一種水飛薊賓的製備方法
2023-12-05 16:18:46 2
專利名稱：一種水飛薊賓的製備方法
技術領域：
本發明涉及水飛薊賓的提取純化工藝，特別是一種應用矽膠層析和結晶提取純化水飛薊賓的方法。
背景技術：
水飛薊賓別名益肝靈、奶薊素、西裡馬靈化學名2, 3-Dihydro-3- (4-hydroxy-3-methoxyphenyl) ~2~ (hydroxymethyl) _6_ (3,5,7-trihydroxy-4-oxobenzopyran-2-yl)benzodioxin分子式和分子量C25H2201Q，482.44formula see original document page 3性質類白色結晶性粉末。無臭、味微苦澀，有引溼性。易溶於丙酮、乙酸乙 酯、甲醇、乙醇，略溶於氯仿，幾乎不溶於水。一水合物(甲醇-水)，mp. 180°C ；無水物， mp. 1580C (180°C分解)。藥理作用水飛薊賓有明顯的保護和穩定肝細胞的作用，用於治療急慢性肝炎、肝 硬化、肝中毒等病。對肝炎患者症狀、肝功能均有明顯的改善。具有穩定細胞及細胞內生物 膜的作用。具有抗輻射的作用。能抑制甲醛引起的腹膜炎。水飛薊素(Silmyarin，水飛薊總黃酮)是指從菊科藥用植物水飛薊種子的種 皮中提取所得的一種黃酮木脂素類化合物，呈黃色粉末，味苦。主要的活性成分有水 飛薊賓(Silybin)、異水飛薊賓(Isosilybin)、水飛薊亭(Silychristin)和水飛薊寧 (Silydianin)等四種同分異構體，有時也特指水飛薊賓，其中水飛薊賓含量為50 70%。我國水飛薊素生產廠家眾多，但技術工藝較為落後。水飛薊賓的製備通常是用乙 酸乙酯法提取，該法水飛薊賓含量少，收率低史勁松，孫達峰，顧龔平等.水飛薊素提取工 藝的改進和探討[J]，中國野生植物資源.2006，12 (25) :52-54。張守勤等《常溫超高壓提 取水飛薊素的研究》報導了一種利用超高壓技術提取水飛薊素的方法，該法壓力條件對提 取器的要求很高，使得投資成本大大升高；中國專利CN1317486《丙酮法生產水飛薊素工藝》 報導了一種用丙酮提取，石油醚脫脂的製備水飛薊賓的方法，該法中脫脂在提取之後，油脂 類成分會影響提取效果，使提取時間增加，且石油醚毒性較大，不利於擴大生產；又如中國 專利CN101260105《一種水飛薊賓的提取方法》報導了一種由水飛薊素開始，乙醇回流提取 制水飛薊賓的方法，該法乙醇用量多，能耗大，生產成本高；再如王翠豔等《水飛薊賓提取方法的研究》敘述了回流提取和超聲提取兩種製備水飛薊賓的方法，脫脂都用石油醚且用量 大，用於生產對人體有很大危害。
發明內容
本發明的目的是為了提供一種工藝簡單，溶劑毒性小，生產成本低，易於實現工業 化的水飛薊賓提取方法。本發明的目的是這樣來實現的①脫脂將水飛薊種子粉碎為20 40目，加入正己烷脫脂3次，得脫脂粗料；②提取脫脂粗料加入稀乙醇回流提取2 3次，合併得提取液；③萃取提取液減壓濃縮至無醇味，濃縮液用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯液；④矽膠層析將乙酸乙酯液與矽膠拌樣烘乾後上柱，以苯、苯-乙酸乙酯洗脫，合 並得到水飛薊主要成分洗脫液；⑤脫色水飛薊賓洗脫液減壓濃縮為浸膏，以乙醇溶液攪拌加熱直至全部溶解，力口 入活性炭，脫色0. 5 1小時，過濾，得脫色液；⑥濃縮結晶將脫色液減壓濃縮至原體積的40 60%，放冷析出晶體，晶體用熱 乙醇飽和溶解，放冷，析出水飛薊賓，濾出水飛薊賓，重複2 4次，即得白色結晶產品。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述正己烷每次用量為原料質量的8 10 倍量，每次脫脂時間為1. 5 2小時。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述稀乙醇濃度為40 50%，每次用量為 原料質量的4 6倍量。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述乙酸乙酯用量為原料質量的3 4倍量。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述矽膠柱體積為5L，矽膠為200 300目。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述分段洗脫過程為流速均保持5L/h， 先用苯洗脫矽膠直至流出液無色，再用6 4 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫至無色，最後 用2 1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫至無色，2 1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫以每 份200ml分段收集，洗脫結束後用紫外光檢測，將顯色相同的水飛薊主要成分洗脫液合併。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述脫色步驟乙醇溶液濃度為50 60%， 用量為洗脫液濃縮浸膏質量的6 8倍量。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述脫色步驟活性炭用量為溶液量的 0. 5 1%。上述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述結晶步驟熱乙醇濃度為70 80%，溫 度為60 70°C。本發明存在以下優點1)選用正己烷取代石油醚、工業汽油、氯仿等安全性較差的脫脂溶劑，使生產更安全。2)用矽膠層析和分段洗脫的方法能夠以較小的能耗完成水飛薊賓的初級純化；3)乙醇重複結晶可以提高產品純度，同時比甲醇的毒性更低。
