多孔性骨填補材的製作方法

2023-12-08 11:03:31

多孔性骨填補材的製作方法
【專利摘要】一種多孔性骨填補材，包含一可被吸收代謝的多孔性硬質殼體，界定出一內部空間；及一設置於該內部空間中的纖維狀填充物。該多孔性骨填補材具有較佳機械強度，可支撐骨缺損部位所承受的壓力，避免二次傷害。且該多孔性骨填補材具有多孔性，可提供一合適於骨骼細胞貼附並生長的環境，繼而提升骨骼細胞生長量。再者，該多孔性骨填補材中的多孔性硬質殼體具有保護該纖維狀填充物的功能，可避免該纖維狀填充物被生物體的體液衝刷，繼而使得該纖維狀填充物變得鬆散、位移或流失，導致失去做為骨骼細胞貼附並生長的模板效果。
【專利說明】多孔性骨填補材
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種骨填補材，特別是涉及一種包含多孔性硬質殼體及纖維狀填充物的多孔性骨填補材。
【背景技術】
[0002]骨骼為生物體的一部份，其成分主要是由礦物質及蛋白質所組成，且其功能是用來支撐生物體並保護生物體內部器官。當骨骼因受外力造成傷害或因病變切除，骨骼缺損部位可使用骨填補材做為骨骼再生的模板(template)，進而引導骨骼細胞的分化(differentiation)與增生(proliferation),以恢復生物體基本的生理功能。一般骨填補材需要具有支撐骨骼缺損部位的作用，以避免造成骨骼缺損部位二次傷害，或其它部位的傷害。且也需提供骨骼細胞貼附並生長的環境，始能達到完整修復(healing)的效果。
[0003]US7547449揭示一種包含礦物質及膠原蛋白纖維的骨填補材，其中，該礦物質是形成在膠原蛋白纖維的表面上，且該礦物質是擇自於磷酸鈣(calciumphosphate)、碳酸鈣(calciumcarbonate)、氫氧基憐灰石(hydroxyapatite)、碳酸,思(strontiumcarbonate)、硫酸鈣(calcium sulfate)、草酸鈣(calciumoxalate)、氧化鈣(calciumoxide)、含續碳酸?丐(magnesium-bearingcalciumcarbonate)、含續憐酸?丐(magnesium-bearingcalciumphosphate)、含續硫酸?丐(magnesium-bearingcalcium sulfate)或含續草酸?丐(magnesium-bearingcalciumoxalate)等。然而,該骨填補材僅適用在不用承受過度壓力的骨骼缺損部位，如手腕或頭顱等，因此，若使用在腳或脊髓等骨骼缺損部位，該骨填補材的支撐效果不佳，容易造成所述骨骼缺損部位二次傷害。再者，該`骨填補材容易經生物體的體液衝刷後，導致鬆散、位移或流失，繼而失去做為骨骼細胞貼附並生長的模板效果。
[0004]經上述說明可知，改良骨填補材以為骨骼缺損部位提供一適當的支撐效果，以及做為骨骼細胞貼附並生長的模板，從而避免骨骼缺損部位二次傷害，並提升骨骼細胞生長量，是此【技術領域】相關技術人員可再突破的課題。

【發明內容】

[0005]本發明的目的在於提供一種具有較佳機械強度，可做為骨骼細胞貼附並生長的模板，且不易被生物體的體液衝刷而導致鬆散、位移或流失的多孔性骨填補材。
[0006]本發明多孔性骨填補材，包含:
[0007]一可被吸收代謝的多孔性硬質殼體，界定出一內部空間；及
[0008]一設置於該內部空間中的纖維狀填充物。
[0009]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，以該多孔性硬質殼體的總體積為100vol%計，該多孔性硬質殼體的孔隙度範圍為5vol%至小於50vol%。
[0010]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該多孔性硬質殼體的孔隙的平均口徑範圍為150 μ m 至小於 500 μ m。
[0011]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該多孔性硬質殼體具有一橫截面，且該多孔性硬質殼體的厚度為該橫截面的等效直徑的11.5%至17.5%。
[0012]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該多孔性硬質殼體是由一包括硫酸鈣的混合物所形成。
