一種具有增強學習記憶力功能的組合物及其製備方法與流程

2023-10-10 15:59:24

本發明涉及組合物，具體是增強學習記憶力功能的組合物，屬於保健品領域。
背景技術：
：現代社會工作、學習節奏不斷加快，社會壓力增大，導致許多人出現了不同程度的學習記憶力衰退情況，嚴重影響了正常生活。如今，學習記憶力減退已成為臨床熱點問題之一，開發改善或治療這類疾病的保健品及藥物已刻不容緩。目前，臨床上針對該症狀，主要採用鎮靜催眠及調節神經系統藥物進行輔助幹預，效果不佳；另外目前多採用化學藥物，毒副作用較大，不適於長期使用。中醫中藥在我國有著悠久的歷史，有「藥食同源」的理論作基礎，來源於天然產物，毒副作用較小，可以長期服用，因此特別適合於學習記憶力減退等亞健康狀態的調理和治療。因此，從天然中藥及食材中尋找具有改善學習記憶力的活性成分，並據此開發藥物和保健食品已成為研究熱點，具有十分重要的現實意義。技術實現要素：基於此，本發明的目的在於克服現有技術的缺陷，提供一種用於增強學習記憶力的組合物，該組合物具有很好的增強學習記憶力的作用。為實現上述目的，本發明採取以下技術方案：一種用於增強學習記憶力的組合物，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料製備而成：蠶蛹10-30份，石菖蒲2-10份，遠志2-10份，人參1-5份，五味子1-5份，益智仁1-5份，肉蓯蓉1-5份，菟絲子1-5份。另外的，一種用於增強學習記憶力的組合物的有效成分由以下重量份的原料製備而成：蠶蛹10-15份，石菖蒲2-3份，遠志2-3份，人參1-1.2份，五味子1-1.2份，益智仁1-1.2份，肉蓯蓉1-1.2份，菟絲子1-1.2份。另外的，一種用於增強學習記憶力的組合物的有效成分由以下重量份的原料製備而成：蠶蛹10份，石菖蒲2份，遠志2份，人參1份，五味子1份，益智仁1份，肉蓯蓉1份，菟絲子1份。本發明還公開一種上述的用於增強學習記憶力的組合物的製備方法，包括以下步驟：製備浸膏一：按重量份稱取蠶蛹，粉碎，得粗粉，按蠶蛹原料重量的10-15倍加水浸泡，隨後以鹽酸調節溶液ph值為1.5-2.5，再按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胃蛋白酶和按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胰蛋白酶，37℃酶解3-6小時，然後加熱使酶失活，過濾，得酶解液，將酶解液濃縮，即得浸膏一；製備浸膏二：按重量份稱取石菖蒲、遠志和人參，按石菖蒲、遠志和人參總重量的6-10倍加入體積百分含量為60%-80%乙醇溶液，回流提取2-4次，每次回流提取時間為2-4小時，合併濾液，將濾液濃縮，即得浸膏二；製備浸膏三：按重量份稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子總重量的10-15倍加入水，在80-100℃下浸提2-4次，每次浸提時間為2-4小時，合併濾液，將濾液濃縮，即得浸膏三；混合：將上述得到的浸膏一、浸膏二和浸膏三混合均勻，即得具有增強學習記憶力功能的組合物。該組合物再經真空乾燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏，命名為組合物1。本發明的一種用於增強學習記憶力的組合物及其製備方法，採用複合生物酶解超濾技術提取蠶蛹有效成分，工藝方法獨特、條件溫和，可在有效提取蠶蛹活性成分的同時保留其生物活性，使得蠶蛹有效成分得到最大限度的利用。且該製備方法中，工藝科學合理，質量穩定、可控、便於操作，可實現工業化連續生產，生產成本低。製備的組合物具有良好的增強學習記憶力作用，同時還是抗衰老抗氧化和增強免疫力的代表中藥，尤其適用於老年學習記憶力減退患者。並且，這些原料均為食材或藥食兩用的藥材，符合中醫「藥食同源」理論，天然、毒副作用低，適合長期服用。具體實施方式下面詳細描述本發明的具體實施方式，本發明不受下述實施案例限制，可根據本發明的技術方案與實際情況確定具體的實施方式。在描述中，在此所使用的某些術語僅用於參照，並不意味著進行限制。