一種治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊的製作方法

2023-08-13 12:52:11 4

專利名稱：一種治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊的製作方法
技術領域：
本發明涉及中藥領域，特別是一種治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊。
背景技術：
糖尿病是一個在全球範圍內發病率快速增長的疾病，根據世界衛生組織的統計， 1998年全世界糖尿病人數為1. 35億，2000年達到1. 6億，2004年達2. 4億。預計到2030 年將達到3. 7億。全世界糖尿病患病人數最多的前三個國家是印度、中國和美國。目前我 國糖尿病的患病率在3%以上，糖尿病的患病人數估計已達5000萬左右。糖尿病在全國各 地各階層的發病率都很高，已成為威脅人類健康的第四大殺手。糖尿病的可怕並不在於糖尿病本身，而在於其併發症。糖尿病的併發症對患者的 長期健康有害，影響生活質量及預期壽命，是糖尿病人致殘和死亡的主要原因。糖尿病腎病 (DiabeticNephropathy,DN)是指糖尿病(Diabetes mellitus，DM)微血管病變所引起的腎 髒結構和功能的改變，是DM常見和嚴重的遠期併發症之一。隨著人民生活水平的提高、人 口老齡化及生活方式的改變，世界範圍內，DM發病率日益增多，DN也隨之急劇增加。在西 方國家DN已成為終末期腎臟病(End stage renal disease,ESRD)的主要原因，約40%的 ESRD患者是由DN所致，每年新增ESRD患者中50%以上是由DN引發。在我國DM患病率也 不斷增高，據估計我國DM患者已超過4000萬。我國因DN而發生慢性腎衰竭的人數也逐年 上升。DM病人一旦發生腎損害表現，持續性尿蛋白難以逆轉，最終進展到終末期腎功能衰 竭。因此如何早期防止DM向DN發展，或採用有效的措施阻止DN向終末期進展，是國內外 學者研究的熱點之一。目前現代醫學對於糖尿病併發症特別是糖尿病腎病尚缺乏行之有效的治療藥物， 現代醫學對糖尿病的認識要晚於中醫，藉助了解剖學及生化、病理學的研究方法，比較清楚 地認識到糖尿病的內在病理變化及臨床類型，隨著胰島素的人工合成與化學合成降糖藥在 臨床上的廣泛使用，糖尿病的血糖控制在大多數情況下能夠實現。但是，單純降糖作用對 併發症多無明確的療效，且易產生耐藥性。很多服用降糖藥及注射胰島素治療的病人隨著 時間的延長，藥量會逐漸增加，投入的藥物種類也常由單一逐漸變為聯合，長期應用剌激胰 島，使胰腺長期處於緊張的工作狀態，最終導致胰島功能障礙，同時出現血糖反覆反彈，血 液流變學改變，形成血黏稠度增加，血微循環發生障礙，最後致心、腦、腎併發症及體重增 加，水腫，肝藥酶升高等不良反應。

發明內容
針對上述情況，為克服現有技術的缺陷，本發明的目的就在於提供一種治療糖尿 病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊，可有效解決糖尿病及早期糖尿病腎病治療的問題，本發 明由薑黃提取物105 130g、黃芪提取物(主要是黃芪總皂苷)65 85g、澱粉、滑石粉制 成，薑黃提取物和黃芪提取物粉碎過100目篩，混合均勻，再加入澱粉、滑石粉混均，制粒， 裝入膠囊，即得；
