一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物的製作方法

2024-01-22 08:51:15

本發明涉及中藥材深加工
技術領域：
，具體涉及一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物。
背景技術：
：鐵皮石斛，又名萬丈須，石斛載於《神農本草經》，並被列為上品。為多年生草本植物，石斛生長在熱帶、亞熱帶原始森林及相類似的溫暖溼潤的環境，多附生於大的樹幹或巖石上。有抗腫瘤、提高人體免疫力、治療胃腸道疾病、抗衰老、抗氧化、抗血小板凝聚、降低血糖和治療白內障等方面均有良好療效。鐵皮石斛花為鐵皮石斛所結的花，5～7月最茂盛，非常美麗。鐵皮石斛的花呈淡黃色，共六瓣，最顯著的功效就是解鬱——其氣清香，味輕清，善疏達，「輕揚宜暢，善走上焦」，溫和養胃，能解鬱。從現代觀點來看，鐵皮石斛花中含有多種揮髮油，具有揮發性，可以清新解鬱，有助於舒緩精神緊張，保持頭腦清醒，解除精神抑鬱，安定煩躁情緒，因此尤其適合有精神性失眠、暑熱不適、躁動不安、工作壓力大等症狀者，或作為養顏清心之用。鐵皮石斛花有非常高的藥用價值，能很好地滋陰潤肺、養胃生津、明目清熱，有增強免疫力、抗衰老功效，對呼吸道疾病、糖尿病、慢性肝炎、慢性胃炎等有好處。鐵皮石斛花素是鐵皮石斛花含有的花色素，包括水溶性和脂溶性兩大類成分，是鐵皮石斛花具有抗氧化、抗衰老，美白等功效的基礎。「美白肌膚」是廣大愛美女性永恆的話題與追求。美白產品的研發、安全性和功效性評價自然成為研究者、生產經營者和消費者關注的焦點。皮膚的顏色主要由皮膚色素含量及分布決定，黑色素是最主要的決定因素。皮膚中的黑色素細胞產生黑色素，黑色素顆粒通過黑色素細胞枝狀突起向角質細胞轉移，轉移至角質細胞的黑色素顆粒隨表皮細胞上行至角質層，從而影響皮膚的顏色或形成色斑，最終隨角質層脫落而排洩。目前市場上的美白產品分為物理美白和生物化學美白2種。物理美白通常用鈦白粉和氧化鋅等粉體遮蓋，以達到美白效果；生物化學美白機理概括來說，就是通過抑制黑色素的生成，阻斷黑色素的運輸，加快表皮細胞代謝速度，阻斷黑色素生成過程中的信號通路等途徑，達到美白肌膚的效果。閃式提取技術是一種用於中草藥提取的高新技術，該技術以組織破碎原理為基礎，按照提取的目的和工藝特點，技術要求等，充分吸收國外最新技術，科學設計，精心製作，不但達到了快速，高效，充分，完全的提取要求，而且不需加熱，節省能源，有效保護了提取物質中的熱敏性成分，原來需要數小時的提取工作利用該儀器僅需幾分鐘即可完成，工作效率提高了幾十倍，並且操作簡便，與傳統提取方法相比具有非常顯著的優勢。亞臨界流體萃取技術是以亞臨界狀態的流體或亞臨界流體的混合溶液為溶媒，與溶質在系統內相繼經過浸提、蒸發脫溶、壓縮、冷凝回收等過程，從天然產物中提取目標組分的一種新技術。當lpg、丙烷、丁烷、r600a、dme、r134a和六氟化硫等以亞臨界流體狀態存在時，分子的擴散性能增強，傳質速度加快，對天然產物中弱極性以及非極性物質的滲透性和溶解能力顯著提高。亞臨界環境下提取，不破壞熱敏性成分、目的物完全，被視為綠色環保、前景廣闊的一項變革性技術。為了解決目前脂溶性鐵皮石斛花素生產成本高、效率低、產品不穩定的問題，本發明把閃式提取和亞臨界萃取技術結合，極大地節約成本，提高生產效率，解決了生產過程中易發生褐變的問題。本發明提供的脂溶性鐵皮石斛花提取物改善皮膚微循環、抑制酪氨酸酶活性以及抗氧化作用協同改善皮膚膚色，達到多層次美白的功效。