作為rtk抑制劑的6－取代的苯胺基嘌呤的製作方法

2024-01-22 12:51:15

專利名稱：作為rtk抑制劑的6－取代的苯胺基嘌呤的製作方法
相關申請的交叉參考本申請要求如下美國臨時專利申請的優先權權益2003年8月15日提交的60/495,406；2003年11月21日提交的60/524,357；和2004年4月26日提交的60/565,367。將這些申請的全部公開內容整體廣泛地引入本文作為參考。
背景技術：
發明領域本發明提供了一類新化合物、包含這類化合物的藥物組合物和使用這類化合物治療或預防與cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、Bmx和/或PFGFRα激酶活性相關的疾病或病症的方法。
背景技術：
蛋白激酶代表一大族蛋白質，它們在調節各種細胞過程和維持對細胞功能的控制方面起中心作用。這些激酶的部分非限制性目錄包括受體酪氨酸激酶，如Fms-樣酪氨酸激酶3(Fit3)、血小板衍生的生長因子受體激酶(PDGF-R)、c-kit、神經生長因子受體、trkB和成纖維細胞生長因子受體(FGFR3)和幹細胞因子的受體激酶；非-受體酪氨酸激酶，如Abl和融合激酶BCR-Abl、Fes、Lck和Syk；和絲氨酸/蘇氨酸激酶，如b-RAF、MAP激酶(例如MKK6)和SAPK2β。已經在許多疾病狀態中觀察到了異常激酶活性，包括良性和惡性增生性病症以及因免疫和神經系統不適當活化導致的疾病。
本發明的新化合物抑制一種或多種蛋白激酶活性，由此預計可用於治療與激酶相關的疾病。
發明概述一方面，本發明提供了式I化合物及其N-氧化物衍生物、前體藥物衍生物、被保護的衍生物、單獨的異構體及異構體混合物和這類化合物的藥學上可接受的鹽和溶劑合物(例如水合物) 其中R1選自氫、滷素、C1-6烷基、滷素-取代的-C1-6烷基、C1-6烷氧基、滷素-取代的-C1-6烷氧基、-OXOR5、-OXR6、-OXNR5R6、-OXONR5R6、-XR6、-XNR5R6和-XNR7XNR7R7；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；其中R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R5選自氫、C1-6烷基和-XOR7；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；且R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R6選自氫、C1-6烷基、C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；或R5和R6與R5和R6所連接的氮原子一起形成C3-8雜環烷基或C5-8雜芳基；其中R5和R6所形成的任意雜環烷基中的亞甲基可以任選被-C(O)-或-S(O)2-替代；其中R6的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基或R5和R6的組合可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XOR7、-XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XNR7C(O)R7、-XOR7、-XC(O)OR7、-XC(O)R7、C1-6烷基、C3-8雜環烷基、C5-10雜芳基、C3-12環烷基和C6-10芳基C0-4烷基；其中R1的任意烷基或亞烷基可以任選帶有被二價基團替代的亞甲基，所述二價基團選自-NR7C(O)-、-C(O)NR7-、-NR7-、-C(O)-、-O-、-S-、-S(O)-和-S(O)2-；且其中R6的任意烷基或亞烷基可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自C5-8雜芳基、-NR7R7、-C(O)NR7R7、-NR7C(O)R7、滷素和羥基；其中R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R2選自氫、C6-10芳基和C5-10雜芳基；其中R2的任意芳基或雜芳基任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XOR7、-XOR8、-XC(O)OR7、-XC(O)R7、C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基、氰基、羥基、滷素和滷素-取代的-C1-6烷基；其中X和R7如上所述；且R8為C6-10芳基C0-4烷基；R3選自氫和C1-6烷基；R4選自C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；其中R4的任意亞烷基可以任選帶有被二價基團替代的亞甲基，所述二價基團選自-C(O)-、-S-、-S(O)-和-S(O)2-；其中R4的所述芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基任選被1-3個基團取代，所述基團選自滷素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、滷素-取代的-C1-6烷基、滷素-取代的-C1-6烷氧基、-XR9、-XOR9、-XS(O)0-2R7、-XS(O)0-2R9、-XC(O)R7、-XC(O)OR7、-XP(O)R7R7、-XC(O)R9、-XC(O)NR7XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XC(O)NR7R9和-XC(O)NR7XOR7；其中X和R7如上所述；R9選自C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基和C5-10雜芳基；其中R9的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基任選被1-3個選自C1-6烷基、-XC(O)R7和-XC(O)NR7R7的基團取代；其中X和R7如上所述。
第二方面，本發明提供了藥物組合物，它含有式I化合物或其N-氧化物衍生物、單獨的異構體及異構體混合物或其藥學上可接受的鹽以及一種或多種合適的賦形劑。
第三方面，本發明提供了治療動物疾病的方法，其中抑制cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、PDGFRα和/或Bmx活性可以預防、抑制或改善所述疾病的病理和/或症狀，該方法包括對所述動物給予治療有效量的式I化合物或其N-氧化物衍生物、單獨的異構體及其異構體混合物或其藥學上可接受的鹽。
第四方面，本發明提供了式I化合物在製備用於治療動物疾病的藥物中的用途，其中cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、PDGFRα和/或Bmx活性對所述疾病的病理和/或症狀起作用。
第五方面，本發明提供了製備式I化合物及其N-氧化物衍生物、前體藥物衍生物、單獨的異構體及異構體混合物及其藥學上可接受的鹽的方法。
發明詳述定義「烷基」作為基團和作為其它基團例如滷素-取代的-烷基和烷氧基的結構單元，可以為直鏈或支鏈的。C1-4烷氧基包括甲氧基、乙氧基等。滷素-取代的烷基包括三氟甲基、五氟乙基等。
「芳基」指的是含有6-10個環碳原子的單環或稠合雙環芳族環系統。例如，芳基可以為苯基或萘基，優選苯基。
「亞芳基」指的是衍生自芳基的二價基團。「雜芳基」如對芳基所定義，其中環原子中的一個或多個為雜原子。例如，雜芳基包括吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯並呋喃基、苯並吡喃基、苯並噻喃基、苯並[1，3]間二氧雜環戊烯、咪唑基、苯並-咪唑基、嘧啶基、呋喃基、噁唑基、異噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、噻吩基等。
「環烷基」指的是含有所示環原子數的飽和或部分不飽和的單環、稠合雙環或橋接多環系統。例如，C3-10環烷基包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基等。「雜環烷基」指的是如本申請中所定義的環烷基，條件是所示環碳中的一個或多個被選自-O-、-N＝、-NR-、-C(O)-、-S-、-S(O)-或-S(O)2-的部分替代，其中R為氫、C1-4烷基或氮保護基。例如，作為本申請中為描述本發明化合物所使用的C3-8雜環烷基包括嗎啉代、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、哌啶基酮、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基等。
「滷素」(或滷代)優選表示氯或氟，但也可以為溴或碘。
「治療」指的是緩解或減輕疾病和/或其附帶症狀的方法。在本說明書中，術語「治療」包括預防性(prophylactic)或防止性(preventative)治療以及治癒或抑制疾病的治療，包括治療處危感染疾病或懷疑已感染疾病的患者以及患病的患者。該術語進一步包括用於延緩疾病發展的治療。
本文所用的術語「治癒」指的是治療涉及Flt3受體酪氨酸激酶活性失調的進行性疾病事件中的功效。
術語「預防性」指的是預防或防止涉及Flt3受體酪氨酸激酶活性失調的疾病的發作或復發。
本文所用的術語「延緩發展」指的是對處於所治療疾病的前置階段(pre-stage)或早期(early phase)的患者給予活性化合物，所述患者例如被診斷為相應疾病的前置形式，或處於例如醫療過程中的條件下或意外導致的條件下，在此條件下可能會發展相應的疾病。
本文所用的術語「涉及Flt3受體酪氨酸激酶活性失調的疾病」包括但不限於白血病，包括急性髓性白血病(AML)、具有三系脊髓發育不良的AML(AML/TMDS)、急性淋巴細胞白血病(ALL)和骨髓增生異常症候群(MDS)。該術語還特別包括Flt3受體突變導致的疾病。
優選實施方案描述本發明提供了一類新化合物、包含這類化合物的藥物組合物和使用這類化合物治療或預防與cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、PFGFRα和/或Bmx激酶活性相關的疾病或病症的方法。特別地，所述化合物表現出對F1t3和FGFR3受體激酶的高度功效。
在一個實施方案中涉及式I化合物R1選自氫、滷素、C1-6烷氧基、-OXOR5、-OXR6、-OXNR5R6、-OXONR5R6、-XR6、-XNR7XNR7R7和-XNR5R6；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；R5選自氫、C1-6烷基和-XOR7；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；且R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R6選自氫、C1-6烷基、C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；R6為氫或C1-6烷基；或R5和R6與R5和R6所連接的氮原子一起形成C3-8雜環烷基或C5-8雜芳基；其中R5和R6所形成的任意雜環烷基中的亞甲基可以任選被-C(O)-或-S(O)2-替代；其中R6的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基或R5和R6的組合可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XOR7、-XNR7R7、-XNR7C(O)R7、-XOR7、-XC(O)R7、C1-6烷基、C3-8雜環烷基和C6-10芳基C0-4烷基；其中R1的任意烷基或亞烷基可以任選帶有被二價基團替代的亞甲基，所述二價基團選自-NR7C(O)-、-C(O)NR7-、-NR7-、-O-；且其中R1的任意烷基或亞烷基可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自C5-8雜芳基、-NR7R7、-C(O)NR7R7、-NR7C(O)R7、滷素和羥基；其中R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R2選自氫、C6-10芳基和C5-10雜芳基；其中R2的任意芳基或雜芳基任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XOR7、-XOR8、-XC(O)OR7、C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基、氰基、滷素、滷素-取代的-C1-6烷氧基和滷素-取代的-C1-6烷基；其中X和R7如上所述；且R8為C6-10芳基C0-4烷基；R3為氫；且R4選自C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；其中R4的所述芳基或雜芳基被1-3個基團取代，所述基團選自滷素、-XR9、-XOR9、-XS(O)2R7、-XS(O)2R9、-XC(O)R7、-XC(O)OR7、-XP(O)R7R7、-XC(O)R9、-XC(O)NR7XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XC(O)NR7R9和-XC(O)NR7XOR7；其中X和R7如上所述；R9為C3-8雜環烷基C0-4烷基；其中R9任選被1-3個選自C1-6烷基、-XC(O)R7和-XC(O)NR7R7的基團取代；其中X和R7如上所述。