澱粉、滑石粉加入量<薑黃提取物、黃芪提取物、澱粉、滑石粉總重量和的10%，澱 粉、滑石粉重量比約為1 1。所說的薑黃提取物是，稱取粉碎後的薑黃藥材，放入微波提取罐內，乙醇用量為姜 黃藥材重量的20倍，即薑黃與乙醇的重量比為1 20，提取溫度50°C，提取時間30min，提 取功率200W，得薑黃粗提液備用；S-8大孔吸附樹脂純化S_8大孔吸附樹脂先用乙醇浸泡24小時，用蒸餾水洗滌至 無醇後備用；將處理好的大孔吸附樹脂溼法裝柱，將薑黃粗提液以lmL/min流速通過層析 柱進行吸附，先用4倍樹脂體積的水洗脫雜質，再用8倍樹脂體積的無水乙醇洗脫，收集無 水乙醇洗脫液，減壓濃縮乙醇，乾燥粉碎，得薑黃提取物，得率約3. 5%，本品為黃色的粉末， 味苦，分光光度法測定，本品含總薑黃素以薑黃素計不少於58. 0% ；HPLC法測定，本品每Ig 含薑黃以薑黃素(C21H200 6)計，不得少於15.0%。總薑黃素照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V )測定，本品含總薑黃 素以薑黃素計不少於58.0%。薑黃素照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件 與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；流動相為乙腈-0. 5%醋酸水溶 液(45 55)，流速1.01^.1^11-1，檢測波長43011111，柱溫301，理論塔板數按薑黃素峰計，不 低於4000。所說的黃芪提取物是，稱取黃芪藥材粗粉，用70%的乙醇回流提取2次，第一次加 入黃芪藥材重量的12倍的無水乙醇提取1. 5h，第二次加入黃芪藥材重量的8倍的無水乙 醇提取lh，合併提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，加水適量，靜置，濾過，得黃芪樣 品提取液。取黃芪乙醇提取液(150mg/ml)，回收乙醇至無醇味，過大孔吸附樹脂柱，先用4 倍樹脂體積的水洗脫，繼用8倍樹脂體積的30%乙醇洗去雜質，再用8倍樹脂體積的70% 乙醇洗脫，收集70 %乙醇洗脫液，減壓濃縮乙醇，乾燥粉碎，得黃芪提取物，得率約3 %，本 品為淡黃色的粉末，味微苦；分光光度法測定，本品含總皂苷以黃芪甲苷計不少於75.0% ； HPLC法測定，本品每Ig含黃芪以黃芪甲苷(C41H68014)計，不得少於7.2%。黃芪總皂苷將黃芪提取物用分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V )測 定，本品含黃芪總皂苷以黃芪甲苷計不少於75. 0%。黃芪甲苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條 件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；流動相乙腈-水(35 65)； 蒸發光散射檢測器。理論塔板數按黃芪甲苷色譜峰計，不低於4000。本發明為膠囊劑，內容物為淡黃色至黃棕色顆粒，氣微，味微苦，破瘀行氣，補益脾 肺。用於糖尿病及早期糖尿病腎病的治療，治療時，口服本發明，一次2粒，一日3次。本發明製備方法簡單，配伍得當，療效好，無毒副作用，在治療糖尿病及早期糖尿 病腎病方面有顯著效果，是治療糖尿病及早期糖尿病腎病上的創新，具有巨大的經濟和社 會效益。
具體實施例方式以下結合實際情況對本發明的具體實施方式
作詳細的說明。實施例1
本發明由薑黃提取物105g、黃芪提取物65g製成，取薑黃提取物和黃芪提取物，粉 碎過100目篩，混合均勻，加入澱粉、滑石粉各9g混勻，制粒，裝入膠囊，即得，每粒0. 3g。實施例2本發明也可由薑黃提取物117g、黃芪提取物75g製成，取薑黃提取物和黃芪提取 物，粉碎過100目篩，混合均勻，加入澱粉、滑石粉各Ilg混勻，制粒，裝入膠囊，即得，每粒 0. 3g。實施例3本發明還可由薑黃提取物130g、黃芪提取物85g製成，取薑黃提取物和黃芪提取 物，粉碎過100目篩，混合均勻，加入澱粉、滑石粉各8g混勻，制粒，裝入膠囊，即得，每粒 0. 3g。中醫通過調整失衡的陰陽，提高自身對血糖的利用和轉化能力，從而降低血糖，而 不通過刺激B細胞分泌胰島素來降低血糖，使用中藥治療從客觀意義上說具有保護、修復 胰島B細胞的作用。