確定醫院內感染的易感性的方法

2023-12-09 09:10:16

確定醫院內感染的易感性的方法
【專利摘要】本發明涉及確定患者中醫院內感染的易感性的方法，所述方法包括測定生物樣品中sCD127的表達。
【專利說明】確定醫院內感染的易感性的方法
[0001] 本發明整體上涉及醫療領域並且尤其是重症監護領域。
[0002] 更具體地，本發明涉及用於確定處於醫院重症監護的患者和/或已經遭受產生全 身性炎症反應或SIRS的諸如手術、燒傷、創傷（trauma)......的傷害（insult)的患者，尤其 是患有敗血症特別是嚴重敗血症的患者，以及優選患有敗血性休克的患者的醫院內感染的 易感性的方法。
[0003] 醫院內感染是一個主要的公共健康問題。根據定義，住院患者在病理直接傷害其 免疫能力後或由於其總體狀況而常常具有減弱的或受損的免疫防禦。這些患者，尤其是那 些營養不良或處於較小或較大年齡範圍的患者（老人、嬰兒）對一般感染並且特別是醫院 內感染的發作尤其敏感。
[0004] 重症監護病房內的醫院內感染的發生率明顯高於其他醫院病房。醫院內感染在該 部門中的高發生率可能是由於幾個內在風險因素的不利組合：患者暴露於侵入性操作（人 工通氣、導尿及其它導管插入術）、患者狀況（以及相關的合併症）的嚴重性和治療（多次 輸注、鎮靜治療）。不過，儘管採取了所有衛生和監測措施（外在風險）並考慮了這些內在 風險因素，醫院內感染的發生率仍然保持穩定或僅略有下降。
[0005] 因此，為了能夠提供個體化醫療和努力使致命結果的額外風險最小化，確定患者 的醫院內感染的易感性至關重要。
[0006] 就發明人了解，當前已知與醫院內感染易感性的增加相關的唯一免疫學標誌物 是HLA-DR標誌物（人白細胞抗原-DR)，其在發生醫院內感染的患者的單核細胞中的表達 (mHLA-DR)降低。但是，由流式細胞術確定的該標誌物的表達要求專門的設備（流式細胞 儀），該設備不能從生物平臺獲得（專門從事血液學或免疫學的實驗室保留使用）並且沒有 使用規範。因此，不能在常規基礎上進行mHLA-DR的測定。
[0007] 因此，確實需要其它免疫學標誌物，通過其可能實現患者醫院內感染的易感性的 簡單、快速預測。鑑定患醫院內感染的風險最高的人的能力可以設定更好適應且更好靶向 的預防性治療。
[0008] 在這一背景下，本發明提供了預測患者發生醫院內感染的提高的風險的新的生物 標誌物，尤其是醫院重症監護的患者和/或已經遭受產生全身性炎症反應（SIRS)的傷害 (手術、燒傷、創傷……）的患者，尤其是患有敗血症特別是嚴重敗血症的患者，並且優選患 有敗血性休克的患者。因此，確定該生物標誌物的表達水平能夠簡單、快速的確定患者對醫 院內感染的易感性並且因此採取必要的預防措施。
[0009] 因此，根據第一方面，本發明的主題是一種確定患者對醫院內感染的易感性的方 法，包括以下步驟：
[0010] -測定取自所述患者的生物樣品或待測樣品中S⑶127的表達；
[0011] -對s⑶127的表達與參考值進行比較之後得出醫院內感染的易感性增加的結 論。
[0012] 因此，本發明的確定醫院內感染的易感性的方法是一種體外或離體（ex vivo)實 施的方法。
[0013] s⑶127是⑶127( -種IL-7受體）的可溶或血漿形式。⑶127或IL-7受體的α 鏈是75kDa的糖蛋白並且是造血生長因子受體超家族的成員。它表達結合有結合CD132 (通 用Y。鏈）的膜上以形成IL-7受體。該受體在淋巴細胞分化、存活和增殖中起重要作用。 ⑶127由219個胺基酸（aa)的胞外部分、25aa的跨膜部分和195aa的胞內部分形成。由編 碼⑶127的mRNA的選擇性剪接產生的可溶性/血漿形式（稱為s⑶127)的存在由Goodwin RG et al.，Cell, 1990, 23, 941 - 951描述於1990年，但迄今為止其生物學功能仍然不為人 知。
[0014] "醫院內感染"是指任何感染，主要是細菌但也包括病毒和真菌，其在患者管理（診 斷、治療、緩解、預防或康復治療）過程中或之後發生於醫療機構，並且在開始患者管理之 時既不存在也不潛伏。當所述感染狀態在患者管理開始時並不具體知曉時，至少48小時的 時間或者比潛伏期更長的時間通常被接受定義為醫院內感染。
