用作抗氧化劑的取代的苯酚和苯硫酚的製作方法

2023-12-02 12:11:56 1

專利名稱：用作抗氧化劑的取代的苯酚和苯硫酚的製作方法
冠心病(CHD)現已成為工業化國家主要的死亡原因。儘管最近的CHD死亡率有所下降，在美國，每年仍有超過500,000人死於CHD。據估計，美國一年直接和間接花在CHD上的費用超過一千億美元。CHD的主要原因是動脈粥樣硬化，這是一種以脂質在動脈管壁中的沉積為特徵的疾病，從而導致管道狹窄，最終使血管系統硬化。
動脈粥樣硬化(由其主要的臨床併發症缺血性心臟病所表現出來)被認為是開始於動脈內皮的局部損傷，然後，動脈平滑肌細胞從中間層向內膜層增生，同時伴有脂質的沉積和泡沫細胞在損傷處的蓄積。隨著動脈粥樣硬化斑的進展，越來越多的血管逐漸被阻塞，最後可導致局部缺血或梗塞。因此，提供一種在患者需要的時候抑制動脈粥樣硬化進展的方法正是人們所需要的。
血膽甾醇過多是一種重要的與CHD有關的危險因素。例如在1984年12月，一個健康共同發展協會研究小組國家研究所得出結論說，降低血漿膽甾醇水平(特別是低密度脂蛋白膽甾醇的血液水平)無疑會減少CHD引起的心臟病發作的危險。血清脂蛋白是脂質循環的載體。根據它們的密度分類如下乳糜微粒、極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。乳糜微粒主要參與飲食中甘油三酯和膽甾醇從腸向脂肪組織與肝臟的轉移。VLDL將內源性合成的甘油三酯從肝臟釋放到脂肪與其他組織中。LDL將膽甾醇轉移至外周組織，並調節這些組織中的內源性膽甾醇水平。HDL將膽甾醇從外周組織轉移至肝臟。動脈壁膽甾醇幾乎全部來自LDL(Brown和Goldstein，《生物化學年鑑》(Ann.Rev.Biochem.)52,223(1983)；Miller，《醫學年鑑》(Ann.Rev.Med.)31,97(1980))。在低水平LDL患者中，很少發生動脈粥樣硬化。因此，需要提供一種降低血膽甾醇過多患者或具有形成血膽甾醇過多危險的患者血漿膽甾醇的方法。
提高的膽甾醇水平也與大量疾病狀態有關，包括再狹窄、絞痛、腦動脈硬化和黃瘤。需要提供一種降低患者血漿膽甾醇的方法，該患者患有再狹窄、絞痛、腦動脈硬化、黃瘤和其他與膽甾醇水平提高有關的疾病狀態或具有形成這些疾病的危險。
血管細胞粘著分子-1(VCAM-1)和細胞間粘著分子-1(ICAM-1)是屬於免疫球蛋白超家族的粘著分子，它們在血管內皮細胞和平滑肌細胞中被細胞因子例如白介素-1(IL-1)、白介素-4(IL-4)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)上調。在炎性反應中，通過與適當的整合蛋白反受體的相互作用，VCAM-1和ICAM-1介導白細胞粘著作用與跨內皮的移行作用。VCAM-1和/或ICAM-1的抑制劑對多種類型的慢性炎症具有治療學上的應用，包括動脈粥樣硬化、哮喘、類風溼性關節炎和自身免疫性糖尿病。例如，對患者動脈粥樣硬化斑的原位雜交與免疫組織化學分析證明，粘著分子(VCAM-1和ICAM-1)的水平高於非疾病區。O』Brien,K.D．等《臨床研究雜誌》(J.Clin.Invest.)92,945-951(1993)；Davies,M.J．等《病理學雜誌》(J.Pathol.)171,223-229(1993)；Poston,R.N．等《美國病理學雜誌》(Am.J.Pathol.)140,665-673(1992)。致動脈粥樣化的飲食誘發了粉瘤兔子主動脈內皮和血管平滑肌細胞中的VCAM-1表達。Poston,R.N．等，出處同上；Cybulsky,M.I．等《科學》(Science)251,788-791(1991)；Li,H．等《動脈硬化與血栓形成》(Arterioscler.Thromb.)13,197-204(1993)。鑑於以前所作的這些研究，提高了的VCAM-1表達據信是與動脈粥樣硬化斑的起始與進展有關的，這是通過循環中的單核細胞向損傷區的募集反應來實現的。
而且，VCAM-1作為一種介體，也涉及其他慢性炎症，例如哮喘、類風溫性關節炎和自身免疫性糖尿病。例如，已知VCAM-1和ICAM-1的表達在哮喘症中是升高的。Pilewski,J.M．等《美國呼吸細胞分子生物學雜誌》(Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.)12,1-3(1995)；Ohkawara,Y．等《美國呼吸細胞分子生物學雜誌》12,4-12(1995)。另外，阻斷VCAM-1和ICAM-1的整合蛋白受體(分別為VLA-4和LFA-1)抑制了卵白蛋白致敏的大鼠氣道變態反應模型的早期和晚期反應。Rabb,H.A．等《美國呼吸護理醫學雜誌》(Am.J.Respir.CareMed.)149,1186-1191(1994)。包括VCAM-1在內的內皮粘著分子在風溼病樣滑膜的微脈管系統中的表達也是升高的。Koch,A.E．等《實驗室研究》(Lab.Invest.)64,313-322(1991)；Morales-Ducret,J．等《免疫學》(Immunol.)149,1421-1431(1992)。抗VCAM-1或其反受體VLA-4的中和抗體能夠延遲自發產生糖尿病的小鼠模型(NOD小鼠)疾病的發病。Yang,X.D．等《美國國家科學院院報》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)90,10494-10498(1993)；Burkly,L.C．等《糖尿病》(Diabetes)43,523-534(1994)；Baron,J.L．等《臨床研究雜誌》93,1700-1708(1994)。VCAM-1的單克隆抗體對同種移植排斥反應的動物模型也具有有益效果，這表明VCAM-1表達的抑制劑可用於預防移植排斥反應。Orocz,C.G．等《免疫學快報》(Immunol.Lett.)32,7-12(1992)。
由細胞所表達的VCAM-1既可以是膜結合的形式，也可以是可溶的形式。VCAM-1的可溶形式顯示具有體外誘導血管內皮細胞趨化性的作用和刺激大鼠角膜血管生成應答的作用。KoCh,A.E．等《自然》(Nature)376,517-519(1995)。可溶VCAM-1表達的抑制劑在具有強血管生成成分的疾病治療中具有潛在的治療學價值，這類疾病包括腫瘤的生長和轉移。Folkman,J.和Shing,Y．《生物學與化學雜誌》(J.Biol.Chem.)10931-10934(1992)。
VCAM-1和ICAM-1的啟動子都已被克隆，並進行了特徵描述。例如，兩者的啟動子都含有多DNA序列元件，它們能夠與轉錄因子NF-kB結合。Iademarco,M.F．等《生物學與化學雜誌》267,16323-16329(1992)；Voraberger,G．等《免疫學雜誌》(J.Immunol.)147,2777-2786(1991)。NF-kB族轉錄因子在位於炎症部位內上調的若干基因的調節中處於核心地位。NF-kB活化為轉錄因子涉及在細胞質中從抑制性亞基IkB的離解過程。NF-kB亞基易位至核，與特異性DNA序列元件結合，激活若干基因的轉錄，包括VCAM-1和ICAM-1。Collins T．等《實驗室研究》68,499-508(1993)。
已經假定，通過特異性還原-氧化(redox)敏感的轉錄調節因子或轉錄後調節因子，可以將VCAM-1基因表達的調節與氧化應力聯繫起來。抗氧化劑吡咯烷二硫代氨基甲酸酯和N-乙醯半胱氨酸抑制血管內皮細胞中細胞因子誘導的VCAM-1表達，但不是ICAM-1。Mauri,N．等《臨床研究雜誌》92,1866-1874(1993)。這一點說明，抗氧化劑對VCAM-1表達的抑制作用涉及某些在ICAM-1表達調節中所不涉及的另外的因子。
Parker等在1992年10月13日公布的美國專利5,155,250號中公開了作為抗動脈粥樣硬化劑的2,6-二烷基-4-甲矽烷基-苯酚。進一步地，於1995年6月15日公開的PCT國際申請WO 95/15760號公開了作為血清膽甾醇降低劑的2,6-二烷基-4-甲矽烷基-苯酚。
它將有助於控制VCAM-1和/或ICAM-1的釋放，並治療以VCAM-1和/或ICAM-1為媒介的作用。它還將有助於控制或治療慢性炎症，而不會產生已知的伴隨使用抗炎甾類化合物和非甾類化合物抗炎劑產生的伴發副作用。
本發明提供了下式化合物
其中X選自
，或
Y為硫基、氧基或一個亞甲基；Z為氫或-C(O)-(CH2)m-Q，其中Q為氫或-COOH,m為一個1、2、3或4的整數；R1為C1-C6烷基；且R2、R3和R4每個獨立為氫或C1-C6烷基；或其一種立體異構體。
本發明還提供了一種在患者需要時抑制LDL脂質過氧化的方法，該方法包括將有效抗氧化量的式(1)化合物對所述患者給藥。
本發明進一步提供了一種在患者需要時降低血漿膽甾醇水平的方法，該方法是通過將血漿膽甾醇降低量的式(1)化合物給藥來實現的。
本發明進一步提供了一種在患者需要時抑制動脈粥樣硬化進展的方法和/或治療動脈粥樣硬化的方法，該方法包括將抗動脈粥樣硬化量的式(1)化合物對該患者給藥。
本發明進一步提供了一種在患者需要時抑制細胞因子誘導的血管細胞粘著分子-1和/或細胞間粘著分子-1的表達的方法，該方法包括將有效的血管細胞粘著分子-1和/或細胞間粘著分子-1抑制量的式(1)化合物對該患者給藥。
本發明進一步提供了一種治療患有慢性炎性疾病的患者的方法，該方法包括將治療學上有效量的式(1)化合物對該患者給藥。
本申請中所用的a)符號「
」指的是一條伸向頁面前方的鍵；b)符號「
」指的是一條伸向頁面後方的鍵；c)符號「—」指的是一條非手性分子間的鍵或一條手性分子間的鍵，其立體化學沒有指明。
本文所用的術語「C1-C6烷基」指的是一個由一至六個碳原子組成的直鏈、支鏈或環狀構型的飽和烴基。包括在該術語範圍內的有甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基、環己基等等。
術語「立體異構體」是單個分子所有異構體的通稱，它們的區別僅在於其原子在空間的取向不同。它包括鏡像異構體(對映體)、幾何(順/反式)異構體、和具有一個以上手性中心的化合物的異構體，它們彼此不是鏡像(非對映體)。
式(1)化合物可以採用為本領域的普通技術人員所熟知和領會的步驟和工藝進行製備。一個製備式(1)化合物的一般性合成流程如下流程A所示，其中的所有取代基除非另有說明，均為前述所定義的。流程A
