一種淨化水體的微生物製劑的製備方法
2023-12-02 07:24:01
專利名稱：一種淨化水體的微生物製劑的製備方法
技術領域：
本發明涉及水體汙染控制技術領域，特別涉及一種高效去除多種汙染物的 淨化水體的微生物製劑的製備方法。
背景技術：
目前，淨化水體的方法主要有物理、化學和生物方法。物理方法效果顯 著，但勞動量大，見效時間較長，使用比較複雜，費用較高；化學藥物雖然 見效快，但成本高，毒副作用較大，且在水體中有一定的殘留，長期使用對 於水體以及周圍生態環境會造成汙染；生物方法毒副作用小，利於恢復生態 環境，因此備受人們的關注。但是目前應用於水體淨化的菌種作用效果不穩 定，難以對具有多種汙染物的水體進行淨化。從環境中篩選淨化多種汙染物、 適於多種水體環境且淨化效果穩定的菌株是當前生物修復技術的一大難題。
發明內容
本發明經過大量的試驗研究工作，發現了一種製備性能優良、高效低毒、 操作簡便且適用範圍較廣的淨化水體的微生物製劑的製備方法。 本發明的目的是提供一種淨化水體的微生物製劑的製備方法。 本發明通過以下技術方案實現
1、 取水體；採用牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基，pH值為8.2 8.4，用塗布平 板分離法對水體中的細菌進行分離；並對所形成的單菌落進行純化，連續純 化3次。
2、 對步驟1純化後的菌株進行染色觀察，選取產莢膜，有異染粒，革蘭氏染色陰性細菌，並通過對廢水COD、 N、 P去除率試驗，以及含有懸浮物 和偶氮染料廢水的絮凝與脫色試驗選取淨化水體效果最好的兩種菌株。
3、 將步驟2所得兩菌株分別接入肉湯液體培養基，放入搖床，在100~120 r-min-1， 35 38。C下培養10~24h，製得菌體濃度約為lO^mr1的菌懸液。
4、 將步驟3所得兩種菌懸液混合均勻，即得到菌體濃度約為1(^ml"的 微生物製劑。
為了更好的效果，步驟3優選120rmin"， 37匸下培養24h。 本發明產品使用時，先將本發明微生物製劑稀釋100倍得稀釋菌懸液，
在所需淨化的水體中，按每噸水加入20 P 1稀釋菌懸液即可。
本發明產品可應用於養殖水體，自然水體，以及生活、農業或工業廢水等。 本發明從水體中分離純化選取的菌株具有以下特性特徵假單胞菌屬，
杆狀，革蘭氏染色陰性，產莢膜，細胞內有異染粒和聚P-羥基丁酸。 本發明的優點和積極效果
1、 本發明產品能去除多種汙染物，可顯著降低水體中COD、可溶性磷、 氨氮和硝態氮含量，從而控制水體藻類的發生，防止水華的出現，
2、 本發明產品具有強大的絮凝、脫色效果。
3、 本發明產品具有高效低毒的特點，應用於養殖水體時可提高水產品的 產量和質量，增加水產養殖的經濟和社會效益；應用於自然水體可防治水體 汙染、改善水域生態環境。
4、 本發明產品使用方便。本發明產品為天然微生物，見效較快，使用方 便簡單，對水環境無副作用。
、 本發明產品適於各種水體環境，可應用於養殖水體，自然水體，及生活、農業及工業廢水等。
具體實施例方式
為了進一步了解本發明，下面以實施例作進一步說明，但並不限制本發明。
實施例1 製備微生物製劑
製備牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基，pH值為8.2 8.4，備用； 取天津市西青區南河鎮南河村魚池及天津市東麗區華明鎮永和村蝦池的 上覆水作為分離純化菌株的水體，備用。
用塗布平板分離法對水體中的細菌進行分離。並對單菌落連續純化3次。 進行染色觀察，選取產莢膜，有異染粒，革蘭氏染色陰性細菌。之後通 過對廢水COD、 N、 P去除率試驗，以及含有懸浮物和偶氮染料廢水的絮凝 與脫色試驗，從上述所選取的細菌中選取水體淨化效果最好的兩種菌株。
將兩菌株分別接入肉湯液體培養基，放入搖床，在120rmin'1， 37"C下培 養24h，得菌體濃度約為10tml"的菌懸液。
將所得兩種菌懸液均勻混合在一起，即得到菌體濃度約為lf^mr1的微生 物製劑。
實驗例l COD去除率試驗 取試驗水體四種
1、 自製葡萄糖廢水取250mg蔗糖、48mg氯化銨、2mg磷酸二氫鉀， 用蒸餾水定容至500ml;
2、 生活汙水取自食堂洗碗槽內廢水500ml;
3、 養殖水體取天津市西青區南河鎮南河村魚池上覆水500ml4、天津市東麗區華明鎮永和村蝦池的上覆水500ml。