在另一個實施方案中，R1選自氫、滷素、C1-6烷氧基、-OXOR5、-OXR6、-OXNR5R6、-OXONR5R6、-XR6和-XNR5R6；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；R5選自氫、甲基、羥基-乙基和甲氧基-乙基；R6選自氫、苯基、苄基、環戊基、環丁基、二甲氨基-丙烯基、環己基、2，3-二羥基-丙基、哌啶基、氨基-羰基-乙基、甲基-羰基-氨基-乙基、甲基-氨基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、1-羥基甲基-丁基、戊基、丁基、丙基、甲氧基-乙炔基、甲氧基-乙烯基、二甲基-氨基-丁基、二甲基-氨基-乙基、二甲基-氨基-丙基、四氫吡喃基、四氫呋喃基-甲基、吡啶基-甲基、氮雜庚環-1-基、[1，4]氧氮雜庚環-4-基、哌啶基-乙基、二乙基-氨基-乙基、氨基-丁基、氨基-異丙基、氨基-乙基、羥基-乙基、2-乙醯基氨基-乙基、氨基甲醯基-乙基、4-甲基-[1，4]二氮雜庚環-1-基、2-羥基-丙基、羥基-丙基、2-羥基-2-甲基-丙基、甲氧基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、2-羥基-2-苯基-乙基、吡啶基-乙基、嗎啉代-丙基、嗎啉代-乙基、吡咯烷基、吡咯烷基-甲基、吡咯烷基-乙基、吡咯烷基-丙基、吡嗪基、喹啉-3-基、喹啉-5-基、咪唑基-乙基、吡啶基-甲基、苯乙基、四氫-吡喃-4-基、嘧啶基、呋喃基、異噁唑基-甲基、吡啶基、苯並[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基、噻唑基-乙基和噻唑基-甲基；或R5和R6與R5和R6所連接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、3-氧代-哌嗪-1-基、[1，4]二氮雜庚環-1-基、嗎啉代、3-氧代-哌嗪-1-基、1，1-二氧代-1λ6-硫代嗎啉-4-基或吡唑基；其中R6的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基或R5和R6的組合可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自甲基-羰基、氨基-甲基、氨基-羰基、甲基-磺醯基、甲氧基、甲氧基-甲基、甲醯基、氟-乙基、羥基-乙基、氨基、二甲基氨基、羥基、甲基、乙基、乙醯基、異丙基、吡咯烷基、嘧啶基、嗎啉代、吡啶基和苄基；其中R6的任意烷基或亞烷基可以任選帶有被選自-NHC(O)-或-C(O)NH-的二價基團替代的亞甲基；且其中R6的任意烷基或亞烷基可以任選被1至2個獨立地選自氨基、滷素、哌啶基和羥基的基團取代。
在另一個實施方案中，R2選自氫、苯基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、噻唑基、吡嗪基、萘基、呋喃基、苯並[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基、異噻唑基、咪唑基和嘧啶基；其中R2的任意芳基或雜芳基任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自甲基、異丙基、滷素、乙醯基、三氟甲基、硝基、1-羥基-乙基、1-羥基-1-甲基-乙基、羥基-乙基、羥基-甲基、氨基甲醯基、甲氧基、苄氧基、羧基、氨基、氰基、氨基-羰基、氨基-甲基和乙氧基。
在另一個實施方案中，R4選自苯基、苄基、吡啶基和1-氧代-茚滿-5-基；其中所述苯基、苄基、茚滿基或吡啶基任選被以下取代滷素、乙醯基、三氟甲基、環丙基-氨基-羰基、氮雜環丁烷-1-羰基、哌啶基-羰基、嗎啉代、甲基-羰基、哌嗪基、甲基-磺醯基、哌啶基-磺醯基、4-甲基-哌嗪基-羰基、二甲基-氨基-乙基-氨基-羰基、嗎啉代-羰基、嗎啉代-甲基、氨基-羰基、丙基-氨基-羰基、羥基-乙基-氨基-羰基、嗎啉代-乙基-氨基-羰基、4-乙醯基-哌嗪-1-羰基、4-氨基-羰基-哌嗪-1-羰基、苯基-羰基、吡咯烷基-1-羰基、丙基-羰基、丁基、異丙基-氧基-羰基、環己基-羰基、環丙基-羰基、甲基-磺醯基、二甲基-次膦醯基(phosphinoyl)、4-甲基-哌嗪基-磺醯基、1-氧代-茚滿-5-基、氧雜環丁烷-3-磺醯基、氨基-磺醯基和四氫-吡喃-4-磺醯基。
下文中的實施例和表1、2和3中詳細描述了優選的式I化合物。其它優選實例選自N6-(4-甲亞磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-(四氫-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；氮雜環丁烷-1-基-{4-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-甲酮；1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮；1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2，2-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺醯基-苯基)-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺醯基-苯基)-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-乙基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-氟甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-2-(3-甲基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N2-甲基-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(2-氮雜庚環-1-基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基)-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-胺；N2-環己基-N6-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-N2-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-(四氫-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N2-環己基-N6-(4-甲亞磺醯基-苯基)-N2-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；R-(4-甲亞磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；{4-[6-(4-甲磺醯基-苯基氨基)-2-(甲基-吡啶-2-基甲基-氨基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇；R-(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；R-4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯磺醯胺；和{4-[6-(4-甲磺醯基-苯基氨基)-2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇。
藥理學與應用本發明的化合物抑制Flt3受體酪氨酸激酶的活性並就此可用於治療其中FLT3活性對疾病的病理和/或症狀起作用的疾病或病症。
Flt3為III型受體酪氨酸激酶(RTK)家族的成員。Flt3(fms-樣酪氨酸激酶)也稱作FLk-2(胎兒肝激酶2)。已記載在成年人和兒童白血病中Flt3基因的表達異常，包括急性髓性白血病(AML)、具有三系脊髓發育不良的AML(AML/TMDS)、急性淋巴細胞白血病(ALL)和骨髓增生異常症候群(MDS)。已經在約35％的患有急性粒細胞白血病(AML)的患者中觀察到Flt3受體活化突變，並與不良預後相關。最常見的突變包括近膜結構域內的框內複製，還有5-10％的患者在835位天冬醯胺上具有點突變。這些突變均與FIt3的酪氨酸激酶活性的組成型活化相關，且在沒有配體存在下產生增殖和存活力信號。已經證實，表達突變型受體的患者的治癒機會減少。因此，存在過度活化的(突變的)Flt3激酶活性在人白血病和骨髓增生異常症候群中作用的累積證據。這促使本申請人尋找新的Flt3受體抑制劑，作為對這些目前藥物療法幾乎無法提供可用性的患者和先前對目前可利用藥物療法和/或幹細胞移植療法失敗的患者的可能的治療手段。
白血病一般由骨髓、淋巴結、脾或其它血液和免疫系統器官中未成熟造血細胞DNA的獲得性(非遺傳性)基因損傷所致。其效果為細胞成熟中的加速生長和阻滯，導致被稱作「白血病性母細胞(leukemic blast)」的細胞蓄積，其不起正常血細胞作用；和不能產生正常髓細胞，導致紅細胞(貧血)、血小板和正常白細胞缺乏。母細胞一般由骨髓產生且通常發育成成熟血細胞，約佔所有髓細胞的1％。在白血病中，母細胞無法適當成熟並在骨髓中蓄積。在急性髓性白血病(AML)中，它們稱作成髓細胞，而在急性淋巴細胞白血病中(ALL)，它們稱作成淋巴細胞。另一種白血病為混合譜系(mixed-lineage)的白血病(MLL)。
術語「具有三系脊髓發育不良的AML(AML/TMDS)」涉及一種不常見的白血病形式，其特徵在於急性白血病伴隨造血機能不全、對誘導化療的反應差以及與單純骨髓增生異常症候群復發的傾向。
術語「骨髓增生異常症候群(MDS)」涉及一組血液病症，其中骨髓停止正常發揮功能，導致健康血細胞數量缺乏。與一種類型的血細胞大量產生的白血病相比，在MDS中任意且有時是所有類型的血細胞均受到影響。在美國每年至少有10,000個新病例出現。診斷為MDS的患者中高達三分之一發生急性髓性白血病。由於這一原因，該病有時稱作白血病前期。骨髓增生異常症候群有時也稱作脊髓發育不良性髓細胞生成異常或原始少突神經膠質細胞性白血病。當高數量的母細胞保留在髓中時，MDS也稱作隱襲性(smoldering)白血病。
骨髓增生異常症候群如白血病，由骨髓中單細胞DNA的基因損傷所致。MDS患者中出現染色體中的某些異常。這些異常稱作易位，它在一條染色體的部分斷裂且與不同染色體的斷裂部分連接時發生。在急性髓性白血病中通常發現相同的缺陷。然而，MDS與白血病不同，因為患者的所有血細胞均異常，且均來源於相同損害的幹細胞。在白血病患者中，骨髓含有患病和健康血細胞的混合物。
目前，使用高劑量的細胞毒性化療藥如阿糖胞苷和柔紅黴素治療AML和晚期骨髓增生異常症候群。這種類型的療法使得約70％的患者進入血液學症狀緩解。然而，儘管長期給予化療，但是在進入緩解的患者中超過一半後來復發。幾乎所有最初未能進入緩解或在獲得緩解後復發的患者最終死於白血病。骨髓移植可以治癒達50-60％的接受該手術的患者，但在患有AML或MDS的所有患者中僅有約三分之一適宜接受移植物。迫切需要新的和有效的藥物來治療使用標準療法未能進入緩解的患者、後期復發的患者和對幹細胞移植不適宜的患者。此外，可以將有效的新藥物加入到標準療法中，併合理預期其將使所有患者的誘導化療改善。
FGFR3是由4種不同基因編碼的結構相關的酪氨酸激酶受體家族的組成部分。在FGFR3基因的不同結構域中的特異性點突變導致受體組成型活化，並與常染色體顯性骨骼病症、多發性骨髓瘤和較大比例的膀胱和宮頸癌相關(Cappellen等，Nature，23卷)。位於小鼠FGFR3基因中的活化突變以及小鼠中被活化的FGFR3靶向生長板軟骨可導致侏儒症。與我們的觀點類似，小鼠中FGFR3的靶向破裂導致長骨和脊椎生長過度。此外，20-25％的多發性骨髓瘤細胞含有t(4；14)(p16.3；q32.3)染色體易位，斷裂點在4p16，位於FGFR3著絲點的50-100kb處。在多發性骨髓瘤的罕有病例中，已經發現了以往在骨骼病症中觀察到的FGFR3活化突變，且始終伴隨該染色體易位。近來，已經在大比例的膀胱癌細胞和某些宮頸癌細胞中鑑定了FGFR3錯義體細胞突變(R248C、S249C、G372C和K652E)，且它們實際上與導致致死性骨骼發育不良即新生兒期致命性的侏儒症形式的生殖活化突變相同。本發明的化合物可以通過比目前療法更有效而可對多發性骨髓瘤具有治療效用、通過避免改變生活的膀胱切除術而對膀胱癌具有治療效用，並對那些希望保護未來生育力的患者中的宮頸癌具有治療效用。