Y』=S或OHal=氯、溴或碘一般來說，結構1a的苯酚可以通過下述方法製備使適當的結構2的烷基-4-巰基苯酚或烷基氫醌(或適當的被保護的衍生物)與一種非親核性鹼(如氫化鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鉀等等)以及適當的結構3的滷代烷或滷代烯反應(如適當的溴代烷)反應，反應在一種適當的非質子傳遞溶劑(如乙腈、二甲基甲醯胺或二甲基乙醯胺)中進行，或者在一種含水溶劑(如水/2-丁酮)中進行。
按照標準的醯化工藝，使結構1a的苯酚醯化，可以製得結構1b的苯酚酯。例如，將結構1a的苯酚溶於一種適當的非質子傳遞溶劑，如乙腈、二甲基甲醯胺或二甲基乙醯胺，或者溶於一種醚性溶劑，如二乙醚或二噁烷，並用一種適當的鹼處理，如三乙胺、N-甲基嗎啉、氫氧化鈉或氫化鈉。然後在室溫下加入過量的O-醯化劑，反應物在室溫下攪拌1至24小時。O-醯化劑的例子為乙醯氯、丙醯氯、一乙基琥珀醯氯、琥珀酸酐等等。產物然後用本領域熟知的工藝進行精製，如萃取法和急驟色譜法。可選地，可以另外再用一種適當的鹼處理，如氫氧化鈉，隨後用一種適當的酸進行酸化，如氫氯酸，然後進行萃取和急驟色譜法，以得到結構1b的苯酚酯。
用於流程A所概述的一般合成過程中的原料對本領域的普通技術人員來說是易於得到的。例如，下列專利描述了製備其中Z為硫的不同式(1)化合物所需的某些苯酚原料，如2,6-二叔丁基-4-巰基苯酚和2-叔丁基-4-巰基苯酚美國專利3,576,883、美國專利3,952,064、美國專利3,479,407、美國專利4,975,467、美國專利5,155,250和日本專利申請73-28425。其他製備式(1)化合物所需的苯酚原料包括三甲基氫醌、叔丁基-1,4-氫醌和2,5-二叔丁基氫醌，它們是商業上可得到的。
結構3的滷代烷和滷代烯原料，如(R)-(-)-香茅基溴、(S)-(+)-香茅基溴、1-溴-3,7-二甲基辛烷、1-溴-3-甲基丁烷和4-溴-2-甲基-2-丁烯，都是商業上可得到的。
在特例中，X是如下式的部分
或
適當的由式(3a)或(3b)代表的結構3的中間體
是通過下述方法製備的在室溫下，一邊攪拌一邊向3-甲基-1,3-丁二醇或羥基香茅醇、溴化鋰、2,4,6-可力丁和二甲基甲醯胺的混合物中加入甲磺醯氯。混合物攪拌數天，用水和乙醚稀釋，並採用本領域熟知的工藝萃取，得到結構(3a)或(3b)的中間體。
若在反應條件下，結構2化合物的1-苯酚官能度可與結構3化合物反應，在這種情況中，結構2化合物的1-苯酚官能度可以用本領域熟知和領會的標準苯酚保護劑保護住。具體保護基團的選擇和使用對本領域的普通技術人員來說是熟知的。一般來說，所選擇的保護基團應當足以在隨後的合成步驟中保護住所述的苯酚，並且在一定條件下是易於除去的，該條件不會導致所需產物降解。
適當的苯酚保護基團的例子是醚，如甲氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基、四氫吡喃基、叔丁基和苄基；甲矽烷基醚，如三甲甲矽烷基和叔丁基二甲矽烷基；酯，如乙酸酯和苯甲酸酯；碳酸酯，如碳酸甲酯和碳酸苄基酯；以及磺酸鹽，如甲磺酸鹽和甲苯磺酸鹽。
若R1和R2均為叔丁基，在這種情況中，流程A的反應可以便利地進行，無需保護1-苯酚官能度。
下列實施例描述了如流程A所述典型的合成方法。這些實施例被理解為僅供舉例說明之用，無論如何不是對本發明範圍的限制。這裡所用的下列術語具有所示含義「g」指克；「mol」指摩爾；「mmol」指毫摩爾；「L」指升；「mL」指毫升；「bp」指沸點；「℃」指攝氏度；「mmHg」指毫米汞柱；「mp」指熔點；「mg」指毫克；「μM」指微摩爾；「μg」指微克；「h」或「hrs」指小時；「min」指分鐘。
實施例1苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-
將2,6-二叔丁基-1,4-氫醌(9.0g,40.5mmol)、碳酸鉀(5.6g)、S-(+)-香茅基溴(8.9g,40.5mmol,Aldrich)和乙腈(150mL，在氬氣下脫氣)混合，加熱回流，並在氬氣下攪拌四天。用水冷稀釋混合物，並用二乙醚萃取。用水洗滌醚層，並蒸發至幹，得到一種油(14.5g)。在球狀管(kugelrohr)中蒸餾該油。在收集其他餾分之前，可以收集原料(2.5g,130℃,0.1mmHg)。由另外收集的一種餾分(140-165℃,0.1mmHg)得到一種油(11.7g)，然後在矽膠上進行色譜法處理(氯仿)。在球狀管上重蒸餾(135-150℃,0.1mmHg)，得到一種淡黃色油(11.4g)。分析計算值C24H40O2:C,79.94；H,11.18實測值C,80.55；H,11.17實施例2苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-
將叔丁基-1,4-氫醌(4.2g,25.8mmol,Aldrich)、碳酸鉀(3.5g)、S-(+)-香茅基溴(5.5g,25.1mmol)和乙腈(150mL，在氬氣下脫氣)混合，加熱回流，並在氬氣下攪拌四天。用水冷稀釋混合物，並用二乙醚萃取。用水洗滌醚層，並蒸發至幹，得到一種油(7.9g)。在球狀管中蒸餾該油。在收集其他餾分之前，可以收集原料(1.6g，至120℃,0.1mmHg)。由另外收集的餾分(140-165℃,0.1mmHg)得到一種油(5.8g)，然後在矽膠上進行色譜法處理(氯仿)。在球狀管上重蒸餾(138-170℃,0.1mmHg)該油，然後在矽膠上進行色譜法分析(己烷-CH2Cl23∶1-1∶1)。殘餘產物在球狀管上重蒸餾(140-150℃,0.1mmHg)，最後再重蒸餾一次(138-150℃,0.1mmHg)，得到標題化合物(4.0g)。分析計算值C20H32O2:C,78.89；H,10.60實測值C,79.51；H,10.44實施例3苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-
將2-叔丁基-4-巰基苯酚(8.0g,44mmol)、碳酸氫鉀(4.4g,44mmol)、碳酸鉀(0.1g)、S-(+)-香茅基溴(9.6g,44mmol)和異丙醇(150mL，在氬氣下脫氣)混合，加熱回流，並在氬氣下攪拌約0.5hrs。蒸餾除去H2O·異丙醇的共沸物，繼續將混合物回流過夜約24小時。用蒸餾法除去溶劑(蒸汽浴)。用H2O稀釋殘餘物，用濃氫氯酸酸化，並用二乙醚萃取。用水和鹽水洗滌醚層，並蒸發至幹，得到一種油(16.2g)。在球狀管中蒸餾該油。在收集其他餾分之前，可以收集原料(3.5g,120℃,0.25-0.1mmHg)。由另外收集的餾分(130-140℃,0.1mmHg)得到一種油(9.7g)，重蒸餾(135-160℃,0.1mmHg)，得到一種無色油(9.4g)。分析計算值C20H32OS:C,74.94；H,10.06；S,10.01實測值C,75.40；H,10.19實施例4苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，
將2,6-二叔丁基-4-巰基苯酚(10.0g,41.9mmol)、R-(-)-香茅基溴(9.2g,8.3mL,41.9mmol)和異丙醇(150mL，在氬氣下脫氣)的混合物在室溫、正壓氬氣下攪拌。加入碳酸氫鉀(4.2g,41.9mmol)，在攪拌下將混合物回流過夜。蒸餾除去異丙醇，加入乙腈(～100mL)，將反應混合物回流約1hr，蒸餾除去乙腈。用水稀釋反應混合物，用濃氫氯酸酸化，並用二乙醚萃取。用水和鹽水洗滌醚層，通過矽膠/Na2SO4過濾，並蒸發至幹，得到一種淡黃色油(16.2g)。在球狀管中蒸餾該油。在收集其他餾分之前，可以收集一種黃色油餾分(1.6g,120℃,0.25-0.1mmHg)。由另外收集的餾分(140-165℃,0.1mmHg)得到一種無色油(13.9g)，將其在球狀管上重蒸餾(140-160℃,0.1mmHg)，得到一種無色油(13.7g)。分析計算值C24H40OS:C,76.53；H,10.71實測值C,76.42；H,10.77實施例5苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，
將二叔丁基-1,4-氫醌(10.0g,45mmol)、溴-3,7-二甲基辛烷(10.0g,45mmol)、碳酸鉀(6.22g,45mmol)和乙腈(200mL，在氬氣下脫氣)混合，在攪拌、氬氣下加熱回流，並蒸餾除去溶劑，直至反應混合物的溫度達到82℃。將反應混合物在氬氣下另外回流三天。用水冷稀釋混合物，並用二乙醚萃取。用水洗滌醚層，並蒸發至於，得到一種油(16.6g)。在球狀管中蒸餾該油。在收集其他餾分之前，可以收集原料(5.0g,～65-110℃,0.1mmHg)。由另外收集的餾分(135-155℃,0.1mmHg)得到一種油(12.0g)，然後在矽膠上進行色譜法處理(氯仿)。將該油在球狀管上重蒸餾(138-170℃,0.1mmHg)，然後在矽膠上進行色譜法處理(CHCl3)，得到一種油(11.7g)。所得產物在球狀管上重蒸餾(130-145℃,0.1mmHg)，得到一種油(10.7g)，最後再重蒸餾一次(130-145℃,0.1mmHg)，得到標題化合物(10.1g)。分析計算值C24H42O2:C,79.50；H,11.68實測值C,80.24；H,11.88
實施例6苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，
在正壓氬氣下，將2-叔丁基氫醌(8.3g,0.05mol)和二甲基乙醯胺(100mL)的混合物在冰浴中攪拌。加入氫化鈉(2.0g,60％油分散系，0.05mol)，並將反應混合物攪拌1hr(和/或H2氣停止放出)。加入1-溴-3,7-二甲基辛烷(11.1g,0.05mol)，並使混合物溫度升至室溫。使所生成的沉澱溶解(～3hrs)。在室溫下攪拌該暗褐色混合物過夜，用H2O和二乙醚稀釋。萃取醚層，洗滌並蒸發至幹，得到一種棕色半固體產物(16.4g)。在球狀管中蒸餾該棕色半固體產物。在收集其他餾分之前，可以收集原料(3.4g，至120℃,0.1mmHg)。由一種收集到的產物餾分(～130-155℃,0.1mmHg)得到一種油(～6.5g)。收集另一種產物餾分(150-185℃,0.1mmHg)得到一種油(～4.1g)。合併這兩種產物餾分(～6.5g+～4.1g)，以及從前次同例另外收集到的產物餾分(～4.6g)，並蒸發至幹，得到一種油(～15.5g)。該油用矽膠色譜法精製，用己烷(500mL)、CCl4∶己烷(500mL,1∶1)和CCl4連續洗脫，得到一種草色油(9.2g)。在球狀管中重蒸餾該草色油，收集到標題化合物(7.9g,135-150℃,0.1mmHg)。
