從含菌絲體的培養基中提取有用成分的方法
2024-03-27 23:44:05 3
>一次提取液(單位％)二次提取液(單位％)蛋白質24.137.2糖40.142.2灰分24.414.9β-葡聚糖0.42.1從表2可知，根據本發明而得到的2種提取液中含有大量的各種有效成分，在一次提取物和二次提取物中，β-葡聚糖的含有量存在差異。實施例3除用靈芝菌代替實施例1中的香蕈種菌外，按與實施例1同樣的方法得到一次提取液。其結果，從每kg菌絲體增殖了的上述固體培養基(a)中得到含菌絲體的固體成分(i-a)0.6kg和清澄的榨汁液(i)(一次提取液)400ml(白利度為7.6％)。另外，往每kg含上述菌絲體的固體成分(i-a)中加入水1升和細胞壁溶解酶「Fanselase」〔(株)Yakult總公司產品〕0.15kg，製成含蔗渣的混合物。在將溫度保持在40℃的同時，用攪拌機攪拌該含蔗渣的混合物1小時，使菌絲體細胞壁溶解。接著，用壓榨機將所得酶處理物〔含細胞壁溶解物的混合液(ii)〕固液分離，從每kg含菌絲體的固體成分(i-a)中得到酶處理提取液(A-1)950ml。然後，加熱酶處理提取液，在90℃放置30分鐘。通過加熱至90℃，使酶失活並殺菌。再用60篩目濾布將所得殺菌處理提取液過濾，從每kg菌絲體增殖了的上述固體培養基(a)中得到含有微小浮遊物的提取液900ml(白利度為3.2重量％)(二次提取液)。在這些一次、二次提取液中，除水以外，還含有蛋白質、糖、礦物質、β-葡聚糖等成分，它們的含有量見表3。另外，作為固體殘渣，得到充分細化了的粉碎物，將其乾燥後，可作為牛等家畜的飼料提供。表3(香蕈菌絲體比較例1(酶搗碎法)將與實施例1中使用的相同的固體培養基1kg分拆，往該拆開的培養基中加入纖維素酶和蛋白酶的濃度均為0.05％的酶液3升，將溫度保持在40℃，進行攪拌並用齒輪泵將培養基搗碎並使其循環，使其反應1小時。反應結束後，升溫至70℃，保持30分鐘，使酶失活。通過離心分離進行固液分離，得到白利度為2.0重量％的提取液約2800ml。比較例2(靜置循環法)將與實施例1中使用的相同的固體培養基1kg破碎後，充填在濾布上，加入水5升，並將溫度保持在50℃，用泵使溶液循環，保持15小時後進行固液分離，得到白利度為0.7重量％的提取液約4400ml。實施例4往由蔗渣90重量份、米糠10重量份組成的固體培養基中加入適量的純水，然後接種香蕈種菌，放置在溫度和溼度經調節的培養室內，使菌絲體增殖。待菌絲體在固體培養基上蔓延後，將菌絲體增殖了的固體培養基(i)浸漬在以β-1，3-葡聚糖酶為主要成分、還含有殼多糖酶、纖維素酶的酶液(a)〔酶液中總酶濃度為0.04重量％，其中，主要成分β-1，3-葡聚糖酶的量佔酶總量的50重量％〕中(培養基與酶液的比例為1kg1升)，保持溫度在40℃，用攪拌機攪拌60分鐘，使菌絲體細胞壁溶解。接著，用固液分離裝置即壓榨機將所得酶處理物(含細胞壁溶解物的混合液)固液分離，得到酶處理提取液(A-1)1500g。然後，加熱所得的酶處理提取液，在90℃放置30分鐘。通過加熱至90℃，使酶失活並殺菌。再用60篩目濾布將所得的殺菌處理提取液過濾，從每kg菌絲體增殖了的上述固體培養基(i)中得到含有微小浮遊物的提取液1400ml(白利度為4.0重量％)。在該提取液中，已知除水以外，還含有蛋白質(包括蛋白質部分分解物的胺基酸)、糖、礦物質、β-葡聚糖等成分，含有的菌絲體代謝成分和菌絲體細胞壁分解物(β-葡聚糖等)間的平衡良好。如此得到的提取液中所含各有效成分的量見表4。另外，作為固體殘渣，得到充分細化了的粉碎物，將其乾燥後，可作為牛等家畜的飼料提供。實施例5在實施例4中，除用火菇種菌代替香蕈種菌外，按與實施例1同樣的方法培養菌絲體，用攪拌機使菌絲體細胞壁溶解。接著，將所得酶處理提取液固液分離，得到酶處理提取液(A-1)1300ml。然後，加熱所得的酶處理液，使酶失活並殺菌處理，將所得的殺菌處理提取液按與實施例4同樣的方法過濾，從每kg菌絲體增殖了的上述固體培養基(i)中得到含有微小浮遊物的提取液1150ml(白利度為3.3重量％)。在如此得到的提取液中，菌絲體代謝成分和菌絲體細胞壁分解物(β-葡聚糖等)間的平衡良好。該提取液中所含各有效成分的量見表4。另外，固體殘渣可與實施例4同樣，作為牛等家畜的飼料提供。實施例6在實施例4中，除用靈芝種菌代替香蕈種菌外，按與實施例4同樣的方法培養菌絲體，用攪拌機使菌絲體細胞壁溶解。