下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 將水飛薊種子粉碎為20目，取10kg(水飛薊賓含量0.96% )加入80L正己烷，脫 脂3次，每次1. 5小時，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加40L40%稀乙醇回流提取3次， 合併提取液後減壓濃縮至無醇味，加30L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目矽膠拌樣後上5L矽膠柱，以5L/h的流速先後用苯、4 1和2 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無色為終點，以每份200ml分段收集2 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結束後用紫外光檢測，將顯色相同的13 21段洗脫液合併，減壓回收溶劑，得 浸膏113g。浸膏加入800ml 50%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入8g活性炭，回流攪 拌，脫色0. 5小時，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約480ml，用60°C的70%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態熱乙醇重複結晶2次，陰乾得針 晶成品67g(水飛薊賓含量98. 2% )。實施例2 將水飛薊種子粉碎為40目，取10kg(水飛薊賓含量0.99% )加入90L正己烷，脫 脂3次，每次1. 5小時，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加50L45%稀乙醇回流提取3次， 合併提取液後減壓濃縮至無醇味，加35L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目矽膠拌樣後上5L矽膠柱，以5L/h的流速先後用苯、5 1和1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無色為終點，以每份200ml分段收集1 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結束後用紫外光檢測，將顯色相同的13 21段洗脫液合併，減壓回收溶劑，得 浸膏119g。浸膏加入900ml 55%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入6g活性炭，回流攪 拌，脫色0. 6小時，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約450ml，用65°C的75%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態熱乙醇重複結晶3次，陰乾得針 晶成品69g(水飛薊賓含量98. 5% )。實施例3 將水飛薊種子粉碎為40目，取10kg(水飛薊賓含量0.98%)加入100L正己烷，脫 脂3次，每次2小時，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加55L50%稀乙醇回流提取2次， 合併提取液後減壓濃縮至無醇味，加35L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目矽膠拌樣後上5L矽膠柱，以5L/h的流速先後用苯、6 1和2 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無色為終點，以每份200ml分段收集2 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結束後用紫外光檢測，將顯色相同的13 21段洗脫液合併，減壓回收溶劑，得 浸膏124g。浸膏加入1000ml 60%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入5g活性炭，回流 攪拌，脫色1小時，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約400ml，用70°C的80%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態熱乙醇重複結晶4次，陰乾得針 晶成品68g(水飛薊賓含量98. 