聚乙二醇化生長激素的液體製劑的製作方法

2023-10-07 23:12:54 5

專利名稱：：聚乙二醇化生長激素的液體製劑的製作方法
技術領域：
：本發明涉及包含聚乙二醇化生長激素的藥物組合物，其中PEG通過肟鍵與生長激素連接。這些穩定的組合物在療法中有用。
背景技術：
：來自人和常見的家養動物的生長激素為約191個胺基酸的蛋白質，由垂體前葉(anteriorlope)合成和分泌。人生長激素由具有如下序列的191個胺基酸組成NSHNDDALLKNYGLLYCFRKDMDKVETFLRIVQCRSVEGSCGF,SEQIDNo.1。生長激素為關鍵激素，它不僅涉及調節身體的生長，而且涉及調節蛋白質、碳水化合物和脂質的代謝。生長激素的主要作用在於促進生長。由生長激素影響的器官系統包括骨骼、結締組織、肌肉和內臟，諸如肝、腸和腎。生長激素的代謝作用由胰島素樣生長因子-I(IGF-I)介導。IGF-I主要由肝產生並且它結合了特異性結合蛋白在血漿中循環，所述的特異性結合蛋白中最重要的是胰島素樣蛋白結合蛋白-3(IGFBP-3)。生長激素似乎通過兩種不同機制發揮其活性。在飯後期間，該作用通過IGF-1介導並且結果為葡萄糖攝取、脂肪生成和蛋白質生成(proteinogenesis)。在禁食時，即當血糖低時，生長激素分泌得到強化，其中它增加脂氧化。由此值得注意的是在飯後期間和禁食期間的生長激素起保護和累積蛋白質的作用。生長激素用於治療生長激素缺乏，例如各種形式的身材矮小症。令人遺憾的是，生長激素具有相對短的半衰期，這意味著接受生長激素治療的患者一般需要每日給予生長激素。由於生長激素為蛋白質，所以給藥形式為注射劑，這對患者反映出了日常的不便利性。在嘗試減少給藥頻率中，在商品名NutropinDepot下銷售了緩釋製劑形式的生長激素。另一種減少給藥頻率的手段在於操縱生長激素分子以便增加其半衰期。增加蛋白質半衰期的眾所周知的方式包括聚乙二醇化(US4,179,337和J.Biol.Chem.221,21969-21977(1996)),它可能通過增加該分子的分子大小以便降低腎清除率起作用，並且通過使所述的分子對蛋白酶分解的敏感性降低起作用。PEG部分可通過不同形式的鍵或連接與PEG結合，包括通過醯化游離氨基獲得的醯胺鍵。或者，可以將官能基引入生長激素，該基團在隨後的步驟中與官能化PEG部分反應。這種手段通常具有改善的選擇性的優點，因為可以對引入的官能基進行選擇以便它對生長激素而言是唯一的(umque)。US6,673,347中披露了可以通過肟鍵與蛋白質結合的聚合物基團。肟鍵可以在羰基官能化，諸如醛官能化生長激素與胺氧基官能化PEG之間的反應中形成，或反之亦然在胺氧基官能化生長激素與羰基，諸如醛官能化PEG之間的反應中形成。WO97/39768中4皮露了可以在pH6.0-8.8下配製人生長激素。J.Am.Chem.Soc.JJJ,3893-3899(1995)中披露了肝鍵形成速率在pH為相當低的pH,即5.7左右或低於5.7下具有其最大值。本發明的目的在於提供聚乙二醇化生長激素的藥物組合物，其中PEG通過肟鍵與生長激素連接。這類製劑比公知的製劑具有改善的或另夕卜的(alternative)特性。發明概述本發明者已經令人意外地發現包含聚乙二醇化生長激素的組合物，其中PEG部分通過肝鍵與生長激素連接，在中性或酸性pH下的穩定性明顯更強。因此，在一個實施方案中，本發明涉及藥物組合物，其包含聚乙二醇化生長激素，其中所述的聚乙二醇化生長激素包含生長激素和PEG部分，其中所述的生長激素和所述的PEG部分通過坊鍵且任選通過連接體(lmker)連接，所述的製劑具有7或低於7的pH。在一個實施方案中，本發明涉及治療得益於生長激素血漿水平增加的疾病的方法，該方法包含對有此需要的患者給予治療有效量的本發明的組合物。在一個實施方案中，本發明涉及本發明的組合物在製備用於治療得益於生長激素血漿水平增加的疾病的藥劑中的應用。附圖描述圖l表示作為在不同20mM緩衝液中pH函數形成的脫聚乙二醇化生長激素的量。數據來自如實施例7中所述的實驗。本發明的描述本發明涉及藥物組合物，其包含聚乙二醇化生長激素，其中所述的聚乙二醇化生長激素包含生長激素和PEG,其中所述的生長激素和所述的PEG通過肟鍵且任選通過連接體連接，所述的製劑具有7或低於7的pH。術語"PEG，，意在表示約100-約1,000,000Da分子量的聚乙二醇，包括其類似物，其中，例如，末端OH-基團已經被烷氧基，諸如甲氧基、乙氧基或丙氧基取代。特別地，其中末端-OH基團已經被甲氧基取代的PEG稱作mPEG。術語"mPEG"(或更適當地為"mPEG基")意指如下結構的多分散或單分散基團formulaseeoriginaldocumentpage18其中m為大於1的整數。因此，mPEG具有約4000Da,即約4kDa的分子量，其中m為90。同樣，具有20kDa平均分子量的mPEG具有的m平均值為453。這些分子因生產mPEG的方法而通常具有分子量分布。這一分布通過多分散性指數描述。本文所用的術語"多分散性指數"意指重均分子量與數均分子量之比，正如聚合物化學領域公知的(例如，參見"PolymerSynthesisandCharacterization",J.A.Nairn,UniversityofUtah,2003)。多分散性指數為大於或等於l的數字，並且可以根據凝膠滲透色譜數據估計它。當多分散性指數為1時，產物為單分散性的且由此由具有單一分子量的化合物構成。當多分散性指數大於l時，它是該聚合物的多分散性測量值，即具有不同分子量的聚合物具有多寬的分布。例如，"mPEG20000"或"mPEG(20k)"在結構式，化合物名稱或分子結構中的應用表示mPEG殘基，其中mPEG為多分散性的並且具有約20kDa的分子量。多分散性指數一般隨PEG或mPEG分子量而增加。當述及20kDaPEG特別是20kDamPEG時，意在表示具有低於1.06,諸如低於1.05,諸如低於1.04,諸如低於1.03,諸如1.02-1.03間的多分散性指數的化合物(或實際上為化合物的混合物)。當述及30kDaPEG特別是30kDamPEG時，意在表示具有低於1.06,諸如低於1.05，諸如低於1.04，諸如低於1.03，諸如1.02-1.03的多分散性指數的化合物(或實際上為化合物的混合物)。當述及40kDaPEG特別是40kDamPEG時，意在表示具有低於1.06,諸如低於1.05,諸如低於1.04,諸如低於1.03,諸如1.02-1.03的多分散性指數的化合物(或實際上為化合物的混合物)。術語"聚乙二醇化GH"或"聚乙二醇化hGH"意在表示共價結合PEG的GH或hGH,即它表示包含GH或hGH和PEG的共軛物(conjugate),其中所述的GH或hGH和所述的PEG共^f介連接，並且在本文上下文中通過將鍵共價連接。所述的連接可以進一步通過連接體。術語"共軛物"作為名詞意在表示修飾的肽，即具有與之鍵合以改變所述肽的特性的部分的肽。作為動詞，該術語意在表示將部分(moiety)與肽鍵合以改變所述肽的特性的過程。下面是在本文其他地方描述的實施方案的非限制性目錄。實施方案1:藥物組合物，包含聚乙二醇化生長激素，其中所述的聚乙二醇化生長激素包含生長激素和PEG,其中所述的生長激素和所述的PEG通過坊鍵且任選通過連接體連接，所述的製劑具有7或以以下的pH。實施方案2:實施方案1的組合物，其中所述的製劑不含任何顯著量的碳酸鹽。實施方案3:實施方案1或實施方案2的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為0.001-100mg/ml。實施方案4:實施方案3的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為0.01-100mg/ml.實施方案5:實施方案4的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為1-100mg/ml.實施方案6:實施方案5的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為5-50mg/ml。實施方案7:實施方案6的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為30-50mg/ml。實施方案8:實施方案7的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度約為40mg/ml。實施方案9:實施方案1-8中任意項的組合物，進一步包含濃度為0.001-10mg組氨酸/mg生長激素的組氨酸。實施方案10:實施方案9的組合物，包含濃度為0.01-1mg組氨酸/mg生長激素的組氨酸。實施方案11:實施方案10的組合物，包含濃度為0.02-0.05mg組氨酸/mg生長激素的組氨酸。實施方案12:實施方案1-8中任意項的組合物，進一步包含濃度為0.002-0.35mg/mg聚乙二醇化生長激素的組氨酸。實施方案13:實施方案12的組合物，包含濃度為0.003-0.035mg組氨酸/mg聚乙二醇化生長激素的組氨酸。實施方案14:實施方案13的組合物，包含濃度為0.01-0.02mg組氨酸/mg聚乙二醇化生長激素的組氨酸。實施方案15:實施方案1-14中任意項的組合物，進一步包含濃度為0.05-100mg/ml的組氨酸。實施方案16:實施方案15的組合物，包含濃度為0.05-1mg/ml的組氨酸。實施方案17:實施方案16的組合物，包含濃度為0.1-0.5mg/ml的組氨酸。實施方案18:實施方案1-17中任意項的組合物，進一步包含濃度為1-20mg/ml的甘氨酸。實施方案19:實施方案18的組合物，包含濃度為2-10mg/ml的甘氨酸。實施方案20:實施方案1-19中任意項的組合物，進一步包含濃度為1-10mg/ml的非離子型表面活性劑。實施方案21:實施方案20的組合物，其中所述的非離子型表面活性劑為伯洛沙姆188(poloxamer188)。實施方案22:實施方案1-21中任意項的組合物，進一步包含濃度為5-10mg/ml的衝唐醇(sugaralcohol)。實施方案23:實施方案1-2]中任意項的組合物，進一步包含濃度為5-100mg/ml的糖醇。實施方案24:實施方案23的組合物，包含濃度為15-50mg/ml的所述的糖醇。實施方案25:實施方案24的組合物，包含濃度約為20mg/ml的所述的糖醇。實施方案26:實施方案23-25中任意項的組合物，其中所述的糖醇為甘露糖醇。實施方案27:實施方案1-26中任意項的組合物，進一步包含5-50mM最終磷酸鹽濃度的磷酸鹽緩沖液。實施方案28:實施方案1-26中任意項的組合物，進一步包含O.l-5mM最終磷酸鹽濃度的磷酸鹽緩衝液。實施方案29:實施方案28的組合物，包含4.5mM最終;舞酸鹽濃度的磷酸鹽緩衝液。實施方案30:實施方案1-26中任意項的組合物，進一步包含5-50mM緩沖液濃度的檸檬酸鹽緩衝液。實施方案31:實施方案1-26中任意項的組合物，進一步包含O.l-5mM緩衝液濃度的檸檬酸鹽緩衝液。實施方案32:實施方案1-26中任意項的組合物，進一步包含5-50mM緩衝液濃度的乙酸鹽緩衝液。實施方案33:實施方案1-26中任意項的組合物，進一步包含O.l-5mM緩衝液濃度的的乙酸鹽緩衝液。實施方案34:實施方案1-33中任意項的組合物，進一步包含濃度為1-10mg/ml的選自苯酚、河-f惑\m-cresol)和/或千醇的防腐劑。實施方案35:實施方案34的組合物，其中所述的防腐劑的存在濃度為1_5mg/ml。實施方案36:實施方案34或實施方案35的組合物，其中所述的防腐劑為苯酚。實施方案37:實施方案1-36中任意項的組合物，包含組氨酸0.1-1.0mg/mg聚乙二醇化生長激素伯洛沙姆188:2-4mg/ml甘露糖醇30-50mg/ml苯酚1-5mg/ml聚乙二醇化生長激素0.1-5.0mg/mlpH:5-7。實施方案38:實施方案37的組合物，包含:組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇苯酚聚乙二醇化生長激素pH:0.54mg/mg聚乙二醇化生長激素3mg/ml40mg/ml2.5mg/ml0.1-5.0mg/ml6.1。實施方案39:實施方案1-36中任意項的組合物，包含:甘氨酸甘露糖醇總P043-:苯酚聚乙二醇化生長激素pH:3-7mg/ml10-30mg/ml5-20mM1to5mg/ml0.1-5mg/ml5-7。實施方案40:實施方案39的組合物，包含甘氨酸甘露糖醇總PO-:苯酚聚乙二醇化生長激素pH:4.4mg/ml22mg/ml9mM2.5mg/ml0.1-5mg/ml6.1-7.3。實施方案41:實施方案1-36中任意項的組合物，包含:組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇苯酚聚乙二醇化生長激素pH:0.002_0.34mg/mg聚乙二醇化生長激素1-4mg/ml10-30mg/ml1to5mg/ml1-200mg/ml5-7。實施方案42:實施方案41的組合物，包含:組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇苯酚聚乙二醇化生長激素:pH:0.0085mg/mg聚乙二醇化生長激素1.5mg/ml20mg/ml5mg/ml1-200mg/ml6.1。實施方案43:實施方案1-36中任意項的組合物，包含甘氨酸甘露糖醇總P043-:苯酚聚乙二醇化生長激素pH:2-7mg/ml10-30mg/ml2-20mM1-5mg/ml1-200mg/ml5-7。實施方案44:實施方案43的組合物，包含:總PO:苯酚聚乙二醇化生長激素:pH:甘氨酸2.2mg/ml甘露糖醇11mg/ml4.5mM5mg/ml1-200mg/ml5-7。實施方案45:實施方案1-44中任意項的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素包含人生長激素。實施方案46:實施方案1-45中任意項的組合物，其中PEG部分在所述的生長激素的N-末端上與生長激素連接。實施方案47:實施方案1-46中任意項的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素選自Lyse(4-((2-(l-(mPEG羰基)哌啶-4基)乙氧基)亞氨基)戊醯基)192)hGH(l-192)醯胺，其中mPEG具有的分子量20kDa;(S)-2-(hGH基氨基)-6-(4-((2-(l-(4-(mPEG基氧基)丁醯基)哌啶-4-基)乙氧基)亞氨基)戊醯氨基)己醯胺，其中mPEG具有的分子量10kDa;N""-[2-(4-(4-(mPEG(20k)基丁醯基)-氨基-丁氧基亞氨基)-乙基)hGH;N':141[2-(l-(十六醯基)哌啶-4-基)乙氧基亞氨基]-乙基]hGH;N""(2-(4-(4-(l,3-雙(mPEG(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(2,6-雙(mPEG(20k)基氧基羰基氨基)己醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2—(4-(4-(mPEG(30k)基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2乂4-(4-(mPEG(20k)基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;和N""(2-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH,其中mPEG(20k)基和mPEG(30k)基意在分別表示mPEG(20k)基和mPEG(30k)基，其中多分散性指數低於1.06;或[MeO-(CH2CH2O)4Q0-5Q。-CH2CH2-NH-C(=O)-O-CH2]2CH-O-(CH2)3-C(=O)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;[MeO-(CH2CH2O)600-750](CH2)3-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)600-750-(CH2)3C(=O)NH]-C(=O)NH-(CH2)4-O-N=CH-C(=O)-GH;MeO-(CH2CH20)4oo-5ocrCH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;MeO-(CH2CH20)6Q—7。。