技術實現要素：本發明的目的是為了克服現有技術中的不足，提供一種一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，解決了現有產品中生產成本高、效率低、產品不穩定等問題。為解決上述技術問題，本發明的技術方案為：一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，其特徵在於：包括如下質量份的原料為鐵皮石斛花素80-90%、米糠油10-20%。鐵皮石斛花素由閃式提取技術結合亞臨界萃取方法製得，步驟如下：（1）閃式提取：將切碎的新鮮鐵皮石斛花的花瓣加入閃式提取器中，加入10-40倍質量重的95%（體積比）乙醇；（2）將步驟（1）中混合物6000轉每分鐘，提取時間3-5分鐘，提取溫度20-30℃；（3）將步驟（2）中混合物高速離心或者板框過濾得到乙醇提取液；（4）將步驟（3）中乙醇提取液真空加熱濃縮至無乙醇的浸膏；（5）亞臨界萃取：將步驟（4）中的浸膏裝入密閉提取罐,抽真空,注入適量萃取溶劑至將樣品完全浸沒,在一定壓力及萃取條件下進行多次萃取；（6）脫溶：萃取結束後,將含有鐵皮石斛花素的萃取溶劑放入蒸發罐,恆溫減壓蒸發,獲得鐵皮石斛花素,氣化後的萃取溶劑經壓縮、過濾、冷凝液化後,回收到溶劑儲存罐；優選地，步驟（5）中萃取溶劑為亞臨界提取有機溶劑，包括丙烷、丁烷、二甲醚、四氟乙烷、乙醇中的一種或幾種的混合。優選地，步驟（5）中樣品與萃取溶劑質量之比為1:2～1:20，萃取壓力為0.1mpa～0.9mpa，萃取時間30min～40min，萃取溫度25℃～40℃，萃取次數2～4次。優選地，步驟（6）中回收的萃取溶劑可以循環使用。本發明的有益效果為：（1）本發明製備工藝成本低，生產效率高，解決了生產過程中；（2）本發明通過閃式提取和亞臨界萃取技術相結合解決了生產過程易發生褐變的問題；（3）本發明提供的脂溶性鐵皮石斛花提取物通過改善皮膚微循環、抑制黑色素生成以及抗氧化作用協同改善皮膚膚色，達到多層次美白的功效。附圖說明附圖1為本發明實施例1中鐵皮石斛花油和金釵石斛花油混合後的氣相色譜儀-質譜（gc-ms）檢測圖譜；附圖2為本發明實施例二天然防脫育髮油的動物實驗效果對比圖。具體實施方式為使對本發明的結構特徵及所達成的功效有更進一步的了解與認識，用以較佳的實施例及附圖配合詳細的說明，說明如下：實施例1：一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，其特徵在於：包括如下質量份的原料為鐵皮石斛花素80%、米糠油20%。所述鐵皮石斛花素由閃式提取技術結合亞臨界萃取方法製得，步驟如下：（1）閃式提取：將切碎的新鮮鐵皮石斛花的花瓣加入閃式提取器中，加入10倍質量重的95%（體積比）乙醇；（2）將步驟（1）中混合物6000轉每分鐘，提取時間3分鐘，提取溫度20℃。（3）將步驟（2）中混合物高速離心得到乙醇提取液。（4）將步驟（3）中乙醇提取液真空加熱濃縮至無乙醇的浸膏。（5）亞臨界萃取：將步驟（4）中的浸膏裝入密閉提取罐,抽真空,注入適量萃取溶劑至將樣品完全浸沒,在一定壓力及萃取條件下進行多次萃取；（6）脫溶：萃取結束後,將含有鐵皮石斛花素的提取溶劑放入蒸發罐,恆溫減壓蒸發,獲得鐵皮石斛花素,氣化後的萃取溶劑經壓縮、過濾、冷凝液化後,回收到溶劑儲存罐；其中，步驟（5）中萃取溶劑為亞臨界提取有機溶劑，為丙烷和丁烷任意比例的混合；步驟（5）中樣品與萃取溶劑質量之比為1:2，萃取壓力為0.1mpa，萃取時間30min，萃取溫度25℃，萃取次數2次；步驟（6）中回收的萃取溶劑可以循環使用。