本發明的化合物不僅可以用作抑制腫瘤的物質，例如在小細胞肺癌中，而且可以作為活性劑用於治療非惡性增殖性病症如動脈粥樣硬化、血栓形成、銀屑病、硬皮病和纖維化，以及用於保護幹細胞，例如對抗化療劑如5-氟尿嘧啶的血毒素作用，以及用於哮喘。本發明的化合物尤其可以用於治療對PDGF受體激酶抑制應答的疾病。
本發明的化合物在治療由移植例如異源移植所致的病症中表現出有用的作用，所述病症尤其是組織排斥，如尤其是閉塞性細支氣管炎(OB)，即異源肺移植物的慢性排斥。與未患OB的患者相反，患有OB的那些患者通常表現出在支氣管肺泡灌洗液中PDGF濃度升高。
本發明的化合物還對與血管平滑肌細胞遷移和增殖相關的疾病有效(其中PDGF和PDGF-R通常也起作用)，如再狹窄和動脈粥樣硬化。這些對體外和體內血管平滑肌細胞增殖或遷移的作用和結果可以通過給予本發明的化合物、還可以通過研究它對體內機械性損傷後血管內膜增厚的作用來證實。
神經營養蛋白受體的trk家族(trkA、trkB、trkC)促進神經元和非神經元組織的存活、生長和分化。TrkB蛋白在小腸和結腸中的神經內分泌型細胞、胰腺的α細胞、淋巴結和脾的單核細胞和巨噬細胞以及表皮的顆粒層中表達(Shibayama和Koizumi，1996)。TrkB蛋白的表達已經與維爾姆斯瘤和神經母細胞瘤的不利發展有關。此外，TkrB在癌性前列腺細胞中表達，而不在正常細胞中表達。Trk受體的信號傳導途徑下遊涉及MAPK通過Shc、活化的Ras、ERK-1和ERK-2基因以及PLC-gammal轉導途徑的活化級聯(Sugimoto等，2001)。
激酶c-Src傳導許多受體的致癌信號。例如，EGFR或HER2/neu在腫瘤中的過量表達導致c-src的組成型活化，它是惡性細胞的特徵，但在正常細胞中不存在。另一方面，c-src表達缺陷的小鼠表現出石骨症表型，表明了c-src在破骨細胞功能中的關鍵參與和在相關病症中的可能關聯。
成纖維細胞生長因子受體3已顯示對骨生長發揮負面調節作用並抑制軟骨細胞增殖。致死性骨發育不全是由成纖維細胞生長因子受體3中的不同突變導致，且一種突變即TDII FGFR3具有活化轉錄因子Statl的組成型酪氨酸激酶活性，導致細胞周期抑制劑表達、生長抑制和骨發育異常(Su等，Nature，1997，386，288-292)。FGFR3還通常在多發性骨髓瘤型癌症中表達。
Lck在T-細胞信號傳導中起作用。缺乏Lck基因的小鼠發育胸腺細胞的能力差。Lck作為T-細胞信號傳導正性活化劑的功能提示Lck抑制劑可以用於治療自身免疫疾病，如類風溼性關節炎。
按照上述，本發明進一步提供了在需要治療的對象中預防或治療上述疾病或病症的方法，該方法包括對所述對象給予治療有效量的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。就上述任意用途而言，所需劑量將根據給藥方式、所治療的具體疾病和所需的效果而改變。
給藥和藥物組合物一般而言，通過本領域中公知的任意常用和可接受的方式、單獨或與一種或多種治療劑聯用、以治療有效量給予本發明的化合物。治療有效量可以根據對象的疾病嚴重程度、年齡和相關健康情況、所用化合物的功效和其它因素的不同而寬泛地改變。一般而言，約0.03-2.5mg/kg體重的每日劑量顯示獲得全身性滿意的效果。在較大哺乳動物、例如人中適合的每日劑量在約0.5mg-約100mg的範圍內，例如每天至多分4次以分劑量或以緩釋形式便利地給藥。用於口服給藥的合適單位劑型包含約1-50mg活性組分。
本發明的化合物可以作為藥物組合物通過任意常規途徑給藥，特別是經腸給藥，例如口服，例如以片劑或膠囊形式；或通過胃腸外給藥，例如以可注射溶液或混懸液形式；通過局部方式，例如以洗劑、凝膠、軟膏劑或霜劑形式，或以鼻用或栓劑形式。包含游離形式或藥學上可接受的鹽形式的本發明化合物與至少一種藥學上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物可以以常規方式、通過混合、制粒或包衣法製備。例如，口服組合物可以為片劑或明膠膠囊，它們包含活性組分以及a)稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨醇、纖維素和/或甘氨酸；b)潤滑劑，例如二氧化矽、滑石、硬脂酸、其鎂或鈣鹽和/或聚乙二醇；用於片劑的還有c)粘合劑，例如矽酸鎂鋁、澱粉糊、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，還有d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、藻酸或其鈉鹽或泡騰混合物；和/或e)吸收劑、著色劑、矯味劑和甜味劑。可注射組合物可以為含水等滲溶液或混懸液，且栓劑可以由脂肪乳劑或混懸液製備。組合物可以是滅菌的和/或含有佐劑，如防腐劑、穩定劑、溼潤劑或乳化劑、溶解促進劑、用於調節滲透壓的鹽和/或緩衝劑。此外，它們還可以含有其它治療上有價值的物質。用於透皮施用的合適的製劑包括有效量的本發明化合物與載體。載體可以包括可吸收的藥學上可接受的溶劑以有助於通過宿主皮膚。例如，透皮裝置為繃帶形式，包括背襯部分(backing member)、含有化合物任選以及載體的貯器、任選的速率控制屏障以以受控和預定速率在延長時期內將所述化合物遞送至宿主皮膚，以及使裝置與皮膚固定的手段。還可以使用基質透皮製劑。局部用於例如皮膚和眼的合適的製劑優選為本領域眾所周知的水溶液、軟膏劑、霜劑或凝膠。這類製劑可以含有增溶劑、穩定劑、張力增強劑、緩衝劑和防腐劑。
本發明的化合物可以與一種或多種治療劑、包括放療和骨髓移植聯合(藥物組合)、以治療有效量給予。可以與本發明化合物聯用的化合物的非限制性實例為細胞毒性化療藥，如阿糖胞苷、柔紅黴素、環磷醯胺、VP-16、米託蒽醌、柔紅黴素、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、長春新鹼、6-硫鳥嘌呤、6-巰基嘌呤、紫杉醇等；抗血管生成藥，例如但不限於環加氧酶抑制劑，如塞來昔布；免疫調節或抗炎物質，例如環孢黴素、雷帕黴素或子囊黴素，或其免疫抑制劑類似物，例如環孢黴素A(CsA)、環孢黴素G、FK-506、雷帕黴素或相當的化合物；皮質類固醇；環磷醯胺；硫唑嘌呤；甲氨蝶呤；白瑞誇爾；來氟洛米；咪唑立賓；麥酚酸；麥考酚酸嗎啉乙酯；15-脫氧精胍菌素；免疫抑制劑抗體，尤其是白細胞受體的單克隆抗體，例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD45、CD58或其配體，或其它免疫調節化合物，如CTLA41g。此外，本發明的化合物可以與其它信號轉導抑制劑或其它靶向癌基因的藥物聯用以獲得顯著的協同療法。
當將本發明的化合物與其它療法聯合給予時，共同給予的化合物的劑量當然根據共同使用的藥物的類型、所用的具體藥物、所治療的疾病等而改變。
本發明還提供了藥物組合，例如藥盒，包括a)第一種活性劑，為本文披露的游離形式或藥學上可接受的鹽形式的本發明化合物；和b)至少一種活性助劑。該藥盒可以包括給藥說明書。
本文所用的術語「共同給藥」或「聯合給藥」等用以包括對單一患者給予所選擇的治療劑，且用以包括活性劑不一定通過相同給藥途徑或在同時給予的治療方案。
本文所用的「藥物組合」指的是混合或合併一種以上活性組分而得到的產品，且包括固定和不固定的活性組分組合。術語「固定組合」指的是將活性組分、例如式I化合物和活性助劑以單一實體或劑量的形式同時對患者給藥。術語「不固定的組合」指的是將活性組分、例如式I化合物和活性助劑作為分開的實體同時、共同或沒有特定時間限制依次對患者給藥，其中這類給藥在患者體內提供了治療有效水平的2種化合物。後者也適用於雞尾酒療法(cocktail therapy)，例如給予3種或3種以上活性組分。
製備本發明化合物的方法本發明還包括製備本發明化合物的方法。在所述反應中，當在終產物中需要它們時，可能有必要保護反應官能基，例如羥基、氨基、亞氨基、硫代或羧基，以避免它們不必要地參與反應。可以按照標準實踐使用常用的保護基，例如參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts《有機化學中的保護基》，John Wiley和Sons，1991。其中R5為氫的式I化合物可以通過進行如下的反應方案I而製備反應方案I 其中R1、R2、R3和R4如發明概述中對式I所定義，PG表示氮保護基(例如四氫-吡喃-2-基等)且Z表示滷素，例如碘或氯，優選氯。
式3化合物可以通過使式2化合物與NHR3R4在合適的溶劑(例如乙醇、丁醇、THF等)存在下、使用合適的鹼(例如DIEA、Na2CO3等)反應而製備。式4化合物可以通過使式3化合物與R1H在合適的溶劑(例如DME、乙醇、丁醇、THF等)、任選合適的催化劑(例如鈀催化劑等)存在下、使用合適的鹼(例如DIEA、Na2CO3等)反應而製備。式I化合物可以通過首先在合適的催化劑(例如p-TSA等)存在下、在合適的溶劑(例如MeOH等)中除去保護基(PG)而製備。反應繼續進行，使脫保護的式4化合物與其中Y代表滷素、例如碘、溴和氯的R2Y反應。反應在約70-約110℃的溫度下、使用合適的鹼(例如磷酸鉀等)、在合適的溶劑(例如DMF、二噁烷等)存在下進行，並可以耗時達24小時完成。
式I化合物可以通過進行如下的反應方案II製備
反應方案II 其中R1、R2、R3和R4如發明概述中對通式I所定義，PG表示氮保護基(例如四氫-吡喃-2-基等)且Z表示滷素，例如碘或氯，優選氯。
式3化合物可以通過使式2化合物與NHR3R4在合適的溶劑(例如乙醇、丁醇、THF等)存在下、使用合適的鹼(例如DIEA、Na2CO3等)反應而製備。式5化合物可以通過首先在合適的催化劑(例如p-TSA等)存在下、在合適的溶劑(例如MeOH等)中除去保護基(PG)而製備。反應繼續進行，使脫保護的式3化合物與R2B(OH)2在合適的溶劑(例如二噁烷、二氯甲烷等)和合適的催化劑(例如乙酸銅等)存在下、使用合適的鹼(例如吡啶、TEA等)反應。反應在約20-約80℃的溫度下進行，且可以耗時達168小時完成。式I化合物可以通過使式5化合物與R1H在合適的溶劑(例如丁醇、乙醇等)存在下、使用合適的鹼(例如DIEA、Na2CO3等)反應而製備。
式I化合物可以通過進行如下的反應方案III製備
反應方案III 其中R1、R2、R3和R4如發明概述中對通式I所定義且Z表示滷素，例如碘或氯，優選氯。
式7化合物可以通過使式6化合物與R2B(OH)2在合適的溶劑(例如二噁烷、二氯甲烷等)和合適的催化劑(例如乙酸銅等)存在下、使用合適的鹼(例如吡啶、TEA等)反應而製備。反應在約20-約80℃的溫度下進行，且可耗時達168小時完成。式5化合物可以通過使式7化合物與NHR3R4在合適的溶劑(例如DME、乙醇、丁醇、THF等)存在下、任選使用合適的催化劑(例如鈀催化劑等)並使用合適的鹼(例如DIEA、Na2CO3等)反應而製備。式I化合物可以通過使式5化合物與R1H在合適的溶劑(例如乙醇、丁醇、THF等)存在下、使用合適的鹼(例如DIEA、Na2CO3等)反應而製備。
製備本發明化合物的其它方法通過使游離鹼形式的化合物與藥學上可接受的無機酸或有機酸反應，可以將本發明的化合物製備成藥學上可接受的酸加成鹽。或者，通過使游離酸形式的化合物與藥學上可接受的無機鹼或有機鹼反應，可以製備本發明化合物的藥學上可接受的鹼加成鹽。或者，可以使用原料或中間體的鹽製備本發明化合物的鹽形式。
本發明化合物的游離酸或游離鹼形式可以分別由相應的鹼加成鹽或酸加成鹽形式製備。例如，通過用合適的鹼(例如氫氧化銨溶液、氫氧化鈉等)處理，可以將酸加成鹽形式的本發明化合物轉化成相應的游離鹼。通過用合適的酸(例如鹽酸等)處理，可以將鹼加成鹽形式的本發明化合物轉化成相應的游離酸。
未氧化形式的本發明化合物可以由本發明化合物的N-氧化物、在0-80℃和合適的惰性有機溶劑(例如乙腈、乙醇、二噁烷水溶液等)中用還原劑(例如硫、二氧化硫、三苯膦、硼氫化鋰、硼氫化鈉、三氯化磷、三溴化磷等)處理而製備。
本發明化合物的前體藥物衍生物可以通過本領域技術人員公知的方法製備(例如進一步的詳細描述參見Saulnier等，(1994)，Bioorganic andMedicinal Chemistry Letters，第4卷，p.1985)。例如，通過使未衍生的本發明化合物與合適的氨基甲醯化試劑(例如1，1-acyloxyalkylcarbanochloridate、碳酸對-硝基苯基酯等)反應，可以製備合適的前體藥物。
本發明化合物的被保護的衍生物可以通過本領域技術人員公知的方式製備。適用於生成保護基並將其除去的技術的詳細描述可見於T.W.Greene，《有機化學中的保護基》第3版，John Wiley和Sons，Inc.，1999。
在本發明方法的過程中，可以便利地將本發明的化合物製成或使其形成溶劑合物(例如水合物)。通過使用有機溶劑如二氧芑、四氫呋喃或甲醇從水/有機溶劑混合物中重結晶，可以便利地製備本發明化合物的水合物。