雖然在控制血糖方面中醫藥力度欠佳，但在緩解臨床症狀方面療效卻 很顯著，中藥迅速緩解患者臨床症狀，會給患者帶來治病的信心，標本兼治。西藥針對並發 症特別是糖尿病腎病無特殊有效的治療方法和藥物，而應用中藥治療糖尿病併發症療效確 切。中藥乃全天然藥材，與西藥對比，只要辨證正確，毒副作用極小，對胰島B細胞沒有刺激 作用，不會發生低血糖事件；只要配伍得當，不存在5年失效的問題。它對人體起到調節、強 壯的作用。本發明有效用於糖尿病及早期糖尿病腎病的治療，並經實驗得到充分證明，其實 驗資料如下實驗一本發明姜芪膠囊對病因性糖尿病模型小鼠的影響1實驗材料1. 1藥物本發明姜芪膠囊，藥物分析學科製備；鹽酸二甲雙胍片，0. 25g/片，48 片/盒，批號08102。1.2試劑鏈脲佐菌素，sigma公司；葡萄糖，廣東汕頭市西隴化工廠，批號 081210;檸檬酸(分析純)，湖北省醫藥公司化玻站，批號080523;檸檬酸鈉(分析純)，天 津市化學試劑批發部，批號080502;生理鹽水，鄭州化學藥業有限公司，規格500ml/瓶，批 號080809 ；葡萄糖測定試劑盒浙江東毆生物有限公司，批號081001。1. 3儀器 752分光光度計，上海第三分析儀器廠；UV-2000分光光度計，尤尼柯 (上海)儀器有限公司；FA (N)/JA (N)系列電子天平，上海民橋精密儀器有限公司；TGL-16G 高速冷凍離心機，上海安亭科學儀器廠；DZKW-4型電子恆溫水浴鍋，北京市永光明醫療儀 器廠；可調式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司；OLYMPUS光學顯微鏡。1. 4動物小鼠，昆明種，SPF級，雄性，體重17 20g ；由河南醫學動物實驗中心 提供，許可證號:410115。1.5試液配製 pH = 4. 2枸櫞酸緩衝液的配製0. lmol/L的枸櫞酸123ml， 0. lmol/L枸櫞酸鈉77ml，臨用前配製。10%福馬林固定液的配製36%甲醛溶液10ml， 用蒸餾水配成100ml。2實驗方法與結果取雄性小鼠72隻，隨機均勻分為6組，正常飼養3天，禁食12h後，空白對照組尾靜脈注射同體積緩衝液，其餘5組尾靜脈注射鏈脲佐菌素30mg/kg(0. 02ml/10g, c :15mg/ ml)，並於第1次注射後第14天加注同等量的STZ。除空白對照組外每天上午灌服高濃度蔗 糖30g/kg，同時飲用5%蔗糖水，下午分別灌服大、中、小劑量本發明姜芪膠囊(600mg/kg、 300mg/kg、150mg/kg，配成濃度為 30mg/ml、15mg/ml、7. 5mg/ml，灌胃體積為 0. 2ml/10g)，二 甲雙胍(0. 5g/kg，配成濃度為25mg/ml，灌胃體積為0. 2ml/10g)及同體積生理鹽水。每天 給藥1次，於給藥第10、20天尾靜脈取血測血糖值。第30天在禁食後12h末次給藥後lh， 尾部採血測空腹血糖後，灌服葡萄糖(5g/kg，0.4ml/10g)，並分別於灌糖後30min、60min、 120min尾部採血，測不同時間血糖水平。處死小鼠後取胰腺、腎臟，10%福馬林液固定，作 組織病理。結果見表1、表2、表3。數據分析用SPSS 12.0 for windows統計軟體，計量資 料組間比較採用單因素方差分析，等級資料採用Ridit分析。表1本發明姜芪膠囊對小劑量鏈脲佐菌素加蔗糖致病因性糖尿病模型小鼠血糖的影響 土s) 與模型組比，**表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從表1可以看出與空白組比，模型組各階段血糖值顯著升高，說明造模成功。 與模型組比，二甲雙胍可明顯降低造模小鼠給藥後第10天血糖值(P<0. 05)，可顯著降 低第20、30天血糖值(P <0.01)；大劑量本發明姜芪膠囊可明顯降低第20天血糖值(P <0.05)，可顯著降低第30天血糖值(P <0.01)；中劑量本發明姜芪膠囊可顯著降低第30 天血糖值(P < 0. 