[0013]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該混合物還包括水。
[0014]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，以該混合物的總量為100被％計，該水的使用量範圍為 18wt%M 23.lwt%。
[0015]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該纖維狀填充物包括至少一種由下列群組所組成的聚合物:聚糖類、聚糖類衍生物、聚胜肽類、聚胜肽類衍生物、聚乳酸、聚乙醇酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、聚己內酯、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚甘醇酸，或上述的聚合物的共聚物。
[0016]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該聚糖類是擇自於幾丁聚糖、纖維素、海藻酸及它們的組合。
[0017]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該聚胜肽類衍生物是擇自於明膠、膠原蛋白、膠原蛋白衍生物及它們的組合。
[0018]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該多孔性骨填補材還包含一設置於該內部空間的陶瓷材料。
[0019]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該陶瓷材料是形成在該纖維狀填充物的表面。
[0020]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該纖維狀填充物包括多條纖維，且所述纖維彼此糾結，形成多孔結構。`
[0021]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該纖維狀填充物的平均長度範圍為3.5mm至7mm。
[0022]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該陶瓷材料包括至少一種由下列群組所組成的陶瓷材料:磷酸鈣鹽類及生物玻璃。
[0023]較佳地，所述多孔性骨填補材，其中，該磷酸鈣鹽類包括至少一種由下列群組所組成的磷酸鈣鹽=CaHPO4.2H20、CaHPO4, Ca(H2PO4)2.H2O, Ca(H2PO4)2、分子式為 Ca10(PO4)6 (OH)2的磷酸鈣鹽、分子式為Caltl(PO4)6(F)2的磷酸鈣鹽、分子式為Ca8(HPO4)2(PO4)4.5H20的磷酸鈣鹽、分子式為Ca4(PO4)2O的磷酸鈣鹽，及分子式為Ca3(PO4)2的磷酸鈣鹽。
[0024]本發明的有益效果在於:通過多孔性硬質殼體的結構設計，使得該多孔性骨填補材具有較佳機械強度，可支撐骨缺損部位所承受的壓力，避免二次傷害。且該多孔性骨填補材具有多孔性，可提供一合適於骨骼細胞貼附並生長的環境，繼而提升骨骼細胞生長量。再者，該多孔性骨填補材中的多孔性硬質殼體具有保護該纖維狀填充物的功能，可避免該纖維狀填充物被生物體的體液衝刷，繼而使得該纖維狀填充物變得鬆散、位移或流失，導致失去做為骨骼細胞貼附並生長的模板效果。
【具體實施方式】
[0025]本發明多孔性骨填補材包含一可被吸收代謝的多孔性硬質殼體，界定出一內部空間；及一設置於該內部空間中的纖維狀填充物。該多孔性骨填補材還包含一設置於該內部空間的陶瓷材料。
[0026]較佳地，該多孔性硬質殼體與該纖維狀填充物皆具有生物相容性。[0027]以下將逐一對該多孔性硬質殼體、該纖維狀填充物及該陶瓷材料進行詳細說明:
[0028]
[0029]該多孔性硬質殼體具有生物相容性，且可被生物體吸收代謝，以及賦予該多孔性骨填補材具有較佳機械強度。該多孔性硬質殼體具有多孔性，可提供一合適於骨骼細胞貼附並生長的環境，繼而提升骨骼細胞生長量，且該骨骼細胞可由該多孔性硬質殼體的孔隙向內生長，繼而使該多孔性硬質殼體與生長的骨骼細胞合而為一，有利於該多孔性骨填補材固定在該骨缺損部位。再者，該多孔性硬質殼體具有保護該纖維狀填充物的功能，可避免該纖維狀填充物被生物體的體液衝刷，繼而使得該纖維狀填充物變得鬆散、位移或流失，導致失去做為骨骼細胞貼附並生長的模板效果。