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;MeO-(CH2CH20)85。-95CrCH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;[MeO-(CH2CH2O)400-500〗-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)400—500-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;[MeO-(CH2CH2O)600-700]-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)600-700-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;MeO-(CH2CH20)4。。-5oo-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;MeO-(CH2CH20)6Q。—7。。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;MeO-(CH2CH20)85Q-95。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;[MeO-(CH2CH2O)4。。.50。]-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)40。—5。0-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(HO)-NH-(CH2)4-9NHCH-CH2-9(cH2)56H;Meo-(CH2CH2o)600-700-CH2CH2CH2-c(卄o)-NH-(CH2)4-9N卩CH-CH2-9(cH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)850-950-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-9N=CH—CH2-o-(cH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH-(CH2)4CHMe9(CH2CH2o)400-500-c(=0)NH-C(=0)NH-(CH2)4—9N=CH-CH2-9(CH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-0KCH2)6-GH;Meo-(CH2CH2o)600-700-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-o-(cH2)6-GH;Meo-(CH2CH2o)850-950-CH2CH2CH2-c(=o)-NH—(CH2)4-o-N=CH-CH2-CKCH2)6-GH;Meo-(CH2CH2o)4。。-5。。-c(=o)NH-(CH2)4CHMe9(CH2CH2o)4。0-5。。-c(=o)NH-c(=o)NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-o-(CH2)6-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(HO丫NH-(CH2)4-o—NHCH-CH2-o-(1,4-門6H4)門H2-GH;Meo-(CH2CH2o)600,700-CH2CH2CH2-c(=o)-NK-(CH2)4-o-N=CH-CH2-o-(l,4-c6H4)CH2-GH;Meo-(CH2CH2o)850-950-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-o-(l,4-c6H4)CH2-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500〕-c(HO)NH-(CH2)4CH〖Meo-(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH-c(=o)NH-(CH2)4-9N=CH-CH26-(l,4-c6H4)CH2-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(卩o)-NH-(CH2)4-9NHCH-CH2-9(1VC6H4)CH2-GH;Meo-(CH2CH2o)600-700-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-9N=CH-CH2-o-(l,3-c6H4)CH2-GH;Meo—(CH2CH2o)850-950-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-9N=CH-CH2-o-(l,3-門6H4)門H2-GH;Me9(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH-(CH2)4CHMeo-(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH〕-c(=o)NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-9(l,3-c6H4)CH2-GH;其中mPEG具有約5kDa，10kDa，15kDa，20kDa，30kDa,40kDa或60kDa的分子量；^""氣2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH，A^4副-2—(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"柳-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^4,-2-(O-(4—(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^4謂—3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;#141/4-3-({4-(1,3-雙(11^巧(1010基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基}-氨氧基)丙氧基hGH;A^"氣3-^4-(mPeg(10k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"氣^G4-(2,^雙(mPeg(10k)基氧基)丙-:i-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-3-((3-(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^""0-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)將基)乙基hGH;A^"湖-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基〉氨氧基)丙'氧基hGH;A^4"氣2-(CK4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;A^"湖-2-(O-(4、3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^4測-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^i"，2-(o-(4-^—peg(20k)基氧基j氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^i"湖-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(U-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-l-基氧基hGH;^i"/，3-((4一G,3一雙(mpeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基卜氨氧基)丙氧基hGH;^"，氺((4一(mpeg(20k)基氧基)亞丁基〉氨氧基)丙氧基hGH;A/Si4i/，3^4一(2,3-雙(mpeg(20k)基氧基)丙小基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"，3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;艫i4i/氣2-(^(2《3一(2,3一雙(mpeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"，3-(H-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^4,一2一(o-(4^4—G,3-雙(mpeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;A^，-2-(O-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;Wi""o一2-(o-(4^3《mpeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^4i，2—(o-(4^4-(2,3-雙(mpeg(30k)基氧基)丙小基氧基)丁醯基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/Si"氣2-(O—(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基！肟基)乙基hGH;T^4Wo—3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基)氨氧基)丙小基氧基hGH;A/Si4，各(^(n雙(mpeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基卜氨氧基)丙氧基hGH;A/5i4固各(^(mpeg(30k)基氧基)亞丁基〉氨氧基)丙氧基hGH;A^4i/氣3^4一(2,3—雙(mpeg(30k)基氧基)丙小基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;^"wo一3-(。一—Peg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A/S"固-3-(0-(2,3-雙(mPeg(3Ok)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"/，3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙-l-基氧基)PEG基氧基}亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"柳-2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;7V^"-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;7V^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;7V^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;7V^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基卜氨氧基)丙氧基hGH;A^41-3-({4-(mPeg(1Ok)基氧基)亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"—3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;#141-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肝基)乙基hGH;A/^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-mmo丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)lt基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(5-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;iV5141-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肝基)乙基hGH，A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"—2-(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"—3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^]"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^"—3-((4-(mPeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^"-3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;;V^"-2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH;^40_2_(0一(4一{4_(1,3_雙(1111^^10]^基氨基羰基氧基)丙_2_基氧基)丁醯基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^氣2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肝基)乙基hGH,A^-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基》氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^氣2-(O-(4-(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-l-基氧基hGH;A^化-3-((4-(l，3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基》-氨氧基)丙氧基hGH;#40_3-({4-(mPeg(1Ok)基氧基)亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A/^-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^-3-((3-(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;jV540—^((4-P3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基》氨氧基)丙氧基hGH;A^，2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-(3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基》氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肝基)乙基hGH;A^-2-(O-(4-(5-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基)氨氧基)丙-l-基氧基hGH;A^-3-((4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基卜氨氧基)丙氧基hGH;A^氣3-((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^，3-(H-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^奶-3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^0-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^—3-(《4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^J-(O-(4-(4-(mPeg(:30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^。