01)，有降低第20天血糖值的趨勢；小劑量本發明姜芪膠囊能顯著降低小 鼠第30天血糖值(P<0.01)，對第10、20天的血糖值無明顯影響。說明本發明姜芪膠囊和 二甲雙胍均可不同程度地對抗模型小鼠的血糖升高。表2本發明姜芪膠囊對小劑量鏈脲佐菌素加蔗糖致病因性糖尿病模型小鼠糖耐量的影響 ±s) 與模型組比，**表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從上表可以看出與空白組比，模型組在灌糖水後60min、120min血糖水平均顯 著增高，說明造模小鼠糖耐量降低。與模型組比，二甲雙胍可明顯降低造模小鼠灌糖水後 30min血糖值(P < 0. 05)，可顯著降低灌糖水60min、120min血糖值(P < 0. 01)；大劑量本 發明姜芪膠囊可明顯降低30min、60min、120min血糖值(P < 0. 05)；中劑量本發明姜芪膠 囊可明顯降低30min、60min、120min血糖值(P < 0. 05)；小劑量本發明姜芪膠囊明顯降低 60min血糖值(P < 0. 05)。說明二甲雙胍、大、中劑量本發明姜芪膠囊可改善糖尿病模型小 鼠的糖耐量降低。表3本發明姜芪膠囊對糖尿病模型小鼠腎臟和胰腺組織的影響 「_」為腎小管上皮細胞和腎小球及間質均正常；「 + 」腎小管上皮細胞有輕度水腫； 「++」腎小管上皮細胞廣泛水腫，間質伴有炎細胞浸潤；「+++」腎小管上皮細胞廣泛水腫和 間質大量炎細胞浸潤及腎小球細胞增生，腎小囊腔變窄。「_」為胰島細胞主要β細胞胞漿均豐富飽滿；「 + 」為胰島細胞主要β細胞出現 2 4個細胞萎縮，細胞胞漿明顯減少；「++」為胰島細胞主要β細胞出現5 9個細胞萎 縮，細胞胞漿明顯減少；「+++」為胰島細胞β細胞出現10個以上的細胞萎縮，胞漿明顯減 少。從表3可以看出空白組腎小球、腎小管上皮細胞及間質基本正常。模型組腎臟 大部分腎小管上皮細胞水腫和間質的不同程度的炎細胞浸潤，經Ridit檢驗P 0.05)；大、中劑 量本發明姜芪膠囊組腎小球、腎小管上皮細胞及間質基本正常(P 0. 05)。結果提示中劑量本發明姜芪膠囊對小劑量鏈脲佐菌素加蔗糖致病因性糖尿病模型 小鼠的腎臟的病變有保護作用，作用強於二甲雙胍。從表3也可以看出空白組動物各胰島細胞中的β細胞胞漿豐富飽滿，模型組動 物胰島細胞中β細胞明顯萎縮，胞漿明顯減少，經Ridit檢驗P <0.01，說明造模小鼠出現 胰腺損傷。與模型組比，二甲雙胍可明顯抵抗胰島細胞中部分β細胞的萎縮，使部分胞漿 得到改善(P <0.05)；大劑量本發明姜芪膠囊可對抗部分β細胞萎縮，使大部分胞漿較豐 富(P <0.05)；中劑量本發明姜芪膠囊可對抗大部分β細胞的萎縮，使大部分胞漿得到明 顯改善(P 0.05)。結果提示大、中劑量本發明姜芪膠囊組和二甲雙胍組對鏈脲佐菌素所 致的胰島損傷有保護作用。實驗二、本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠的影響1實驗材料1. 1藥物本發明姜芪膠囊，藥物分析學科製備；鹽酸二甲雙胍片，0. 25g/片，48 片/盒，批號08102。1.2試劑鏈脲佐菌素，sigma公司；葡萄糖，廣東汕頭市西隴化工廠，批號 081210 ；檸檬酸(分析純)，湖北省醫藥公司化玻站，批號080523 ；檸檬酸鈉(分析純)，天津 市化學試劑批發部，批號080502;生理鹽水，鄭州化學藥業有限公司，規格500ml/瓶，批號 080809 ；葡萄糖測定試劑盒浙江東毆生物有限公司，批號081001 ；MAU檢測試劑盒，南京建 成生物工程研究所，批號081120 ；Scr檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號081114 ； BUN檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號081108 ；NO檢測試劑盒，南京建成生物工 程研究所，批號081110 ；NOS檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號0811161. 