[0030]較佳地，該多孔性硬質殼體是由一包括硫酸鈣的混合物所形成。該硫酸鈣可採以往所使用的，例如，無水硫酸鈣或水合硫酸鈣。
[0031]較佳地，該硫酸鈣是由式(I)所示:
[0032]CaSO4.ηΗ20 式(I)
[0033]其中η 為 O、1/2 或 2。
[0034]較佳地，該混合物還包括水。通過調整該混合物中的水與硫酸鈣的混合比例，可有效提升該多孔性硬質殼體的機械強度，較佳地，以該混合物的總量為100被％計，該水的使用量範圍為18被％至23.lwt%,當水的使用量範圍小於18wt%時，該硫酸鈣與水無法均勻混合，以使硫酸鈣溼潤；當水的使用量範圍大於23.lwt%時，會導致該多孔性硬質殼體的抗壓強度降低。
[0035]該多孔性硬質殼體的製備方式可採用以往方式，例如，將該混合物與一加熱會氣化或升華的物質混合，並置入於一可形成中空的模具中，經加熱後，即為本發明多孔性硬質殼體，該加熱會升華的物質如樟腦、棻或萘。
[0036]在不影響該多孔性硬質殼體的功效範圍內，較佳地，該混合物還包括一陶瓷材料。該陶瓷材料的添加可使該多孔性硬質殼體的成分與生物體骨骼所含成分相近，更有利於骨骼細胞的生長。該陶瓷材料如下所述，所以不再贅述。
[0037]該多孔性硬質殼體的孔隙可提供一合適於骨骼細胞貼附並生長的環境。較佳地，以該多孔性硬質殼體的總體積為100vol%計，該多孔性硬質殼體的孔隙度範圍為5vol%至小於50vol%。較佳地，該孔隙的平均口徑範圍為150 μ m至小於500 μ m。較佳地，該多孔性硬質殼體具有一橫截面，且該多孔性硬質殼體的厚度為該橫截面的等效直徑的11.5%至17.5%。較佳地，該多孔性硬質殼體的孔隙是與該內部空間相通，可使生物體的體液接觸該纖維狀填充物，更有效提升該多孔性骨填補材的骨骼細胞生長效果。通過調整該多孔性硬質殼體的孔隙度及孔隙的平均口徑，可使得該多孔性骨填補材具有合適的抗壓強度(至少16Mpa)，較佳地，以該多孔性硬質殼體的總體積為100vol%計，該多孔性硬質殼體的孔隙度範圍為5vol%至小於50vol%，且該孔隙的平均口徑範圍為150 μ m至小於300 μ m。或者，較佳地，以該多孔性硬質殼體的總體積為100vol%計，該多孔性硬質殼體的孔隙度範圍為5vol%至小於30vol%，且該孔隙的平均口徑範圍為300 μ m至小於500 μ m。
[0038]
[0039]該纖維狀填充物具有生物相容性。較佳地，該纖維狀填充物還具有較佳的抗彎強度。該纖維狀填充物的抗彎強度越佳，表示該纖維狀填充物越易糾結，更可提升該多孔性骨填補材的機械強度。更佳地，該纖維狀填充物還具有引導骨骼細胞再生及/或誘導骨骼修復的功能，可更有效地促進該多孔性骨填補材的骨骼細胞生長效果。
[0040]較佳地，該纖維狀填充物包括至少一種由下列群組所組成的聚合物:聚糖(polysaccharide)類、聚糖類衍生物(polysaccharide derivatives)、聚胜肽類(polypeptide)、聚胜肽類衍生物(polypeptide derivatives)、聚乳酸、聚乙醇酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、聚己內酯、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚甘醇酸，或上述的聚合物的共聚物。
[0041]較佳地，該聚糖類是擇自於幾丁聚糖、纖維素、海藻酸及它們的組合。較佳地，該聚糖類衍生物是擇自於幾丁聚糖的鹽類、纖維素的鹽類、海藻酸鹽類及它們的組合。較佳地，該聚胜肽類衍生物是擇自於明膠、膠原蛋白、膠原蛋白衍生物及它們的組合。
[0042]較佳地，該纖維狀填充物包括多條纖維，且所述纖維彼此糾結，形成多孔結構。該多孔結構可提供一適合骨骼細胞貼附並生長的環境。
[0043]較佳地，該纖維狀填充物的平均長度範圍為3.5mm至7mm。當纖維狀填充物的平均長度小於3.5mm時，所述纖維彼此糾結效果不佳，使得該纖維狀填充物無法聚集成塊，繼而導致機械強度下降；當纖維狀填充物的平均長度大於7mm時，所述纖維彼此糾結效果不佳，使得該纖維狀填充物的結構過於鬆散，繼而導致機械強度下降。