[0015] 本發明的"全身性炎症反應"或"SIRS"是指與以下條件中的至少兩個相關的反 應：溫度>38°C或90/分鐘；呼吸頻率>20/分鐘或paC02〈32mmHg ;白細胞計數 >12. 000/mm3 或〈4. 000/mm3 (Bone et al.，Chest, 1992, 1644 - 1655)。
[0016] 本發明的"S⑶127"是指IL-7受體的可溶形式或循環形式（也稱為血漿或血清 形式），也被稱為IL-7受體的α鏈或IL7R或IL7R-a或IL7RA或CDW127,並且尤其是 如 Goodwin et al, Cell, 1990, 23, 941 - 951 所述的以及由 Crawley et al, Journal of Immunology, 2010, 184, 4679 - 4687 所分析的。
[0017] 特別地，根據本發明的SCD127的參考核酸序列優選下列： ENSG00000168685, HPRD - ID:00893 核苷酸序列:匪 002185. 2, Vega 某 因：0TTHUMG00000090791。
[0018] 根據本發明的s⑶127的參考蛋白序列還優選下列：NP_002176XP_942460 ;版 本：NP_002176. 2GI:28610151。
[0019] 用本發明所述方法測試的樣品是取自期望確定醫院內感染易感性的患者的生物 樣品。特別地，所述生物樣品是選自那些可能含有SCD127標誌物的樣品。
[0020] 本發明對重症監護住院治療的患者和/或已經遭受產生全身性炎症反應或SIRS 諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者提供特別優選的應用。因此，用於本發明所述方 法的生物樣品優選取自重症監護住院治療的患者和/或已經遭受產生全身性炎症反應 (SIRS)的傷害（手術、燒傷、創傷……）的患者，尤其是取自患有敗血症的患者，尤其是嚴重 敗血症，並且尤其是取自患有敗血性休克的患者。在特別優選的方式中，用於本發明所述方 法的生物樣品取自患有敗血性休克的患者。
[0021] 根據第一優選實施方案，本發明的所述方法可以確定患者的醫院內感染的易感 性，即當證明與第一參考值相比測試樣品中具有S⑶127過表達時，得出醫院內感染的風險 增加的結論。
[0022] "過表達"是指統計學上顯著增加的表達水平。
[0023] 在該實施方案中，第一參考值可以對應於在取自下述的患者的生物樣品中測定的 SCD127的表達水平：所述患者是已知沒有發生醫院內感染的處於重症監護住院治療和/或 已經遭受產生全身性炎症反應（SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者，尤其是已 知沒有發生醫院內感染的患有敗血症的患者，並且優選已知沒有發生醫院內感染的患有敗 血性休克的患者。在這種情況下，形成所述第一參考值的S⑶127表達的這種測定優選平行 進行，即與來自要確定醫院內感染易感性的患者的樣品的SCD127表達的測定同時進行，盡 管所參考樣品的獲取早於測試樣品的獲取。
[0024] 第一參考樣品還可以對應於取自以下患者的樣品集中測定的s⑶127表達水平的 平均值：所述患者是已知沒有發生醫院內感染的處於重症監護住院治療和/或已經遭受產 生全身性炎症反應（SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者，尤其是已知沒有發生 醫院內感染的患有敗血症的患者，以及優選已知沒有發生醫院內感染的患有敗血性休克的 患者。在這種情況下，形成第一參考值的這種SCD127表達的測定優選在來自要確定醫院內 感染易感性的患者的樣品的SCD127表達的測定之前進行，儘管要收集的參考樣品的獲取 早於測試樣品的獲取。
[0025] 在該第一優選實施方案中，並且尤其是為了確定患有敗血性休克的患者的醫院內 感染的易感性，待測樣品中以及任選的用於獲取第一參考值的生物樣品（即，當第一參考 值從生物樣品獲取時）中s⑶127表達的測定在敗血性休克後10天之內或第10天（DlO) 進行，優選在敗血性休克後7天之內或第7天（D7)進行，更優選在敗血性休克後4天之內 或第4天（D4)進行，以及尤其是在敗血性休克後3天之內或第3天（D3)進行。
