具有受控溫度響應的冷凍指示劑的製作方法

2023-09-18 07:28:15 3

具有受控溫度響應的冷凍指示劑的製作方法
【專利摘要】本發明涉及具有受控溫度響應的冷凍指示劑。冷凍指示劑，其可包括具有含水液體介質和在所述含水液體介質中分散的有機材料指示劑顆粒的指示劑分散體。所述指示劑分散體在冷凍之前可具有初始外觀，在冷凍之後具有不可逆的不同的外觀，並且可呈現約-1.9℃或更高的冷凍-開始溫度。有助於提供相對高的冷凍開始溫度的一些因素為，採用蛋白質冰-成核劑、控制pH、使用蛋白穩定劑和控制蛋白穩定劑與冰-成核劑的比率。
【專利說明】具有受控溫度響應的冷凍指示劑
[0001]本申請是申請號為201080039542.X母案的分案申請。該母案的申請日為2010年8月30日；發明名稱為「具有受控溫度響應的冷凍指示劑」。
【技術領域】
[0002]【具體實施方式】本申請要求2009年8月31日提交的臨時專利申請號61 / 238, 403的權益，該臨時申請的內容通過引用結合到本文中。
[0003]本發明涉及包含有機材料指示劑顆粒在含水液體介質中的分散體的冷凍指示劑等。更具體地，但非排他地，本發明涉及冷凍指示劑，所述冷凍指示劑可提供主體(host)產品過去暴露於接近或低於水或另一種液體的凝固點的溫度的可靠的指示。本發明包括一種冷凍-敏感的主體產品，其具有與主體產品聯合的本發明的冷凍指示劑實施方案，以監測可能的冷凍暴露。
【背景技術】
[0004]許多商業產品為溫度敏感的，並且如果經受即使短暫的暴露於接近或低於冷凍的溫度，就可能損壞、劣化或損失品質。例如，水果可能變為褐色，花、色拉用蔬菜和一些草藥可能枯萎，並且疫苗可能失去效力。一些其他冷凍-敏感的產品包括藥用產品、藥物、血液產品和含有冷凍-敏感的產品比如天然、合成或重組蛋白和多肽的健康護理產品，以及食品、飲料和一些工業產品，例如乳液和乳膠漆。一些產品由於暴露於過冷的溫度可能經受品質損失，而不呈現任何明顯的外觀變化。
[0005]為了幫助監測這種看不見的或隱藏的品質損失的可能存在，可採用低成本冷凍指示劑。一種有用的冷凍指示劑可提供對主體產品過去暴露於冷凍或接近冷凍溫度不可逆的指示，並且可與冷凍-敏感的主體產品聯合，例如通過將冷凍指示劑與主體產品連接。
[0006]這種冷凍指示劑的多種提議為已知的。例如，發明人均為Taylor等人的美國專利號7，343，872和7，490，575和美國專利申請公布號2008 / 0110391和2008 / 0257251公開了多種冷凍指示劑和冷凍指示劑技術。本文中提及這些專利和專利申請公布時稱為「Taylor等人專利公布」。Lentz等人的美國專利申請公布號US2010 / 0162941也公開了多種冷凍指示劑和冷凍指示劑技術。Taylor等人專利公布和Lentz等人申請各自通過引用結合到本文中。
[0007]如在它們的說明書中所描述的，Taylor等人專利公布和Lentz等人申請公開了採用包含固體顆粒在液體介質中的分散體的指示劑元件的冷凍指示劑。當暴露於冷凍溫度後，例如由於已分散的固體顆粒凝結，該指示劑元件能不可逆地改變外觀，提供冷凍指示劑已暴露於冷凍溫度的信號。
[0008]此外，Guisinger的美國專利6，957，623描述了臨界溫度指示劑，該指示劑產生視覺的、不可逆的指示，表明指示劑已暴露於臨界溫度，比如接近水的凝固點的溫度。如在其說明書中所描述的，Guisinger的臨界溫度指示劑包括一種可轉化的材料,該材料包含水、成核劑、膠乳和用於成核劑的穩定劑的混合物。同樣如所描述的，膠乳可為蠟，成核劑可為冰成核劑活性(INA)微生物，水可包含氧化氘。
[0009]儘管有冷凍指示劑的以上提議，仍期望具有增強的響應特性的冷凍指示劑。

【發明內容】

[0010]其響應涉及含水介質的冷凍的冷凍指示劑的難點在於，通過過冷或其他現象，可能過度降低含水介質的凝固點。克服該問題的經濟的冷凍指示劑對於一些目的會是有用的。
[0011]本發明尤其提供了一種具有新的或改進的溫度響應特性的冷凍指示劑。
[0012]本發明還可提供一種具有含水液體介質的冷凍指示劑，所述冷凍指示劑呈現相對高的冷凍開始溫度。
[0013]此外，本發明可提供一種具有含水液體介質的冷凍指示劑，所述冷凍指示劑在室溫下一周或更長儲存後呈現相對高的冷凍開始溫度。
[0014]此外，本發明的冷凍指示劑可採用相對低成本的成分，從而有助於製造的經濟性。
[0015]因此，在一方面，本發明提供了一種包含指示劑分散體的冷凍指示劑，所述分散體包含含水液體介質和在所述含水液體介質中分散的有機指示劑顆粒。所述含水液體介質具有熔融溫度和冷凍溫度，所述冷凍溫度低於所述熔融溫度。另外，所述指示劑分散體在冷凍之前具有初始外觀，在冷凍之後具有不可逆的不同的外觀。冷凍指示劑可呈現改進的冷凍-開始溫度，例如約-1.9°c或更高的冷凍開始溫度。
[0016]所述冷凍-相關的響應溫度可為冷凍開始溫度。有用地，冷凍指示劑可呈現不同的外觀變化，指示在冷凍開始溫度下液體介質的冷凍。
[0017]本發明包括其中所述冷凍指示劑在至少-l°c或至少-0.5°C的溫度下可呈現冷凍-相關的響應的實施方案。例如，冷凍指示劑的一些實施方案可在約0.(TC的溫度下呈現冷凍-相關的響應。
[0018]在另一方面，本發明提供了一種冷凍指示劑，在約20°C -約25°C的室溫下儲存至少4周後，所述冷凍指示劑可呈現至少約-2.(TC、至少約-1.5°C的冷凍-開始溫度。或者，在這種儲存後的冷凍開始溫度可比當分散體新製備時冷凍指示劑的冷凍開始溫度低不超過 0.5。。。