實施例7苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)硫基]-，
步驟a結構(3a)的製備將羥基香茅醇(10.0g,57.4mmol)、溴化鋰(10.0g,111.5mmol)、2,4,6-可力丁(7.0g,7.6mL,57.7mmol)和二甲基甲醯胺(100mL)混合，並在室溫下攪拌。歷時大約五分鐘加入甲磺醯氯(6.6g,4.44mL,57.4mmol)，混合物在室溫下攪拌過夜。再加入溴化鋰(5.0g)、甲磺醯氯(4.4mL)和2,4,6-可力丁(7.6mL)，混合物攪拌四天。混合物用H2O和乙醚稀釋，萃取醚層，用飽和Cu(NO3)2和水洗滌，並蒸發至幹，得到標題化合物，為一種淡黃色油(8.7g,37mmol)。
步驟bMDL 104,487的製備合併實施例7步驟a的產物與2,6-二叔丁基-4-巰基苯酚(8.8g,37mmol)、碳酸氫鉀(3.7g,37mmol)和異丙醇(100mL)的混合物，並加熱回流。繼續將混合物回流一小時，並蒸餾除去溶劑，直至反應混合物的溫度達到82℃。用H2O稀釋反應混合物，用濃氫氯酸酸化，並用二乙醚萃取。用水和鹽水洗滌醚層，通過矽膠/Na2SO4過濾，並蒸發至幹，得到一種油(37.0g)。在球狀管中蒸餾該油。在收集其他餾分之前，可以收集原料(～100-130℃,0.1mmHg)。由另外收集的餾分(160-175℃,0.1mmHg)得到一殘餘物(13.8g)。該殘餘物用矽膠色譜法精製，用CCl4、CCl4∶CH2Cl2(1∶1)和CH2Cl2連續洗脫，得到標題化合物，為一種黃色油(10.6g)。分析計算值C24H42O2S:C,73.04；H,10.73實測值C,73.19；H,10.92實施例8苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-(MDL 104 535)
將2,6-二叔丁基-1,4-氫醌(6.7g,30mmol)、R-(-)-香茅基溴(6.6g,6.0mL,30mmol)和乙腈(150mL，在氬氣下脫氣)的混合物在室溫下攪拌，並加入碳酸鉀(4.2g,30mmol)。在正壓氬氣下將混合物加熱回流過夜。再將反應混合物回流24小時，加入碘化鉀，另外再回流～6hrs。將反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋，用濃氫氯酸酸化，用二乙醚萃取，通過矽膠/Na2SO4過濾，並蒸發至幹，得到一種油(11.0g)。在球狀管中蒸餾該油。收集餾分(10.8g,120-130℃,0.1mmHg和150-180℃,0.1mmHg)，並在球狀管中重蒸餾該油。由另外收集的餾分(160-175℃,0.1mmHg)得到一殘餘物(13.8g)。收集原料(2.2g，最高120℃,0.1mmHg)和標題化合物，為一種淡黃色油(8.3g,135-150℃,0.1mmHg)。分析計算值C24H40O2:C,79.94；H,11.18實測值C,79.96；H,11.10實施例9苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，
將2-叔丁基氫醌(7.0g,42mmol)、R-(-)-香茅基溴(9.2g,42mmol)和乙腈(150mL，在真空下脫氣)的混合物在室溫下攪拌。加入碳酸鉀(5.8g,42mmol)，並在攪拌、正壓氬氣下將混合物回流過夜。加入碘化鉀(2.0g)，並繼續回流三天。將反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋，用濃氫氯酸酸化，用二乙醚萃取，通過矽膠/Na2SO4過濾，並蒸發至幹，得到一種油(13.0g)。在球狀管中蒸餾該油。收集原料(1.3g，最高120℃,0.1mmHg)。由另外收集的餾分(140-170℃,0.1mmHg)得到一殘餘物(8.9g)，將其重蒸餾，收集(7.5g,140-160℃,0.1mmHg)，並用矽膠色譜法精製，用CHCl3洗脫，得到標題化合物，為一種淡黃色油(7.1g)。分析計算值C20H32O2:C,78.89；H,10.60實測值C,79.73；H,10.86實施例10苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-
將2,5-二叔丁基-1,4-氫醌(11.1g,50mmol)、S-(+)-香茅基溴(11.0g,50mmol)、碳酸鉀(6.9g)和乙腈(150mL，在氬氣下脫氣)的混合物在攪拌下加熱回流兩天。加入二甲基甲醯胺(～15mL)和碘化鈉(～0.5g)，並繼續回流過夜。將反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋，用濃氫氯酸酸化，用二乙醚萃取，通過矽膠/Na2SO4過濾，並蒸發至幹，得到一種油(19.2g)。將該油與己烷混合。過濾所生成的沉澱。將濾液蒸發至幹，在球狀管中蒸餾殘餘物。收集原料(最高120℃,0.1mmHg)。收集另外的餾分(155-180℃,0.1mmHg)，得到一種油(9.2g)，將其用矽膠色譜法精製(己烷∶CH2Cl2∶4∶1)，並蒸發至幹，得到一種淡草色油(8.4g)。在球狀管中重蒸餾該淡草色油，得到標題化合物，為一種油(8.2g,150-165℃,0.1mmHg)。分析計算值C24H40O2:C,79.94；H,11.18實測值C,80.68；H,11.08實施例11丁酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯
將實施例5產物(4.9g,13.5mmol)和氫化鈉(0.6g，在油中60％,15mmol)在二甲基乙醯胺(100mL)中的混合物在室溫下攪拌1小時。在攪拌下向反應混合物中加入一乙基琥珀醯氯(2.46g,15mmol)。反應混合物在室溫下攪拌過夜，然後在90℃下加熱2小時，再冷卻。用水稀釋混合物，並用乙醚萃取。用水洗滌醚層，並蒸發至幹，得到一殘餘物。將殘餘物與甲醇(100mL)混合，並加熱回流。加入氫氧化鈉(1.0g，在20mL水中)，並將反應混合物回流30分鐘，然後用水稀釋，並冷卻。用濃氫氯酸酸化該水懸液，並用乙醚和四氫呋喃萃取該混合物。分離有機層，並蒸發至幹，得到從己烷中結晶出的標題化合物。
實施例12乙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(S)-
將實施例1的產物(6.02g,16.7mmol)、氫化鈉(0.67g，在油中60％,16.7mmol)和二甲基乙醯胺(50mL)的混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中緩慢加入乙醯氯(2.6g,33.5mmol)，繼續反應過夜。用水和乙醚稀釋反應混合物，並分離各層。蒸發醚層至幹，得到粗的標題化合物。在球狀管中蒸餾，然後進行重結晶，得到標題化合物。
實施例13乙酸，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯
在室溫下攪拌實施例9的產物(4.67g,15.3mmol)、三乙胺(3.04g,30mmol)和乙醚(100mL)的混合物。在攪拌下緩慢加入乙醯氯(2.4g,30mmol)。混合物攪拌4小時，然後用水稀釋。分離各層並蒸發有機層至幹，得到一殘餘物。在球狀管中蒸餾該殘餘物，得到標題化合物。
實施例14丙酸，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(S)-
在室溫下攪拌實施例10的產物(7.21g,20mmol)、三乙胺(2.53g,25mmol)在乙醚(150mL)中的混合物。加入丙醯氯(23g,25mmol)，混合物攪拌過夜。加入水和乙醚，並分離各層。蒸發有機層，得到一種油，然後將其在球狀管中蒸餾。殘餘物可用矽膠色譜法精製，得到標題化合物。
實施例15丁酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯
在室溫下攪拌實施例4的產物(7.53g,20mmol)、三乙胺(2.53g,25mmol)在乙醚(150mL)中的混合物。加入丁醯氯(2.66g,25mmol)，混合物攪拌過夜。加入水和乙醚，並分離各層。蒸發有機層，得到-種油，然後將其在球狀管中蒸餾。殘餘物可用矽膠色譜法精製，得到標題化合物。
實施例16苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-
將三甲基氫醌(10.0g,66mmol,Aldrich化學公司，Milwaukee,WI 53233)、S-(+)-香茅基溴(14.47g,66mmol)、碳酸鉀(9.12g,66mmol)、碘化鈉(9.9g)和乙腈(150mL)的混合物加熱回流，並攪拌五天。混合物冷卻，用水和乙醚稀釋，並分離各層。蒸發有機層至幹，得到一種油。在球狀管中蒸餾該油。殘餘物用矽膠色譜法精製，並重蒸餾，得到標題化合物。
實施例17苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-
對上述實施例16的反應產物進行色譜法處理，然後蒸餾，得到標題化合物。
實施例18苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-甲基-2-丁烯基)硫基]-，
用4-溴-2-甲基-2-丁烯(6.25g,41.9mmol)按照實施例4方法進行製備。在球狀管中蒸餾，得到標題化合物。
實施例19苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-甲基丁烷)氧基]-，
用1-溴-3-甲基丁烷(7.55g,0.05mol)按照實施例6方法進行製備。在球狀管中蒸餾，得到標題化合物。
實施例20乙酸，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(S)-