[0026] 根據第二優選實施方案，本發明的方法可以確定患者的醫院內感染的易感性，即 當與第二參考值比較時測試樣品中測定的SCD127的表達沒有顯著降低時，得出發生醫院 內感染的風險增加或醫院內感染的易感性增加的結論。在特別優選的方式中，當與第二參 考值比較時測試樣品中測定的SCD127的表達沒有降低大於25%，尤其沒有降低大於20% 時，得出發生醫院內感染的風險增加的結論。
[0027] 該第二參考值可以對應於在來自先前採集的所述相同患者的生物樣品中，即在測 試樣品之前採集的生物樣品中，所測定的s⑶127的表達水平。"在先"或"之前"是指更早 時或在採集（或獲取）測試樣品之前。
[0028] 在該第二優選實施方案中，並且尤其是為了確定患有敗血性休克的患者的醫院 內感染的易感性，測試樣品中SCD127表達的測定在敗血性休克後第10天或大約第10天 (DlO)進行，優選在敗血性休克後第7天或大約第7天（D7)進行，更優選在敗血性休克後第 4天或大約第4天（D4)進行。
[0029] 在先取樣在敗血性休克後48h內或第48h並且在所述待測樣品獲取之前至少24h 進行，並且優選在先取樣在敗血性休克後48h內或第48h進行並且所述測試樣品在在先取 樣之後48h內或在在先取樣之後第48h獲取。
[0030] 因此，在所有的情況下，在真正測定測試樣品中S⑶127表達之前，本發明的所述 方法可以包括在先獲得參考值，而不論其是第一參考值還是第二參考值，在所測試的樣品 中所檢測到的表達水平會相對該參考值進行比較從而可以得出獲取測試樣品的患者是否 具有發生醫院內感染的增加的風險的結論。
[0031] 因此，無論是否在先或同時獲取第一參考值或第二參考值，相對於這些參考值，可 以比較測試樣品中測定的S⑶127表達值。
[0032] 在其中實施本發明所述方法的樣品，本發明也稱為測試樣品，可以是人或動物來 源的，並優選人來源的。
[0033] 因此，測試樣品可以具有不同類型。特別地，該樣品是選自例如以下的生物液體： 血液、全血（如通過靜脈途徑收集液體，即含有白細胞和紅細胞、血小板和血漿的液體）、血 清、血漿和支氣管肺泡灌洗液。
[0034] 優選地，取自所述患者的測試樣品是血漿或血清樣品。
[0035] 由其可以確定參考值（無論是第一參考值還是第二參考值）的樣品也被稱為 "參考樣品"，其可以具有不同類型並且尤其是如前針對測試樣品所述的生物類型（生物液 體）。有利的是，這些生物樣品是與測試樣品相同的類型或至少是形成用於檢測和/或定量 s⑶127表達的參考的相容類型。
[0036] 特別地，為了獲得第一參考值，這些樣品優選獲取自具有相同特徵或多數共同特 徵的人，尤其是相同性別和/或相似或相同年齡和/或種族起源的作為期望確定醫院內感 染易感性的受試者或患者。在這種情況下，參考樣品還可以由任何樣品形成，而無論其是否 是生物學樣品，所述樣品之前被校準含有平均SCD127值，其對應於由取自以下的患者的樣 品的集合中所測定的水平，所述患者是已知沒有發生醫院內感染的處於重症監護住院治療 和/或已經遭受產生全身性炎症反應（SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者，尤 其是已知沒有發生醫院內感染的患有敗血症的患者，並且優選已知沒有發生醫院內感染的 患有敗血性休克的患者。在這種情況下以及根據一個特別優選的變體，所述參考樣品是取 自已知沒有發生醫院內感染的患有敗血性休克的一個或多個患者。
[0037] 特別地，為了獲得第二參考值，所示參考樣品是取自所述相同患者的生物樣品， 艮P，來自期望確定醫院內感染易感性並從其獲取測試樣品的患者，該參考樣品是在先樣品， 艮P，在測試樣品之前的較早時間獲取的生物樣品。
[0038] 在本發明中，術語"測定表達"是指體外或離體測定。該術語還旨在表示s⑶127 在蛋白水平的檢測和定量。為此，可以採用本領域技術人員公知的任何檢測和/或定量 方法用於實施本發明，而不論是否確定SCD127蛋白的存在和/或測定其表達。作為測 定s⑶127蛋白的表達的方法的例子，尤其可提及的方法可見Crawley et al, Journal of Immunology，2010, 184, 4679 - 4687。
