一種植物抗敏劑及其製備方法
2023-05-31 16:50:26
專利名稱：一種植物抗敏劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種植物抗敏劑及其製備方法。
背景技術：
過敏反應是指人體對抗原物質接觸後的不正常反應。皮膚過敏的一般表現是 乾燥、瘙癢、紅腫和色素沉著等。它與正常的免疫反應不同，不但不起保護作用， 相反由於反應過度強烈而導致生理功能紊亂和組織損傷。仙人掌含有多種植物營養 素，18種胺基酸，以及各類維生素和礦物質，能給皮膚帶來珍貴的養分和能量，能 夠抵抗外界對皮膚造成的刺激，還可以有效消除因外界刺激而造成的皮膚表面泛紅 現象，具有抗敏和舒敏作用。
目前，仙人掌有效成分的提取一般都通過有機溶劑提取或者採用溫和鹼提取 法，這些方法都需要引入有機溶劑，成本高，去除不易；而且，在蛋白分離過程中 普遍採用等電點沉澱的方法，雜蛋白去除效率低，且去除過程需要離心，不利於工 業化生產；這些提取方法還存在操作步驟繁瑣，加入試劑多，所得產品純度不高等 缺點。
發明內容
本發明的目的是提供一種植物抗敏劑及其製備方法。 本發明所提供的植物抗敏劑的製備方法，包括以下步驟
1) 用纖維素酶處理仙人掌莖，以降解細胞壁，得到細胞裂解液；
2) 將上述步驟l)的細胞裂解液滅酶，滅酶後的溶液靜置，取上清液；
3) 調節上述步驟2)的上清液的pH值至4.2，再向其中加入活性碳，攪拌， 過濾，收集濾液，得到仙人掌提取液；
4) 將上述步驟3)的仙人掌提取液進行離子交換層析，以脫鹽和脫色，收集流 出液，得到植物抗敏劑。
具體製備時，可以使用仙人掌粉，也可以使用新鮮的仙人掌莖作為原料。 上述方法中，所述步驟l)中，所述纖維素酶的酶活為50萬-100萬U/g，所述 仙人掌莖和所述纖維素酶的質量比為1: (0.02-0.005)，優選為l: 0.01。 所述步驟2)中，所述滅酶條件為8(TC加熱10分鐘。所述步驟3)中，所述過濾是將反應液用硅藻土和板框過濾器進行過濾。
所述步驟4)中，所述離子交換層析是用陽離子樹脂001*7和陰離子樹脂D309 進行的。
上述方法還包括將所述植物抗敏劑進行濃縮得到濃縮液，然後在濃縮液中加入 海藻糖和甘油得到混合液的步驟；所述濃縮液體積為所述植物抗敏劑體積的1/3;
所述混合液中，所述濃縮液、海藻糖和甘油三者的配比為為lg海藻糖4ml甘油
10ml濃縮液。
上述方法還包括將所述混合液進行滅菌的步驟，所述滅菌條件為9(TC滅菌 30min。
上述方法還包括將滅菌後的混合液冷卻，然後在冷卻的混合液中加入防腐劑
L.G.P (丙二醇/雙咪唑烷基脲/碘代丙炔基丁基甲胺酸酯，購自美國ISP公司)的
步驟；所述L.G.P和所述混合液的質量比為1: 167。
採用上述方法製備的植物抗敏劑也屬於本發明的保護範圍。 本發明的植物抗敏劑的生產工藝，不需要加入有機試劑，提取分離方法簡便，
得到的抗敏劑質量穩定，抗敏功效明顯。
圖1為植物抗敏劑的生產工藝流程圖 圖2為皮膚表面的失水量百分比隨時間變化的曲線 圖3為皮膚表面的含水量百分比隨時間變化的曲線 圖4為植物抗敏劑對皮膚的舒敏作用實驗結果 圖5為植物抗敏劑對皮膚的抗敏作用實驗結果
具體實施例方式
實施例1、植物抗敏劑的生產
植物抗敏劑的生產工藝流程如圖1所示，具體過程如下
1) 將100g仙人掌粉(購自昕聖生物科技發展有限公司)和2L水以1: 20的 質量比混合，再加入20g酶活為100萬U/g的纖維素酶，5(TC下攪拌lh，以不出現 沉澱為指標，得到仙人掌粉的水溶液；