[0044]
[0045]該陶瓷材料具有生物兼容性。較佳地，該陶瓷材料還具有骨鍵結(bone-binding)特性。更佳地，該陶瓷材料還具有植入至生物體中不會引起發炎反應及/或不會被生物體內的纖維組織所佔據，可更有效地促進該多孔性骨填補材的骨骼細胞生長效果。
[0046]該陶瓷材料包括至少一種由下列群組所組成的陶瓷材料:磷酸鈣鹽類及生物玻
`3? ο
[0047]該磷酸鈣鹽類包括至少一種由下列群組所組成的磷酸鈣鹽=CaHPO4 *2H20,CaHPO4,Ca (H2PO4) 2.H2O' Ca (H2PO4) 2、分子式為 Ca10 (PO4) 6 (OH) 2 的磷酸鈣鹽、分子式為 Ca10 (PO4) 6 (F) 2的磷酸鈣鹽、分子式為Ca8(HPO4)2(PO4)4.5Η20的磷酸鈣鹽、分子式為Ca4(PO4)2O的磷酸鈣鹽，及分子式為Ca3(PO4)2的磷酸鈣鹽。
[0048]該生物玻璃主要由Na2O-CaO-SiO2-P2O5為基礎組成。該陶瓷材料的製備方式並無特別的限制，可採用以往的方式，例如，該磷酸鈣鹽類是由將一包含鈣鹽與磷酸鹽的混合物進行反應所獲得。
[0049]較佳地，該鈣鹽是擇自於氯化鈣、碳酸鈣、硝酸鈣、氫氧化鈣、乙酸鈣、葡萄糖酸鈣、檸檬酸鈣及此等一組合。較佳地，該磷酸鹽是擇自於磷酸三鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸三鈉、磷酸氫二銨、磷酸二氫銨、磷酸三銨、磷酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀及它們的組
口 ο
[0050]較佳地，該陶瓷材料是形成在該纖維狀填充物的表面。該形成方式並無特別的限制，可採用以往的方式，例如，將一包含該纖維狀填充物、鈣鹽與磷酸鹽的混合物進行反應所獲得。該陶瓷材料是形成在該纖維狀填充物的表面，可使該陶瓷材料較不易受生物體的體液衝刷，而導致位移或流失，並增強該纖維狀填充物的機械強度，以及延緩纖維狀填充物降解速度。
[0051]在不影響本發明多孔性骨填補材的功效範圍內，較佳地，本發明多孔性骨填補材還包含一具有修復和再生能力的生長因子。該生長因子可單獨或混合使用，且該生長因子例如但不限於骨誘導生長因子(osteoinductivegrowthfactor)、血小板衍生生長因子(platelet-derived growthfactor)、轉化生長因子(transforminggrowthfactor)或類膜島素生長因子(insulin-1 ikegrowthfactor)等。該骨誘導生長因子例如但不限於骨成型蛋白(bonemorphogeneticprotein)、骨?丐素(ostercalcin)或成骨素(osteogenin)等。
[0052]本發明將就以下實施例來作進一步說明，但應了解的是，所述實施例僅為例示說明用，而不應被解釋為本發明實施的限制。
[0053]
[0054]
[0055]1.膠原蛋白:購自於 SigmaAldrich ;型號為 BornsteinandTraubTypeI(SigmaTypeIII)。
[0056]2.六氟異丙醇(1，I, I, 3, 3, 3hexaf luoro-2-propanol):購自於 Fluka ；純度≥ 99.0%。
[0057]3.幾丁聚糖:購自於 SigmaAldrich。
[0058]4.三氟醋酸:購自於 SigmaAldrich ;型號為 ReagentPiUS'? ;純度為 99%。
[0059]5.半水硫酸鈣:購自於SigmaAldrich。
[0060]6.氯化鈣:購自於 SigmaAldrich。
[0061]7.磷酸氫二鈉:購自於 SigmaAldrich。
[0062][纖維狀填充物的製備]
[0063]
[0064]將0.3克的膠原蛋白溶於5毫升的六氟異丙醇中，以製得一濃度為6?〖％的膠原蛋白溶液，再將該溶液置於一自製電紡儀器(紡織產業綜合研究所的COSMISC-PME30)中，利用電紡原理，在20kV的電壓下，流速為0.8ml/h,並在7公分的收集距離下噴絲，以得到多條的膠原蛋白纖維，進一步地依序以30wt%甲醇水溶液與60wt%甲醇水溶液進行清洗，且經冷凍乾燥即可，所述膠原蛋白纖維的平均長度為0.7_。