3儀器 752分光光度計，上海第三分析儀器廠；UV-2000分光光度計，尤尼柯 (上海)儀器有限公司；FA (N)/JA (N)系列電子天平，上海民橋精密儀器有限公司；TGL-16G 高速冷凍離心機，上海安亭科學儀器廠；DZKW-4型電子恆溫水浴鍋，北京市永光明醫療儀 器廠；可調式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司；OLYMPUS光學顯微鏡；日立H-7500透射 電子顯微鏡。1.4動物大鼠，SPF級，Wistar，雄性，體重165 185g，均由河南醫學動物實驗 中心提供，許可證號:410117。1.5試液配製 pH = 4. 2枸櫞酸緩衝液的配製0. lmol/L的枸櫞酸123ml， 0. lmol/L枸櫞酸鈉77ml，臨用前配製。10%福馬林固定液的配製36%甲醛溶液10ml，用 蒸餾水配成100ml。4%的戊二醛固定液的配製磷酸氫二鈉35. 61g，用雙蒸水配成IOOOml ； 磷酸二氫鈉27. 60g，用雙蒸水配成1000ml。取磷酸氫二鈉溶液40. 5ml和磷酸二氫鈉溶液 9. 5ml混勻後加入25%戊二醛16. 0ml，再加雙蒸水至100ml。2實驗方法與結果取大鼠100隻，禁食12h後尾靜脈注射鏈脲佐菌素60mg/kg (用pH為4. 2的枸櫞酸 緩衝液配製)，另選10隻設為完全空白對照組，尾靜脈注射等體積的枸櫞酸緩衝液。第10 天尾部取血測血糖值，選取血糖值> 11. lmmol/L並具有明顯多飲、多食、多尿症狀的大鼠 50隻，按血糖值隨機均分為5組，分別灌大中、小、劑量本發明姜芪膠囊(300mg/kg、150mg/ kg、75mg/kg，配成濃度為 30mg/ml、15mg/ml、7. 5mg/ml，灌胃體積均為 lml/100g)，二 甲雙胍 片250mg/kg(25mg/ml，lml/100g)，模型組與空白對照組給予同體積生理鹽水，每天給藥1 次，連續給藥40天，分別於給藥的第10、20、30天測空腹血糖值，每次測血糖前觀察尿量，於 最後一次測血糖前一天禁食，代謝籠收集12小時夜尿，離心(3000rpm/min) 10分鐘，冷藏代 用；灌藥2h後，取血，分離血清。處死大鼠後取胰臟、腎臟作常規病理，取腎臟作透射電鏡觀 察。數據分析用SPSS 10.0 for windows統計軟體，計量資料組間比較採用單因素方差分 析，等級資料採用Ri dit分析。胸腺皮質厚度及淋巴細胞數的測定方法用測微尺測得胸 腺皮質最寬處和最窄處，求均值為皮質厚度；將測微尺基線壓在胸腺皮質上的淋巴細胞計 數，求均值為淋巴細胞數。結果見表4、表5、表6、表7、表8。
表4本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠血糖的影響(I 士s) 與模型組比，**表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從上表可以看出與空白組比，模型組血糖水平顯著高於空白組(P <0.01)，說明 鏈脲佐菌素造糖尿病腎病模型成功。與模型組比，二甲雙胍可顯著降低給藥後第20、30、40 天血糖值(P < 0. 01)，對第10天血糖值無明顯影響；大劑量本發明姜芪膠囊可明顯降低第 20天血糖值(P <0.05)，可顯著降低第30、40天血糖值(P < 0. 01)；中劑量本發明姜芪膠 囊可顯著降低第20、30、40天血糖值，有降低第10天血糖值趨勢；小劑量本發明姜芪膠囊可 明顯降低第30天血糖值(P < 0. 05)、顯著降低第40天血糖值(P < 0. 05)。表5 玉米須總皂苷對糖尿病腎病模型大鼠血肌酐、尿肌酐、腎指數的影響