[0039] 特別地，s⑶127表達水平的測定採用允許直接或間接確定其存在和/或定量其表 達水平的s⑶127特異性工具或試劑進行。
[0040] 在這些能夠檢測和/或定量S⑶127的工具或試劑中，具體可以提及的為特異性多 克隆或單克隆抗體，優選單克隆抗體，或其片段或衍生物，例如，"單鏈"抗體Sv。
[0041] 在這些工具或試劑中，尤其優選的是那些特異於IL-7受體的可溶性形式的，即不 識別該受體的不溶性細胞/膜形式的CD127。採用同時識別IL-7受體的可溶性形式SCD127 和細胞形式CD127的工具或試劑也是可能的，前提是可能通過其他方法區分這兩種形式， 例如所分析樣品的類型（例如血漿或血清對比於含有細胞的生物樣品或全血）。
[0042] 當在蛋白水平進行s⑶127的檢測和/或定量時，可以採用如免疫印跡、ELISA、 RIA、IRMA、FIA、CLIA、ECL、流式細胞術或免疫細胞學的標準技術。
[0043] 在特別有利的方式中，在蛋白水平測定s⑶127的表達，且優選採用ELISA技術。
[0044] 根據本發明以及尤其是該特別的實施方案中，優選採用單克隆或多克隆抗SCD127 的抗體，尤其是單克隆抗SCD127的抗體，測定SCD127的表達水平。例如，具體可以提及的 是由Beckman Coulter?供貨的人R34. 34單克隆抗SCD127的抗體或由R&D Systems?供 貨的多克隆抗s⑶127的抗體。
[0045] 所有如前所述的涉及s⑶127表達的測定的指徵和偏好無差別地應用，而不論是 用於測試樣品中或參考樣品中所述表達的測定。
[0046] 根據第二方面，本發明的進一步的主題是s⑶127表達體外或離體的測定用於確 定患者的醫院內感染的易感性的用途。
[0047] 優選地，該用途對確定下述患者的醫院內感染的易感性尤其有利：所述患者是重 症監護住院治療和/或已經遭受產生全身性炎症反應或SIRS的諸如手術、燒傷、創傷…… 的傷害的患者，尤其是患有敗血症的患者，尤其是嚴重敗血症，以及優選患有敗血性休克的 患者。優選地，本發明的用途可以確定患有敗血性休克的患者的醫院內感染的易感性。
[0048] 此外，對於根據本發明的所述用途，優選在蛋白水平測定s⑶127的表達，並且尤 其是採用ELISA技術。
[0049] 特別地，可以採用單克隆或多克隆抗s⑶127的抗體以及優選單克隆抗s⑶127的 抗體測定s⑶127的表達。如前所述的抗體也可以用於本發明的該第二方面。
[0050] 更廣泛地，上述涉及所述方法及其組合的所有優選的實施方案也形成本發明的所 述用途的優選的實施方案。
[0051] 根據第三方面，本發明的進一步的主題是用於生物樣品中S⑶127表達的體外或 離體測定的試劑盒，包括：
[0052] -可以測定所述生物樣品中s⑶127表達的特異性工具或試劑；以及
[0053] -陽性標準樣品，其為用於校準含有s⑶127的量對應於來自已知發生醫院內感 染的患者的樣品集合中所測定的平均量的樣品，和/或陰性標準樣品，其為用於校準含有 SCD127的量對應於來自已知沒有發生醫院內感染的患者的樣品集合中所測定的平均量的 樣品。
[0054] 因此，本發明的試劑盒包括可以測定所述生物樣品中和至少一種標準樣品中 s⑶127表達的特異工具或試劑。
[0055] 特別地，本發明的試劑盒可以確定患者的醫院內感染的易感性，並且尤其是患有 敗血性休克的患者。
[0056] 優選地，所述能夠測定生物樣品中s⑶127表達且包含在本發明的試劑盒中的所 述特異工具或試劑能夠檢測和/或定量SCD127的表達，而不論是在蛋白水平還是在SCD127 活性水平，優選在蛋白水平。
[0057] 根據一個特別優選的實施方案，本發明的試劑盒含有單克隆或多克隆抗SCD127 的抗體，並且尤其是單克隆抗體。