本發明採取以下技術方案：一種用於增強學習記憶力的組合物，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料製備而成：蠶蛹10-30份，石菖蒲2-10份，遠志2-10份，人參1-5份，五味子1-5份，益智仁1-5份，肉蓯蓉1-5份，菟絲子1-5份。方中：蠶蛹為蠶蛾科昆蟲家蠶bymbyxmori(linnaeus)的乾燥蛹。味甘、辛、鹹，性微溫。歸脾、胃、肝、腎經。蠶蛹《本草綱目》、《日華子本草》、《東醫寶鑑》、《醫林纂要》、《聖惠方》、《聖濟總錄》等古代醫藥經典著作中均有詳細記載，蠶蛹具有生津止渴、消食理氣、鎮驚、壯陽、和脾胃、祛風溼、長肌退熱等功效,用於治療虛損、小兒疳瘦、心血管疾病、慢性肝炎、腎陽不足等疾病，此外，還有滋補強壯作用。現代研究表明，蠶蛹中富含蛋白質、脂肪、維生素a、b2、d和麥角甾醇等物質。具有增強學習記憶力、降血糖、降血脂、抑制血小板凝集等功效。在增強學習記憶力方面，蠶蛹能明顯地提高正常小鼠跳臺被動迴避反應再現能力和提高避暗反應再現能力，具有明顯改善記憶作用。還能顯著提高d-半乳糖所致衰老小鼠腦組織sod、gsh-px活性，降低脂質過氧化產物mda的含量，具有改善d-半乳糖致衰老小鼠的學習記憶能力的作用。石菖蒲為天南星科植物石菖蒲acorustatarinowiischott的乾燥根莖。味辛、苦，性溫。歸心、胃經。具有化溼開胃，開竅豁痰，醒神益智的功效。用於脘痞不飢，噤口下痢，神昏癲癇，健忘耳聾等症。現代研究表明，石菖蒲中含有揮髮油、糖類、有機酸、胺基酸等成分。具有調節中樞神經系統、植物神經系統、內分泌系統、心血管系統和消化系統的作用，其最主要的藥理作用表現為中樞鎮靜抗驚作用。此外，藥理實驗證明，與石菖蒲配伍的複方製劑能對抗樟柳鹼引起的小鼠記憶障礙，提高正常小鼠的學習記憶能力，增加大鼠腦內去甲腎上腺素（na）和多巴胺（da）的含量，減少5-羥色胺（5-ht）、5-羥吲哚乙酸（5-hiaa）含量及增加腦內蛋白質和核酸的含量。遠志為遠志科植物遠志polygalatenuifoliawilld.的乾燥根。味苦、辛，性微溫。歸心、腎、肺經。具有安神益智，祛痰，消腫的功效。用於心腎不交引起的失眠多夢，健忘驚悸，神志恍惚，咳痰不爽，瘡瘍腫毒，乳房腫痛等症。現代研究表明，遠志中含有多種皂苷、口山酮、糖酯、生物鹼類物質。具有增強學習記憶力、鎮靜、中樞降壓、抗氧化、抗衰老等作用。人參五加科植物人參panaxginsengc.a.mey.的乾燥根。味甘、微苦，性平。歸脾、肺、心經。具有大補元氣，復脈固脫，補脾益肺，生津，安神等功效。用於體虛欲脫，肢冷脈微，脾虛食少，肺虛喘咳，津傷口渴，內熱消渴，久病虛羸，驚悸失眠，陽痿宮冷；心力衰竭，心原性休克等症。現代研究表明，人參中含皂甙、揮髮油、多糖、有機酸、黃酮類物質和多種維生素。具有興奮神經系統、調節血壓和血糖、抗氧化、抗衰老、提高視力等作用。五味子為木蘭科植物五味子schisandrachinensis（turcz.）baill.或華中五味子schisandrasphenantherarehd.etwils.的乾燥成熟果實。味酸、甘，性溫。歸肺，心、腎經。具有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心之功效。用於久嗽虛喘，夢遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗，盜汗，津傷口渴，短氣脈虛，內熱消渴，心悸失眠等症。現代研究表明，五味子中主要含有多種木脂素類物質、多糖和揮髮油。具有調節中樞神經系統、提高學習記憶力、促進肝糖原生成、提高免疫力等作用。益智仁為姜科植物益智alpiniaoxyphyllamiq.的果實。味辛，性溫。歸脾、腎經。具有溫脾止瀉攝涎，暖腎縮尿固精的功效。用於脾胃虛寒，嘔吐，洩瀉，腹中冷痛，口多唾涎，腎虛遺尿，尿頻，遺精，白濁等症。含有揮髮油、並含豐富的b族維生素及維生素c，以及微量元素錳、鋅、鉀、鈉、鈣、鎂、磷、鐵、銅等。具有調節心血管系統、抗胃損傷、抑制前列腺素、升高外周血液白細胞的作用。肉蓯蓉為列當科植物肉蓯蓉cistanchedeserticolay.c.ma的乾燥帶鱗葉的肉質莖。味甘、鹹，性溫。歸腎、大腸經。