[0019]再一方面，本發明提供了一種包含指示劑分散體的冷凍指示劑，所述冷凍指示劑包含含水液體介質和在所述含水液體介質中分散的有機指示劑顆粒。所述含水液體介質具有熔融溫度和冷凍溫度，所述冷凍溫度低於所述熔融溫度。在該方面，冷凍指示劑可進一步包含蛋白質冰-成核劑以升高冷凍溫度。冷凍指示劑還可包含成核劑穩定劑，以穩定成核劑，例如防備通過所述冷凍指示劑可能暴露的升高的溫度所誘導的熱降解。期望地，所述指示劑分散體在冷凍之前可具有初始外觀，在冷凍之後具有不可逆的不同的外觀。
[0020]冷凍指示劑可包含任何合適量的蛋白質冰-成核劑，例如約14 8-約211^的重量。如果期望，冷凍指示劑還可包含合適濃度的用於所述冰-成核劑的穩定劑，例如，約
0.05%-約5%重量，基於所述指示劑分散體的重量。
[0021]此外，含水液體介質的pH可在約pH4-約pHll範圍內。例如，含水液體介質的pH可在約ρΗ7.5-約ρΗ8.5範圍內。
[0022]又一方面，本發明提供了一種包含指示劑分散體的冷凍指示劑，所述指示劑分散體包含含水液體介質和在所述含水液體介質中分散的有機指示劑顆粒。所述含水液體介質具有熔融溫度和冷凍溫度，所述冷凍溫度低於所述熔融溫度。期望地，所述指示劑分散體在冷凍之前可具有初始外觀，在冷凍之後具有不可逆的不同的外觀。並且液體介質的PH可在約PH7-約pH9範圍內。
[0023]本發明可包括包含本發明的冷凍指示劑的主體產品，其中所述冷凍指示劑與主體產品聯合，例如通過與主體產品或主體產品的容器或包裝連接。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0024]本文中詳細描述並參考附圖(關於所示的任何內部或外部結構，不一定按比例繪製)，通過舉例的方式來描述本發明的一些實施方案以及製備和使用本發明的一個或多個實施方案的方式，其中在全部的幾個圖中，相同的附圖標記指定相同的元件，其中:
[0025]圖1為本發明的冷凍指示劑的一個示例性實施方案的平面圖；和
[0026]圖2為圖1在線2-2上的截面。
【具體實施方式】
[0027]對於一些目的，期望採用含水冷凍指示劑介質的冷凍指示劑，所述冷凍指示劑呈現相對升高的冷凍開始溫度。
[0028]此外，在一些情況下，期望在一定時期的儲存之後能呈現相對升高的冷凍開始溫度的冷凍指示劑。
[0029]採用指示劑顆粒在含水介質中的分散體並且響應含水介質的冷凍的已知的冷凍指示劑通常具有冷凍開始溫度，所述冷凍開始溫度向上受到過冷、指示劑分散體的組成和其他因素的限制。當冷凍時，冷凍開始溫度可能稍微或顯著低於液體介質的熔點，因此可能顯著低於某些商業應用所需的。
[0030]除非上下文明確說明另外的情況，否則在本說明書中使用的術語「水」和「含水」不僅包括其中存在的主要氫同位素為気的水，而且還包括氧化氣、D2O或重水、部分氣化的水、DHO和這些形式的水的混合物。當期望區分不同形式的水時，術語「輕水」用於指其中存在的佔優勢的氫同位素為氕的常見的普通的水。痕量的氘可能存在於輕水中，這一點是眾所周知的。
[0031]雖然冷凍的輕水(冰)在0°C下熔融，就像多種液體一樣，相對純的輕水可在顯著低於其熔融溫度的溫度下冷凍，例如在低至-10°c的溫度下，或甚至更低，該現象稱為過冷。同樣，雖然冷凍的氧化氘在比輕水更高的溫度下熔融，即，在約3.8°C下，與輕水一樣，由於過冷，氧化氘在比其熔融溫度顯著更低的溫度下冷凍。
[0032]可將冰成核劑加入到含水分散體中，以降低過冷的程度、升高冷凍溫度和使熔點和凝固點之間的範圍變窄。然而，即使使用成核劑也不能提供期望的高冷凍開始溫度。
[0033]因此，提供採用指示劑顆粒在水中的分散體的冷凍指示劑，可能出現困難，其具有足夠高的冷凍或冷凍開始溫度。本發明提供了可克服或減輕這些困難的冷凍指示劑。
[0034]為此，本發明尤其提供了一種包含指示劑顆粒在含水介質中的分散體的冷凍指示齊U，其響應含水介質的冷凍而不可逆地改變外觀，可能是在冷凍的含水介質融化之後，並且其呈現超過-2°C的冷凍開始溫度。例如，冷凍開始溫度可為約-1.9°C或更高，或約-l°c或更高，或約-ο.5 °C或更高，或約0.5 °C或更高。有用地，冷凍開始溫度可在約-0.9 °C至約(TC範圍內。
[0035]本文使用的術語「冷凍開始溫度」是指冷凍指示劑分散體呈現可察覺的冷凍-誘導的外觀變化時的最高溫度，該變化可通過視覺觀察無誤地確定。該外觀變化可為從澄清到不透明、形成冰晶或渾濁的變化。
[0036]本發明的冷凍指示劑的一些實施方案可在相對短的時間段內呈現無誤的冷凍-誘導的外觀變化，例如在暴露於冷凍開始溫度或更低的溫度I小時內。本發明還包括大量生產的冷凍指示劑，在暴露較短的時間段(例如，15分鐘或5分鐘或小於約30分鐘的另一時間段)後，從一個樣品到下一個樣品，一致和可靠地得到無誤的冷凍-誘導的外觀變化。
[0037]本發明還提供了具有升高的冷凍開始溫度或一種或多種其他期望的特性的冷凍指示劑，如本文所述，其能可靠地響應冷凍暴露。在上下文中採用的術語「可靠地」是指一批類似的冷凍指示劑在經受類似的條件時，顯著比例在大致相同的時間以相同的方式響應。所述顯著比例可為任何適當的比例，例如，一批冷凍指示劑的70%、90%、95%或甚至100%。
[0038]意外地，已發現，按照本發明，包含指示劑顆粒的含水分散體的冷凍指示劑的冷凍開始溫度可對製劑PH敏感。
[0039]按照本發明，還尤其發現，關於液體介質的pH，當以8.0或接近8.0的pH配製時，例如在約7.8-8.2範圍內，包含指示劑顆粒的含水分散體的冷凍指示劑可呈現意外高的冷凍開始溫度。
[0040]除非上下文明確說明另外的情況，否則本文中對pH值的提及應理解為是指冷凍指示劑分散體(有時是「製劑」)的PH，根據冷凍指示劑分散體中的液體介質而確定。例如，還可提及本發明的冷凍指示劑實施方案中可用的蠟分散體的pH。