本發明的化合物可以如下製備成它們的單獨的立體異構體使化合物的外消旋混合物與旋光活性拆分劑反應，生成非對映異構體化合物對，分離非對映體並回收光學純的對映體。儘管可以使用本發明化合物的共價非對映異構衍生物進行對映體拆分，但是優選可離解的複合物(例如結晶非對映異構鹽)。非對映體具有不同的物理特性(例如熔點、沸點、溶解度、反應性等)且可容易地通過利用這些差異進行分離。非對映體可以通過色譜法或優選通過基於溶解度差異的分離/拆分技術分離。然後通過任意不會導致外消旋化的實用方式回收光學純的對映體與拆分劑。適用於從外消旋混合物中拆分化合物的立體異構體的技術的更詳細描述可見於Jean Jacques，Andre Collet，Samuel H.Wilen，《對映體、外消旋物與拆分》，John Tiley和Sons，Inc.，1981。
概況而言，式I化合物可以通過包括下列步驟的方法製備(a)反應方案I、II和III的那些方法，例如按照反應方案II或III使式5化合物與R1H偶聯；和(b)任選將本發明的化合物轉化成藥學上可接受的鹽；(c)任選將本發明化合物的鹽形式轉化成非鹽形式；(d)任選將本發明化合物的未氧化形式轉化成藥學可接受的N-氧化物；(e)任選將本發明化合物的N-氧化物形式轉化成其未氧化形式；(f)任選從異構體混合物中拆分本發明化合物的單獨的異構體；(g)任選將本發明的未衍生化合物轉化成藥學上可接受的前體藥物衍生物；和(h)任選將本發明化合物的前體藥物衍生物轉化成其未衍生形式。
就原料的生產未特別描述而言，這些化合物是已知的或可以按照與本領域中公知的方法類似的方式或如下文實施例中披露的方法製備。
本領域技術人員將理解上述轉化僅是製備本發明化合物方法的代表且可以類似地使用其它眾所周知的方法。
實施例下列實施例提供了代表性化合物製備的詳細描述，但其供以解釋而非限定本發明。
實施例1{4-[2-(4-氨基-環己基氨基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮 向0℃的哌啶(18.0g，211.8mmol)在二氯甲烷(360mL)中的溶液中分幾部分謹慎加入4-硝基苯甲醯氯(18.6g，100mmol)。將該反應混合物在室溫下攪拌10分鐘，此後用HCl(1％，2×200mL)溶液和水(300mL)洗滌並用Na2SO4乾燥。在蒸發溶劑後，得到(4-硝基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(23.2g，99％)並直接用於氫化(含1.0g 10％Pd/C的400mL乙醇)。在過濾催化劑並蒸發乙醇後，得到(4-氨基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(19.6g，96％)。
將2，6-二氯嘌呤(18.80g，100mmol)、3，4-二氫-2H-吡喃(12.62g，150mmol)、對甲苯磺酸一水合物(1.90g，10mmol)和無水二氯甲烷(200mL)的混合物在室溫下攪拌4小時。過濾後，將其用Na2CO3(10％水溶液，100mL)、水(100mL)洗滌並用Na2SO4乾燥。蒸發溶劑，隨後在乙酸乙酯(5mL)和己烷(60mL)中研磨，誘發沉澱，經過濾，得到2，6-二氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(24.01g，88％)。
將2，6-二氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(5.44g，20mmol)、(4-氨基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(4.08g，20mmol)、二異丙基乙胺(24mmol)和乙醇(100mL)的混合物回流24小時。然後加入反式-1，4-環己烷二胺(6.84g，60mmol)和二異丙基乙胺(24mmol)，並將該混合物再回流24小時。用乙酸乙酯(250mL)和水(200mL)處理蒸發乙醇後得到的油狀殘餘物。用乙酸乙酯(2×100mL)萃取水相，用Na2SO4乾燥合併的有機相。在蒸發後，在55℃用在甲醇(100mL)中的對甲苯磺酸一水合物(3.80g，20mmol)將獲得的油狀殘餘物處理4小時並監測反應，直到完成脫保護。
加入二異丙基乙胺以中和該混合物。對油狀殘餘物進行柱色譜(EtOAc∶MeOH＝9∶1，然後CH2Cl2∶MeOH(含有～7N氨)＝9∶1)，得到2-(4-氨基-環己基氨基)-6-[4-(哌啶-1-羰基)-苯基氨基]-9H-嘌呤(6.50g，75％)。
將含有如上製備的2-(4-氨基-環己基氨基)-6-[4-(哌啶-1-羰基)-苯基氨基]-9H-嘌呤(86.8mg，0.2mmol)、碘化銅(I)(38.2mg，0.2mmol)和磷酸鉀(170mg，0.8mmol)的混合物的反應瓶脫氣並重新充填乾燥的氮氣。加入在DMF(700μL)中的N』N』-二甲基乙二胺(35.3mg，43μL，0.4mmol)和碘苯(40.8mg，0.2mmol)並將該混合物在88℃攪拌過夜。加入AcOH-MeOH(1∶10，1.5mL)以中和該混合物，隨後通過注射器式濾器過濾。進行柱色譜(EtOAc∶MeOH＝9∶1，然後CH2Cl2∶MeOH(含有～7N氨)＝9∶1)，得到{4-[2-(4-氨基-環己基氨基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮，為固體；1HNMR 400MHz(CD3OD)d 8.03(s，1H)，7.90-7.95(m，2H)，7.75-7.65(m，2H)，7.50-7.42(m，2H)，7.38-7.30(m，3H)，3.80-3.50(m，5H)，2.83-2.73(m，1H)，2.15-2.05(m，2H)，1.95-1.90(m，2H)，1.70-1.40(m，6H)，1.40-1.20(m，4H)；MSm/z 511.3(M+1)。
實施例2[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮 將2，6-二氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(10g，36.6mmol)、(4-氨基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(7.48g，36.6mmol)和二異丙基乙胺(9.5g，73.5mmol)在乙醇(110mL)中的混合物回流過夜。將該混合物冷卻至室溫並在真空中濃縮，得到[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(14.7g，91％)，為暗黃色固體。
將[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(10g，22.7mmol)和對-甲苯磺酸一水合物(0.86g，4.5mmol)在甲醇(100mL)中的混合物在50℃攪拌2小時。將該混合物冷卻至室溫並懸浮於甲醇中。收集沉澱並用乙酸乙酯洗滌，得到[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(7.69g，95％)，為淺黃色固體。
向活化的分子篩(4.2g)在二噁烷(35mL)中的混懸液中加入[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(4g，11.2mmol)、苯基代硼酸(2.73g，22.4mmol)、乙酸銅(3.05g，16.8mmol)和吡啶(3.54g，44.8mmol)。將該混合物在室溫下攪拌過夜且然後在40℃加熱5小時。將該混合物冷卻至室溫，用THF(50mL)稀釋，通過硅藻土過濾並用甲醇洗滌。在減壓下濃縮濾液並通過快速柱色譜法純化殘餘物(MeOH/二氯甲烷＝1/50)，得到[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(3.89g，80％)，為黃色固體；1HNMR 400MHz(CDCl3)d 8.17(s，1H)，8.06(s，1H)，7.93(d，2H，J＝8.8Hz)，7.69(d，2H，J＝8.8Hz)，7.58(d，2H，J＝8Hz)，7.49(t，3H，J＝7.2Hz)，7.41(d，1H，J＝7.2Hz)，2.93-2.90(m，4H)，2.18-1.96(m，2H)，1.58-1.53(m，4H)，1.35-1.29(m，2H)；MS m/z 433.2(M+1)。
實施例3{4-[2-(3-二甲基氨基-吡咯烷-1-基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮 將[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基甲酮(129mg，0.3mmol)和3-(二甲氨基)-吡咯烷(103mg，0.9mmol)在1-丁醇(0.6mL)中的混合物在120℃攪拌12小時。將該混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。通過快速柱色譜法純化殘餘物(MeOH/二氯甲烷＝1/50)，得到{4-[2-(3-二甲基氨基-吡咯烷-1-基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮(73.3mg，49％)，為暗粉紅色固體；1H NMR 400MHz(MeOH-d4)d 8.22(s，1H)，7.95(d，2H，J＝8.4Hz)，7.83(d，2H，J＝7.6Hz)，7.53(t，2H，J＝7.6Hz)，7.43(d，1H，J＝7.6Hz)，7.40(d，2H，J＝8.8Hz)，4.04-3.96(m，1H)，3.94-3.83(m，1H)，3.70-3.36(m，6H)，2.95(s，6H)，2.51-2.46(m，1H)，2.25-2.19(m，1H)，1.78-1.47(m，6H)；MS m/z 511.3(M+1)。
實施例44-(2-咪唑-1-基-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]哌啶-1-基-甲酮
向石英反應容器(2mL)中加入在NMP(0.3mL)中的[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基-氨基)-苯基]-哌啶-1-基甲酮(43mg，0.1mmol)和咪唑(20.4mg，0.3mmol)。然後將該反應容器放入微波反應器的腔內(Emrys優化器)並在200℃照射30分鐘。通過製備型HPLC純化粗反應混合物，得到4-(2-咪唑-1-基-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]哌啶-1-基-甲酮的三氟乙酸鹽(18.7mg)，為淺黃色固體；1H NMR 400MHz(MeOH-d4)d 9.52(s，1H)，8.58(s，1H)，8.26(s，1H)，7.91(d，2H，J＝6.8Hz)，7.86(d，2H，J＝8.8Hz)，7.65(m，3H)，7.56(d，1H，J＝7.6Hz)，7.51(d，2H，J＝8.8Hz)，3.70-3.49(m，4H)，1.77-1.60(m，6H)；MS m/z 465.3(M+1)。
實施例5{4-[9-苯基-2-(喹啉-3-基氨基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮 向試管內加入[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基甲酮(43mg，0.1mmol)、3-氨基喹啉(21.6mg，0.15mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(7mg，0.008mmol)、2-(二-叔-丁基膦基)聯苯(8.9mg，0.03mmol)、磷酸鉀(100mg，0.47mmol)，抽真空並反充氮氣。在氮氣下加入DME(0.7mL)。將該反應混合物在85℃攪拌16小時。將所得淺棕色混懸液冷卻至室溫並通過製備型HPLC純化，得到{4-[9-苯基-2-(喹啉-3-基氨基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮的三氟乙酸鹽(24.5mg)，為黃色固；1H NMR400MHz(MeOH-d4)d 9.29(d，1H，J＝2.4Hz)，9.13(d，1H，J＝2.0Hz)，8.18(s，1H)，7.92(d，1H，J＝8.4Hz)，7.81-7.70(m，7H)，7.58(t，2H，J＝8.0Hz)，7.48(t，1H，J＝7.2Hz)，7.30(d，2H，J＝8.4Hz)，3.87-3.35(m，4H)，1.80-1.43(m，6H)；MS m/z 541.3(M+1)。
實施例6N2-(4-氨基-環己基)-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-9-苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺 在150℃和真空下將分子篩(4A，12.0g)乾燥過夜並冷卻至室溫。然後加入2-氟-6-氯-嘌呤(6.0g，35mmol)、苯基代硼酸(8.3g，70mmol)、乙酸銅(9.0g，52mmol)和三乙胺(19mL，140mmol)並在乾燥二噁烷(100mL)中混合。以連接的乾燥管將該反應混合物在室溫下攪拌2天。在反應完成後，將該反應混合物在二氯甲烷(200mL)中稀釋，通過硅藻土墊過濾並用二氯甲烷(200mL)洗滌。合併有機相併通過旋轉蒸發除去溶劑。通過矽膠快速柱色譜法純化粗產物，用己烷/乙酸乙酯(2∶1)作為洗脫劑，得到2-氟-6-氯-9-苯基-9H-嘌呤(2.1g，24％)，為淡黃色固體，MS m/z 249.1(M+1)。