-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)將基)乙基hGH;A^G-2-(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/S氣3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^氣3-((4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A/S氣3-((4-(mPeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^-3—((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^-3-((3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A/^-3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^o—3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;和A/S，2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH。實施方案48:治療得益於循環生長激素量增加的疾病的方法，該方法包含對有此需要的患者給予治療有效量的實施方案1-47中任意項的組合物。實施方案49:實施方案48的方法，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；普-韋症候群(PWS);努南症候群；唐氏症候群；慢性腎臟疾病，幼年型類風溼性關節炎；嚢性纖維化；接受HAART治療的兒童中的HIV-感染(HIV/HALS兒童)；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);成年人中的GHD;長骨內或其骨折，諸如脛骨、腓骨、股骨、肱骨、橈骨、尺骨、鎖骨、matacarpea、matatarsea和趾；松質骨，諸如顱骨(scull)、手底和足底內或其骨折；例如手、膝或肩中的腱或韌帶手術後的患者；牽拉骨生成(distractionoteogenesis);因骨寬或盤置^灸、半月鬥反4多復(meniscusrepair)、脊柱融合術或假體固定術導致的病症，諸如在膝、髖、肩、肘、腕或顎中；因骨接合術材料，諸如釘、螺釘和板固定導致的病症；骨折的骨不連接或骨折癒合不良；因骨脂瘤(osteatomia)導致，例如來自脛骨或第一訨的病症；因移植物植入導致的病症；因創傷或關節炎導致的膝中的關節軟骨變性；具有特納症候群的患者中的骨質疏鬆症；男性骨質疏鬆症；長期透析的成年患者(APCD);APCD中與營養不良相關的心血管疾病；APCD中惡病質的逆轉；APCD中的癌症；APCD中的')"曼性阻塞性(abstractive)肺病；APCD中的HIV;具有APCD的中老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲勞症候群；克羅恩病；受損的肝功能；具有HIV感染的男性；短腸症候群；向心性肥胖(centralobesity);HIV-相關脂肪營養不良症候群(HALS);男性不育；大的選擇性外科手術後的患者，酒精/藥物脫毒或神經性創傷；老化；虛弱老人；骨關節炎；創傷損害的軟骨；勃起功能障礙；纖維肌痛；記憶障礙；抑鬱症；外傷性腦損傷；蛛網膜下出血；極低出生體重；代謝症候群；糖皮質激素肌病；和因兒童糖皮質激素治療導致的身材矮小症.實施方案50:實施方案48或實施方案49的方法，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);和成年人中的GHD。實施方案51:實施方案1-47中任意項的組合物在製備用於治療得益於生長激素血漿水平增加的疾病的藥劑中的應用。實施方案52:實施方案51的應用，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；普-韋症候群(PWS);努南症候群；唐氏症候群；慢性腎臟疾病，幼年型類風溼性關節炎；嚢性纖維化；HIV-感染m兒童接受HAART治療(HIV/HALS兒童)；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);成年人中的GHD;長骨內或其骨折，諸如脛骨、腓骨、股骨、肱骨、橈骨、尺骨、鎖骨、matacarpea、matatarsea和J止；術〉質骨，諸如盧貞骨、手底和足底內或其骨折；例如手、膝或肩中的腱或韌帶手術後的患者；牽拉骨生成；因髖或盤置換、半月板修復、脊柱融合術或假體固定術導致的病症，諸如在膝、髖、肩、肘、腕或顎中；因骨接合術材料，諸如釘、螺釘和板固定導致的病症；骨折的骨不連接或骨折癒合不良；因骨脂瘤導致，例如來自脛骨或第一趾的病症；因移植物植入導致的病症；因創傷或關節炎導致的膝中的關節軟骨變性；具有特納症候群的患者中的骨質疏鬆症；男性骨質疏鬆症；長期透析的成年患者(APCD);APCD中與營養不良相關的心血管疾病；APCD中惡病質的逆轉；APCD中的癌症；APCD中的慢性阻塞性肺病；APCD中的HIV;具有APCD的中老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲勞症候群；克羅恩病；受損的肝功能；具有HIV感染的男性；短腸症候群；向心性肥胖；HIV-相關脂肪營養不良症候群(HALS);男性不育；大的選擇性外科手術後的患者，酒精/藥物脫毒或神經性創傷；老化；虛弱老人；骨關節炎；創傷損害的軟骨；勃起功能障礙；纖維肌痛；記憶障礙；抑鬱症；外傷性腦損傷；蛛網膜下出血；極低出生體重；代謝症候群；糖皮質激素肌病；和因兒童糖皮質激素治療導致的身材矮小症.實施方案53:實施方案51或實施方案52的方法，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW)，但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);和成年人中的GHD。在一個實施方案中，聚乙二醇化生長激素為聚乙二醇化的人生長激素(hGH),它具有如SEQIDNo.1中所示的胺基酸序列。在一個實施方案中，生長激素為hGH的變體，其中將變體理解為通過下列方式獲得的化合物用另一種天然或非天然胺基酸取代hGH序列中的一個或多個胺基酸殘基；和/或通過將一個或多個天然或非天然胺基酸添加到hGH序列中；和/或通過從hGH序列中缺失一個或多個胺基酸殘基，其中這些步驟中的任意一個之後可以任選對一個或多個胺基酸殘基進行進一步衍生化。特別地，這類取代為保守的，其含義為一個胺基酸殘基被來自相同組的另一個胺基酸殘基取代，即被另一個具有類似特性的胺基酸殘基取代。可以將胺基酸基於其特性便利地分成如下幾組鹼性胺基酸(諸如精氨酸和賴氨酸)；酸性胺基酸(諸如穀氨酸和天冬氨酸)；極性胺基酸(諸如穀氨醯胺、組氨酸、半胱氨酸和天冬醯胺)；疏水性胺基酸(諸如亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、曱硫氨酸和纈氨酸)；芳香胺基酸(諸如苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸)和小胺基酸(諸如甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸和蘇氨酸)。在一個實施方案中，生長激素與具有SEQIDNo.1的胺基酸序列的hGH具有至少80%，諸如至少85%,諸如至少90%,諸如至少95%的同一性。在一個實施方案中，正如本文測定I中測定的，所述的與hGH的同一性與hGH的至少20%,諸如至少40%,諸如至少60%,諸如至少80%的生長激素活性相關。本文所用的為本領域中公知的術語"同一性"意指如通過比較序列測定的兩種或多種蛋白質序列之間的相關性。在本領域中，"同一性"還指如根據兩個或多個胺基酸殘基的串之間的配對數確定的蛋白質之間的序列相關性程度。"同一性"確定了具有通過特定數學模型或電腦程式(即"算法")得到的缺口排列(如果有的話)的兩種或多種序列中更小序列之間的相同配對百分比。易於通過公知方法計算相關蛋白質的同一性。這類方法包括，但不限於那些在如下文獻中描述的方法ComputationalMolecularBiology,Lesk,A.M.,ed.,OxfordUniversityPress,NewYork,1988;Biocomputing:Informatics和GenomeProjects,Smith,D.W.,ed.,AcademicPress,NewYork,1993;ComputerAnalysisofSequenceData，Part1,Griffin,A.M.,和Griffin,H.G.,eds.,HumanaPress,NewJersey,1994;SequenceAnalysisinMolecularBiology,vonHeinje,G.,AcademicPress,1987;SequenceAnalysisPrimer,Gribskov,M.和Devereux,J.,eds.,M.StocktonPress,NewYork,1991;和Carillo等，SIAMJ.AppliedMath.化1073(1988)。設計測得同一性的優選的方法，以便獲得測試序列之間的最大配對。測定同一性的方法在公開可利用的電腦程式中描述。測定兩種序列之間同一性的優選電腦程式包括GCG電腦程式包，包括GAP(Devereux等，Nucl.Acid.Res.U,387(1984);GeneticsComputerGroup,UniversityofWisconsin,Madison,Wis.);BLASTP、BLASTN和FASTA(Altschul等，J.Mol.Biol.HI,403-410(1990))。^^眾可以從NationalCenterforBiotechnologyInformation(NCBI)和其它來源(BLASTManual,Altschul等NCB/NLM/NIHBethesda,Md.20894;Altschul等,文獻同上)獲得BLASTX程序。眾所周知的Smithwaterman算法也可以用於測定同一性。例^t口，4吏用i十算才幾算、;^:GAP(GeneticsComputerGroup,UniversityofWisconsin,Madison,Wis.),對測定序列同一性百分比的兩種蛋白質進行序列對比，以便優化其相應胺基酸的配對("配對廣度"，如通過算法測定的)。缺口空位罰分(計算為3.倍的對角線平均值；"對角線平均值(averagediagonal)"為所用比較矩陣的對角線的平均值；"對角線"為通過特定比較矩陣指定各正確胺基酸配對的評分或編號)和缺口延長罰分(通常為{分數(1/10)}倍的缺口空位罰分)以及比較矩陣，諸如PAM250或BLOSUM62與算法結合使用。算法還使用標準比較矩陣(參見用於PAM250比較據矩陣Dayhoff等，AtlasofProteinS叫uenceandStructurevol.5,supp.3(1978);用於BLOSUM62比較矩陣Hemkoff等,Proc.Natl.Acad.SciUSA10915-10919(1992))。用於蛋白質序列對比的優選參數包括如下Algorithm:Needleman等，J.Mol.Biol.443-453(1970);Comparisonmatrix:BLOSUM62,來自Henikoff等的Proc.Natl.Acad.Sci.USA10915-10919(1992);GapPenalty:12,GapLengthPenalty:4,ThresholdofSimilarity:0.GAP程序與上述參數聯用。上述參數為使用GAP算法進行蛋白質對比(對末端缺口而言無罰分)的默認參數。在一個實施方案中，生長激素為如J.Clin.Endocnn.Metabol.1562-1571(2004)和EndocrineJ.42,S49-S52(2000)中所述的20khGH。在一個實施方案中，生長激素為hGH,其中第40位穀氨醯胺缺失或被另一種胺基酸取代，且特別是被天冬醯胺取代。在一個實施方案中，生長激素為hGH,其中笫141位穀氨醯胺缺失或被另一種胺基酸取代，且特別是被天冬醯胺取代。在一個實施方案中，生長激素為hGH,它在N-末端上延伸最多達10個胺基酸，諸如0，1，2,3,4,5,6,7,8,9或10個胺基酸。特別提及Ser-X-hGH,其中X表示鍵或一-,二-，三-,四或五-肽，並且特別是Ser-hGH。hGH的變體可通過使用標準蛋白質合成技術進行的蛋白質合成獲得，因為這些變體相當小。或者，可以通過對合適的宿主進行遺傳操作獲得。將編碼該變體的核酸構建體插入宿主，並且在發酵所述的宿主時，可以從發酵液中分離該變體或分離為包涵體。在任何情況下，核酸和宿主構建、發酵和分離均屬於本領域技術人員的能力範圍。PEG典型地為具有5-100kDa分子量，諸如10-80kDa,諸如10，20,30，40，60kDa的mPEG。聚乙二醇化生長激素可以包含一個以上PEG,—般為2或3個。有效地，這相當於使用支化PEG聚乙二醇化的生長激素。或者，一個以上PEG可以與生長激素結合以便獲得PEG分子量增加。按照這種方式，兩個結合的各自具有20kDa分子量的PEG相當於具有40kDa分子量的結合的PEG。通常在PEG與生長激素之間存在連接體。實際上，聚乙二醇化生長激素可以採用結構形式PEG-連接體1-肟-連接體2-生長激素。連接體1和連接體2可以獨立地不存在或存在。使用連接體1和連接體2—般調節PEG與生長激素之間的距離，或它們為用於製備聚乙二醇化生長激素中生產官能化PEG和官能化生長激素的結果。一般而言，連接體為C2—15亞烷基，其中一個或多個亞甲基任選被例如O、NH、C(O)或亞芳基取代。連接體還可以為小的PEG雙基，即例如-(CH2-CH2-0)w5。肟4建在羰基部分(即醛(aldegyde)或酮)與羥基胺部分之間的反應中形成，且特別是在醛部分與羥基胺部分之間的反應中形成在上述圖解反應中，生長激素可以是含羰基或羥基胺(oxyamme)的部分。按照相同的方式，PEG部分可以為含羰基或羥基胺的部分。然而，應理解PEG部分和生長激素必須互補，其含義是如果生長激素為羰基，例如醛官能化的，那麼PEG部分必須為羥基胺官能化的，且如果生長激素為羥基胺官能化的，那麼PEG部分必須為羰基，例如醛官能化的。