[0065]
[0066]合成例2是以與合成例I相同的步驟來製備該膠原蛋白纖維，不同的地方在於:流速為0.45ml/h，且所述膠原蛋白纖維的平均長度為3.5mm。
[0067]
[0068]將0.35克的幾丁聚糖溶於5毫升的三氟醋酸中，以製得一濃度為7wt%的幾丁聚糖溶液，再將該溶液置於一自製電紡儀器中，利用電紡原理，在20kV的電壓下，流速為
0.8ml/h,並在5公分的收集距離下噴絲，以得到多條的幾丁聚糖纖維，進一步地依序以30wt%甲醇水溶液與60wt%甲醇水溶液進行清洗，且經冷凍乾燥即可，所述幾丁聚糖纖維的平均長度為4.5mm。
[0069]
[0070]合成例4是以與合成例I相同的步驟來製備該膠原蛋白纖維，不同的地方在於:流速為0.3ml/h，且所述膠原蛋白纖維的平均長度為6.8mm。
[0071]〈合成例5>
[0072]合成例5是以與合成例I相同的步驟來製備該膠原蛋白纖維，不同的地方在於:流速為0.15ml/h，且所述膠原蛋白纖維的平均長度為13mm。[0073][多孔性硬質殼體的製備]
[0074]
[0075]將一由18.03wt%的水與8L 97wt%的半水硫酸鈣(CaSO4.0.5H20)所組成的混合物與樟腦混合，並置於一直徑為6mm,內徑為4mm且高12mm的不鏽鋼圓柱模具中，於80°C下放置24h待完全固化後取出，即可獲得口徑約為300 μ m至400 μ m、孔隙度約為20vol%至25vol%，且厚度為2mm的多孔性硬質殼體。
[0076]
[0077]將一由23.08wt%的水與76.92wt%的半水硫酸鈣(CaSO4.0.5H20)所組成的混合物與樟腦混合，並置於一直徑為6mm且高12mm的不鏽鋼圓柱模具中，於室溫下放置24h待完全固化後取出，即可獲得口徑約為300 μ m至400 μ m、孔隙度約為20vol%至25vol%，且厚度為2mm的多孔性硬質殼體。
[0078]
[0079]將一由33.33wt%的水與66.67wt%的半水硫酸鈣(CaSO4.0.5H20)所組成的混合物與樟腦混合，並置於一直徑為6mm且高12mm的不鏽鋼圓柱模具中，於室溫下放置24h待完全固化後取出，即可獲得口徑約為300 μ m至400 μ m、孔隙度約為20vol%至25vol%，且厚度為2mm的多孔性硬質殼體。
[0080][陶瓷材料形成於纖維狀 填充物表面的製備]
[0081]〈製備例1>
[0082]將I克的合成例I的膠原蛋白纖維均勻溶解於14毫升的0.1M的氯化鈣水溶液中，再將8.4毫升的0.1M的磷酸氫二鈉水溶液以0.5ml/min的速度緩慢滴入，接著，使用磁石以轉速為120rpm的速度進行攪拌，以使其均勻混合，並使膠原蛋白纖維彼此糾結纏繞，同時，磷酸鈣會在膠原蛋白纖維表面析出，然後，利用0.1M的氫氧化鈉水溶液將pH值調至7.0，且進行攪拌I小時後，進行過濾，並以兩次水清洗濾餅並進行離心處理，取得沉澱物後，重複上述步驟三次後，取其沉澱物並經冷凍乾燥處理，即可獲得一膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物。
[0083]
[0084]製備例2是以與製備例I相同的步驟來製備該膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物，不同的地方在於:使用合成例2的膠原蛋白纖維。
[0085]
[0086]製備例3是以與製備例I相同的步驟來製備該幾丁聚糖纖維磷酸鈣複合物，不同的地方在於:使用合成例3的幾丁聚糖纖維。將該幾丁聚糖纖維磷酸鈣複合物壓成板狀後，裁切成長度2_、寬度2_且厚度4_的大小，進行抗彎強度、細胞活性及骨鈣素濃度檢測。
[0087]
[0088]製備例4是以與製備例I相同的步驟來製備該膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物，不同的地方在於:使用合成例4的膠原蛋白纖維。將該膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物壓成板狀後，裁切成長度2_、寬度2_且厚度4_的大小，進行抗彎強度、細胞活性及骨鈣素濃度檢測。
[0089]