將2-氟-6-氯-9-苯基-9H-嘌呤(50mg，0.20mmol)、4-嗎啉-4-基-苯基胺(39mg，0.22mmol)和二異丙基乙胺(35μL，0.2mmol)在1-丁醇(0.4mL)中混合。將該反應在80℃攪拌2小時，此後加入反式1，4-環己烷二胺(68mg，0.6mmol)和二異丙基乙胺(70μL，0.4mmol)。將該反應混合物在110℃攪拌過夜。通過旋轉蒸發除去溶劑。將粗混合物重新溶於DMSO並通過HPLC純化，得到N2-(4-氨基-環己基)-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-9-苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺的三氟乙酸鹽，為白色粉末；1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ9.29(s，1H)，8.23(1 1H)，7.84(t，4H，J＝9.4Hz)，7.51(t，2H，J＝8.0Hz)，7.35(t，1H，J＝7.2Hz)，6.84(d，2H，J＝9.2Hz)，6.48(d，1H，J＝7.2Hz)，3.71(t，4H，J＝4.8Hz)，3.57(s，1H)，3.01(t，4H，J＝4.8Hz)，1.93(d，2H，J＝12Hz)，1.77(d，2H，J＝11.2Hz)，1.24(m，4H)，0.90(t，1H，J＝7.2Hz)；MS m/z 485.3(M+1)。
實施例7N2-(4-氨基-環己基)-N6-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-9-苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺 將1-氯-3-硝基-苯(1.0g，7mmol)與1-甲基-哌嗪(2.0mL)混合併將該反應加蓋，在190℃攪拌2小時。反應後，通過旋轉蒸發除去過量的1-甲基-哌嗪，得到粗產物，為黃色油狀物。通過矽膠快速柱純化粗產物，得到1.2g1-甲基-4-(3-硝基-苯基)-哌嗪(產率78％)。
將1-甲基-4-(3-硝基-苯基)-哌嗪(1.2g，5.4mmol)溶於甲醇(50mL)並向該溶液中加入Pd/C(5％，120mg)。將氫氣囊與燒瓶連接。將該溶液在室溫下攪拌過夜。在反應完成後，過濾Pd/C，收集濾液且通過旋轉蒸發濃縮，得到3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基胺。
將2-氟-6-氯-9-苯基-9H-嘌呤(50mg，0.20mmol)、3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基胺(42mg，0.22mmol)和二異丙基乙胺(35μL，0.2mmol)在1-丁醇(0.4mL)中混合。將該反應在80℃攪拌2小時，此後加入反式1，4-環己烷二胺(68mg，0.6mmol)和二異丙基乙胺(70μL，0.4mmol)。將該反應混合物在110℃攪拌過夜。通過旋轉蒸發除去溶劑，將粗產物重新溶於DMSO並通過HPLC純化，得到N2-(4-氨基-環己基)-N6-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-9-苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺，為白色粉末；1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ9.12(s，1H)，8.16(s，1H)，7.78(d，2H，J＝6.0Hz)，7.58(d，1H，J＝7.6Hz)，7.42(m，2H)，7.24(m，2H)，7.00(t，1H，J＝8.0Hz)，6.48(m，2H)，3.53(s，1H)，3.25(m，4H)，3.01(t，4H，J＝4.8Hz)，2.09(s，3H)，1.74(m，2H)，1.66(s，2H)，0.92(m，4H)，0.79(t，1H，J＝7.2Hz)；MS m/z 498.3(M+1)。
實施例81-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮 將1-(4-氨基-苯基)-乙酮(1.0g，7.4mmol)與2-氟-6-氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1.90g，7.4mmol)、二異丙基乙胺(1.54mL，8.9mmol)和正丁醇50mL混合。將該反應在95℃攪拌14小時。在冷卻至室溫並除去溶劑後，通過使用MeOH/DCM(5％∶95％)的快速色譜法純化粗產物，得到1-{4-[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，為白色固體2.49g。
將1-{4-[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(100mg，0.28mmol)與2-甲基-嗎啉HCl鹽(58mg，0.45mmol)、二異丙基乙胺(121μL，0.70mmol)和5mL正丁醇混合。將該反應在100℃攪拌14小時。在冷卻並除去溶劑後，通過使用EA/己烷(1∶1)的快速色譜法純化粗產物，得到1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，為黃色固體115mg。
將1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(115mg，0.26mmol)溶於10mL乙醇並與200μLTFA混合。將該反應在60℃攪拌2小時。在冷卻至室溫並完全除去溶劑和TFA後，將粗產物與碘化銅(I)(50mg，0.26mmol)和磷酸鉀(220mg，0.8mmol)混合併脫氣，重新填充乾燥的氮氣。加入在DMF(4mL)中的N′，N′-二甲基乙二胺(46mg，0.52mmol)和碘-噻唑(53mg，0.26mmol)，並將該混合物在90℃攪拌14小時。在冷卻至室溫後，加入AcOH-MeOH(1∶10，1.6mL)以中和該混合物，隨後通過注射器式濾器過濾。在除去溶劑後，將粗產物溶於DMSO並通過製備型HPLC純化，得到淺色固體1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮71mg。1H NMR 600MHz(DMSO-d6)δ10.21(s，1H)，9.26(d，1H，J＝2.2)，8.60(s，1H)，8.27(d，1H，J＝2.0Hz)，8.07(d，2H，J＝8.8Hz)，7.95(d，2H，J＝8.8Hz)，4.50(dd，2H，J＝3.0Hz)，3.95(dd，1H，J＝2.6Hz)，3.59(m，2H)，3.04(m，1H)，2.72(m，1H)，2.54(s，3H)，1.22(d，3H，J6.2Hz)；MS m/z 436.2(M+1)。
實施例9(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺 將4-甲磺醯基-苯基胺(1.27g，7.4mmol)與2-氟-6-氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1.90g，7.4mmol)、二異丙基乙胺(1.54mL，8.9mmol)和正丁醇50mL混合。將該反應在95℃攪拌14小時。在冷卻至室溫並除去溶劑後，通過使用MeOH/DCM(7％∶93％)的快速色譜法純化粗產物，得到[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺醯基-苯基)-胺，為白色固體2.75g。
將[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺醯基-苯基)-胺(110mg，0.28mmol)與4-哌啶-4-基-嗎啉(76mg，0.45mmol)、二異丙基乙胺(121μL，0.70mmol)和5mL正丁醇混合。將該反應在100℃攪拌14小時。在冷卻並除去溶劑後，通過使用EA/己烷(6∶4)的快速色譜法純化粗產物，得到(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]胺，為黃色固體145mg。
將(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-胺(145mg，0.26mmol)溶於10mL乙醇並與200μL TFA混合。將該反應在60℃攪拌2小時。在冷卻至室溫並完全除去溶劑和TFA後，將粗產物與碘化銅(I)(50mg，0.26mmol)和磷酸鉀(220mg，0.8mmol)混合、脫氣並重新充添乾燥的氮氣。加入在DMF(4mL)中的N′，N′-二甲基乙二胺(46mg，0.52mmol)和碘-噻唑(53mg，0.26mmol)並將該混合物在90℃攪拌14小時。在冷卻至室溫後，加入AcOH-MeOH(1∶10，1.6mL)以中和該混合物，隨後通過注射器式濾器過濾。在除去溶劑後，將粗產物溶於DMSO並通過製備型HPLC純化，得到白色固體(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺95mg。1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ10.44(s，1H)，9.41(s，1H)，8.72(s，1H)，8.40(d，1H，J＝2.4Hz)，8.31(d，2H，J＝8.8Hz)，8.01(d，2H，J＝8.0Hz)，4.86(d，2H，J＝12.8Hz)，3.71(s，4H)，3.52(m，4H)，3.33(s，3H)，3.15(t，2H，J＝12.0Hz)，2.06(d，2H，J＝11.2Hz)，1.55(m，2H)；MS m/z 541.3(M+1)。
實施例10N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺 將2-氟-6-氯嘌呤(17.26g，100mmol)、3，4-二氫-2H-吡喃(12.62g，150mmol)和對甲苯磺酸一水合物(1.90g，10mmol)的混合物溶於無水二氯甲烷(200mL)並在室溫下攪拌4小時。過濾該反應混合物，用Na2CO3(10％水溶液，100mL)和水(100mL)洗滌並用Na2SO4乾燥有機層。蒸發溶劑，得到油狀物，將其與乙酸乙酯(10mL)和己烷(60mL)一起研磨以誘發沉澱形成。通過過濾收集產物2-氟-6-氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤。
將2-氟-6-氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(2.56g，10mmol)、4-(甲硫基)苯胺(1.39g，10mmol)和DIEA(1.93g，15mmol)在乙醇(20mL)中的混合物在78℃攪拌過夜。將該混合物冷卻至室溫。蒸發溶劑，隨後進行柱色譜(EtOAc/DCM 10％至30％)，得到[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲硫基-苯基)-胺，為白色固體。
向上述獲得的化合物(3.33g，9.25mmol)在DCM(10mL)中的溶液中逐步緩慢地加入3-氯過氧苯甲酸(6.22g，最大77％，27.8mmol)(在冰浴中)。在添加後，將該混合物在室溫下再攪拌2小時。用DCM(50ml)稀釋該混合物並用飽和Na2S2O3(50ml)和飽和NaHCO3(50mL×2)洗滌混懸液，直到有機相澄清。用水(50ml)和鹽水(50ml)進一步洗滌有機層並用MgSO4乾燥。蒸發溶劑，隨後進行柱色譜(EtOAc/DCM 30％至70％)，得到[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲基磺醯基-苯基)-胺，為淺黃色固體。
將2-氟嘌呤底物(4.6g，11.8mmol)和2-(氨基甲基)吡啶(15.0g)的混合物在84℃的油浴中加熱過夜。使該混合物分配在乙酸乙酯(200mL)與水(200mL)之間。用NH4Cl(2×150mL，飽和水溶液)和水(200mL)洗滌有機相併用Na2SO4乾燥。蒸發溶劑，得到粗產物，將其不經進一步純化用於下一步反應。
在60℃將上述獲得的化合物(1.93g，4.02mmol)與對甲苯磺酸一水合物(950mg，5.0mmol)在甲醇(20mL)中攪拌至不再檢測出原料(通過TLC或LC-MS監測)。加入三乙胺(1.0mL)。隨該反應混合物冷卻至室溫，沉澱形成，通過過濾收集，得到脫保護的產物。