天然胺基酸不含羰基部分，也不含羥基胺部分，且由此必須將這些官能基引入生長激素。在一個實施方案中，生長激素在N-末端上用Ser-X延長，其中X如上述所定義。在一個實施方案中，X表示鍵，且特別是生長激素為hGH,即N-末端延長的生長激素為Ser-hGH。絲氨酸上的醇例如可以藉助於高硪酸鹽^皮氧化成醛。或者，轉穀氨醯胺酶可以用於催化生長激素與含胺親核基團之間的反應。該反應產生轉氨化的生長激素，其中親核基團被引入生長激素的穀氨醯胺上。通過適當選擇親核基團，羰基部分，即醛或酮，羥基胺或在進一步反應時，例如氧化可以轉化成這些部分之一的基團可以被引入生長激素。例如，這一結果4皮露在WO05/070468和PCT申請WO2006EP063246中。或者，通過使用非天然a-胺基酸醯胺使所述的生長激素的羧基-末端形成醯胺製備生長激素-衍生的醛，酮或羥基胺，所述的非天然a-胺基酸醯胺包含酮，醛或羥基胺作為側鏈官能基。或者，所述的oc-胺基酸醯胺可以包含在進一步反應時可以轉化成所述官能基之一的部分。這類formulaseeoriginaldocumentpage37非天然(X-胺基酸醯胺可以與所述的蛋白質藉助於酶，諸如羧肽酶偶聯。這一結果披露在WO05/035553中。或者，可以如US2005/0170404中披露的在發酵過程中將非-天然胺基酸摻入蛋白質。醛官能化PEGs例如購自Shearwater和NOF公司。羥基胺官能化PEGs並非直接可得到，但可以通過對例如琥珀醯亞胺基官能化的PEG進行簡單的化學操作獲得。有關如何將琥珀醯亞胺基官能化的PEG轉化成烷氧基胺官能化的PEG的詳細描述參見實施例。通過將官能化生長激素與官能化PEG混合，任選隨後純化，例如色謙純化獲得聚乙二醇化生長激素。聚乙二醇化生長激素的濃度一般為0.001-200mg/ml,例如0.001-100mg/ml，諸如0.01-100mg/ml,例如1-100mg/ml,諸如5-50mg/ml,例如10-50mg/ml，諸如30-50mg/ml,例如約40mg/ml。在一個實施方案中，聚乙二醇化生長激素的濃度在0.01-10mg/ml,諸如0.1-10mg/ml，例如0.1-5mg/ml。如下的聚乙二醇化生長激素目錄代表了可以有利地配製成本發明的藥物組合物的聚乙二醇化生長激素s的實例。Lyss(4-((2-(l-(mPEG羰基)哌啶-4基)乙氧基)亞氨基)戊醯基)192)hGH(l-192)醯胺，其中mPEG具有的分子量20kDa;(S)-2-(hGH基氨基)-6-(4-((2-(l-(4-(mPEG基氧基)丁醯基)哌啶-4-基)乙氧基)亞氨基)戊醯氨基)己醯胺，其中mPEG具有的分子量10kDa;N""-[2-(4-(4-(mPEG(20k)基丁醯基)-氨基-丁氧基亞氨基)-乙基)hGH;N""-[2-(l-(十六醯基)哌啶-4-基)乙氧基亞氨基]-乙基]hGH;N""(2-(4-(4-(l,3-雙(mPEG(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(2,6-雙(mPEG(20k)基氧基羰基氨基)己醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(4-(mPEG(30k)基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(4-(mPEG(20k)基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;和Nsl41(2-(4-(3-(mPEGpOk)基氧基)丙醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;Meo-(CH2。H20)4。。-5。。-CH2CH2-NH-c(=。)-9CH22CH-9(CH2)3-c(=o)-NH-(CH2)4-0,N=CH-C(=0)-GH;Meo-(CH2CH2o)600-750(CH2)3-c(=o)NH-(CH2)4CHMeo-(CH2CH2o)600,750-(CH2)3c(=o)NH-c(=o)NH-(CH2)46-N=CH-c(=o)-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-N=CH-c(=o)-GH;Meo-(CH2CH2o)600-700-CH2CH2CH2-c(=o)—NH-(CH2)4-9N=CH-c(=o)-GH;Meo-(CH2CH20)85。-95。-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-9N=CH-c(=o)-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-c(卩o)NH-(CH2)4CHMeo-(CH2CH2o)400-500-c(Ho)NH-c(HO)NH-(CH2)4-o,N=CH-c(=o)-GH;Meo-(CH2CH2o)i,700-c(=o)NH-(CH2)4CHMeo-(CH2CH2o)600,700-c(=o)NH〕-c(=o)NH-(CH2)4-〇-N=CH-c(=o)-GH;Meo-(CH2CH20)4。。-5。。-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-NHCH-CH26-(cH2)4-GH;Meo-(CH2CH2o)6。。-700-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-9N=CH-CH2-9(cH2)4-GH;Meo-(CH2CH2o)850-950—CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4—o-N=CH-CH2-o-(cH2)4-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH-(CH2)4CHMeo-(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH-c(=o)NH-(CH2)46-N=CH-CH2-o-(CH2)4-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4—o-N=CH-CH26-(cH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)600-700-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-9(cH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)850-95。-CH2CH2CH2-。(=o)-NH-(CH2)4-9N=CH-CH2-o-(cH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-c(HO)NH-(CH2)4CHMeo-(CH2CH2o)400-500-c(=o)NH-c(=o)NH-(CH2)46-N=CH-CH2-o-(CH2)5-GH;Meo-(CH2CH2o)400-500-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)46-N=CH-CH2-9(cH2)6-GH;Me9(CH2CH2o)600-700-CH2CH2CH2-c(=o)-NH-(CH2)4-o-N=CH-CH2-9(cH2)6-GH;MeO-(CH2CH20)85。.95。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)6-GH;[MeO-(CH2CH2O)400-500]-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)400—500-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)6-GH;MeO-(CH2CH2O)4。0-5。。-CH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-CH2-O-(l,4-C6H4)CH2-GH;MeO-(CH2CH20)6oo-7oo-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(l,4-C6H4)CH2-GH;MeO-(CH2CH2O)850-95C)-CH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-CH2-O-(l,4-C6H4)CH2-GH;[MeO-(CH2CH2O)4。0-5。。]-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)4。。.5。。-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(l,4-C6H4)CH2-GH;MeO-(CH2CH20)4。。.5。。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(l,3-C6H4)CH2-GH;MeO-(CH2CH20)6。。—7。。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(l,3-C6H4)CH2-GH;MeO-(CH2CH20)85o.95。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(l,3-C6H4)CH2-GH;[MeO-(CH2CH2O)40。-5。。]-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)40。.5。。-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(l,3-C6H4)CH2-GH;0其中mPEG具有約5kDa,10kDa，15kDa，20kDa,30kDa，40kDa或60kDa的分子量；A^"湖-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基》氨基丁基)肟基)乙基hGH，A^"柳-2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;^w湖-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-1-基氧基)丁醯基}氨基丁基)肝基)乙基hGH;A^"湖-2-(O-(4-(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基〉肟基)乙基hGH;A/5"測-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基)氨氧基)丙-l-基氧基hGH;A^""。-3-((4—(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基卜氨氧基)丙氧基hGH;A^i氣^(^-(mPeg(K)k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"/40一3《(4《2,3-雙(mpeg(iok)基氧基)丙小基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖G-(p—(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肝基)乙基hGH;A^"湖-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;7V^"湖-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;A^"湖-2-(O-(4-(3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^""。-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/S"，-2-(O-(4-(5-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;7V^"湖-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^"氣^G4-(!,3-雙(mPegP0k)基氨基羰基氧基)丙—2—基氧基)亞丁基}_氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-3-((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/S"i，3-(0-(2，^雙(mPeg(2Ok)基氧基)丙小基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;^"，-3-(^-(mPegP0k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A/8"，-2-(CK2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"氣3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;A^"柳-2-(O-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^"柳-2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^""。-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"湖-2-(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"湖-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基)氨氧基)丙小基氧基hGH;^南，3一((4一(i,3一雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)一氨氧基)丙氧基hGH;A^"，3《4-(mPeg(;30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^i4i，3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"柳-;3-(p-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)將基)乙基hGH;#141/40-3-({4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;^""氣3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙-l-基氧基)PEG基氧基}亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"/40-2-((4-(4-((2，3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;7V^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^"-2-(O-(4-(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;7V^"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^"-;3-((4-(mPeg(10k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)將基)乙基hGH;A/^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^"-2-(O-(4-(4-(l，3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-mmo丁基)坊基)乙基hGH,A^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)將基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-。