[0041]並且，本發明的一方面提供了一種包含指示劑顆粒的含水分散體的冷凍指示劑，其具有近似或接近0°c的冷凍開始溫度，與採用的含水介質的pH無關。
[0042]另一方面，本發明提供了一種可用的冷凍指示劑的實施方案，該冷凍指示劑採用在約4-約9.5範圍內的pH與冷凍指示劑分散體的製劑的組合，在對多個樣品進行測試時，可呈現可靠地在_1°C的溫度以上的冷凍開始。另一種製劑可呈現可靠地在0°C或接近(TC的溫度以上的冷凍開始。
[0043]除非上下文說明另外的情況，否則本文使用的術語「固體」包括「半固體」。
[0044]在本說明書中使用的術語「凝結」包括當冷凍時或當冷凍和融化時，指示劑顆粒的液體分散體可呈現的聚集、附聚、絮凝和其他外觀-變化現象。
[0045]為了對過去的暴露於冷凍溫度發信號，根據本發明有用的冷凍指示劑可在冷凍之前具有一個視覺外觀，在指示劑已冷凍之後具有不同的視覺外觀。該外觀變化可通過指示劑顆粒在分散體中的凝結來提供，並且理想地是不可逆的。
[0046]按照本發明，可理解的是，當將其冷凍時，在液體介質中分散的固體顆粒通常不能在結構上摻入到液體介質的生長晶體內，因此，隨著晶體生長，固體在殘餘的液體中的濃度增加，並且未冷凍的液體的體積下降，引起凝結。
[0047]在實踐本發明中採用的冷凍指示劑顆粒可包含有機材料的固體或液體顆粒，例如不溶於水的疏水性有機材料。如本文中進一步描述的，所述有機材料可包含一種或多種蠟和任選的與一種或多種蠟共混以軟化蠟質材料的蠟軟化劑。
[0048]因此，本發明的冷凍指示劑的一些有用的實例包含在含水液體介質中分散的有機指示劑顆粒，以提供指示劑分散體，其中已分散的指示劑顆粒可凝結，以響應所述指示劑分散體的冷凍，提供在視覺外觀上不可逆的變化。
[0049]有用地，蛋白質顆粒成核劑可包含在所述指示劑分散體中。蛋白質顆粒成核劑可幫助升高冷凍響應溫度。如果期望，冷凍指示劑分散體可包括穩定劑以穩定所述冰-成核劑。
[0050]有利地，在本發明的冷凍指示劑中，如果期望，含水液體介質的pH可在選擇的範圍內，以幫助提供 升高的冷凍響應溫度。例如，pH範圍可選自約pH4-約pHll ^pH4-約ρΗ9.5 ;約 ρΗ7.5-約 ρΗ8.5 ;和約 ρΗ7.8-約 ρΗ8.2。
[0051]並且，如果期望，本發明的冷凍指示劑可包含指示劑體積，所述指示劑體積含有指示劑分散體和限定指示劑體積的聚合膜構件(一或多個)。所述聚合膜構件可設置為與所述指示劑分散體相鄰，並且可具有暴露於所述冷凍指示劑的周圍環境的外表面。
[0052]此外，如果期望，本發明的冷凍指示劑可包含觀察窗口和連接裝置，所述觀察窗口用於觀察所述指示劑分散體，所述連接裝置用於將所述指示劑固定於待監測可能的冷凍暴露的主體產品。任選地，這種冷凍指示劑可包含包括所述連接裝置的基底層、包括所述觀察窗口的觀察層和在所述基底層和所述觀察層之間的溼氣氣密密封，其中在所述基底層和所述觀察層之間限定所述指示劑體積，並且其中所述氣密密封在完全圍繞所述指示劑體積的封閉迴路中延伸。
[0053]此外，如果期望，本發明的冷凍指示劑可包含與所述指示劑體積鄰近的參比區域，並且參比區域可具有與冷凍指示劑的終點的外觀類似的外觀。
[0054]如所述的，對過去的暴露於冷凍的指示可為不可逆的，因此使得通過冷凍指示劑提供的冷凍暴露信號具有一些永久性。例如，視覺外觀的變化可能無法通過搖動、融化或加熱至正常的室溫或另一非破壞性溫度而消除。這種特性可使得本發明的冷凍指示劑有用地用於廣泛的產品，包括藥用產品、醫療產品、食品和某些工業產品。
[0055]期望地，本發明的冷凍指示劑實施方案可具有與冷凍指示劑的初始未冷凍的外觀不同的冷凍後視覺外觀，並且該外觀差別是不可逆的。例如，在一旦已冷凍後，冷凍指示劑的外觀可與初始外觀永久地不同，而無論冷凍指示劑是否已融化。可能地，冷凍和融化的外觀可彼此不同。優選冷凍和融化的外觀均與初始外觀截然不同。然而，本發明還包括其中冷凍外觀與初始外觀類似，並且融化的外觀與初始外觀或冷凍外觀不可逆地不同的實施方案。
[0056]本發明的冷凍指示劑的外觀可提供查看冷凍指示劑的觀察器或光學裝置，具有對過去的冷凍暴露的不可逆的指示或者信號。信號的不可逆性可使觀察器能確定冷凍指示劑是否曾經暴露於冷凍事件，儘管冷凍指示劑介質可能隨後已融化並恢復液態。如果期望，冷凍指示劑信號可被光學裝置(例如照相機)讀取或捕獲。
[0057]如果期望，通過提供一個或多個與冷凍指示劑的活性區域相鄰的參比區域，可輔助觀察器對指示劑信號的判讀，使用該參比區域，觀察器可比較冷凍指示劑的外觀。參比區域可幫助觀察器判斷冷凍指示劑的外觀的意義，例如用於確定該外觀說明「從未冷凍」或「已經過冷凍」。
[0058]本發明的冷凍指示劑可與主體產品聯合，例如冷凍-敏感的或冷凍-易壞的產品，以監測主體產品，和任選地提出主體產品還可能已經受潛在有害的冷凍暴露。
[0059]液體介質。本文使用的術語「液體介質」是指本發明的冷凍指示劑分散體的成分，其在20°C的室溫下為液體。所述液體介質可為任何合適的液體介質，其與有機指示劑顆粒不混溶，並且不是有機指示劑顆粒的溶劑，例如，含水液體介質。
[0060]期望地，基於所述液體介質的重量，所述含水液體介質可包含至少約10%的氧化氘、氘化的水或氧化氘和氘化的水的混合物。可採用較高比例的氧化氘，例如至少約50%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%，或者如果期望，大致100%重量氧化氘。氧化氕/氧化氘混合物的凝固點和熔點通常與兩種化合物的相對比例相關，氧化氕的熔點為0.(TC，而氧化氘的熔點為3.8°C。
[0061]如果期望，所述液體介質可基本上由水組成，或完全由水組成，例如，所述液體介質可完全由氧化氘組成，即，為100%氧化氘，或者可為氧化氘和輕水的混合物。