功效為補腎陽，益精血，潤腸通便。現代研究表明，肉蓯蓉的主要成分是苯乙醇苷、環烯醚萜、木脂素和多糖類，肉蓯蓉總苷、苯乙醇苷類和多糖類具有改善微循環，增加心、腦及外周末梢血管循環的作用，能夠明顯的保護心腦血管和神經系統。此外，肉蓯蓉還有抗疲勞、抗衰老、提高免疫力、調節循環系統等作用，有利於患者身體達到健康平衡狀態。菟絲子為旋花科植物菟絲子cuscutachinensislam.的乾燥成熟種子。味辛、甘，性平。歸肝、腎、脾經。具有補益肝腎，固精縮尿，安胎，明目，止瀉之功效。常用於肝腎不足，腰膝酸軟，陽痿遺精，遺尿尿頻，腎虛胎漏，胎動不安，目昏耳鳴，脾腎虛瀉；外治白癜風等症。菟絲子含生物鹼、蒽醌、香豆素、黃酮、甙類、甾醇、鞣酸、糖類等成分。具有壯陽、調節內分泌、調節血壓、鎮靜、鎮痛等作用。《醫方集解·補養之劑》指出「人之精與志，皆藏於腎，腎精不足則志氣衰，不能上通於心，故迷惑善忘也。」故記憶力減退多由精血虧虛所引起，由於年老肝腎虧虛，精虧髓減，腦髓失所養或思慮過度勞傷心脾、情志不遂木鬱克土、飲食不節傷及脾胃而致脾胃運化失司，氣血生化乏源，不能上榮於腦，腦髓失所養，皆可致記憶力減退。治宜益精氣，填精髓，補氣血，寧心養神。本方以蠶蛹為君，性平味甘，益精氣，健脾，生津止渴，營養先天之本；石菖蒲、遠志芳香開竅，寧心安神，人參補益氣血，強壯後天之本，三藥共為臣藥；五味子補腎寧心，肉蓯蓉、益智仁、菟絲子補益肝腎，加強君藥益精填髓之力，共為佐使藥，全方共奏補精填髓之效。上述幾種藥材或食材通過合理的藥物配伍，達到了改善睡眠的作用。在其中一個實施例中，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料製備而成：蠶蛹10-15份，石菖蒲2-3份，遠志2-3份，人參1-1.2份，五味子1-1.2份，益智仁1-1.2份，肉蓯蓉1-1.2份，菟絲子1-1.2份。在其中一個實施例中，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料製備而成：蠶蛹10份，石菖蒲2份，遠志2份，人參1份，五味子1份，益智仁1份，肉蓯蓉1份，菟絲子1份。本發明還公開一種上述的用於增強學習記憶力的組合物的製備方法，包括以下步驟：製備浸膏一：按重量份稱取蠶蛹，粉碎，得粗粉，按蠶蛹原料重量的10-15倍加水浸泡，隨後以鹽酸調節溶液ph值為1.5-2.5，再按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胃蛋白酶和按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胰蛋白酶，37℃酶解3-6小時，然後加熱使酶失活，過濾，得酶解液，將酶解液濃縮，即得浸膏一；製備浸膏二：按重量份稱取石菖蒲、遠志和人參，按石菖蒲、遠志和人參總重量的6-10倍加入體積百分含量為60%-80%乙醇溶液，回流提取2-4次，每次回流提取時間為2-4小時，合併濾液，將濾液濃縮，即得浸膏二；製備浸膏三：按重量份稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子總重量的10-15倍加入水，在80-100℃下浸提2-4次，每次浸提時間為2-4小時，合併濾液，將濾液濃縮，即得浸膏三；混合：將上述得到的浸膏一、浸膏二和浸膏三混合均勻，即得具有增強學習記憶力功能的組合物。該組合物再經真空乾燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏，命名為組合物1。本發明的製備方法，採用現代製藥技術提取原料中的有效成份，在保證療效的前提下，提高了便利性和口感。並且在製備蠶蛹浸膏一時，以胃蛋白酶和胰蛋白酶進行酶解，使蠶蛹蛋白質中的部分肽鍵水解，獲得吸收速度更快、生物活性更強的小分子多肽，使其更利於人體吸收，增加蠶蛹的生物利用度。在其中一個實施例中，製備浸膏一步驟中，所述胃蛋白酶和胰蛋白酶的重量比為2:1-1:2。在其中一個實施例中，製備浸膏一步驟中，將酶解液以截留分子量為50000的超濾柱進行過濾，得濾液，濾液減壓濃縮，即得浸膏一。去除大分子雜質，保留蠶蛹酶解所得的多肽、腺苷、多糖、多種維生素等主要活性成份，對蠶蛹的有效成份進行純化。