-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A/^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;7^141-3-((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^"-3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^"-2-(O-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)將基)乙基hGH;7V^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A/^"-3-((4-(mPeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;7V^"-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"—3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基〉氨氧基)丙氧基hGH;A^"—3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基}亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A/^"-2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)月虧基)乙基hGH;A^，2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/S氣2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^氣2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-p-(mPeg(10k)基氧基；氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;^氣3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;7V^-3-(H-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^氣3-({4-(mPeg(1Ok)基氧基)亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A/S氣3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;iV5，3-({3-(mPeg(1Ok)基氧基)亞丙基}氨氧基)丙氧基hGH;A^-2-(CK2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/S，2-(O-(4-P-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-(4-(2，3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;^，2-(O-(4-(5-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A/^-3-(H-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^0-3-((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/5氣3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^-3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;7V5，2-(CK2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^L2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-2-(O-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^，2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;iV^-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^氣3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^-3—((4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hQH;7V^-3-((4-(mPeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/^-;3-((4-(2,3-雙(mPegP0k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基》氨氧基)丙氧基hGH;A^，3-((3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A/S氣3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;和A/^-2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)月虧基)乙基hGH。本發明的藥物組合物具有7或以A下的pH。在一個實施方案中，pH為l-7,諸如2-6,諸如3-5。在一個實施方案中，pH為4-7，諸如5-7,諸如6-7。在一個實施方案中，pH為4.5-7,諸如5.5-7，諸如6.5-7。在一個實施方案中，pH為5.5-6.5,諸如約6.1。本發明的藥物組合物不含任何顯著量的碳酸鹽。"顯著量(substantmlamount)"意指影響聚乙二醇化生長激素穩定性的用量。在一個實施方案中，碳酸鹽的存在量低於1CT3M,諸如低於10^M,諸如低於ICT5M。應注意碳酸鹽以酸-石成平tf的形式存在H2C03eHCCVoCO,並且"碳酸鹽"意指上述碳酸鹽形式的總和。本發明的藥物組合物一般進一步包含本領域中公知的賦形劑，諸如緩衝劑、防腐劑、等滲劑、螯合劑、穩定劑、胺基酸或胺基酸衍生物、表面活性劑、溼潤劑、軟化劑、抗氧化劑、填充劑、金屬離子、油性媒介物、蛋白質(例如人血清清蛋白、明膠或蛋白質)和兩性離子。這些賦形劑的應用為本領域技術人員眾所周知的並且描述在例如Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thedition,2000中。在一個實施方案中，用作賦形劑的胺基酸或胺基酸衍生物為組氨酸；Y-His,其中Y代表胺基酸殘基；聚-His;或脫-氨基-His。特別提及組氨酸。在一個實施方案中，組氨酸的存在量為0.001-10mg/mg聚乙二醇化生長激素，諸如0.1-10mg/mg聚乙二醇化生長激素，例如0.1-5mg/mg聚乙二醇化生長激素，諸如O.l-1mg/mg聚乙二醇化生長激素，例如0.3-0.7mg/mg聚乙二醇4匕生長激素。在一個實施方案中，組氨酸的存在量為0.002-0.35mg/mg聚乙二醇化生長激素，諸如0.0025-0.17mg/mg聚乙二醇化生長激素，例如0.003-0.035mg/mg聚乙二醇化生長激素，諸如0.005-0.025mg/mg聚乙二醇化生長激素，例如O.Ol-0.02mg/mg聚乙二醇化生長激素。在一個實施方案中，組氨酸的存在量為0.001-10mg/mg生長激素，諸如0.1-10mg/mg生長激素，例如0.1-5mg/mg生長激素，諸如0.1-1mg/mg生長激素，例如0.3-0.7mg/mg生長激素。在一個實施方案中，組氨酸的存在量為0.001-10mg/mg生長激素，諸如0.005-1mg/mg生長激素，例如0.01-1mg/mg生長激素，諸如0.02-0.05mg/mg生長激素，其中計算生長激素的重量，但不考慮存在的PEG部分。在一個實施方案中，所述的藥物組合物包含組氨酸，其用量為0.05—100mg/ml，i者J(口0.05—50mg/ml，侈寸i口0.05—10mg/ml，t者戈口0.05—1mg/ml，例如0.1-0.5mg/ml，諸如0.2-0.4mg/ml，例如約0.34mg/ml。在一個實施方案中，用作賦形劑的胺基酸或胺基酸衍生物為甘氨酸。一般而言，甘氨酸的存在量為1-20mg/ml,例如2-20mg/ml或1-10mg/ml,諸如2-10mg/ml，諸如3-7mg/ml或2-7mg/ml，諸如約2.2mg/ml或如約4.5mg/ml。在一個實施方案中，用作賦形劑的表面活性劑為非離子型表面活性劑，諸如，例如聚山梨醇酯或伯洛沙姆。具體的實例包括聚山梨醇酯20、伯洛沙姆188或伯洛沙姆407。特別貼劑由伯洛沙姆188構成。非離子型表面活性劑的存在量一般為1_10mg/ml,諸如1-5mg/ml,例如1一4mg/ml或2—4mg/ml,t者如約1.5mg/ml或約3mg/ml。在一個實施方案中，本發明的藥物組合物包含糖醇，諸如甘露糖醇、木糖醇、蘇糖醇、山梨醇或甘油。在一個實施方案中，糖醇為甘露糖醇。甘露糖醇可能的存在量為5-lOOmg/ml,諸如5-80mg/ml,例如IO-80mg/ml,諸如10-60mg/ml,例如30-60mg/ml或15-50mg/ml，諸如30-50mg/ml,例如約20mg/ml或約40mg/ml。在一個實施方案中，甘露壽唐醇的存在量為5-50mg/ml,諸如10-50mg/ml或5-30mg/ml,寸列:^10—30mg/ml，i者:^20-25mg/ml"列長口約22mg/ml)或10-15mg/ml(例如約11mg/ml)。在一個實施方案中，本發明的藥物組合物包含穩定pH的磷酸鹽緩沖液。一般而言，使用磷酸一氬鹽和磷酸二氫鹽的混合物，例如隨後調整pH。可以使用許多磷酸鹽，諸如鈉或鉀鹽。在一個實施方案中，磷酸鹽的總量為2-50mM,諸如5-50mM(例如5-20mM)或2-20mM，諸如約5mM(例如4.5mM)或約10mM。在一個實施方案中，本發明的組合物包含濃度為5-50mM，諸如10mM且pH在5-7下的石舞酸鹽緩沖液。在一個實施方案中，本發明的組合物包含濃度為5-50mM,諸如10mM且pH在5-7下的乙酸鹽緩衝液。在一個實施方案中，本發明的組合物包含濃度為5-50mM,諸如10mM且pH在5-7下的檸檬酸鹽緩沖液。在一個實施方案中，本發明的藥物組合物包含防腐劑，諸如河-f悉\苯酚或千醇且特別是苯酚。防腐劑可能的存在量為1_10mg/ml,諸如1-5mg/ml，例如約2.5mg/ml或約5mg/ml。在一個實施方案中，本發明的藥物組合物包含A)聚乙二醇化生長激素0.3-0.7mg/mg1-5mg/ml30-50mg/ml組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇pH:或B)聚乙二醇化生長激素組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇pH:或C)聚乙二醇化生長激素甘氨酸甘露糖醇NaH2P〇4+Na2HP04:pH:或D)聚乙二醇化生長激素甘氨酸甘露糖醇NaH2P04+Na2HP04:pH:或0.54mg/mg3mg/ml40mg/ml6.1;2-10mg/ml10-30mg/ml5-20mM5-7:4.4mg/ml22mg/ml9.2mM5-7E)聚乙二醇化生長激素組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇0.002-0.34mg/mg聚乙二醇4匕生長激素1-5mg/ml30-50mg/ml或F)聚乙二醇化生長激素組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇0.0085mg/mg聚乙二醇化生長激素3mg/ml40mg/ml6.1;或G)聚乙二醇化生長激素甘氨酸甘露糖醇NaH2P04+Na2HP04:pH:或H)聚乙二醇化生長激素甘氨酸甘露糖醇NaH2P04+Na2HP04:pH:2-10mg/ml10-30mg/ml4-20mM5-72.2mg/ml11mg/ml4.5mM5-7.特別提及上述配製在組合物A),B),C)或D)且特別是B)或D)中的任意一種中的聚乙二醇化生長激素。在一個實施方案中，將上述聚乙二醇化生長激素配製在包含緩衝液濃度為5-50mM，諸如10mM且pH5-7的乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽緩衝液的組合物中。本發明的組合物用於治療可以得益於循環生長激素的量增加的疾病或狀態，特別地，本發明提供了治療如下疾病或情況的方法生長激素缺乏(GHD);特納症候群；普-韋症候群(PWS);努南症候群(Noonansyndrome);唐氏症候群；慢性腎臟疾病，幼年型類風溼性關節炎；嚢性纖維化；接受HAART治療的兒童中的HIV-感染(HIV/HALS兒童)；孕齡短出生的兒童(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);成年人中的GHD;長骨內或其骨折，諸如脛骨、腓骨、股骨、肱骨、橈骨、尺骨、鎖骨、matacarpea、matatarsea和趾；松質骨，諸如盧貞骨、手底和足底內或其骨折；例如手、膝或肩中的腱或韌帶手術後的患者；具有或正在進行牽拉骨生成的患者；因髖或盤置換、半月板修復、脊柱融合術或假體固定術導致的病症，諸如在膝、髖、肩、肘、腕或顎中；固定入骨接合術材料，諸如釘、螺釘和板的患者；具有骨折的骨不連接或骨折癒合不良的患者；骨脂瘤(osteatomia)後，例如來自脛骨或第一趾的骨脂瘤的患者；移植物植入後的患者；因創傷或關節炎導致的膝中的關節軟骨變性；具有特納症候群的患者中的骨質疏鬆症；男性骨質疏鬆症；長期透析的成年患者(APCD);APCD中與營養不良相關的心血管疾病；APCD中惡病質的逆轉；APCD中的癌症；APCD中的f曼性阻塞性肺病；APCD中的HIV;具有APCD的中老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲勞症候群；克羅恩病；受損的肝功能；具有HIV感染的男性；短腸症候群；向心性肥胖；HIV-相關脂肪營養不良症候群(HALS);男性不育；大的選擇性外科手術後的患者,酒精/藥物脫毒或神經性創傷；老化；虛弱老人；骨關節炎；創傷損害的軟骨；勃起功能障礙；纖維肌痛；記憶障礙；抑鬱症；外傷性腦損傷；蛛網膜下出血；極低出生體重；代謝症候群；糖皮質激素肌病；或因兒童糖皮質激素治療導致的身材矮小症，該方法包含對有此需要的患者給予治療有效量的本發明藥物組合物。本發明在一個方面中提供了加速肌肉組織，神經組織或傷口癒合；加速或改善血流到達受損組織；或降低受損組織感染率的方法，該方法包含對有此需要的患者給予有效量的治療有效量的本發明藥物組合物。本文所用的化合物的"治療有效量"意指足以治癒，緩解或部分阻止指定疾病及其併發症的臨床表現的用量。將足以達到這一目的的用量定義為"治療有效量"。對每一目的而言，有效量取決於例如疾病或損傷的嚴重性以及受試者的體重、性別、年齡和總體狀況。可以理解可以使用常規實驗通過構建值的矩陣並且在該矩陣中測試不同的點獲得合適的劑量，這完全屬於受過訓練的臨床醫師或獸醫的能力範圍。