步驟a4-乙醯氧基-2,3,5-三甲基苯酚的製備在冰浴中攪拌三甲基氫醌(15.2g,0.1mol)、三乙胺(25.3g,0.25mol)和乙醚(500mL)的混合物。在攪拌下緩慢加入乙醯氯(19.6g,0.25mol)，使反應物溫度升至室溫一小時，然後用水稀釋，並分離各層。蒸發醚層至幹。將所得二乙酸酯溶於甲醇(300mL)。加入強氫氧化銨(11mL)，並在室溫下攪拌混合物過夜。在減壓下蒸餾除去溶劑，並將殘餘物溶於乙醚。用水洗滌醚層，並蒸發至幹。從己烷-乙醚中重結晶，得到4-乙醯氧基-2,3,5-三甲基苯酚(16.7g,m.p.=106-107℃)。
步驟b乙酸，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(S)-的製備在攪拌下，將4-乙醯氧基-2,3,5-三甲基苯酚(8.1g,41.7mmol)、S-(+)-香茅基溴(9.14g,41.7mmol)、溴化鋰(3.6g,41.7mmol)、碳酸鉀(5.8g,41.7mmol)和乙腈(150mL)的混合物加熱回流三天。冷卻混合物，用水稀釋，用濃氫氯酸酸化，並萃取入乙醚中。蒸發醚層至幹，得到一殘餘物。蒸餾該殘餘物，然後進行矽膠色譜法處理，得到標題化合物。
按照類似於上述實施例1-20的方法，可以製得下列化合物苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-，苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-，
苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-，苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(R)-，苯酚，2,6-二乙基-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,6-二乙基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(R)-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,5-二乙基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,6-二丙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，苯酚，2,6-二丙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-，苯酚，2,5-二丙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-，苯酚，2,5-二丙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，苯酚，2,6-二異丙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-，苯酚，2,6-二異丙基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(R)-，苯酚，2,5-二異丙基-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,5-二異丙基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-，
苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(R)-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(R)-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,3,5-三甲基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-甲基-2-丁烯基)硫基]-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-甲基-2-丁烯基)硫基]-，苯酚，2,3,6-三甲基-4-[(3-甲基-2-丁烯基)硫基]-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-甲基丁基)氧基]-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-甲基丁基)氧基]-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3-羥基-3-甲基丁基)氧基]-，乙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，乙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(R)-，乙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，乙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，(S)-，乙酸，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，(R)-，乙酸，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯，乙酸，2,3,6-三甲基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯，丙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，丙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(R)-，丙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，丙酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，(S)-，丙酸，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，(R)-，丙酸，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯，丁酸，2,3,6-三甲基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯，丁酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，丁酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]苯基酯，(R)-，丁酸，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，丁酸，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，(S)-，
丁酸，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]苯基酯，(R)-，丁酸，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯，丁酸，2,3,6-三甲基-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)氧基]苯基酯。
一個製備其中Z為亞甲基的式(1)化合物的一般性合成流程如下流程B所示，其中的所有取代基除非另有說明，均為前述所定義的。
流程B
Hal=氯、溴或碘一般來說，按照流程B，可用兩步法製備結構1c的苯酚。在步驟a中，適當的結構3的滷代烷或滷代烯在一種適當的非質子傳遞溶劑(如乙醚)中與金屬鎂反應，生成鎂的滷化物鹽。鎂的滷化物鹽(格利雅試劑)然後與適當的結構4的烷基-4-羥基苯甲醛(或適當的被保護的衍生物)反應，得到結構5的醇。在步驟b中，通過本領域熟知和領會的各種還原工藝和過程可將結構5的醇還原為所需的結構1b的苯酚。例如，使其在液氨中與鈉反應，藉助此Birch還原反應，可將結構5的醇還原。
按照前面流程A所述的標準醯化反應工藝，可通過醯化結構1c的苯酚來製備結構1d的苯酚酯。
用於流程B所概述的一般合成過程中的原料是易於得到的，或者按照標準工藝和過程是易於製備的。為了防止發生所不需要的副反應，可以在格利雅反應之前，用前面流程A所述的標準苯酚保護劑保護流程B中結構4的烷基-4-羥基苯甲醛的1-苯酚官能度。
下列實施例描述了如流程B所述典型的合成方法。這些實施例被理解為僅供舉例說明之用，無論如何不是對本發明範圍的限制。
實施例21苯酚，2,3,6-三甲基-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(R)-
步驟a
在惰性氣氛下，將鎂屑(240mg,10mmol)與無水乙醚混合。加入S-(+)-香茅基溴(2.19g,10mmol)的無水乙醚溶液。攪拌直至金屬鎂溶解。加入2,3,5-三甲基-4-羥基苯甲醛(1.7g,10mmol)的無水乙醚溶液。攪拌直至反應完全。將反應混合物冷卻至0℃，加入飽和氯化銨溶液。分離醚層，用水洗滌並乾燥(MgSO4)。蒸發得到適當的結構5的中間體，用矽膠色譜法精製。
步驟b將金屬鈉(520mg,22.6mmol)與液氨(13mL)混合。向該溶液中滴加實施例19步驟a的中間體(3.04g,10mmol)的乙醇(0.5g)與乙醚(5mL)溶液。藍色消失後，小心地加入水(13mL)，用乙醚萃取，乾燥(MgSO4)，並蒸發溶劑。用矽膠色譜法精製殘餘物，得到標題化合物。
或者，也可按照下述流程C方法製備其中Z為亞甲基的式(1)化合物，其中的所有取代基除非另有說明，均為前述所定義的。
流程C
一般來說，結構1b的苯酚可按下述方法製備首先，適當的結構3的滷代烷或滷代烯與金屬鎂在一種適當的非質子傳遞溶劑(如乙醚)中反應，生成鎂的滷化物鹽。鎂的滷化物鹽(格利雅試劑)然後與適當的結構6的烷基-4-羥基苄基滷(或適當的被保護的衍生物)反應，得到所需的結構1c的苯酚。
按照前面流程A所述的標準醯化反應工藝，可通過醯化結構1c的苯酚來製備結構1d的苯酚酯。
用於流程C所概述的一般合成過程中的原料是易於得到的，或者按照標準工藝和過程是易於製備的。例如，3,5-二甲基-4-乙醯氧基苄基溴的製備描述在《四面體》(Tetrahedron)33,3097-103(1977)中。通過標準的水解步驟，3,5-二甲基-4-乙醯氧基苄基溴可轉化為相應的苯酚原料。
