新型嘧啶類抗腫瘤化合物及其製備方法與用途與流程
2023-12-09 03:54:16 2
本發明涉及新型嘧啶類抗腫瘤化合物及其製備方法與用途，屬於醫藥技術領域。
背景技術：
蛋白酪氨酸激酶(proteintyrosinekinase,ptks)通過控制細胞的信號傳導通路調節細胞的生長、分化、凋亡等一系列生理生化過程。受體型酪氨酸激酶是一類橫跨細胞膜相對較大的激酶，其具有配體結合的胞外結構域、跨膜結構域和起激酶作用—在磷酸化特定酪氨酸殘基並且由此影響細胞增殖的胞內結構域。在一般人類癌症中(如肺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、淋巴瘤)已發現所述激酶的異常表達。蛋白酪氨酸激酶已成為抗腫瘤藥物研究開發的重要靶點之一。
黏著斑激酶(focaladhesionkinase,fak)是一種位於黏著斑，由1028個胺基酸組成的細胞質酪氨酸激酶和骨架蛋白，參與多種受體或非受體酪氨酸激酶信號通路，包括腫瘤蛋白src、血管內皮生長因子-3(vegfr-3)、p53、磷脂醯肌醇-3激酶(pi3k)和胰島素樣表皮生長因子-1(igf-1)等通路，對細胞的存活、增殖、遷移和侵襲等生物行為都有調節作用。已有研究表明，在許多腫瘤細胞中都有fak的過表達。因此，fak已成為研究與開發新型抗腫瘤藥物的重要靶標。研究表明，絕大多數胰腺癌病人的腫瘤組織中都存在fak的過表達，而fak抑制劑可通過多種途徑降低胰腺癌細胞的生存力，抑制其生長，促進其凋亡，但fak抑制劑對正常細胞僅有極少影響。目前，進入臨床前或臨床研究的fak抑制劑幾乎均為小分子抑制劑，由於fak與許多細胞信號蛋白都有作用，因此依據作用機制的不同，作為fak靶向抗腫瘤藥物的fak小分子抑制劑大致分為兩大類：atp依賴型和atp非依賴型。atp依賴型fak小分子抑制劑能干擾fak催化區域的活性，可能會影響多個下遊信號通路，造成較為廣泛的副作用，而非atp依賴型fak小分子抑制劑如變構fak抑制劑則可阻滯特定的蛋白質-蛋白質相互作用(如p53與fak的相互作用)，從而抑制fak的活性。目前已有多個頗具治療前景的fak小分子抑制劑陸續開發進入臨床前和臨床研究，但尚無此類藥物上市。其中具有代表性的fak小分子抑制劑有：pf-00562271是pf-562271的苯磺酸鹽，是一種有效的，atp競爭性，可逆的fak抑制劑，ic50為1.5nm，作用於pyk2比作用於fak效果低10倍左右，比作用於其他蛋白激酶(除了一些cdks)選擇性高100倍以上。目前正進行phase1研究(serrelsa.,etal.int.j.cancer,2012,131(2):287-97.)。又如，tae226(nvp-tae226)是一種有效的fak抑制劑，ic50為5.5nm，最有效作用於pyk2，對insr，igf-1r，alk和c-met作用效果比其弱10到100倍左右。tae226在體內外實驗中對一系列惡性腫瘤都表現出有效的抗增殖和抑瘤作用，目前尚無有關其臨床試驗的報導(schultzea.,etal.investnewdrugs,2010,28(6):825-33.)。此外，defactinib(vs-6063,pf-04554878)是一種選擇性，且口服有效的fak抑制劑。目前正進行phase2研究。(kangy.,etal.j.natl.cancerinst.,2013,105(19):1485-95.)