本文所用的術語"治療(treatment)"和"治療(treating)"意指用於抗擊疾患，諸如疾病或病症目的的對患者的控制和護理。該術語意圖包括對患有指定疾患的患者全方法治療，諸如給予活性化合物以便緩解症狀或併發症，延緩疾病、病症或疾患發展，緩解或減輕症狀和併發症，和/或治癒或消除疾病、病症或疾患並且預防疾患，其中應將預防理解為控制和護理患者，目的在於抗擊疾病、疾患或病症，並且包括給予活性化合物以便預防症狀或併發症發作。所治療的患者優選為哺乳動物，特別是人，但還可以包括動物，諸如狗、貓、牛、綿羊和豬。但是，應認為治療方案和預防(預防性)方案代表了本發明單獨的方面。在一個實施方案中，本發明涉及本發明組合物在製備得益於生長激素血漿水平增加的疾病，諸如上述疾病的藥劑中的應用。典型的非腸道劑量在10-9mg/kg-約100mg/kg體重生長激素/給藥的範圍。典型的給藥劑量在約0.0000001-約10mg/kg體重/給藥。確切劑量取決於例如適應徵、藥劑、給藥頻率和方式；所治療的受試者性別、年齡和總體狀況；所治療的疾病或疾患的性質和嚴重性；所需的治療作用和對本領域技術人員顯而易見的其它因素。典型給藥頻率為每日兩次，每日、每雙日一次(bi-daily)，每周兩次，每周一次或甚至間隔更長給藥。由於聚乙二醇化生長激素的半衰期延長，所以具有長給藥間隔的給藥方案，諸如每周兩次，每周一次或甚至更長給藥間隔是本發明具體的實施方案。將本文引述的所有參考文獻，包括公開文獻、專利申請和專利完整地通過援引引入本文，且其引入程度與指定將每篇參考文獻各自和特別地通過援引引入並且在本文中完整地列出相同(法律允許的最大程度)，除非本文另有指示或上下文中有清楚地相反的說明，否則在上下文中描述本發明的術語"a"和"an"和"the"和類似的指示物被解釋為覆蓋單數和複數。例如，除非另有指示，否則術語"所述的化合物"應理解為涉及本發明或具體描述的方面的各種"化合物"。除非另有指示，否則本文提供的所有確切值為相應近似值的代表(例如，如果合適，可以將在具體因素或測量值方面提供的所有典型確切值視為還提供了相應的由"約"改變的近似測量值)。除非另有指示或上下文中有清楚地相反的說明，否則使用在要素或多種要素方面涉及的術語，諸如"包含"，"具有"，"包括"或"含有，，進行的對本發明任意方面的描述意在提供對本發明類似方面或方面的支持，所述類似的方面為"由該特定要素或多種要素組成"，"基本由該特定要素或多種要素組成，，或"基本上包含該特定要素或多種要素"(例如，除非另有指示或上下文中有清楚地相反的說明，否則應將本文所述包含特定要素的組合物理解為也描述了由該要素組成的組合物)。實施例實施例1鞋基胺官能化的PEG^2-^Y炎7"真蔬差^我差」T4^7fW-二銜formulaseeoriginaldocumentpage53向商購N-(4-溴丁基)鄰苯二甲醯亞胺(2.82g,10mmol)和N-Boc-羥基胺(2.08g，15.6mmol)的混合物中加入乙腈(2ml)並且依次加入1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯(2.25ml，15mmol)。將該反應混合物在室溫下攪拌30分鐘且然後在50°C下攪拌2天。用水(30ml)和1N鹽酸(20ml)的混合物稀釋該體系。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。用鹽水(50ml)洗滌有機相併且用硫酸鎂乾燥。通過二氧化矽(60g)色譜法純化粗產物，使用庚烷/乙酸乙酯l:0-0:l梯度作為洗脫劑，從而得到2.08g2-(4-(叔丁氧羰基氨氧基)丁基)異吲哚-l,3-二酮。"N-^-肩差:r真4i瘋差^^炎T遊formulaseeoriginaldocumentpage53將肼水合物(l.Oml,20mmol)加入到2-(4-(叔丁氧羰基氨氧基)丁基)異吲咮-1，3-二酮(2.08g,6.22mmol)在乙醇(8.0ml)中的溶液。將該反應混合物在80。C下攪拌65小時。在真空中除去溶劑。將殘餘物溶於曱苯(IOml)並且在真空中除去溶劑。將殘餘物懸浮於1N鹽酸(10ml)中。通過過濾除去沉澱並且用水(2ml)洗滌。合併濾液和洗滌液體並且使用碳酸鉀使其成鹼性。用二氯曱烷(4x20ml)萃取該溶液。用^5危酸鎂乾燥有機層。在真空中除去溶劑而得到0.39g,(4-氨基丁氧基)胺基酸甲酸叔丁酯。將碳酸鉀(3g)加入到水相中，用二氯曱烷(3x20ml)萃取。用硫酸鎂乾燥合併的這些有機層。在真空中除去溶劑而又得到0.39giV-(4-氨基丁氧基)氨基甲酸叔丁酯。cjN畫0-fV-屍五G2(WW差」7"應差"wta"o/y^^差」T真差」廑羞^^炎T遊mPEG200口口〇CH33將商購的mPEG2000基丁酸的TV-羥基琥珀醯亞胺酯(Nektar"mPEG匿SBA",#2M450P01,3g,0.15mmol)溶於二氯甲烷(25ml)。加入AK4-氨基丁氧基)氨基甲酸叔丁酯(0.12g,0.59mmol)。在室溫下振搖該反應混合物。加入乙醚，直到獲得沉澱為止。通過過濾分離沉澱。在真空中乾燥該物質而得到2.39giV-(4-(4-(mPEG20000基)丁醯基氨基)丁氧基)氨基曱酸叔丁酯。《N-P-^真差7"差」-4-—屍EG2WW差」T瘋應mPEG20000將三氟乙酸(20ml)加入到iV-(4-(4-(mPEG20000基)丁醯基氨基)丁氧基)氨基甲酸叔丁酯(2.39g,0.12mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中。將該反應混合物振搖30分鐘。加入乙醚(100ml)。通過過濾分離形成的沉澱。將其用乙醚(2x100ml)洗滌並且在真空中乾燥而得到1.96gAK4-氨氧基丁基)-4-(mPEG20000基)丁醯基醯胺。實施例2醛官能化的hGHa」5"er-AG//基於pNNC13(Zbasic2mt-D4K-hGH)生成Ser-hGH類似物表達質粒，它表達與Zbasic結構域VETFLRIVQCRSVEGSCGF,SEQIDNo.2)融合的野生型hGH。用來自Stratagene的QmkChangeXL位點-定向諸變試劑盒與以下引物對將額外的Ser插入Phe,即成熟hGH的第一個胺基酸之前5'末端pNNC13Ser-F:5'隱GGATCAGACGACGACGACAAAagcTTCCCAACCATTCCCTTATCC-3,和3，末端p麗C13Ser-R:5'-GGATAAGGGAATGGTTGGGAAgctTTTGTCGTCGTCGTCTGATCC-3，.用pETlla-Zbasic2mt-D4K-Ser-hGH轉4匕大腸桿菌(co&)BL21(DE3)。將單一菌落接種入含有100pg/mlAmp的100mlLB培養基並且4吏其在37°C下生長。當OD600到達0.6時，4吏細J包培養物溫度降至30°C,並且在30°C下用lmMIPTG將細胞誘導4小時。通過以3000g離心15分鐘(Eppendorf離心機5810R)收集細菌細胞。將細胞沉澱重新懸浮於細胞裂解緩沖液(25mMNa2HP0425mMNaH2P04pH7,5mMEDTA,0.1%TritonX-100)中，並且通過以30kpsi(恆定細胞破碎系統(ConstantCellDisruptionSystems))進行細月包石皮石爭來石皮石爭細l包。通過以10000g離心30分鐘澄清裂解液。保留上清液並且用於純化，同時棄去沉澱。在SP-瓊脂糖凝膠上使用不連續梯度洗脫純化Zbasic2mt-D4K-Ser-hGH(緩衝液A:25mMNa2HP0425mMNaH2P04pH7;緩沖液B:25mMNa2HP0425mMNaH2P〇4pH7,1MNaCl)。隨後j吏用腸肽酶裂解蛋白質以便釋放Ser-hGH。使用丁基瓊脂糖4FF柱進一步純化Ser-hGH,以便從Zbasic2mt-D4K結構域和腸肽酶中分離產物(緩沖液A:100mMHepespH7.5;緩衝液B:100mMHepespH7.5,2MNaCl,使用線性梯度)。將Ser-hGH的終產物進行緩衝液交換並且從50mMNH4HC03,pH7.8中凍幹。〇HONal04oNH222211g/mol22180g/mol製備下列溶液緩沖液在水(10ml)中的25pl(188pmol)三乙醇胺(Mwt:149.21,d:1.12)甲硫氨酸(Mwt:149.21):在水(l.Oml)中20mg(134pmol)NaI04(Mwt:213.89):在水(l.Oml)中5mg(23.3(imol)AcOH(Mwt:60,d:1):在水(l.Oml)中17pl(283pmol)將Ser隱hGH(Mwt:22211;約1mg,45nmol)溶於緩衝液(l10pl)。向該溶液中加入甲硫氨酸溶液(IOpi,約30eq)，隨後加入Nal04溶液(10pl，約5eq)。將該澄清溶液保持在室溫下15分鐘。加入羥基胺溶液(10^d;約10eq)並且將所得輕度混濁的混合物保持在室溫下15分鐘。然後加入AcOH的溶液(10pl,約60eq),並且在約1分鐘後加入水(0.5ml)和上述三乙醇胺緩衝液(0.5ml)。通過HPLC和Maldi分析顯示至少80%轉化成所需肟。實施例3醛官能化的hGH^/zG7/^^差X炎而謬i^V^"-f2-,差-3-^^-丙4MG//將hGH(200mg)溶於磷酸鹽緩衝液(50mM,pH8.0,14ml)。將該溶液與溶於石岸酸鹽緩衝液(50mM，1ml,pH8.0,在溶解1,3-二氨基-丙-2-醇後用稀鹽酸將pH調整至8.0)的1,3-二氨基-丙-2-醇(378mg)溶液混合。最終加入溶於石岸酸鹽l爰沖液(50mM，pH8.0,1ml)的轉穀氨醯胺酶溶液(18mg40U)並且通過添加磷酸鹽^爰衝液(50mM,pH8)將體積調整至10ml,得到0.2M濃度的1,3-二氨基-丙-2-醇。合併的混合物在37°C下孵育4小時。使溫度降至室溫並且加入N-乙基-馬來醯亞胺至終濃度為1mM。再經過l小時後，用10個體積的tris緩衝液(50mM,pH8.5)稀釋該混合物。^,"7-(2-在差-3-盧差-丙^MG//^離子X炎^浮將由a)產生的溶液上到用緩衝液A(50mMtris,pH8.5)預平衡的MonoQ10/100GL4主(AmershamBiosciencescat.No.17-5167-01)。然後在40分鐘內使用在緩沖液A中的3%-6%緩衝液B(50mMtris,2MNaCl,pH8.5)梯度以2ml/分鐘的流速洗脫。基於在280nm處的UV吸收採集級分並且對選擇的級分進行Maldi-Tof分析。合併對應於最大峰的級分，得到根據Maldi-Tof質譜法預測的mw。c;,"V2-在U-郝-為4MG贈顛在b)採集的合併物的肽譜(peptidemapping)顯示Asp-N片l殳AA130-146展示出73amu的質量增加，相當於在穀氨醯胺殘基的側鏈上添加了氨基醇。在與天然hGH相比時，這是在HPLC圖中改變了保留時間的唯一的肽。該片段包含兩個穀氨醯胺殘基。對該肽進行Edman測序並且發現了預測產率的Gln-137，而Gln-141展示出空白Edman循環。推定衍生選擇性地在Gln-141上發生。t/」,"f2-在差-3-虞差-^^MG/Z^^^'A^W-P-^^t'-乙差f^y/"/zG//使用AmiconUltra-15超濾裝置(Millipore)將來自含有48.7mg的b)的合併的級分的緩衝液與15mM三乙醇胺pH8.5(使用IN鹽酸調整)緩沖液交換四次。最終將該溶液濃縮至2ml。向其中加入2ml的在pH8.5的15mM三乙醇胺緩衝液中100mM甲石克氨酸溶液。最終加入0.4ml在水中的25mM高碘酸鈉，並且將該混合物在室溫下孵育30分鐘。然後將其在水上冷卻並且加入1.6ml冰冷的N,N-二曱基甲醯胺。實施例4使用A^4-氨基氧基-丁基)-4-mPEG基-丁醯胺使^141-(7-氧代-乙基)hGH肟化而得到N""-「2-(4-(4-(mPEG基)丁醯基)-氨基-丁氧基亞氨基)-乙基lhGH,其中mPEG基為多分散性的並且具有約20kDa的分子量將380mgyV-(4-氨氧基-丁基)-4-mPEG基-丁醯胺溶於4ml水並且用1N鹽酸將pH調整至6.0。然後在緩慢混合下緩慢加入由實施例3獲得的混合物並且^吏該反應在室溫下進行72小時。將由a)產生的溶液上用緩衝液A(50mMtris,pH8.5)預平衡的MonoQ10/100GL柱(AmershamBiosciencescat.No.17-5167-01)。然後在1120分鐘內使用在緩沖液A中的0。/。-7%的緩衝液B(50mMtris,2MNaCl,pH8.5)梯度以0.5ml/分鐘的流速洗脫。基於在280nm處的UV吸收採集級分並且對選擇的級分進行Maldi-Tof分析。收集對應於最大峰的級分，得到根據Maldi-Tof質譜法預測的mw。Maldi-Tof分析得到以43130Da為中心的寬峰，與mPEG的多分散性一致。SDS記錄顯示具有60kDa的表觀分子量單一帶。用銀和碘化鋇染色的帶證實它是PEG衍生的蛋白質。這些分析結果證實分離的產物化合物為hGH的單聚乙二醇4t書f生物。實施例5PEG連接體穩定性在下列1mg/ml組合物中作為pH的函數測試[l-(PEG-30000)-O-CH2CH2CH2CONH-(CH2)4-O-N=CH-CO]-hGH的穩定性。通過將Ser-hGH中的絲氨酸醇氧化成醛，隨後偶聯PEG-30K-羥基胺製備該化合物。製備雙倍濃度的緩衝液並且與等量的生長激素溶液混合。緩衝液-雙倍濃度組氨酸緩沖液碳酸鹽緩沖液磷酸鹽緩衝液0.68mg/ml組氨酸3mg/ml伯洛沙姆18840mg/ml甘露糖醇pH6.120mg/ml甘氨酸2.5mg/mlNaHC032mg/ml甘露糖醇pH8.2甘氨酸4.4mg/ml,甘露糖醇22mg/ml,NaH2P040,55mg/mlNa2HPO40.65mg/mlpH7.3.最終緩衝液濃度:組氨酸緩衝液碳酸鹽緩沖液磷酸鹽緩衝液0.34mg/ml組氨酸1.5mg/ml伯洛沙姆18820mg/ml甘露糖醇pH6.110mg/ml甘氨酸1.2mg/mlNaHC031mg/ml甘露糖醇pH8.2甘氨酸2.2mg/ml，甘露糖醇11mg/ml,NaH2P040,27mg/mlNa2HPO40.32mg/mlpH7.3.將組合物在40°C下孵育2周並且在1和2周後抽取樣品用於SEC-HLPC分析。作為％純度表示的結果如表1中所示。表1tableseeoriginaldocumentpage59實施例6化學穩定性在下列1.25mg/ml的li衝液中作為pH的函數測試與實施例5相同聚乙二醇化的化合物的穩定性。磷酸鈉，碳酸鈉和組氨酸緩衝液為10mM。將樣品在40°C下孵育1周並且抽取樣品用於SEC-HLPC分析。主要的分解產物為22kDa種類，它相當於脫聚乙二醇化生長激素的大小。表2表示形成的22kDa種類(species)的百分比。200680031555.6說明書第45/47頁表2.tableseeoriginaldocumentpage60實施例7研究l-[(mPEG(20k)NHC(=O)OCH2)2CH-O-CH2CH2CH2CONH-(CH2)4-0-N=CH-CO]-hGH在1.3mg/ml濃度的不同緩衝液中作為pH函數的穩定性。通過將Ser-hGH中的絲氨酸醇(sermealcohol)氧化成醛，隨後偶聯支化PEG-40K-羥基胺製備該化合物。磷酸鈉，碳酸鈉，檸檬酸鈉，組氨酸，Tris和甘氨酸緩衝液為10mM。將樣品在40°C下孵育4周並且抽取樣品用於SEC-HLPC分析。表3表示在40°C下4周後的聚乙二醇化生長激素純度(％)。圖1表示在不同緩衝液中作為pH函數形成的脫聚乙二醇化生長激素的量。表3.tableseeoriginaldocumentpage61tableseeoriginaldocumentpage61藥理學方法測定(I):生長激素活性的BAF-3GHR測定BAF-3細胞(來源於骨髓的鼠pro-B淋巴樣細胞系)就生長和存活而言最初為IL-3依賴性的。11-3活化JAK-2和STAT,這與GH在刺激時活化的介體相同。在轉染人生長激素受體後，細胞系變成生長激素-依賴性細胞系。該克隆可以用於評價不同生長激素樣品對BAF-3GHR存活的作用。使BAF-3GHR細胞在37。C,5%C〇2下生長在飢餓培養基(不含生長激素(hormoen)的培養基)中24小時。