[0090]製備例5是以與製備例I相同的步驟來製備該膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物，不同的地方在於:使用合成例5的膠原蛋白纖維。[0091][骨填補材的製備]
[0092]
[0093]將製備例I的膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物置於合成例6的多孔性硬質殼體的內部空間中，並經冷凍乾燥即可。
[0094]
[0095]將合成例I的膠原蛋白纖維置於合成例6的多孔性硬質殼體的內部空間中，並經冷凍乾燥即可。
[0096]
[0097]將製備例I的膠原蛋白纖維磷酸鈣複合物置於一直徑為6mm，內徑為4mm且高12mm的不鏽鋼圓柱模具中，並經冷凍乾燥即可。
[0098]
[0099]將合成例I的膠原蛋 白纖維置於一直徑為6mm,內徑為4mm且高12mm的不鏽鋼圓柱模具中，並經冷凍乾燥即可。
[0100]
[0101]將一由重量比值為I的氫氧基磷灰石與硫酸鈣所組成的混合物，取7.5克混合物粉末加入2.5毫升的水，獲得一漿料。
[0102]
[0103]將一由重量比值為I的氫氧基磷灰石與硫酸鈣所組成的混合物，取7.5克混合物粉末加入2.5毫升2wt%的膠原蛋白溶液，獲得一漿料。
[0104]【檢測項目】
[0105]1.抗壓強度:
[0106]將上述合成例6至8的多孔性硬質殼體、實施例1至2及比較例I至2的骨填補材分別置於instron試驗機(廠牌為Instron ;型號為:5900)中，並依據IS05833抗壓強度測試方法進行測試。單位:MPa。
[0107]2.抗彎強度:
[0108]將上述製備例I至5的複合物置於instron試驗機中，並依據IS0178彎曲強度測試方法進行測試。單位:MPa。
[0109]3.承受生物體體液衝刷能力:
[0110]將上述實施例1以及比較例I的骨填補材分別置於15毫升的試管中，並且分別加入5毫升的磷酸鹽緩衝生理鹽水(PhosphateBuffered Saline,簡稱PBS),形成兩個測試樣品，並將所述測試樣品置於37°C的恆溫振蕩水槽中，轉速設定為lOOrpm，並置放24小時，接著，觀察所述測試樣品的溶液情況。〇:溶液仍保持清澈；X:溶液變混濁。
[0111]4.細胞活性測試:
[0112]將製備例3及4的複合物及實施例1至2及比較例I至2的骨填補材分別置於一96-孔盤培養盤(96-wellplate)的不同孔中，並分別加入15 μ L且由重量比值為0.22的水與半水硫酸鈣(CaSO4.0.5Η20)所組成的混合物，接著，待其固化後，以紫外光殺菌備用。
[0113]將比較例3及4的漿料分別置於一96-孔盤培養盤(96-well plate)的不同孔中，待其固化後，以紫外光殺菌備用。
[0114]將IxlO4個類人體骨母細胞(humanosteoblast-likecells)加入上述每個孔中，並於37°C的環境下培養7天，然後，進行MTT分析法測試細胞活性，並以ELISA分光亮度計(ELISAreaderscanning mult1-well spectrophotometer ;廠牌為 BIOTEK ;型號為POffERffAVE XS)在波長570nm下量測其吸光值。吸光值愈高，代表存在於其上的細胞量愈多。
[0115]5.骨鈣素生成測試:
[0116]將製備例3及4的複合物及實施例1至2及比較例I至2的骨填補材分別置於一96-孔盤培養盤的不同孔中，並分別加入15 μ L由重量比值為0.22的水與半水硫酸鈣所組成的混合物，待其固化後，以紫外光殺菌備用。
[0117]將比較例3及4的漿料分別置於一 96-孔盤培養盤的不同孔中，接著，待其固化後，以紫外光殺菌備用。
[0118]將IxlO4個類人體骨母細胞加入上述每個孔中，並於37°C的環境下培養7天，接著，使用骨鈣素免疫分析試劑盒，並以ELISA分光亮度計在波長450nm下量測其吸光值，並由該吸光值換算骨鈣素濃度。
[0119]表1
【權利要求】
1.一種多孔性骨填補材，其特徵在於包含: 一可被吸收代謝的多孔性硬質殼體，界定出一內部空間 '及 一設置於該內部空間中的纖維狀填充物。