[0062]如果期望，含水液體介質可全無或不含任何在所述冷凍指示劑預期暴露的可能環境溫度範圍內的溫度(例如，在約-10°C至約-50°c範圍內的溫度)下能與液體介質分離的有機液體。
[0063]蛋白質冰成核劑。如果期望，在本發明的冷凍指示劑的實施方案中可採用任何合適的蛋白質冰成核劑。
[0064]例如，所述蛋白質冰-成核劑(如果採用)可包含不含細胞的蛋白質冰成核劑或由選自以下的微生物得到的全-細胞蛋白質冰成核劑:假單胞菌屬物種、丁香假單胞菌(Pseudomonas syringae, P.syringae)、丁香假單胞菌的菌株、So等人的美國專利號5，489，521中所述的丁香假單胞菌的菌株、螢光假單胞菌、暈斑假單胞菌、豌豆假單胞菌(Pseudomonaspisi)、歐文氏菌屬物種、菠蘿歐文氏菌、草生歐文氏菌、大腸桿菌、黃單胞菌(Xanthomonas)、冰-成核真菌和冰-成核原生動物。用於本發明的實踐的不含細胞的蛋白質冰成核劑可由合適的冰-成核微生物通過任何合適的方法來製備，例如在Wight等人的美國專利號5，223，412中所述的。
[0065]適用於本發明的實踐的一種微生物-衍生的冰-成核材料為SNOMAX(商標)雪誘導劑，為可得自 Johnson Controls Inc., Milwaukee Wisconsin, www.johnsoncontrols.com的蛋白質材料。如供應商所描述的，SNOMAX雪誘導劑的平均組成包含約54%重量的蛋白，包括冰-成核蛋白，其中蛋白材料衍生自細菌丁香假單胞菌。關於SNOMAX雪誘導劑的其他信息可在「Snomax FAQ' s」中找到，該文件可得自www.johnsoncontrols.com,並且通過引用結合到本文中。
[0066]雖然本發明不束縛於任何具體的理論，在本申請的年代，看起來本領域應理解的是，細菌丁香假單胞菌或在商標SNOMAX下供應的商用冷凍-乾燥形式的細菌的冰成核性質可歸因於特定的冰-成核蛋白。稱為「冰-成核蛋白InaZ」的該蛋白在本領域描述為丁香假單胞菌的InaZ基因表達產物，並且認為位於細菌的外細胞膜上。認為冰-成核蛋白具有以多個在冰中水分子具有的間距而間隔的水-結合官能團，並且提供一些天生的成核能力。還認為，通過冰-成核蛋白分子以對齊的陣列(有時稱為「微晶」)聚集，大致在膜表面的平面中，周圍水的凝固點升高。認為分子陣列的破壞或降解導致失去成核有效性。[0067]冰-成核蛋白InaZ在本領域中顯然應理解為具有約118kDa的推斷分子量的由多於1200個胺基酸殘基組成的單體蛋白。認為N-末端區域的胺基酸殘基與在細菌細胞的外膜中的磷脂部分相互作用。認為冰-成核蛋白的中心區域包含長度為8、16和48個殘基的重複的胺基酸序列的串聯，這些殘基起冰晶形成模板的作用。C-末端區域為親水性的，並且在最外面的細胞表面處暴露。冰成核蛋白的這種結構進一步描述於Jung, H-C等人,EnzymeMicrob.Technol.1998，22:348_354，其所公開的內容通過引用結合到本文中。
[0068]可用於本發明的實踐的蛋白質冰-成核劑包括具有胺基酸序列的天然、合成和重組多肽，該胺基酸序列包括與冰-成核蛋白InaZ的冰晶模板區域同源或類似的區域或由這樣的區域組成，並且提供冰-成核功能。
[0069]蛋白穩定劑。蛋白質材料可對在可監測冷凍暴露的一些主體產品的儲存和分布中遇到的通常的環境溫度敏感，和受到不利的影響。溫暖的夏季天氣、熱氣候和其他環境條件可引起蛋白降解，並且可引起蛋白質冰-成核劑失去一些或全部效力。
[0070]此外，含有蛋白質材料並且未滅菌的混合物可允許微生物活性，所述微生物活性也可不利地降低蛋白質冰-成核材料的效力。
[0071]因此，如果期望，採用蛋白質冰-成核劑的本發明的冷凍指示劑分散體還可包括穩定劑以穩定所述冰-成核劑免受熱降解或其他降解。
[0072]可用於本發明的實踐的合適的穩定劑的一些實例包括甲醛、二醛、具有不多於10個碳原子的二醛、乙二醛、戊二醛(CH0.CH2CH2CH2.CH0)、己二醛、鹽酸胍、丙二醛、丁二醛和對苯二甲醛。一些其他合適的穩定劑包括各種交聯劑，例如，硫醇-特異性交聯劑比如二溴丙酮或雙馬來醯亞胺基己烷，以及氨基-特異性交聯劑比如異氰酸酯和異硫氰酸酯。
[0073]可用於本發明的實踐的其他合適的穩定劑為本領域普通技術人員鑑於本公開已知或顯而易見的，或者隨著技術的發展，在將來將變得已知或顯而易見。例如，還可採用化學保持或固定冰-成核蛋白的三維分子結構的材料，使得隨著時間的過去和/或在升高的溫度下，蛋白可更好地保持其構象。一些這樣的材料包括交聯劑、多官能和雙官能的試劑，其中戊二醛僅是一個實例。交聯可穩定三級結構和任何聚集體。還可採用任何前述穩定劑的相互相容的混合物。期望地，所選的穩定劑和採用的濃度可達到避免幹擾蛋白質材料的冰-成核功能或冷凍指示劑的任何其他功能方面。
[0074]可任選包含在冷凍指示劑分散體中的其他成分為本領域普通技術人員鑑於本公開已知或顯而易見的，或者隨著技術的發展，在將來將變得已知或顯而易見，並且包括例如殺生物劑。在一些情況下，殺生物劑(如果採用)可控制可不利地影響冰-成核蛋白的性能的潛在的微生物活性。一些合適的蛋白穩定劑也可用作殺生物劑，例如乙二醛和戊二醛。
[0075]指示劑顆粒。用於本發明的冷凍指示劑實施方案的冷凍指示劑分散體可包含任何合適的冷凍指示劑顆粒，以提供冷凍開始的視覺信號。期望地，響應冷凍，例如通過凝結，冷凍指示劑顆粒可提供不同的外觀變化或其他視覺信號。
[0076]還期望，冷凍指示劑顆粒可由無毒、生物相容和經濟的材料形成。一些有用的冷凍指示劑顆粒包含不溶於水的固體、半固體或液體有機材料(例如疏水性有機材料)的顆粒。