洗滌細胞並且重新懸浮於飢餓培養基中並且接種在平板中。向細胞中加入IO^不同濃度的生長激素化合物或人生長激素或對照品，並且將平板在37。C,5。/。C02下孵育68小時。將AlamarBlue加入到各孔中且然後將細胞再孵育4小時。AlamarBlue為氧化還原指示劑並且通過對細胞代謝而言固有的反應還原，且由此提供了存活細胞數的間接測量值。最終，用螢光平板讀數器測定細胞的代謝活性。以未用生長激素化合物或對照品刺激的細胞％表示樣品中的吸收度，並且可以根據濃度-響應曲線計算活性(刺激50%細胞的細胞的化合物量)。權利要求1.藥物組合物，包含聚乙二醇化生長激素，其中所述的聚乙二醇化生長激素包含生長激素和PEG，其中所述的生長激素和所述的PEG通過肟鍵且任選通過連接體連接，所述的製劑具有7或低於7的pH。2.權利要求1所述的組合物，其中所述的製劑不含任何顯著量的碳酸鹽。3.權利要求1或權利要求2所述的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為0.001-100mg/ml。4.權利要求3所述的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度為1_100mg/ml。5.權利要求4所述的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素的存在濃度約為40mg/ml。6.權利要求1-5中任意項所述的組合物，進一步包含0.001-10mg組氨酸/mg生長激素的濃度的組氨酸。7.權利要求1-5中任意項所述的組合物，進一步包含0.002-0.35mg組氨酸/mg聚乙二醇化生長激素的濃度的組氨酸。8.權利要求1-5中任意項所述的組合物，進一步包含0.05-100mg/ml的濃度的組氨酸。9.權利要求1-8中任意項所述的組合物，進一步包含1-20mg/ml的濃度的甘氨酸。10.權利要求1-9中任意項所述的組合物，進一步包含1-10mg/ml的濃度的非離子型表面活性劑。11.權利要求IO所述的組合物，其中所述的非離子型表面活性劑為伯洛沙姆188。12.權利要求1-11中任意項所述的組合物，進一步包含5-100mg/ml的濃度的糖醇。13.權利要求12所述的組合物，包含約20mg/ml的濃度的所述糖醇。14.權利要求12-13中任意項所述的組合物，其中所述的糖醇為甘露糖醇。15.權利要求1-14中任意項所述的組合物，進一步包含5-50mM的最終磷酸鹽濃度的磷酸鹽緩沖液。16.權利要求l-14中任意項所述的組合物，進一步包含0.1-5mM的最終磷酸鹽濃度的磷酸鹽緩衝液。17.權利要求16所述的組合物，包含4.5mM最終磷酸鹽濃度的磷酸鹽緩衝液。18.權利要求1-14中任意項所述的組合物，進一步包含5-50mM緩衝液濃度的檸檬酸鹽緩衝液。19.權利要求l_14中任意項所述的組合物，進一步包含O.l-5mM緩衝液濃度的擰檬酸鹽緩衝液。20.權利要求1-14中任意項所述的組合物，進一步包含5-50mM緩衝液濃度的乙酸鹽緩衝液。21.權利要求1-14中任意項所述的組合物，進一步包含O.l-5mM緩衝液濃度的乙酸鹽緩沖液。22.權利要求1-21中任意項所述的組合物，進一步包含濃度為1-10mg/ml的選自苯酚、/^7-f惑^口/或千醇的防腐劑。23.權利要求22所述的組合物，其中所述的防腐劑的存在濃度為1-5mg/ml。24.權利要求22或權利要求23所述的組合物，其中所述的防腐劑為苯酚。25.權利要求1-24中任意項所述的組合物，包含組氨酸0.002-0.34mg/mg聚乙二醇化生長激素伯洛沙姆188:l-4mg/ml甘露糖醇10-30mg/ml苯酚1_5mg/ml聚乙二醇化生長激素1-200mg/mlpH:5陽7。26.權利要求25所述的組合物，包含0.0085mg/mg聚乙二醇化生長激素1.5mg/ml20mg/ml5mg/ml1-200mg/ml6.1。組氨酸伯洛沙姆188:甘露糖醇苯酚聚乙二醇化生長激素:pH:27.權利要求1-24中任意項所述的組合物，包含甘氨酸2-7mg/ml甘露糖醇10-30mg/ml總P043-:2-20mM苯酚1_5mg/ml聚乙二醇化生長激素1-200mg/mlpH:5-7。28.權利要求27所述的組合物，包含甘氨酸2.2mg/ml甘露糖醇11mg/ml總P043-:4.5mM苯酚5mg/ml聚乙二醇化生長激素1-200mg/mlpH:5-7。29.權利要求1-28中任意項所述的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素包含人生長激素。30.權利要求1-29中^壬意項所述的組合物，其中PEG部分在所述的生長激素的N-末端上與生長激素連接。31.權利要求1-30中任意項所述的組合物，其中所述的聚乙二醇化生長激素選自Lyss(4-((2-(l-(mPEG羰基)哌啶-4基)乙氧基)亞氨基)戊醯基)192)hGH(l-192)醯胺，其中mPEG具有20kDa的分子量；(S)-2-(hGH基氨基)-6-(4-((2-(l-(4-(mPEG基氧基)丁醯基)哌啶-4-基)乙氧基)亞氨基)戊醯氨基)己醯胺，其中mPEG具有的分子量為10kDa;N""-[2-(4-(4-(mPEG(20k)基丁醯基)-氨基-丁氧基亞氨基)-乙基)hGH;N""-[2-(l-(十六醯基)哌啶-4-基)乙氧基亞氨基]-乙基]hGH;N""(2-(4-(4-(l,3-雙(mPEG(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(2,6-雙(mPEG(20k)基氧基羰基氨基)己醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(4-(mPEG(:30k)基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;N""(2-(4-(4-(mPEG(20k)基氧基)丁醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;和N""(2-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙醯基氨基)丁氧基亞氨基)乙基)hGH;其中mPEG(20k)基和mPEG(30k)基意在分別表示mPEG(20k)基和mPEG(30k)基，其中多分散性指數低於1.06;或[MeO-(CH2CH20)4oo.5oo-CH2CH2-NH-C(=0)-0-CH2]2CH-0-(CH2)3-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;[MeO-(CH2CH2O)600-750](CH2)3-C(=O)NH-(CH2)4CH[MeO-(CH2CH2O)600—750-(CH2)3C(=O)NH]-C(=O)NH-(CH2)4-O-N=CH-C(=O)-GH;MeO-(CH2CH20)4。。—5。。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;Me〇-(CH2CH20)6oo-7oo-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;MeO-(CH2CH2O)850.950-CH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-C(=O)-GH;[MeO-(CH2CH2O)400-500]-C(=O)NH-(CH2)4CH[Me〇-(CH2CH2O)400-500-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;[MeO-(CH2CH2O)600-700]-C(=O)NH-(CH2)4C，eO-(CH2CH2O)600-，-C(=)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-C(=0)-GH;MeO-(CH2CH20)4。。.5。crCH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-〇-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;MeO-(CH2CH20)6oo-70。-CH2CH2CH2-C(=0)-NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;MeO-(CH2CH2O)850.950-CH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-CH2-O-(CH2)4-GH;[MeO-(CH2CH20;Uo0-500]-C(=0)NH-(CH2)4C,eO-(CH2CH20)400-500-C(=0)NH]-C(=0)NH-(CH2)4-0-N=CH-CH2-0-(CH2)4-GH;MeO-(CH2CH2O)40。-5。。-CH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-CH2-0-(CH2)5-GH;MeO-(CH2CH2O)60。-7(K)-CH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-CH2-O-(CH2)5-GH;MeO-(CH2CH2O)850-95(rCH2CH2CH2-C(=O)-NH-(CH2)4-O-N=CH-CH2-O-(CH2)5-GH;一HO"H。(寸H93-^I)-0"H3-H3HN-0-^H。)-HN(0)KHN(0H)0-。。2。寸(0NH3f3)-o!〕H:D寸QH。)-HN(？)3-。。！寸(ONH:yH3)-o！l)-0-NH::>-HVN-0;。H。)-HN-(0=)。"H3NH::>￡3-。"，。s(0§N3)-03PM1)6"H3-HVN-o-寸(NH。)-HN-(？)。-NH::^H。NH3-萍。s(ONH:yH。)-o！1)6"H3-H〕HN-o-寸(NH。)-HN-(OH)。"H3^GNH。-i,i(cyH:^H:3)-03!M一HO"HO(寸H93-f0-0"H3-HON-0-寸。H3)-HN(0)U-HN(0H)。-。。s-,(ONH:yH3)-o!〕H3寸QHU)-HN(？)3-〖。。s。寸(OWH3)-o！〕〖H0-NH3(w。-寸。〖)-o"H:>H3=N-o-K￡::>)-i(o=)。"H。￡:^3-。s6-。ss(Q￡UZK。)-03Nl)-o-NH3-H:>N-ov(^G)-HISKO=)O..NH::^HC^H::>-,—§(ONH:>￡:D)-ap:s"HO-NH3(寸ts-寸。1)-o"H。-HVN-o;。5)-HN-(OH)。-NH:^HUNH3-。。s。寸(ONH。NH。)-03IAt"HO-3H〕)-o」H。-H3=N-o-KNHU)-HN(？)。-HN(o")。-。。l寸(QZ3NH3)-。！〕5寸。H3)-HN(？)。-！，寒(OWH::0-o！3)-o-NH0-HVN-o-寸QH。)-HN-(o卩)。"H。NH。NH3-。s-。；ONH:yH3)-o3w3)-o"s-H:>N-OANH::>)-HN-(o=)。-NH。￡::>￡:>,,。。9§H::^H3)-03:2。)-o-NH。-H。HN-o-5H。)-HN-(o卩)。"H。NH:^H。-。。s。寸(ONH:^H。)-cn"H0"。H3)-0"H。-HVN-0-寸(NH3)-HN(？)。-HN(010-。。s。寸(oiH0)-o!〕H〕寸QH3)-HN(？)。-。。s。寸(OWH〕)-cpsformulaseeoriginaldocumentpage6其中mPEG具有約5kDa，10kDa，15kDa，20kDa,30kDa，40kDa或60kDa的分子量；A^"柳-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"柳-2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"柳-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"湖-2-(O-(4-0-(mPeg(lOk)基氧基-S-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"湖-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-l-基氧基hGH;A^"/氣3一((4f,3一雙(mpegG0k)基氨基羰基氧基)丙一2-基氧基)亞丁基L氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-3-((4-(mPeg(10k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-3-(H-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;^w/40一3一(。-(mpegG0k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^4，-2-(CL(2-(3-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^4，-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"柳-2-(O-(4-H-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;A/^"湖-2-(O-(4-(3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"/氣2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肝基)乙基hGH;A^"湖-2-(O-(4-(5-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^4，-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A/8"，-3-(《4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)陽氨氧基)丙氧基hGH;A^固；((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/Si4i/4Q-3《(4乂2,3一雙(mPeg(;20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^4i/氣3^3乂mpeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^4i/，2-(^(2-(3一(2,3-雙(mpeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;^141/，3^4一(2,3-雙(mpeg(20k)基氧基)丙小基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^4，-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;A/S"脂-2-(O(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"，2《o-(4、3《mPeg(30k)基氧基)丙醯基》氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^4i"o一2《o《4—"《2，^雙(mPeg(30k)基氧基)丙-i-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;^14!