另外與本發明密切相關的專利如：us2013/0281438a1、cn102264371a、cn101830889a、cn103052627a、cn103059030a、cn103476776a、cn103534240a、cn103534241a。
鑑於治療癌症的迫切需要，本領域有必要開發新的效果更加良好的藥物。
技術實現要素：
本發明的目的之一在於提供一種嗎啡啉乙醯胺基嘧啶類化合物或其藥學上可接受的鹽，該類化合物具有良好的抗腫瘤活性。
本發明的另一目的在於提供含所述嗎啡啉乙醯胺基嘧啶類化合物或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物。
本發明的再一目的在於提供所述嗎啡啉乙醯胺基嘧啶類化合物或其藥學上可接受的鹽，或所述組合物的用途。
一方面，本發明提供一種通式(i)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽，所述通式(i)所示的化合物具有如下結構：
r選自甲基、乙基、環丙基、異丙基或2,2,2-三氟乙基；
r1選自氫、氯、甲基或甲氧基；
r2選自氟、氯。
作為本發明的一種具體實施方式，本發明所述通式(i)所示的化合物具有i-1～i-36所示的結構：
優選地，所述通式(i)所示的化合物為i-1。
如上所示結構化合物為嗎啡啉乙醯胺基嘧啶類化合物，抗腫瘤活性篩選顯示本發明中的化合物大部分都具有較強的抑制胰腺癌細胞(aspc-1細胞、bxpc-3細胞和panc-1細胞)增殖能力，抑制肺癌細胞(h1975細胞)增殖能力，抑制乳腺癌耐藥細胞(mcf-7/adr)增殖能力；部分化合物顯示出比參照藥物tae226(cas：761437-28-9)預料不到的更加優良的抗fak激酶活性。作為一類結構新穎的分子，本發明中的化合物具有開發成新型高效fak抑制劑的潛力，對治療相關的腫瘤疾病尤其是胰腺癌、肺癌和乳腺癌有較大的應用價值。
前述i-1～i-36所示的結構分別具有如下名稱：
(i-1)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-2)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-3)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-環丙醯胺
(i-4)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-環丙醯胺
(i-5)n-[3-[[5-氯-2-[4-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-6)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-7)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-8)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-9)n-[3-[[5-氯-2-[4-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-10)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-11)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-12)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-13)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-14)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-三氟乙醯胺
(i-15)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-三氟乙醯胺
(i-16)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-三氟乙醯胺
(i-17)n-[3-[[5-氯-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-環丙醯胺
(i-18)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-19)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-20)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-環丙醯胺
(i-21)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-環丙醯胺
(i-22)n-[3-[[5-氟-2-[4-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-23)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-24)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-25)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-乙醯胺
(i-26)n-[3-[[5-氟-2-[4-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-27)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-28)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-29)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-異丙醯胺
(i-30)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-環丙醯胺
(i-31)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-三氟乙醯胺
(i-32)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)甲氧基]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-三氟乙醯胺
(i-33)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-三氟乙醯胺
(i-34)n-[3-[[5-氟-2-[4-[3-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)氯]苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-35)n-[3-[[5-氟-2-[4-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
(i-36)n-[3-[[5-氯-2-[4-((1-嗎啡啉)乙醯胺基)苯胺]-4-嘧啶]氨基]苯基]-2-甲醯胺
另一方面，本發明提供一種藥物組合物，其含有有效劑量的本發明所述通式(i)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽，及藥用載體。
本發明所述化合物由於它們在藥物中的可能用途，式(i)化合物的鹽優選藥物可接受的鹽。本發明的化合物為鹼，其中所需鹽形式可以通過本領域已知的合適方法製備，包括用無機酸處理游離鹼，所述無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或用有機酸處理游離鹼、所述有機酸例如乙酸、三氟乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羥基乙酸、水楊酸、吡喃糖苷酸(pyranosidy1acid)，例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸，α-羥基酸，例如檸檬酸或酒石酸，胺基酸，例如天冬氨酸或穀氨酸，芳香酸，例如苯甲酸或肉桂酸，磺酸，例如p-甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸等。藥學上可接受的鹽的實施例包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙酸鹽(propiolates)、草酸鹽、丙二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽(phenylbutrates)、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、羥基乙酸鹽、酒石酸鹽、苦杏仁酸鹽和磺酸鹽、例如二甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽和萘-2-磺酸鹽。
本發明的藥物組合物通常含有一種本發明化合物。然而，在一些實施方案中，本發明的藥物組合物含有超過一種本發明的化合物。另外，本發明的藥物組合物還可任選包括一種或多種其它藥學活性化合物。
本發明還提供所述新型嘧啶類化合物或其藥學上可接受的載體，所述藥物組合物通過抑制黏著斑激酶，進而抑制腫瘤增殖的用途。具體地，該用途主要為製備用於治療胰腺癌、肺癌和乳腺癌的藥物中的用途。
本發明提供所示的化合物或其藥學上可接受的鹽，或本發明所述的藥物組合物在製備黏著斑激酶抑制劑中的應用。
本發明提供所述通式(i)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽，或本發明所述的藥物組合物在製備治療腫瘤的藥物中的用途。優選地，所述腫瘤選自胰腺癌、肺癌和乳腺癌的一種或多種，進一步優選胰腺癌。更優選地，所述用途主要通過抑制黏著斑激酶實現的。
附圖說明
圖1為本發明實施例不同處理組對aspc-1的抑制作用隨時間變化情況。
圖2.1為本發明實施例不同處理組aspc-1細胞凋亡情況。
圖2.2為本發明實施例不同處理組aspc-1細胞周期分布。
圖3為本發明實施例不同處理組對裸鼠腫瘤體積變化的影響。腫瘤體積表示為平均值±標準差(n＝5)。
圖4為本發明實施例不同處理組對裸鼠腫瘤重量的影響。與空白組相比*p<0.05,**p20.00μm)，對h1975和mcf-7/adr的ic50分別為0.333μm和0.892μm，均優於參比化合物tae226。(3)流式分析結果顯示i-1能使aspc-1細胞的凋亡率明顯增加(90.4％)並將細胞周期阻滯在g0/g1期，呈劑量依賴性。(4)裸鼠皮下移植瘤實驗驗證i-1的體內抗腫瘤活性，結果表明i-1能抑制aspc-1細胞在體內的生長，給予30、60mg/kg/day劑量的腫瘤抑制率(tgi)分別為，44.38％和28.58％。證明i-1能抑制腫瘤細胞生長，且呈現劑量依賴性。預示此類分子有極大可能開發成新型高效fak抑制劑的潛力，對治療相關的腫瘤疾病尤其是胰腺癌有較大的應用價值。
以上所述僅是本發明的優先實施方式，應當指出，對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明技術原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。