[0058] 另一個陽性標準樣品還可以是取自已知發生醫院內感染的患者的樣品。相似地， 另一個陰性標準樣品還可以是取自已知沒有發生醫院內感染的患者的樣品。無論對於陽性 還是陰性標準，該類標準樣品優選取自重症監護住院治療的和/或已經遭受產生全身性炎 症反應（SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者的一個或多個患者，尤其是患有敗 血症的一個或多個患者並且優選來自一個患有敗血性休克的患者。例如,所述試劑盒可以 含有取自下述一個或多個患者的陰性標準樣品：所述患者是已知沒有發生醫院內感染的重 症監護住院治療和/或已經遭受產生全身性炎症反應（SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷…… 的傷害的患者，尤其是已知沒有發生醫院內感染的患有敗血性休克的患者。
[0059] 優選地，所述試劑盒包括陽性標準樣品和陰性標準樣品兩者，並且尤其是每個均 選自如上所述校準的樣品中。
[0060] 本發明還涵蓋本發明的試劑盒實施本發明的方法的用途，並且尤其是確定患者 的醫院內感染的易感性，尤其是重症監護住院治療和/或已經遭受產生全身性炎症反應 (SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者，尤其是患有敗血症的患者，尤其是嚴重 敗血症,並且優選患有敗血性休克的患者。優選地,本發明的所述試劑盒的用途可以確定患 有敗血性休克的患者的醫院內感染的易感性。
[0061] 上述涉及方法及其組合的所有優選的實施方案也形成本發明的試劑盒及其用途 的優選的實施方案。
[0062] 其他多個特徵將根據下文並參考所附附圖而顯而易見，並且附圖作為非限制性的 例子是為了示例本發明主題的實施方案，其中：
[0063] -圖1顯示在患有敗血性休克的35個患者中在第1-2天（1-2)和第3-4天（3-4) 以及在30個健康志願者"HV"（A)中的IL-7血漿濃度，以及這些結果在"NS"和"S"患者組 (圖1B)和"NI"和"無 NI"患者組（圖1C)之間的比較。
[0064] **p〈0. 005vs. "HV" - Mann Whitney U -檢驗；
[0065] -圖2顯示在患有敗血性休克的35個患者中在第1-2天和第3-5天以及在30個 健康志願者"HV"中的T⑶4+細胞（圖2A)和T⑶8+細胞（圖2B)中的⑶127表達。
[0066] p〈0. 05vs. "HV" - Mann Whitney U -檢驗；§ ρ〈0· 05 -在同一患者組內時間的 趨勢-Wilcoxon paired t_ 檢驗。
[0067] -圖3顯示在患有敗血性休克的35個患者中在第1-2天和第3-4天，以及在30個 健康志願者（圖3A)中的s⑶127血漿濃度以及這些結果在"NS"或"S"患者組（圖3B)和 "NI "或"無 NI "患者組（圖3C)之間的比較。
[0068] #p〈0. 05##p〈0. 005vs. "無NI，，-Mann Whitney U -檢驗；§ ρ〈0· 05 § § ρ〈0· 005 -在同一患者組內時間的趨勢-Wilcoxon paired t -檢驗。
[0069] -圖4顯示在患有敗血性休克的35個患者中在第1-2天和第3-4天，以及在30個 健康志願者中作為每個患者組的"NI "或"無 NI "的HLA-DR標誌物的表達。
[0070] 方法
[0071] IL-7血漿濃度的測定
[0072] 用由 Bio - Rad (Bio - Plex Pro Cytokine,細胞因子和生長因子分析：BioPlexPro Reagent 試劑盒，Bio - Rad #171 - 304070 和 SinglePlex IL - 7)供貨的採用 LUMINEX? 技 術的試劑盒按照供應商的指導測定IL-7血漿濃度。
[0073] IL-7受體（CD127)的細胞表達的測定
[0074] 簡言之，50μ1全血在5μ1結合有藻紅蛋白-德克薩斯紅（E⑶）的抗⑶4抗體 (Beckman Coulter#6604727)或5μ 1 結合有ECD 的抗CD8抗體（Beckman Coulter#737659) 和10 μ 1結合有藻紅蛋白（PE)綴合的抗CD127抗體（Beckman Coulter#頂1980U)存在下 在黑暗中室溫孵育15分鐘。然後用低滲裂解法裂解紅細胞並且通過自動裂解將細胞固定 於TQ-Pr印自動系統（Beckman Coulter)上。用流式細胞術測定T CD4+或CD8+淋巴細胞 的表面上⑶127的膜表達。