為了防止發生所不需要的副反應，可以在格利雅反應之前，用前面流程A所述的標準苯酚保護劑保護流程C中結構6的烷基-4-羥基苄基滷的1-苯酚官能度。
下列實施例描述了如流程C所述典型的合成方法。這些實施例被理解為僅供舉例說明之用，無論如何不是對本發明範圍的限制。
實施例22苯酚，2,6-二乙基-4-(4,8-二甲基-7-壬烯村)-，(R)-
在惰性氣氛下，將鎂屑(240mg,10mmol)與無水乙醚混合。加入S-(+)-香茅基溴(2.19g,10mmol)的無水乙醚溶液。攪拌直至金屬鎂溶解。加入4-溴甲基-2,6-二乙基苯酚(2.43g,10mmol)的無水乙醚溶液，並回流該混合物直至反應完全。倒在冰/氫氯酸的混合物上，並分離各層。用水洗滌醚層，乾燥(MgSO4)並蒸發，得到用矽膠色譜法精製的標題化合物。
實施例23乙酸，2,6-二乙基-4-[(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(R)-
在室溫下攪拌實施例20的產物(6.05g,20mmol)、三乙胺(2.53g,25mmol)在乙醚(150ml)中的混合物。加入乙醯氯(1.96g,25mmol)，並攪拌該混合物過夜。加入水和乙醚，並分離各層。蒸發有機層，得到一種油，將其在球狀管中蒸餾。矽膠色譜法(氯仿)得到標題化合物。
按照類似於上述實施例21-23的方法，可製備下列化合物苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(R)-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(S)-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，(R)-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，(S)-，苯辛醇，3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，苯辛醇，3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，(R)-，
苯辛醇，3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，(S)-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(R)-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(S)-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，(R)-，苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，(S)-，苯辛醇，3,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，苯辛醇，3,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，(R)-，苯辛醇，3,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，(S)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(R)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(S)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-,(R)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基壬基)-,(S)-，苯辛醇，3-(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，苯辛醇，3-(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，(R)-，苯辛醇，3-(1,1-二甲基乙基)-4-羥基-α,α,ε-三甲基-，(S)-，苯辛醇，4-(乙醯氧基)-3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-α,α,ε-三甲基-，苯辛醇，4-(乙醯氧基)-3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-α,α,ε-三甲基-，(R)-，苯辛醇，4-(乙醯氧基)-3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-α,α,ε-三甲基-，(S)-，苯辛醇，4-(乙醯氧基)-3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，苯辛醇，4-(乙醯氧基)-3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(R)-，苯辛醇，4-(乙醯氧基)-3,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-(4,8-二甲基-7-壬烯基)-，(S)-。
式(1)化合物被理解為可以以不同立體異構體的形式存在。按照標準的立體異構體結構表達慣例的解釋，與上述結構式一致的所有的立體異構體形式均包括在本發明的範圍內。
優選的式(1)化合物是那些化合物，其中Z為氫、乙醯基或琥珀醯基，優選為氫；R1為甲基或叔丁基；R2與R3每個獨立為氫、甲基或叔丁基；R4為氫或甲基。更優選的化合物是苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)硫基]-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)硫基]-，苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-，苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，和苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-。
本文所用的術語「患者」指的是一種溫血動物或哺乳動物，需要治療其慢性炎性疾病、動脈粥樣硬化、血膽甾醇過多或者需要抑制其細胞因子誘導的血管細胞粘著分子-1和/或細胞間粘著分子-1的表達。豚鼠、犬、貓、大鼠、小鼠、倉鼠、兔和靈掌類(包括人)被理解為該術語含義範圍內的患者的例子。
動脈粥樣硬化是一種以動脈粥樣化損害或斑的形成與生長為特徵的疾病狀態。這類需要治療其動脈粥樣硬化的患者的判斷恰好是在本領域的普通技術人員的能力和知識範圍內。例如，患有臨床上明顯的動脈粥樣硬化或面臨形成臨床上明顯的動脈粥樣硬化危險的個體即為有必要進行動脈粥樣硬化治療的患者。利用臨床化驗、體格檢查和病歷/家族史，本領域的普通臨床醫師能夠輕易確定一個個體是否是有必要進行動脈粥樣硬化治療的患者。
式(1)化合物的有效抗動脈粥樣硬化量是在需要時有效抑制患者動脈粥樣硬化形成或生長的量。照此，動脈粥樣硬化患者的成功治療被理解為包括有效地延緩、中斷、阻止或停止動脈粥樣硬化損害或斑的形成或生長，但不必表示為動脈粥樣硬化的全部消除。進一步為本領域的普通技術人員所理解和領會的是，動脈粥樣硬化的成功治療可以包括在防止動脈粥樣硬化損害或斑生成方面的預防。
LDL脂質(例如LDL膽甾醇酯和磷脂的不飽和脂肪酸部分)的過氧化已知促進了膽甾醇在巨噬細胞中的沉積，該巨噬細胞繼而沉積在血管壁上，並轉化為泡沫細胞。需要抑制其LDL脂質過氧化的患者的判斷恰好是在本領域的普通技術人員的能力和知識範圍內。例如，如上所定義的有必要進行動脈粥樣硬化治療的個體也是有必要抑制其LDL脂質過氧化的患者。式(1)化合物的有效抗氧化量是對抑制患者血液中LDL脂質過氧化有效的量。
血膽甾醇過多是一種以血清膽甾醇水平或LDL膽甾醇水平為特徵的疾病狀態，該水平在臨床上顯著高於被本領域的普通技術人員認為是正常的水平。需要治療其血膽甾醇過多的患者的判斷恰好是在本領域的普通技術人員的能力和知識範圍內。例如，由臨床實驗室化驗所決定的、血清膽甾醇水平或LDL膽甾醇水平實質上和長期高於被本領域的普通技術人員認為是正常的水平的個體即為有必要進行血膽甾醇過多治療的患者。藉助於進一步的例子說明，面臨形成血膽甾醇過多危險的個體也可以是有必要進行血膽甾醇過多治療的患者。利用臨床化驗、體格檢查和病歷/家族史，本領域的普通臨床醫師能夠輕易確認患有血膽甾醇過多的患者和面臨形成血膽甾醇過多危險的患者，因此輕易確定一個個體是否是有必要進行血膽甾醇過多治療的患者。
術語「慢性炎性疾病」指的是以在沒有可辨認的刺激物或微生物病原體的存在下持續發炎為特徵的疾病或病症。用式(1)化合物治療對其特別有用的炎性疾病包括哮喘、慢性炎症、類風溼性關節炎、自身免疫性糖尿病、移植物排斥和腫瘤血管生成。式(1)化合物的「治療有效量」是經對患者單劑或多劑給藥後，對緩解與慢性炎性疾病有關的症狀有效的量。式(1)化合物的「有效的血管細胞粘著分子-1和/或細胞間細胞粘著分子-1抑制量」是經對患者單劑或多劑給藥後，對緩解與血管細胞粘著分子-1和/或細胞間粘著分子-1介導的病症有關的症狀有效的量。
本文所用的慢性炎性疾病或血管細胞粘著分子-1介導的病症的「症狀緩解」指的是比不經過治療的症狀嚴重程度降低了，但不必表示為疾病的全部消除或治癒。症狀的緩解也應包括預防。
在確定式(1)化合物的治療有效量或劑量、有效抗氧化量或劑量、血漿膽甾醇降低量或劑量、有效抗動脈粥樣硬化量或劑量、或有效VCAM-1和/或ICAM-1抑制量時，有關診斷醫師要考慮大量因素，包括但不限於哺乳動物的種類；它的大小、年齡和一般健康狀況；所涉及的具體疾病；疾病的程度或牽連性或嚴重性；個別患者的反應；所給藥的特定化合物；給藥方式；所給藥製劑的生物利用度特徵；所選擇的劑量方案；同時使用的治療藥物；和其他相關條件。
式(1)化合物的治療有效量或劑量、有效抗氧化量、血漿膽甾醇降低量、有效抗動脈粥樣硬化量或有效VCAM-1和/或ICAM-1抑制量一般從大約1毫克每千克體重每天(mg/kg/天)至大約5克每千克體重每天(gm/kg/天)不等。約1mg/kg至約500mg/kg的每日劑量是優選的。