7% )。實施例4 將水飛薊種子粉碎為40目，取10kg(水飛薊賓含量0.98%)加入100L正己烷，脫脂3次，每次2小時，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加60L50%稀乙醇回流提取2次，合併提取液後減壓濃縮至無醇味，加40L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目矽膠拌樣上5L矽膠柱，以5L/h的流速先後用苯、4 1和1 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無色為終點，以每份200ml分段收集1 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結束後用紫外光檢測，將顯色相同的13 21段洗脫液合併，減壓回收溶劑，得 浸膏126g。浸膏加入1000ml 60%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入IOg活性炭，回流 攪拌，脫色1小時，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約400ml，用60°C的70%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態熱乙醇重複結晶3次，陰乾得針 晶成品71g(水飛薊賓含量99. 2% )。
權利要求
一種水飛薊賓的製備方法，其特徵在於包括以下幾個步驟①脫脂將水飛薊種子粉碎為20～40目，加入正己烷脫脂3次，得脫脂粗料；②提取脫脂粗料加入稀乙醇回流提取2～3次，合併得提取液；③萃取提取液減壓濃縮至無醇味，濃縮液用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯液；④矽膠層析將乙酸乙酯液與矽膠拌樣烘乾後上柱，以苯、苯-乙酸乙酯洗脫，合併得到水飛薊主要成分洗脫液；⑤脫色水飛薊賓洗脫液減壓濃縮為浸膏，以乙醇溶液攪拌加熱直至全部溶解，加入活性炭，脫色0.5～1小時，過濾，得脫色液；⑥濃縮結晶將脫色液減壓濃縮至原體積的40～60％，放冷析出晶體，晶體用熱乙醇飽和溶解，放冷，析出水飛薊賓，濾出水飛薊賓，重複2～4次，即得白色結晶產品。
2.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述正己烷每次用量為原料 質量的8 10倍量，每次脫脂時間為1. 5 2小時。
3.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述稀乙醇濃度為40 50%，每次用量為原料質量的4 6倍量。
4.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述乙酸乙酯用量為原料質 量的3 4倍量。
5.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述矽膠柱體積為5L，矽膠 為200 300目。
6.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述分段洗脫過程為流速 均保持5L/h，先用苯洗脫矽膠直至流出液無色，再用6 4 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫 至無色，最後用2 1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫至無色，2 1 1(ν/ν)的苯-乙酸 乙酯洗脫以每份200ml分段收集，洗脫結束後用紫外光檢測，將顯色相同的水飛薊主要成 分洗脫液合併。
7.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述脫色步驟乙醇溶液濃度 為50 60%，用量為洗脫液濃縮浸膏質量的6 8倍量。
8.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述脫色步驟活性炭用量為 溶液量的0.5 1%。
9.根據權利要求1所述水飛薊賓的製備方法，其特徵在於所述結晶步驟熱乙醇濃度為 70 80%，溫度為60 70°C。
全文摘要
本發明涉及一種水飛薊賓的製備方法。工藝步驟包括水飛薊種子粉碎為20～40目，用正己烷脫脂3次。脫脂粗料用稀乙醇回流提取。提取液減壓濃縮至無醇味，用乙酸乙酯萃取，酯相與矽膠拌樣烘乾後上柱，以苯、苯-乙酸乙酯洗脫，分段收集，合併得到水飛薊主要成分洗脫液，減壓濃縮，用乙醇溶液溶解，加活性炭攪拌脫色0.5～1小時，脫色液濾除活性炭，減壓濃縮到原體積40～60％，放冷析出晶體，晶體用熱乙醇結晶並重複2～4次，得到產品。採用本發明生產水飛薊賓，工藝簡單，溶劑毒性小，生產成本低，易於實現工業化。
文檔編號C07D407/04GK101817816SQ200910264449
公開日2010年9月1日 申請日期2009年12月23日 優先權日2009年12月23日
發明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司