在其中一個實施例中，製備浸膏一步驟中，加熱至100℃保持20-30分鐘使酶失活。在其中一個實施例中，製備浸膏一步驟中，濾液減壓濃縮至55-65℃時密度為1.15-1.25g/ml的稠浸膏，再經真空乾燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏一；製備浸膏二步驟中，濾液減壓濃縮至55-65℃時密度為1.15-1.25g/ml的稠浸膏，再經真空乾燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏二；製備浸膏三步驟中，濾液減壓濃縮至55-65℃時密度為1.15-1.25g/ml的稠浸膏，再經真空乾燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏三。本發明還公開了一種上述的組合物在製備用於增強學習記憶力的藥物或保健食品中的應用。在其中一個實施例中，所述藥物或保健食品的劑型為片劑、顆粒劑、硬膠囊、軟膠囊、口服液、丸劑或滴丸。與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：本發明的一種用於增強學習記憶力的組合物，原料由蠶蛹、石菖蒲、遠志、人參、五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子組成。這幾種藥材和食材相互配合，協同作用，具有良好的增強學習記憶力作用，同時還是抗衰老抗氧化和增強免疫力的代表中藥，尤其適用於老年學習記憶力減退患者。並且，這些原料均為食材或藥食兩用的藥材，符合中醫「藥食同源」理論，天然、毒副作用低，適合長期服用。對比例1石菖蒲、遠志、人參組合物，通過以下原料製備而成：石菖蒲120克，遠志120克，人參60克。具體製備方法如下：以上三味，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的稠浸膏；再在0.06mpa的壓力下以65℃乾燥成幹浸膏；幹浸膏經粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠志、人參組合物。命名為組合物2。對比例2遠志、人參、肉蓯蓉、菟絲子組合物，通過以下原料製備而成：遠志120克，人參60克，肉蓯蓉60克、菟絲子60克。具體製備方法如下：按配方比稱取遠志和人參，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的遠志、人參浸膏；按配方比稱取肉蓯蓉和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的肉蓯蓉、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃乾燥成幹浸膏；幹浸膏經粉碎，過80目篩，得粉末狀的遠志、人參、肉蓯蓉、菟絲子組合物。命名為組合物3。對比例3石菖蒲、遠志、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物，通過以下原料製備而成：石菖蒲120克、遠志120克、五味子60克、益智仁60克、肉蓯蓉60克、菟絲子60克。具體製備方法如下：按配方比稱取石菖蒲和遠志，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的石菖蒲、遠志浸膏；按配方比稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃乾燥成幹浸膏；幹浸膏經粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠志、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物。命名為組合物4。對比例4石菖蒲、遠志、人參、五味子、益智仁、菟絲子組合物，通過以下原料製備而成：石菖蒲120克、遠志120克、人參60克、五味子60克、益智仁60克、菟絲子60克。