將脫保護的2，6-二取代的嘌呤(1.98g，5.0mmol)、CuI(475mg，2.50mmol)和K3PO4(3.18g，15mmol)在燒瓶中合併(反充氮氣)。加入在DMF(9.0mL)中的反式-N，N′-二甲基環己烷-1，2-二胺(355mg，2.50mmol)和4-溴噻唑(932mg，88％純，5.0mmol)並將該混合物在88℃攪拌過夜。在將該混合物冷卻至室溫後，加入乙酸(1.0mL)並將該混合物通過注射器式濾器過濾(用DMF洗滌)。通過反相製備型LC-MS純化濾液(乙腈/水/TFA梯度10-90％CH3CN，7.5分鐘內，Ultro 1205μM C18Q，75×30mmID)。將所收集的產物的水/MeCN溶液蒸發以除去乙腈。加入NaHCO3(飽和水溶液)以使pH升至9。用DCM萃取產物並用Na2SO4乾燥有機相。蒸發溶劑，得到產物，為游離鹼N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺，為白色粉末；1H NMR 400MHz(d-DMSO)δ10.21(s，1H)，9.26(s，1H)，8.53-7.70(m，9H)，7.42(d，1H，J＝8.0Hz)，7.24(t，1H，J＝6.0Hz)，4.67(d，2H，J＝5.6Hz)，3.17(s，3H)，MS m/z 479.3(M+1)。
實施例11R-(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺 將N-苄基乙醇胺(9.06g，60mmol)與(R)-(+)-氧化丙烯(6.96g，99％，120mmol)在密封試管內於45℃攪拌過夜。在真空中蒸發過量的氧化丙烯，得到二醇殘餘物，將其直接用於下一步。
將所述二醇溶於二噁烷(60mL，無水)。加入KOH(10.08g，180mmol)和三(3，6-二氧雜庚基)胺(200mg，0.62mmol)，並將該混合物冷卻至0℃，此後滴加甲苯磺醯氯(12.58g，66mmol，在60mL無水二噁烷中)。將該反應混合物在0℃攪拌45分鐘，此後將其溫至室溫並再攪拌4小時。過濾該反應混合物並在真空中蒸發濾液。向產物中加入HCl(2N，200mL)，並用乙酸乙酯(150mL×2)洗滌所得酸性水溶液，將該溶液冷卻至0℃並通過添加NaOH中和。然後用乙酸乙酯萃取產物。用Na2SO4乾燥有機相且然後進行蒸發。對殘餘物進行色譜處理(含5～20％乙酸乙酯的DCM)，得到環化產物(6.66g)。
將游離鹼轉化成HCl鹽並如下重結晶用HCl(2M乙醚溶液，50mL)處理上述獲得的游離鹼並進行蒸發，得到HCl鹽。將該鹽(6.0克)與乙酸乙酯(120mL)混合併加熱至回流。謹慎滴加EtOH，直到全部固體溶解。然後將該體系冷卻至室溫並保持在冰箱內過夜。過濾獲得的沉澱，得到純產物(2.8g)。
在壓力(55psi)和室溫下用10％Pd/C(0.20g)氫化重結晶的鹽(1.35g，5.94mmol)在乙醇(30mL)中的溶液。將該混合物通過硅藻土過濾(用EtOH洗滌)並蒸發濾液，得到油狀物。添加乙醚且隨後蒸發，得到R-2-甲基嗎啉鹽酸鹽，為固體。
將2-氟嘌呤底物(4.6g，11.8mmol)、R-2-甲基嗎啉鹽酸鹽(1.78g，12.9mmol)和DIEA(3.78g，29.4mmol)在乙醇(20ml)中的混合物回流過夜。蒸發乙醇並將殘餘物重新溶於DCM(100ml)。將其用飽和NaHCO3(50ml)、水(50ml)、鹽水(50ml)洗滌並用MgSO4乾燥。蒸發溶劑，隨後進行柱色譜(EtOAc/DCM 30％至50％)，得到R-4-甲磺醯基-苯基)-(2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)-胺，為淺棕色固體。
在60℃將上述獲得的化合物(1.90g，4.02mmol)與對甲苯磺酸一水合物(380mg，2.0mmol)在甲醇(20mL)中攪拌至不再檢測出原料(通過TLC或LC-MS監測)。加入三乙胺(0.5mL)並蒸發乙醇。進行柱色譜(MeOH/DCM0至5％)，得到脫保護的產物。
將2，4-二溴噻唑(5.00g，20.7mmol)放入已經反充三次氬氣的燒瓶中。加入無水乙醚(82mL)並將該溶液冷卻至-78℃。加入正-丁基鋰(2.5M環己烷溶液，10.0mL)並將該反應混合物在-78℃攪拌90分鐘，此後用HCl/乙醚溶液(2.0m×15mL)猝滅。將該反應混合物溫至室溫。用NaHCO3(飽和水溶液，60ml)洗滌該混合物並用Na2SO4乾燥有機相。蒸發後，得到4-溴噻唑，為粗產物。
將脫保護的2，6-二取代的嘌呤(1.44g，3.71mmol)、CuI(352mg，1.86mmol)和CS2CO3(3.62g，3.0eq)在燒瓶中合併(預先用氬氣反充)。加入在DMF(8.0mL)中的反式-N，N-二甲基環己烷-l，2-二胺(264mg，1.86mmol)和4-溴噻唑(691mg，88％純，3.71mmol)並將該混合物在88℃攪拌過夜。在將該混合物冷卻至室溫後，加入乙酸(1.0mL)並通過注射器式濾器(用DMF洗滌)過濾該混合物。通過反相製備型LC-MS(乙腈/水/TFA梯度10-90 10％CH3CN，7.5分鐘內，Ultro 1205uM CI8Q，75×30mmID)純化濾液。將所收集的產物的水/MeCN溶液蒸發以除去乙腈。加入NaHCO3(飽和水溶液)以使pH升至9。用DCM萃取產物並用Na2SO4乾燥有機相。蒸發溶劑，得到R-(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺，為游離鹼/白色粉末；1H NMR 400MHz(CDCl3)δ9.69(s，1H)，8.87(d，1H，J＝2.4Hz)，8.83(s，1H)，8.26(d，1H，J＝2.4Hz)，8.07(d，2H，J＝8.8Hz)，7.95(d，2H，J＝8.8Hz)，4.53(t，2H，J＝10.8Hz)，4.10-4.07(m，1H)，3.74-3.65(m，2H)，3.25-3.10(m，1H)，3.08(s，3H)，2.90-2.84(m，1H)，1.33(d，3H，J＝6.4Hz)；MS m/z 472.3(M+1)。
實施例121-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮
將1-(4-氨基-苯基)-乙酮(1.0g，7.4mmol)與2-氟-6-氯-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1.90g，7.4mmol)、二異丙基乙胺(1.54mL，8.9mmol)和正丁醇50mL混合。將該反應在95℃攪拌14小時。在冷卻至室溫並除去溶劑後，通過使用MeOH/DCM(5％∶95％)的快速色譜法純化粗產物，得到1-{4-[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，為白色固體2.49g。
將1-{4-[2-氟-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(100mg，0.28mmol)與甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-胺(58mg，0.45mmol)、二異丙基乙胺(121μL，0.70mmol)和5mL正丁醇混合。將該反應在100℃攪拌14小時。在冷卻並除去溶劑後，通過使用EA/己烷(1∶1)的快速色譜法純化粗產物，得到1-{4-[2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，為黃色固體115mg。
將1-{4-[2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-(四氫-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(115mg，0.26mmol)溶於10mL乙醇並與200μL TFA混合。將該反應在60℃攪拌2小時。在冷卻至室溫並完全除去溶劑和TFA後，將粗產物與碘化銅(I)(50mg，0.26mmol)和磷酸鉀(220mg，0.8mmol)混合、脫氣且重新充填乾燥的氮氣。加入在DMF(4mL)中的N′，N′-二甲基乙二胺(46mg，0.52mmol)和碘-噻唑(53mg，0.26mmol)並將該混合物在90℃攪拌14小時。在冷卻至室溫後，加入AcOH-MeOH(1∶10，1.6mL)以中和該混合物，隨後通過注射器式濾器過濾。在除去溶劑後，將粗產物溶於DMSO並通過製備型HPLC純化，得到淺黃色固體1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ10.22(s，1H)，9.28(d，1H，J＝2.3)，8.61(s，1H)，8.25(d，1H，J＝2.1Hz)，8.12(d，2H，J＝8.7Hz)，7.98(d，2H，J＝8.7Hz)，3.57(m，4H)，3.21(t，1H，J＝4.6Hz)，3.10(s，3H)，2.79(d，3H，J＝4.6Hz)，2.55(s，3H)，2.00(m，4H)(MS m/z 463.3(M+1)。
通過重複上述實施例中所述步驟、使用合適的原料獲得如表1、2和3中確定的下列式I化合物。
表1


















表1中的成分合併成式I化合物，例如，化合物13的成分合併成具有如下結構的N2-(1-苄基-哌啶-4-基)-9-苯基-N6-[4-(哌啶-1-磺醯基)-苯基]-9H-嘌呤-2，6-二胺
類似地，表2中的成分合併成式I化合物，例如，化合物425的成分合併成具有如下結構的(4-{2-[2-(4-甲基-噻唑-5-基)-乙氧基]-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-哌啶-1-基-甲酮 表2



表3




















表3中的成分合併成式I化合物，例如，化合物605的成分合併成具有如下結構的[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(四氫-吡喃-4-磺醯基)-苯基]-胺 試驗通過下列藥理試驗的結果(實施例10-13)闡釋本發明化合物在治療涉及Flt3和/或FGFR3受體酪氨酸激酶活性失調的疾病中的功效。這些實施例用於解釋本發明，而不以任何方式限定本發明的範圍。
實施例13Flt-3活性的產生和測定在有或沒有不同濃度抑制劑存在下，通過測定33P從33P-ATP向適宜底物的摻入來檢測活性。
使用純化的GST-Flt-3的酪氨酸蛋白激酶試驗在40μL終體積中進行，所述終體積含有500ng酶於激酶緩衝液中(30mM Tris-HCl(pH7.5)、3mMMnCl2、15mM MgCl2、1.5mM DTT、15μM Na3VO4、7.5mg/ml PEG、0.25μM聚-EY(Glu，Tyr)、1％DMSO(在最高濃度化合物下)、10μM ATP和γ-33P-ATP(0.1μCi))。製備兩種溶液第一種10μl溶液含有Flt-3酶和抑制劑。第二種溶液含有在30μl激酶緩衝液中的底物(聚-EY)、ATP和γ-33P-ATP。將兩種溶液在預先用70％乙醇溼潤並用1M Tris(7.4)衝洗的96-孔PVDF濾板(Millipore，Bedford，MA，USA)上混合。將該反應在室溫下孵育20分鐘，用0.1％磷酸終止，然後用多頭抽真空裝置通過平板過濾，使底物與膜結合。然後用0.1％磷酸將平板洗滌5次，固定在PackardTopCount 96-孔連接平板並向各孔中加入50μL Microscint TM(Packard)，此後計數。
通過對每種化合物(一式兩份)在8種濃度下(從1μM-0.0005μM按照1∶3稀釋)的百分比抑制進行線性回歸分析，計算IC50值。在本試驗中，本發明化合物的IC50值在0.1nM-2μM範圍內。
實施例14一般技術包括將可能的抑制劑對依賴於突變體Flt3進行增殖的細胞系的作用與對不依賴於突變體Flt3進行增殖的細胞系的作用進行比較。選擇在Flt3+細胞系與Flt3-細胞系之間具有不同活性(敏感性差異大於或等於10倍)的化合物用於進一步研究。
用於初步篩選的細胞係為Ba/F3細胞的亞系，其被設計以便在感染表達合適的Flt3 cDNA的反錄病毒後過量表達突變體或野生型(未突變的)Flt3。母細胞系Ba/F3依賴於白細胞介素-3進行增殖，而當喪失IL-3時，細胞迅速停止增殖並死亡。反錄病毒自反錄病毒LTR表達Flt3和自IRES位點表達neo基因。在G418中選擇Ba/F3細胞並通過螢光激活細胞分類術(FACS)分析Flt3的表達。使用具有兩種不同Flt3突變的細胞系。一種突變體表達由外顯子11編碼的近膜結構域中具有14個胺基酸重複的Flt-3，具體的重複為…VDFREYEYDLKWEF…(稱作Ba/F3-Flt3-ITD)。第二種突變具有將835位上的天冬醯胺轉化成酪氨酸的點突變(稱作Ba/F3-Flt3-D835Y)。兩種突變均導致Flt-3激酶活化並使其不依賴於IL-3，表達的細胞在沒有IL-3存在下生長。類似地產生表達野生型Flt3的Ba/F3細胞並將其用作「對照」細胞系。親代(未感染的)細胞系和野生型「對照」細胞保持依賴於IL-3進行增殖。