實施例2一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，其特徵在於：包括如下質量份的原料為鐵皮石斛花素90%、米糠油10%。所述鐵皮石斛花素由閃式提取技術結合亞臨界萃取方法製得，步驟如下：（1）閃式提取：將切碎的新鮮鐵皮石斛花的花瓣加入閃式提取器中，加入40倍質量重的95%（體積比）乙醇；（2）將步驟（1）中混合物6000轉每分鐘，提取時間5分鐘，提取溫度30℃。（3）將步驟（2）中混合物板框過濾得到乙醇提取液。（4）將步驟（3）中乙醇提取液真空加熱濃縮至無乙醇的浸膏。（5）亞臨界萃取：將步驟（4）中的浸膏裝入密閉提取罐,抽真空,注入適量萃取溶劑至將樣品完全浸沒,在一定壓力及萃取條件下進行多次萃取；（6）脫溶：萃取結束後,將含有鐵皮石斛花素的提取溶劑放入蒸發罐,恆溫減壓蒸發,獲得鐵皮石斛花素,氣化後的萃取溶劑經壓縮、過濾、冷凝液化後,回收到溶劑儲存罐；其中，步驟（5）中萃取溶劑為亞臨界提取有機溶劑，為丁烷；步驟（5）中樣品與萃取溶劑質量之比為1:20，萃取壓力為0.9mpa，萃取時間40min，萃取溫度40℃，萃取次數4次；步驟（6）中回收的萃取溶劑可以循環使用。實施例3一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，其特徵在於：包括如下質量份的原料為鐵皮石斛花素85%、米糠油15%。所述鐵皮石斛花素由閃式提取技術結合亞臨界萃取方法製得，步驟如下：（1）閃式提取：將切碎的新鮮鐵皮石斛花的花瓣加入閃式提取器中，加入20倍質量重的95%（體積比）乙醇；（2）將步驟（1）中混合物6000轉每分鐘，提取時間4分鐘，提取溫度25℃。（3）將步驟（2）中混合物高速離心得到乙醇提取液。（4）將步驟（3）中乙醇提取液真空加熱濃縮至無乙醇的浸膏。（5）亞臨界萃取：將步驟（4）中的浸膏裝入密閉提取罐,抽真空,注入適量萃取溶劑至將樣品完全浸沒,在一定壓力及萃取條件下進行多次萃取；（6）脫溶：萃取結束後,將含有鐵皮石斛花素的提取溶劑放入蒸發罐,恆溫減壓蒸發,獲得鐵皮石斛花素,氣化後的萃取溶劑經壓縮、過濾、冷凝液化後,回收到溶劑儲存罐；其中，步驟（5）中萃取溶劑為亞臨界提取有機溶劑，為丙烷、丁烷、二甲醚、四氟乙烷任意比例的混合；步驟（5）中樣品與萃取溶劑質量之比為1:10，萃取壓力為0.5mpa，萃取時間35min，萃取溫度30℃，萃取次數3次；步驟（6）中回收的萃取溶劑可以循環使用。實施例4一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，其特徵在於：包括如下質量份的原料為鐵皮石斛花素90%、米糠油10%。所述鐵皮石斛花素由閃式提取技術結合亞臨界萃取方法製得，步驟如下：（1）閃式提取：將切碎的新鮮鐵皮石斛花的花瓣加入閃式提取器中，加入30倍質量重的95%（體積比）乙醇；（2）將步驟（1）中混合物6000轉每分鐘，提取時間3分鐘，提取溫度25℃。（3）將步驟（2）中混合物板框過濾得到乙醇提取液。（4）將步驟（3）中乙醇提取液真空加熱濃縮至無乙醇的浸膏。