(X 士S)
與模型組比，**表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從上表可以看出模型組大鼠血肌酐、尿肌酐、腎指數顯著升高(P < 0. 01)。與模 型組比，大、中、小劑量玉米須總皂苷可顯著降低血肌酐、尿肌酐、腎指數值(P < 0.01)。表6本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠血BUN、MAU、Ccr的影響 土s) 與模型組相比，#表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從上表可以看出，與空白組比，模型組BUN、MAU、Ccr顯著升高。與模型組比，二甲 雙胍可顯著降低BUN、MAU值(P < 0. 01)；大、中劑量本發明姜芪膠囊可顯著降低BUN、MAU 值(P < 0.01)；小劑量本發明姜芪膠囊可明顯降低BUN(P < 0.05)、顯著降低MAU值(P < 0. 01)，中、小劑量本發明姜芪膠囊可明顯降低Ccr (P < 0. 05)。表7姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠N0、N0S水平的影響 土s) 與模型組相比，#表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05 ；從上表可以看出與空白組比，模型組N0、N0S均顯著升高(P < 0. 01)。與模型組 比，二甲雙胍可顯著降低N0、N0S水平(P<0.01)；大、中、小劑量本發明姜芪膠囊可顯著降 低 NO、NOS 水平(P < 0.01)。表8本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠腎臟和胰腺組織的影響 「_」為腎小管上皮細胞和腎小球及間質均正常；「 + 』 「++」腎小管上皮細胞廣泛水腫，間質伴有炎細胞浸潤；「+++ 間質大量炎細胞浸潤及腎小球細胞增生，腎小囊腔變窄。
腎小管上皮細胞有輕度水腫； 』腎小管上皮細胞廣泛水腫和
「_」為胰島細胞主要β細胞胞漿均豐富飽滿；「 + 」為胰島細胞主要β細胞出現 2 4個細胞萎縮，細胞胞漿明顯減少；「++」為胰島細胞主要β細胞出現5 9個細胞萎 縮，細胞胞漿明顯減少；「+++」為胰島細胞β細胞出現10個以上的細胞萎縮，胞漿明顯減 少。從上表可以看出空白組大鼠的腎小球、腎小管上皮細胞及間質基本正常。模型 組大鼠腎臟廣泛的腎小管上皮細胞水腫和間質不同程度的炎細胞浸潤，經Ridit檢驗P <0.01，說明造模大鼠的腎臟發生損傷。與模型組比，大劑量及中劑量本發明姜芪膠囊可保 護腎小球、腎小管上皮細胞，使其得到顯著改善(P < 0. 01)，二甲雙胍組和小劑量本發明姜 芪膠囊可部分改善腎小管上皮細胞的廣泛水腫和間質炎細胞的浸潤(P < 0. 05)。結果提 示本發明姜芪膠囊組對鏈脲佐菌素所致模型大鼠的腎臟損傷有較好的保護作用。從上表也可以看出空白組大鼠各胰島細胞中的β細胞胞漿豐富飽滿，模型組大 鼠胰島細胞中β細胞明顯萎縮，胞漿明顯減少，經Ridit檢驗P 0.05)；大、中劑量本發明姜芪膠囊可對抗大部分β細胞萎縮，使大部分胞漿得到顯著改 善(P 0. 05)。結果提示大、中劑量本發明姜芪膠囊對鏈脲佐菌素所致的胰島損傷有保護作用，作 用明顯強於二甲雙胍組。表9本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠胸腺皮質厚度、淋巴細胞數的影響 與模型組相比，#表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從上表及光鏡下對糖尿病大鼠胸腺組織的觀察可以看出模型組大鼠的胸腺皮質 出現不同程度的皮質厚度變薄、細胞稀疏等病理改變。與模型組比，大、中、小劑量本發明姜 芪膠囊組大鼠胸腺皮質厚度有顯著改善(P < 0.01)，淋巴細胞數有顯著增加(P < 0. 01)。表10本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠腎小管上皮細胞線粒體體密度(Vv)、比表面(δ )、比膜面(δ m)的影響(單位μ m3，μ m2) 與模型組相比，#表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05