具體製備方法如下：按配方比稱取石菖蒲、遠志和人參，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的石菖蒲、遠志、人參浸膏；按配方比稱取五味子、益智仁和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的五味子、益智仁、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃乾燥成幹浸膏；幹浸膏經粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠志、人參、五味子、益智仁、菟絲子組合物。命名為組合物5。對比例5石菖蒲、遠志、人參、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物，通過以下原料製備而成：石菖蒲120克、遠志120克、人參60克、五味子60克、益智仁60克、肉蓯蓉60克、菟絲子60克。具體製備方法如下：按配方比稱取石菖蒲、遠志和人參，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的石菖蒲、遠志、人參浸膏；按配方比稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合併濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的五味子、益智仁、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃乾燥成幹浸膏；幹浸膏經粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠志、人參、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物。命名為組合物6。實驗例1對morris水迷宮行為的影響將上述實施例和對比例製備得到的組合物粉末進行morris水迷宮實驗。一、材料1.組合物，通過上述實施例和對比例製備得到的組合物1-6；2.注射用戊巴比妥鈉，上海新亞藥業有限公司；3.成年昆明小鼠，體重18-22g，雌性，購自軍事醫學科學院實驗動物中心。二、方法1.動物分組和處理將昆明小鼠隨機分為8組:每組18隻,分別為空白對照組、記憶障礙模型組、組合物1-6組（2.0g·kg-1·d-1）。對照組和模型組小鼠灌胃給予生理鹽水（20ml·kg-1·d-1），組合物1-6組分別灌服2.0g·kg-1·d-1的組合物1-6，連續灌胃14d，第15d除對照組外，其餘各組均腹腔注射戊巴比妥鈉（20mg·kg-1）1次，建立記憶障礙動物模型。2.morris水迷宮行為測試於造模結束後進行morris水迷宮系統的學習記憶能力測試，歷時5d，每天訓練4次，每次分別從4個不同的象限將小鼠面向池壁放入水中，觀察並記錄小鼠在有效區的停留時間及穿越平臺的次數。如果小鼠在60s內未找到平臺，需將其引至平臺，此時潛伏期記為60s，每次訓練間隔60s。前4d為訓練適應期，第5天記錄小鼠尋找平臺的運動軌跡，包括有效區停留時間、穿越平臺的次數、到達平臺的潛伏期，作為行為學實驗的測試結果。三、結果實驗結果如下表所示。表1各組小鼠morris水迷宮試驗潛伏期結果（n=18）vs對照組：*p＜0.05，**p＜0.01；vs模型組：#p＜0.05，##p＜0.01。結果顯示，與正常對照組相比，模型組小鼠有效區停留時間、穿越平臺次數均縮短，到達平臺的潛伏期延長（p<0.05，p<0.01），表明記憶障礙動物模型建模成功；與模型組相比，組合物1組可顯著延長小鼠有效區停留時間、增加穿越平臺的次數，縮短到達平臺的潛伏期(p<0.05，p<0.01)，說明組合物1有增強小鼠學習記憶能力的作用；與模型組相比，組合物2可延長小鼠有效區停留時間、增加穿越平臺的次數（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物2雖然可以縮短實驗小鼠到達平臺的潛伏期時間，但無統計學意義；與模型組相比，組合物3可增加小鼠穿越平臺的次數、縮短到達平臺的潛伏期（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