（5）亞臨界萃取：將步驟（4）中的浸膏裝入密閉提取罐,抽真空,注入適量萃取溶劑至將樣品完全浸沒,在一定壓力及萃取條件下進行多次萃取；（6）脫溶：萃取結束後,將含有鐵皮石斛花素的提取溶劑放入蒸發罐,恆溫減壓蒸發,獲得鐵皮石斛花素,氣化後的萃取溶劑經壓縮、過濾、冷凝液化後,回收到溶劑儲存罐；其中，步驟（5）中萃取溶劑為亞臨界提取有機溶劑，為二甲醚、四氟乙烷和乙醇任意比例的混合；步驟（5）中樣品與萃取溶劑質量之比為1:15，萃取壓力為0.7mpa，萃取時間30min，萃取溫度40℃，萃取次數4次；步驟（6）中回收的萃取溶劑可以循環使用。實施例5一種具有美白功效的鐵皮石斛花提取物，其特徵在於：包括如下質量份的原料為鐵皮石斛花素88%、米糠油12%。所述鐵皮石斛花素由閃式提取技術結合亞臨界萃取方法製得，步驟如下：（1）閃式提取：將切碎的新鮮鐵皮石斛花的花瓣加入閃式提取器中，加入35倍質量重的95%（體積比）乙醇；（2）將步驟（1）中混合物6000轉每分鐘，提取時間3分鐘，提取溫度30℃。（3）將步驟（2）中混合物高速離心得到乙醇提取液。（4）將步驟（3）中乙醇提取液真空加熱濃縮至無乙醇的浸膏。（5）亞臨界萃取：將步驟（4）中的浸膏裝入密閉提取罐,抽真空,注入適量萃取溶劑至將樣品完全浸沒,在一定壓力及萃取條件下進行多次萃取；（6）脫溶：萃取結束後,將含有鐵皮石斛花素的提取溶劑放入蒸發罐,恆溫減壓蒸發,獲得鐵皮石斛花素,氣化後的萃取溶劑經壓縮、過濾、冷凝液化後,回收到溶劑儲存罐；其中，步驟（5）中萃取溶劑為亞臨界提取有機溶劑，為丙烷、丁烷、二甲醚、四氟乙烷、乙醇任意比例的混合；步驟（5）中樣品與萃取溶劑質量之比為1:10，萃取壓力為0.4mpa，萃取時間36min，萃取溫度30℃，萃取次數4次；步驟（6）中回收的萃取溶劑可以循環使用。實施例5所得產品的抗氧化活性測試：（1）對dpph自由基的清除作用配製不同濃度（25μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml，400μg/ml）的鐵皮石斛花提取物的油溶液，分別取2ml與2mldpph的甲醇溶液（0.13mmol/l）混和。將反應混合物用快速混勻器混合均勻並在室溫25oc下孵育30min，靜置，在517nm處用紫外可見光分光光度計測定吸光值；每組實驗設置三個平行，取吸光值的平均值。以ve作陽性對照代替鐵皮石斛花提取物按上述步驟操作；dpph自由基的清除能力按照以下公式計算：其中，a0為2mldpph溶液加入2ml甲醇中的吸光度值；a1是2ml甲醇加2ml不同濃度的樣品的混合物的吸光度值；a2為2mldpph的甲醇溶液加2ml不同濃度的樣品的吸光度值。測試結果如圖1所示，從圖中可以看出，在測試濃度範圍內，所有樣品對dpph清除能力呈明顯的濃度依賴性。鐵皮石斛花提取物和ve的ic50值分別是11.2μg/ml和22.8μg/ml，說明鐵皮石斛花提取物對dpph自由基的清除能力優於ve（2）對羥基自由基（•oh）的清除作用分別精確配製不同濃度（10μg/ml，25μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，400μg/ml，500μg/ml）的鐵皮石斛花提取物和ve樣品的油溶液，6mm的feso4溶液，2.4mm的h2o2溶液，6mm的乙醇-水楊酸溶液。各取1mlfeso4溶液、1ml乙醇-水楊酸溶液，加入1ml樣品溶液，將反應混合物在試管中震蕩混勻，靜置10min。再加入1mlh2o2溶液反應30min。以ve作為陽性對照，用錫箔紙分別包裹陽性對照和鐵皮石斛花提取物在37oc條件下恆溫水浴30min。