表11本發明姜芪膠囊對糖尿病腎病模型大鼠腎小管上皮細胞核比表面(δ )、異、常染色質的體密度(Vv)的影響(單位μ m3，μ m2) 與模型組相比，#表示P < 0. 01，*表示P < 0. 05從上表可以看出空白組近曲小管上皮細胞有排列整齊而密集的微絨毛，胞漿內 有豐富的線粒體存在，大部分線粒體嵴排列密集，嵴間隙少部分增寬，遠曲小管上皮細胞無 微絨毛，胞漿內含有豐富的線粒體，部分線粒體嵴排列密集，部分線粒體嵴排列紊亂，嵴間 腔有所增寬，核周出許多空胞，呈現水腫狀態；模型組近曲小管上皮細胞有排列整齊而密集 的微絨毛呈橫切面，細胞核呈不規則皺縮，染色質呈現異染色質增多而常染色質減少，胞漿 內線粒體大多數呈水腫狀態，嵴呈現不規則，嵴間腔大小不等，部分線粒體嵴溶解或消失。 遠曲小管上皮細胞呈現水腫狀態，胞漿內特別是核周圍出現大小不一的空泡，基質溶解，線 粒體明顯減少，嵴部分溶解消失，嵴間腔增大，少部分線粒體嵴排列整齊密集，核膜部分出 現皺摺，染色質降解。與模型組比，各劑量本發明姜芪膠囊可不同程度地改善上述腎臟超微 結構的改變。成組資料t檢驗表明，造模後腎小管上皮細胞線粒體體密度(線粒體Vv)、比 膜面(δ m)、常染色質體密度(常染色質Vv)均顯著降低(P < 0. 01)，比表面(δ )、核比表 面(核S)、異染色質體密度(異染色質Vv)均顯著升高(P <0.01)。大、中、小本發明姜芪 膠囊均可顯著升高腎小管上皮細胞線粒體Vv、δ m、常染色質Vv (P < 0. 01)，均可顯著降低 S、核3、異染色質*( <0.01)。大、中、小劑量本發明姜芪膠囊均可顯著升高腎小管上 皮近曲小管常染色質Vv (P <0.01),可顯著降高近曲小管核(δ )、異染色質Vv (P <0.01)； 大、中、小劑量本發明姜芪膠囊均可顯著降低腎小管上皮遠曲小管核(S)、常染色質Vv(P <0.01),可顯著升高遠曲小管異染色質Vv (P < 0. 01)。結論本發明姜芪膠囊能明顯降低和改善小劑量鏈脲佐菌素加高糖飲食所致高血 糖小鼠模型血糖水平及糖耐量降低，可明顯對抗小鼠胰島細胞中β細胞萎縮，使胞漿得到 明顯恢復，可一定程度上改善造模小鼠胰腺組織病理變化，對糖尿病模型小鼠的腎臟有保 護作用，作用與二甲雙胍相當；不同劑量本發明姜芪膠囊可不同程度降低鏈脲佐菌素所致 糖尿病模型大鼠血清中血糖、肌酐、尿素氮、N0、N0S，尿液中尿微量白蛋白、肌酐和內生肌酐 清除率等指標的水平，通過光鏡觀察分析表明本發明姜芪膠囊可以保護造模大鼠的胰島 細胞，對抗造模藥物對胰島細胞的損傷；對造模大鼠的腎臟有保護作用，可減輕遠曲小管上 皮細胞水腫狀態；電鏡觀察分析表明本發明姜芪膠囊可增加大鼠腎小管上皮細胞線粒體 數量，減少線粒體異染色質數量，減輕線粒體嵴的溶解和消失；通過對組織微觀結構的改善 一定程度上有利於延緩糖尿病大鼠腎臟的病變過程。通過實驗結果的分析，本發明姜芪膠囊延緩和改善糖尿病大鼠所致腎臟病變的作
用可能與其降低血糖、降低尿微量白蛋白、肌酐、尿素氮、內生肌酐清除率水平、降低血清中NO、NOS水平，改善造模動物的組織病理改變等因素有關，從而延緩糖尿病腎病的發生和發展。
權利要求