2.根據權利要求1所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:以該多孔性硬質殼體的總體積為100vol%計，該多孔性硬質殼體的孔隙度範圍為5vol%至小於50vol%。
3.根據權利要求2所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該多孔性硬質殼體的孔隙的平均口徑範圍為150 μ m至小於500 μ m。
4.根據權利要求1所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該多孔性硬質殼體具有一橫截面，且該多孔性硬質殼體的厚度為該橫截面的等效直徑的11.5%至17.5%。
5.根據權利要求1所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該多孔性硬質殼體是由一包括硫酸鈣的混合物所形成。
6.根據權利要求5所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該混合物還包括水。
7.根據權利要求6所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:以該混合物的總量為100wt%計，該水的使用量範圍為18wt%至23.lwt%。
8.根據權利要求1所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該纖維狀填充物包括至少一種由下列群組所組成的聚合物:聚糖類、聚糖類衍生物、聚胜肽類、聚胜肽類衍生物、聚乳酸、聚乙醇酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、聚己內酯、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚甘醇酸，或上述的聚合物的共聚物。
9.根據權利要求8所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該聚糖類是擇自於幾丁聚糖、纖維素、海藻酸及它們的組合。
10.根據權利要求8所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該聚胜肽類衍生物是擇自於明膠、膠原蛋白、膠原蛋白衍生物及它們的組合。
11.根據權利要求1所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該多孔性骨填補材還包含一設置於該內部空間的陶瓷材料。
12.根據權利要求11所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該陶瓷材料是形成在該纖維狀填充物的表面。
13.根據權利要求12所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該纖維狀填充物包括多條纖維，且所述纖維彼此糾結，形成多孔結構。
14.根據權利要求1或12所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該纖維狀填充物的平均長度範圍為3.5mm至7mm。
15.根據權利要求11所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該陶瓷材料包括至少一種由下列群組所組成的陶瓷材料:磷酸鈣鹽類及生物玻璃。
16.根據權利要求15所述的多孔性骨填補材，其特徵在於:該磷酸鈣鹽類包括至少一種由下列群組所組成的磷酸鈣鹽=CaHPO4.2H20、CaHPO4、Ca(H2PO4)2.H2O、Ca(H2PO4)2、分子式為Caltl(PO4)6(OH)2的磷酸鈣鹽、分子式為Caltl(PO4)6(F)2的磷酸鈣鹽、分子式為Ca8(HPO4)2(PO4)4.5Η20的磷酸鈣鹽、分子式為Ca4(PO4)2O的磷酸鈣鹽，及分子式為Ca3(PO4)2的磷酸鈣鹽。
【文檔編號】A61L27/24GK103800099SQ201310319257
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2013年7月26日 優先權日:2012年11月5日
【發明者】王若凌, 陳惠琬 申請人:遠東新世紀股份有限公司