[0075] 通過ELISA分析IL-7受體的可溶性形式（SCD127)
[0076] 包被
[0077] 製備 500ml 水中含有 0. 8g Na2CO3U. 4g NaHC03、0. Ig NaN3 的包被緩衝液。
[0078] 將稀釋於包被緩衝液的100 μ 1捕獲抗體（Ab)(小鼠單克隆抗體抗⑶127,人， R34. 34，Beckman Coulter? )沉積（deposited)於測定板的每個孔中（[Ab] = 8μ g/mL)。 然後蓋上板4°C孵育過夜。
[0079] 然後，吸出孔的內容物並且孔用至少300μ L的0.05% PBS-Tween2tl洗滌緩衝液 洗滌3次。每次洗滌後小心的去除所有液體。最後一次洗滌之後，板翻過來扣到吸水紙上 以去除所有的痕量的緩衝液。
[0080] 封閉
[0081] 非特異性固定採用每孔150yL封閉緩衝液封閉（10%胎牛血清（FBS)/0.05% PBS - TweenJ，並且使板37 °C孵育Ih。
[0082] 然後，再次吸出孔的內容物並且孔用至少300μ L的0.05% PBS-Tween2tl洗滌緩 衝液洗滌3次。每次洗滌後小心的去除所有液體。最後一次洗滌之後，板翻過來扣到吸水 紙上以去除所有的痕量的緩衝液。
[0083] 樣品和標準品
[0084] 用稀釋於含有5% FCS稀釋緩衝液的PBS中的重組人IL - 7Ra /⑶127Fc嵌合體 (R&D Systems -目錄號：306 -IR)獲得標準範圍，如以下表1所示並根據C. Janot-Sardet et al. Journal of Immunological Methods, 2010, 28, 115 - 123。
[0085] 表 I
【權利要求】
1. 確定患者對醫院內感染的易感性的方法，所述方法包括以下步驟： -測定取自所述患者的生物樣品或測試樣品中S⑶127的表達； -比較SCD127表達和參考值之後，得出醫院內感染的易感性增加的結論。
2. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述生物樣品取自處於重症監護住院治 療和/或已經遭受產生全身性炎症反應或SIRS的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者， 尤其是取自患有敗血症的患者，尤其是取自患有嚴重敗血症的患者。
3. 根據權利要求2所述的方法，其特徵在於，所述生物樣品來自患有敗血性休克的患 者。
4. 根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特徵在於，當與第一參考值比較證實所述 測試樣品中SCD127過表達時，得出醫院內感染的易感性增加的結論。
5. 根據權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述第一參考值對應於在取自患者的生 物樣品中測定的s⑶127表達水平，所述患者是處於重症監護住院治療和/或已經遭受產生 全身性炎症反應或SIRS的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害且已知沒有發生醫院內感染的 患者，尤其是已知沒有發生醫院內感染的患有敗血症的患者，或所述第一參考值對應於在 取自這些患者的樣品集合中所測定的SCD127表達水平的平均值。
6. 根據權利要求4或5所述的方法，其特徵在於，所述第一參考值對應於在取自已知沒 有發生醫院內感染的患有敗血性休克的患者的生物樣品中測定的SCD127表達水平，或者 對應於在取自這些患者的樣品集合中所測定的s⑶127表達水平的平均值。
7. 根據權利要求3-6任一項所述的方法，其特徵在於，所述測試樣品中以及任選的用 於獲取第一參考值的所述生物樣品中s⑶127表達的測定在敗血性休克後10天之內或第10 天（D10)進行，優選在敗血性休克後7天之內或第7天（D7)進行，更優選在敗血性休克後 4天之內或第4天（D4)進行，進一步優選在敗血性休克後3天之內或第3天（D3)進行。