本發明化合物是VCAM-1和/或ICAM-1表達的抑制劑。據信，本發明化合物是通過抑制由細胞因子上調的VCAM-1和/或ICAM-1水平來發揮其抑制活性的，從而預防炎性疾病或緩解症狀，炎性疾病包括哮喘、慢性炎症、類風溼性關節炎、自身免疫性糖尿病等等；動脈粥樣硬化和血膽甾醇過多。不過，在解釋其在最終應用中的功效時，本發明被理解為不受任何特定理論或建議機制的限制。
在對患者的治療中，式(1)化合物可以以任意方式或模式給藥，給藥方式使有效量的化合物是生物可利用的，包括口服和腸胃外途徑。例如，化合物可以口服、皮下、肌內、靜脈內、透皮、鼻內、直腸給藥等等。一般優選口服給藥。根據所治療的疾病狀態、疾病的階段和其他相關條件，藥物製劑領域的技術人員能夠輕易選擇正確的給藥方式和模式。《雷明頓藥物科學》(Remington’sPharmaceutical Sciences)，第18版，Mack出版公司(1990)。
式(1)化合物可以以藥物組合物或藥劑的方式給藥，其製備方法是將一種式(1)化合物與藥學上可接受的載體或賦型劑組合，它們的比例和性質是由所選擇的給藥途徑和標準的藥學慣例所決定的。
藥物組合物或藥劑是以藥學領域熟知的方式製備的。載體或賦型劑可以是一種固體、半固體或液體材料，它能起到有效成分的載體或媒介的作用。適當的載體或賦型劑是本領域所熟知的。藥物組合物可以是適合於口服或腸胃外用途的，對患者可以以片劑、膠囊劑、栓劑、溶液、懸液等等的方式給藥。
藥物組合物例如可以與一種惰性稀釋劑或與一種可食用載體口服給藥。它們可以被包封在膠囊中或被壓製成片。為了進行口服治療給藥，式(1)化合物可以與賦型劑結合，並且可以以片劑、錠劑、膠囊劑、酏劑、栓劑、糖漿劑、糯米紙囊劑、口香糖等等方式使用。這些製劑應當含有至少4％的式(1)化合物作為有效成分，但是根據特定方式可以變化，4％至約70％重量單位之間是適宜的。組合物中存在的有效成分的量是使人們可以得到適於給藥的單位劑量形式。
片劑、丸劑、膠囊劑、錠劑等等也可以含有一種或多種下列助劑粘合劑，如微晶纖維素、黃蓍膠或明膠；賦型劑，如澱粉或乳糖；崩解劑，如海藻酸、Primogel、玉米澱粉等等；潤滑劑，如硬脂酸鎂或Sterotex；助流劑，如膠體二氧化矽；和甜味劑，如可以加入蔗糖或糖精，或矯味劑，如薄荷、水楊酸甲酯或橙香料。若劑量單位形式為膠囊，除了以上類型的物質以外，還可以含有一種液體載體，如聚乙二醇或一種脂油。其他劑量單位形式可以含有其他改變劑量形式的物理形狀的不同物質，例如包衣料。因此，片劑或丸劑可以用糖、蟲膠或其他腸溶包衣劑進行包衣。除了有效成分以外，糖漿劑可以含有蔗糖作為甜味劑，和某些防腐劑、染料及色素和矯味劑。用於製備這些不同組合物的物質應當是藥學純的，並且在用量上應當是無毒的。
為了進行腸胃外給藥，可以將式(1)化合物加入到一種溶液或懸液中。這些製劑應當含有至少0.1％的本發明化合物，但是其重量可以在0.1與約50％之間變化。該組合物中存在的有效成分的量是使人們可以得到適當的劑量。
根據式(1)化合物的溶解度和其他性質，溶液或懸液還可以含有一種或多種下列助劑無菌稀釋劑，如注射用水、鹽水溶液、固定油類、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶劑；抗菌劑，如苯甲醇或羥苯甲酸甲酯；抗氧化劑，如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑，如乙二胺四乙酸；緩衝劑，如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽；和用於調節毒性的試劑，如氯化鈉或葡萄糖。腸胃外製劑可以封裝在玻璃或塑料製成的安瓿、一次性注射器或多劑量小瓶中。
實施例24所選擇的酚性抗氧化劑在人主動脈平滑肌細胞或增生性人臍靜脈內皮細胞中對VCAM-1和ICAM-1細胞因子誘導的表達的百分抑制作用將來自Clonetics(San Diego,CA)的增生性人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)或人主動脈平滑肌細胞(HASMC)置於96孔平皿中，每孔有100μL培養基，每cm2有20000個細胞。在加入細胞因子或藥物之前，將培養物在生長培養基(EGM或SMGM2,Clonetics,San Diego,CA)中保持兩天。在分析粘著分子水平之前，加入含有或不含有化合物的細胞因子，歷時20至24小時。向培養物中加入500-1000單位/mL的腫瘤壞死因子(Genzyme,Cambridge,MA)，以刺激ICAM-1表達。向培養物中加入100-200 pg/mL的白介素-4(GIBCO-BRL,Gaithersburg,MD)，以刺激VCAM-1表達。(加入方法是將100μL連續稀釋在另一個96孔平皿上的細胞因子加化合物轉移至含有細胞的平皿中。在加入效應物之前不交換培養物上的培養基。)。除去培養基，並在室溫下用Hanks緩衝鹽水溶液(HBSS)洗滌單層兩次。向每孔(1μg/mL，在HBSS加5％新生小牛血清，GIBCO-BRL,Gaithersburg,MD)中加入原發抗體(來自Upstate Biotechnology,Inc.,Lake Placid,NY的抗人VCAM-1或來自Immunotech,Inc.,Westbrook,ME的抗人ICAM-1)，並在37℃下培養1小時。用HBSS洗滌孔兩次，然後向每孔加入100μL的的與辣根過氧化物酶共軛的山羊抗小鼠IgG(BioRad,Hercules,CA)在HBSS加5％新生小牛血清中的1/1000稀釋液，並在37℃下培養1小時。用HBSS洗滌孔三次，然後向每孔中加入100μL的TMB底物(BioRad,Hercules,CA)。在顯藍色後加入50μL的1N H2SO4以終止反應。用平皿讀數器測量450nm下的吸光度。
表1總結了使用人主動脈平滑肌細胞(HASMC)時所選擇的本發明化合物抑制VCAM-1和ICAM-1的能力。在這些實驗中，細胞與白介素-4共同培養以刺激VCAM-1表達，與腫瘤壞死因子-α共同培養以刺激ICAM-1表達。
表1對人主動脈平滑肌細胞(HASMC)中VCAM-1和ICAM-1的抑制作用
*三次實驗平均值@兩次實驗平均值，括號中的數字代表負值表2總結了使用增生性人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)時本發明的不同化合物選擇性抑制VCAM-1或既抑制VCAM-1又抑制ICAM-1的能力。在這些實驗中，細胞與腫瘤壞死因子-α以及所示化合物共同培養大約20至24小時後，測定細胞表面粘著分子的表達。
表2對人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)中VCAM-1和/或ICAM-1的抑制作用
*三次實驗平均值，括號中的數字代表負值@兩次實驗平均值在其他預知涉及VCAM-1水平升高的炎症模型中，也可以測定這些化合物的體內活性。這樣一種呼吸疾病(如哮喘)的模型，是卵白蛋白致敏模型。Kung,T.T．等《國際變態反應與免疫學文獻》(Int.Arch.Allergy Immunol.)105,83-90(1994)。該肺部炎症模型是以IgE為媒介的，並涉及嗜酸粒細胞增多(哮喘患者即是如此)。從實驗動物得到的支氣管小泡灌洗(BAL)液能夠進行多種參數的測定，包括可溶性粘著分子表達和白細胞蓄積。粘著分子表達能用免疫組織化學的方法在實驗動物組織內測定，尤其是肺。請求保護的化合物的作用應當是抑制VCAM-1表達的上調，並抑制BAL液中嗜酸細胞蓄積。可在大鼠輔助關節炎模型中對該抑制劑進行試驗，該模型曾顯示出對抗ICAM-1單克隆抗體有應答。Iigo,Y．等《免疫學雜誌》147,4167-4171(1991)。在該模型中，粘著分子的表達將在實驗動物的肢部(關節)中測定。對自身免疫性糖尿病來說，在NOD小鼠模型中可以試驗化合物延緩疾病發作或預防疾病繼承性轉移的能力。Heinke,E.W．等《糖尿病》42,1721-1730(1993)；Baron,J.L．等《臨床研究雜誌》93,1700-1708(1994)。而且，可以監測組織(例如胰)中VCAM-1表達的水平，還可以監測實驗動物糖尿病的進展。通過監測心臟同種移植的存活率(移植給C3H/He受體的Balb/c心臟。Isobe,M．等《免疫學雜誌》153,5810-5818(1994))，可以測定對移植排斥的治療能力。抗VCAM-1和抗VLA-4單克隆抗體的體內給藥誘發對該小鼠模型心臟同種移植物和可溶性抗原的免疫抑制作用。多種模型能夠評價化合物對腫瘤轉移和血管生成的作用。它們可以包括B16(小鼠)和M24met(人)實驗性黑素瘤轉移模型。Fidler,I.J．《癌症研究》(Cancer Res.)35,218-224(1975)；Meuller,B.M．等《癌症研究》51,2193-2198。通過化合物對多種發展的肺轉移瘤的作用以及對上述小鼠呼吸模型肺中VCAM-1表達的作用，可以測定它們的活性。可用來對化合物進行試驗的用於評價抗血管生成化合物的模型涉及監測小鼠血管對皮下注射的血管生成因子與基膜蛋白混合物的應答。Passaniti,A．等《實驗室研究》67,519-528(1992)。把補充到matrigel中的血管數量和凝膠的血紅蛋白含量記錄為血管生成。如上所有實例所述，用免疫組織化學方法可以測定粘著分子表達和白細胞蓄積。
實施例25式(1)化合物對用膽甾醇飼餵的雌性紐西蘭白兔的血膽甾醇降低作用和抗氧化作用A．實驗方案如下方式進行五個獨立實驗。每個實驗有一個對照組和1-5組MDL化合物治療組(每組N=5)。用含有或不含有0.4％MDL化合物的富含0.2％膽甾醇的兔飼料(Purina #5322)飼餵雌性紐西蘭白兔(Hazelton,～2.0-2.3kg)。將MDL化合物在100％乙醇中增溶。在飼料上噴灑MDL混合物，並在化學通風櫥中乾燥過夜。在對照飼料上噴灑乙醇。每天飼餵白兔100克飼料，飼餵7天(0.6％MDL 103,491飼餵14天)；使動物可以隨意地飲水。第7天，從白兔(禁食過夜)耳緣靜脈放血(～2mL)。用過量二氧化碳無痛致死白兔。記錄總體重和肝重的克數。記錄飼料量，以克·天-1·兔-1表示。將新鮮血清的等分試樣用在血清臨床化學、脂蛋白膽甾醇檢測、硫巴比土酸反應物(TBARS)和化合物與代謝物濃度測定中。將肝臟在-20℃下冷凍(～5克等分試樣)，用於晚些時候的化合物與代謝物濃度測定。