以延長實驗小鼠有效區停留時間，但無統計學意義；與模型組相比，組合物4可延長小鼠有效區停留時間、增加穿越平臺的次數（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物4雖然可以縮短小鼠到達平臺的潛伏期，但無統計學意義；與模型組相比，組合物5可增加穿越平臺的次數，縮短到達平臺的潛伏期（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物5雖然可以延長實驗小鼠有效區停留時間，但無統計學意義；與模型組相比，組合物6可延長小鼠有效區停留時間、增加穿越平臺的次數（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物6雖然可以縮短小鼠到達平臺的潛伏期，但無統計學意義。實驗例2對氧化應激相關酶活性及含量的影響將上述實施例和對比例製備得到的組合物粉末進行氧化應激相關酶活性及含量測定實驗。一、材料1.組合物，通過上述實施例和對比例製備得到的組合物1-6；2.超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，sod）試劑盒，購自南京建成公司；3.一氧化氮（nitricoxide，no）試劑盒，購自碧雲天生物技術公司；4.過氧化氫酶（catalase，cat）試劑盒，購自南京建成公司；5.實驗動物同實驗例1。二、方法實驗例1中動物行為學實驗結束後，取小鼠腦組織，用生理鹽水製備10%的腦組織勻漿，4℃，4000r·min-1離心15min，取上清液，按照試劑盒要求分別採用黃嘌呤氧化酶法、化學發光法、分光光度法測定腦組織sod，no，cat的活性。三、結果實驗結果如下表所示。表2組合物對學習記憶障礙小鼠腦組織氧化應激的酶的影響（n=18）組別劑量/g·kg-1cat/u·mg(prot)-1sod/u·mg(prot)-1no/μmol·l-1對照組23.52±6.36275.52±65.616.54±3.66模型組10.36±2.28**154.05±26.89**32.65±9.91**組合物12.026.82±6.75##260.36±59.21##10.74±4.22##組合物22.020.91±7.31#204.25±35.32#21.75±1.73組合物32.013.93±3.35201.18±42.46#18.06±5.94#組合物42.019.58±5.22#182.71±32.6316.35±4.27#組合物52.015.62±4.81213.54±55.69#16.88±6.31#組合物62.020.06±6.35#194.36±44.92#23.61±3.62vs對照組：*p＜0.05，**p＜0.01：vs模型組：#p＜0.05，##p＜0.01。結果顯示，模型組小鼠腦內cat、sod活性低於正常對照組（p<0.01），no含量高於對照組（p<0.01），表明造模成功；與模型組相比，組合物1組可顯著提高小鼠腦內cat的活性，顯著提高小鼠腦組織內的sod活性並顯著降低no含量（p<0.01）；與模型組相比，組合物2組可提高小鼠腦內cat的活性，提高小鼠腦組織內的sod活性（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物2雖然可以降低小鼠腦組織內no含量，但無統計學意義；與模型組相比，組合物3組可提高小鼠腦組織內的sod活性，降低小鼠腦組織內no含量（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以提高小鼠腦內cat的活性，但無統計學意義；與模型組相比，組合物4組可提高小鼠腦組織內的cat活性，降低小鼠腦組織內no含量（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以提高小鼠腦內sod的活性，但無統計學意義；與模型組相比，組合物5組可提高小鼠腦組織內的sod活性，降低小鼠腦組織內no含量（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物5雖然可以提高小鼠腦內cat的活性，但無統計學意義；與模型組相比，組合物6組可提高小鼠腦內cat的活性，提高小鼠腦組織內的sod活性（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物6雖然可以降低小鼠腦組織內no含量，但無統計學意義。