2) 將上述仙人掌粉的水溶液在8(TC條件下加熱10分鐘，使酶失活，酶失活後 的溶液靜置2小時，取上清液；
3) 取1800ml上述步驟2)的上清液，調節pH值至4.2，再向其中加入36g活性碳，使活性碳和上清液的配比為1: 50， 7(TC攪拌1.5小時；
4) 將上述步驟3)的反應液5000轉/分離心15分鐘，得到的上清液分別用矽 藻土和板框過濾器(購自溫州天富機械有限公司，濾徑0. 2um 5. Oum)進行過濾， 收集濾液，得到仙人掌粉提取液；
5) 將上述仙人掌粉提取液按照l: 6的上樣比分別過陽離子樹脂001*7和陰離 子樹脂D309 (購自丹東明珠特種樹脂有限公司)，以降低其電導率，收集流出液；
6) 將上述步驟5)的流出液進行濃縮，使濃縮液的體積為上述步驟5)的流出 液體積的1/3，向濃縮液中加入60g海藻糖和240ml甘油，使混合液中三者的配比 為lg海藻糖4ml甘油10ml濃縮液；
7) 將上述步驟6)獲得的混合液於9(TC滅菌30分鐘；
8) 將900ml上述步驟7)的混合液冷卻至4(TC以下，加入防腐劑L. G. P (丙二 醇/雙咪唑烷基脲/碘代丙炔基丁基甲胺酸酯，購自美國ISP公司)使L.G.P和混合 液的質量比為l: 167，混合均勻，得到植物抗敏劑。
實施例2、植物抗敏劑的功能實驗
1、 保溼功效實驗
選取20個自願者，志願者男女各半，將志願者左、右前臂分別用清水清洗幹 淨，在未擦用任何化妝品的情況下進行保溼功效實驗。
用水分測試儀測試受試者左、右前臂皮膚的水份含量和TEWL值，然後在受試 者左前臂塗抹上述實施例1製備的植物抗敏劑，右前臂作為空白對照，不塗抹任何 化妝品。每半小時測試一次，共4小時。實驗設三次重複，受試者皮膚表面的平均 水份含量和平均水份散失的百分比隨時間的變化曲線如圖2和圖3所示。結果表明， 上述實施例1製備的植物抗敏劑具有良好的長效保溼效果。
2、 植物抗敏劑的舒敏實驗
選取6個自願者，志願者男女各半，將志願者左、右前臂分別用清水清洗乾淨， 在溫度為20-26°C，相對溼度為50-60%的環境下，受試者未擦用任何化妝品的情況 下進行舒敏實驗。
將受試者左、右前臂分別塗抹辣椒素，每半小時塗抹一次，直至將皮膚刺激到 紅腫為止。然後將受試者的左前臂塗抹上述實施例1製備的植物抗敏劑，每半個小 時塗抹一次，右前臂作為對照，不塗抹上述實施例l製備的植物抗敏劑。觀察受試 者手臂的反應，結果如圖4所示。其中，A為塗抹辣椒素而未塗抹上述實施例1製備的植物抗敏劑4h後受試者的手臂，B為塗抹辣椒素後再塗抹上述實施例1製備的 植物抗敏劑4h後受試者的手臂。結果表明，受試者左前臂塗抹上述實施例1製備 的植物抗敏劑後，紅腫現象在4個小時後消失，而未塗抹上述實施例1製備的植物 抗敏劑的右前臂，紅腫現象在8個小時後才消失。可見，上述實施例l製備的植物 抗敏劑有一定的舒敏作用。
3、植物抗敏劑的抗敏實驗
選取6個自願者，志願者男女各半，將志願者左、右前臂分別用清水清洗乾淨， 在溫度為20-26t:，相對溼度為50-60%的環境下，受試者未擦用任何化妝品的情況 下進行舒敏實驗。