將Ba/F3細胞(-對照、-Flt3-ITD或-Flt3-D835Y)培養至在30mL培養物中達到500,000個細胞/mL，用含有10％胎牛血清的RPMI 1640作為培養基。用於對照細胞(但不是突變體-Flt3細胞)的培養基含有來自WEHI-3B細胞系的10％條件培養基作為IL-3源。製備各化合物在二甲亞碸(DMSO)中的10mM「儲備」溶液。然後在含有10％胎牛血清的RPMI 1640中製備稀釋液，使最終藥物濃度典型地為1nM-10μM。由DMSO製成類似的稀釋液用作載體對照。在添加化合物後48小時，檢測細胞的增殖率和細胞毒性。
向細胞中加入Yo-Pro-l碘化物(分子探針)，在NaCl/檸檬酸Na緩衝液中的終濃度為2.5μM。將細胞與Yo-Pro在室溫下孵育10分鐘，然後在螢光計上讀數，以測定細胞毒性。接下來用NP40/EDTA/EGTA緩衝液將細胞裂解90分鐘，在室溫下孵育90分鐘並讀數，以測定增殖。
用表達Flt3-D835Y的細胞進一步測試選擇性地對Ba/F3-Flt3-ITD細胞比對野生型對照Ba/F3細胞更具毒性的化合物。
另外，在暴露於不同濃度活性化合物前後，使用α-Flt3抗體免疫沉澱Flt3蛋白。通過十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠分離免疫沉澱的蛋白，通過電泳方式轉至PVDF膜，並用α-磷-591Y-Flt3抗體進行免疫印跡。本試驗測定化合物是否可以降低突變形式受體特徵性的Flt3「自磷酸化」水平。
本發明的化合物一般在納摩爾範圍內表現出對Flt3-ITD的抗增殖活性，而對對照-Flt3在達10μM下也沒有毒性。本發明的化合物在納摩爾範圍內還減少細胞Flt-3的自磷酸化活性。
游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式I化合物表現出有價值的藥理學特性，例如，如本申請中所述的體外試驗所示。例如，在上述試驗中，式I化合物對Flt3表現出的IC50優選在1×10-10-2×10-6M範圍內，優選低於100nM。例如，{4-[2-(4-氨基-環己基氨基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮在實施例14所述試驗中的IC50為5nM，而在實施例13所述試驗中表現出的IC50為7nM。
實施例15FGFR3活性的測定在有或沒有不同濃度抑制劑存在下，通過使用HTRF測定肽底物的磷酸化來檢測活性。
使用純化的FGFR3(Upstate)的酪氨酸蛋白激酶試驗在10μL終體積中進行，所述終體積含有激酶緩衝液(30mM Tris-HCl pH7.5、15mMMgCl2、4.5mM MnCl2、15μM Na3VO4和50μM/mL BSA)中的0.25μg/mL酶以及底物(5μg/mL生物素-聚-EY(Glu，Tyr)(CIS-US，Inc.)和3μMATP)。製備兩種溶液第一種5μl溶液含有在激酶緩衝液中的FGFR3酶，首先將其配入384-格Proxiplate_(Perkin-Elmer)，隨後添加50nL溶於DMSO的化合物，然後向各孔中加入5μl第二種溶液，其含有在激酶緩衝液中的底物(聚-EY)和ATP。將反應在室溫下孵育1小時，通過添加10μLHTRF檢測混合物終止，所述檢測混合物含有30mM Tris-HCl pH7.5、0.5MKF、50mM ETDA、0.2mg/mL BSA、15μg/mL鏈黴抗生物素蛋白-XL665(CIS-US，Inc.)和150ng/mL穴狀化合物綴合的抗-磷酸酪氨酸抗體(CIS-US，Inc.)。在室溫下孵育1小時以使鏈黴抗生物素蛋白-生物素相互作用後，在Analyst GT(Molecular Devices Corp.)上讀取時間分辨螢光信號。
通過對每種化合物(一式兩份)在12種濃度(從10μM-0.05nM按照1∶3稀釋)下的百分比抑制進行線性回歸分析，計算IC50值。在本試驗中，本發明化合物的IC50值在0.1nM-2μM範圍內。
實施例16一般技術包括將可能的抑制劑對依賴於FGFR3進行增殖的細胞系的作用與對不依賴於FGFR3進行增殖的細胞系的作用進行比較。選擇在FGFR3+細胞系與FGFR3-細胞系之間具有不同活性(敏感性差異大於或等於10倍)的化合物用於進一步研究。
用於初步篩選的細胞係為Ba/F3細胞的亞系，其被設計成在感染表達TEL-FGFR3 cDNA的反錄病毒後過量表達TEL-FGFR3融合體。母細胞系Ba/F3依賴於白細胞介素-3(IL-3)進行增殖，而當喪失IL-3時，細胞迅速停止增殖並死亡。相反，在FGFR3過量表達的Ba/F3細胞中，TEL-FGFR3融合體導致配體-獨立性FGFR3二聚化和隨後的FGFR3激酶活化，使得過量表達的Ba/F3細胞在沒有IL-3存在下生長。
將野生型Ba/F3和轉化的Ba/F3(-TEL-FGFR3)細胞在混懸液中培養至800,000個細胞/mL，使用補充了10％胎牛血清的RPMI 1640作為培養基。用於對照細胞的培養基含有10ng/ml重組IL-3(RD Research)。製備各化合物在二甲亞碸(DMSO)中的10mM「儲備」溶液。然後稀釋入DMSO中，使最終藥物濃度典型地為0.05nM-10μM。在添加化合物後48小時，檢測細胞的增殖率。將AlamarBlue_(TREK Diagnostic Systems)加入到細胞中，在細胞培養基中的終濃度為10％。將細胞與AlamarBlue_在37℃組織培養箱內孵育4小時，然後在螢光讀出器中讀數，以測定增殖。
另外，在用抗-磷酸化-FGFR3抗體免疫印跡的Western印跡中，檢測暴露於不同濃度活性化合物後過量表達Ba/F3的裂解物中的磷酸化TEL-FGFR3蛋白水平。本試驗測定化合物是否可以降低突變型受體特徵性的FGFR3的「自磷酸化」水平。
本發明的化合物一般在納摩爾範圍內表現出對TEL-FGFR3的抗增殖活性，而對野生型Ba/F3在達10μM下也沒有毒性。本發明的化合物在納摩爾範圍內還降低細胞TEL-FGFR3的自磷酸化活性。
實施例17Upstate KinaseProfilerTM-放射酶濾膜結合試驗對本發明化合物抑制一組激酶(部分非限制性激酶目錄包括cSRC、Lck、FGFR3、F1t3、TrkB和PFGFRα)中各成員的能力進行評價。按照該一般性方案一式兩份以終濃度10μM測試化合物。注意激酶緩衝液組成和底物因「Upstate KinaseProfilerTM」組中包括的不同激酶而改變。按照該一般性方案一式兩份以終濃度10μM測試化合物。注意激酶緩衝液組成和底物因「Upstate KinaseProfilerTM」組中包括的不同激酶而改變。將激酶緩衝液(2.5μL，10x-如果需要含有MnCl2)、活性激酶(0.001-0.01單位；2.5μL)、在激酶緩衝液中的特異性或聚(Glu4-Tyr)肽(5-500μM或.01mg/ml)和激酶緩衝液(50μM；5μL)在冰上的eppendorf管中混合。加入Mg/ATP混合物(10μL；67.5(或33.75)mM MgCl2、450(或225)μMATP和1μCi/μl[γ-32P]-ATP(3000Ci/mmol))，並將該反應在約30℃孵育約10分鐘。將該反應混合物點樣(20μL)在2cm×2cm P81(磷酸纖維素，用於帶正電荷的肽底物)或Whatman No.1(用於聚(Glu4-Tyr)肽底物)正方形紙塊上。用0.75％磷酸將試驗正方形紙塊洗滌4次，每次5分鐘，並用丙酮洗滌一次5分鐘。將試驗正方形紙塊轉入閃爍瓶，加入5mL閃爍合劑，使用Beckman閃爍計數器對肽底物中摻入的32P(cpm)進行定量。對每次反應計算抑制百分比。
優選地，式I化合物在10μM濃度下對cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB和PFGFR α激酶表現出的抑制百分比大於50％，優選大於60％，更優選大於70％。例如(i)化合物539N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-N6-(4嗎啉-4-基-苯基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺表現出下列抑制特性Bmx(90％)；c-Src(97％)；Lck(99％)；FIt3(100％)；Rsk1(82％)；和TrkB(99％)；(ii)化合物554(實施例10)N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺表現出下列抑制特性Abl(98％)；Bmx(86％)；c-Src(99％)；Lck(95％)；FIt3(100％)；FGFR3(98％)；和TrkB(99％)；和(iii)化合物503(4-甲磺醯基-苯基)-(2-嗎啉-4-基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基)-胺表現出下列抑制特性Abl(81％)；Bmx(71％)；c-Src(98％)Lck(99％)；FIt3(99％)；TrkB(99％)。
應理解，本文所述實施例和實施方案僅用於解釋目的，且提示本領域技術人員可以依據它們進行各種修改和改變，這些修改和改變應包括在本申請以及待批權利要求的的實質和範圍內。本文引述的所有公開文獻、專利和專利申請在此引入作為參考用於所有目的。
權利要求
1.式I化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑合物、異構體和前體藥物 其中R1選自氫、滷素、C1-6烷基、滷素-取代的-C1-6烷基、C1-6烷氧基、滷素-取代的-C1-6烷氧基、-OXOR5、-OXR6、-OXNR5R6、-OXONR5R6、-XR6、-XNR5R6和-XNR7XNR7R7；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；其中R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R5選自氫、C1-6烷基和-XOR7；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；且R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R6選自氫、C1-6烷基、C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；或R5和R6與R5和R6所連接的氮原子一起形成C3-8雜環烷基或C5-8雜芳基；其中R5和R6所形成的任意雜環烷基中的亞甲基可以任選被-C(O)-或-S(O)2-替代；其中R6的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基或R5和R6的組合可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XOR7、-XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XNR7C(O)R7、-XOR7、-XC(O)OR7、-XC(O)R7、C1-6烷基、C3-8雜環烷基、C5-10雜芳基、C3-12環烷基和C6-10芳基C0-4烷基；其中R1的任意烷基或亞烷基可以任選帶有被二價基團替代的亞甲基，所述二價基團選自-NR7C(O)-、-C(O)NR7-、-NR7-、-C(O)-、-O-、-S-、-S(O)-和-S(O)2-；且其中R6的任意烷基或亞烷基可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自C5-8雜芳基、-NR7R7、-C(O)NR7R7、-NR7C(O)R7、滷素和羥基；其中R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R2選自氫、C6-10芳基和C5-10雜芳基；其中R2的任意芳基或雜芳基任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XOR7、-XOR8、-XC(O)OR7、-XC(O)R7、C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基、氰基、羥基、滷素和滷素-取代的-C1-6烷基；其中X和R7如上所述；且R8為C6-10芳基C0-4烷基；R3選自氫和C1-6烷基；R4選自C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；其中R4的任意亞烷基可以任選帶有被二價基團替代的亞甲基，所述二價基團選自-C(O)-、-S-、-S(O)-和-S(O)2-；其中R4的所述芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基任選被1-3個基團取代，所述基團選自滷素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、滷素-取代的-C1-6烷基、滷素-取代的-C1-6烷氧基、-XR9、-XOR9、-XS(O)0-2R7、-XS(O)0-2R9、-XC(O)R7、-XC(O)OR7、-XP(O)R7R7、-XC(O)R9、-XC(O)NR7XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XC(O)NR7R9和-XC(O)NR7XOR7；其中X和R7如上所述；其中R9選自C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基和C5-10雜芳基；其中R9的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基任選被1-3個選自C1-6烷基、-XC(O)R7和-XC(O)NR7R7的基團取代；其中X和R7如上所述。