將實施例1所得微生物製劑稀釋IOO倍，在上述每種廢水中分別加入1^1， 之後於24、 48、 72、 96h測定COD含量，結果顯示微生物製劑在48h對四 種廢水的COD去除率均在80%以上。
實驗例2 氮、磷含量去除率試驗
取40cm (長)x30cm (寬)x35cm (高)魚缸6個，分別裝入從天津市 西青區南河鎮南河村魚池和天津市東麗區華明鎮永和村蝦池取來底泥和上覆 水，約4cm厚，再分別緩慢注入各自的上覆水至高度為20cm。魚缸四周用黑 布包圍，隨機排列在窗口，在自然光和室溫下培養5個月。每月將實施例1 所得微生物製劑稀釋100倍的菌懸液20^1注入上覆水中，每組設2個樣本， 並設對照。每月採上覆水測定可溶性磷、氨態氮及硝態氮含量，共測5次。
實驗結果顯示微生物製劑可明顯降低上覆水可溶性磷、氨氮和硝硝態 氮含量。與對照相比，東麗池塘上覆水可溶性磷含量5個月下降了 87.43%， 西青池塘下降了 59.28%。氨氮含量東麗池塘比對照下降了 72.83%,西青池塘 下降了 59.28%。硝態氮含量東麗池塘比對照下降了 49.61%，西青池塘下降了 40.65% 。
實驗例3 絮凝率試驗
1、 不同溫度下微生物製劑的絮凝效果
分別將10^1微生物製劑投加於6個裝有4g^的高嶺土懸濁液100ml的三 角瓶中，分別加熱至10。C、 15°C、 20°C、 25°C、 30°C、 35°C，靜置30min， 測定絮凝率，結果表明在2(TC時絮凝效果最好，絮凝率可達87.62%;
2、 不同濃度的微生物製劑用量的絮凝效果-取6個裝有4g/L的高嶺土懸濁液100ml的三角瓶中，分別加入1^1 、 5pl、 IO(J 、 15(^1 、 20^1 (lO^mr1)稀釋IOO倍菌懸液，培養30min，測定絮凝率， 結果表明加入10nl微生物製劑，30min後，絮凝率達86.25%。
3、不時間微生物製劑的絮凝效果
取5個裝有4g/L的高嶺土懸濁液100ml的三角瓶中，加入1(^1 (lOSnl") 稀釋100倍菌懸液，分別靜置15min、 20min、 30 min、 40 min、 50min測定 絮凝率，結果表明微生物製劑在絮凝30min即可達到良好絮凝效果，絮凝率 為88%。
實驗例4脫色試驗
對黑墨水和偶氮染料廢水的絮凝和脫色試驗各取50ml黑墨水和偶氮染料 廢水於小燒杯中，分別加入lOpl (1(^ml—1)稀釋100倍菌懸液，同時做空白 試驗(CK)， 24h後觀察，發現黑墨水已絮凝沉澱，上覆水變清；偶氮染料廢水 已脫色。
權利要求
1、一種淨化水體的微生物製劑的製備方法，其特徵在於包括步驟1)取水體；採用牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基，pH值為8.2～8.4，用塗布平板分離法對水體中的細菌進行分離；並對所形成的單菌落進行純化，連續純化3次；2)對步驟1)純化後的菌株進行染色觀察，選取產莢膜，有異染粒，革蘭氏染色陰性細菌，並通過對廢水COD、N、P去除率試驗，以及含有懸浮物和偶氮染料廢水的絮凝與脫色試驗選取淨化水體效果最好的兩種菌株；3)將步驟2)所得兩菌株分別接入肉湯液體培養基，放入搖床，在100～120r·min-1，35～38℃下培養10～24h，製得菌體濃度約為108·ml-1的菌懸液；4)將步驟3)所得兩種菌懸液混合均勻，即得到菌體濃度約為108·ml-1的微生物製劑。
2、 根據權利要求1所述的淨化水體的微生物製劑的製備方法，其特徵在 於步驟3)中將兩菌株分別接入肉湯液體培養基培養時，培養條件為在120 rmin-1， 37。C下培養24h。
全文摘要
本發明涉及一種淨化水體的微生物製劑的製備方法，步驟包括從水體中分離純化菌株，並從所得菌株中篩選兩種菌株，將兩菌株分別接入肉湯液體培養基在所述條件下培養10～24h，製得菌體濃度約為108·ml-1的菌懸液，將所得兩種菌懸液混合，即得到菌體濃度約為108·ml-1的微生物製劑；本發明產品具有絮凝、脫色效果好速度快、對水中COD、可溶性磷、氨氮及硝態氮去除率高等特點；且製備成本低，使用方便，可廣泛應用於河流、水庫、池塘、湖泊以及其他汙水的生物修復。
文檔編號C12N1/20GK101643715SQ200910070250
公開日2010年2月10日 申請日期2009年8月27日 優先權日2009年8月27日
發明者盧顯芝, 王永剛, 田秀平, 郝建朝 申請人:天津農學院