B．臨床化學使血液在室溫下凝結30分鐘。在5℃下，在帶GH轉子的BeckmanGPKR離心機中以3000rpm離心10分鐘後得到血清。使用Roche診斷試劑，用COBAS MIRA自動分析儀(Roche Diagnostics)分析總膽甾醇(CHOL，試劑盒#44334)和甘油三酯(TG，試劑盒#44120)。計算膽甾醇和甘油三酯的mg/dL值。
C．TBARS測定TBARS可定性表示樣本中脂質的氧化作用。在該測定中，用CuSO4引發血清脂質的氧化作用，結果導致醛的生成，例如丙二醛(MDA)。用硫巴比土酸培養後，在530-540nm下可以檢測到醛的吸光度。低於對照血清值的TBARS值表示了化合物抑制氧化作用的相對能力。測量如下將50μL血清與50μL的0．9％鹽水和400μL的5mM CuSO4溶液混合，在37℃下培養5小時。加入1.0mL的20％三氯乙酸以終止反應。然後加入1.0mL的0.67％硫巴比土酸的0.05N氫氧化鈉溶液，混合，並在90℃下將樣本溫育30分鐘。簡單地對樣本進行離心，使不溶物形成顆粒，再將上清液轉移至96孔微量滴定板中。用Biotek EL311型微量板讀數器在540nm下測量吸光度。從0至10納摩爾的MDA(由丙二醛雙(二甲基乙縮醛)製得)標準曲線計算所產生的MDA納摩爾數。比較來自受治療兔子的血清樣本與來自沒有接受MDL化合物的對照兔子的血清樣本。
D．化合物與代謝物在血清和肝臟中濃度的HPLC定量測定使用Waters 990 Powerline系統，用反相HPLC測定母體化合物及其代謝物、即雙酚和二苯酚合苯醌的血清濃度和肝濃度。使用Polytron組織勻化器在5檔設置下，用5.0mL PBS,pH7.4將肝臟(1克)勻化20-30秒。如下萃取血清或肝臟勻漿化物在使試管渦旋的同時，向2.0mL二乙醚∶乙醇(3∶1)中加入100μL的血清或勻漿化物。蓋住樣本試管，在5℃下在帶GH 3.7轉子的Beckman GPKR離心機中以3500rpm離心10分鐘。將上清液轉移至乾淨的試管中，在N2下乾燥。用200μL的乙腈∶己烷∶0.1M乙酸銨(90∶6.5∶3.5體積比)重新構成樣本。向Waters Deltapak C18-300柱上注入100μL，用83％乙腈∶17％水移動相洗脫，流速為1.5mL/min。記錄在波長為240、254和420nm下的吸光度。從經過回收率校正的已知量的真實母體化合物計算化合物濃度。計算血清濃度的μg/mL值，計算肝臟濃度的μg/g值。
E．脂蛋白亞級分膽甾醇水平的HPLC分離和定量測定在連接Waters Powerline HPLC系統的Sepharose 6HR柱(1×30cm,Pharmacia)上分離脂蛋白級分(極低密度脂蛋白VLDL，低密度脂蛋白LDL和高密度脂蛋白HDL)。將血清(50μL)注入到柱上，用pH7.4的磷酸鹽緩衝鹽水洗脫，流速為0.5mL/min。以0.2mL/min向後置柱洗脫液中加入膽甾醇試劑(Roche Diagnostics，試劑盒#44334，用20mL水稀釋，然後用20mL的0.9％鹽水稀釋)，在37℃下在編織PFTE Kratos反應盤管(Applied Biosystems)中恆溫5分鐘。在500nm下測量吸光度。如下定量脂蛋白的亞級分(總血清膽甾醇)×(每種亞級分曲線下％面積)下表3和表4列出了該試驗過程中單個實驗的數據匯總。
表3式(1)化合物對膽甾醇飼餵的雌性紐西蘭白兔的血膽甾醇降低和抗氧化作用，相對於對照組的百分比
N=5隻兔子/組；禁食過夜兔子飼餵7天飲食％=(MDL化合物重量/食物重量)×(100)表3中數據如下進行規一化％對照=(平均，治療組/平均，對照組)×(100)食物=每隻兔子每天吃掉的克數體重=重量克數LW/BW=(肝重/體重克數)CHOL=總膽甾醇mg/dLLDL=低密度脂蛋白膽甾醇mg/dLHDL=高密度脂蛋白膽甾醇mg/dLTRIG=甘油三酯mg/dLTBARS=硫巴比土酸反應物，以納摩爾MDA表示表4兔血清和肝臟中的藥物和代謝物濃度
N=5隻兔子/組；禁食過夜兔子飼餵7天飲食％=(MDL化合物重量/食物重量)×(100)表4中數據以平均值(N=5)給出，沒有對對照值進行過規一化。
血清母體=母體化合物濃度，以μg/mL血清表示血清Bis=雙酚濃度，以μg/mL血清表示血清Quin=二苯酚合苯醌濃度，以μg/g血清表示肝臟母體=母體化合物濃度，以μg/g肝臟表示肝臟Bis=雙酚濃度，以μg/g肝臟表示肝臟Quin=二苯酚合苯醌濃度，以μg/g肝臟表示實施例26體內篩選法測量式(1)化合物在雄性Sprague-Dawley大鼠中的抗氧化活性和生物利用度A．實驗方案典型的實驗由4-6組大鼠組成(每組N=5)，其中1組為對照，不接受MDL化合物，其他組用0.3％MDL化合物處理。一些化合物的劑量保持在0.3％，另一些在較低的0.1％劑量下進行評價。籠養雄性Sprague-Dawley大鼠，50-100克(Harlan Laboratories,Indianapolis,IN)，分5組，使動物可以隨意地飲水，用含有或不含有MDL化合物的Purina Rodent飼料(#5002)作為飲食混合物飼餵4天。將1.2克的一種MDL化合物與400克Purina rodent飼料(#5002)混合，製成飲食混合物(0.3％)。使用研缽和研棒，將MDL化合物與大約50克食物混合。將其加入到其餘食物中，在旋轉混合器中混合3小時。在第5天早晨，用二氧化碳麻醉沒有禁食的大鼠，用心臟穿刺法收集血液。用頸脫位法處死大鼠。記錄體重和肝重的克數。記錄食物消耗量，以克·天-1·大鼠-1表示。記錄死亡的只數作為死亡率。將新鮮血清等分試樣用在臨床化學、硫巴比土酸反應物(TBARS)和共軛二烯測量中。將血清的等分試樣(～0.5mL)和全肝在-20℃下冷凍，用於晚些時候的化合物與代謝物濃度測定。
B．臨床化學使血液在室溫下凝結30分鐘。在4℃下，在帶JS-4.2轉子的Beckman J-6M/E離心機中以3000rpm離心10分鐘後得到血清。使用Roche診斷試劑，用COBAS MIRA S自動分析儀(Roche Diagnostics)分析新鮮血清，用於下列臨床化學測量鹼性磷酸酶(ALP，試劑盒#44553)、丙氨酸轉氨酶(ALT，試劑盒#42375)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST，試劑盒#42381)、總膽甾醇(CHOL，試劑盒#44334)、甘油三酯(TG，試劑盒#44120)和葡萄糖(GLU，試劑盒#44558)。計算ALP、ALT和AST的單位/L值。計算膽甾醇、甘油三酯和葡萄糖的mg/dL值。
C．血清和肝臟中化合物和代謝物濃度的HPLC定量測定使用Waters 990 Powerline系統的反相HPLC測定母體化合物及其代謝物、即雙酚和二苯酚合苯醌的血清濃度和肝濃度。使用Polytron組織勻化器在5檔設置下，用5.0mL PBS,pH7.4將肝臟(1克樣本)勻化20-30秒。如下萃取血清或肝臟勻漿化物在使試管渦旋的同時，向2.0mL二乙醚∶乙醇(3∶1)中加入100μL的血清或勻漿化物。蓋住樣本試管，在5℃下在帶GH 3.7轉子的BeckmanGPKR離心機中以3500rpm離心10分鐘。將上清液轉移至乾淨的試管中，在N2下乾燥。用200μL的乙腈∶己烷∶0.1M乙酸銨(90∶6.5∶3.5體積比)重新構成樣本。然後向Waters Deltapak C18-300柱上注入100μL，用83％乙腈∶17％水移動相洗脫，流速為1.5mL/min。記錄在波長為240、254和420nm下的吸光度。從經過回收率校正的已知量的真實母體化合物計算化合物濃度。計算濃度，μg/mL。計算血清濃度的μg/mL值，計算肝臟濃度的μg/g值。
D．硫巴比土酸反應物(TBARS)測定在該測定中，用CuSO4引發血清脂質的氧化作用，結果導致醛的生成，例如丙二醛(MDA)。用硫巴比土酸培養後，在530-540nm下可以檢測到醛的吸光度。如前面的實施例所述，低於對照血清值的TBARS值表示了受試化合物抑制樣本中脂質氧化作用的相對能力。測量TBARS如下將100μL血清與400μL的5mmol CuSO4溶液混合，在37℃下培養3小時。加入1.0mL的20％三氯乙酸以終止反應。然後加入1.0mL的0.67％硫巴比土酸的0.05N氫氧化鈉溶液，混合，並在90℃下將樣本恆溫30分鐘。簡單地對樣本進行離心，使不溶物形成顆粒，再將上清液轉移至96孔微量滴定板中。用Biotek EL311型微量板讀數器在540nm下測量吸光度。從0至10納摩爾的MDA(由丙二醛雙(二甲基乙縮醛)製得)標準曲線計算所產生的MDA納摩爾數。比較來自受治療大鼠的血清樣本與來自沒有接受MDL化合物的對照大鼠的血清樣本。
E．共軛二烯測定共軛二烯遲滯期是脂質氧化的另一個指標。脂質與Cu++接觸形成共軛二烯，吸收230至235nm範圍的紫外光。二烯形成的遲滯期表示了脂質氧化的量。長於對照樣本的遲滯期表示對氧化的抑制作用。在30℃下，使用Varian DMS200分光光度計(裝有一個恆定溫度的5隻吸收池樣品轉換器)測定共軛二烯遲滯期。向含有3.0mL磷酸鹽緩衝鹽水，pH7.5的吸收池中加入二十(20)μL匯集的血清，並混合。測量所有吸收池的吸光度，利用最小吸收樣本設置儀器的基線為零。下一步，加入100μL的1mmol CuSO4並立即混合。每隔2分鐘記錄每隻吸收池的吸光度，歷時840分鐘。截取數據，並轉移到微軟EXCEL電子表格(spreadsheet)中，使曲線平滑，並得到微分值。用數學方法測定遲滯期，以分鐘表示。匯集血清樣本(N=5)；所列數據為2次測定的平均值。比較經過處理的大鼠血清樣本與沒有接受MDL化合物的對照大鼠血清樣本。
下表5、表6和表7給出了來自該試驗過程的單個實驗的數據匯總。表5為雄性Sprague-Dawley大鼠的血清化學測量結果，表6為動物參數，表7提供了藥物或代謝物在血清和肝臟中的濃度。
表5式(1)化合物對雄性Sprague-Dawley大鼠的抗氧化作用，以相對於對照的百分比表示
ND=未檢測N=5隻大鼠/組飲食％=(MDL化合物重量/食物重量)×(100)共軛二烯=共軛二烯遲滯期的分鐘數(2次匯集樣本測定的平均值，N=5)表5中的數據除了共軛二烯和飲食百分比以外，均作如下規一化處理％對照=(平均，治療組/平均，對照組)×(100)ALP=鹼性磷酸酶，U/mLAST=天冬氨酸氨基轉移酶，U/mLALT=丙氨酸氨基轉移酶，U/mLCHOL=總膽甾醇，mg/dL