2.權利要求1的化合物，其中R1選自氫、滷素、C1-6烷氧基、-OXOR5、-OXR6、-OXNR5R6、-OXONR5R6、-XR6、-XNR7XNR7R7和-XNR5R6；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；R5選自氫、C1-6烷基和-XOR7；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；且R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R6選自氫、C1-6烷基、C3-12環烷基C0-4烷基、C3-8雜環烷基C0-4烷基、C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；R6為氫或C1-6烷基；或R5和R6與R5和R6所連接的氮原子一起形成C3-8雜環烷基或C5-8雜芳基；其中R5和R6所形成的任意雜環烷基中的亞甲基可以任選被-C(O)-或-S(O)2-替代；其中R6的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基或R5和R6的組合可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XOR7、-XNR7R7、-XNR7C(O)R7、-XOR7、-XC(O)R7、C1-6烷基、C3-8雜環烷基和C6-10芳基C0-4烷基；其中R1的任意烷基或亞烷基可以任選帶有被二價基團替代的亞甲基，所述二價基團選自-NR7C(O)-、-C(O)NR7-、-NR7-、-O-；且其中R1的任意烷基或亞烷基可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自C5-8雜芳基、-NR7R7、-C(O)NR7R7、-NR7C(O)R7、滷素和羥基；其中R7獨立地選自氫或C1-6烷基；R2選自氫、C6-10芳基和C5-10雜芳基；其中R2的任意芳基或雜芳基任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自-XNR7R7、-XOR7、-XOR8、-XC(O)OR7、C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基、氰基、滷素、滷素-取代的-C1-6烷氧基和滷素-取代的-C1-6烷基；其中X和R7如上所述；且R8為C6-10芳基C0-4烷基；R3為氫；且R4選自C6-10芳基C0-4烷基和C5-10雜芳基C0-4烷基；其中R4的所述芳基或雜芳基被1-3個基團取代，所述基團選自滷素、-XR9、-XOR9、-XS(O)2R7、-XS(O)2R9、-XC(O)R7、-XC(O)OR7、-XP(O)R7R7、-XC(O)R9、-XC(O)NR7XNR7R7、-XC(O)NR7R7、-XC(O)NR7R9和-XC(O)NR7XOR7；其中X和R7如上所述；R9為C3-8雜環烷基C0-4烷基；其中R9任選被1-3個選自C1-6烷基、-XC(O)R7和-XC(O)NR7R7的基團取代；其中X和R7如上所述。
3.權利要求2的化合物，其中R1選自氫、滷素、C1-6烷氧基、-OXOR5、-OXR6、-OXNR5R6、-OXONR5R6、-XR6和-XNR5R6；其中X選自鍵、C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基和C2-6亞炔基；R5選自氫、甲基、羥基-乙基和甲氧基-乙基；R6選自氫、苯基、苄基、環戊基、環丁基、二甲氨基-丙烯基、環己基、2，3-二羥基-丙基、哌啶基、氨基-羰基-乙基、甲基-羰基-氨基-乙基、甲基-氨基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、1-羥基甲基-丁基、戊基、丁基、丙基、甲氧基-乙炔基、甲氧基-乙烯基、二甲基-氨基-丁基、二甲基-氨基-乙基、二甲基-氨基-丙基、四氫吡喃基、四氫呋喃基-甲基、吡啶基-甲基、氮雜庚環-1-基、[1，4]氧氮雜庚環-4-基、哌啶基-乙基、二乙基-氨基-乙基、氨基-丁基、氨基-異丙基、氨基-乙基、羥基-乙基、2-乙醯基氨基-乙基、氨基甲醯基-乙基、4-甲基-[1，4]二氮雜庚環-1-基、2-羥基-丙基、羥基-丙基、2-羥基-2-甲基-丙基、甲氧基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、2-羥基-2-苯基-乙基、吡啶基-乙基、嗎啉代-丙基、嗎啉代-乙基、吡咯烷基、吡咯烷基-甲基、吡咯烷基-乙基、吡咯烷基-丙基、吡嗪基、喹啉-3-基、喹啉-5-基、咪唑基-乙基、吡啶基-甲基、苯乙基、四氫-吡喃-4-基、嘧啶基、呋喃基、異噁唑基-甲基、吡啶基、苯並[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基、噻唑基-乙基和噻唑基-甲基；或R5和R6與R5和R6所連接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、3-氧代-哌嗪-1-基、[1，4]二氮雜庚環-1-基、嗎啉代、3-氧代-哌嗪-1-基、1，1-二氧代-lλ6-硫代嗎啉-4-基或吡唑基；其中R6的任意芳基、雜芳基、環烷基或雜環烷基或R5和R6的組合可以任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自甲基-羰基、氨基-甲基、氨基-羰基、甲基-磺醯基、甲氧基、甲氧基-甲基、甲醯基、氟-乙基、羥基-乙基、氨基、二甲基-氨基、羥基、甲基、乙基、乙醯基、異丙基、吡咯烷基、嘧啶基、嗎啉代、吡啶基和苄基；其中R6的任意烷基或亞烷基可以任選帶有被選自-NHC(O)-或-C(O)NH-的二價基團替代的亞甲基；且其中R6的任意烷基或亞烷基可以任選被1-2個獨立地選自氨基、滷素、哌啶基和羥基的基團取代。
4.權利要求2的化合物，其中R2選自氫、苯基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、噻唑基、吡嗪基、萘基、呋喃基、苯並[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基、異噻唑基、咪唑基和嘧啶基；其中R2的任意芳基或雜芳基任選被1-3個基團取代，所述基團獨立地選自甲基、異丙基、滷素、乙醯基、三氟甲基、硝基、1-羥基-乙基、1-羥基-1-甲基-乙基、羥基-乙基、羥基-甲基、氨基甲醯基、甲氧基、苄氧基、羧基、氨基、氰基、氨基-羰基、氨基-甲基和乙氧基。
5.權利要求2的化合物，其中R4選自苯基、苄基、吡啶基和1-氧代-茚滿-5-基；其中所述苯基、苄基、茚滿基或吡啶基任選被以下取代滷素、乙醯基、三氟甲基、環丙基-氨基-羰基、氮雜環丁烷-1-羰基、哌啶基-羰基、嗎啉代、甲基-羰基、哌嗪基、甲基-磺醯基、哌啶基-磺醯基、4-甲基-哌嗪基-羰基、二甲基-氨基-乙基-氨基-羰基、嗎啉代-羰基、嗎啉代-甲基、氨基-羰基、丙基-氨基-羰基、羥基-乙基-氨基-羰基、嗎啉代-乙基-氨基-羰基、4-乙醯基-哌嗪-1-羰基、4-氨基-羰基-哌嗪-1-羰基、苯基-羰基、吡咯烷基-1-羰基、丙基-羰基、丁基、異丙基-氧基-羰基、環己基-羰基、環丙基-羰基、甲基-磺醯基、二甲基-次膦醯基、4-甲基-哌嗪基-磺醯基、1-氧代-茚滿-5-基、氧雜環丁烷-3-磺醯基、氨基-磺醯基和四氫-吡喃-4-磺醯基。
6.權利要求2的化合物，選自N6-(4-甲亞磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-(四氫-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；氮雜環丁烷-1-基-{4-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-甲酮；1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮；1-{4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(4-嗎啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-嗎啉-4-基-苯基)-胺；N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N2-甲基-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2，2-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺醯基-苯基)-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺醯基-苯基)-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-乙基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-氟甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-[2-(3-甲基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N2-甲基-N6-(4-嗎啉-4-基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(2-氮雜庚環-1-基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基)-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-胺；N2-環己基-N6-[4-(二甲基-次膦醯基)-苯基]-N2-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-(四氫-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N2-環己基-N6-(4-甲亞磺醯基-苯基)-N2-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；R-(4-甲亞磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N6-(4-甲磺醯基-苯基)-N2-甲基-N2-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；{4-[6-(4-甲磺醯基-苯基氨基)-2-(甲基-吡啶-2-基甲基-氨基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇；R-(4-甲磺醯基-苯基)-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；R-4-[2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯磺醯胺；和{4-[6-(4-甲磺醯基-苯基氨基)-2-(2-甲基-嗎啉-4-基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇。
7.藥物組合物，包含治療有效量的權利要求1的化合物以及藥學上可接受的賦形劑。
8.治療動物疾病的方法，其中抑制激酶活性可以預防、抑制或改善所述疾病的病理和/或症狀，該方法包括對所述動物給予治療有效量的權利要求1的化合物。
9.權利要求8的方法，其中所述激酶選自cSRC、Lck、FGFR3、F1t3、TrkB和Bmx激酶。
10.權利要求1的化合物在製備用於治療動物疾病的藥物中的用途，其中cSRC、Lck、FGFR3、F1t3、TrkB和/或Bmx的激酶活性對所述疾病的病理和/或症狀起作用。
全文摘要
本發明提供了一類新化合物、包括這類化合物的藥物組合物和使用這類化合物治療或預防與cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、Bmx和/或PFGFRα激酶活性相關的疾病或病症的方法。
文檔編號A61K31/522GK1835952SQ200480023425
公開日2006年9月20日 申請日期2004年8月13日 優先權日2003年8月15日
發明者成岱, 丁強, 韓東, N·S·格雷, 張國寶 申請人:Irm責任有限公司