袋備用，全部生 產過程在100萬級淨化，符合gmp生產要求的條件下完成。
全文摘要
一種高活性醫用光合菌的培養方法，包括在1000公斤的透明的PET樹脂桶內加800公斤純化水及培養基，所述培養基配方包括醋酸鈉3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氫鉀1公斤、磷酸氫二鉀1公斤、硫酸鎂1公斤、氯化鈣0.8公斤、碳酸氫鈉0.5公斤、酵母浸膏1公斤，以上均符合食品添加劑的標準，符合食用標準的氯化鈉1公斤、符合藥用標準的維生素B1 100克、維生素B2 100克、維生素B6 100克、生物素D2公斤、亞硒酸鈉300克、葡萄糖酸鋅500克等；於潔淨的日光溫室內，溫度為25℃-32℃，加菌種200公斤，自然光照條件下培養7-10天，獲得培養成熟的光合菌檢測每毫升60個億以上)。本發明還公開了對藥用固體光合菌進行加工的工藝。本發明為現代新藥的研究開發，提供了一種全新的思路和方法，具有極大的研究價值。
文檔編號C12N1/20GK101624575SQ200810249539
公開日2010年1月13日 申請日期2008年12月26日 優先權日2008年12月26日
發明者於建敏, 紅 周, 蒙 魏 申請人:魏 蒙;周 紅;於建敏