抗肺癌組合物及其應用的製作方法

2023-05-09 22:31:31

抗肺癌組合物及其應用的製作方法
【專利摘要】本發明屬於製藥【技術領域】，具體而言，本發明涉及抗肺癌組合物及其應用。本發明所述的一種抗肺癌組合物，其特徵在於，包括人參，南沙參，白花蛇舌草，其中，所述人參為160-200份，南沙參為50-90份，白花蛇舌草為60-120份。本發明還提供了上述組合物在製備抗肺癌藥物中的應用。本發明的有益效果在於：1、通過實驗驗證，藥物有高效的抗癌效果。2、藥物的抗癌機制很可能是由於藥物中的有效成分抑制了L型胺基酸轉運體1的轉運功能，從而達到良好的抗癌效果。
【專利說明】抗肺癌組合物及其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬於製藥【技術領域】。具體而言，本發明涉及抗肺癌組合物及其應用。
【背景技術】
[0002]近年來，肺癌發病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。近50年來許多國家都報導肺癌的發病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發病率和死亡率均佔所有惡性腫瘤的第一位，女性發病率佔第二位，死亡率佔第二位。肺癌的病因至今尚不完全明確，大量資料表明，長期大量吸菸與肺癌的發生有非常密切的關係。
[0003]目前肺癌的治療手段有手術、放射治療、藥物治療，以及上述療法的綜合治療。藥物治療中，中藥因為藥效持久、副作用小，成為患者的首選，以減輕病人痛苦、延長其生命、提高其生活質量為目的，市場上此類中藥不少，但普遍存在療效不確切，有效率低的問題。
[0004]L 型胺基酸轉運體 I (L-type amino acid transporter 1，LAT1)是近年發現的一種在癌細胞(包括腎癌，前列腺癌，膀胱癌，大腸癌，胃癌，乳腺癌，胰腺癌，肺癌等)表面特異性高表達的藥物跨膜轉運蛋白質。研究顯示，特異性地抑制LATl蛋白的轉運功能，阻斷必需胺基酸經LATl向癌細胞內的轉運，可以抑制癌細胞內蛋白質合成，降低細胞增殖速率，實現癌症治療和控制癌症發展的目的。因此，某種藥物如果能夠抑制LATl的表達，就可以在一定程度上治療抑制癌細胞的生長，這種藥物具有成為抗癌藥物的前景。
[0005]在篩選治療宮頸癌 的藥物的過程中，皂苷類物質由於植物來源豐富，容易獲取，療效好，且不良反應較低，一度成為人們關注的目標。人參為五加科人參屬草本植物人參的乾燥根，人參的主要成分為人參皂苷，人參皂苷單體化合物具有抗腫瘤，抗疲勞，抗衰老等功效。人參皂苷Rbl和Rgl在天然植物中含量較高，而Rg3、Rh2、compand K等含量較少。許多藥理研究表明，稀有人參皂苷(如Rhl、Rh2、Rg3、Rb3等)藥效更為珍貴，在某些難治性疾病如腫瘤治療方面顯示獨特的療效，因此，對人參進行加工處理，增加人參稀有皂苷的含量，同時篩選藥物組方配伍，形成一個有效的抗癌方劑是本領域技術人員研究的關鍵。

【發明內容】

[0006]為解決上述技術問題，本發明提供一種抗肺癌組合物及其應用。
[0007]本發明所述的一種抗肺癌組合物，其特徵在於，包括人參，南沙參，白花蛇舌草，其中，所述人參為160-200份，南沙參為50-90份，白花蛇舌草為60-120份。
[0008]進一步的，人參為180-195份，南沙參為65_85份，白花蛇舌草為76_90份。
[0009]進一步的，所述人參經過如下方法加工:將人參原材料粉碎20-40目，用人參原料50%-70%重量的水溼潤，噴入人參原料5-20%重量的米根黴菌菌液，在25-30°C條件下有氧發酵24-72小時，得到生物轉化人參。
[0010]進一步的，所述的人參為鮮人參、幹人參、紅參中的任一種或幾種。
[0011]進一步的，一種抗肺癌組合物和藥學上可接受的載體組成。
[0012]所說的藥學中可以接受的輔助性成分，可包括例如在片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑或適當形式的緩釋劑型等固體製劑形式口服藥物製劑中可以接受和使用的填充劑:如澱粉、糊精、糖粉、預膠化澱粉、乳糖、葡萄糖、碳酸鈣等；黏合劑:如羥丙甲纖維素、聚維酮、澱粉漿、糊精漿、糖漿、膠漿、阿拉伯膠等；賦形劑、潤滑劑:如硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、滑石粉、微粉矽膠、液體石蠟、聚乙二醇等；軟膠囊劑中的基質:如植物油、聚乙二醇等；抗氧化劑:如亞硫酸鈉、抗壞血酸、半胱氨酸、維生素E等；在口服緩控釋製劑中的阻滯劑:如蜂蠟、巴西棕櫚蠟、氫化植物油、硬脂酸、聚維酮、乙基纖維素等；在注射製劑中允許使用的溶劑、助溶劑、穩定劑和附加劑等。經相應的製劑方法和過程，即可製備得到相應的口服或注射製劑形式的藥物。在栓劑中使用的基質:如可可豆脂、半合成甘油脂肪酸酯類、香果脂、氫化油等；水溶性及親水性基質:如甘油明膠、聚乙二醇、吐溫-61、硬脂酸聚烴氧(40)酯、水溶性殼聚糖、泊洛沙姆等；吸收阻滯劑:如大豆卵磷脂、海藻酸、羥丙基甲級纖維素、硬脂酸、蜂蠟等；在軟膏中使用可藥用輔料或賦形劑，如黏合劑:如預膠化澱粉、羥丙基纖維素等、填料:如乳糖、蔗糖、甘露醇等；潤滑劑:如硬脂酸、聚乙二醇、硬脂酸鎂、滑石粉、二氧化矽等、崩解劑:如澱粉、竣甲基纖維素納；潤滑劑:如十烷基硫酸納等。