8. 根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特徵在於，當與第二參考值相比，在所述測 試樣品中測定的SCD127的表達沒有顯著降低時，優選當與所述第二參考值相比，在所述測 試樣品中測定的s⑶127的表達沒有降低多於25 %，優選沒有降低多於20 %時，得出醫院內 感染的易感性增加的結論。
9. 根據權利要求8所述的方法，其特徵在於，所述第二參考值對應於在來自先前採樣 的所述相同患者的生物樣品中，即在測試樣品之前較早的時間採集的生物樣品中，測定的 SCD127表達水平。
10. 根據權利要求3和8或9任一項所述的方法，其特徵在於，所述測試樣品中的 SCD127表達的測定在敗血性休克後第10天或大約第10天（D10)進行，優選在敗血性休克 後第7天或大約第7天（D7)進行，更優選在敗血性休克後第4天或大約第4天（D4)進行。
11. 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，在先取樣在敗血性休克後48h內或第 48h並且在所述測試樣品獲取之前至少24h進行。
12. 根據權利要求10和11任一項所述的方法，其特徵在於，在先取樣在敗血性休克後 48h內或第48h進行，所述測試樣品在在先取樣之後48h內或在在先取樣之後第48h獲取。
13. 根據前述任一項權利要求所述的方法，其特徵在於，取自所述患者的所述測試樣品 是血漿或血清樣品。
14. 根據前述任一項權利要求所述的方法，其特徵在於，在蛋白水平測定SCD127的表 達，優選採用ELISA技術測定s⑶127的表達。
15. 根據前述任一項權利要求所述的方法，其特徵在於，採用抗SCD127的抗體並且尤 其是抗s⑶127的單克隆抗體測定s⑶127的表達。
16. 體外或離體SCD127測定用於確定患者對醫院內感染的易感性的用途。
17. 根據權利要求16所述的用途，其特徵在於，所述患者是重症監護住院治療和/或已 經遭受產生全身性炎症反應（SIRS)的諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者，尤其是患有 敗血症的患者，尤其是患有嚴重敗血症的患者。
18. 根據權利要求17所述的用途，其特徵在於，所述患者是患有敗血性休克的患者。
19. 根據權利要求17或18所述的用途，其特徵在於，在蛋白水平測定s⑶127的表達， 優選採用ELISA技術測定s⑶127的表達。
20. 根據權利要求16-19任一項所述的用途，其特徵在於，採用抗s⑶127的抗體並且優 選抗s⑶127的單克隆抗體測定s⑶127的表達。
21. 用於體外或離體測定生物樣品中s⑶127表達的試劑盒，所述試劑盒包括： -可以測定所述生物樣品中s⑶127表達的特異性工具或試劑；以及 -陽性標準樣品，其為用於校準以使含有的SCD127量對應於在來自已知發生醫院內感 染的患者的樣品集合中所測定的平均量的樣品，和/或陰性標準樣品，其為用於校準以使 含有的SCD127量對應於在來自已知沒有發生醫院內感染的患者的樣品集合中所測定的平 均量的樣品。
22. 根據權利要求21所述的試劑盒，其特徵在於，所述特異性工具或試劑可以檢測和/ 或定量s⑶127的表達，並且優選在蛋白水平。
23. 如權利要求21-22任一項所定義的試劑盒用於確定患者對醫院內感染的易感性中 的用途，所述患者是處於重症監護住院治療和/或已經遭受產生全身性炎症反應（SIRS)的 諸如手術、燒傷、創傷……的傷害的患者。
24. 根據權利要求23的試劑盒用於確定患有敗血性休克的患者對醫院內感染的易感 性中的用途。
【文檔編號】G01N33/53GK104246499SQ201380016796
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2013年3月22日 優先權日:2012年3月23日
【發明者】A·勒帕珀, F·微納特, A·維勒斯, G·蒙那爾特 申請人:裡昂奧斯皮思民用公司, 生物梅裡埃公司