一種治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊，其特徵在於，由薑黃提取物105～130g、黃芪提取物65～85g、澱粉、滑石粉製成，薑黃提取物和黃芪提取物粉碎過100目篩，混合均勻，再加入澱粉、滑石粉混均，制粒，裝入膠囊，即得；澱粉、滑石粉加入量≤薑黃提取物、黃芪提取物、澱粉、滑石粉總重量和的10％，澱粉、滑石粉重量比為1∶1；所說的薑黃提取物是，稱取粉碎後的薑黃藥材，放入微波提取罐內，乙醇用量為薑黃藥材重量的20倍，即薑黃與乙醇的重量比為1∶20，提取溫度50℃，提取時間30min，提取功率200W，得薑黃粗提液備用；S 8大孔吸附樹脂純化S 8大孔吸附樹脂先用乙醇浸泡24小時，用蒸餾水洗滌至無醇後備用；將處理好的大孔吸附樹脂溼法裝柱，將薑黃粗提液以1mL/min流速通過層析柱進行吸附，先用4倍樹脂體積的水洗脫雜質，再用8倍樹脂體積的無水乙醇洗脫，收集無水乙醇洗脫液，減壓濃縮乙醇，乾燥粉碎，得薑黃提取物；分光光度法測定，本品含總薑黃素以薑黃素計不少於58.0％；HPLC法測定，本品每1g含薑黃以薑黃素(C21H20O6)計，不得少於15.0％。所說的黃芪提取物是，稱取黃芪藥材粗粉，用70％的乙醇回流提取2次，第一次加入黃芪藥材重量的12倍的無水乙醇提取1.5h，第二次加入黃芪藥材重量的8倍的無水乙醇提取1h，合併提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，加水適量，靜置，濾過，得黃芪樣品提取液。取黃芪乙醇提取液，150mg/ml，回收乙醇至無醇味，過大孔吸附樹脂柱，先用4倍樹脂體積的水洗脫，繼用8倍樹脂體積的30％乙醇洗去雜質，再用8倍樹脂體積的70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，減壓濃縮乙醇，乾燥粉碎，得黃芪提取物；分光光度法測定，本品含總皂苷以黃芪甲苷計不少於75.0％；HPLC法測定，本品每1g含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少於7.2％。
2.根據權利要求1所述的治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊，其特徵在於，由 薑黃提取物105g、黃芪提取物65g製成，取薑黃提取物和黃芪提取物，粉碎過100目篩，混合 均勻，加入澱粉、滑石粉各9g混勻，制粒，裝入膠囊，即得，每粒0. 3g。
3.根據權利要求1所述的治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊，其特徵在於，由 薑黃提取物117g、黃芪提取物75g製成，取薑黃提取物和黃芪提取物，粉碎過100目篩，混合 均勻，加入澱粉、滑石粉各Ilg混勻，制粒，裝入膠囊，即得，每粒0. 3g。
4.根據權利要求1所述的治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊，其特徵在於，由 薑黃提取物130g、黃芪提取物85g製成，取薑黃提取物和黃芪提取物，粉碎過100目篩，混合 均勻，加入澱粉、滑石粉各8g混勻，制粒，裝入膠囊，即得，每粒0. 3g。
全文摘要
本發明涉及一種治療糖尿病及早期糖尿病腎病的姜芪膠囊，可有效解決糖尿病及早期糖尿病腎病治療的問題，本發明由薑黃提取物105～130g、黃芪提取物(主要是黃芪總皂苷)65～85g、澱粉、滑石粉製成，薑黃提取物和黃芪提取物粉碎過100目篩，混合均勻，再加入澱粉、滑石粉混均，制粒，裝入膠囊，即得；澱粉、滑石粉加入量≤薑黃提取物、黃芪提取物、澱粉、滑石粉總重量和的10％，澱粉、滑石粉重量比約為1∶1。本發明製備方法簡單，配伍得當，療效好，無毒副作用，在治療糖尿病及早期糖尿病腎病方面有顯著效果，是治療糖尿病及早期糖尿病腎病上的創新，具有巨大的經濟和社會效益。
文檔編號A61P13/12GK101912565SQ20101018176
公開日2010年12月15日 申請日期2010年5月25日 優先權日2010年5月25日
發明者苗明三 申請人:河南中醫學院