反應產生的2,3-二羥基苯甲酸在510nm處有吸光值。以雙蒸水代替鐵皮石斛花提取物溶液作為空白組，以雙蒸水代替水楊酸作為對照組，每組實驗設三組平行。•oh的清除能力按照如下公式計算：其中，a0為空白組的吸光值，a2為不同濃度鐵皮石斛花提取物樣品的吸光值，a1為對照組的吸光值。測試結果如圖2所示，從圖中可以看出，所有樣品對•oh的清除活性具有明顯濃度依賴性。鐵皮石斛花提取物和ve的ic50值分別為70.2μg/ml和61.3μg/ml。很顯然，鐵皮石斛花提取物與ve具有幾乎同樣的清除•oh能力。實施例5所得產品的人體改善皮膚微循環、抑制黑色素生成活性測試：基於光譜吸收的原理（rgb），通過測定特定波長的光照在人體皮膚上後的反射量來確定皮膚中黑色素和血紅素的含量。色素檢測儀的測試探頭由光源發射器和接收器組成，另有彈簧以保持檢測時對皮膚的壓力恆定。探頭的發射器發出波長分別為568nm、660nm、和880nm3種波長的光，照射在皮膚表面，接受器測得皮膚反射的光。由於發射光的量是一定的，因此就可以測出被皮膚吸收的光的量，測出皮膚黑色素和血紅素的含量測試步驟與要求志願者要求、測試環境條件、測試前準備及測試志願者要求：無嚴重系統疾病、無免疫缺陷或自身免疫性疾病者；無活動性過敏性疾病者；既往對護膚類化妝品無嚴重過敏史者；近1個月內未曾使用激素類藥物及免疫抑制劑者；未參加其他臨床試驗者；按規定使用受試物；測試前所有志願者應填寫知情同意書。測試環境條件：保持溫度18℃，溼度45%±1%。測試前準備：受試部位前2天～3天不能使用任何產品（化妝品或外用藥品）。試驗前，受試者需要清潔雙手前臂內側，用幹的面巾紙擦拭乾淨。清潔後，在受試者雙手前臂內側做好測量區域標記。正式測試前，應該在符合標準的房間內靜坐至少30min，不能喝水，前臂暴露，呈測試狀態放置，保持輕鬆。測試步驟：實驗中，受試產品塗抹量一般為2mg/cm2，塗布在2cm2的區域，區域之間間隔至少2cm，選擇一區域作為空白對照。選擇不同時間，分別測定各測試點的變化值，每點一般測定3次，取平均值。10名受試者分別塗抹添加5%鐵皮石斛花提取物的乳液，分別測定受試者使用前和連續使用3天、7天、14天和28天後面頰中的黑色素和血紅素含量，計算平均值見表1。從表1中可以看出，受試者試用第3天黑色素和血紅素的含量並沒有明顯減少，第7天黑色素和血紅素含量開始有一定的減少，第14天時，黑色素和血紅素的含量減少最明顯，第28天以後，黑色素和血紅素的含量逐漸趨於平穩狀態。說明含有鐵皮石斛花提取物的乳液在使用第7天開始有一定的美白作用，第28天以後美白效果逐漸趨於平穩。表1項目使用前第3天第7天第14天第28天血紅素196191186177162黑色素286280271258240本發明的有益效果為：（1）本發明製備工藝成本低，生產效率高，解決了生產過程中；（2）本發明通過閃式提取和亞臨界萃取技術相結合解決了生產過程易發生褐變的問題；（3）本發明提供的脂溶性鐵皮石斛花提取物通過改善皮膚微循環、抑制黑色素生成以及抗氧化作用協同改善皮膚膚色，達到多層次美白的功效。本行業的技術人員應該了解，本發明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是本發明的原理，在不脫離本發明精神和範圍的前提下本發明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發明的範圍內。本發明要求的保護範圍由所附的權利要求書及其等同物界定。當前第1頁12