[0077]合適的有機指示劑材料包括某些蠟、一些聚合材料和用於膠乳中的微粒材料以及對於本領域普通技術人員顯而易見的其他有機材料。合適的有機微粒材料的一些實例包括天然和合成橡膠、合成聚合物比如苯乙烯、乙烯基和亞乙烯基聚合物和共聚物以及蠟。本文使用的術語「膠乳」包括固體有機顆粒在含水或其他液體介質中的分散體，所述介質任選通過乳化製備。一些有用的膠乳為具有乳狀外觀的透明的或半透明的以及其他。可用於本發明的實踐的一些膠乳可包括表面-活性試劑或表面活性劑以穩定分散體。
[0078]本發明可採用開始時為半透明的並且在冷凍之後變得不透明或顯示另一種不同的外觀變化的膠乳指示劑分散體。或者，有用的膠乳指示劑分散體在開始時可為不透明的，並且當冷凍後可凝結，以提供(可能在融化後)分散體的透明的區域，通過該區域可觀察到有色的或其他不同的背景。
[0079]在本發明的冷凍指示劑中適合用作有機指示劑顆粒材料的蠟或蠟質材料的一些實例包括蠟質材料，比如石蠟、微晶蠟、巴西棕櫚蠟、蜂蠟、白蠟、紫膠蠟、鯨蠟、牛油、棕櫚臘、大豆臘、羊毛脂(lanolin)、羊毛脂(wool grease)、臘質聚合物、臘質共聚物、聚烯烴、聚乙烯、聚丙烯、乙烯共聚物、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、乙烯基酯聚合物、乙酸乙烯酯聚合物、乙烯與丙烯酸類化合物的共聚物、乙烯與丙烯酸的共聚物、以及任何兩種或更多種前述蠟質材料的混合物，包括乙烯基酯和丙烯酸類材料的混合物。其他合適的蠟或蠟質材料為本領域普通技術人員鑑於本公開已知或顯而易見的，或者隨著技術的發展，在將來將變得已知或顯而易見。
[0080]如果期望，可採用熔點在合適的範圍內的蠟作為有機指示劑材料，例如在約400C -約80°C範圍內，或在另一合適的範圍，例如約0°C -約100°C。期望地，蠟在液體介質的冷凍狀態下為固體，或者在室溫和環境溫度下以及在介質的冷凍狀態中為固體。或者，或另外，合適的蠟可具有通過穿透數據特性說明的柔軟度。例如，由有機材料形成的指示劑顆粒的柔軟度可為至少約20dmm或至少約30dmm。可採用具有其他適當的柔軟度(例如至少約10d_的柔軟度)或通過另一種測試確定的適當的柔軟度的材料，這對於本領域普通技術人員是顯而易見的。本文描述的柔軟度旨在根據ASTM D1321Needle PenetrationTest (針穿透測試)在25°C下測定。
[0081]本文使用的術語「蠟」包括石蠟，有時稱為「鏈烷烴」。適用於本發明的實踐的蠟包括但不限於在室溫下為固體的單獨的、混合的和共混的烴，這種蠟可為晶體或微晶。
[0082]雖然本發明不旨在局限於任何具體的理論，但是我們認為，蠟、蠟共混物和可能的蠟共混比率的適當選擇可幫助提供期望的外觀變化。柔軟的蠟和蠟共混物可比硬的蠟或蠟共混物更容易凝結。另外，認為具有一些極性官能團的蠟或其他有機材料促進指示劑顆粒凝結成塊，該塊保持水並具有良好的不透明特性。應理解的是，在本發明的冷凍指示劑的冷凍後條件下，具有良好不透明性的指示劑顆粒的大塊、主體或附聚的存在可幫助提供指示劑的冷凍後外觀，該冷凍後外觀與冷凍前外觀明顯不同。冷凍前和冷凍後外觀之間的明顯的差別可幫助觀察器或觀察裝置準確地辨認指示劑。
[0083]採用相對簡單的、充分定義的、經濟的和容易得到的有機微粒材料，比如例如蠟和本文所述的某些疏水性聚合物，可有助於大量生產本發明的冷凍指示劑實施方案。使用這種蠟和聚合物可促進產品的品質控制、一致性和經濟性。
[0084]如果期望，可將用於有機微粒材料的軟化劑與有機材料共混，以增強冷凍指示劑外觀變化，或用於另一個有用的目的。如在US2010 / 0162941中描述和要求保護的，如果期望，軟化劑可與有機材料共混或以另外的方式密切混合，以提供在液體介質中分散的固體材料的均質顆粒。冷凍後，相對柔軟的顆粒能不可逆地凝結成為團或聚集體，可提供指示劑分散體在冷凍之後與在冷凍之前的初始外觀截然不同的外觀。
[0085]使用本發明的軟化劑能得到增強的指示劑外觀。例如，與在冷凍之前指示劑分散體的不透明性相比，在冷凍之後，軟化的固體有機顆粒的一些實施方案可凝結成為數個具有相對高不透明性的大塊或單個的塊。通過使合適的背景模糊，這種凝結顆粒的高不透明性塊或多個塊可提供強視覺信號，所述背景例如白色或淺色的反射背景，或帶有圖案、圖像或圖形、核查標記或文字或其他期望的外觀的背景。
[0086]採用蠟軟化劑或增塑劑等，按照本發明能得到增強的指示劑外觀，而無需採用可浸出進入分散介質並幹擾對冷凍的視覺響應的染料或顏料。然而，如果期望，本發明的一些實施方案可採用一種或多種染料和/或顏料或其他著色劑。
[0087]用於蠟指示劑材料的軟化劑(如果採用)可選自乙烯共聚物、微晶蠟、聚乙烯、膽固醇、短鏈烷烴、石蠟油、環烷油、芳族油、甘油、礦物油、脂肪酸、脂肪酸衍生物、脂肪醇、月旨肪酸酯、氫化和部分氫化脂肪酸、包含至少一個酯基的親水性軟化劑和親水性長鏈烴。軟化劑還可為合適的增塑劑。
[0088]本發明的冷凍指示劑可包含約5-約50%重量或約20-約30%重量比例的軟化齊U，軟化劑的兩個比例範圍均基於軟化劑和有機材料的總重量。
[0089]各種其他有機材料可用於指示劑材料，作為本文已描述的有機材料的備選或與之混合。例如，有機指示劑材料可包含選自以下的柔軟的固體或半固體材料:橡膠狀聚合物、苯乙烯-丁二烯膠乳、天然橡膠膠乳、橡膠狀聚氨酯、橡膠狀丙烯酸類聚合物和共聚物、橡膠狀腈聚合物和共聚物、橡膠狀聚氯丁烯、橡膠狀乙烯基吡啶聚合物、橡膠狀苯乙烯聚合物、橡膠狀苯乙烯/ 丁二烯共聚物、橡膠狀苯乙烯/丙烯酸共聚物、橡膠狀乙烯基甲苯/叔丁基苯乙烯共聚物、橡膠狀偏二氯乙烯/氯乙烯共聚物和兩種或更多種前述聚合材料的混合物。