TG=甘油三酯，mg/dLGLU=葡萄糖，mg/dLTBARS=硫巴比土酸反應物，以MDA納摩爾數表示。
表6動物參數，以相對於對照的百分比表示
N=5隻大鼠/組飲食％=(MDL化合物重量/食物重量)×(100)表6中的數據已按表5中所列公式進行過規一化處理。
食物=每隻大鼠每天吃掉的克數體重=重量克數LW/BW=(肝重/體重克數)死亡率=每組死亡數表7大鼠血清和肝臟中的藥物和代謝物濃度
表7中的數據以平均值(N=5)給出，沒有對對照值進行過規一化處理。
血清母體=母體化合物濃度，以μg/mL清表示血清Bis=雙酚濃度，以μg/mL血清表示血清Quin=二苯酚合苯醌濃度，以μg/g血清表示肝臟母體=母體化合物濃度，以μg/g肝臟表示肝臟Bis=雙酚濃度，以μg/g肝臟表示肝臟Quin=二苯酚合苯醌濃度，以μg/g肝臟表示實施例27式(1)化合物對膽甾醇飼餵的雌性紐西蘭白兔的抗動脈粥樣硬化作用A．實驗方案進行四個獨立實驗。每個實驗有一個對照組和1-5組MDL化合物治療組(每組N=5)。用含有或不含有0.4％MDL化合物的富含1％膽甾醇的兔飼料(Purina#5322)飼餵雌性紐西蘭白兔(Hazelton,～2.0-2.3kg)。將MDL化合物在100％乙醇中增溶，在飼料上噴灑，並在化學通風櫥中乾燥過夜。或者，可以用Purina將MDL化合物加入到兔食中。在對照飼料上噴灑乙醇。每天飼餵白兔100克飼料，飼餵70天，使動物可以隨意地飲水。周期性從白兔(禁食過夜)耳緣靜脈放血(～2mL)，以監測血清膽甾醇水平。在第70天用過量二氧化碳無痛致死白兔。記錄總體重和肝重的克數。記錄食物消耗量，以克·天-1表示。將新鮮血清的等分試樣用在血清臨床化學、脂蛋白膽甾醇檢測、硫巴比土酸反應物(TBARS)和化合物與代謝物濃度測定中。將肝臟在-20℃下冷凍(～5克等分試樣)，用於晚些時候的化合物與代謝物濃度測定。
每隻兔子處死後立即解剖主動脈。體外脂肪組織清創術後切除從上行弓至髂骨分叉之間的主動脈。將主動脈貯存在4℃的磷酸鹽緩衝鹽水，pH7.4中過夜，直至最終清創術完成。縱向切開主動脈，用蘇丹Ⅳ染色。染色後，用別針壓平主動脈，截取電子圖象後定量計算嗜蘇丹損害面積。
B．臨床化學使血液在室溫下凝結30分鐘。在5℃下，在帶GH 3.7轉子的Beckman GPKR離心機中以3000rpm離心10分鐘後得到血清。使用Roche診斷試劑，用COBA MIRA自動分析儀(Roche Diagnostics)分析總膽甾醇(CHOL，試劑盒#44334)和甘油三酯(TG，試劑盒#44120)。計算膽甾醇和甘油三酯的mg/dL值。
C．TBARS測定用CuSO4引發血清脂質的氧化作用，結果導致醛的生成，例如丙二醛(MDA)。用硫巴比土酸培養後，在530-540nm下檢測醛的吸光度。如下測量TBARS將50μL血清與50μL的0.9％鹽水和400μL的5mmol CuSO4溶液混合，在37℃下培養5小時。加入1.0mL的20％三氯乙酸以終止反應。加入1.0mL的0.67％硫代巴比土酸的0.05N氫氧化鈉溶液，混合，並在90℃下將樣本恆溫30分鐘。簡單地對樣本進行離心，使不溶物形成顆粒，再將上清液轉移至96孔微量滴定板中。用Biotek EL311型微量板讀數器在540nm下測量吸光度。從0至10納摩爾的MDA(由丙二醛雙(二甲基乙縮醛)製得)標準曲線計算所產生的MDA納摩爾數。比較來自受治療兔子的血清樣本與來自沒有接受MDL化合物的對照兔子的血清樣本。
D．化合物與代謝物在血清和肝臟中濃度的HPLC定量測定使用Waters 990 Powerline系統通過反相HPLC測定母體化合物及其代謝物、即雙酚和二苯酚合苯醌的血清濃度和肝濃度。使用Polytron組織勻化器在5檔設置下，用5.0mL PBS,pH7.4將肝臟(1克)勻化20-30秒。如下萃取血清或肝臟勻漿化物在使試管渦旋的同時，向2.0mL二乙醚∶乙醇(3∶1)中加入100μL的血清或勻漿化物。蓋住樣本試管，在5℃下在帶GH 3.7轉子的Beckman GPKR離心機中以3500rpm離心10分鐘。將上清液轉移至乾淨的試管中，在N2下乾燥。用200μL的乙腈∶己烷∶0.1M乙酸銨(90∶6.5∶3.5體積比)重新構成樣本。然後向Waters Deltapak C18-300柱上注入100μL，用83％乙腈∶17％水移動相洗脫，流速為1.5mL/min。記錄在波長為240、254和420nm下的吸光度。從經過回收率校正的已知量的真實母體化合物計算化合物濃度。計算血清濃度的μg/mL值，計算肝臟濃度的μg/g值。
E．脂蛋白亞級分膽甾醇水平的HPLC分離和定量測定在連接Waters Powerline HPLC系統的Sepharose 6HR柱(1×30cm,Pharmacia)上分離VLDL、LDL和HDL的脂蛋白級分。將50μL血清注入到柱上，用pH7.4的磷酸鹽緩衝鹽水洗脫，流速為0.5mL/min。以0.2mL/min向後置柱洗脫液中加入膽甾醇試劑(RocheDiagnostics，試劑盒#44334，用20mL水稀釋，然後用20mL的0.9％鹽水稀釋)，在37℃下在編織PFTE Kratos反應盤管(AppliedBiosystems)中恆溫5分鐘。在500nm下測量吸光度。如下定量脂蛋白的亞級分(總血清膽甾醇)×(每種亞級分曲線下％面積)
另外，式(1)化合物可以用作化學抗氧化劑添加劑，加入到在正常情況下會氧化變質的有機材料中，例如橡膠、塑料、油脂、石油產品等等。一般來說，將防腐量的式(1)化合物與易遭受氧化反應的材料混合，該防腐量的式(1)化合物濃度足以抑制被保護材料的氧化變質。式(1)化合物的防腐量一般從約0.01重量％至約1.0重量％不等。
權利要求
1．一種下式化合物
其中X選自
Y為硫基、氧基或一個亞甲基；Z為氫或-C(O)-(CH2)m-Q，其中Q為氫或-COOH,m為一個1、2、3或4的整數；R1為C1-C6烷基；且R2、R3和R4每個獨立為氫或C1-C6烷基；或其一種立體異構體。
2．權利要求1的化合物，其中R1為甲基或叔丁基；R2和R3每個獨立為氫、甲基或叔丁基；R4為氫或甲基；且Z為氫、乙醯基或琥珀醯基。
3．權利要求1的化合物，其中X選自
或
4．權利要求3的化合物，其中Z為氫、乙醯基或琥珀醯基；R1為甲基或叔丁基；R2和R3每個獨立為氫、甲基或叔丁基；R4為氫或甲基。
5．權利要求4的化合物，其中Z為氫。
6．權利要求1的化合物，其中Z為-C(O)-(CH2)m-Q，其中Q為氫或-COOH,m是一個1、2、3或4的整數。
7．權利要求6的化合物，其中R1為甲基或叔丁基；R2和R3每個獨立為氫、甲基或叔丁基；且R4為氫或甲基。
8．根據權利要求2的化合物，其中Z為硫基。
9．根據權利要求2的化合物，其中Z為氧基。
10．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-。
11．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-。
12．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-，(S)-。
13．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)硫基]-。
14．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)氧基]-。
15．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基辛基)硫基]-。
16．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(7-羥基-3,7-二甲基辛基)硫基]-。
17．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2,6-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(R)-。
18．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2-(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-。
19．權利要求1的化合物，其中該化合物是苯酚，2,5-雙(1,1-二甲基乙基)-4-[(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基]-，(S)-。
20．一種在患者需要時抑制動脈粥樣硬化進展的方法，該方法包括將有效抗動脈粥樣硬化量的權利要求1的化合物對該患者給藥。
21．一種治療患者動脈粥樣硬化的方法，該方法包括將有效抗動脈粥樣硬化量的權利要求1的化合物對該患者給藥。
22．一種在患者需要時抑制LDL膽甾醇過氧化的方法，該方法包括將有效抗氧化量的權利要求1的化合物對該患者給藥。
23．一種在患者需要時降低血漿膽甾醇水平的方法，該方法包括將血漿膽甾醇降低量的權利要求1的化合物對該患者給藥。
24．一種在患者需要時抑制細胞因子誘導的血管細胞粘著分子-1和/或細胞間粘著分子-1的表達的方法，該方法包括將有效的血管細胞粘著分子-1和/或細胞間粘著分子-1抑制量的權利要求1的化合物對該患者給藥。
25．一種治療患有慢性炎性疾病的患者的方法，該方法包括將治療有效量的權利要求1的化合物對該患者給藥。
26．根據權利要求25的方法，其中該炎性疾病是哮喘。
27．根據權利要求25的方法，其中該炎性疾病是慢性炎症。
28．根據權利要求25的方法，其中該炎性疾病是類風溼性關節炎。
29．根據權利要求25的方法，其中該炎性疾病是自身免疫性糖尿病。
30．根據權利要求25的方法，其中該炎性疾病是移植排斥。
31．根據權利要求25的方法，其中該炎性疾病是腫瘤血管生成。
全文摘要
本發明提供了式(1)化合物，其中X選自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)；Y為硫基、氧基或一個亞甲基；Z為氫或－C(O)－(CH
文檔編號C07C69/017GK1237955SQ97199910
公開日1999年12月8日 申請日期1997年10月7日 優先權日1996年11月20日
發明者R·A·帕克, P·S·賴特, S·J·布希, K·S·陳, M·T·亞特斯 申請人:赫徹斯特馬裡恩魯斯公司