實驗例3對小鼠腦組織中單胺遞質含量的影響將上述實施例和對比例製備得到的組合物粉末進行小鼠腦組織中單胺遞質含量測定實驗。一、材料1.組合物，通過上述實施例和對比例製備得到的組合物1-6；2.去甲腎上腺素（norepinephrine，ne）、多巴胺鹽酸鹽（dopaminehydrochloride，da）、5-羥色胺鹽酸鹽（5-hydroxytryptaminehydrochloride，5-ht）均購自美國sigma公司；3.甲醇（色譜純）、檸檬酸三鈉購自merck公司；4.水為去離子水；5.實驗動物同實驗例1。二、方法在morns水迷宮實驗結束之後，每組取半數小鼠，用於檢測腦組織中單胺遞質的含量。將小鼠斷頭，冰上取腦組織400mg，加0.1mol/l高氯酸（2ml），冰浴勻漿，4℃，14000r·min-1離心20min，取上清，0.45μm濾膜（millipore，usa）過濾，注入高效液相色譜儀，進樣100μl。流動相：檸檬酸三鈉（20mmol/l），鹽酸調ph4.50，0.45μm濾膜過濾，加5％（v/v）甲醇，超聲脫氣，流速：1.0ml/min，柱溫：5℃，螢光檢測器波長：激發波280nm，發射波315nm；峰面積定量。三、結果實驗結果如下表所示。表3組合物對學習記憶障礙小鼠腦組織中ne，da，5-ht含量的影響（n=18）組別劑量/g·kg-1ne/ng·g-1da/ng·g-15-ht/ng·g-1對照組5.54±1.321.25±0.411.72±0.36模型組7.82±1.21*1.52±0.35*0.65±0.39*組合物12.04.34±0.92##1.16±0.22#1.82±0.48##組合物22.05.22±1.57#1.39±0.261.38±0.45#組合物32.06.26±0.961.35±0.241.29±0.32#組合物42.05.45±1.26#1.31±0.321.15±0.41#組合物52.06.07±1.131.22±0.29#1.24±0.27#組合物62.05.66±1.35#1.26±0.38#0.92±0.32vs對照組：*p＜0.05，**p＜0.01；vs模型組：#p＜0.05，##p＜0.01。結果顯示，與對照組比較，模型組小鼠腦組織中ne，da含量增加，5-ht含量降低，含量變化均具有統計學意義（p<0.05），表明建模成功；與模型組比較，組合物1組小鼠腦組織中ne，da含量明顯降低，5-ht含量明顯升高，具有統計學意義（p<0.05,p<0.01）；與模型組比較，組合物2組小鼠腦組織中ne含量降低，5-ht含量升高，具有統計學意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物2雖然可以降低小鼠腦組織中da含量，但無統計學意義；與模型組比較，組合物3組小鼠腦組織中5-ht含量升高，具有統計學意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以降低小鼠腦組織中ne和da含量，但無統計學意義；與模型組比較，組合物4組小鼠腦組織中ne含量降低，5-ht含量升高，具有統計學意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物4雖然可以降低小鼠腦組織中da含量，但無統計學意義；與模型組比較，組合物5組小鼠腦組織中da含量降低，5-ht含量升高，具有統計學意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物5雖然可以降低小鼠腦組織中ne含量，但無統計學意義；與模型組比較，組合物6組小鼠腦組織中ne，da含量降低，具有統計學意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物6雖然可以升高小鼠腦組織中5-ht含量，但無統計學意義。當前第1頁12