[0013]其中，口服製劑優選為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質體；注射製劑優選凍乾粉針、靜脈乳劑、脂質體、納米乳；外用製劑優選栓劑、軟膏。
[0014]本發明還提供了上述組合物在製備抗肺癌藥物中的應用。
[0015]其中，抗肺癌藥物優選為用於肺癌的含有人參的組合物。
[0016]本發明所述的藥物製備方法為:將前述的原料按相應的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然後將其用等質量的30-50°C的溫水浸泡l_3h，然後，加入原料重量3-5倍的水，在75-90°C提取3-5次，冷卻過濾後，在65°C以下濃縮成為與原料等質量的流浸膏狀，搖勻密封，至於陰涼通風處保存。上述浸膏可直接作藥用，也可用於如動物抗癌模型試驗。
[0017]本發明的有益效果在於:1、通過實驗驗證，組合物有高效的抗癌效果。2、組合物的抗癌機制很可能是由於藥物中的有效成分抑制了 L型胺基酸轉運體I的轉運功能，從而達到良好的抗癌效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1為不同濃度抗肺癌組合物對肺癌細胞H1299體外生長的抑制率。
【具體實施方式】
[0019]下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細說明，給出的實施例僅為了闡明本發明，而不是為了限制本發明的範圍。
[0020]下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法；下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規生化試劑商店購買得到的；下述實施例中的米根黴(根黴菌Rhizopus oryzae)購自中國普通微生物菌種保藏管理中心，菌株保藏編號:cgmcc3.6919,原始編號:3.851。
[0021]實施例1:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為160克，南沙參為50克，白花蛇舌草為120 克。[0022]人參原材料粉碎20-40目，其中，所述的人參為鮮人參,用人參原料50%重量的水溼潤，噴入人參原料5%重量的米根黴菌菌液，在25-30°C條件下有氧發酵24小時，得到生物轉化人參。
[0023]製備方法為:先用清水清洗除雜，然後將其用等質量的50°C的溫水浸泡lh，然後，加入原料重量5倍的水，在75°C提取3次，冷卻過濾後，在65°C以下濃縮成為與原料等質量的流浸膏狀，得到抗肺癌組合物I號。
[0024]實施例2:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為200克，南沙參為90克，白花蛇舌草為60克。
[0025]人參原材料粉碎20-40目，人參為幹人參與紅參混合物，重量比為1:1，用人參原料70%重量的水溼潤，噴入人參原料20%重量的米根黴菌菌液，在25-30°C條件下有氧發酵72小時，得到生物轉化人參。
[0026]製備方法為:將前述的原料按相應的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然後將其用等質量的30°C的溫水浸泡3h，然後，加入原料重量3倍的水，在80°C提取5次，冷卻過濾後，在65°C以下濃縮成為與原料等質量的流浸膏狀，得到抗肺癌組合物2號。
[0027]實施例3:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為180-195克，南沙參為65-85克，白花蛇舌草為76-90克。
[0028]人參原材料粉碎20-40目，所述人參為紅參，用人參原料67%重量的水溼潤，噴入人參原料17%重量的米根黴菌菌液，在25-30°C條件下有氧發酵38小時，得到生物轉化人參。
[0029]製備方法為:先用清水清洗除雜，然後將其用等質量的44°C的溫水浸泡2.5h，然後，加入原料重量4倍的水，在90°C提取4次，冷卻過濾後，在65°C以下濃縮成為與原料等質量的流浸膏狀，搖勻密封，得到抗肺癌組合物3號。