[0090]本文使用的術語「橡膠狀」包括像天然橡膠的材料、彈性材料和彈性體材料。
[0091]如果期望，有機指示劑材料的玻璃化轉變溫度可低於約20°C或低於液體介質冷凍狀態的熔點。
[0092]或者，有機指示劑材料的玻璃化轉變溫度可超過約20°C。如果期望，有機材料軟化劑可包含增塑劑。
[0093]有機指示劑材料還可包含晶體和非晶體材料的混合物，例如合適的蠟和合適的橡膠狀聚合物的混合物，比如本文所述的。
[0094]另外，如果期望，有機指示劑材料顆粒可為液體，例如石蠟油。這種液體有機指示劑材料顆粒可由在普通的環境溫度下、在室溫下和/或在冷凍溫度下為液體的材料形成，由固體有機材料在有機溶劑中的溶液(例如溶解於石蠟油中的石蠟)形成，或者採用另一種合適的方式形成。
[0095]有機指示劑材料可包括少量的無機材料，如果期望，條件是無機材料不能干擾本文所述的本發明的目標。本發明的冷凍指示劑的一些實施方案採用包含不大於約10%重量的無機材料的有機材料指示劑顆粒，基於所述指示劑顆粒的重量。
[0096]有機指示劑材料可具有任何合適的粒徑和濃度。例如，可選擇有機指示劑材料的粒徑和濃度，以幫助提供在冷凍之前相對澄清的和在冷凍之後或在冷凍和融化之後相對不透明的冷凍指示劑分散體。通過在指示劑分散體中採用相對較大的顆粒，在本發明的一些實施方案中，可得到更加不透明的冷凍後外觀。含有過大顆粒的指示劑分散體可能不穩定，並且在冷凍之前易於沉降或凝結，或者在冷凍之前可缺乏澄清度或具有不期望的不透明性。
[0097]廣泛的有機指示劑材料粒徑可用於實踐本發明。可根據指示劑分散體的期望的初始外觀來選擇有機指示劑材料的平均粒徑。因此，開始時為透明的並且在冷凍後變得不透明的指示劑分散體可採用平均粒徑小於約400nm的有機指示劑顆粒，期望小於約300nm，例如，平均粒徑在約IOnm-約IOOmn或約20nm_約60nm範圍內。
[0098]另一方面，開始時為不透明的並且在冷凍後呈現透明度的指示劑分散體可採用平均粒徑大於約400nm,例如平均粒徑大於約600nm的有機指示劑顆粒。
[0099]暈和比例。本發明的有用的冷凍指示劑分散體可採用任何合適的成分比例。
[0100]例如，基於所述冷凍指示劑分散體的重量，可利用在選自以下的範圍內的重量比例的冷凍指示劑顆粒:約1% -約50% ;約5% -約30% ;和約13% -約22%。
[0101]另外，基於所述冷凍指示劑分散體的重量，可採用在選自以下的範圍內的重量比例的含水液體介質:約50% -約99% ;約70% -約95% ;和約77% -約85%。
[0102]此外，任何合適量的蛋白質冰-成核劑可用於給定體積的冷凍指示劑分散體，例如，約I μ g-約2mg ;或約20 μ g-約500 μ g ;或約100 μ g-約250 μ g的重量。
[0103]在本發明的冷凍指示劑的一些實施方案中，採用的蛋白質冰-成核劑的量與在冷凍指示劑中所用的指示劑分散體的體積無關。我們認為這是由於在某一體積的過冷液體中，在該體積的任何地方形成單個晶種可引起結晶快速蔓延整個體積。因此，在這樣的實施方案中，冷凍指示劑分散體可包含足夠量的冰成核劑，以在許多冷凍指示劑的每一個的冷凍指示劑體積中，提供一致和可靠地產生至少一個冰成核部位的合理的預期。例如，可採用足夠量的冰-成核劑，以提供在每一個冷凍指示劑中產生多個(比如至少3、至少6或至少10個)冰-成核部位的合理的預期。
[0104]基於所述指示劑分散體的重量，在本發明的冷凍指示劑中，還可採用選自以下重量比例的冰-成核劑穩定劑:約0.01 % -約5 %;約0.05 % -約I %;和約0.1 % -約0.5 %。
[0105]此外，如果採用穩定劑，可利用以下穩定劑比率中的一種:小於20 ；10以下的比率；4以下的比率；2以下的比率；或約0.2-約1.5的比率。本文使用的「穩定劑比率」為在所述指示劑分散體中冰-成核劑穩定劑的重量比例與蛋白質冰-成核劑的重量比例的比率，所述重量比例基於所述分散體的重量。
[0106]如果期望，與本發明的目標一致的其他材料也可包含在用於本發明的冷凍指示劑的冷凍指示劑分散體中。本發明還包括排他地由所描述的成分組成或基本上由所描述的成分組成的冷凍指示劑的實施方案。
[0107]冷凍指示劑包封。本發明的冷凍指示劑還可包括包封或其他密閉(containment)裝置，以容納和顯示合適體積的冷凍指示劑分散體，用於通過人觀察者、光學裝置或通過另一種裝置來觀察。一些合適的包封和其他密閉裝置描述於Taylor等人專利公布，其他的為本領域普通技術人員鑑於本公開已知或顯而易見的，或者隨著技術的發展，在將來將變得已知或顯而易見。
[0108]用於容納和顯示冷凍指示劑分散體的合適的密閉裝置在本文中稱為「包封」，並且可理解為包含由任何合適的一種或多種材料形成的一個、兩個或多個部件。[0109]例如，有用的冷凍指示劑包封可包含含有冷凍指示劑分散體的封閉的和密封的冷凍指示劑體積。冷凍指示劑包封可包含柔性聚合膜材料或大部分或完全由柔性聚合膜材料組成。冷凍指示劑包封可完全由柔性聚合膜材料的單個片或構件形成。冷凍指示劑包封的另一個實施方案包含結合在一起並密封的柔性聚合膜材料的兩個片或構件。可採用任何合適的方式實現密封，例如通過在接合點的面對的表面處採用可熱密封的材料。該密封方法的實例和一些其他合適的密封方法公開於Taylor等人US2008 / 0110391。如果期望，聚合膜構件(一個或多個)可設置為與所述指示劑分散體相鄰，並且可具有暴露於所述冷凍指不劑的周圍環境的外表面。
[0110]有用地，冷凍指示劑包封的內表面的實質部分(例如主要部分)與包含在包封中的冷凍指示劑分散體接觸，並且冷凍指示劑包封的外表面的實質部分(例如至少20 %的外包封表面的面積)旨在在使用時暴露於環境條件。例如，冷凍指示劑分散體可填充或幾乎填充包封，在後一種情況下，在包封中留下小氣泡，任選空氣的小氣泡，這可幫助對冷凍暴露發信號。