/，2一(o-(^XmPegpok)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/S"i柳-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙小基氧基hGH;A/Si4i/4Q各((4-G,3J又(mpeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基卜氨氧基)丙氧基hGH;A/Si4，各(^(mpeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^i4i/4。一3^4-(2,3一雙(mpeg(30k)基氧基)丙小基氧基)亞丁基》氨氧基)丙氧基hGH;A/Si4i/4Q一3^3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A/Si4畫-2乂o《2《3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;^141/40一3—(^(2,3一雙(mpeg(30k)基氧基)丙—][_基氧基)亞丙基}氨氧基)丙氧基hGH;^14,;((4、(2,3一雙(mpEG(20k)基)丙小基氧基)pEG基氧基}亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"湖-2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O(4-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-l-基氧基hGH;A^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^"—3-((4-(mPeg(10k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2，3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH,A^"-3-((3-(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((9-(2-(3-(2，3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基〉氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-氨基(mmo)丁基)肟基)乙基hGH;A^"—2-(O-(4-(3-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;iV^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)將基)乙基hGH;A/^"-2-(O-(4-(5-(mPeg(20k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"—3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A/S"i-3-((4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-(O-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)坊基)乙基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^"-2—(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基》肟基)乙基hGH;A^"—3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^"-3-((4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(mPeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基}氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((9-(2-(3-(2，3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;A^"—3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^"-2-((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH;A^氣2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/^-2-(O-(4-(4-(mPeg(10k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;^氣2-(O-(4-(3-(mPeg(10k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^，2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/S氣2-(O-(4-(5-(mPeg(10k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,A^0-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基)氨氧基)丙-l-基氧基hGH;A^O-3-((4-(l,3-雙(mPeg(10k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A^0-3-((4-(mPeg(10k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^，3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;iV^-3-((3-(mPeg(10k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;iV^-2-(CK2-(3-(2,3-雙(mPeg(1Ok)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;7V^-3-((4-(2,3-雙(mPeg(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^0-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;^氣2-(O-(4-。-(mPeg(20k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^0-2-(O-(4-H-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^-2-(O-(4-0-(mPeg(2Ok)基氧基巧-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^40-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A^-3-((4-(l,3-雙(mPeg(20k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基》-氨氧基)丙氧基hGH;A^-3—((4-(mPeg(20k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/S，3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣3-((3-(mPeg(20k)基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^氣2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;jV^-;3-((4-(2,3-雙(mPeg(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;7V^-2-(O-(4-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^o—2-(0-(4-(4-(mPeg(30k)基氧基)丁醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^，2-(O-(4-(3-(mPeg(30k)基氧基)丙醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^，2-(O-(4-(4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁醯基》氨基丁基)肟基)乙基hGH;A^-2-(O-(4-(5-(mPeg(30k)基氧基-5-氧代戊醯基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;A/5，3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)丁醯基氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亞丁基}氨氧基)丙-1-基氧基hGH;A/S，3-((4-(l,3-雙(mPeg(30k)基氨基羰基氧基)丙-2-基氧基)亞丁基)-氨氧基)丙氧基hGH;A/-3-((4-(mPeg(30k)基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A/8氣3-((4-(2,S-雙(mPegp0k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;A-3-((3-(mPeg(30k)基氧基)亞丙基〉氨氧基)丙氧基hGH;A-2-((9-(2-(3-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙氧基)丙氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH,A/S氣3-((4-(2,3-雙(mPeg(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亞丙基)氨氧基)丙氧基hGH;A^0-3-((4-((2,3-雙(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亞丁基)氨氧基)丙氧基hGH;和A/S4。-2畫((4-(4-((2,3-雙(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁醯基氨基)丁基)肟基)乙基hGH。32.治療得益於循環生長激素量增加的疾病的方法，該方法包含對有此需要的患者給予治療有效量的權利要求1-31中任意項的組合物。33.權利要求32的方法，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；普-韋症候群(PWS);努南症候群；唐氏症候群；慢性腎臟疾病，幼年型類風溼性關節炎；嚢性纖維化；接受HAART治療的兒童中的HIV-感染(HIV/HALS兒童)；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW)，但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);成年人中的GHD;長骨內或其骨折，諸如脛骨、腓骨、股骨、肱骨、橈骨、尺骨、鎖骨、matacarpea、matatarsea和處；松質骨，諸如盧貞骨(scull)、手底和足底內或其骨折；例如手、膝或肩中的腱或韌帶手術後的患者；牽拉骨生成；因髖或盤置換、半月板修復、脊柱融合術或假體固定術導致的病症，諸如在膝、髖、肩、肘、腕或顎中；因骨接合術材料，諸如釘、螺釘和板固定導致的病症；骨折的骨不連接或骨折癒合不良；因骨脂瘤導致，例如來自脛骨或笫一趾的病症；因移植物植入導致的病症；因創傷或關節炎導致的膝中的關節軟骨變性；具有特納症候群的患者中的骨質疏鬆症；男性骨質疏鬆症；長期透析的成年患者(APCD);APCD中與營養不良相關的心血管疾病；APCD中惡病質的逆轉；APCD中的癌症；APCD中的慢性阻塞性(abstractive)肺病；APCD中的HIV;具有APCD的中老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲勞症候群；克羅恩病；受損的肝功能；具有HIV感染的男性；短腸症候群；向心性肥胖；HIV-相關脂肪營養不良症候群(HALS);男性不育；大的選擇性外科手術後的患者,酒精/藥物脫毒或神經性創傷；老化；虛弱老人；骨關節炎；創傷損害的軟骨；勃起功能障礙；纖維肌痛；記憶障礙；抑鬱症；外傷性腦損傷；蛛網膜下出血；極低出生體重；代謝症候群；糖皮質激素肌病；和因兒童糖皮質激素治療導致的身材矮小症。34.權利要求32或權利要求33的方法，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);和成年人中的GHD。35.權利要求1-31中任意項的組合物在製備用於治療得益於生長激素血漿水平增加的疾病的藥劑中的應用。36.權利要求35的應用，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；普-韋症候群(PWS);努南症候群；唐氏症候群；慢性腎臟疾病，幼年型類風溼性關節炎；嚢性纖維化；接受HAART治療的兒童中的HIV-感染(HIV/HALS兒童)；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);成年人中的GHD;長骨內或其骨折，諸如脛骨、腓骨、股骨、肱骨、橈骨、尺骨、鎖骨、matacarpea、matatarsea和趾；矛>質骨，諸如盧貞骨、手底和足底內或其骨折；例如手、膝或肩中的腱或韌帶手術後的患者；牽拉骨生成；因髖或盤置換、半月板修復、脊柱融合術或假體固定術導致的病症，諸如在膝、髖、肩、肘、腕或顎中；因骨接合術材料，諸如釘、螺釘和板固定導致的病症；骨折的骨不連接或骨折癒合不良；因骨脂瘤導致，例如來自脛骨或第一趾的病症；因移植物植入導致的病症；因創傷或關節炎導致的膝中的關節軟骨變性；具有特納症候群的患者中的骨質疏鬆症；男性骨質疏鬆症；長期透析的成年患者(APCD);APCD中與營養不良相關的心血管疾病；APCD中惡病質的逆轉；APCD中的癌症；APCD中的1曼性阻塞性肺病；APCD中的HIV;具有APCD的中老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲勞症候群；克羅恩病；受損的肝功能；具有HIV感染的男性；短腸症候群；向心性肥胖；HIV-相關脂肪營養不良症候群(HALS);男性不育；大的選擇性外科手術後的患者，酒精/藥物脫毒或神經性創傷；老化；虛弱老人；骨關節炎；創傷損害的軟骨；勃起功能障礙；纖維肌痛；記憶障礙；抑鬱症；外傷性腦損傷；蛛網膜下出血；極低出生體重；代謝症候群；糖皮質激素肌病；和因兒童糖皮質激素治療導致的身材矮小症。37.權利要求35或權利要求36的方法，其中所述的疾病選自生長激素缺乏(GHD);特納症候群；孕齡短(SGA);以極低出生體重出生(VLBW),但SGA的兒童中的身材矮小症；骨骼發育不良；軟骨發育不良；軟骨發育不全；原發性身材矮小症(ISS);和成年人中的GHD。全文摘要提供了包含聚乙二醇化生長激素的pH7或7以下的藥物組合物。文檔編號C07K14/61GK101268098SQ200680031555公開日2008年9月17日申請日期2006年8月30日優先權日2005年8月30日發明者M·雷斯羅申請人:諾沃-諾迪斯克保健股份有限公司