接著，將所得酶處理提取液固液分離，得到酶處理提取液(A-1)1450ml。然後，加熱所得的酶處理液，使酶失活，將殺菌處理所得殺菌處理提取液按與實施例4同樣的方法過濾，從每kg菌絲體增殖了的上述固體培養基(a)中得到含有微小浮遊物的提取液1300ml(白利度為4.5重量％)。在如此得到的提取液中，菌絲體代謝成分和菌絲體細胞壁分解物(β-葡聚糖等)間的平衡良好。該提取液中所含各有效成分的量見表4。另外，固體殘渣可與實施例4同樣，作為牛等家畜的飼料提供。表4(單位％)比較例3(酶搗碎法)將與實施例4中使用的相同的固體培養基1kg分拆，往該拆開的培養基中加入纖維素酶和蛋白酶的濃度均為0.05％的酶液3升，將溫度保持在40℃，進行攪拌並用齒輪泵將培養基搗碎並使其循環，使其反應1小時。反應結束後，升溫至70℃，保持30分鐘，使酶失活。通過離心分離進行固液分離，得到白利度為2.0重量％的提取液約2800ml。比較例4(靜置循環法)將與實施例4中使用的相同的固體培養基1kg破碎後，充填在濾布上，加入水5升，並將溫度保持在50℃，用泵使溶液循環，保持15小時後進行固液分離，得到白利度為0.7重量％的提取液約4400ml。權利要求1.從含有菌絲體的培養基中提取有用成分的方法，其特徵在於，將擔子菌類種菌接種在以蔗渣為主料的固體培養基上，然後使菌絲體增殖，壓榨含所得菌絲體的固體培養基，得到清澄的榨汁液(i)，並且，往分離出了榨汁液(i)的、含菌絲體的固體殘渣成分中加入水和酶，在將溫度保持在30～60℃的同時，進行攪拌，使菌絲體細胞壁溶解，然後，加熱至95℃，使上述酶失活，並同時滅菌，由此得到含細胞壁溶解物的混合液(ii)。2.從含有菌絲體的培養基中提取有用成分的方法，其特徵在於，將擔子菌類種菌接種在以蔗渣為主料的固體培養基上，然後使菌絲體增殖，壓榨含所得菌絲體的固體培養基，得到榨汁液(i)，並且，將分離出了榨汁液(i)的、含菌絲體的固體殘渣成分分拆，往該拆開的固體殘渣成分中加入水和酶，在將溫度保持在30～60℃的同時，將上述固體殘渣成分粉碎和搗碎，使菌絲體細胞壁溶解，然後，加熱至95℃，使上述酶失活，並同時滅菌，由此得到含細胞壁溶解物的混合液(ii)。3.如權利要求1或2所述的方法，其特徵在於，所述酶包含β-1，3-葡聚糖酶。4.如權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述酶除β-1，3-葡聚糖酶以外，還包含殼多糖酶、纖維素酶、蛋白酶中的一種或多種。5.從含有菌絲體的培養基中提取有用成分的方法，其特徵在於，將擔子菌類種菌接種在以蔗渣為主料的固體培養基上，然後使菌絲體增殖，將所得的含菌絲體的固體培養基分拆，於30～60℃的溫度使拆開的固體培養基與含β-1，3-葡聚糖酶的溶液(a)接觸1～65分鐘，使菌絲體細胞壁溶解，然後，將所得的含有細胞壁溶解物的混合液加熱至95℃，使上述酶失活並同時滅菌。6.如權利要求5所述的方法，其特徵在於，對於固體培養基1kg，使用含濃度為0.01～0.1重量％的β-1，3-葡聚糖酶的溶液(a)100～2000ml。7.如權利要求5或6所述的方法，其特徵在於，通過將拆開的固體培養基浸漬在含有β-1，3-葡聚糖酶的溶液(a)中，使所述固體培養基與含有β-1，3-葡聚糖酶的溶液(a)接觸。8.如權利要求5至7中任一項所述的方法，其特徵在於，將上述含有細胞壁溶解物的混合液預先固液分離後，再將所得分離液如上所述地加熱至95℃，使上述酶失活並同時滅菌。9.如權利要求5～8中任一項所述的方法，其特徵在於，所述含有β-1，3-葡聚糖酶的溶液(a)還含有殼多糖酶、纖維素酶、蛋白酶中的一種或多種。全文摘要一種從含有菌絲體的培養基中提取有用成分的方法，該方法系將擔子菌類種菌接種在以蔗渣為主料的固體培養基上，然後使菌絲體增殖，壓榨含所得菌絲體的固體培養基，得到清澄的榨汁液(i)，並且，往分離出了榨汁液(i)的、含菌絲體的固體殘渣成分中加入水和酶，在將溫度保持在30～60℃的同時，進行攪拌，使菌絲體細胞壁溶解，然後，加熱至95℃，使上述酶失活，並同時滅菌，由此得到含細胞壁溶解物的混合液(ii)。根據本發明，可短時間內高收率地從菌絲體和培養基中提取有用成分。文檔編號C12N1/06GK1157327SQ9611677公開日1997年8月20日申請日期1996年12月25日優先權日1995年12月25日發明者長岡均申請人:長岡均