[0111]為了使觀察者能夠觀察或察看冷凍指示劑分散體和讀取指示劑信號，冷凍指示劑包封期望地包含具有足夠透明度的窗口，使得能讀取指示劑信號。如果期望，通過使整個冷凍指示劑包封透明，可提供窗口。當冷凍指示劑包封包含兩片密封在一起的柔性聚合膜材料時，有用地，至少一片可為透明的，以提供觀察窗口。
[0112]冷凍指示劑的一個示例性實施方案示於圖1和2。參考圖1和2，用標記為10的所顯示的冷凍指示劑包括支撐包封14的基底12，包封14含有一定體積的冷凍指示劑分散體10。
[0113]如所示的，包封14可大致為圓形。或者，包封14可具有任何其他期望的形狀，例如，橢圓形、六邊形、正方形、長方形、條狀或環狀。如所示的，包封14包括通過粘合劑20的環結合在一起的內壁16和外壁18,或者以另一種合適的方式,例如通過熔化結合在一起。或者，包封14可為單片密封的囊。包封14的內壁16可粘附於基底12、沉積在基底12上或以另外的方式與基底12連接，使得將包封與基底連接。或者，基底12可提供內壁16作為基底的整體部件。例如，內壁16可包括對水蒸汽和含水液體實質不滲透的鋁或其他材料的層或插入物，與基底12整體形成。
[0114]如果期望，包封14的外壁18包括透明的區域(未標記)，其可佔據包封14在基底12上的大致整個覆蓋區。或者，外壁18的透明的區域可佔據較小的面積。透明的區域能夠使通過冷凍指示劑10產生的光學信號(例如，顏色的變化)通過合適的儀器、通過人觀察者或以另一種合適的方式在外部被接收。
[0115]包封14可完全填充有冷凍指示劑分散體15。或者，如果期望，空氣或氣泡22可包含在容納的體積內，以提供所容納的分散體為液態或固態的視覺指示。如果分散體被冷凍，當傾斜或搖動冷凍指示劑時，氣泡不能移動。
[0116]如所示的，冷凍指示劑10圍繞著水平延伸橫過紙平面的軸彎曲，並例如通過粘合劑(未示出)與主體產品24的凸的外表面連接。在圖1中，彎曲的軸在紙平面下面，而在圖2中，彎曲的軸在紙平面中。該描述僅是示例性的，並且如本文中的其他地方描述的，各種其他的冷凍指示劑10的構造、主體產品24的形狀和連接模式是可能的。這種彎曲的冷凍指示劑可為剛性的或者可為柔性，並且能採用平面構造。[0117]如果期望冷凍指示劑具有延長的保存期限，則冷凍指示劑包封可構造為限制從冷凍指示劑分散體失去溼氣，例如如在Taylor等人專利公布中所描述和要求保護的，或採用另一種合適的方式，該方式為本領域普通技術人員鑑於本公開已知或顯而易見的，或者隨著技術的發展，在將來將變得已知或顯而易見。在儲存期間從指示劑分散體過度失去水蒸汽可導致指示劑乾燥，不利地影響指示劑對暴露於寒冷溫度發信號的能力。
[0118]例如，冷凍指示劑包封可包含溼氣阻擋材料層或由溼氣阻擋材料層組成，該溼氣阻擋材料完全圍繞容納的體積延伸以控制從冷凍指示劑分散體失去水分。如果期望，冷凍指示劑包封可包含多層材料，其中通過蒸汽阻擋材料提供一個或多個層。
[0119]如果期望，合適的溼氣阻擋材料或包括蒸汽阻擋層的包封材料可為具有低水蒸汽透過率的材料，例如水蒸汽透過率不多於約1.0g / m2 /天或0.50g / m2 /天的較低的透過率。為了更長的保存期限，或出於其他原因，可採用不多於約0.1g / m2 /天的水蒸汽透過率。水蒸汽透過率值應理解為是指在38°C (100° F)溫度和90%相對溼度下的測量值。
[0120]注意到，具有相對低的溼氣透過率的透明的材料可能更昂貴，當不需要長保存期限，例如用於監測旨在立即或急迫使用的主體產品時，具有相對較高的溼氣透過率的材料可用於冷凍指示劑。
[0121]合適的蒸汽阻擋材料包括具有適當厚度的鋁箔、片材或塗層，例如，厚度為約
0.0lmm-約0.1mm。可採用鋁的合金或其他金屬，並且在有用的厚度中通常為不透明的。
[0122]當以透明形式提供時可允許觀察指示劑分散體的有用的蒸汽-阻擋材料的一些實例包括聚氯三氟乙烯、氯三氟乙烯-偏二氟乙烯共聚物、乙烯-氯三氟乙烯共聚物、乙烯-四氟乙烯共聚物、氟化乙烯-丙烯共聚物、全氟烷基-四氟乙烯共聚物、聚四氟乙烯、聚偏二氟乙烯、聚氟乙烯、四氟乙烯-六氟丙烯共聚物、四氟乙烯-六氟丙烯-偏二氟乙烯三元共聚物、聚氯三氟乙烯、六氟丙烯-偏二氟乙烯共聚物、四氟乙烯-丙烯共聚物和四氟乙烯-全氟甲基醚共聚物。
[0123]如果期望用於結構或其他目的，可將一種或多種這樣的蒸汽阻擋材料的膜或片材摻入到多層層壓材料中，該層壓材料具有一種或多種其他片材或膜材料，例如，聚氯乙烯、聚乙烯、乙二醇化(glycolised)的聚對苯二甲酸乙二酯或乙烯-乙烯醇共聚物。
[0124]這種多層層壓材料的一些實例包括:剛性和柔性泡罩(blister)包裝水分阻擋膜；聚氯乙烯和聚氯三氟乙烯的雙層層壓材料，比如由Honeywell International Inc.供應，商標為ACLAR? 22的材料；包含0.2mm(7.5mil)聚氯乙烯層和0.015mm(0.6mil)PCTFE層的兩層層壓材料，比如由Tekn1-Plex，Somerville, NJ供應，商標為TEKNIFLEXVA760的材料，和包含0.25mm(1 Omi I)聚氯乙烯層、0.05mm(2miI)聚乙烯層和0.08mm(3mi I)聚氯三氟乙烯層的三層層壓材料，也由Tekn1-Plex供應，商標為TEKNIFLEX VPA10300的材料。