將受試者左前臂塗抹上述實施例1製備的植物抗敏劑，每半個小時塗抹一次， 共塗抹10次，右前臂不塗抹任何化妝品作為空白對照。然後將受試者的左、右前 臂分別塗抹質量百分含量為5%的十二垸基硫酸鈉(SDS)。觀察受試者手臂的反應， 結果如圖5所示。其中，A為塗抹上述實施例1製備的植物抗敏劑後再塗抹SDS的 受試者的手臂，B為只塗抹SDS的受試者的手臂。結果表明，塗抹上述實施例l制 備的植物抗敏劑後，再塗抹刺激物，左前臂的刺痛感和紅腫現象不明顯。而作為空 白對照的右前臂對刺激物的刺激反應強烈，塗抹刺激物0. 5h後皮膚內立刻紅腫， 並伴有刺痛感發生。說明上述實施例l製備的植物抗敏劑有一定的抗敏作用。
權利要求
1、一種抗敏劑的製備方法，包括如下步驟1)用纖維素酶處理仙人掌莖，以降解細胞壁，得到細胞裂解液；2)將上述步驟1)的細胞裂解液滅酶，滅酶後的溶液靜置，取上清液；3)調節上述步驟2)的上清液的pH值至4.2，再向其中加入活性碳，攪拌，過濾，收集濾液，得到仙人掌提取液；4)將上述步驟3)的仙人掌提取液進行離子交換層析，以脫鹽和脫色，收集流出液，得到抗敏劑。
2、 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述步驟l)中，所述纖維素酶 的酶活為50萬-100萬U/g，所述仙人掌莖和所述纖維素酶的質量比為1:(0.02-0.005)，優選為1: 0.01。
3、 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述步驟2)中 ，所述滅酶的條件為8(TC加熱10分鐘。
4、 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述步驟3)中 ，所述過濾是將反應液用硅藻土和板框過濾器進行過濾。
5、 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述步驟4)中,所述離子交換層析是用陽離子樹脂001*7和陰離子樹脂D309進行的。
6、 根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特徵在於所述方法還包括將所 述抗敏劑進行濃縮得到濃縮液，然後在濃縮液中加入海藻糖和甘油得到混合液的步 驟；所述濃縮液體積為所述抗敏劑體積的1/3;所述混合液中，所述濃縮液、海藻糖和甘油三者的配比為lg海藻糖4ml甘油 10ml濃縮液。
7、 根據權利要求6所述的方法，其特徵在於所述方法還包括將所述混合液 進行滅菌的步驟，所述滅菌條件為9(TC滅菌30min。
8、 根據權利要求7所述的方法，其特徵在於所述方法還包括將滅菌後的混 合液冷卻，然後在冷卻的混合液中加入L. G. P的步驟；所述L. G. P和所述混合液的質量比為1: 167。
9、 根據權利要求1-8中任一所述的方法製備的抗敏劑。
全文摘要
本發明公開了一種植物抗敏劑及其製備方法。該方法，包括以下步驟1)用纖維素酶處理仙人掌，以降解細胞壁，得到細胞裂解液；2)將上述步驟1)的細胞裂解液滅酶，滅酶後的溶液靜置，取上清液；3)調節上述步驟2)的上清液的pH值至4.2，再向其中加入活性炭，攪拌，過濾，收集濾液，得到仙人掌提取液；4)將上述步驟3)的仙人掌提取液進行離子交換層析，以脫鹽和脫色，收集流出液，得到植物抗敏劑。本發明所提供的植物抗敏劑的製備方法不需要有機試劑，提取分離方法簡便，得到的抗敏劑質量穩定，抗敏功效明顯。
文檔編號A61K135/00GK101416996SQ20081023932
公開日2009年4月29日 申請日期2008年12月10日 優先權日2008年12月10日
發明者何聰芬, 王昌濤, 王海濤, 董銀卯 申請人:北京工商大學