[0030]實施例4:
在本實施例中，通過實驗證明了組合物在抗肺癌方面具有良好的效果。
[0031]1.材料與方法
1.1受試藥品 抗肺癌組合物3號。
[0032]1.2 細胞株:
肺癌細胞H1299。
[0033]1.3主要試劑
DMEM、RPMI1640、F12K、McCoy』 s 5A培養基購自Hycelone公司和中科邁晨(北京)科技有限公司，胎牛血清(FBS)、胰酶購自Gibco公司，PBS粉末購自Sigma公司，100X青鏈黴素溶液購自北京索萊寶科技有限公司，MTS —步法細胞活力檢測試劑盒(Promega)。
[0034]1.4 儀器
Zenyth 1100多功能掃描儀:奧地利Anthos公司出品；IC 1000 Countstar全自動細胞計數儀:上海睿鈺生物科技有限公司；HFsafe生物安全櫃:力康生物醫療科技控股有限公司；HERAcell 150i CO2培養箱:Thermo Scientific公司；LD5_2A低速離心機:北京醫用離心機廠。
[0035]1.5實驗方法
1.5.1人癌細胞的體外培養與鋪板
上述人源癌細胞用含10%FBS和青鏈黴素的DMEM/RPMI1640/F12K/McCoy』 S 5A培養基於37°C、5%C02、95%飽和溼度的培養箱中常規培養、傳代，待細胞生長至融合、於超淨臺內用胰酶將貼壁細胞進行消化，以培養基混懸成104~105cells/ml的細胞懸液，鋪於96孔板，每孔鋪細胞懸液100μΙ，繼續培養24 h。
[0036]1.5.2藥物配製與96孔板投藥
1.5.2.1抗 肺癌組合物3號
精密稱取抗肺癌組合物3號600mg，以IOml的DPBS溶解後離心12000rpm 40min,取上清液經0.22Mffl的微孔濾膜除菌過濾後再以培養基逐級稀釋成逐級稀釋成30、15、7.5、
3.75、1.875,0.94,0.47mg/ml的溶液，投於96孔板，每孔50μ1，使孔內的終濃度分別為10、
5、2.5、1.25,0.63,0.31和0.15mg/kg,對照孔投與同體積的培養基，繼續培養48 h。
[0037]1.5.3 MTT 測定
投藥48 h後將MTS —步法細胞活力檢測試劑盒中的試劑，每孔加入20 μ I，放入CO2培養箱中繼續培養1-3h，應用螢光掃描儀在492nm處測定每孔的OD值，對每孔的存活細胞產生的可溶性甲瓚的顏色進行測定。
[0038]1.5.4結果計算
根據每孔的OD值，按下列公式計算對細胞生長的抑制率:
抑制率(％)=(對照組平均OD值-給藥組平均OD值)/對照組平均OD值X 100%
2.結果
2.1抗肺癌組合物3號對癌細胞的體外生長抑制作用
試驗結果可見，肺癌細胞H1299在體外生長過程中受到不同程度的抑制，抑制率約51.29% ( ±6.59)以上。抗肺癌組合物3號的抑制濃度為0.15~10mg/ml，H1299可見3個濃度以上的劑量依賴關係(見表1、圖1)。
[0039]3.結論
抗肺癌組合物3號對人源癌細胞系的體外生長具有一定抑制作用。
[0040]表1抗肺癌組合物3號對肺癌細胞的體外生長抑制作用
【權利要求】
1.抗肺癌組合物，其特徵在於，包括人參，南沙參，白花蛇舌草，其中，所述人參為160-200份，南沙參為50-90份，白花蛇舌草為60-120份。
2.根據權利要求1所述的抗肺癌組合物，其特徵在於，人參為180-195份，南沙參為65-85份，白花蛇舌草為76-90份。
3.根據權利要求2所述的抗肺癌組合物，其特徵在於，所述人參經過如下方法加工:將人參原材料粉碎20-40目，用人參原料50%-70%重量的水溼潤，噴入人參原料5-20%重量的米根黴菌菌液，在25-30°C條件下有氧發酵24-72小時，得到生物轉化人參。
4.根據權利要求1-3任意一項所述的抗肺癌組合物，其特徵在於，所述的人參為鮮人參、幹人參、紅參中的任一種或幾種。
5.根據權利要求1-3任意一項所述的抗肺癌組合物，其特徵在於和藥學上可接受的載體組成。
6.根據權利要求1-3任意一 項所述的抗肺癌組合物，其特徵在於，口服製劑可以為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質體。
7.根據權利要求1-3任意一項所述的抗肺癌組合物，其特徵在於注射用製劑可以為凍乾粉針、注射用靜脈乳劑、注射劑、脂質體、納米乳、輸液；外用製劑可以為栓劑、軟膏。
8.—種如權利要求1所述的抗肺癌組合物作為有效成分在治療抗肺癌藥物中的應用。
【文檔編號】A61K36/748GK104000904SQ201410239229
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年5月30日 優先權日:2014年5月30日
【發明者】金鑫 申請人:金鑫