[0125]具有有用的溼氣阻擋性質的另一種合適的多層膜層壓材料包含可印刷的聚酯/聚偏二氯乙烯/聚乙烯層壓材料。這種層壓材料的一個實例為可得自Prairie StateGroup (Chicago, IL)的產品,其包含相對薄的層壓材料,例如配備聚偏二氯乙烯薄塗層的約0.012mm(約50gauge)的聚對苯二甲酸乙二酯。期望的標記(如果有的話)可為在聚對苯二甲酸乙二酯表面上印刷的油墨。另外，如果期望，可使用粘合劑將相對厚的(例如約
0.062mm(約250gauge)厚度)的線性低密度聚乙烯共混物層與聚偏二氯乙烯表面粘合。[0126]用於冷凍指示劑包封的蒸汽阻擋材料可包含任何一種或多種前述蒸汽阻擋材料或多層層壓材料或由它們組成。
[0127]冷凍指示劑包封可具有任何合適的體積，以容納冷凍指示劑分散體。對於一些目的，相對小的體積(比如小於約2mL)是有用的並且可採用。合適的體積的一些實例包括在約20 μ L (微升)-約2mL範圍的體積；在約20 μ L-約150 μ L範圍內的體積；在約40 μ L-約80 μ L範圍內的體積；和至高達約50 μ L的體積。
[0128]基底。如果期望，本發明的冷凍指示劑可包含支撐冷凍指示劑包封的基底。所述基底可例如為標籤或標牌，並且可配備一部分冷凍指示劑包封或由冷凍指示劑包封構成。
[0129]這種基底可用於將冷凍指示劑與待監測的主體產品或與主體產品的散裝容器或包裝固定。基底可攜帶粘合劑層，或者可具有其他合適的手段將冷凍指示劑與主體產品連接或與散裝容器或包裝連接。如果期望，連接前粘合劑可被脫模襯裡保護。另外，如果期望，包括所述基底(如果存在)的冷凍指示劑可為柔性，以與主體產品、散裝容器或包裝的彎曲的外表面一致。
[0130]任選地，基底可包含光-反射背景，以幫助給予指示劑分散體在冷凍之前和之後的視覺外觀的期望的組合。例如，冷凍指示劑分散體在冷凍之前可為透明的並且在已冷凍或冷凍和融化後為不透明的，並且光-反射背景可為明亮著色的，以呈現在冷凍之前的不同的外觀，該外觀在冷凍或冷凍和融化之後被掩蔽。因此，背景和冷凍指示劑在開始時可為綠色的，或者具有另一種合適的顏色，並且在冷凍之後，當背景被凝結的分散體掩蔽時，可變為白色或另一種截然不同的顏色或外觀。
[0131]如果期望，冷凍指示劑可包含與冷凍指示劑包封鄰近的參比區域，該參比區域具有與冷凍指示劑的終點類似的外觀或具有另外的適當的圖形字符，其可促進讀取冷凍指示劑信號。任選地，如果採用，可將這種參比區域在冷凍指示劑基底上印刷。
[0132]如果期望，包含基底(如果採用)的大量冷凍指示劑可在片材原料或連續的網上排列。
[0133]冷凍指示劑的製造。本發明的等份的冷凍指示劑分散體可通過任何合適的方法製造成為單個的冷凍指示劑。合適的方法包括將等份的冷凍指示劑分散體裝入可大量生產的包裝(例如在片材中或在合適的包裝材料的一個或多個連續的膜中預製的凹座樣泡罩的陣列)中，關閉泡罩並切割或另外將陣列分成單個的冷凍指示劑。一些合適的方法描述於Taylor等人專利公布，其他為本領域普通技術人員鑑於本公開已知或顯而易見的，或者隨著技術的發展，在將來將變得已知或顯而易見。
[0134]現在將描述本發明的一些方面實踐的一些示例性和非限制性實施例以及一個或多個對比實施例。
[0135]實施例1-7ρΗ對冷凍指示劑分散體的影響
[0136]如表IA所示的具有從4.0的酸性pH到11.0的鹼性pH範圍的不同的pH值和其他特性的7種臘分散體得自供應商Michelman Inc., Cincinnati, Ohio,並且配製成為實施例1-7，如以下所描述的。在表IA中，「蠟pH」是指蠟分散體的pH，用於蠟分散體的蠟為石蠟/合成蠟共混物，並且蠟分散體的供應商產品代碼如表中所述。
[0137]
【權利要求】
1.一種冷凍指示劑，所述冷凍指示劑包括指示劑分散體，所述指示劑分散體包含: 含水液體介質，所述含水液體介質具有熔融溫度和冷凍溫度，所述冷凍溫度低於所述溶融溫度；和 有機材料指示劑顆粒，所述有機材料指示劑顆粒在所述含水液體介質中分散； 其中所述指示劑分散體在冷凍之前具有初始外觀，在冷凍之後具有不可逆的不同的外觀，並且其中所述冷凍指示劑可呈現約-1.9°c或更高的冷凍-開始溫度。
2.權利要求1的冷凍指示劑，其中所述冷凍指示劑可呈現不同的外觀變化，指示在冷凍-開始溫度下含水液體介質的冷凍。
3.權利要求1的冷凍指示劑，其中所述冷凍指示劑可呈現至少-1°C的冷凍-開始溫度。
4.權利要求1的冷凍指示劑，其中所述冷凍指示劑可呈現至少-0.9°C或至少-0.5°C的冷凍-開始溫度。
5.權利要求1的冷凍指示劑，其中所述冷凍指示劑可呈現約0.(TC的冷凍-開始溫度。.
6.權利要求1的冷凍指示劑，其中所述冷凍指示劑可呈現約0.5°C的冷凍-開始溫度。
7.權利要求1、2、3、4、5或6的冷凍指示劑，其中在約20°C-約25°C的室溫下儲存至少4周後，所述冷凍指示劑可呈現至少約-2.(TC的冷凍-開始溫度。
8.權利要求1、2、3、4、5或6的冷凍指示劑，其中在約20°C-約25°C的室溫下儲存至少`4周後，所述冷凍指示劑可呈現比新鮮時的冷凍-開始溫度低不超過0.5°C的冷凍-開始溫度。
9.權利要求1、2、3、4、5或6的冷凍指示劑，其中所述含水液體介質的pH在選自以下範圍的範圍內:約 pH4-約 pHll j4pH4-約 pH9.5 j4pH7.5-約 pH8.5 ;和約 pH7.8-約 pH8.2。
10.權利要求1、2、3、4、5或6的冷凍指示劑，其中所述指示劑顆粒包含疏水性有機材料的固體顆粒。
【文檔編號】G01K11/12GK103940527SQ201410031155
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2010年8月30日 優先權日:2009年8月31日
【發明者】D.E.史密斯, C.M.倫茨, D.H.泰勒, Y.奧森加, B.赫夫曼 申請人:泰坦公司